植物组织培养实验报告
陈裴
（201101生物科学学号：20114089）
一、实验目的:
1了解MS培养基大量元素、微量元素、铁盐、有机元素、激素母液的配置；
2熟悉工作培养基的配置；
3掌握湿热灭菌法进行培养基和接种工具的灭菌；
4了解植物细胞脱分化原理，学习诱导愈伤组织的接种方法；
二、实验原理：
植物细胞全能性：任何生活细胞都具有产生一个完整个体的全套基因组，在适宜的条件下，细胞具有发育成完整植株的潜在能力。
三、实验步骤
（一）培养基的配制与灭菌
（1）配制培养基的准备阶段
a.取30个培养瓶，用自来水（洗衣粉水）洗净瓶、烧杯等容器，再用蒸馏水把每个培养瓶、烧杯润洗一下。带晾干后贴上标签
b.在称量纸上分别称取9.0g琼脂，36.0g蔗糖
c.在一个烧杯（250ml）中，依次加入下列各种母液：大量元素母液I，60ml、大量元素II，60ml、微量元素母液，12ml、铁盐母液12ml、有机母液I，12ml、有机母液II，12ml
（2）配置培养基
a.去一个烧杯（2000ml），加入800ml左右蒸馏水，放在电炉子上加热，在蒸馏水温度大约60-70℃时将之前称取的琼脂放入烧杯中，不断搅拌加热溶解待完全溶解后把之前称好的蔗糖和取好的母液直接倒入烧杯
b.加蒸馏水定容到1200ml，加热并不断搅拌熬至溶液呈透明状
c.当温度降到60℃左右时，用HCl和NaOH将溶液pH调至5.8
d.用大量注射器以每瓶40ml培养基分装在培养瓶中，有两瓶标注为对比，直接盖紧培养瓶盖。另取7个培养瓶，分别向每一瓶中加入200μLNAA和400μL6-BA，盖紧培养瓶盖。再取7个培养瓶，分别向每一瓶中加入400μLNAA和800μL6-BA，盖紧培养瓶盖。再取7个培养瓶，分别向每一瓶中加入400μL2,4-D和200μLKT，盖紧培养瓶盖。再取7个培养瓶，分别向每一瓶中加入800μLNAA和400μL6-BA，盖紧培养瓶盖。
（3）高压湿热灭菌
a.把用剪刀剪好的圆形纸片放进培养皿中，培养皿用报纸包好
b.把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好
c.将培养瓶、培养皿、接种工具放到高温灭菌锅中灭菌121℃，20min。
（二）植物组织的接种及培养
（1）实验前准备工作
a.接种前半小时用75%的酒精喷洒接种室，将培养基及接种工具放入超净工作台台面，开鼓风机，用75%的酒精擦拭超净工作台台面和有关工具，打开紫外灯
b.将绿豆芽分开两半，在流水中冲洗20min，在洗衣粉水中仔细清洗，在用流水冲洗，放到培养皿中
c.洗净双手，用75%酒精擦拭双手
d.接种前关掉紫外灯
（2）外植体灭菌及接种
a.将洗好的豆芽在75%的酒精中浸泡8s后迅速把酒精倒出，迅速加入无菌水漂洗多次，在氯化汞中浸泡8min，并不断搅拌，倒掉氯化汞，用无菌水多次漂洗，在装入无菌培养皿中备用
b.打开包培养皿、接种工具的报纸，将接种工具在75%酒精中浸泡，后用酒精灯火烧，待冷却后用手术刀将绿豆芽子叶切成小块，放到无菌培养皿中待用，取一个培养瓶，打开瓶盖，用酒精灯将瓶口、瓶盖用火烧，将盖子翻转放到瓶身用一只手拿培养瓶，另一只手取刚才切好的绿豆芽子叶，靠近酒精灯迅速将材料接种到培养瓶中，每瓶接种3粒，接种完后盖紧瓶盖，再次用酒精灯灼烧瓶盖
c.待所有培养瓶接种完后，将所有培养瓶放到培养架上在25℃，黑暗下培养
d.清理并整理超净工作台
（三）定期观察培养瓶中材料的生长状况
在超净工作台上操作的不是一个人，所以增大了污染率，另外在操作过程中一些不规范的操作也可能导致污染，总体污染率不是很高。
六、实验失败分析
本实验最终没能成功，可能原因是绿豆芽子叶的全能性较弱，或者是实验处理的时期不对造成的。
七、实验收获
通过这次试验学会了配制培养基和无菌操作的过程，虽然实验还是失败了，但是其中的过程我们每个人都亲手操作了，也学到了很多知识，为以后的实验积累了宝贵的经验和知识。
思考题
一、为什么要配制母液？各种母液的扩大倍数是如何确定的？
答：（1）减少称量极微量药品的误差，保证各物质成分的准确性。（2）减少每次配制称量药品的麻烦，便于配制时的快速移取。（3）体积缩小，便于低温保藏。配制母液时。母液的浓缩倍数，一方面要根据配方中各种化合物地用量和在水中的溶解度来确定。浓缩倍数不能太高，否则可能使化合物过饱和而析出，而且浓缩倍数太高时溶解也较慢。另一方面为方便操作，以整数倍为宜，倍数与用量成
反比，也就是说凡在配制母液时称量化学试剂量少的，配制的倍数可以大到100倍。用量大的配制的倍数只要10倍。然后按一般化学混合的要求，错开阳离子（如钙离子）与阴离子（如硫酸根离子）以免混合后产生沉淀。
