高中生物实验：班氏试剂的配制与鉴定结果
透明蓝色无
加热时无变化，仅冷却后有少量沉淀微量，约0.5以下
加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀少量，约0.5-1
加热10-15秒后即出现土黄色沉淀中量，约1-2
班氏试剂与斐林试剂比较：
首先，两者的配方不一样。斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲，0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。而班氏试剂的配方为：400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜，制成CuO4溶液;把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠?Na2CO3溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。
其次，两者在反应原理上略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Cu(OH)2，Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生OH-，与柠檬酸钠?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时，Cu2+和OH-结合，生成Cu(OH)2，Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。
两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反
应产生Cu(OH)2，Cu(OH)2很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中，柠檬酸钠?Na2CO3为一对缓冲物质，产生的OH-数量有限，与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。
可溶性还原糖的鉴定：
生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含有醛基，醛基具有还原性，可与弱氧化剂反应。与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在。
利用斐林试剂：斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的Na0H溶液和质量浓度为0.05g/mLL的CuS04溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的Cu2O沉淀，醛基则被氧化为羧基。可见用斐林试剂只能鉴定还原性糖，不能鉴定可溶性的非还原性糖。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
利用班氏试剂：班氏试剂由A液(硫酸铜溶液)，B液(柠檬酸钠和碳酸溶液)配制而成。将A溶液倾注人B液中，边加边搅，如有沉淀可过滤。实验原理与斐林试剂相似，所不同的是班氏试剂可长期使用。
利用银氨溶液：银氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水，至最初产生的沉淀恰好溶解为止，这时得到的溶液就是银
氨溶液。银氨溶液中含有Ag(NH3)20H(氢氧化二氨合银)，这是一种弱氧化剂，能把醛基氧化成羧基，同时Ag+被还原成金属银。还原生成的银附着在试管壁上，形成银镜。可见，银镜反应也可用于鉴定可溶性还原糖。鉴定的结果是出现银镜。
用班氏试剂鉴定可溶性还原糖，比用斐林试剂更简便。
步骤
在试管中加入1mL班氏试剂，加热到沸腾，如不变色，则可使用。
再在试管中滴人2滴新鲜澄清的尿液，摇匀。
加热上述混合液到沸腾，并持续2min～3min。
观察试管内混合液颜色是否发生变化，是否有沉淀物产生，并按表5提示作出判断记录。
混合液现象—记录符号含糖量
混合液呈蓝色或蓝灰色-0.02g/100mL
出现浅黄绿色沉淀+(0.1～0.5g)/100mL
注意事项：
班氏试剂和尿液混合液的体积比例应为10：1。
如是糖尿病人，检验前两三天最好停止服药。
实验中常用器材和药品的使用
NaOH：用于吸收CO2或改变溶液的pH(马上点标题下“高中生物”关注可获得更多知识干货，每天更新哟！)
Ca(OH)2：鉴定CO2
CaCl2：提高细菌细胞壁的通透性
NaHCO3：提供CO2、作为酸碱缓冲剂
酸碱缓冲剂(Na2CO3/NaHCO3，Na2HPO4/NaH2PO4)：用于调节溶液pH
NaCl：配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)
琼脂：激素或其他物质的载体或培养基，用于激素的转移或培养基
酒精：用于消毒(75%)、提纯DNA(95%)、叶片脱色、配制解离液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)
蔗糖：配制蔗糖溶液，测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原
苔黑酚乙醇溶液：用于RNA的鉴定
斐林试剂(甲液0.1g/mL NaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂：鉴定可溶性还原性糖(沸水浴，砖红色沉淀)
双缩脲试剂：用于蛋白质的鉴定(紫色)
碘液：用于鉴定淀粉(变蓝色)
龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色
改良苯酚品红染液：检测染色体，红色
健那绿B：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色
重铬酸钾溶液：检测酒精，呈灰绿色
吲哚酚试剂：用于维生素C的鉴定
伊红美蓝：鉴定有无大肠杆菌的存在
亚甲基蓝：用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌(细菌的氧化可使之褪色)
pH试纸：检验物质的酸碱性，如乳酸
卡诺氏固定液：用于细胞有丝分裂根尖的固定
解离液(5%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成)：有丝分裂中根尖的分离与固定
93号汽油；
9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合；
汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。
20%新鲜肝脏研磨液：含有H2O2酶，可促进H2O2分解产生O2
无土营养液：用于植物无土栽培
结晶紫：用于自生固氮菌的分离
秋水仙素(C22H25O6N)：用于单倍体育种，作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成，可导致细胞内染色体数目加倍。是1937年发现的，是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶，有剧毒，使用时应特别注意。
看看网友们都有什么想法
网友1
是来鉴定还原糖的，硫酸铜和氢氧化钠的混合物，斐林试剂应
