第三版免疫学检验技术第章中级试题及答案
Prepared on 22 November 2020
第九章酶免疫技术
一、A1
1、下图所示的为哪一种ELISA技术的反应原理示意图（）。
A、双抗原夹心法
B、双位点一步法
C、间接法测抗体
D、竞争法
E、捕获法
2、钩状效应是指用ELISA一步法测定标本中待测抗原时，抗原浓度过（），实测值偏（）的现象，极易造成假阴性
A、低，高
B、高，高
C、高，低
D、低，低
E、高，不变
3、ELISA试验中最常用的标记酶是（）。
A、AST
B、HRP
C、ACP
D、LDH
E、ALT
4、酶增强免疫测定技术是最早取得实际应用的（）。
A、均相酶免疫测定
B、异相酶免疫测定
C、固相酶免疫测定
D、液相酶免疫测定
E、固相-液相酶免疫测定
5、利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体的方法，通常称为（）。
A、双抗体夹心法
B、双位点一步法
C、间接法
D、竞争法
E、捕获法
6、ELISA中最常用的固相载体是（）。A、聚氯乙烯B、聚苯
乙烯C、三聚氧胺
D、琼脂糖
E、尼龙膜
7、均相酶免疫测定不
具有的特点是（）。
A、常用于半抗原和小
分子的检测B、操作简
便，易于自动化C、不
易受样品中的内源性酶
的干扰D、酶与抗原结
合后仍保留酶和抗原的
活性E、灵敏度不及异
相酶免测定
8、酶增强免疫测定技
术（EMIT）是一种
（）。
A、非均相酶免疫测定
技术B、均相酶免疫测
定技术C、酶免疫组织
化学技术D、酶免疫测
定与电泳相结合的技术
E、电泳技术
9、ELISA板包被后，最
常用的封闭物质是
（）。
A、人白蛋白
B、人球
蛋白C、牛血清白蛋白
D、牛血清球蛋白
E、鼠白蛋白
10、可用免疫渗滤试验
和免疫层析试验检测的
项目没有（）。A、抗
HCV B、HIV C、HCG
D、HBsAg
E、HAV
11、制备抗体酶结合物
的方法通常采用（）。
A、戊二醛交联法
B、糖原染色法
C、免疫印迹法
D、酶耦联测定法
E、捕获竞争法
12、下列不属于ELISA
测定方法中所必需的试
剂（）。
A、固相的抗原或抗体
B、酶标记的抗原或抗
体
C、酶作用的底物
D、戊二醛交联剂
E、稀释的血清
13、斑点免疫层析试验
最常用的载体材料是
（）。A、乙酸纤维素
膜B、尼龙膜C、滤纸
D、硝酸纤维素膜
E、玻璃纤维膜
14、用ELISA抗体夹心
法检测抗原A时，固
相载体的包被物是
（）。
A、酶标记A抗体
B、未标记的抗A抗体
C、未标记抗原A
D、酶标抗球蛋白抗体
E、酶标记的A抗原
15、ELISA检测中“钩状
效应”（hookeffect）是
指（）。A、间接法检
测抗体时抗体过量B、
双抗体夹心一步法检测
抗原时抗原过量C、双
抗体夹心法检测抗原时
RF的干扰D、检测的
假阳性反应E、竞争法
检测抗体时特异性问题
16、ELISA试验以HRP
为标记酶时，常用的供
氧底物为（）。A、
OPD B、OT C、YMB
D、ABTS
E、PNP
17、艾滋病病毒检测的
确诊试验通常采用的检
测方法是（）。A、竞
争法B、免疫印迹法
C、化学发光法
D、斑
点-ELISA法E、斑点免
疫渗滤试验
二、B
1、A.免疫印迹法
（双抗体夹心法）
C.自身红细胞凝集试验
（间接法）
E.免疫组织化学技术
<1> 、测定HIV抗体确
诊HIV感染常用的方法
是（）。
A、B、C、D、E、
<2> 、对相应的抗原进
行定性、定位和定量测
定常用的方法是（）。
A、B、C、D、E、
<3> 、检测抗原最常用
的方法是（）。
A、B、C、D、E、
<4> 、可用于HIV抗
体、HBsAg的检测的方
法是（）。
A、B、C、D、E、
答案部分
一、A1 1、【正确答
案】 B
【答案解析】酶联免疫
吸附试验（ELISA）的
位点一步法是在双抗体
夹心法测定抗原时，如
应用针对抗原分子上两
个不同抗原决定簇的单
克隆抗体分别作为固相
抗体和酶标抗体，则可
如图中所示，在测定时
可使标本的加入和酶标
抗体的加入两步并作一
步。此法不但简化了操
作，缩短了反应时间，
如应用高亲和力的单克
隆抗体，测定的敏感性
和特异性也显着提高。
单克隆抗体的应用使测
定抗原的ELISA提高
到新水平。
2、【正确答案】 C
3、【正确答案】 B 【答案解析】在ELISA中，常用的酶为辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。应用AP
系统，其敏感性一般高于应用HRP系统，空白值也较低。但由于AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP 低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率较HRP低等原因，国内在ELISA中一般均采用HRP。
4、【正确答案】 A 【答案解析】均相酶免疫测定方法有酶增强免疫测定技术（EMIT）和克隆酶供体免疫分析方法。其中，酶增强免疫测定技术是最早取得实际应用的酶免疫测定方法。
5、【正确答案】 C 【答案解析】间接法是检测抗体最常用的方法，其原理是利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，只要更换不同的固相抗原，就可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体。
6、【正确答案】 B 【答案解析】酶免疫技术的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。最常用的固相载体物质是聚苯乙烯。
7、【正确答案】 C
【答案解析】均相酶免
疫测定是将半抗原或小
分子抗原如药物、激
素、毒品、兴奋剂等与
酶结合制成酶标记物，
酶与抗原（半抗原）结
合后仍保留酶和抗原
（半抗原）的活性。均
相酶免疫测定操作简
便、快速、适合于自动
化，应用广泛，不仅可
检测药物、激素、毒
品、兴奋剂等半抗原或
小分子抗原，也可测定
大分子蛋白质、病毒及
细胞性抗原成分。
最大缺点是易受样品中
非特异的内源性酶、酶
抑制药及交叉反应物的
干扰，而且由于采用竞
争性结合分析原理，灵
敏度不及异相酶免测
定。
8、【正确答案】 B
【答案解析】酶增强免
疫测定技术（EMIT）
是均相酶免疫测定技
术。EMIT的基本原
理：半抗原与酶结合成
酶标半抗原，保留半抗
原和酶的活性，当酶标
半抗原与抗体结合后，
所标的酶与抗体密切接
触，使酶的活性中心受
到影响而活性被抑制，
反应后酶活力大小与标
本中的半抗原量呈一定
的比例，从酶活力的测
定结果可推算出标本中
半抗原的量。
9、【正确答案】 C
【答案解析】将抗原或
抗体固相化的过程称为
包被。由于载体的不
同，包被的方法也不
同。如以聚苯乙烯
ELISA板为载体，通常
将抗原或抗体溶于缓冲
液（最常用的为的碳酸
缓冲液）中，加于
ELISA板孔中在4℃过
夜，经清洗后即可应
用。如果包被液中的蛋
白质浓度过低，固相载
体表面有能被此蛋白质
完全覆盖，其后加入的
血清标本和酶结合物中
的蛋白质也会部分地吸
附于固相载体表面，最
后产生非特异性显色而
导致本底偏高。在这种
情况下，如在包被后再
用1%～5%牛血清白
蛋白包被一次，可以消
除这种干扰。这一过程
称为封闭。包被好的
ELISA板在低温可放置
一段时间而不失去其免
疫活性。
10、【正确答案】 E
【答案解析】免疫渗滤
试验和免疫层析试验具
有简便、快速、单份测
定、可立等结果等优
点，无需任何仪器设
备，试剂稳定，因此多
用于急诊检验。这类试
验不能准确定量，所以
主要限于检测正常体液
中不存在的物质以及正
常含量极低而在特殊情
况下异常升高的物质。
目前临床检验中已开展
的项目有HCG、抗
HCV和抗HIV、
HBsAg等，新项目正
在不断发展中。
11、【正确答案】 A
【答案解析】制备抗体
酶结合物的方法通常有
戊二醛交联法、过碘酸
盐氧化法和标记抗体鉴
定法。
12、【正确答案】 D
【答案解析】 ELISA
是在固相载体上包被抗
原或抗体后，通过抗原
抗体反应使酶标抗体
（或酶标抗原）结合到
载体上，经洗涤使结合
的酶标抗体和游离的酶
标抗体分离，洗去游离
的酶标抗体（或酶标抗
原）。在这种测定方法
中有3种必要的试剂：
①固相的抗原或抗体。
②酶标记的抗原或抗
体。③酶作用的底物。
间接法和捕获法还使用
稀释的血清标本做试
剂。戊二醛是一种双功
能团试剂，可以使酶与
蛋白质或其他抗原的氨
基通过它而耦联。与
ELISA的方法相反。
13、【正确答案】 D
