基础生化复习要点
（注：此题非考题，只是一些考题的总结，请全面复习。）
一．写或结构写名称
ACP 脂酰基载体蛋白Ala 丙氨酸AMP 腺苷酸
Arg 精氨酸Asn 天冬酰胺BCCP
FAD 黄素腺嘌呤二核苷酸FADH 还原型黄素腺嘌呤二核苷酸
FAS 脂肪酸合酶PCR 聚合酶链式反应Cys 半胱氨酸EMP 糖酵解TCA 三羧酸循环PPP磷酸戊糖途径PFK 磷酸果糖激酶TPP焦磷酸硫胺素NADPH 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸SAM S-腺苷甲硫氨酸PAPS磷酸腺苷酰硫酸FH4 四氢叶酸ETC 电子传递链CAP降解物基因活化蛋白THFA
FMN 黄素单核苷酸GSH 谷胱甘肽GSSG 氧化型谷胱甘肽Glu 谷氨酸
Gln 谷氨酰胺His 组氨酸Lys 赖氨酸
PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳PEP 磷酸烯醇式丙酮酸Phe 苯丙氨酸PRPP 5-磷酸核糖-1-焦磷酸Ser 丝氨酸SSB 单键结合蛋白Tm 熔点（熔解温度）Trp 色氨酸Tyr酪氨酸
UDPG 尿苷二磷酸葡萄糖Ψ假尿苷C AMP 3’,5’环腺苷酸DNA 互补DNA Km米氏常数ASP腺苷酰硫酸
C
二．名词解释或比较
稀有碱基/稀有核苷酸:又称修饰碱基,核酸中含量甚少的碱基。
DNA双螺旋结构的多态性
增色效应/减色效应：
减色效应：核酸的光吸收值比组成它的核苷酸的光吸收值的总和少30%-40%的现象。
增色效应：将DNA的稀盐酸溶液在热变性过程中，紫外吸收值增高的现象。 蛋白质的变性与复性:
变性：天然蛋白质因受到物理及化学因素影响，使其分子原有的天然构象发生变化（次级键被破坏），导致理化性质和生物活性发生改变，称为变性。
复性：当变性因素去除后，有些变性蛋白质又可缓慢重新回复到天然构象。 酶的活性中心与必须基团
酶的活性中心：酶分子中直接和底物结合，并和酶催化直接有关的部位。
必须基团：没的活性中心以及对维持酶的空间构象必须的基团。
酶原的激活:是指有些酶在细胞内合成和初分泌时，并不表现有催化活性，这种无活性状态的酶的前身物称为酶原。酶原在一定条件下，受某种因素的作用，酶原分子的部分肽键被水解，使分子结构发生改变，形成酶的活性中心，无活性的酶原转化成有活性的酶称酶原的激活。
酶的别构效应:别构效应又称为变构效应，是寡聚蛋白与配基结合改变蛋白质的构象，导致蛋白质生物活性改变的现象
生物氧化是有机物在细胞中氧化，同时产生CO2和H2O的过程。
高能化合物通常指水解时释放较多自由能的化合物。（其中最重要的是ATP，被称为能量代谢的通货。）
底物水平磷酸化与氧化磷酸化
底物水平磷酸化：由高能磷酸底物直接把磷酸基团交给ADP偶联生成ATP 的过程。这种磷酸化与电子传递链无关。
氧化磷酸化：电子从一个底物经电子传递链传递给分子氧形成水，同时生成ATP的过程。这种磷酸化水平与电子传递链相偶联。
糖酵解与糖异生
辅酶与辅基
辅酶：酶分子中与酶蛋白结合较疏松，用透析法可除去的小分子有机物质。
辅基：酶分子中与酶蛋白结合较紧密，用透析法不易去除的小分子有机物。 限制性内切酶：识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。
转氨基作用：在转氨酶催化下，α-氨基酸与α-酮酸经行氨基酮基互换生成相应的α-酮酸和α-氨基酸的过程。
中心法则：是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA，即完成DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。
转录与逆转录
转录：以DNA分子中的一条链为模板，按照碱基互补配对原则，合成RNA 的过程
逆转录：以RNA为模板合成DNA的过程。
启动子与终止子
启动子：DNA分子中RNA聚合酶能够结合并导致转录起始的序列。
终止子：基因末端一段能使转录终止的特殊序列。
半保留复制：DNA复制的一种方式，每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。
前导链与滞后链：
前导链：DNA复制过程中，有一条链的合成是连续的，称之为前导链。
滞后链：DNA复制过程中，有一条链的合成是不连续的，而是先合成一些小DNA片段，再连接形成一条完整的DNA链，称之为滞后链。
操纵子：在细菌基因组中，编码一组在功能上相关的蛋白质的几个结构基因，与共同的控制位点组成一个基因表达的协同单位。
密码子：mRNA分子中三个相邻的核苷酸自称的三联体称为密码子，每个密码子编码一种氨基酸。
能荷与能量通货
能荷：总腺酐酸系统中，所负荷的高能磷酸基数量。
能量通货：ATP
填空，选择，判断：
1.DNP为解偶联剂，至抑制ATP的形成，并不抑制电子传递过程。
2.真核生物1mol葡萄糖通过EMP途径产生丙酮酸，通过底物水平磷酸化净生
成ATP（2mol）。
3.hnRNA是tRNA的前体
4.能阻断蛋白质α-螺旋的氨基酸是（Pro）
5.磷酸戊糖途径包括两步脱氢反应，催化这两步反应酶的辅因子是（NADP+）。
6.1分子丙酮酸完全氧化分解可产生的（3分子）CO2和（15分子）A TP
7.转氨酶的辅因子是（磷酸吡哆醛）
8.生物体中活化的甲基供体是（SAM）
9.维持DNA双链结构稳定的因素主要是（氢键）（碱基堆积力）（磷酸基上的
负电荷与金属阳离子或组蛋白的正电荷之间的相互作用）
10.染色质的基本结构单位是（核小体），由（组蛋白）核心和它外侧盘绕的（DNA）
组成。
11.大部分真核细胞mRNA的3’-末端都具有（多聚A）
12.DNA复性的重要标志是：紫外吸收低
13.利用在NaCl溶液中的溶解度不同来分离DNA和RNA
14.DNA制品应保存在高浓度的缓冲液中
15.维持蛋白质构象的作用力是：氢键，范德华力，盐键，疏水作用，二硫键，
配位键
16.构型的改变必须有旧的共价键的破坏，而构象的改变则不发生此变化。
17.蛋白质构象形成中内部氢键的形成是驱动蛋白质折叠额主要相互作用力。
18.变性后蛋白质溶解度降低是因为中和电荷和去水膜所引起的。
19.酶促反应中决定酶专一性的部分是：酶蛋白
20.变构酶是一种寡聚酶
21.NAD+酶促反应中转移氢原子
22.NAD+或NADP+中含有哪一种维生素：尼克酰胺
23.辅酶磷酸吡哆醛的主要功能是传递氨基
24.生物素是丙酮酸羟化酶的辅酶
25.哪一个维生素能被氨基喋呤和氨甲喋呤所拮抗：叶酸
26.酶原是酶的前体（无活性）
27.酶反应的专一性和高效性取决于酶蛋白本身（F）
28.酶的最适温度是酶的一个特征性常数（F）
29.泛酸在生物体内用来构成辅酶A，后者在物质代谢中参加酰基转移作用。
30.在直链淀粉中单糖间靠α-1,4糖苷键连接，支链淀粉中单糖间靠α-1,6糖苷
键连接，纤维素分子中单糖间靠β-1,4糖苷键连接。
31.EMP途径的细胞学定位为细胞质，TCA循环的细胞学定位为线粒体，PPP
的细胞学定位为细胞匀浆。
32.EMP的速率主要受己糖激酶，磷酸果糖激酶，丙酮酸激酶的调节控制。
33.EMP中催化作用底物水平磷酸化的两个酶是：磷酸甘油激酶，丙酮酸激酶
34.促使TCA向一个方向进行的酶主要是：柠檬酸合成酶
35.PPP途径不产生：（D）A.NADPH B.CO2和水 C.葡萄糖-1-磷酸 D.NADH
36.下列各中间产物中，PPP特有的是：（D）A.丙酮酸 B.3-磷酸甘油醛 C.1,3-
而磷酸甘油醛D.6-磷酸葡萄糖酸
37.丙氨酸脱氢酶系的辅因子有：TPP,FAD,NAD+,硫辛酸，CoA,Mg2+
38.TCA循环过程中有4次脱氢，2次脱羧反应。两次脱羧反应分别由（异柠檬
酸脱氢酶）和（α-酮戊二酸脱氢酶催化）