现配现用
网友2
1斐林试剂检测可溶性还原糖
原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀
注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用，而且是现用现配，条件需要水浴加热。
应用：检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中含糖量高低的测定；在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。
2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪
原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅳ+脂肪→红色
注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察。
应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪。
对纳氏试剂配制方法的改良及其效果验证 陈琼希，江晓明 （湛江市水务投资集团有限公司水质计量检测中心，广东省湛江市，524034） 摘要：纳氏试剂是影响水质氨氮检测结果准确性的重要因素。经改良处理后的纳氏试剂大大缩短了溶解时间和最后沉淀时间且无上浮杂质，并用氨氮质控样进行检测验证且其结果在正常范围内。 关键词：氨氮纳氏试剂 纳氏试剂分光光度法作为目前环境检测实验室检测水质中的氨氮含量的标准方法之一，具有简单、快速、灵敏的特点，但实际中这个方法受诸多因素影响，纳氏试剂就是其中的重要影响因素之一。本次试验在传统的纳氏试剂配制方法基础上做简单改良，大大缩短溶解时间和沉淀时间，同时提高稳定性及可靠性。 1 材料与方法 1.1 试验材料 碘化汞、氢氧化钠、盐酸：广州化学试剂厂；碘化钾、酒石酸钾钠、氯化铵：天津市光复科技发展有限公司；氯化锌：西陇化工股份有限公司；纯水：湛江冰露；双圈定性中速滤纸：杭州沃华滤纸有限公司；试剂均为分析纯。 1.2 主要试验仪器 双光束紫外可见分光光度计TU-1901：北京普析通用仪器有限公司；超声波清洗机：上海必能信超声有限公司 1.3 试验方法 1.3.1氨氮标准母液（1000mg/L）：取3.819g经100℃干燥过的纯氯化铵溶于水中，移入1000mL 容量瓶，用无氨水稀释定容并混匀，储存于4℃下备用。 氨氮标准工作液（10mg/L）：用一定量的氨氮标准母液精确配制成100mL10mg/L的工作液，备用。 1.3.2 中速定性滤纸处理：将滤纸叠置于漏斗中，用5%热盐酸（60℃）将滤纸淋洗5次，再用无氨水淋洗5次，至滤液为中性，并将最后淋洗的滤液进行检测。分别于50mL比色管中加入2mL 10mg/L的标准液，然后分别以无氨水和滤液稀释到标线并混匀，以两者的检测值对比验证处理后的滤纸是否可进一步使用。 1.3.3酒石酸钾钠溶液：称250g酒石酸钾钠溶解于500mL无氨水中，加入1-2滴浓氢氧化钠溶液，煮沸20min以除氨，放冷定容至500mL。再用处理后的滤纸过滤，以除杂质。 1.3.4 纳氏试剂：称80.0gNaOH，溶于250mL无氨水中，充分冷却至室温。另称取50.0g HgI2，缓慢加到25mL KI溶液（含35.0g KI）中，并于超声辅助作用下不断搅拌至充分溶解，然后用处理过的中速定性滤纸过滤，将滤液在搅拌下徐徐注入经充分冷却过的NaOH溶液中，用无氨水稀释至500mL，贮于聚乙烯瓶中，密塞静置24h。小心倒出上层清液，取上清液进行下一步验证操作。
高中生物必修一实验大全共14个实验 https://www.doczj.com/doc/8d1085202.html,work Information Technology Company.2020YEAR
高考备考“生物实验”易错点归纳 （1）、可溶性还原性糖的鉴定： 植物组织应该选择苹果、梨等应该选择白色或者近于白色的组织，而不能选择西瓜； 鉴定的糖类为可溶性还原糖，故不能选用甘蔗作为实验材料； 实验过程中需要水浴加热； 若鉴定材料中不含可溶性还原糖，则实验结果的现象应该为蓝色，而非无色，答题时切忌描述为“无色”； 斐林试剂的配制为“等量混合均匀后使用，且须现配现用”，注意与双缩脲试剂的先加A液，后加少量B液区分开来。鉴定结果为斐林试剂在水浴条件下可与可溶性还原糖发生反应产生砖红色沉淀。 （2）、脂肪的鉴定实验： 材料选取得是富含脂肪的花生子叶，鉴定过程中须用显微镜进行观察，故而需要制片操作，若切片厚薄不均，会导致显微镜视野明暗不一； 在染色后，显微镜观察前，须用50%酒精溶液洗去浮色，便于我们区分被苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ染色的脂肪颗粒 （3）蛋白质鉴定实验： 材料选择：豆浆或者鸡蛋清（鸡蛋清须稀释，以避免试验后鸡蛋清粘附于试管壁上，不易清洗） 试剂配制：先加1~2mL A液，再加1~2滴B液。 实验原理：Cu（OH）2在碱性条件下与肽键发生络合反应，生成紫色络合物。（故而加热导致蛋白质空间结构发生改变引发的蛋白质变性之后的物质，仍能够与双缩脲试剂发生紫色络合反应）
实验拓展：将蛋白质与蛋白酶混合使其充分反应过后，再加入双缩脲试剂进行鉴定，仍能够发生紫色络合反应；将蛋白质+蛋白酶+多肽酶混合反应后，加入双缩脲试剂，实验结果依旧为紫色。【原因】 （4）观察细胞内的叶绿体： 材料：黑藻（它是真核细胞还是原核细胞为什么） （5）观察细胞内的线粒体： 材料：人的口腔上皮细胞（为什么不选择绿色植物细胞） 试剂：健那绿试剂（染成蓝色） 细胞活性：实验过程中细胞始终保持活性，故而在制作装片的过程中，须滴加生理盐水（等渗溶液），而不能滴加蒸馏水； （6）观察细胞内DNA和RNA的分布： 实验材料：人的口腔上皮细胞； 重要操作：HCl的作用：①增加细胞膜的通透性；②使DNA和蛋白质分开，便于染色剂染色； 试剂：吡罗红（RNA，故而细胞质被染成红色）；甲基绿（DNA，故而细胞核被染成绿色） （7）植物细胞的质壁分离复原实验： 实验材料：植物的成熟细胞（不能选用根尖分生区和动物细胞）【满足两个条件：第一有细胞壁；第二有成熟大液泡】课本选用的实验材料为洋葱鳞茎外表皮（其液泡含有紫色色素，易观察）；
高中生物教材实验归纳
蛋白质鉴定蛋白质双缩脲试剂紫色豆浆、稀蛋清 先加A液，后加 B液，摇匀使用 尿糖检测葡萄糖葡萄糖试纸有色水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样” 无 绿叶中色素的提取和分离四种色素 提取液：无水 乙醇；分离 液：层析液 画滤液细线 细、直、干燥 后重复画 胡萝卜素： 橙黄色；叶 黄素：黄色； 叶绿素a： 蓝绿色；叶 绿素b：黄 绿色 新鲜的绿叶 (如菠菜叶) 层析液不能 没及滤液细 线（防止色素 溶解） 加入二氧化硅： 研磨充分；碳酸 钙：防止研磨中 色素被破坏 酒精酸性重铬酸钾溶液（橙色）灰绿色 CO2澄清石灰水石灰水混浊溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄学习、研究性课题调查对象统计方法计算公式 调查人群中遗传病人类某种 遗传病 汇总法发病率＝ 患病人数 被调查人数 ×100% 最好选取群体中发病率较高 的单基因遗传病 发病率广大人群进行调查 遗传方式患者家系 种群密度调查要随机取样活动强动 物 标志重捕法 初次捕获个体数 总数N ＝ 重捕中标志个体数 重捕个体数 植物、活 动弱动物 样方法 所取各样方的种群密度和所 取样方数（取平均值） 土壤中小动物类群丰富度土壤中的 小动物 取样器取样法记名计算法、目测估计法 探究培养液中酵母酵母菌抽样检测法血球计数板显微计数