【答案解析】斑点免疫
层析试验以硝酸纤维素
为载体，利用微孔滤膜
的毛细管作用，滴加在
膜条一端的液体慢慢向
另一端渗移，犹如层析
一般。
14、【正确答案】 B
【答案解析】 ELISA
抗体夹心法检测抗原A
时，固相载体的包被物
是未标记的抗A抗
体。
15、【正确答案】 B
【答案解析】在双位点一步法测定中，应注意钩状效应，类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。16、【正确答案】 A 【答案解析】许多化合物可作为HRP的供氧体，在ELISA中常用的供氢体底物为邻苯二胺（OPD）、四甲基联苯胺（FMB）和ABTS。OPD为在ELISA中应用最多的底物，灵敏度高，比色方便。
17、【正确答案】 B 【答案解析】在艾滋病病毒感染中免疫印迹法作为确诊试验。
二、B 1、<1>、
【正确答案】 A
【答案解析】免疫印迹法在艾滋病病毒感染中作为确诊试验。
<2>、【正确答案】 E 【答案解析】免疫组织化学技术是指酶标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应的抗原进行定性、定位和定量测定的一项技术。
<3>、【正确答案】 B
<4>、【正确答案】 C 【答案解析】自身红细
胞凝集试验可用于HIV
抗体、HBsAg的检
测，灵敏度与间接血凝
试验相仿。
第十章化学发光免疫分
析技术
一、A1
1、电化学发光法的检
测范围很广，其检测灵
敏度可达A、g/L B、
mg/dl
C、pg/ml
D、ng/dl
E、mg/L
2、电化学发光免疫分
析临床应用广泛，在日
常工作中一般不用于检
测
A、肿瘤标记物
B、甲
状腺素C、病毒标记物
D、血药浓度
E、免疫球蛋白
3、发光物吖啶酯标记
的化学发光反应体系应
在何种环境中进行A、
酸性B、碱性C、中性
D、酸性或中性
E、碱性或中性
4、具备化学发光免疫
分析的最重要的条件是
A、反应过程中必须保
证信号接收的灵敏度
B、反应过程中必须保
证产生足够的先量子
C、反应过程中必须保
证有发光物质对光的吸
收D、反应过程中必须
保证产生足够的激发能
E、反应过程中必须保
证有发光物质对光的发
射
5、影响发光剂标记的
因素有A、被标记蛋白
的性质B、原料比C、
标记率D、温度E、以
上都是
6、下列关于化学发光
效率说法错误的是
A、又称化学发光反应
量子产率
B、发光效率决定于生
成激发态产物分子的化
学激发效率
C、发光效率决定于激
发态分子发射效率
D、发光效率、光辐射
的能量大小以及光谱范
围，完全有发光物质的
性质决定
E、所有的发光反应都
具有相同的化学发光效
率
7、化学发光免疫测定
的荧光剂不包括A、鲁
米诺B、吖啶酯C、碱
性磷酸酶D、异鲁米诺
E、三联吡啶钌
8、有关化学发光错误
的说法是A、化学发光
是指伴随着化学反应过
程所产生的光的发射现
象
B、化学发光与荧光形
成激发态分子的激发能
相同C、化学发光是吸
收了化学能使分子激发
而发射的光
D、大多数化学发光反
应为氧化还原反应
E、化学发光必须提供
足够的化学能
答案部分
一、A1 1、【正确答
案】 C
【答案解析】酶联免疫
分析技术、生物素-亲
和素技术、化学发光分
析技术、荧光偏振免疫
测定技术、时间分辨荧
光免疫测定技术、电化
学发光技术等，使免疫
检验手段更先进、方法
更可靠、测定更快速、
结果更准确、灵敏度达
到纳克（ng）甚至皮
克（pg）水平，可与
放射免疫分析技术相媲
美。
2、【正确答案】 E
【答案解析】除E选
项，其余选项均常用电
化学发光免疫分析法检
测。
3、【正确答案】 B
【答案解析】吖啶酯在
碱性条件下被H2O2
氧化时，方能发生波长
为470nm的光。
4、【正确答案】 D
【答案解析】化学发光
的首要条件是吸收了化
学能而处于激发态的分
子或原子必须释放出光
子或将能量转移到另一
个物质的分子上并使这
种分子发光，故必须产
生足够的激发能是重要
条件。
5、【正确答案】 E
【答案解析】影响发光
剂标记的因素有被标记
蛋白的性质、原料比、
标记率、温度。
6、【正确答案】 E
【答案解析】每一个发
光反应都有其特征性的
化学发光光谱和不同的
化学发光效率。
7、【正确答案】 C
【答案解析】除选项C 外，其余均可作为化学发光免疫测定的发光剂。
8、【正确答案】 B 【答案解析】化学发光是吸收了化学能使分子激发而发射的光，而荧光是吸收了光能使分子激发而发射的光。
第十一章生物素-亲和素免疫放大技术
一、A1
1、不属于生物素－亲和素系统的基本类型的是（）。A、BAB B、ABC
C、LAB
D、ELISA
E、BAS
2、关于生物素标记蛋白质的注意事项，下列说法错误的是（）。
A、根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质，选择相应的活化生物素和反应条件
B、活化生物素与待标记抗原或抗体可以为任意比例
C、在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构可减少空间位阻影响
D、生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后，不影响后者的免疫活性
E、生物素标记酶时会影响其免疫活性
答案部分
一、A1 1、【正确答案】 D
2、【正确答案】 B 【答案解析】生物素标
记蛋白质的注意事项包
括：①应根据抗原或抗
体分子结构中所带可标
记基团的种类以及分子
的理化性质，选择相应
的活化生物素和反应条
件。②标记反应时，活
化生物素与待标记抗原
或抗体应有适当的比
例。③为减少空间位阻
影响，可在生物素与被
标记物之间加入交联臂
样结构。④生物素与抗
原、抗体等蛋白质结合
后，不影响后者的免疫
活性；标记酶时则结果
有不同。
第十二章固相膜免疫测
定
一、A1
1、在使用胶体金斑点
金免疫渗滤试验检测样
本时，发现胶体金检测
质控正常，检测结果为
阴性，而ELISA检测
为阳性，可能的原因是
（）。
A、样本中待检物含量
低，胶体金方法灵敏度
不够B、ELISA试剂的
非特异反应
C、胶体金试剂不稳定
D、胶体金方法比
ELISA特异性好
E、ELISA试剂灵敏度
过高
2、下列有关胶体金特
性的叙述中，错误的是
（）。
A、胶体金颗粒稳定、
均匀地分散悬浮在液体
中B、电解质可使胶体
金沉淀
C、较大颗粒的胶体金
是橙黄色的
D、蛋白质有保护胶体
金稳定性的作用
E、胶体金颗粒越小，
其吸收波长越短
3、当前免疫电镜技术
中应用最广的标记物是
A、辣根过氧化物酶
B、硝酸银
C、胶体金
D、铁蛋白
E、SPA
答案部分
一、A1 1、【正确答
案】 A
【答案解析】在使用胶
体金斑点金免疫渗滤试
验检测样本时，由于样
本中待检物含量低，胶
体金方法灵敏度不够等
原因，胶体金检测质控
正常，检测结果为阴
性，而ELISA检测为
阳性。
2、【正确答案】 C
【答案解析】胶体金的
呈色性为：较大颗粒的
胶体金呈紫红色；中等
大小的胶体金是酒红
色；最小的胶金是橙黄
色。故C选项说法错
误。
3、【正确答案】 C
【答案解析】胶体金标
记免疫电镜技术是利用
胶体金在碱性环境中带
有负电的性质，使其与
抗体相吸附，从而将抗
体标记。
第十三章免疫组织化学
技术
一、A1
1、下列有关直接法荧
光抗体试验的叙述中，
不正确的是A、简单易
行，特异性好B、敏感
性较间接法差C、可对
抗原或抗体进行检测
D、检测一种抗原需要
制备一种荧光抗体
E、只能检测抗原
2、用直接免疫荧光法
检测T细胞上CD4抗
原，荧光素应标记在
（）。
A、CD4抗原上
B、CD4单克隆抗体上
C、固相载体上
D、抗人Ig抗体上
E、某种动物红细胞上
3、最先被用作标记免
疫技术的标记物是
（）。
A、荧光素
B、放射性
核素C、酶D、激素
E、生物素-亲和素
4、下列不符合荧光免
疫技术直接法的描述是
（）。A、荧光抗体直
接加于标本上B、常用
于抗核抗体的检测
C、每检查一种抗原需
制备特异的荧光抗体
D、灵敏度偏低
E、特异性高，非特异
荧光染色因素少
5、为了保证免疫荧光
细胞化学染色的准确
性，排除某些非特异性
染色，必须在初次实验
时进行对照试验。下列
选项中不必要的是
（）。
A、自身对照
B、吸收
试验C、阴性对照D、
阳性对照E、补体对照
6、关于免疫组织化学技术的应用，下列说法错误的是（）。
A、对于细胞抗原性物质能准确、敏感地进行检测和定位
B、在细胞学中主要用于菌种鉴定和抗原结构的研究
C、检测人体大多数寄生虫，且具有特异性高和敏感性好等优点