二、高压蒸汽灭菌之前为什么要将锅内的冷空气排尽，灭菌完毕后为什么不能过早过急地排气，要待压力缓慢降至0才能打开锅盖取物？
答:完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气。因为空气的膨胀压力大于水蒸气的膨胀压力，所以当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。此时压力达到0.1MPa了，但温度达不到121℃，使灭菌不彻底。过早过急地排气，会使培养瓶内压力下降的速度比锅内慢，从而造成瓶内压力大于瓶外压力，使瓶内液体冲出容器外,另外压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢,培养瓶变形。
三、以表格的形式列出配置MS培养基母液200ml(大量元素×50、微量元素×150、铁元素×40、有机元素×80)时,各种母液成分中各化学试剂应称取的量。如果要配置200ml矮牵牛分化培养基(生芽和生根)所取母液和激素的量(激素的浓度均0.5mg/ml)。矮牵牛生芽培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼7.5g/L,矮牵牛生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L(生根培养基中1/2代表MS培养基中的所有母液的量减半)。
答：激素0.5mg/mL的取0.2mL，0.1mg/mL的取0.4mL
⑶MS培养基铁盐母液的成分及配置方法
答：（1）培养基配置技术及灭菌：包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌。（2）培养材料的选择及灭菌：供体植物材料选择、外植体的选择和处理。（3）无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌。（4）培养技术：主要是培养条件的控制，包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH、渗透压等各种化学环境条件。（5）外植体的接种及培养技术：包括初代培养、继代培养、生根培养和试管苗的驯化与移栽
五、植物组织培养技术中无菌操作应注意哪些事项？
答：（1）不准说话或对着植物材料或培养容器口呼吸
（2）接种时在近火焰处打开瓶口，使瓶倾斜，以免空气中微生物落入瓶中3整个接种操作应在近火焰处进行，且动作要迅速（4）防止操作带来的污染，接种过程中尽可能达到悬空要求（5）手不能接触接种器械的前半部分（即直接切割、触碰植物材料的部分），也不能接触瓶盖内壁或瓶口，接种操作时（包括拧开或拧上培养瓶盖时），培养瓶、试管或三角瓶宜水平放置或倾斜一定角度（45度以下），避免直立放置而增大污染机会（6）瓶盖朝上放置，接种完毕立即盖好瓶口（7）接种完一瓶用火灼烧镊子或接种针防止交叉污染（8）种子或分生组织培养，贴放培养基表面，不是插到内部，防止供氧不足（9）已消毒的植物材料接种时不慎掉在超净工作台上，不宜再用。
植物组织培养实验基本步骤 一、母液的配置 1、MS大量元素母液的配制 将大量元素配制成10倍的母液，使用时再稀释10倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的：NH4NO3 、KNO3 、KH2PO4 、 MgSO4·7H2O 、CaCl2·2H2O ，所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，最后定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 2、MS微量元素母液的配制 将微量元素配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别依次称取：MnSO4· 4H2O 、ZnSO4·7H2O 、 H3BO3 、KI 、CuSO4·5H2O 、CoCl2·6H2O ，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 3、MS铁盐母液配制 将铁盐配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：称