(1) 制作DNA分子双螺旋结构模型、建立减数分裂中染色体变化模型—构建物理模型法。血糖调节的模型—构建概念模型和物理模型法；种群数量增长模型—构建数学模型。 (2) 分离各种细胞器——差速离心法。证明DNA半保留复制——密度梯度离心法。 (3)分离叶绿体中的色素——纸层析法。观察线粒体——活体染色法；观察叶绿体——活体观察法（无需染色）。观察根尖分生组织细胞的有丝分裂、低温诱导染色体数目变化——死体染色法。 (4) 探究酵母菌的呼吸方式——对比实验法（有氧呼吸和无氧呼吸进行相互对照）和产物检测法。 (5) 制备细胞膜的方法——（渗透作用）吸水涨破法。取材：人和其他哺乳动物成熟的红细胞(无核膜和各种细胞器膜)，不能用禽类和两栖类动物的红细胞，有细胞核和众多细胞器。 (6) 恩格尔曼水绵实验——通过好氧细菌确定释放氧气的部位在叶绿体（自变量：光照和黑暗；因变量：好氧菌聚集部位） (7) 假说—演绎法：①孟德尔发现基因的分离和自由组合定律②摩尔根证明基因在染色体上③证明DNA的复制方法是半保留复制 (8) 萨顿提出“基因位于染色体上”的假说——类比推理法 (9) 同位素标记法：①研究分泌蛋白的合成和运输②鲁宾和卡门证明光合作用产生的氧气中的O全部来自于H2O（自变量：标记物H218O和C18O2,因变量：O2的反射性） ③卡尔文追踪CO2中的C在光合作用中的转移途径（卡尔文循环）④赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验⑤DNA半保留复制 (10)提纯，鉴定—艾弗里的实验；离心技术——噬菌体侵染细菌实验，DNA半保留复制。 (11)探究温度对酶活性的影响:材料——淀粉和淀粉酶,不能使用过氧化氢(化学性质不稳定，受温度影响易分解)。检测试剂不能用斐林试剂宜用碘液。
高中生物实验方法与常用试剂 1．实验方法 实验方法是整个实验设计的精髓，是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下： (1)化学物质的检测方法： ①淀粉——碘液(蓝色) ②还原性糖——斐林试剂、班氏试剂(砖红色) ③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)或酸碱指示剂 ④乳酸——pH试纸 ⑤O2——余烬复燃无O2——火焰熄灭 ⑥蛋白质——被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫色) ⑦脂肪——苏丹Ⅲ染液(橘黄色)、苏丹Ⅳ染液(红色) ⑧DNA——二苯胺(蓝色) ⑨染色体——龙胆紫溶液（紫色），醋酸洋红溶液（红色） (2)实验结果的显示方法： ①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量 ◆水生植物可依气泡的产生量或产生速率; ◆离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目; ◆植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。 ②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量 ③原子途径——放射性同位素示踪法 ④细胞液浓度大小——质壁分离和复原 ⑤细胞是否死亡——质壁分离的复原 ⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量，发育速度等（饲喂法） ⑦生长激素作用——生长速度(体重变化，身高变化) ⑧胰岛素作用——动物活动状态（切除、移植胰腺） ⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度 ⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基 ⑴生长素作用——向光性 (3)实验条件的控制方法： ①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物 ②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水 ③除去容器中CO2——NaOH溶液 ④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境 ⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热 ⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光 ⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光 ⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠 ⑨线粒体提取——细胞匀浆离心 ⑩骨的脱钙——盐酸溶液 ⑴灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌，对不同材料,灭菌方法不同：培养基用高压蒸气灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂洗净，擦干后用75％酒精消毒；整个接种过程都在实验室无菌区进行。 (4)实验中控制温度的方法：
2017高中生物实验设计专题复习 1 实验设计的一般程序： 明确实验目的；分析实验原理；选择材料用具；设计实验步骤；预测实验结果； 观察收集数据；分析推理得出结论。 2 实验设计遵循的原则： ⑴单一变量原则 ? ①自变量与因变量 自变量是实验中由实验者操纵的因素或条件，而因变量是指由实验变量而引起的变化结果，二者之间是前因后果的关系。实验的目的就在于获得和解释前因与后果。 例：关于“唾液淀粉酶水? 解淀粉”的实验中，“低温(冰块)、适温(37℃)、高温 (沸水)就是实验变量，而这些变量引起的实验变化结果就是反应变量。该实验旨在获得和解释温度变化(自变量)与酶的活性(因变量)的因果关系。 ②无关变量与额外变量 无关变量是指实验中除实验变量外的影响实验结果与现象的因素或条件。由无关变量引起的变化结果就叫额外变量。它们之间也是前因后果的关系。但它们的存在对实验与反应变量的获得起干扰作用。例如：“唾液淀粉酶实验”中，除实验变量(温度)外，试管的洁净程度、唾液的新鲜程度、淀粉浓度、温度处理的时间长短等等就属于无关变量。如无关变量中的任何一个或几个对三组实验不等同、不均衡，就会产生额外变量，影响实验的真实结果。实验变量，或称自变量，指实验假设中涉及的给定的研究因素。反应变量，或称因变量，指实验变量所引起产生的结果或结论。而其他对反应变量有影响的因素称之为无关变量，观察其对实验结果的影响。 强调：不论一个实验有几个实验变量，都应确定一个实验变量对应观测一个反应变量，这就是单一变量原则，它是处理实验中的复杂关系的准则之一。 ⑵对照性原则? 对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全相等的实验。 ①空白对照 空白对照是指不做任何实验处理的对象组。