39.TCA中催化氧化磷酸化的四个酶是（异柠檬酸脱氢酶）（α-酮戊二酸脱氢酶
催化）（琥珀酸脱氢酶）（苹果酸脱氢酶）其辅酶分别是（NAD+）和（Mg2+），催化底物水平磷酸化的酶是（琥珀酸硫激酶）产生的高能化合物（ATP）
40.通过PPP可以产生NADPH，为合成反应提供还原力。
41.PPP可以分为2个阶段，分别称为（葡萄糖的直接氧化脱羧）（非氧化的分
子重排）其中两种脱氢酶是（6-磷酸葡萄糖脱氢酶）（6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶）
其辅酶是（NAD+）
42.联系三大物质代谢的中间产物是乙酰CoA
43.EMP中产生ATP的机制是底物水平磷酸化。
44.EMP在有氧、无氧条件下均可进行，TCA只能在有氧条件下进行。
45.PPP非氧化重排阶段的一系列中间产物及酶类与光合作用卡尔文循环的大多
数中间产物及酶类相同，因此PPP可与光合作用关联实现单糖间的互变。46.真核生物生物氧化的主要场所是线粒体，呼吸链和氧化磷酸化偶联因子都定
位于线粒体内膜上。
47.细胞色素和铁硫中心在呼吸链中以Fe2+→Fe3+的变价进行电子传递，每个
细胞色素和铁硫中心每次传递1个电子。
48.在呼吸链中，氢或电子从氧化还原电位低得载体依次向氧化还原电位高的载
体传递。
49.常见的呼吸链电子传递抑制剂中，鱼藤酮专一地抑制NADH脱氢酶的电子
传递，抗霉素A专一地抑制铁硫蛋白的电子传递，CN-，N3-和CO则专一地阻断由汗Fe3+的细胞色素到含Cu2+细胞色素C氧化酶的电子传递，寡霉素专一地抑制FO因子。
50.2,4-二硝基酚导致氧化磷酸化解偶联。
51.呼吸链的各种细胞色素在电子传递中的排列顺序是：b→c1→c→aa3→O2
52.高等植物叶绿体中含有两类色素分子，分别为叶绿素和类胡萝卜素。
53.天然色素包括叶绿素b，类胡萝卜素和大部分叶绿素a，作用中心色素主要
是少数叶绿素a分子。
54.根据光波长不同，可把作用中心色素分为PSI和PSII两类。
55.光合链电子的最终供体是H2O，在暗反应阶段，电子受体为NADPH+H+
56.在C4植物中，卡尔文循环只存在于维管束鞘细胞中。
57.动物体合成糖原过程中，葡萄糖供体为UDPG。
58.光合碳素途径中CO2固定的反应中催化的酶是：核酮糖-1,5-二磷酸羟化酶
59.脂肪是动物和植物主要的能源贮存形式，是由甘油和3分子脂肪酸酯化而成。
60.一个碳原子数为n（n为偶数）的脂肪酸在β-氧化中需经（0.5n-1）次β-氧
化循环，生成0.5n个乙酰CoA，（0.5n-1）个FADH2和（0.5n-1）个NADPH+H+ 61.乙醛酸循环中两个关键酶是异柠檬酸裂解酶和苹果酸合成酶，使异柠檬酸避
免了在TCA循环中的两次脱羧反应，实现从乙酰CoA净合成TCA的中间物。
62.脂肪酸从头合成C2供体是乙酰CoA,活化的C2供体是丙二酸单酰CoA，还
原剂是NADPH+H+
63.脂肪酸从头合成的酰基载体是ACP，限速酶是乙酰CoA羟化酶。
64.以干重计量脂肪比糖完全氧化产生更多的能量，糖对脂肪的产能比例：1:2
65.软脂酰CoA在β-氧化第一次循环及生成二碳代谢物彻底氧化时，ATP总量
为17个ATP
66.由3-磷酸甘油和酰基CoA合成甘油三脂过程中，第一个中间产物是磷脂酸。
67.脂肪酸的β-氧化和α-氧化都是从羧基开始的。
68.脂肪酸从头合成需要柠檬酸裂解提供乙酰CoA。
69.谷氨酸能直接氧化脱氨基。天冬氨酸经过转氨基作用生成草酰乙酸。鸟氨酸
脱羧生成腐胺
70.氨基酸分解代谢的氨在体内主要的贮存形式是谷氨酰胺。
71.体内转运一碳单位的载体是：四氢叶酸。
72.肌肉中氨基酸脱氢的主要方式是：嘌呤核苷酸循环
73.高等植物中氨同化的主要途径是谷氨酰胺合成酶-谷氨酸合酶。
三．简述或论述
DNA 二级结构的模型要点：
1.DNA分子由两条反向平行的多核苷酸链构成双螺旋结构两条链围绕一个
“中心轴”形成右手螺旋，螺旋表面有一条大沟和一条小沟。
2.嘌呤碱和嘧啶碱层叠于螺旋内侧，碱基平面与纵轴垂直，碱基之间的堆积
距离是0.34nm，磷酸与脱氧核糖在外侧，彼此之间通过磷酸二酯键连接，形成DNA的骨架，糖环平面与中轴平行。
3.双螺旋的直径为2nm顺轴方向每个0.34nm有一个核苷酸，两个核苷酸之
间的夹角是36°，沿中心轴每旋转一周有10个核苷酸。
4.一条多核苷酸链上的嘌呤碱基与另一条链上的嘧啶碱基以氢键相连，
A=T,G≡C
举例说明蛋白质结构与功能的关系
蛋白质结构是其生物学功能的基础，生物学功能是其结构的反映。
1，一级结构与功能的关系（以镰刀状贫血病为例）
镰刀状贫血病患者的血红蛋白与正常人的血红蛋白β亚基相比第六位的Glu突变为Val，导致患者的红细胞呈现镰刀状，易于发生严重贫血。
2，空间结构与功能的关系（以核糖核酸酶S为例）
核糖核酸酶S的三级结构的形成与维持与其多肽链内的4个二硫键有关，用含疏基乙醇的尿素溶液还原二硫键，使核糖核酸酶S变性失活。若透析除去尿素和疏基乙醇，在有氧和衡量疏基乙醇的水溶液中，变性的核糖核酸酶S伸展的肽链自动折叠，多肽链内的4个二硫键重新恢复配对，核糖核酸酶S酶活性恢复。
凝胶过滤层析的原理
SDS-PAGE的原理
酶催化的高效性产生的要素
TCA循环的生物学意义：
1.三羧酸循环与糖酵解相连构成糖的有氧氧化途径，此途径产生的能量最
多，是机体利用糖和其他物质氧化获得能量的最有效的方式。
2.三羧酸循环是糖、脂和蛋白质等物质代谢和转化的枢纽。
3.在植物体内，三羧酸循环的中间产物如柠檬酸、苹果酸既是生物氧化基质，
又是一定生长发育时期一定器官中的积累物质。
ATP在能量转换中的作用
电子传递链的复合物的排列顺序
化学渗透学说要点
1.呼吸链中的电子传递体在线粒体内膜中有着特定的不对称分布，递氢体和
电子传递体是间隔交替排列的，催化反应是定向的。
2.电子传递过程中，复合物I、III和IV中的递氢体起质子泵的作用，将H+
从线粒体内膜基质侧定向地泵至内膜外侧空间而将电子（2e）传给其下游的电子传递体。
3.质子不能透过线粒体内膜，泵到内膜外侧的H+不能自由返回，这样就能在
电子传递过程中在内膜两侧建立起质子浓度梯度，形成膜电位。这种跨膜的
质子电化学梯度就是推动ATP合成的原动力，称为原子推动力。
4.线粒体F1-F0-ATPase复合物能利用ATP水解能量将质子泵出内膜，但当存
在足够高的跨膜质子电化学梯度是，强大的质子流通过F1-F0-ATPase进入线粒体基质时，释放的自由能推动ATP合成。
乙醛酸循环的生物学意义
1.乙酰CoA经乙醛酸循环可转变为琥珀酸等有机酸，这些有机酸可以作为
TCA中的基质。
2.乙醛酸循环是微生物利用乙酸作为碳源建造自身机体的途径之一。
3.乙醛酸循环是油料植物将脂肪酸转变为糖的途径，
脂肪酸β氧化与从头合成的比较
蛋白质降解的胞内途径的要点及意义
用实验证明DNA的半保留复制模型
转录的终止模型
乳糖操纵子的调控方式
乳糖操纵子的结构：调节基因，启动子，操纵子，结构基因z,y,a
负调控：当细胞中没有乳糖或其他诱导物存在时，调节基因的转录产物阻遏蛋白与操纵基因结合，住址了RNA聚合酶与启动子结合，导致结构基因不转录。
正调控：当细胞中有乳糖或其他诱导物存在时。诱导物与阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白构象发生变化而失活们不能与操纵基因结合，从而使RNA聚合酶与启动子结合，导致结构基因转录。
简述酶活性调节的方式
酶活性调节的方式有，酶原激活，别构抑制，别构激活，反馈调节（包括顺序反馈抑制，积累反馈抑制，同工酶反馈抑制），前馈激活，共价修饰及级联放大，能荷调节，金属离子浓度调节，酶原激活，共价修饰，变构及聚合和解聚等机制进行调节。