FeSO4·7H2O 和Na2·EDTA ，把FeSO4·7H2O和Na2·EDTA·2H2O分别置于200ml蒸馏水中，加热并不断搅拌使之溶解（磁力搅拌器，边加热，边搅拌）。保持加热，把FeSO4溶液慢慢倒入Na2·EDTA溶液中并不断搅拌，接近沸腾时停止加热，待溶液冷却后加蒸馏水到最终容积500ml，置于棕色细口瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。在室温下避光保存一段时间令其充分反应后，再置于4℃冰箱中保存备用。 4、MS有机化合物母液的配制 将有机化合物配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：肌醇、维生素B1 、烟酸、甘氨酸、维生素B6 、蔗糖，用蒸馏水依次溶解并定容至500ml后，转入500ml 细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 二、植物激素的配置 常见激素：二氯苯氧乙酸（2，4－D）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚－3－丁酸（IBA）、激动素（6-糠氨基嘌呤、 KT）、6－苄氨基嘌呤（6－BA）、赤霉素（GA3）、 1、生长素类： （1）、生长素类在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织
植物组织培养报告内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
大蒜茎尖的组织培养 谢婷婷江宋青万嫣文吕凌宇一、实验目的 掌握植物组织培养的相关理论知识及操作方法； 通过自行设计并完成实验，提高动手能力和思维能力； 利用植物细胞的全能性，使大蒜茎尖经过脱分化作用形成愈伤组织，再分化为有结构的组织和器官，最终增殖培育出大量品质优良的大蒜试管苗。二、实验原理 植物组织培养是利用植物细胞的全能性原理。植物组织培养是在无菌环境下，将离体的植物器官、组织以至单个细胞，在人工配置的培养基上培养，使其能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化”。已经脱分化的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化”。 三、实验材料、试剂和器材 1 供试材料 以购于府前菜场的大蒜为实验材料，实验在丽水学院生态学院组培实验室进行。 2 仪器与设备 超净工作台、培养事、电子天平、烧杯、容量瓶、玻璃棒、量筒、移液
管。 3 试剂 70%酒精、95%酒精、0.1%升汞、蔗糖、琼脂条、6-BA（1.5 mg/L；2.0 mg/L）、2,4-D（2.0 mg/L）、NAA（1.0 mg/L；）、IBA（2.0 mg/L）、10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物。 四、实验步骤 1.培养基的配制及灭菌 诱导培养基：MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L 出芽培养基：MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L 生根培养基：MS+IBA 2.0 mg/L （1）将MS母液（10倍的大量元素、100倍的微量元素、100倍的铁盐、100倍的有机物）按顺序排列、检查是否失效。 （2）在装有3/4蒸馏水的容器中加入0.7%琼脂和3%蔗糖，加热溶化。（3）依次吸取适量各种母液移到容器中。 （4）用蒸馏水定容到相应体积。 （5）调节pH值(用0.1M的NaOH或HCl调节)至5.8-6.0。 （6）向培养基中加入适量激素。 （7）将配制好的培养基进行分装（20-30ml/瓶）。 （8）用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃下灭菌 20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，冷却后备用。接种操作所需的一切用具（烧杯、培养皿、灭菌水等），需同时灭菌。 （9）将灭菌后的培养基于常温下放置一星期，观察有无污染。
萍乡市武功山职业中专 园林专业实训基地建设方案 实训、实习基地是学校办学条件的重要组成部分，是提高学生实践技术能力、创新能力，提高教学质量的基础条件，其建设水平在一定程度上反映着学校的教学、科研和管理水平。 按照学校“十二五”发展规划的总体要求，本着“整合资源，调整布局，突出职业优势，提高投资效益”的原则，特制定本计划。 一、实训、实习基地现状分析 1. 校内实训基地 园艺专业现有５个专用实训室，1个２００亩的综合实训基地，１个１０亩的植物园。近三年投入资金５０万元，主要用于园林树木护理。在实训室规划和建设上，将实训室功能划分为三个层次。第一个层次完成学生的基础技能训练，使学生具有一定的基础技能和职业意识；第二个层次完成学生的专业核心技能训练，三门主干专业课程《果树栽培》、《蔬菜栽培》、《花卉栽培》充分运用现代化教学手段和实物教学手段，实施理实一体化教学，打破传统的先上理论再进行实践的教学组织方式，理论实践融会贯通，知识和技能同步形成；第三个层次完成学生的职业岗位能力训练，根据学生就业的职业岗位进行强化训练。 校内实训基地基本情况一览表