如，在“唾液淀粉酶催化淀粉”的实验中，实验组滴加了唾液淀粉酶液，而对照组只加了等量的蒸馏水，起空白对照。 ②条件对照 条件对照是指虽给对象施以某种实验处理,但这种处理作为对照意义的,或者说这种处理不是实验 假设所给定的实验变量意义的，或不是所要研究的处理因素。即虽给对照组施以部分实验因素，但不是所研究的实验处理因素；这种对照方法是指不论实验组还是对照组的对象都作不同条件的处理，目的是通过得出两种相对立的结论，以验证实验结论的正确性。例,“动物激素饲喂小动物”实验,其实验设计方案是：甲组：饲喂甲状腺激素(实验组)；乙组：饲喂甲状腺抑制剂(条件对照组)；丙组：不饲喂药剂(空白对照组)。显然,乙组为条件对照。该实验既设置了条件对照,又设置了空白对照, 通过比较、对照,更能充分说明实验变量---甲状腺激素能促进蝌蚪的生长发育。 ③自身对照 自身对照是指实验与对照在同一对象上进行,即不另设对照。如“植物细胞质壁分离和复原”实验,则是典型的自身对照。自身对照,方法简便,关键是要看清楚实验处理前后现象变化的差异,实验处理前的对象状况为对照组,实验处理后的对象变化则为实验组。 ④相互对照 相互对照是指不另设对照组,而是几个实验组相互对比对照。如“植物激素与向光性向重力性实验”和“温度对唾液淀粉酶活性的影响的实验”中,所采用的都是相互对照,较好地平衡和抵消了无关变量的影响,使实验结果具有说服力。 ⑶等量原则 对照实验设置的正确与否，关键就在于如何尽量去保证“其它条件的完全相等”。具体来说有如下四个方面： ①所用生物材料要相同即所用生物材料的数量、质量、长度、体积、来源和生理状况等方面特点要尽量相同或至少大致相同。 ②所用实验器具要相同即试管、烧杯、水槽、广口瓶等器具的大小型号要完全一样。 ③所用实验试剂要相同即试剂的成分、浓度、体积要相同。尤其要注意体积上等量的问题。 ④所用处理方法要相同如：保温或冷却：光照或黑暗；搅拌或振荡都要一致。有时尽管某种处理对对照实验来说，看起来似乎是毫无意义的，但最好还是要作同样的处理。
生物：高中生物实验颜色变化汇总 1斐林试剂检测可溶性还原糖 原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀 注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用，而且是现用现配，条件需要水浴加热。 应用：检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。 2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪 原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色 注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察。 应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪。 3双缩脲试剂检测蛋白质 原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色 注意：双缩脲试剂在使用时，先加A液再加B液，反应条件为常温(不需要加热)。 应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。 4碘液检测淀粉 原理：淀粉+碘液→蓝色 注意：这里的碘是单质碘，而不是离子碘。 应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉 5DNA的染色与鉴定 染色原理：DNA+甲基绿→绿色 应用：可以显示DNA在细胞中的分布。 鉴定原理：DNA+二苯胺→蓝色 应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂。 6吡罗红使RNA呈现红色 原理：RNA+吡罗红→红色 应用：可以显示RNA在细胞中的分布。 注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂，而不是单独染色。
7台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理：正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。 应用：区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。 8线粒体的染色 原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。 应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。 9酒精的检测 原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。 应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。 10CO2的检测 原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。 应用：根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短，可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。 11染色体(或染色质)的染色 原理：染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色。 应用：用高倍镜观察细胞的有丝分裂。 12亚硝酸盐的检测出现玫瑰红 原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。 应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。 13脲酶的检测 原理：细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，使PH升高，从而使酚红指示剂变红。 应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂，培养某种细菌后，看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。 14伊红美蓝检测大肠杆菌