简述维持蛋白质的构象的作用力：
氢键，范德华力，疏水作用，盐键，二硫键，配位键
诱导契合学说的要点
四．实验
质粒提取及电泳
过氧化物同工酶PAGE的原理与简要步骤
淀粉酶活性测定的原理与简要步骤：
基本原理：
1.小麦种子中存在淀粉水解所需要的α-淀粉酶，β-淀粉酶，脱支酶和麦
芽糖酶，在四种酶的作用下，淀粉可被彻底水解为葡萄糖。植物中最重要的是α、β淀粉酶。
2.α-淀粉酶耐高温不耐酸，β-淀粉酶耐酸不耐高温。因此，实验时，可
以先测定淀粉酶总活力，再在70℃水浴中加热15分钟将β-淀粉酶钝化，即可测出α-淀粉酶活力。用总活力减去α-淀粉酶活力即为β-淀粉酶活力。
3.淀粉酶活力大小可用其作用于淀粉生成的还原糖与3,5-二硝基水杨酸
的显色反应来测定，还原性糖可使3,5-二硝基水杨酸由黄色变为棕红色，生成物颜色的深浅与还原糖的含量成正比。
操作步骤：
1.α-淀粉酶活力测定：
1）酶液提取
2）取4支试管（2支对照，2支测定），每管中各加入酶液，水浴加热（70℃，15min），钝化β-淀粉酶。
3）对照管中加入NaOH
4)向4支试管中分别加入pH5.6柠檬酸缓冲液、预热淀粉液，立即放入40℃
水浴中，计时5min，迅速像反应管中加入NaOH，终止酶活动，准备测糖，
2.淀粉酶总活力测定：
1)将1.中酶液取5ml稀释至100ml
2) 对照管中加入NaOH
3）向4支试管中分别加入pH5.6柠檬酸缓冲液、预热淀粉液，立即放入40℃水浴中，计时5min，迅速像反应管中加入NaOH，终止酶活动，准备测糖
3.麦芽糖含量测定：
1）取7支试管（25ml），分别加入麦芽糖标准液0,0.02ml,0.6ml，1.0ml，
1.4ml,1.8ml,
2.0ml。加水至2ml，各加3,5-二硝基水杨酸2ml，沸水浴
5min，冷却后定容至25ml，用分光光度计测起吸光值，后以吸光值为纵坐标，麦芽糖含量为横坐标绘制标准曲线。
2）取2.1.反应液各2ml，重复3.中步骤
3）根据吸光值在标准曲线上查出对应的麦芽糖含量
结果处理
五．计算米氏方程的应用
一、蛋白质 1.蛋白质的概念：由许多氨基酸通过肽键相连形成的高分子含氮化合物，由C、H、O、N、S元素组成，N的含量为16%。 2.氨基酸共有20种，分类：非极性疏水R基氨基酸、极性不带电荷R基氨基酸、带正电 荷R基氨基酸（碱性氨基酸）、带负电荷R基氨基酸（酸性氨基酸）、芳香族氨基酸。 3.氨基酸的紫外线吸收特征：色氨酸和酪氨酸在280纳米波长附近存在吸收峰。 4.氨基酸的等电点：在某一PH值条件下，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相同，溶液中氨基酸的净电荷为零，此时溶液的PH值称为该氨基酸的等电点；蛋白质等电点： 在某一PH值下，蛋白质的净电荷为零，则该PH值称为蛋白质的等电点。 5.氨基酸残基：氨基酸缩合成肽之后氨基酸本身不完整，称为氨基酸残基。 6.半胱氨酸连接用二硫键（—S—S—） 7.肽键：一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸α-氨基脱水缩合形成的化学键。 8.N末端和C末端：主链的一端含有游离的α氨基称为氨基端或N端；另一端含有游离的 α羧基，称为羧基端或C端。 9.蛋白质的分子结构：（1）一级结构：蛋白质分子内氨基酸的排列顺序，化学键为肽键和二硫键；（2）二级结构：多肽链主链的局部构象，不涉及侧链的空间排布，化学键为氢键， 其主要形式为α螺旋、β折叠、β转角和无规则卷曲；（3）三级结构：整条肽链中，全部氨基 酸残基的相对空间位置，即肽链中所有原子在三维空间的排布位置，化学键为疏水键、离子键、氢键及范德华力；（4）四级结构：蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和 相互作用。 10.α螺旋：(1)肽平面围绕Cα旋转盘绕形成右手螺旋结构，称为α螺旋；(2).螺旋上升一圈，大约需要3.6个氨基酸，螺距为0.54纳米，螺旋的直径为0.5纳米；(3).氨基酸的R基分布在 螺旋的外侧；(4).在α螺旋中，每一个肽键的羰基氧与从该羰基所属氨基酸开始向后数第五个氨基酸的氨基氢形成氢键，从而使α螺旋非常稳定。 11.模体：在许多蛋白质分子中可发现两个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象，被称为模体。 12.结构域：大分子蛋白质的三级结构常可分割成一个或数个球状或纤维状的区域，折叠得较为紧密，各行使其功能，称为结构域。 13.变构效应：蛋白质空间结构的改变伴随其功能的变化，称为变构效应。 14.蛋白质胶体结构的稳定因素：颗粒表面电荷与水化膜。 15.什么是蛋白质的变性、复性、沉淀？变性与沉淀关系如何?导致蛋白质的变性因素？举 例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子？ 蛋白质的变性：在理化因素的作用下，蛋白质的空间构象受到破坏，其理化性质发生改变，生物活性丧失，其实质是蛋白质的次级断裂，一级结构并不破坏。 蛋白质的复性：当变性程度较轻时，如果除去变性因素，蛋白质仍能恢复或部分恢复其原 来的构象及功能，这一现象称为蛋白质的复性。
1.18世纪后期提出了第一个肿瘤标志物是:β2-微球蛋白。 2. 盛血试管是测定电解质的最佳选择:肝素抗凝管。 3. 推荐血糖测定的抗凝管:草酸钾 /氟化钠抗凝管。 4.17-羟皮质类固醇测定的尿液防腐剂:浓盐酸。 5. 用于尿钾、钠、钙、糖、氨基酸等测定的尿液防腐剂:麝香草酚。 6. 血清生化结果是随年龄增加而升高:甘油三脂和总胆固醇。 7. 实验室常用制备纯水的方法:蒸馏法。 8. 可获二级甚至一级纯水的制备方法:混合纯化系统。 9. 临床实验室用水,一般选用:Ⅱ级水。 10. Ⅲ级水用于:仪器、器皿的自来水清洁后冲洗。 11. 关于清洁液的使用描述错误的是:如果清洁液变成黑色,再加入适量的重铬酸钾和浓硫酸,还可继续使用。 12. 电解质测定的决定性方法:同位素稀释——质谱分析法。 13. 血清总蛋白测定的参考方法:凯氏定氮法。 14. 连续 5次结果在均数线的同一侧, -s 图失控的表现为:“漂移” 。 15. 血清葡萄糖测定的参考方法:己糖激酶法。 16. 作为常规方法的工作标准及为控制物定值的标准试剂为:二级标准品。 17. 系统误差错误的是:误差没有一定的大小和方向。 18. 关于随机误差的描述正确的:误差没有一定的大小和方向。可正可负。
19. 表示精密度较好的指标是:标准差 20. 用以表示测定结果中随机误差大小程度的指标:精密度 21. 用的是检测候选方法的比例系统误差的试验:回收试验 22. 用于检验候选方法的恒定系统误差的试验:干扰试验 23. 关于回收试验的注意事项描述错误的是:回收试验的目的是为了减少随机误差 24. 指常规测定中出现日间变异较大的情况, --S 图失控的表现为:精密度的变化 25. 火焰光度法是属于:发射光谱 26. 底物或产物的变化量与时间成正比的酶促反应时期称为:线性期 27. 下列属于 LDH2的四聚体是:H3M 28. 被认为是诊断肝细胞损伤最敏感的指标之一的是:ALT 29. 常用于肝硬化程度诊断的酶是:MAO 30. 急性胰腺炎时,下列哪一种酶在血浆中酶活性明显增高:淀粉酶 31诊断急性心肌梗死最为敏感的指标是:CK — MB 32. 急性心肌梗死时,下列哪一种 LDH 同工酶升高:LDH3 33. 对于前列腺癌的诊断具有重要价值的是:酸性磷酸酶(ACP 34. 溃疡性结肠炎时,血浆下列哪种蛋白质升高:α1—酸性糖蛋白 35. 具有蛋白酶抑制作用的急性时相反应蛋白是:α1—抗胰蛋白酶 36. 可协助判断肝癌分化程度及肝癌患者病情和预后的血浆蛋白是:甲胎蛋白