2. 校外实训基地 在校外，建有实训基地5个，供教师实践锻炼和毕业生生产实习，实现教学与生产同步，与生产紧密结合。校外实训基地详见表２。
2.主要问题 经过近10年的建设，目前初具规模。已有植物生理生态实训室（观赏植物实训室）、植物组织培养实训室、切花保鲜实训室（在建）、温室等，目前缺花艺设计室、花艺作品陈列室、园林设计模型室等。植物生理生态实训室（观赏植物实训室）设备落后。 二、实训、实习基地建设的目标和主要任务 未来3年主要建设花艺设计实训室、花艺作品展示室，植物与病虫害标本室，园林设计含模型室，以及温室、植物组织培养实训室功能完善等。 （一）教学团队建设 1.鼓励专任教师进入企业学习和锻炼，提高实践教学能力。每位教师每年至少在企业实践1个月。鼓励和支持专任教师主持或参与精品课程、示范性基地专业、示范性基地建设以及各级各类教学研究课题。双师素质教师比例提高至100％。 2．鼓励专任教师通过学历进修、短期培训、参加学术会议，提高职称与学历，提升教学研究和科学研究能力。争取有1～2名教师获得博士学位，1～2名教师晋升副教授职称。 3.不断选聘行业企业中的技术能手与能工巧匠进入教学团队，聘请他们担任实践性较强的课程的教学工作。兼职教师比例达到100％，并且进行动态调整，优中选优。 （二）实训、实习基地建设年度实施计划 2009～2011年城市园艺实训中心建设年度实施计划
甘肃农业大学农学院 药用植物组织培养实验指导 柳福智编 农学院中草药栽培与鉴定教研室 2007年8月 前言 药用植物组织培养实验是根据中草药栽培与鉴定专业的培养要求，为学生开设的一门实验课程。药用植物组织培养实验的任务是使学生加深对药用植物组织培养基本理论的理解，掌握药用植物组织培养实验的基本操作技能，学习药用植物组织培养实验的基本知识，养成严格、认真和实事求是的科学态度，提高观察、分析和解决问题的能力，为将来参加工作打下良好的基础。 编者 2007年8月 学生实验守则 1、实验前认真预习，领会实验原理，明确本次实验的目的和要求，了解实验步骤和注意事项。
2、实验时要严格按照规范操作进行，仔细观察实验现象，认真记录有关数据。 3、要认真写好实验报告，实验报告要清楚、简练、整洁。 4、学生进入实验室必须严格遵守实验室规则，服从带教老师的指导。 5、爱护实验室的仪器设备，不准将实验室的仪器设备私自带出室外。 6、严格遵守操作规程及实验时应注意的事项，在使用不熟悉其性能的仪器和药品之前，应查阅有关资料或请教指导教师，不要随意进行实验，以免损坏仪器，浪费试剂，使实验失败，更重要的是预防发生意外事故。 7、实验过程中应注意防火灾、防爆炸、防腐蚀、防污染工作，牢固树立“安全第一”意识。 8、实验结束后，一切仪器试剂应放回原处，玻璃仪器要清洗干净，一些有毒、有腐蚀性的废液应倒入废液缸内。 9、实验台面要擦试干净，由值日生负责安全卫生工作，包括清理实验室，检查水、电的开关，清除垃圾和污物，关好门窗后方可离开实验室。 药用植物组织培养实验报告一般包括以下内容和要求： （1）实验名称、实验日期。 （2）实验目的写明通过本实验要达到的训练目的。
植物组织培养实验报告 摘要：以大豆子叶为外植体，在MS培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素，以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响，并练习无菌操作。实验结果显示第2组即MS+6-BA（2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)和第 3 组即MS+KT（0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 培养基中愈伤组织诱导率较高，为较佳的愈伤组织诱导组合。 关键词：大豆；植物组织培养；无菌操作；愈伤组织 1.材料与方法 1.1实验材料：大豆子叶 1.2实验试剂与仪器 （1）试剂：75%酒精、MS干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂（NAA、2，4-D、KT、6-BA）、无菌水、升汞、NaOH溶液 （2）仪器：超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁置架、烧杯、电炉。 1.3实验方法 1.3.1培养基的配制与灭菌 1.3.1.1 配制培养基的准备阶段 （1）准备80个培养试管及封口膜，2个小培养皿、1个大培养皿，用洗衣粉、自来水洗净，再用蒸馏水把每个培养试管、润洗一下。带晾干后将试管编号1-80；（2）在称量纸上用百分之一天平分别称取1.5g 琼脂4份，7.5g 蔗糖4份，在烧杯里用千分之一天平上称取1.185g MS干粉4份（烧杯不要清洗）；