高中生物实验方法及试剂汇总 1．实验方法 实验方法是整个实验设计的精髓，是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下： (1)化学物质的检测方法： ①淀粉——碘液 ②还原糖——斐林试剂、班氏试剂 ③CO2——Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂 ④乳酸——pH试纸 ⑤O2——余烬复燃 ⑥无O2——火焰熄灭 ⑦蛋白质——双缩脲试剂 ⑧染色体——龙胆紫、醋酸洋红溶液 ⑨DNA——二苯胺试剂 ⑩脂肪——苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液 (2)实验结果的显示方法： ①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量 ②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量 ③原子途径——放射性同位素示踪法 ④细胞液浓度大小——质壁分离 ⑤细胞是否死亡——质壁分离 ⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量，发育速度等 ⑦生长激素作用——生长速度(体重变化，身高变化) ⑧胰岛素作用——动物活动状态 ⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度 ⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基 (3)实验条件的控制方法： ①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物 ②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水 ③除去容器中CO2——NaOH溶液 ④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境 ⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热 ⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光 ⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光 ⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠 ⑨线粒体提取——细胞匀浆离心 ⑩骨的脱钙——盐酸溶液 ⑩灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌，对不同材料,灭菌方法不同：培养基用高压蒸气灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂洗净，擦干后用75％酒精消毒；整个接种过程都在实验室无菌区进行。 (4)实验中控制温度的方法：
纳氏试剂比色法测定水体中氨氮常见问题与解决办法 纳氏试剂比色法是测定水中氨氮的国家标准方法,文献[2]介绍了纳氏试剂比色法的等效方法。标准方法和等效方法对氨氮测定的介绍较为详细,但实际工作中情况复杂,很多问题需要分别深入探讨并加以解决。不少专家学者和专业技术人员对纳氏试剂比色法测定氨氮作了研究,我们根据工作经验,对纳氏试剂比色法测定水体中氨氮常见问题进行了总结,以期更好的指导实际工作。 1实验原理 1.1纳氏试剂配制原理纳氏试剂的正确配制,影响方法的灵敏度。了解纳氏反应机理,是正确配制纳氏试剂的关键。纳氏试剂由Nessler于1856年发明,有2种配制方法,常用HgCl2与KI反应的方法配制,其反应过程如下: 显色基团为[HgI4]2-,它的生成与I-浓度密切相关。开始时,Hg2+与I-按反应(1)式生成红色沉淀HgI2,迅速与过量I-按反应(2)式生成[HgI4]2-淡黄色显色基团;当红色沉淀不再溶解时,表明I-不再过量,应立即停止加入HgCl2,此时可获得最大量的显色基团。若继续加入HgCl2,反应(3)式和(4)式就会显著进行,促使显色基团不断分解,同时产生大量HgI2红色沉淀,从而引起纳氏试剂灵敏度的降低。 1 2氨氮反应原理 了解氨氮反应原理对我们理解反应过程,控制反应条件有重要意义。纳氏试剂与氨氮反应的情况较为复杂,随反应物质含量不同而分别按方程式(5)～(9)进行。 一般情况,纳氏试剂主要用于微量氨氮测定,其反应式为(5)式和(8)式。(9)式表明NH3与NH4+在水溶液中可相互转化,主要受溶液pH的影响。 1.3酒石酸钾钠掩蔽原理 水体中常见金属离子有Ca2+、Mg2+、Fe2+、Mn2+等,若含量较高,易与纳氏试剂中OH-或I-反应生成沉淀或浑浊,影响比色。因而在加入纳氏试剂前,需先加入酒石酸钾钠,以掩蔽这些金属离子,其掩蔽原理如下: 2氨氮实验的影响因子及解决方法 2.1商品试剂纯度 纳氏试剂比色法实验所用试剂主要有KNaC4H6O6·4H2O、KI、HgCl2、KOH。某些市售分析纯试剂常达不到要求,从而给实验造成较大影响,据我们的经验,影响实验的试剂主要是KNaC4H6O6·4H2O和HgCl2。 不合格酒石酸钾钠会导致实验空白值高和引起实际水样浑浊,影响测定。不纯试剂从外
高中生物实验试剂归纳 1、斐林试剂： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。 用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。 2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。 和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 3、双缩脲试剂： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。 用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。 4、苏丹Ⅲ： 用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。 用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。 5、二苯胺： 用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。 6、甲基绿： 用于鉴定DNA。 DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。 7、50%的酒精溶液：
在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。 8、75%的酒精溶液： 用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。 75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。 9、95%的酒精溶液： 冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 10、15%的盐酸： 和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11、龙胆紫溶液：(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml) 用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。（也可以用醋酸洋红染色） 12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁： 用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 14、碘液： 用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。