D、确定肿瘤的组织学发生，进行肿瘤的转移性和特异性的鉴别
E、应用免疫荧光抗体直接法可以检出自身免疫疾病患者血中的自身抗体
答案部分
一、A1 1、【正确答案】 C
2、【正确答案】 B 【答案解析】直接免疫荧光法是用单克隆抗体检测T细胞表面抗原的方法。用已知特异性抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应抗原结合，在荧光显微镜下，即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。
3、【正确答案】 A 【答案解析】直接免疫荧光法是用单克隆抗体检测T细胞表面抗原的方法。用已知特异性抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应抗原结合，在荧光显微镜下，即可见抗原存在
部位呈现特异性荧光。
4、【正确答案】 B
【答案解析】荧光免疫
技术直接法检查抗原
时，是用已知特异性抗
体与荧光素结合，制成
荧光特异性抗体，直接
与细胞或组织中相应抗
原结合，在荧光显微镜
下即可见抗原存在部位
呈现特异性荧光。一种
荧光抗体只能检查一种
抗原，敏感性较差。
5、【正确答案】 E
【答案解析】为保证免
疫荧光组织化学染色的
准确性，排除某些非特
异性染色，在实验中通
常针对第一抗体设立对
照，包括阳性对照、阴
性对照、替代对照、自
身对照和吸收试验等。
6、【正确答案】 E
第十四章免疫细胞的分
离及其表面标志检测技
术
一、A1
1、B细胞经抗免疫球
蛋白荧光抗体染色后，
其表面呈现的荧光随时
间的变化规律是（）。
A、环状-帽状-斑点状-
消失B、环状-斑点状-
帽状-消失C、斑点状-
环状-帽状-消失D、帽
状-斑点状-环状-消失
E、斑点状-帽状-环状-
消失
2、用Ficoll分离人外
周血淋巴细胞时离心
后，细胞分布情况正确
的是A、单个核细胞沉
于管底，红细胞悬浮于
血浆层中，血小板分布
于界面B、血小板沉于
管底，红细胞悬浮于血
浆层中，单个核细胞分
布于界面 C、单个核细
胞沉于管底，血小板悬
浮于血浆层中，红细胞
分布于界面D、红细胞
沉于管底，血小板悬浮
于血浆层中，单个核细
胞分布于界面E、血小
板沉于管底，单个核细
胞悬浮于血浆层中，红
细胞分布于界面
3、下述有关淋巴细胞
冷冻保存的叙述中，哪
条是错误的（）。
A、液氮内可长期保存
B、深低温环境可中断
细胞的代谢
C、应迅速解冻
D、可采用两步降温法
E、不需加冷冻保护剂
4、染色体检查时常用
的有丝分裂原是A、
ConA B、PHA C、美
洲商陆A D、秋水仙素
E、秋水仙胺
5、分离人外周血淋巴
细胞的分层液的比重为
（）。A、 B、
C、 D、 E、
6、分离纯化淋巴细胞
亚群的基本原理是A、
相应细胞体积不同特点
B、相应细胞具有不同
的表面标志C、形态不
同特点D、相应细胞贴
壁生长特点E、相应细
胞具有吞噬性的特点
7、关于NK细胞错误
的是A、来源于骨髓
B、CD16、CD56是其
特有标志C、表达
TCR-CD3复合物
D、大多数为CD4-
CD8-
E、识别CD1分子提
呈的脂类或糖类抗原
8、以下受体中，哪一
项是B细胞所特有的
（）。
A、Fc受体
B、补体受
体C、SmIg
D、EB病毒受体
E、小鼠红细胞受体
9、胸腺细胞发生阴性
选择时发生在A、双阳
性期B、双阴性期C、
单阳性期D、前T细胞
期
E、祖T细胞期
10、长期保存细胞的
温度为A、-196oF B、
-85oF C、-196℃D、-
85℃E、20℃
11、溶血空斑形成试
验中，每一个空斑表示
（）。
A、一种抗体
B、一种
抗体形成细胞C、一种
细胞D、一个细胞
E、一个抗体形成细胞
12、不属于人B淋巴
细胞膜上的表面标志有
（）。
A、膜表面免疫球蛋白
分子（smIg）B、Fc
受体C、补体受体D、
丝裂受体E、SRBC受
体
13、T、B细胞表面共
有的标志是（）。
A、CD3
B、PWM-R
C、绵羊红细胞受体
D、补体受体
E、CD80分子
14、可判断出淋巴细胞对有关刺激的反应性与功能状态的试验是（）。
A、噬菌体裂解实验
B、溶血试验
C、空斑形成试验
D、T淋巴细胞转化试验
E、T细胞表面标志检测
15、T细胞阳性选择的主要目的是（）。
A、选择出对自身抗原不发生免疫应答的细胞克隆
B、选择掉对自身抗原发生免疫应答的细胞克隆
C、实现自身免疫耐受
D、实现对自身MHC 分子的限制性
E、实现TCR功能性成熟
答案部分
一、A1 1、【正确答案】 B
【答案解析】 B细胞经荧光标记的抗Ig抗体染色，细胞膜表面呈现的荧光着色可有不同的形式，开始均匀分布呈环状，其后集中在某些部位呈斑点状，然后又可集在一个部位呈帽状，最后可被吞饮入胞浆直至荧光消失。
2、【正确答案】 D 【答案解析】 Ficoll分层液法主要用于分离外周血中单个核细胞，是一种单次密度梯度离心分离法，其分布从上到
下依次为稀释的血浆
层，单个核细胞层，粒
细胞层和红细胞层。
3、【正确答案】 E
【答案解析】淋巴细胞
长期保存可采用液氮深
低温（-196℃）环境保
存细胞，加入二甲亚砜
作为保护剂。
4、【正确答案】 B
【答案解析】非抗原性
刺激物：如植物血凝素
（PHA）、刀豆素A
（ConA）、美洲商陆
（PWM）、脂多糖
（LPS），通称促有丝
分裂原。其中染色体检
查时常用PHA。
5、【正确答案】 C
【答案解析】外周血中
单个核细胞（淋巴细胞
和单核细胞）的比重与
红细胞、多核细胞、血
小板不同，介于～之
间，红细胞和粒细胞在
左右，血小板在～之
间，因而利用比重介
于～之间，近于等渗的
溶液做密度梯度离心，
使一定比重的细胞按相
应密度分布而加以分
离。
6、【正确答案】 B
【答案解析】根据相应
细胞的特性和不同的标
志加以选择性纯化。根
据细胞的特性和标志选
择纯化所需细胞的方法
是阳性选择法，而选择
性去除不要的细胞，仅
留下所需的细胞为阴性
选择。
7、【正确答案】 B
【答案解析】 NK细胞
表面至少存在CD2、
CD11b、CD11c、
CD16、CD56和
CD69等多种抗原，但
均非NK细胞所特有，
因此极少以CD系列抗
原为指标鉴定和计数
NK细胞。
8、【正确答案】C
【答案解析】 SmIg是
B细胞特有的受体。
9、【正确答案】 A
【答案解析】在体内抗
CD3的阴性选择模型
中，胸腺细胞发生阴性
选择时处于发育阶段的
早期双阳性期；而在内
源性超抗原的阴性选择
模型中.则发生于双阳
性向单阳性发育的过程
之中。
10、【正确答案】 C
【答案解析】长期保存
细胞的技术要求：液氮
深低温（-196℃）环
境，加入二甲亚砜为保
护剂。
11、【正确答案】 E
【答案解析】溶血空斑
试验可用于检测实验动
物抗体形成细胞的功
能，其原理是将绵羊红
细胞（SRBC）免疫小
鼠，4天后取出脾细
胞，加入SRBC及补
体，混合在温热的琼脂
溶液中，浇在平皿内或
玻片上，使成一薄层，
置37℃温育。因脾细
胞内的抗体生成细胞可
释放抗SRBC抗体，
使其周围的SRBC致
敏，在补体的参与下导
致SRBC溶血，形成
一个肉眼可见的圆形透
明溶血区而成为溶血空
斑。每一个空斑表示一
个抗体形成细胞，空斑
大小表示抗体生成细胞
产生抗体的多少。
12、【正确答案】 E
【答案解析】表面免疫
球蛋白是B细胞最具
特征性的表面标志。
Fc受体、补体受体、
丝裂受体都是B细胞
的表面标志。另外，B
细胞表面还有多种细胞
因子（如IL-1，IL-2，
IL-4，和IFNγ等）的
受体，与不同细胞因子
的结合可使B细胞产
生相应的生物活性。
13、【正确答案】 B
【答案解析】 T、B细
胞表面共有的标志是
PWM-R。PWM可刺
激T和B类细胞。
14、【正确答案】 D
【答案解析】 T细胞
增殖试验又称T细胞
转化试验。T细胞在体
外经某种物质刺激，细
胞代谢和形态相继发生
变化，在24～48h内
细胞内蛋白质和核酸的
合成增加，产生一系列
增殖的变化，如细胞变
大、细胞浆扩大、出现
空泡、核仁明显、核染
色质疏松等，由淋巴细
胞转变为淋巴母细胞。
因此，这种淋巴细胞增
殖又称为淋巴细胞转
化。据此可判断出淋巴
细胞对有关刺激的反应
性与功能状态。
15、【正确答案】 D 【答案解析】 T细胞阳性选择的主要目的是实现对自身MHC分子的限制性。MHC限制性是指免疫细胞间相互作用时，T淋巴细胞识别自身的MHC分子。