第六章生物化学实验基本知识 主编：齐锦生编委： 孔德娟齐锦生许丽辉杨崇辉周秀霞罗湘衡君智炜张晓玲王芳 实验室要求 一、实验课的目的 1、加深理解：加深对生物化学基本理论的理解。 2、掌握技术：掌握生物化学的基本实验方法和实验技术（四大基本技术：离心、电泳、层析、比色）及分子生物学的一些基本技术和方法。 3、培养能力：培养学生的思维能力、动手能力和表达能力。 4、掌握精髓：科学的精髓是实事求是、敢于探索、善于创新的精神，要对实验中出现的一切反常现象进行讨论，并大胆提出自己的看法。 二、生化实验室规则和要求 1、预习：课前要预习实验教材，了解实验目的、原理，熟悉操作规程。 2、秩序：自觉遵守纪律，维护教学秩序，不准迟到、早退，保持安静，严禁谈笑打闹，听从教师指导，未经教师同意，不得随意离开实验室。 3、整洁：搞好实验环境和仪器的卫生整洁，实验台面必须保持整洁，仪器药品要井然有序，公用试剂用毕，应立即盖严放回原处，勿使药品试剂撒在实验台面和地面。实验完毕，需将药品试剂排列整齐，仪器要洗净倒置放好。固体废物，如滤纸、棉花、血块不得倒入水池中，以免堵塞下水道；一般性废液可倒入水池中冲走，但强酸强碱或有毒有害溶液必须用水高度稀释后，方可倒入水池中，同时放水冲走，以免腐蚀水管。全体同学由班长安排轮流值日，负责当天实验室卫生、安全和一些服务性工作，经教师验收合格后，方可离开实验室。 4、节约：使用仪器、药品、试剂及各种物品必须厉行节约，并节约水电。应特别注意保持药品和试剂的纯净，严防混杂、乱用和污染。使用和洗涤仪器应小心仔细，防止损坏，贵重仪器使用前应熟悉使用方法，严格遵守操作规程，严禁随意开动，发现故障后应立即报告指导教师，不要自己动手检修，如有损坏按学校规定赔偿。 5、安全：注意人身和国家财产安全是至关重要的，要时刻注意防火、防水、防电、防危险品、防事故，以免发生意外。实验室内严禁吸烟。使用乙醚、苯、乙醇、丙酮等易燃品时，不允许在电炉、酒精灯上直接加热。实验中须远离火源，如有危险发生，应首先关掉电源；有机溶剂着火时，勿用水泼，以免扩大燃烧面积，可用沙土、灭火器具灭之。用火时必须严格做到：火着人在，人走火灭。用毕电器后及时切断电源。加热试剂、液体时，管口不要对人，要十分小心操作，避免灼伤人。实验室内一切物品未经本室负责教师批准，严禁携带出室外，有毒物品尤其如此。借物必须办理登记手续。
生物化学第一章蛋白质化学测试题 一、单项选择题 1．测得某一蛋白质样品的氮含量为0．40g，此样品约含蛋白质多少？B(每克样品*6.25) A．2．00g B．2．50g C．6．40g D．3．0 0g E．6．25g 2．下列含有两个羧基的氨基酸是：E A．精氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸 D．色氨酸E．谷氨酸 3．维持蛋白质二级结构的主要化学键是：D A．盐键 B．疏水键 C．肽键D．氢键 E．二硫键(三级结构) 4．关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是：B A．天然蛋白质分子均有的这种结构 B．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系 D．亲水基团聚集在三级结构的表面 E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5．具有四级结构的蛋白质特征是：E
A．分子中必定含有辅基 B．在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上，肽链进一步折叠，盘曲形成 C．每条多肽链都具有独立的生物学活性 D．依赖肽键维系四级结构的稳定性 E．由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成6．蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定：C A．溶液pH值大于pI B．溶液pH值小于pI C．溶液pH值等于pI D．溶液pH值等于7．4 E．在水溶液中 7．蛋白质变性是由于：D A．氨基酸排列顺序的改变B．氨基酸组成的改变C．肽键的断裂D．蛋白质空间构象的破坏E．蛋白质的水解 8．变性蛋白质的主要特点是：D A．粘度下降B．溶解度增加C．不易被蛋白酶水解
D．生物学活性丧失 E．容易被盐析出现沉淀9．若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时，该溶液的pH 值应为：B A．8 B．＞8 C．＜8 D．≤8 E．≥8 10．蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？E A．半胱氨酸 B．蛋氨酸 C．胱氨酸 D．丝氨酸E．瓜氨酸 二、多项选择题 1．含硫氨基酸包括：AD A．蛋氨酸 B．苏氨酸 C．组氨酸D．半胖氨酸 2．下列哪些是碱性氨基酸：ACD A．组氨酸B．蛋氨酸C．精氨酸D．赖氨酸 3．芳香族氨基酸是：ABD A．苯丙氨酸B．酪氨酸 C．色氨酸D．脯氨酸4．关于α-螺旋正确的是：ABD A．螺旋中每3．6个氨基酸残基为一周 B．为右手螺旋结构
（半）自动生化分析仪工作原理 一、基本结构 （一）按照反应装置的结构，自动生化分析仪主要分为流动式(Flow system)、分立式(Discrete system)两大类。 1．流动式指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。 2．分立式指各待测样品与试剂混合后的化学反应都是在各自的反应杯中完成。其中有几类分支。 (1)典型分立式自动生化分析仪。此型仪器应用最广。 (2)离心式自动生化分析仪，每个待测样品都是在离心力的作用下，在各自的反应槽内与试剂混合，完成化学反应并测定。由于混合，反应和检测几乎同时完成，它的分析效率较高。3．袋式自动生化分析仪是以试剂袋来代替反应杯和比色杯，每个待测样品在各自的试剂袋内反应并测定。 4．固相试剂自定生化分析仪(亦称干化学式自动分析仪) 是将试剂固相于胶片或滤纸片等载体上，每个待测样品滴加在相应试纸条上进行反应及测定。操作快捷、便于携带是它的优点。 (二)典型分立式自动生化分析仪基本结构 1．样品(Sample)系统 样品包括校准品、质控品和病人样品。系统一般由样品装载、输送和分配等装置组成。 样品装载和输送装置常见的类型有： (1)样品盘(Sample disk)，即放置样品的转盘有单圈或内外多圈，单独安置或与试剂转盘或反应转盘相套合，运行中与样品分配臂配合转动。有的采用更换式样品盘，分工作和待命区，其中放置多个弧形样品架(Sector)作转载台，仪器在测定中自动放置更换，均对样品盘上放置的样品杯或试管的高度、直径和深度有一定要求，有的需专用样品杯，有的可直接用采血试管。样品盘的装载数，以及校准品、质控品、常规样品和急诊样品的装载数，一般都是固定的。这些应根据工作需要选择。 (2)传动带式或轨道式进样即试管架(Rack)不连续，常为10个一架，靠步进马达驱动传送带，将试管架依次前移，再单架逐管横移至固定位置，由样品分配臂采样。 (3)链式进样试管固定排列在循环的传动链条上，水平移动到采样位置，有的仪器随后可清洗试管。 分配加样装置大都由注射器、步进马达或传动泵、加样臂和样品探针等组成，①注射器(syrine unit)。根据注射器直径和活塞移动距离的多少，定量吸取样品或试剂。它的精度决定加样的精度，一般可精确到1微升。注射器漏液时，首先考虑是否探针堵塞，其次是注射器活塞磨损等。有的加液系统采用容积型注射泵和数控脉冲步进马达，提高精度。②样品探引(Probe)与加样臂相联，直接吸取样品。探针均设有液面感应器，防止探针损伤和减少携带污染。有的设有阻塞检测报警系统当探针样品中的血凝块等物质阻塞时．仪器会自动报警冲洗探针，并跳过当前样品，对下一样品加样。有的还有智能化防撞装置遇到阻碍探针立即停止运动并报警。即使如此，它仍是非正规操作时的易损件。为了保护探针，除预先需要根据样品容器的高低、最低液面高度等进行设置外、，样品容器的规格、放置以及液面高度等设定条件不得随意改变。在某些仪器上，采样器和加液器组合在一起，加样品和加试剂或稀释液一个探针一次完成。③加样臂。连接探引，在样品杯(试剂瓶)和反应杯之间运动，完成采样和加样(加试剂)。它的运动方式，与仪器工作效率及工作寿命有一定关系。④阀门用以决定液体流动方向。⑤稀释系统。对样品进行预稀释、过后稀释或加倍，对标准原液系列稀释等。不同仪器的稀释方式有所差异，要注意识别。试剂系统亦有稀释功能：