（3）剪小圆纸片40，均分在两个小培养皿小能从中自由取出为宜；剪大圆纸片10，均分在两个大培养皿中。然后分别用报纸包好。 （4）把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。 1.3.1.2 配制培养基 （1）在装有MS干粉的烧杯中按下表加入植物生长调节剂 实验所用的所有激素浓度均为0.5mg/mL 激素的加样量(ml) 编号培养基配置 6-BA NAA KT 2,4-D 1 MS+6-BA（1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L) 0.5 0.25 2 MS+6-BA（2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L) 1.0 0.5 3 MS+KT（0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 0.25 0.5 4 MS+KT（1.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L) 0. 5 1.0 （2）用量筒量取250ml（稍多）蒸馏水，取一个不锈钢杯子加入150ml蒸馏水和称量好的琼脂，在电炉子加热沸腾2min，再加入混合好的MS培养基1号和蔗糖，混合沸腾2min，用剩余的蒸馏水定容至250ml； （3）当温度降到60℃左右时，将溶液pH 调至5.8，一般加4滴NaOH溶液即可；（4）取编号1-20的培养试管，用大量注射器以每瓶12.5ml 左右培养基分装在培养试管中，用封口膜封口，4支一捆捆扎好。 （5）用相同的方法配置2-4号培养基，并分装、捆扎。 1.3.1.3高压湿热灭菌 （1）将包好的接种工具，包好的培养皿，以及分装好的试管一起放到高温灭菌
《植物组织培养》课程标准 课程名称：《园林植物植物组织培养》 课程性质：职业能力必修课 学分：3分 计划学时：45 适用专业：园艺技术、园林技术、种子生产与经营专业 1.前言 1.1课程定位 《植物组织培养技术》是一门园艺技术、园林技术等专业的基础课，也是一门实践性很强的课程。通过本门课程学习，主要培养学生将来能从事相关工作，如能够独立设计组培方案、具备培养基制备、进行无菌操作、快繁、控制污染、褐化、玻璃化等不良现象发生和分析解决问题的能力，还能够独立从事植物组织培养经营管理的工作。该课程以化学、植物学、植物生理学、遗传学等学科为基础建立起来的，为适应时代发展，结合当前高职教育改革实际，压缩理论课时，精选教学内容，增加单位时间内的知识传授量，增加实验实训课的课时。培养技能型、应用型人才，使课程教学朝着高职院校校企合作的办学模式，工学结合的人才培养模式，教学做合一的教学模式方向发展。 1.2设计思路 本课程理论课时48学时。根据植物组织培养岗位对从业人员知识、能力和素质要求，以“应用”为主旨和特征，构建课程内容模块体系。课程内容打破传统的“老三段”模式，打破学科特性，理论知识要求“必需、够用”，实践教学突出能力培养，注重知识的应用性、实践性和针对性，并以此来构建组培课结构和内容体系。在实践教学上，以“项目教学法”为主导，强化实训项目的实用性。本课程一般按照“实验室设计与培养条件要求―培养基制备―无菌操作技术―器官培养―个体植物组织培养与园艺植物栽培”的顺序进行。 2．课程目标 2.1总体目标 通过理论学习和实践锻炼，掌握植物组织培养的基本理论，能识别常见的污染、褐变、玻璃化等现象，掌握组培培养方案设计程序和器官培养要求，掌握组培各流程环节与技术要求。通过参观组培实验室，掌握组培实验室的场地选择和厂房设计的原理和方法；通过配制母液、培养基的制作、使用无菌操作技术，能熟练掌握培养基母液和激素母液的配制，并且能够独立完成培养基的制作和高压灭菌锅的使用，还要掌握不通植物材料无菌接种技术。通过个体植物组织培养的