高中生物常用的试剂及其作用 1.斐林试剂：成分：ml NaOH(甲液)和ml CuSO4(乙液)。用法：将斐林试剂甲液和乙液混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。 2.双缩脲试剂：成分：ml NaOH(甲液)和ml CuSO4(乙液)。用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。 3.苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。 4.二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。 5.甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。 6.吡罗红：检测RNA，呈红色 7、50%的酒精溶液：用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。 8、70%的酒精溶液：用于医学临床上的消毒灭菌。 9、95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA 10、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 11. 龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色 改良苯酚品红染液：检测染色体，红色健那绿：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色。活体染色剂 %的肝脏研磨液、3%的过氧化氢、%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶） 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
14.碘液：用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红 15.丙酮：用于提取叶绿体中的色素 16.层析液：(成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油)可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。 17.二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。 18.碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。 19、mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。 20、氯化钠溶液：①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、 L时DNA的溶解度最高，在氯化钠浓度为 mol/L 时，DNA溶解度最低。②浓度为%时可作为生理盐水。 21、胰蛋白酶：①可用来分解蛋白质。 ②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散于。 22、秋水仙素：人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制正在分裂的细胞纺缍体的形成。 23、氯化钙：增强细菌细胞壁的通透性，可用于基因工程。 24、NaHCO3/ Na2CO3 Na2HPO4/ NaH2PO4：酸碱缓冲对→调节ＰＨ 25．NaCl：配制生理盐水（%）或用于提取DNA（或2M) 26．溴麝香草酚蓝水溶液：检测CO2，由蓝变绿再变黄 27.酸性重铬酸钾溶液：检测酒精，橙色变为灰色 常用的实验方法
2018高考生物：高中生物实验归纳(全面)
2018高考生物：高中生物实验归纳（全面） 一、用显微镜观察多种多样的细胞 1.实验原理 (1)放大倍数的计算，显微镜的放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 (2)放大倍数的实质：放大倍数是指放大的长度或宽度，不是指面积或体积。 (3)高倍显微镜的作用：可以将细胞放大，更清晰地观察到细胞的形态、结构，有利于区别不同的细胞。 2.操作步骤 [深度思考] (1)如何区分目镜与物镜，其长短与放大倍数之间存在怎样的关系？ 提示目镜无螺纹，物镜有螺纹。物镜越长，放大倍数越大；目镜越长，放大倍数越小。 (2)为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野中央，再换高倍物镜观察？ 提示低倍镜下视野范围大，而高倍镜下视野范围小，如果直接用高倍物镜观察，往往由于观察的物像不在视野范围内而找不到。因此，需要先用低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野中央，再换高倍物镜观察。 (3)如何把物像移到视野中央？ 提示物像在视野中偏向哪个方向，装片就向哪个方向移动，简称“偏哪移哪”。 (4)若视野中出现一半亮一半暗；观察花生切片标本材料一半清晰一半模糊不清，出现上述两种情况的可能原因分别是什么？ 提示前者可能是反光镜的调节角度不对；后者可能是由花生切片厚薄不均匀造成的。 (5)若所观察视野中有“污物”，应如何判断“污物”位置？ 提示 [方法技巧]
1.关注显微镜使用的“4”个易错点 (1)必须先用低倍物镜观察，找到要观察的物像，移到视野中央，然后再换用高倍物镜。 (2)换用高倍物镜后，不能再转动粗准焦螺旋，只能用细准焦螺旋来调节。 (3)换用高倍物镜后，若视野太暗，应先调节遮光器(换大光圈)或反光镜(用凹面反光镜)使视野明亮，再调节细准焦螺旋。 (4)观察颜色深的材料，视野应适当调亮，反之则应适当调暗。 2.显微镜下细胞数目的两种计算方法 若视野中的细胞为单行，计算时只考虑长度和宽度；若视野中充满细胞，计算时则要考虑面积的变化。 (1)若视野中为一行细胞，高倍镜下细胞数量与低倍镜下细胞数量之比等于其放大倍数之比的倒数。 (2)若视野中充满细胞，则高倍镜下细胞数量与低倍镜下细胞数量之比等于其放大倍数之比的倒数的平方。 二、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1.实验原理 2.实验步骤 [深度思考] (1)上述实验选材的标准是什么？ 提示①被检测物质含量丰富；②材料接近无色；③易取材，易操作等。 (2)实验中，在加相应试剂之前为何要留出部分组织样液？ 提示作为对照，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。 (3)鉴定还原糖时使用的斐林试剂为何要现配现用？ 提示因为斐林试剂很不稳定，容易产生蓝色的Cu(OH)2沉淀，所以应将甲液和乙液分别保存，使用时现配现用。 (4)蔗糖溶液中加入斐林试剂后呈现什么颜色？ 提示蔗糖属于非还原糖，不与斐林试剂发生颜色反应。观察到的现象不是无色，而是蓝色 [Cu(OH)2的颜色]。 (5)在使用双缩脲试剂时，为什么要先加入试剂A，后加入试剂B? 提示先加入试剂A，造成碱性环境，只有在碱性环境中，蛋白质才容易与Cu2＋发生颜色反应。 (6)鉴定蛋白质时，加入试剂B后，如果没有产生紫色反应，可能的原因是什么？ 提示可能加入的双缩脲试剂B过量，CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)2絮状沉淀，会遮蔽实验中所产生的紫色，影响观察结果。 (7)脂肪鉴定实验中为什么用50%的酒精洗去浮色，而不用清水？ 提示因为苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ易溶于有机溶剂酒精中，而不溶于清水中。