生物化学知识点486 时间：2011-8-10 18:04:44 点击： 、大多数的蛋白质都是由（碳）、（氢）、（氧）、（氮）等主要1生物化学一、填空题核心提示：折、蛋白质二级结构的主形式是（a-螺旋）、（B-元素组成的，组成蛋白质的基本单位是（氨基酸）。2（疏3、维行蛋白质的空间结稳定的化 学键主要有（氢键）、（盐键）、叠）（B-转角）（无规则卷曲）。... 水键）、（范德华力）等生物化学 一、填空题 、大多数的蛋白质都是由（碳）、（氢）、（氧）、（氮）等主要元素组成的，组成蛋白1 质的基本单位是（氨基酸）。 转角）（无规则卷曲）。、蛋白质二级结构的主形式是（a-螺旋）、（B-折叠）（B-2、维行蛋白质的空间结稳定的化学键主要有（氢键）、（盐键）、（疏水键）、（范德华3 力）等非共价键和（二硫键）。 、使蛋白质沉淀常用的方法有（盐析法）、（有机溶剂沉淀法）、、4 （重金 属盐沉淀法）。、核酸分（核糖核酸）和（脱氧核糖核酸）两大类。构成核酸的基本单位是（氨基酸），5 核酸彻底水解的最终产物是（碳酸）、（戊糖）、（含氮碱），此即组成核酸的基本成分。）、CA）和（鸟嘌呤B）两种，嘧啶碱主要有（胞嘧啶6、核酸中嘌呤碱主要有（腺嘌呤）和（胸腺嘧啶T）三种。（尿嘧啶U、酶是指（由活细胞产生的能够在体内外起催化作用的生物催化剂），酶所催化的反应称7 为（酶促反应），酶的活性是指（酶的催化能力）。 8、酶促反应的特点有（催化效率高）、（高度专一性）（酶活性的不稳定性）。 、酶促反应速度受许多因素影响，这些因素主要有（酶浓度）、（底物浓度）、（温度）、9 ）、（激活剂）、（抑制剂）（PH），糖的来源有（食物中糖的消化吸收）、3.9-6.1mmol/L10、正常情况下空腹血糖浓度为（（肝糖原的分解）、（糖异生作用），糖的正常去路有（氧化供能）、（合成糖原）、（转化成脂肪等），异常去路有（尿糖）。，反应在（线12）分子ATP411、三羧酸循环中有（2）次脱羧（）次脱氧反应，共生成（酮戊二酸脱氢酶粒）中进行，三种关键酶是（柠檬酸合成酶）、（异柠檬酸脱氢酶）、（a- 系）。、由于糖酵解的终产物是（乳酸），因此，机体在严重缺氧情况下，会发生（乳酸）中12 毒。 、糖的主要生理功能是（氧化供能），其次是（构成组织细胞的成分），人类食物中的13 糖主要是（淀粉）。、糖尿病患者，由于体内（胰岛素）相对或绝对不足，可引起（持续）性（高血糖），14 1 甚至出现（糖尿）），并释放能量的过程称（生H2O、营养物质在（生物体）内彻底氧化生成（CO2）和（15 物氧化），又称为（组织呼吸）或（细胞呼吸）。琥珀酸氧化呼吸链），两FADH2、体内重要的两条呼吸链是（NADH氧化呼吸链）和（16 2ATP）。条呼吸链ATP的生成数分别是（3ATP）和（）H2O17、氧化磷酸化作用是指代谢物脱下的（氢）经（呼吸链）的传递交给（氧）生成（ATP）的过程相（偶联）的作用。的过程与（ADP）磷酸化生成（ATP的主 要方式为（氧化磷酸化），其次是（底物水平磷酸化）。18、体内生成脱a-CO2是通过（有机物）的脱羧反应生成的，根据脱羧的位置不同，可分为（19、体内脱羧）。羧）和（B-氧化过程包括（脱氢）、（加水）、（再脱氢）、（硫解）四个步每一次B-20、脂酰CoA ）。）和比原来少2
生物化学知识点总结 一、蛋白质 蛋白质的元素组成：C、H、O、N、S 大多数蛋白质含氮量较恒定，平均16%，即1g氮相当于6.25g蛋白质。6.25称作蛋白质系数。 样品中蛋白质含量=样品中含氮量×6.25 蛋白质紫外吸收在280nm，含3种芳香族氨基酸，可被紫外线吸收 等电点（pI）：调节氨基酸溶液的pH值，使氨基酸所带净电荷为零，在电场中，不向任何一极移动，此时溶液的pH叫做氨基酸的等电点。 脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质，其余的氨基酸与茚三酮反映均产生蓝紫色物质。氨基酸与茚三酮反应非常灵敏，几微克氨基酸就能显色。 肽平面：肽键由于C-N键有部分双键的性质，不能旋转，使相关的6个原子处于同一平面，称作肽平面或酰胺平面。 生物活性肽：能够调节生命活动或具有某些生理活动的寡肽和多肽的总称。 1）谷胱甘肽：存在于动植物和微生物细胞中的一种重要三肽，由谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Cys）和甘氨酸（Gly）组成，简称GSH。由于GSH含有一个活泼的巯基，可作为重要的还原剂保护体内蛋白质或酶分子中的巯基免遭氧化，使蛋白质或酶处在活性状态。 寡肽：10个以下氨基酸脱水缩合形成的肽 多肽：10个以上氨基酸脱水缩合形成的肽 蛋白质与多肽的区别： 蛋白质：空间构象相对稳定，氨基酸残基数较多 多肽：空间构象不稳定，氨基酸残基数较少 蛋白质的二级结构：多肽链在一级结构的基础上，某局部通过氢键使肽键平面进行盘曲，折叠，转角等形成的空间构象。 α?螺旋的结构特点： 1）以肽键平面为单位，以α?碳原子为转折盘旋形成右手螺旋；肽键平面与中心轴平行。2）每3.6个氨基酸残基绕成一个螺圈，螺距为0.54nm，每个氨基酸上升0.15nm。
1.2. 常用临床生化项目的分类 1.2.1. 按化学性质分类 大概分为四类：酶类、底物代谢类、无机离子类、特种蛋白类。 1.2.1.1. 酶类 包括ALT（谷丙转氨酶），AST（谷草转氨酶），ALP（碱性磷酸酶），ACP（酸性磷酸酶），r-GT（谷氨酰转移酶），α-HBDH（α羟丁酸脱氢酶），LDH（乳酸脱氢酶），CK（肌酸激酶），CK-MB（肌酸激酶同功酶），α-AMY（淀粉酶），ChE（胆碱脂酶）等。 1.2.1.2. 底物代谢类 包括TG（甘油三脂），TC（总胆固醇），HDL-C（高密度脂蛋白胆固醇），LDL-C（低密度脂蛋白胆固醇），UA（尿酸），UREA（尿素氮），Cr（肌酐），Glu（葡萄糖），TP （总蛋白），Alb（白蛋白），T-Bil（总胆红素），D-Bil（直接胆红素），TBA（总胆汁酸），CO2（二氧化碳）等。 1.2.1.3. 无机离子类 包括Ca（钙），P（磷），Mg（镁），Cl（氯），Fe（铁）等。 1.2.1.4. 特种蛋白类 apoA1（载脂蛋白A1），apoB（载脂蛋白B），Lp(a)（脂蛋白a）；补体C3，补体C4；免疫球蛋白IgA、IgG、IgM等。 1.2.2. 按临床性质分类 无机离子：包括Ca，P，Mg，Cl等； 肝功能：包括ALT，AST，r-GT，ALP，MSO，T-Bil，D-Bil，TBA，TP，Alb等； 肾功能：UA，UREA，Cr等； 心肌酶谱：CK，CK-MB，LDH，α-HBDH， AST，MSO等； 糖尿病：GLU等； 前列腺疾病：ACP，p-ACP等； 胰腺炎：α-AMY； 血脂：TC，TG，HDL-C，LDL-C，apoA1，apoB，Lp(a)； 痛风：UA； 中毒：ChE； 免疫性疾病：C3，C4，IgG，IgA，IgM； 急性炎症反应：CRP（C反应蛋白），AAG（a1酸性糖蛋白），CER（铜蓝蛋白），ASO （抗链球菌溶血素O）。 1.3. 常用临床项目的医学决定水平 医学决定水平（Medicine decide level，MDL）是指不同于参考值的另一些限值，通过观察测定值是否高于或低于这些限值，可在疾病诊断中起排除或确认的作用，或对某些疾病进行分级或分类，或对预后做出估计，以提示医师在临床上应采取何种处理方式，如进一步进行某一方面的检查，或决定采取某种治疗措施等等。 医学决定水平与参考值的根本区别在于： 它不仅对健康人的数值进行研究，以决定健康人的数值区间，同时还对有关疾病的不同病情的数据进行研究，以定出不同的决定性限值。 可提示及引导医师采取不同的临床措施。所医学决定水平看来更合理、更客观、更有助于临床的应用。当然，真正建立起每一项试验的医学决定水平是一个十分复杂的问题，存在着许多的实际困难。 下列为一些常用检验项目的医学决定水平，仅供参考。 1.3.1. 钾