扬州市植物组织培养实验室建设指导方案 （试行） 一、建设目的 植物组织培养是20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。在快速繁育、种苗脱毒、远缘杂交、突变育种、基因工程和生物制品等方面都得到了应用。植物组织培养技术涉及到多项高中生命科学课程中的基础知识，例如：细胞全能性原理、细胞增殖、细胞分化、植物激素及生命的基本元素和物质等。在生物选修一《生物技术》教材中，组织培养已经作为一个专题实验，成为高中升学考试的一个考点。组织培养作为一项生物技术，它对学生的动手能力和科学素养都提出新的要求，使学生能够在知识层面、能力层面和情感层面上达到了全面的拓展。 二、建设要求 组织培养实验室面积一般为96-120平方米，学生实验依据无菌间超净工作台的多少分组进行，原则上6~8人一组。 组织培养实验基于对无菌条件的严格要求，由准备室、缓冲间、无菌室、培养室和炼苗室四部分组成。 1、准备室 功能：进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 设备：准备室应具备实验边台、药品柜、水池、仪器、药品、天平、纯水机（制作组织培养基用水）、酸度计、烘干箱、高压灭菌锅、超声波清洗器及常用的培养基配制用玻璃仪器等。 2、缓冲间 功能：是进入无菌室前的一个缓冲场地，减少人体从外界带入的尘埃等污染物。 要求：缓冲间需5～8平方米，保持清洁无菌。缓冲间需安装紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。 3、无菌间 功能：也叫接种室，主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序，是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。
植物组织培养实验报告 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。 植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件
把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加
植物组织培养实验报告 一实验目的 让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。 二实验原理 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA ）和 6 –苄基氨基腺嘌呤（6 – BA ）的比例，决定了根和芽的分化。 三实验器材 （一）试剂 乙醇、IAA 或 2 ，4 – D 、HgCl 2 （或次氯酸钠）、6- 苄基氨基腺嘌呤（6-BA ） MS 培养基 （二）仪器设备 培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL ），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等 三实验步骤 1. 配制培养基 （1 ）愈伤组织诱导培养基：MS 培养基（蔗糖含量为10 g/L ，2,4 – D 含量为 2 mg/L ，琼脂10 g/L ）。 （2 ）试验培养基：在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。 吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解，6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。 2. 培养基灭菌 将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH 5.8 ，趁热分装于100 mL 三角烧瓶中，每瓶约20 mL 。待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，
植物野外实习总结报告 植物野外实习汇报 植物学的发展：(前人所做的努力) 我国中医药的发展已有数千年。祖先通过他们的勇毅同智慧发现了各种草药的药理性，寒热性。进而治疗各种病人的病症，痛苦。这就是在我国的草本植物的发展。当今已是21世纪，让中医药继续发扬光大是各科学家，医生药师的重任。 在19世纪前国外发展得较我国慢，但当代发展地十分迅速。特别是近代与当代，植物学发展一日千里，新的代表植物分子生物学，植物细胞生物学，引领植物学向更微观世纪进军。植物组织培养，植物pcr技术等在国外是较成熟的。 前人留下的问习题： 草本植物与木本植物的异同;植物体内的营养;草本植物为何高级于木本植物; 选“草本植物”的缘由： 草本植物，我们第一联想到草，草有很多用处。猪牛马羊等各类家畜也都吃草。竹子在日常生活处处可见，在我们中国还有竹子造的房屋。大自然中的野草不止是动物的食物，还能制造大量氧气，防止水土流失。 植物资源是极其丰富的，它的开发利用，能给人类带来物质财富;但若违反自然规律地滥采滥用，则会破坏资源，毁灭资源，给人