(2017·全国Ⅰ，29)根据遗传物质的化学组成，可将病毒分为RNA病毒和DNA病毒①两种类型。有些病毒对人类健康会造成很大危害。通常，一种新病毒出现后需要确定该病毒的类型。假设在宿主细胞内不发生碱基②之间的相互转换。请利用放射性同位素标记③的方法，以体外培养的宿主细胞④等为材料，设计实验以确定一种新病毒的类型。简要写出(1)实验思路，(2)预期实验结果及结论即可。(要求：实验包含可相互印证的甲、乙两个组⑤) 审题关键 信息①：病毒营寄生生活，由蛋白质和核酸组成，核酸是DNA或RNA，只含有二者中的一种，DNA和RNA在化学组成上的区别如下： 信息②：强调了碱基，二者碱基的区别：DNA特有T，RNA特有U。 信息③：放射性同位素标记法是指用放射性同位素替代某化合物中的特殊元素，来追踪该化合物的运行和变化规律。回忆相关内容： 信息④：联想T2噬菌体遗传物质的探究实验和病毒的寄生特点，标记病毒需要先用含有放射性元素的培养基培养宿主细胞，再让病毒去侵染标记的细胞，子代病毒就会被标记。 信息⑤：甲、乙两组要形成对比，结合信息①、②、③、④可判断出，应分别用放射性同位素标记DNA成分中的T和RNA成分中的U。 参考答案 (1)实验思路 甲组：将宿主细胞培养在含有放射性标记的尿嘧啶的培养基中，之后接种新病毒。培养一段时间后收集病毒并检测其放射性。乙组：将宿主细胞培养在含有放射性标记的胸腺嘧啶的培养基中，之后接种新病毒。培养一段时间后收集病毒并检测其放射性。
(2)结果及结论：若甲组收集的病毒有放射性，乙组无，即为RNA病毒；反之为DNA病毒。错解例析 错例：用含有放射性同位素标记的尿嘧啶和胸腺嘧啶的培养基培养病毒。一段时间后收集病毒并检测其放射性。 错因分析：没有分成甲、乙两组，而是用同时含有放射性同位素标记的尿嘧啶和胸腺嘧啶的培养基来培养，不能形成对照。病毒不能直接用培养基培养，这样设计不科学。 实验设计遵循的四大基本原则 1．单一变量原则：即除自变量(实验变量)以外，应使实验组与对照组的无关变量保持相同且适宜。如生物材料相同(大小、生理状况、年龄、性别等)、实验器具相同(型号、洁净程度等)、实验试剂相同(用量、浓度、使用方法等)和条件相同(保温或冷却、光照或黑暗、搅拌、振荡等)。 2．对照原则：应设置对照实验，使实验组与对照组的自变量不同(其他因素都相同)，以便消除无关变量对实验结果的干扰，增强实验结果的可信度。 3．平行重复原则：在实验设计中为了避免实验结果的偶然性，必须对所做实验进行足够次数的重复，以获得多次实验结果的平均值，保证实验结果的准确性。 4．科学性原则：在设计实验时必须有充分的科学依据，即实验目的要明确，实验原理要正确，实验研究的材料和实验方法的选择要恰当，整个实验设计的思路和实验方法的确定都不能偏离实验原理、有关的生物学知识及其他学科领域的基本知识。 1．已知蛋白质和双缩脲试剂反应呈现紫色，请你根据给出的实验材料设计一个验证唾液中含有蛋白质的实验，要求写出(1)基本的实验步骤，(2)预期实验结果和结论。 材料用具：双缩脲试剂A液、双缩脲试剂B液、蛋清稀释液(含有丰富蛋白质)、水、小烧杯、玻璃棒、试管、滴管和滴瓶、镊子、脱脂棉。 答案(1)步骤： ①用清水漱口后取适量唾液到小烧杯中，备用； ②取2 mL蛋清稀释液和2 mL唾液分别加入甲、乙两支试管中； ③分别向两支试管中加入双缩脲试剂A液1 mL，振荡后加入双缩脲试剂B液4滴，振荡均匀后静置； ④观察并对照两支试管的颜色。 (2)预期结果和结论：甲、乙两支试管都呈现紫色，说明唾液中含有蛋白质。 解析要验证唾液中含有蛋白质，可采取设置对照实验的方法。取两支相同的试管，在其中一支试管中加入唾液，在另一支试管中加入蛋清稀释液作为对照，经过相同的处理后，根据
高中生物实验总结 实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA 绿色（甲基绿试剂），RNA 红色（吡罗红试剂） 分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 实验二物质鉴定 还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹III ～橘黄色 脂肪 + 苏丹IV～红色 蛋白质 + 双缩脲试剂～紫色反应 1、还原糖的检测 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） ★模拟尿糖的检测 1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。 2、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓ 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓ 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）
实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞 一、实验目的： 1、学会如何使用显微镜观察细胞； 2、了解细胞的结构； 3、学会制作临时装片。 二、实验材料：（实验材料可换）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片 三、实验用具：载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜（物镜5X、10X、40X） 四、方法步骤： 1、制作松针的临时切片： （1）取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。 （2）将土豆切成条状（截面约：0.5X0.5cm)取两条，将一根松针夹在两个土豆条之间，用刀片削成尽量薄的薄片，削时，手腕不动，靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较薄的切片，置于载玻片的水滴上。 （3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作。 2、观察切片： （1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。 （2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。（3）使用5X物镜观察切片，使松针切片在视野中心，换成10X物镜，观察松针叶面横切结构。 （4）换成40X物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构，画图。 3、动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似） 4、动物神经细胞永久装片的观察。 五、考点提示： 1、松针的叶面结构是什么样的？ 2、动物细胞的结构是什么样的？与植物细胞又什么不同？ 3、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何？物体的大小如何？ 4、如何调节焦距？ 5、如何才能使切片尽量的薄？切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。 实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。 二、实验原理： 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的 分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。