生物化学名词解释及基本概念整理 第一章蛋白质化学 Ⅰ基本概念 1、等电点（pI）：使氨基酸离解成阳性离子和阴性离子的趋势和程度相等，总带电荷为零（呈电中性） 时的溶液pH值. A溶液pH
绪论（老师只要求了结部分已经自动过滤） 基本概念： 新陈代谢：生物体与外界环境之间的物质和能量简化以及生物体内物质和能量的装换过程重点内容：生物化学的主要研究内容：1.生物体内的化学组成2.生物体内的物质代谢，能量装换和代谢调节3.生物体内的信息代谢 核酸 一、基本概念： 核苷酸：核苷酸即核苷的磷酸酯 碱基互补配对：A-T,G-C 三叶草结构：t-RNA的二级结构，一般由四臂四环组成：氨基酸接受臂，二氢酸尿嘧啶环，反密码子环，额外环，假尿嘧啶核苷-胸腺嘧啶核糖核甘酸环（TΨC环） 增色效应：DNA变性后由于双螺旋分子内部的碱基暴露，260nm紫外吸收值升高。减色效应：核酸的光吸收值通常比其各个核算组成部分的光吸收值之和小30%~40%，是由于碱基密集堆积的缘故。 变性和复性：指的是在一定物理和化学因素的作用下，核酸双螺旋结构在碱基之间的氢键断裂，变成单链的过程。复性恰好相反。 重点内容： 1.核酸的生物学功能（1.生物分子遗传变异基础， 2.遗传信息的载体， 3.具有催化作用， 4.对基因的表达有调控作用），基本结构单位（核苷酸），基本组成部分（磷酸，含氮碱基，戊糖） 2.核苷酸的名称（A:腺嘌呤T:胸腺嘧啶C:胞嘧啶G:鸟嘌呤U:尿嘧啶）符号（后面统一描述） 3.DNA双螺旋结构的特点（1.有反向平行的多核苷酸链互相盘绕，2.亲水骨架在外，疏水碱基在内，一周十个碱基，螺距3.4nm,3.两条DNA链借助氢键结合在一起）和稳定因素（氢键，碱基堆积力，带负电的磷酸基团静电力，碱基分子内能）： 4.核酸的紫外吸收特性(因为核酸中含有的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键的特性所以对紫外光有吸收特性，在260nm处有最大吸收值，不同的核酸吸收峰值不同)、T m（熔解温度）（把热变性过程中的光吸收达到最大吸收一半（双螺旋解开一半）时的温度叫做熔解温度）值及变性和复性的关系：（G-C）%=(T m-69.3)*2.44 5.α-螺旋、β—折叠以及β-转角的结构特点：1.主要维持空间力为氢键，2.α螺旋是一段肽链中所有的Cα的扭角都是相等的，这段肽链则会围绕某个中心轴成规则螺旋构想，3.β折叠是由两条多肽链侧向聚集，通过相邻肽链主链上的N-H与C=O之间有规则的氢键形成，4.转角结构使得肽链不时扭曲走向成为β转角 蛋白质、氨基酸化学 一、基本概念 氨基酸：羧酸分子中α碳原子上的一个氢原子被氨基取代所生成的衍生物，是蛋白质的基本结构单位。 寡肽：2～20个氨基酸残基通过肽键连接形成的肽 多肽：由20个以上的氨基酸残基组成的肽 肽键：一个氨基酸的羧基与另一氨基酸的氨基发生缩合反应脱水成肽时，羧基和氨基形成的酰胺键。具有类似双键的特性，
检验科基础知识培训 一，检验科室组成 生化室、临床检验室、免疫室、细菌室（微生物室) 二，生化室仪器与试剂 生化室就是检验科开展生化检验得实验室。其设备主要有72１／72２分光光度计、半自动生化分析仪、全自动生化分析仪、电解质分析仪、血凝分析仪、血气分析仪、水浴锅、离心机。 耗材主要有试管、注射器、真空采血管、采血针、样品杯、试剂。 全自动生化分析仪 全自动生化分析仪按测定速度分小型、中型、大型、超大型四种,这就是我们自己划分得,以方便记忆与区别。 测试速度就是以单位时间生化分析仪能够完成测试得生化项目数 以200左右测试速度为小型机 小型机适用县级中医院、妇保院、乡镇卫生院 以400左右测试速度为中型机 中型机适用县医院、地市级中医院妇保院 以８０0左右测试速度为大型机 大型机适用县医院、地市级医院中医院妇保院 800以上至翻倍速度为超大型机 超大型机适用地市级以上医院中医院妇保院
全自动生化分析仪有国产与进口之分,多数医院喜欢进口仪器。进口仪器品牌有: 罗氏、日立、奥林巴斯、贝克曼、东芝、雅培、西门子、日本电子(ＢM6010)、希森美康,其中奥林巴斯生化仪被贝克曼收购，成为一个公司两个品牌，西门子生化仪就是贴牌日本电子。 国产仪器品牌主要有: 上海科华、南京英诺华、深圳迈瑞、长春迪瑞（四川新成） 全自动生化分析仪又有湿化学与干化学两类机器。 上面讲得进口与国产都就是湿化学生化分析仪。 湿化学与干化学得本质区别就是试剂得物理性状。 湿化学得试剂就是液体得,干化学得试剂就是以干片形式存在。两种试剂价格比较，干片试剂价格较高, 目前市场上以强生得干片机为主,其它品牌有希森美康、罗氏等,较少见。还没有国产干片生化仪。 全自动生化分析仪耗材有: 试剂、标准品、质控品、清洗液、样品杯、采血管等。 标本类型:血清、血浆、尿液、胸腹水等。 生化分析仪测定项目: 生化分析仪得测定项目与人体脏器功能、人体内环境、营养状况等密切相关。 AST——谷草转氨酶（天门冬氨酸氨基转移酶)／ALT——谷丙转氨酶(丙氨酸氨基转移酶)在人体广泛存在,在心肌、肝脏活性
生物化学期末考试知识点归纳 三羧酸循环记忆方法 一：糖无氧酵解过程中的“１、２、３、４”１：1分子的葡萄糖２：此中归纳为：6个2 2个阶段；经过2个阶段生成乳酸 2个磷酸化； 2个异构化，即可逆反应； 2个底物水平磷酸化；2个ＡＴＰ消耗，净得2个分子的ＡＴＰ； 产生2分子ＮＡＤＨ ３：整个过程需要3个关键酶４：生成４分子的ＡＴＰ． 二：糖有氧氧化中的“１、２、３、４、５、６、７”１：1分子的葡萄糖２：2分子的丙酮酸、2个定位３：3个阶段：糖酵解途径生成丙酮酸丙酮酸生成乙酰ＣＯ-Ａ三羧酸循环和氧化磷酸化 ４：三羧酸循环中的４次脱氢反应生成３个ＮＡＤＨ和１个ＦＡＤＨ2 ５：三羧酸循环中第５步反应：底物水平磷酸化是此循环中唯一生成高能磷酸键的反应６：期待有人总结７：整个有氧氧化需７个关键酶参与：己糖激酶、６－
磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶、丙酮酸脱氢酶复合体、拧檬酸合酶、异拧檬酸脱氢酶、a-酮戊二酸脱氢酶复合体一.名词解释： 1.蛋白质的等电点：当蛋白质溶液处在某一pH值时，蛋白质解离成正、负离子的趋势和程度相等，即称为兼性离子或两性离子，净电荷为零，此时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点。、 2.蛋白质的一级结构：是指多肽链中氨基酸的排列的序列，若蛋白质分子中含有二硫键，一级结构也包括生成二硫键的半胱氨酸残基位置。维持其稳定的化学键是：肽键。蛋白质二级结构：是指多肽链中相邻氨基酸残基形成的局部肽链空间结构，是其主链原子的局部空间排布。蛋白质二级结构形式：主要是周期性出现的有规则的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲等。 蛋白质的三级结构是指整条多肽链中所有氨基酸残基，包括相距甚远的氨基酸残基主链和侧链所形成的全部分子结构。因此有些在一级结构上相距甚远的氨基酸残基，经肽链折叠在空间结构上可以非常接近。 蛋白质的四级结构是指各具独立三级结构多肽链再以各自特定形式接触排布后，结集所形成的蛋白质最高层次空间结构。 3..蛋白质的变性：在某些理化因素的作用下，蛋白质的空间结构受到破坏，从而导致其理化性质的改变和生物学活性的丧失，这种现象称为蛋白质的变性作用。蛋白质