类生存造成威胁。因此，正确认识植物资源的特点，是合理利用植物资源的出发点。 意义与目的： 1培养学生初步掌握生物学的形态的鉴定技术和分类方法，培养学生具备生命科学的专业基础,以利于更好地学习和从生物学研究;为开拓,发展生态学，环境学等边缘学科研究打下良好基础。 2掌握一般的植物分类的理论基础。能认识30-50科植物。掌握重要植物标本采集的基本方法。认识(海岸)草本植物的特征。 3一般掌握大鹏半岛生物群落的植物分布类型。牢固掌握生物生态学和生物群落学的理论及其内容。 材料与方法： 植物专用钳，尖头钳，镐子，塑料袋，大编织袋，“红白蓝”大麻袋。 采集方法： 一个同学用小镐子，铲那些地上长的成株的植物;一个同学手持尖头剪或植物剪，剪下一些路边的树枝条(应该尽量带有花和果);一个同学带着大编织袋，把同组同学采集下来的植物放入袋中。 辨别技巧： 辨别植物所属科目时：应该注意植株的各种形态上的区别：根状茎，块茎;贮藏根，寄生根;单叶，复叶;轮生，对生，互生叶...... 注意：以上的特征就可以辨别大部分的植物的科目了。 花的基本构成：花萼，花被，花瓣，萼片，花冠，雄蕊群，雌
蝴蝶兰植物组织培养全过程 一实验目的： 1 掌握植物细胞组织培养的原理和方法； 2了解植物组织培养的方法； 3 学习植物组织培养的原理； 4 了解不同浓度BA对蝴蝶兰生根的影响； 5了解炼苗的作用； 6掌握训化的方法步骤； 7观察蝴蝶兰组织培养到种植的全过程，并注意其中出现的问题。 二实验原理： 蝴蝶兰为兰科蝴蝶兰属植物,因花型奇特、色彩艳丽、花期长久而享有“洋兰皇后”的美誉。蝴蝶兰原产于缅甸、菲律宾、台湾、马来西亚、印度尼西亚等热带亚洲地区,具有极高的观赏和经济价值,是国际上最具商业价值的四大观赏热带兰之一。蝴蝶兰属单茎性气生兰,再生能力弱,很难进行分株繁殖,且种子无胚乳,自然条件下难以萌发,增殖系数低,难以满足日益增长的市场需求。应用植物组织培养技术进行蝴蝶兰快速繁殖可以缩短繁育周期,获得大量成株,并可以保持优良性状,维护种质资源,是蝴蝶兰快速繁殖的有效途径。在以蝴蝶兰根尖、茎尖、叶片和花梗芽为外植体诱导原球茎时,由于根尖的诱导率低,摘取茎尖会损失母株等原因,因此在蝴蝶兰组织培养中根和茎都不是诱导原球茎的理想材料。而蝴蝶兰叶片和花梗芽作为外植体诱导圆球茎时,其诱导率较高、对母株伤害不大,是较为理想的外植体材料。 三材料与用具： 蝴蝶兰的茎尖、1/ 2MS +BA2. 5 mg/L + NAA0. 2 mg/L花梗腋芽诱导培养基、1/ 2 MS + BA3. 5 mg/L + KT1. 0 mg/L + NAA0. 5 mg/L + 椰乳10 %增殖培养基、母液、量筒、烧杯、玻璃棒、移液管、无菌水、高压灭菌器、容量瓶、pH试纸、75%酒精、2%次氯酸钠、镊子、解剖刀、超净工作台、95%酒精、穴盘等。 四方法与步骤 （1）母液的配制 根据需要的母液量配制母液，配好后要贴好标签，以防弄错。标签上要注明是什么母液和母液的稀释倍数。将配好的母液进行储藏，要用的时候可以方便使用。 配制培养液时应注意：
报告编号：YT-FS-3980-51 植物实习报告(完整版) After Completing The T ask According To The Original Plan, A Report Will Be Formed T o Reflect The Basic Situation Encountered, Reveal The Existing Problems And Put Forward Future Ideas. 互惠互利共同繁荣 Mutual Benefit And Common Prosperity
植物实习报告(完整版) 备注：该报告书文本主要按照原定计划完成任务后形成报告，并反映遇到的基本情况、实际取得的成功和过程中取得的经验教训、揭露存在的问题以及提出今后设想。文档可根据实际情况进行修改和使用。 植物野外实习报告 6－1组员： 实习日期：XX.7.19－7.22 报告编写日期: XX年9月6日 带队教师：雷安平，仙湖植物园老师（校外） 我国中医药的发展已有数千年。祖先通过他们的勇毅同智慧发现了各种草药的药理性，寒热性。进而治疗各种病人的病症，痛苦。这就是在我国的草本植物的发展。当今已是21世纪，让中医药继续发扬光大是各科学家，医生药师的重任。 在19世纪前国外发展得较我国慢，但当代发展地十分迅速。特别是近代与当代，植物学发展一日千里，新的代表植物分子生物学，植物细胞生物学，引领植