目录： 一：服务质量记录 1、患者满意度调查表编号：1-1（科） 2、临床医护人员满意度调查表编号：1-2（科） 3、临床沟通反馈记录编号：1-3（科） 4、与医护人员定期会议记录表编号：1-4（科） 5、服务对象投诉记录编号：1-5（科） 6、咨询记录表编号：1-6（科） 二：人员培训 7、会议、培训签到表编号：2-7（科） 8、新进人员考核记录编号：2-8（科） 9、生物安全培训记录表编号：2-9（科） 10、员工基本信息表编号：2-10（科） 11、员工继续教育记录编号：2-11（科） 12、员工外出参会或进修记录编号：2-12（科） 13、员工岗位能力评估报告编号：2-13（科） 14、科研成果及学术论文发表记录编号：2-14（科） 三：质量控制 15、检验项目定标记录表编号：3-15（通用） 16、实验室间或实验室内部比对试验结果及分析报告编号：3-16（通用） 17、室间质评标本收到和分发记录编号：3-17（通用） 18、室间质评原始记录及上报记录编号：3-18（通用） 19、室间质评总结报告编号：3-19（通用） 20、室内质控记录编号3-20（通用） 21、室内质控失控（警告）处理记录编号：3-21（通用） 22、20 年月室内质控月总结编号：3-22（通用） 四：生物安全 23、标准菌株保存和使用记录编号：4-23（细菌） 24、菌、毒株的使用记录编号：4-24（细菌） 25、室消毒焚烧记录编号：4-25（通用） 26、试管破损或血样溢出时处理记录表编号4-26（通用） 27、复查标本记录编号：4-27（通用） 28、检测结果危急值报告登记表编号：4-28（通用） 29、不合格标本记录表编号：4-29（通用）
一、名词解释第1章概论 1.免疫学： 2.免疫分子： 3.补体： 4.临床免疫学： 第2章抗原抗体反应 5.抗原抗体反应： 6.抗原抗体反应特异性 7.可逆性 8.比例性 9.抗原抗体反应的等价带（zoneofequivalence） 10.最适比（optimalratio） 带现象（11.zonephenomenon） 第3章免疫原和抗血清的制备 12.免疫原(immunogen) 半抗原 13.免疫佐剂14. 多克隆抗体15.(polyclonal antibody, pcAb) 凝集反应章5第 16.凝集反应 直接凝集反应 17.间接凝集反应18. 明胶凝集试验19.
第6章沉淀反应 20.沉淀反应 絮状沉淀试验 21. 免疫浊度测定 22.凝胶内沉淀试验23. 单项扩散试验24. 双向扩散试验 25. 免疫电泳技术26. 对流免疫电泳 27. 火箭免疫电泳28. 免疫电泳29. 免疫固定电泳30.第19章补体检测及应用31.补体 免疫溶血法32. 33.补体结合试验 第22章感染性疾病与感染免疫检测 34.感染 第23章超敏反应性疾病及其免疫检测35.超敏反应 Ⅰ型超敏反应 36. Ⅱ型超敏反应 37.Ⅲ型超敏反应38. Ⅳ型超敏反应 39. 第24章自身免疫性疾病及其免疫检测
40.自身耐受 自身免疫 41. 自身免疫病42. 自身抗体43. 抗核抗体44. 第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测 45.免疫增殖性疾病 免疫球蛋白增殖病46. 47.本周蛋白 血清区带电泳 48.免疫电泳49. 免疫固定电泳 50.第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验51.免疫缺陷病 获得性免疫缺陷综合征 52. 第27章肿瘤免疫与免疫学检验 53.肿瘤免疫学 肿瘤抗原 54.肿瘤标志物55. 第28章移植免疫及其免疫检测 56.移植 主要组织相容性复合体 57.移植排斥反应58. 移植物抗宿主反应59.(GVHR) 血清学分型法60. 二、填空题。．
章免疫学检验试题 一、选择题 1. SPA能特异性与下述哪种lg的Fc段结合? ( ) A. lgG B. lgA C. lgM D. lgD 2. 在人类血清的lg中，K链和入链之比为？( ) A. 1:1 B. 1:2 C. 1:3 D. 2:1 3. 56C 30分钟可使下列哪种I g丧失生物学 活性？( ) A. IgG B. IgA C. IgM D. IgE 4. 胎血中出现抗风疹病毒的何种lg，则表示子宫内感染？( ) A. lgG B. lgA C. lgM D. lgD 5. 补体系统的激活必须有下列哪种成分参与？( ) A. C2 B. B 因子 C. C1q D. C3 6. 补体不具备的作用是？( ) A. 中和作用 B. 促进中和及溶解病毒 C. 调理作用 D. 溶菌作用 7. 补体含量增高见于下列哪种疾病？( ) A. 肿瘤 B. 系统性红斑狼疮 C. 血清病 D. 肾小球肾炎 8. 关于旁路途径正确的叙述是：( ) A. 需要抗原抗体的识别和反应 B. 膜攻击单位与经典途径相同 C. 首先被活化的补体成分是C5 D. 需要经典途径的识别单位和活化单位的参与 9. 能引起恶液质的细胞因子是：( ) A. TNF- a B. TGF- 3 C. lFN-a D. lL-2 10. 下列英文缩写的中文含义错误的是：( ) A. lL ——白细胞介素 B. EPO ――血小板生成素 C. SCF ――干细胞生长因子 D. TNF ――肿瘤坏死因子 11. 关于MHC I类分子，下列哪项是正确的？( ) A. 存在于一切有核细胞上 B. 只存在于白细胞上 C. 只存在于淋巴细胞上 D. 只存在于巨噬细胞上 12. 下列哪种疾病与HLA-B27 抗原相关性显著：( ) A. 系统性红斑狼疮 B. 类风湿性关节炎 C. 重症肌无力 D. 强直性脊柱炎 13. 无血缘关系的同种器官移植中，急性排斥 反应难以避免的主要原因是：( ) A. HLA 系统的高度多态性 B. 受者的免疫功能常处于紊乱状态 C. 移植物供血不良 D. 受者体内已存在对移植物致敏的淋巴细胞 14. 粘附分子包括下列哪项？( ) A. 粘合素家族 B. 免疫球蛋白家族 C. 选择素家族 D. 以上全都是 15. 绵羊红细胞受体又称为：( ) A. CD2 B. CD3 C. CD4 D. CD8 16. 关于免疫细胞错误的叙述是：( ) A. B 淋巴细胞分化为浆细胞 B. NK 细胞引起ADCC 效应 c?单核吞噬细胞具有抗原递呈功能
《免疫学与免疫学检验》课程教学大纲 一、课程的性质和任务 《免疫学与免疫学检验》课程是高等职业院校医学检验技术专业的专业核心主 干课程是从事医学实验室工作专业技术人员的一门必修的专业课程。随着免疫学和 免疫学技术的发展免疫学检验技术成为医学检验中的一个重要组成部分。免疫学检 验技术以其特异性强、灵敏度高、结果稳定、方便快捷和成本低廉的特点应用范围 廷伸至医学检验专业的各个领域尤其是床旁检验POCT产品的应用当中发展成为一 种微量化学定性或定量分析方法。对疾病的病因、发病机制、诊断、治疗和特异性 预防起着重要的作用。 二、课程教学目标 1. 使学生掌握抗原、免疫球蛋白、抗原和抗体反应、补体和免疫应答等免疫学 基础知识和理论，熟悉免疫系统和免疫分子概念和知识。 2. 使学生能够熟悉免疫学检验的基本原理和设计方法，使学生掌握抗体制备技术、免疫比浊分析、酶免疫分析术和荧光免疫技术等基本检验方法。 3. 使学生掌握免疫学常规仪器的操作和维护，使学生熟悉免疫学实验室的一般 管理方法。 三、教学内容与要求 第一章绪论 【教学目的】通过本章学习，了解免疫学的主要成就及与医学的关系，理解免疫学研究的基本内容，掌握免疫学的基本概念 【教学重点与难点】本章重点是免疫学基本概念，难点是免疫系统。
【教学内容】 第一节免疫学和免疫学检验概况 一、免疫应答的类型和特征 二、免疫学发展简史 三、免疫学检验 第二节免疫系统 一、免疫器官 1、中枢免疫器官 2、外周免疫器官 二、免疫细胞 1、淋巴细胞 2、免疫辅佐细胞 三、免疫分子 【教学建议】课堂讲授 第二章免疫化学 【教学目的】通过本章学习，了解补体激活的三条途径，理解抗原抗体反应的基本原理、特点和影响因素，掌握抗原的基本性质、免疫球蛋白的结构和功能【教学重点与难点】本章重点是掌握抗原的基本性质、免疫球蛋白的结构和功能，难点是抗原抗体反应的基本原理、特点和影响因素。 【教学内容】 第一节抗原 一、抗原的性质 1、异物性 2、理化特性 3、其他因素 二、抗原的特异性 1、抗原决定簇 2、共同抗原和交叉反应
免疫学检验试题（一） 1. 免疫监视功能低下时易发生（）。 A．自身免疫病 B．超敏反应 C．肿瘤 D．免疫缺陷病 E．移植排斥反应 答案C 解析免疫系统的功能之一是对自身偶尔产生的有癌变倾向的细胞进行清除，此即免疫监视功能，免疫监视功能低下时易发生肿瘤。2. 免疫自稳功能异常可发生（）。 A．病毒持续感染 B．肿瘤 C．超敏反应 D．自身免疫病 E．免疫缺陷病 答案D 解析免疫系统的功能之一是对自身衰老的组织细胞进行清除，此即免疫自稳功能，免疫自稳功能异常可发生自身免疫病。 3. 既具有抗原加工提呈作用又具有杀菌作用的细胞是（）。A．树突状细胞 B．巨噬细胞