高中生物实验试剂归纳 ?1、斐林试剂： ?成分：0.1g/ml?NaOH（甲液）和0.05g/ml?CuSO4（乙液）。 用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。 ?2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。 和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。 ?3、双缩脲试剂： 成分：0.1g/ml?NaOH（甲液）和0.01g/ml?CuSO4（乙液）。 用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。 ?4、苏丹Ⅲ： 用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。 用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。 ?5、二苯胺： 用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。 ?6、甲基绿： 用于鉴定DNA。 DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。 ?7、50%的酒精溶液： 在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。
?8、75%的酒精溶液： 用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。 75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。 ?9、95%的酒精溶液： 冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 ?10、15%的盐酸： 和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。 ?11、龙胆紫溶液：(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml) 用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。（也可以用醋酸洋红染色） ?12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁： 用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶） ?13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液： 用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 ?14、碘液： 用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。 ?15、丙酮： 用于提取叶绿体中的色素。 ?16、层析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93
详述纳氏试剂的配制方法 纳氏试剂法测氨氮的详细步骤： 一、原理 碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物,其色度与氨氮含量成正比,通常可在波长410—425nm范围内测其吸光度,计算其含量.本法最低检出浓度为0.025mg/L （光度法）,测定上限为2mg/L. 二、仪器 1．500mL全玻璃蒸馏器 . 2．50mL具塞比色管. 3．分光光度计. 4．pH计. 三、试剂 配制试剂用水均应为无氨水. 1．无氨水：可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后,重蒸馏得到. 2．1mol/L氢氧化钠溶液. 3．吸收液：①硼酸溶液：称取20g硼酸溶于水中,稀释至1L. ②0.01mol/L硫酸溶液. 4．纳氏试剂：称取16g氢氧化钠,溶于50mL水中,充分冷却至室温. 另称取7g碘化钾和碘化汞(HgI2)溶于水,然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中.用水稀释至100mL,贮于聚乙烯瓶中,密塞保存. 5．酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)溶于100mL水中,加热煮沸以除去氨,放冷,定容至100mL. 6．铵标准贮备溶液：称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NH4Cl)溶于水中,移入1000mL 容量瓶中,稀释至标线.此溶液每毫升含1.00mg氨氮. 7．铵标准使用溶液：移取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中,用水稀释至标线.此溶液每毫升含0.010mg氨氮. 四、测定步骤 1．水样预处理：无色澄清的水样可直接测定；色度、浑浊度较高和含干扰物质较多的水样,
需经过蒸馏或混凝沉淀等预处理步骤. 2．标准曲线的绘制：吸取 0 、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0mL铵标准使用液于50mL比色管中,加水至标线,加1.0mL酒石酸钾钠溶液,混匀.加1.5mL纳氏试剂,混匀.放置10min后,在波长420nm处,用光程10mm比色皿,以水为参比,测定吸光度. 由测得的吸光度,减去零浓度空白管的吸光度后,得到校正吸光度,绘制以氨氮含量（mg）对校正吸光度的标准曲线. 3．水样的测定：分取适量的水样（使氨氮含量不超过0.1mg）,加入50mL比色管中,稀释至标线,加1.0mL酒石酸钾钠溶液（经蒸馏预处理过的水样,水样及标准管中均不加此试剂）,混匀,加1.5mL的纳氏试剂,混匀,放置10min. 4．空白试验：以无氨水代替水样,作全程序空白测定. 五、计算 由水样测得的吸光度减去空白实验的吸光度后,从标准曲线上查得氨氮含量（mg）. 氨氮(N,mg/L)=m×1000/V 式中：m-——由校准曲线查得样品管的氨氮含量（mg）； V——水样体积（mL）. 注意事项 1、纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例,对显色反应的灵敏度有较大影响.静置后生成的沉淀应除去. 2、滤纸中常含痕量铵盐,使用时注意用无氨水洗涤.所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污.