基础知识篇 生物化学 知识点： 1、各类糖分子的结构和功能； 2、脂类中与生物膜有关的物质结构与功能； 3、核酸的基本结构、相互关系与功能； 4、各类氨基酸的基本结构、特征以及蛋白的构象与功能的关系； 5、酶的分类、作用机制、抑制类型、动力学过程与调节； 6、代谢中的生物氧化过程特别是光合磷酸化过程的机理及意义； 7、代谢中的糖代谢过程； 8、核酸的生物合成、复制、转录及基因表达； 9、各种代谢过程的调控及相互关系； 10、现代生物学的方法和实验手段特别是分离、纯化、活性册顶的基本 方法等； 11、生物化学研究进展；
◎●将两种旋光不同的葡萄糖分别溶与水后，其旋光率均逐渐变为+52.7°。，称为变旋现象。 ◎●羟甲基在糖环平面的上方的为D-型，在平面的下方的为L-型。在D-型中，半缩醛羟基在平面的下方的为α-型，在平面的上方的为β-型。 ◎●一切糖类都有不对称碳原子，都具旋光性。 ◎●区分酮糖、醛糖用Seliwanoff反应。 ◎●天然糖苷多为β-型。 ◎●糖醛酸是肝脏内的一种解毒剂。 ◎●自然界存在的糖胺都是己糖胺。 ◎●麦芽糖为[α-D-葡萄糖-α（1→4）-α-D-葡萄糖苷]，异麦芽糖为[α-D-葡萄糖-α（1→6）-α-D-葡萄糖苷]，蔗糖为[α-D-葡萄糖-α，β（1→4）-果糖苷]，乳糖为[半乳糖-β（1→4）-α-D-葡萄糖苷]，纤维二糖为[α-D-葡萄糖-β（1→4）α-D-葡萄糖苷]。 ◎●直链淀粉成螺旋状复合物，遇碘显紫蓝色，碘位于其中心腔内，在620——580nm有最大光吸收。支链淀粉分支平均有24——30个葡萄糖，遇碘显紫红色，在530——555nm有最大光吸收。糖原遇碘显棕红色，在430——5490nm有最大光吸收。◎●与糖蛋白相比，蛋白聚糖的糖是一种长而不分支的多糖链，即糖胺聚糖。其一定的部位上与若干肽链连接，糖含量超过95%，多糖是系列重复双糖结构。 ◎●糖蛋白是病毒、植物凝集素、血型物质的基本组成部分，Fe2+、Cu2+、血红蛋 素结合蛋白。参与凝血过程的糖蛋白有：凝血酶原、纤维蛋白酶原。 ◎●血型物质含75%的糖，它们是：岩藻糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖胺。 ◎●木糖-Ser连接为结缔组织蛋白聚糖所特有。
生化知识点梳理 蛋白质水解 （1）酸水解：破坏色胺酸，但不会引起消旋，得到的是L-氨基酸。（2）碱水解：容易引起消旋，得到无旋光性的氨基酸混合物。 （3）酶水解：不产生消旋，不破坏氨基酸，但水解不彻底，得到的是蛋白质片断。（P16） 酸性氨基酸：Asp（天冬氨酸）、Glu（谷氨酸） 碱性氨基酸：Lys（赖氨酸）、Arg(精氨酸）、His（组氨酸) 极性非解离氨基酸：Gly（甘氨酸）、Ser(丝氨酸）、Thr（苏氨酸）、Cys（半胱氨酸），Tyr（酪氨酸）、Asn（天冬酰胺）、Gln（谷氨酰胺） 非极性氨基酸：Ala（丙氨酸）、V al（缬氨酸）、Leu（亮氨酸）、Ile（异亮氨酸）、Pro（脯氨酸）、Phe（苯丙氨酸）、Trp（色氨酸）、Met（甲硫氨酸） 氨基酸的等电点调整环境的pH，可以使氨基酸所带的正电荷和负电荷相等，这时氨基酸所带的净电荷为零。在电场中既不向阳极也不向阴极移动，这时的环境pH称为氨基酸的等电点（pI）。 酸性氨基酸：pI= 1/2×（pK1+pKR） 碱性氨基酸：pI=1/2×（pK2+pKR） 中性氨基酸：pI= 1/2×（pK1+pK2） 当环境的pH比氨基酸的等电点大，氨基酸处于碱性环境中，带负电荷，在电场中向正极移动；当环境的pH比氨基酸的等电点小，氨基酸处于酸性环境中，带正电荷，在电场中向负极移动。 除了甘氨酸外，所有的蛋白质氨基酸的α-碳都是手性碳，都有旋光异构体，但组成蛋白质的都是L-构型。带有苯环氨基酸（色氨酸）在紫外区280nm波长由最大吸收 蛋白质的等离子点：当蛋白质在某一pH环境中，酸性基团所带的正电荷预见性基团所带的负电荷相等。蛋白质的净电荷为零，在电场中既不向阳极也不向阴极移动。这是环境的pH称为蛋白质的等电点。 盐溶：低浓度的中性盐可以促进蛋白质的溶解。 盐析：加入高浓度的中性盐可以有效的破坏蛋白质颗粒的水化层，同时又中和了蛋白质分子电荷，从而使蛋白质沉淀下来。 分段盐析：不同蛋白质对盐浓度要求不同，因此通过不同的盐浓度可以将不同种蛋白质沉淀出来。 变性的本质：破坏非共价键（次级键）和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。蛋白质的二级结构：多肽链在一级结构的基础上借助氢键等次级键叠成有规则的空间结构。组成了α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲等二级结构构象单元。α-螺旋α-螺旋一圈有3.6个氨基酸，沿着螺旋轴上升0.54nm，每一个氨基酸残基上升0.15nm，螺旋的直径为2nm。当有脯氨酸存在时，由于氨基上没有多余的氢形成氢键，所以不能形成α-螺旋。 β-折叠是一种相当伸展的肽链结构，由两条或多条多肽链侧向聚集形成的锯齿状结构。有同向平行式和反向平行式两种。以反向平行比较稳定。 β-转角广泛存在于球状蛋白中，是由于多肽链中第n个残基羰基和第n+3个氨基酸残基的氨基形成氢键，使得多肽链急剧扭转走向而致 超二级结构：指多肽链上若干个相邻的二级结构单元（α-螺旋、β-折叠、β-转角）彼此相互作用，进一步组成有规则的结构组合体（p63 ）。主要有αα，
生物化学知识点整理 注: 1.此材料根据老师的PPT及课堂上强调需掌握的内容整理 而成,个人主观性较强，仅供参考。（如有错误，请以课本为主) 2.颜色注明：红色:多为名解、简答（或较重要的内容) 蓝色：多为选择、填空 第八章脂类代谢 第一节脂类化学 脂类：包括脂肪和类脂，是一类不溶于水而易溶于有机溶剂，并能为机体利用的有机化合物。 脂肪：三脂肪酸甘油酯或甘油三酯。 类脂:胆固醇、胆固醇酯、磷脂、糖脂。
第二节脂类的消化与吸收 脂类消化的主要场所：小肠上段 脂类吸收的部位：主要在十二指肠下段及空肠上段 第三节三酰甘油（甘油三酯）代谢 一、三酰甘油的分解代谢 1.1）脂肪动员：储存在脂肪细胞中的脂肪，被肪脂酶逐步水解为 脂肪酸及甘油，并释放入血以供其他组织氧化利用的过程。 ２）关键酶：三酰甘油脂肪酶 （又称“激素敏感性三酰甘油脂肪酶",HSL） 3）脂解激素:能促进脂肪动员的激素,如胰高血糖素、去甲肾上
腺素、肾上腺素等. 4）抗脂解激素:抑制脂肪动员,如胰岛素、前列腺素、烟酸、雌 二醇等。 2.甘油的氧化 甘油在甘油激酶的催化下生成３—磷酸甘油,随后脱氢生成磷酸二羟丙酮，再经糖代谢途径氧化分解释放能量或经糖异生途径生成糖。 3.脂肪酸的分解代谢 饱和脂肪酸氧化的方式主要是β氧化. 1)部位：组织:脑组织及红细胞除外。心、肝、肌肉最活跃; 亚细胞：细胞质、线粒体. 2）过程： ①脂酸的活化-—脂酰CoA的生成（细胞质) 脂肪酸+ ＨSCｏ 脂酰~SＣoＡ + AＭP + Ｐｉ 消耗了2个高能磷酸键 ②脂酰CｏＡ进入线粒体 酶:a．肉碱酰基转移酶 I（脂肪酸氧化分解的关键酶、限速酶）b。肉碱酰基转移酶Ⅱ c。脂酰肉碱-—肉碱转位酶（转运体）