C．中性粒细胞 D． B细胞 E． T细胞 答案B 解析树突状细胞、巨噬细胞和B细胞都有抗原加工提呈作用，但只有巨噬细胞兼有吞噬杀菌作用。 4. 免疫应答过程不包括（）。 A． T细胞在胸腺内分化成熟 B． B细胞对抗原的特异性识别 C．巨噬细胞对抗原的处理和提呈 D． T细胞和B细胞的活化、增殖和分化 E．效应细胞和效应分子的产生和作用 答案A 解析免疫应答过程指免疫系统针对抗原的反应过程，不包括免疫细胞的发育过程。 5. 关于外周免疫器官的叙述，不正确的是（）。 A．包括淋巴结、脾和黏膜相关淋巴组织 B．发生发育的时间晚于中枢免疫器官 C．是免疫应答发生的场所 D．是免疫细胞发生和成熟的场所 E．是所有淋巴细胞定居的场所 答案D
解析免疫细胞发生和成熟的场所在中枢免疫器官，故D项不正确。 5. 在正常血清中，含量最高的补体成分是（）。 A． C1 B． C3 C． C4 D． C5 E． C4Bp 答案B 解析在正常血清中含量最高的补体成分是C3。 7. 细胞因子不包括（）。 A．单核因子 B．淋巴因子 C．生长因子 D．抗体 E．集落刺激因子 答案D 解析细胞因子是生物活性的小分子多肽，抗体不是。 8. 体内抗病毒、抗毒素、抗细菌最重要的抗体为（）。 A． IgM B． IgA C． IgG D． IgE
抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。 抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强，它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。 亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合强度，取决于两者空间结构的互补程度。 亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。 抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。 带现象（zone phenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中，由于抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应现象。抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。 免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。免疫佐剂（immuno adjustvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。 半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性)，而单独不能诱导抗体产生（无免疫原性）的物质。当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。 载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。 载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半抗原的免疫应答，该现象称为~。 单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。 多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白，即~ 基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。 凝集反应（agglutination reaction）：是指细菌和红细胞或红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。 ①直接~：在适当电解质参与下，细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体结合后出现肉眼可见的凝集现象，称为~。 ②间接~：可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体（如正常人O型红细胞、细菌、胶乳颗粒等）的表面，然后与相应抗体（抗原）作用，在适宜的电解质存在条件下出现特异性凝集现象，称为~。其敏感度高于直接凝集反应和沉淀反应。 正向间接凝集反应：用可溶性抗原致敏载体以检测标本中的待检抗体。 反向间接凝集反应：用特异性抗体致敏载体以检测标本中的待检抗原。 间接凝集抑制反应：用抗原致敏的载体颗粒及相应的抗体作为诊断试剂，检测标本中是否存
名词解释第1 章概论 1. 免疫学： 2. 免疫分子： 3.补体： 4.临床免疫学：第2 章抗原抗体反应 5.抗原抗体反应： 6.抗原抗体反应特异性 7.可逆性 8.比例性 9. 抗原抗体反应的等价带( zoneofequivalence ) 10.最适比( optimalratio ) 11.带现象( zonephenomenon) 第3 章免疫原和抗血清的制备 12.免疫原(immunogen) 13.半抗原 14.免疫佐剂 15.多克隆抗体(polyclonal antibody, pcAb) 第5 章凝集反应 16.凝集反应 17. 直接凝集反应 18. 间接凝集反应 19. 明胶凝集试验第6 章沉淀反应 20.沉淀反应 21. 絮状沉淀试验 22. 免疫浊度测定 23. 凝胶内沉淀试验
24. 单项扩散试验 25. 双向扩散试验 26. 免疫电泳技术 27. 对流免疫电泳 28. 火箭免疫电泳 29.免疫电泳 30. 免疫固定电泳第19 章补体检测及应用 31. 补体 32. 免疫溶血法 33. 补体结合试验第22 章感染性疾病与感染免疫检测 34. 感染 第23 章超敏反应性疾病及其免疫检测 35.超敏反应 36.I型超敏反应 37.U型超敏反应 38.川型超敏反应 39.W型超敏反应 第24 章自身免疫性疾病及其免疫检测 40.自身耐受 41.自身免疫 42. 自身免疫病 43.自身抗体 44.抗核抗体 第25 章免疫增殖性疾病及其免疫检测 45. 免疫增殖性疾病 46. 免疫球蛋白增殖病 47. 本周蛋白
48. 血清区带电泳 49. 免疫电泳 50. 免疫固定电泳第26 章免疫缺陷性疾病及其免疫检验 51. 免疫缺陷病 52. 获得性免疫缺陷综合征第27 章肿瘤免疫与免疫学检验 53. 肿瘤免疫学 54. 肿瘤抗原 55. 肿瘤标志物第28 章移植免疫及其免疫检测 56. 移植 57. 主要组织相容性复合体 58. 移植排斥反应 59. 移植物抗宿主反应(GVHR) 60. 血清学分型法 、填空题。 第1 章概论 1.推动现代生命科学前进的三架战车：分子生物学、免疫学、细胞生物学 2.免疫学的发展历史可分为三个时期：经验时期、免疫学科形成时期、现 代免疫学时期 3.为保持机体内环境稳定，免疫系统的三大生理功能分别是：免疫防御、免疫 自稳、免疫监视。 4.免疫应答的过程主要分为：识别阶段、活化阶段、效应阶段 5.免疫系统的组成包括三部分，分别是：免疫器官、免疫细胞、免疫分子。 6.补体的三条激活途径分别是：经典途径、甘露糖结合凝集素途径、旁路途 径。 第2 章抗原抗体反应 7.在抗原抗体反应中，主要的结合力有：静电引力、范德华力、氢键、疏水作
临床医学检验技术（中级)-临床免疫学和免疫学检验 (B1型题) 1、既具有抗原吞噬能力又有抗原提呈能力的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 2、既不表达HLA-Ⅰ类抗原又不表达HLA-Ⅱ类抗原的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 3、应用CDC方法检测HLA-DR抗原所使用的待测细胞为 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞
E.单核细胞 4、PHA刺激法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 5、免疫比浊法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 6、流式细胞仪可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验
7、细胞毒试验可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 8、测定抗体生成细胞数 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 9、测定T细胞数量 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验
10、测定NK细胞的杀伤活性 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 11、测定非特异性细胞免疫功能 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 12、白血病儿童从骨髓库中得到别人捐献的骨髓，属 A.自体移植 B.同种移植 C.异种移植 D.同系移植 E.胚胎组织移植 13、试验性将猪心移植给猴，属
生物医学技术论文 免疫学检验分析技术 姓名：陶晨宇 系部：16级医疗器械工程工程完成日期2017年5月14日
免疫学分析方法(immlmological assay，IA)是以抗原与抗体的特异可逆结合反应为基础的分析技术。它集高灵敏性和强特异性于一体，20世纪90年代开始应用于抗生素残留的检测中。IA主要包括酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentasssy，ELISA)、放射免疫分析法(radio immunological assay，RIA)和荧光免疫分析法(fluorescence immunnological assay，FIA)等。目前，应用于抗生素残留分析的主要是ELISA。IA具有特异性强，灵敏度高，操作简便、快速，能同时筛选大量的样品，检测费用低，不需要昂贵的仪器设备，适合推广应用等优点。但同时也存在假阳性和假阴性偏多，提取液中杂质成分对检测结果干扰大，通常一次实验仅能检测一种抗生素残留等不足。 目前，IA已用于β-内酰胺类、氨基糖苷类、氯霉素类、四环素类和磺胺类抗生素残留的检 测中。用氨苄青霉素作为半抗原通过戊二醛法合成免疫抗原，免疫兔子后获得多克隆抗体，可用于检测牛奶中青霉素类药物残留。应用商品化的cHARMⅡ放射免疫系统可检测动物血清、尿液和组织中青霉素类抗生素残留。应用EuSA检测牛奶和肾脏样品中新霉素、庆大霉素和链霉素残留，其回收率大于80％。以牛血 清白蛋白为载体蛋白合成磺胺甲基嘧啶人工抗原，免疫兔子获得多克隆抗体后，以ELISA可检测乳中磺胺甲基嘧啶残留，检测限为24ng／mL。 今后，抗生素残留免疫学检测技术的发展方向，至少包括以下几个方面：①需要进一步规范抗生素残留免疫检测方法的操作步骤以及实现试剂的标准化。②将免疫检测方法与其他常规方法相结合，发挥各自的优势。例如，先用免疫分析法对大量样品进行粗筛，再用HPLC等方法确证，或首先采用免疫亲和色谱柱对样品进行提取与净化，然后再进行仪器分析，这样可以大大减少分析的时间。③利用抗体蛋白质芯片技术或通用抗体技术实现抗生素多残留的同时分析。④采用基因工程技术制备人工抗体。 现代免疫学检验技术源于标记技术在免疫学中的应用。科技的进步推动免疫检验技术的迅速发展，正从单一的免疫诊断技术向单细胞、多基因、微量化等方面发展。而哮喘、器官和骨髓自身免疫性疾病、变态反应、淋巴细胞和浆细胞的恶性肿移植、瘤以及继发性和原发性免疫缺陷的临床诊断都客观要求免疫学检验技术更加精确，并且能够定量评价临床治疗的有效性。 酶联免疫斑点技术酶联免疫斑点技术是一种用于测定B细胞分泌免疫球蛋白、T细胞分泌细胞因子功能的分析技术，是定量酶联免疫吸附试验技术的发展和延伸。 酶联免疫斑点技术的原理是在微孔培养板底部植入抗CK或Ig的特异性单克隆抗体。待检测样本进入微孔板内培养时，在有丝分裂原或者特异性抗原的作用下，活化记忆型T细胞或B细胞，产生CK或Ig。细胞下方的固相单克隆抗体就会捕获CK或Ig物质。细胞被清洗后，加入生物素化的第二抗体，抗体和CK或 Ig物质结合后，再加以酶做标记的生物素或亲和素反应，以酶 荧光素标记抗体技术是建立在免疫荧光、免疫微球和流式细胞分析等实验技术基础上的一种新的血清学实验方法。利用荧光对抗体进行染色可电以获得所需信息的原理而研制的流式细胞仪，具有激光技术、子计算机技术和单克隆抗体技术特点，主要用于细胞表型、细胞内及核膜成分、DNA含量等领域的分析。它具有在同一试管中同步检测多种靶物质的潜在特征，受到许多临床检验学者的关注。迄今尚未进入临床应用。 四聚体分析技术该技术利用T细胞表面的TCR可与构建的四聚体的表位肽相
安徽理工大学医学院
教研室审阅意见： （教研室主任签名） 年月日 （教案续页） 基本内容辅助手段和时间分配备注
荧光免疫技术(fluoroimmunoassay)是免疫标记技术中发展最早的一 种检测方法，其将免疫学反应酶异性与荧光技术的敏感性结合起来。基本 原理是：利用荧光素标记抗体，使之在涂片上或组织切片上以一定的条件 与标本中的待测抗原特异性地结合，通过高发光效率的点光源，经过滤色 板发出一定波长的光，使标本结合的荧光素激发而产生荧光，借助荧光显 微镜来进行观察，可以判断待测抗原或抗体的有无。荧光免疫技术被广泛 地应用于临床检测和科学研究。 第一节荧光的基本知识 一、荧光现象 荧光就是某些物质受到一定波长光的激发后，在极短的时间内发射出 的波长大于激发光波长的光。 二、荧光技术中有关的概念和参数 1．发射光谱 指固定激发波长，在不同波长下所记录到的样品发射荧光的相对强度。 2．激发光谱 指固定检测发射波长，用不同波长的激发光激发样品所记录到的相应 的荧光发射强度。 3．荧光效率 荧光物质不会将全部吸收的光能都转变成为荧光，荧光效率是指荧光 物质将吸收的光能转变序为荧光的百分率。 荧光效率=发射荧光的光量子数（荧光强度）/吸收光的光量子数（激 发光强度） 不同的荧光物质各有其特定的吸收光谱和发射光谱，即在某一特定波 长处有最大吸收峰和最发射峰。选择激发光波长在最接近于荧光物质的最 大吸收峰的波长，而且测定光波长也设定在最接近于最大发射光波峰时， 可得到最高的荧光效率。 4．荧光寿命 指荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光随时间而衰减到一定程 度时所用的时间。 5．荧光的猝灭 指荧光物质的荧光辐射能力在受到激发光较长时间的照射后会发生减 弱的现象。一些化合物有天然的荧光猝灭作用而被用作猝灭剂，用以消除 （教案续页） 基本内容辅助手段和时间分配备注
智慧树知到《临床免疫学检验技术》章节测试答案第一章 1、免疫球蛋白的分类依据是： A.轻链恒定区 B.重链恒定区 C.轻链可变区 D.重链可变区 E.铰链区 正确答案：重链恒定区 2、IgG的补体结合位点位于： A.VH和VL B.CH1和CL C.CH2 D.CH3 E.CH4 正确答案：CH2 3、各种抗体单体分子共有的特性是： A.与靶细胞结合后能介导ADCC作用 B.具有两个完全相同的抗原结合部位 C.轻链与重链以非共价键结合 D.与抗原结合后能激活补体 E.与颗粒性抗原结合后能介导调理作用
正确答案：具有两个完全相同的抗原结合部位 4、以下哪种技术极大提高了免疫学检测的特异性？ A.标记技术； B.单克隆抗体技术； C.计算机技术； D.分子生物学技术； E.细胞培养技术。 正确答案：标记技术； 5、最早用于标记免疫测定的标记物是 A.荧光素 B.放射性核素 C.酶 D.化学放光物质 E.胶体金 正确答案：荧光素 6、抗体的基本单位是： A.由2条不同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 B.由1条重链和1条轻链组成的二肽链结构 C.由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构 D.由2条相同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 E.由4条相同的肽链组成的四肽链结构 正确答案：由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构