临床生化检验基础知识培训 一、生化基础知识 二、生化仪器基础知识 三、部分生化项目的临床意义 本文档仅供生化应用工程师参考阅览，更多专业知识请查阅后附参考文献。 肖自强 2014-3-19
一、生化基础知识 1.1生化诊断试剂盒为由一定的化学品或者酶类组成的多成分混合试剂（Reagent），最终以水溶液的方式与待测物发生一系列化学或者生化反应，通过生成物或反应物中某物质的吸光度变化，测量待检测物中某种特定物质的含量。 1.2生化诊断试剂用于检测样本，包括：人体血清（主要）、血浆及尿液中的各种酶类和代谢产物，用于预测，诊断以及治疗监测，协助临床医生诊治疾病提供数据参考。 1.3按功能分为：肝功、血脂、肾功、心肌、代谢、免疫&风湿、离子&其他。 1.4试剂性能评价指标： 1 试剂外观 2批间差 3准确度 4精密度 5线性（灵敏度） 6抗干扰能力（特异性） 7稳定性 1.5试剂检测原理（朗伯比尔定律）：A=Kbc
式中，A 为吸光度;K 为吸收系数，是与入射辐射的波长及吸收物质的性质有关的常数;b为液层厚度，单位为cm;c 为吸收物质的浓度。当浓度的单位为mol/L 时，K 的单位为L/mol·cm，称为摩尔吸收系数，通常用ε表示。摩尔吸收系数ε表示物质对某一波长的辐射的吸收特性。ε愈大，表示物质对某波长辐射的吸收力愈强，因而分光光度法测定的灵敏度就愈高. 1.6理论值与实测值偏差的解释：实测值偏离了朗伯比尔定律。 偏离Lambert-Beer定律的因素： 1复合光对Beer 定律的偏离：吸收定律要求入射光为单色光，而分光光度计单色光的纯度主要决定于色散元件及光路设计，即使高精度的仪器，也得不到纯单色光，而是波长宽度的复合光，其结果导致偏离Lambert Beer 定律。 2杂散光的影响：杂散光(stray light) 是进入检测器待测波长以外的光。主要来源于仪器色散元件表面的散射、单色器内壁尘埃等。 3狭缝宽度的影响：单色器设有进、出口狭缝，狭缝愈窄，单色光愈纯，吸光度增加，但辐射能减小，对弱吸收带的测量有一定影响。定性分析时，为提高分辨能力常采用较小的狭缝，而定量分析时，在灵敏度允许的情况下，宜采用较大狭缝。当出、入射狭缝宽度相等时，狭缝宽度引起的误差最小。 4非吸收作用引起的误差： 1.散射效应：光吸收定律只适用于均匀的吸收体系，如待测溶液是混浊的，当 光通过时，将产生散射效应。其结果使光通过吸收物质的光程不固定，散射光的一部分和透射光一起进入检测器，导致偏离Beer 定律。因此，免疫比浊法常用多点校准来做标准曲线。 2. 荧光效应：分子吸收辐射能后产生的激发态分子以重新发射辐射的方式回 到基态而发射荧光。由于多数显色体系荧光效应很小，而且荧光发射是各向同性，只有一部分沿透射光方向进入检测器，使测量吸光度偏低。一般情况下，荧光效应对分光光度法产生的影响较小。目前，多数光度计设有两个样品室，对有荧光试样可置于离检测器较远的样品室，或在光路中插入适当的滤光片以消除荧光效应。 5测定过程中产生的误差：化学反应引起的误差，人为的误差等，在此不作详细解释。 1.7生化测定方法：临床化学自动分析仪所涉及的测定方法包括终点测定法、连续监测法、固定时间法等。 1.8.1生化分析基本术语概述： 1双波长：由主波长和副波长构成的两个波长，测定样品采用双波长可以消除对实验的影响。主波长是指测定某物质时，生成的产物颜色对光吸收的特有波长。副波长是指测定某物质时，为消除其他干扰物质在主波长造成测定干扰所设定的波长。 2反应杯空白：在特定波长下，光通过以蒸馏水或空气为反应体系所测得的吸光度值。 3试剂空白：在各特定波长下，光通过以蒸馏水或生理盐水为样品和相应测定项目
生化检测常识
目录 第一章生化检测基本常识 1.1标本的获得 (2) 第二章常规生化检测项目简介 2.1生化项目的临床意义 (2) 第三章生化仪参数测量原理 3.1自动生化仪的分类 (3) 3.2分立式生化仪结构 (5) 3.3生化检验的原理和方法 (6) 3.4生化分析仪测定方法的分类及应用度的计算 (9) 3.5.测定值计算方程 (10) 3.6 定标参数和浓度的计算 (17) 第四章几个重要概念 5．1试剂空白 (21) 5．2样本空白 (21) 5．3水空白 (21) 5．4样本 (21) 5．5质控物质 (21) 5．6底物控制 (21)
第一章生化检测基本常识 生化检测是医院检验科（或化验室）常用的检测手段，通常以人的血清为标本，通过测量血清中各生化成份的含量，为临床诊断提供依据。 1.1标本的获得 一般要求病人空腹时采静脉血（全血）。全血经过离心机离心，分层为血清和血细胞，正常情况下，上层颜色浅且透明（血清），下层颜色深且不透明（血细胞）。有的血清较为特殊，或分层不明显（融血），或血清不透明（脂血，呈牛奶状）。 第二章常规生化检测项目简介 2.1生化项目的临床意义 ◆丙氨酸氨基转移酶（ALT）：又称为谷丙转氨酶（GPT）是衡量肝功能的重要指标，许多低端医 疗机构在做体检时仅测此一项生化项目。正常人一般在40U/L以内。干粉试剂复溶后为单试剂，液体试剂一般为双试剂，应用动力学法可计算结果。 ◆蛋白：通常测白蛋白（ALB）和总蛋白（TP），终点法。一般用单试剂，有的TP试剂为双试剂， 可用两点终点法测。蛋白质是血清的主要成份，大部份由肝细胞合成。通过蛋白的测定可以协助某些疾病的诊断。 ◆血糖：血液中的葡萄糖简称血糖（GLU）。常用于糖尿病的诊断。正常人空腹血糖一般为3.9～ 6.1mmol/L。市场上单、双试剂的商品化试剂盒都有，可用终点法（单试剂）或两点终点法测量 （双试剂）。 ◆门冬氨酸氨基转移酶（AST）：又称为谷草转氨酶（GOT），主要用于心肌和肝胆疾病及骨骼肌病 的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在40U/L以内。同ALT一样，无论单、双试剂，用动力学法可计算结果。 ◆碱性磷酸酶（ALP）：主要用于肝胆疾病及骨骼病的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常 人一般在240U/L以内。用动力学法计算结果。 ◆γ-谷氨酰转移酶（GGT）：主要用于肝胆疾病诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般 在50U/L以内。用动力学法计算结果。 ◆胆红素（BiL）：胆红素的测定，能准确反映黄疸的程度，判断黄疸的类型。一般测量总胆红素（TBil） 和直接胆红素（DBil）。 ◆甘油三酯（TG）：其含量测定是血脂分析的重要内容之一。 ◆总胆固醇（CHOL）：是游离胆固醇和胆固醇酯的总称，其测定对高脂蛋白血症和冠心病的诊断 及发病机理的研究有一定意义。 ◆高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）：主要在肝脏中合成，是血清中颗粒数最多的脂蛋白。其含量是 冠心病诊断的重要依据之一。 ◆肌酐（CREA）：是肌酸代谢的最终产物，由肾脏排出。是肾功能的重要指标之一。 ◆尿素（Urea）：是蛋白质分解代谢的终产物。血尿素测定是肾功能的最敏感指标。 ◆载脂蛋白A1(APOA1):是高密度脂蛋白的主要组成成分，临床上主要用于脑血管病风险度的估 计。 ◆载脂蛋白B(APOB):是低密度脂蛋白的主要组成成分，临床上主要用于冠心病的风险度的估计。 ◆肌酸激酶（CK）：肌酸激酶通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中，是 一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。可用于早期诊断急性心肌梗，常见肌病(如进行性肌营养不良发作期、病毒性心肌炎、多发性肌炎、挤压综合征等严重肌肉损伤)及脑血管疾病的诊断。