7、木瓜蛋白酶能将抗体水解成： A.Fab和Fc B.F(ab’)2和Fc C.Fab和pFc’ D.Fab’和pFc’ E.F(ab’)2和pFc’ 正确答案：Fab和Fc 8、抗体中与抗原表位互补结合的部位： A.仅重链可变区 B.仅轻链可变区 C.重链恒定区 D.轻链恒定区 E.重链和轻链的高变区 正确答案：重链和轻链的高变区 9、血清中含量最高的抗体是： A.IgG B.IgM C.IgA D.IgD E.IgE 正确答案：IgG 10、机体再次免疫应答的主要抗体是：
免疫学和免疫学检验：沉淀反应 沉淀反应（precipetaiton）是可溶性抗原与相应抗体特异性结合所出现的反。早在1897年Kraus就发现，细菌培养液与相应抗血清混合时可发生 沉淀反应（precipetaiton）是可溶性抗原与相应抗体特异性结合所出现的反。早在1897年Kraus就发现，细菌培养液与相应抗血清混合时可发生沉淀反应。1905年Bechhold把抗体放在明胶中，将抗原加于其中，发现沉淀反应可在凝胶中进行。Oudin（1946）报告了试管免疫扩散技术，Mancini（1965）提出单向免疫扩散技术，使定性免疫试验向定量化发展。另一方面，免疫浊度法的出现，使沉淀反应达到快速、微量、自动化的新阶段。沉淀反应分两个阶段，第一阶段发生抗原抗体特异性结合，第二阶段形成可见的免疫复合物（参见第九章）。经典的沉淀反应在第二阶段观察或测量沉淀线或沉淀环等来判定结果，称为终点法；而快速免疫浊度法则在第一阶段测定免疫复合物形成的速率，称为速率法。现代免疫技术（如各种标记免疫技术）多是在沉淀反应的基础上建立起来的，因此沉淀反应是免疫学方法的核心技术。第一节液体内沉淀试验一、絮状沉淀试 验絮状沉淀试验为历史较久，又较有用的方法。该法要点是：将抗原与抗体溶液混合在一起，在电解质存在下，抗原与抗体结合，形成絮状沉淀物。这种沉淀试验受到抗原和抗体比例的直接影响，因而产生了两种最适比例的基本测定方法。（一）抗原稀释法抗原稀释法（Dean-Webb法）是将可溶性抗原作一系列稀释，与恒定浓度的抗血清等量混合，置室温或37℃反应后，产生的沉淀物随抗原的变化而不同。表12-1系以牛血清白蛋白为例的实验结果。表12-1Dean-Webb定量沉淀试验 管号抗原抗体总沉淀量反应过剩物抗原沉淀量抗体沉淀量沉淀中Ab/Ag 1 0.003 0.68 0.093 Ab 0.003 0.090 30.0 2 0.005 0.68 0.145 Ab 0.005 0.140 28.0 3 0.011 0.68 0.249 Ab 0.011 0.238 21.7 4 0.021 0.68 0.422 Ab 0.021 0.401 19.1 5 0.032 0.68 0.571 Ab 0.032 0.539 16.8 6 0.043 0.68 0.734 － 0.043 0.691 16.1 7 0.064 0.68 0.720 Ab －－－ 8 0.085 0.68 0.601 Ag －－－ 9 0.171 0.68 0.464 Ag －－－ 10 0.341 0.68 0.368 Ag －－－单位：mmol/L 从表12-1可以看出，1～5管为抗体过剩管，7～10管为抗原过剩管，唯第6管沉淀物最多，两者之比为16:1，即最适比。（二）抗体稀释法（Ramon）法本法采用恒定的抗原量与不同程度稀释的抗体反应，计算结果同上法，得出的是抗体结合价和最适比。现今，为了取得抗原与抗体的最佳比例，已将以上两法相结合，即抗原和抗体同时稀释，称为棋盘格法（亦称方阵法），找出最佳配比。举例见表12-2。表12-2方阵最适比测定 抗体稀释度抗原稀释度 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/12 对照 1/5 ＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋± －－
临床免疫学检验技术考试题库及答案 101.补体系统的调节因子包括( ) A.I因子 B.D因子 C.B因子 D.H因子 E.衰变加速因子(DAF) 答案：ADE 102.B细胞表达的CD分子包括( ) A.CD19 B.CD21 C.CD40 D.CD80/CD86 E.CD79a/CD79b 答案：ABCDE 103.免疫系统包括( ) A.胸腺 B.骨髓 C.淋巴结 D.脾 E.周围淋巴结 答案：ABCDE 104.下列关于PEG比浊法的描述，正确的是( ) A.PEG用于沉淀蛋白质具有可逆性，对蛋白质生物活性无影响 B.在pH、离子强度等条件固定时，蛋白质分子量越大，用以沉淀的PEG的浓度越小 C.PEG比浊法特异性强 D.不能反映小分子循环免疫复合物的情况 E.受温度变化影响大，重复性差
答案：ABDE 105.在淋巴细胞转化实验中，属于特异性刺激物的是( ) A.肿瘤抗原 B.PPD C.葡萄球菌毒素A、B、E D.ConA E.同种异体细胞 答案：ABCE 106.补体结合试验的正式试验应设立的对照有( ) A.血清对照 B.补体对照 C.抗原对照 D.溶血素对照 E.SRBC对照 答案：ABCDE 107.PEG比浊法检测非抗原特异性循环免疫复合物应注意的有( ) A.应空腹采血 B.温度、离心速度和时间应严格掌握 C.标本反复冻融可引起浊度增加 D.2%PEG只能沉淀较小分子的循环免疫复合物 E.温度每升高1℃，A值就下降0.02 答案：ABCE 108.关于CH50试验的方法学评价，下列正确的是( ) A.方法简便，快速，敏感性低 B.过量钙、镁离子可抑制溶血反应 C.补体的溶血活性与试验中反应体积成反比 D.缓冲液pH和离子强度增高，补体活性下降 E.过量钙、镁离子可促进溶血反应 答案：ABCD
常用免疫学检验技术的基本原理 免疫学检测即是根据抗原、抗体反应的原理，利用已知的抗原检测未知的抗体或利用已知的抗体检测未知的抗原。由于外源性和内源性抗原均可通过不同的抗原递呈途径诱导生物机体的免疫应答，在生物体内产生特异性和非特异性T 细胞的克隆扩增，并分泌特异性的免疫球蛋白（抗体）。由于抗体－抗原的结合具有特异性和专一性的特点，这种检测可以定性、定位和定量地检测某一特异的蛋白（抗原或抗体）。免疫学检测技术的用途非常广泛，它们可用于各种疾病的诊断、疗效评价及发病机制的研究。 最初的免疫检测方法是将抗原或抗体的一方或双方在某种介质中进行扩散，通过观察抗原－抗体相遇时产生的沉淀反应，检测抗原或抗体，最终达到诊断的目的。这种扩散可以是蛋白的自然扩散，例如环状沉淀试验、单向免疫扩散试验、双向免疫扩散实验。单向免疫扩散试验就是在凝胶中混入抗体，制成含有抗体的凝胶板，而将抗原加入凝胶板预先打好的小孔内，让抗原从小孔向四周的凝胶自然扩散，当一定浓度的抗原和凝胶中的抗体相遇时便能形成免疫复合物，出现以小孔为中心的圆形沉淀圈，沉淀圈的直径与加入的抗原浓度成正比。 利用蛋白在不同酸碱度下带不同电荷的特性，可以利用人为的电场将抗原、抗体扩散，例如免疫电泳试验和双向免疫电泳。免疫电泳首先将抗原加入凝胶中电泳，将抗原各成分依次分散开。然后沿电泳方向平行挖一直线形槽，于槽内加入含有针对各种抗原的混合抗体，让各抗原成分与相应抗体进行自然扩散，形成沉淀线。然后利用标准的抗原－抗体沉淀线进行抗原蛋白（或抗体）的鉴别。上述的方法都是利用肉眼观察抗原－抗体反应产生的沉淀，因此灵敏度有很大的局限。比浊法引入沉淀检测产生的免疫比浊法就是利用浊度计测量液体中抗原－抗体反应产生的浊度，根据标准曲线来计算抗原（或抗体）的含量。该方法不但大大提高了检测的灵敏度，且可对抗原、抗体进行定量的检测。
一、名词解释 第1章概论 1.免疫学： 2.免疫分子： 3.补体： 4.临床免疫学： 第2章抗原抗体反应 5.抗原抗体反应： 6.抗原抗体反应特异性 7.可逆性 8.比例性 9.抗原抗体反应的等价带（zoneofequivalence） 10.最适比（optimalratio） 11.带现象（zonephenomenon） 第3章免疫原和抗血清的制备 12.免疫原(immunogen)
13.半抗原 14.免疫佐剂 15.多克隆抗体(polyclonal antibody, pcAb) 第5章凝集反应 16.凝集反应 17.直接凝集反应 18.间接凝集反应 19.明胶凝集试验 第6章沉淀反应 20.沉淀反应 21.絮状沉淀试验 22.免疫浊度测定 23.凝胶内沉淀试验 24.单项扩散试验
25.双向扩散试验 26.免疫电泳技术 27.对流免疫电泳 28.火箭免疫电泳 29.免疫电泳 30.免疫固定电泳 第19章补体检测及应用 31.补体 32.免疫溶血法 33.补体结合试验 第22章感染性疾病与感染免疫检测34.感染 第23章超敏反应性疾病及其免疫检测35.超敏反应
36.Ⅰ型超敏反应 37.Ⅱ型超敏反应 38.Ⅲ型超敏反应 39.Ⅳ型超敏反应 第24章自身免疫性疾病及其免疫检测 40.自身耐受 41.自身免疫 42.自身免疫病 43.自身抗体 44.抗核抗体 第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测 45.免疫增殖性疾病 46.免疫球蛋白增殖病 47.本周蛋白
48.血清区带电泳 49.免疫电泳 50.免疫固定电泳 第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验 51.免疫缺陷病 52.获得性免疫缺陷综合征 第27章肿瘤免疫与免疫学检验 53.肿瘤免疫学 54.肿瘤抗原 55.肿瘤标志物 第28章移植免疫及其免疫检测 56.移植 57.主要组织相容性复合体 58.移植排斥反应
临床免疫学检验技术复习练习试题及答案801.CFT的正式试验中抗体成分的效价是( ) A.4个单位 B.1个单位 C.2个实用单位 D.2个单位 E.3个单位 答案：A 802.免疫溶血法检测的是单个补体成分的( ) A.含量 B.分子量 C.活性 D.特异性 E.含量和活性 答案：C 803.Ⅰ类MHC分子穿过细胞膜插入胞质的部分是( ) A.α链的羧基端 B.α链的氨基端 C.β链的羧基端 D.β链的氨基端 E. 答案：A 二、多选题 26.关于胶体金结构和特性的正确描述( ) A.颗粒大小约为1～100nm B.包括一个基础金核 C.具有内正外负的以离子层 D.吸收峰波长随颗粒大小而改变
E.对电解质不敏感 答案：ABC 27.抗体的生物学活性包括( ) A.特异性结合抗原 B.介导各型变态反应 C.活化补体 D.调理吞噬作用 E.发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用答案：ACDE 28.细胞膜表面粘附分子的测定方法有( ) A.ELISA B.酶免疫组织化学染色方法 C.流式细胞仪测定方法 D.荧光免疫方法 E.时间分辨荧光免疫测定方法 答案：BCDE 29.补体的三条激活途经( ) A.MBL途径 B.内源性途径 C.经典途径 D.外源性途径 E.旁路途径 答案：ACE 30.常用的免疫电泳技术有( ) A.交叉免疫电泳 B.火箭免疫电泳 C.免疫电泳 D.免疫固定电泳 E.对流免疫电泳
答案：ABCDE 31.常用的荧光素是指( ) A.异硫氰酸荧光素 B.镧系稀土元素 C.四甲基异硫氰酸罗丹明 D.藻红蛋白 E.四乙基罗丹明 答案：ACDE 32.巨噬细胞的功能包括( ) A.分泌特异性抗体 B.产生溶酶体酶 C.分泌多种细胞因子 D.参与抗原加工、递呈 E.直接吞噬、杀伤病原体、肿瘤细胞 答案：BCDE 33.可用于破碎组织细胞制备可溶性抗原的方法有( ) A.超声破碎法 B.反复冻融法 C.超速离心法 D.酶处理法 E.表面活性剂处理法 答案：ABDE 34.肽链胞浆区具有ITAM结构的是哪些膜分子( ) A.CD3 B.CD154 C.FcεRⅠ D.Igα/Igβ E.CD80/CD86 答案：ACD
一、单选题(A1／A2型题) 1．最早将抗原抗体反应原理及方法应用于临床血清学诊断的学者是(A ) A．Widal B．Landsteiner C．KOhler D．ManciniE．Coons 2．下列各项用于反映B细胞功能的试验是( B) A。淋巴细胞转化B．血清免疫球蛋白检测C．迟发型超敏反应皮肤试验D．移动抑制试验E．CD3检测 3．对流免疫电泳的沉淀线出现在抗原抗体之间且靠近抗原孔可说明(B) A．抗原强阳性B．抗原弱阳性C．抗原阴性 D．抗体弱阳性E．抗体阴性 4。下列何种抗原是触发移植排斥反应的首要抗原(D) A．HLA-A、B 、C B．HLA-DP C．HLA-DQ D．HLA-DR E．HLA-D 5．人类MHC基因位于第几对染色体上(B ) A．第1对B．第6 对C．第9对D．第12 对E．第19 对 6．机体的免疫系统具有杀灭或排斥突变细胞功能称为(C ) A．免疫防御B.免疫自稳 C.免疫监视D.免疫应答 E.兔疫识别7．用异硫氰荧光色素(FITC)作标记时其激发光波长近于(D ) A．365nm B．435nm C．450mn D．490nm E．500nm 8.血清中含量最高的补体分子是( C) A．C1 B．C2 C．C3 D．C4 E．C5 9．检测不完全抗体可使用的凝集反应(D ) A．协同凝集反应B．间接凝集反应C．间接血凝试验 D．Coombs试验E．直接凝集反应
10．ELISA试验时易造成空白值增高的原因主要来自于(C ) A．加样不准B保温时间短C洗涤不彻底D比色误差E包被不好11．GVHR的中文全称为( B) A．宿主抗移植物反应B移植物抗宿主反应C补体依赖的细胞毒作用D．荧光偏振免疫分析E人类白细胞抗原 12．为提取高纯度特异性IgG通常采用的方法是(C) A．区带电泳B．凝胶过滤C．亲和层析D．选择性沉淀E．超速离心13．初次应答中首先产生的抗体是(C ) A．1gA B．IgG C．IgM D．IgE E．IgD 14．用于前列腺癌初筛的首选肿瘤标志物是(B ) A．AFP B．PSA C．CEA D．CAl9-9 E．HCG 15．不完全抗原的特点是(B ) A．仅具有免疫原性B仅具有反应原性C具有免疫原性及反应原性D．与抗体不产生沉淀反应E．不可能是病原微生物的产物16．化学发光的基本原理是发光物由于(D ) A．在一定波长激发光照射下发光B．在化学反应中获得能量而发光C．在电子激发态时发光D在电子激发态返回基态时释放能量而发光E．某物在化学反应中生成发光物而发光 17．组织相容性抗原指的是(C ) A．同种异型抗原B．隐蔽的自身抗原C同种移植抗原 D．有核细胞表面抗原E．N曾异性抗原
第二十一章免疫学检验的质量保证 一、A1 1、对新批号质控品应确定控制限，控制限通常以下述哪一个表示（）。 A、平均值 B、变异系数 C、标准差 D、标准差倍数 E、中位数 2、在有组织的国际研究的基础上，取得了成员国完全同意，并确定了国际单位（U）的生物制品为（）。 A、国际标准品 B、二级标准品 C、三级标准品 D、控制物 E、样品 3、质控图制作的关键是对（）的选择。 A、标准差 B、控制限 C、质控血清 D、试剂盒 E、操作人员 4、已经确定的稳定而均一的物质，它的数值已由决定性方法确定，所含杂质也已经定量，该物质为（）。 A、一级标准品 B、二级标准品 C、校准品 D、样品 E、质控品 5、病毒性肝炎酶免疫检验中，有高值、中值、低值及阴性值的质控物，我们认为其中哪种质控物最重要（）。 A、高值 B、中值 C、低值 D、阴性值 E、高值和低值 6、在酶联免疫吸附测定中，判断阴、阳性结果的标准是以（）为依据的。 A、阴性对照 B、阳性对照 C、临界值血清 D、以试剂盒说明书上提供的Cutoff值为准 E、最终的颜色变化 7、在质控中，质控血清的检测结果超过±3SD时，则表示该结果（）。 A、质控 B、失控 C、无解释意义 D、仍然有效 E、在控 8、Grubbs法中若SI上限和SI下限有一值处于n2s～n3s值之间时则表示（）。 A、处于质控范围之内 B、该值在2～3s范围，处于“警告”状态 C、该值已在3s范围之外，属“失控” D、不可继续进行测定，但可重复以上计算 E、该值在1s范围之内 9、“即刻法”质控，只需检测几次，即可进入质控状态（）。 A、1次 B、2次 C、3次 D、4次 E、5次 10、在“即刻法”质控中，当SI上限值和SI下限值＜n2s 时，表示（）。 A、失控 B、警告 C、处于控制范围内 D、该值不在2s范围内 E、要重复测定 11、作为标准品的生物制品，其最大的特点应该是（）。 A、稳定性好，无传染危险性 B、没有任何杂质 C、蛋白质含量多 D、非常干燥 E、价格低廉 答案部分 一、A1 1、【正确答案】D 【答案解析】对新批号质控品应确定控制限，控制限通常以标准差倍数表示。 2、【正确答案】A 【答案解析】国际标准品是在有组织的国际研究的基础上，取得了成员国完全同意，并确定了国际单位（U）的生物制品。 3、【正确答案】B 【答案解析】质控图制作的关键是对控制限的选择。4、【正确答案】A 【答案解析】已经确定的稳定而均一的物质，它的数值已由决定性方法确定，所含杂质也已经定量，该物质为一级标准品。 5、【正确答案】C 【答案解析】病毒性肝炎酶免疫检验中，有高值、中值、低值的质控物，我们认为其中以低值的质控物为最重要，设置临界于Cutoff值（CO值）的低值弱阳性质控物是室内质控的关键。 6、【正确答案】D