物学向更微观世纪进军。植物组织培养，植物pcr技术等在国外是较成熟的。 草本植物与木本植物的异同；植物体内的营养；草本植物为何高级于木本植物； 草本植物，我们第一联想到草，草有很多用处。猪牛马羊等各类家畜也都吃草。竹子在日常生活处处可见，在我们中国还有竹子造的房屋。大自然中的野草不止是动物的食物，还能制造大量氧气，防止水土流失。 植物资源是极其丰富的，它的开发利用，能给人类带来物质财富；但若违反自然规律地滥采滥用，则会破坏资源，毁灭资源，给人类生存造成威胁。因此，正确认识植物资源的特点，是合理利用植物资源的出发点。 一个同学用小镐子，铲那些地上长的成株的植物；一个同学手持尖头剪或植物剪，剪下一些路边的树枝条（应该尽量带有花和果）；一个同学带着大编织袋，把同组同学采集下来的植物放入袋中。
如对你有帮助，请购买下载打赏，谢谢！ 院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件 把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分；微量元素种类全，浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。 6.生长调节物质 包括天然植物激素额人工激素类似物。植物激素是一类植物自身合成、同时对其生长发育具有重要调节作用的有机化合物。生长调节物质对于离题培养中的细胞分裂分
《植物组培快繁技术》 康乃馨植物组织培养 实 验 设 计 小组成员：陈梅20141641044 郑莉20141641002 雷雨田20141641043
康乃馨植物组织培养 一、实验目的 掌握植物离体快速繁育原理、方法和完整过程。 二、实验原理 香石竹（学名Dianthuscaryophyllus）又名康乃馨，花色艳丽，开花时间长，装饰效果好，是世界上最畅销的切花之一，具有较高经济价值。由于病毒病侵害，常使植株矮化，花朵变小，花色产生斑点，退色甚至不开花，影响切花产 量和质量。通过茎尖分生组织培养，能够获得“无病毒”的健康植株，对于引 进的少而新的脱毒种苗，再进行一次茎尖培养，进一步降低基础苗中的病毒含量，并通过组织培养的方法快速繁殖，在短期内，就可以获得大量的脱毒试管苗，使引入材料迅速在生产上推广应用，取得明显的经济效益。 三、实验仪器与材料 仪器：超净工作台、酒精灯、电炉、烧杯、玻璃棒、镊子、解剖刀、接种盘、 纱布、记号笔、标签纸 试剂：75%乙醇、0.1%升汞、无菌水、MS培养基、IAA0.1mg/L、BA0.5mg/L、pH5.8-6.0、蔗糖、琼脂 材料：康乃馨带芽外植体材料 四、实验步骤 （一）培养基的配方 1、康乃馨的生芽培养基 MS+IAA(0.1mg/L)+BA(2.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖30g/L+琼脂(8g/L) pH5.8-6.0,配制300ml,用培养瓶分装10~15瓶。另外需要制备无菌水10瓶，培养瓶每人3~4瓶。纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。
2、康乃馨的继代培养基 MS+BA(0.3mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖30g/L+琼脂(8g/L)，pH5.8-6.0,配制300ml,用培养瓶分装10-15瓶。另外需要制备无菌水10瓶，培养瓶每人3-4瓶。纱布、碟子若干后二者分别用报纸包好一同灭菌。 3、康乃馨的生根培养基 MS+生根培养基为1/2MS+NAA(0.075mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂(8g/L)， pH5.8-6.0,配制0.3L，用培养瓶分装10-15瓶。另外，需要制备无菌水10瓶，每人3-4培养瓶、纱布、碟子若干后二者分别用报纸包好一同灭菌。 （二）康乃馨的生芽培养 1、无菌操作准备 将培养基、无菌水、及各种接种用具放入超净工作台，开紫外灯照射消毒20-30min,开送风开关，关紫外灯，通风10min后，打开照明日光灯。洗手、换鞋，换实验服，戴口罩，进入接种室，开启超净工作台。用纱布吸取75%酒精擦手、擦拭超净台、擦拭培养基和无菌水瓶，点燃酒精灯，镊子、解剖刀、剪刀等接种工具放入灭菌锅灭菌，待冷却后使用。 2、外植体消毒 选取康乃馨叶腋间生出的侧芽为外殖体，用自来水冲洗半小时，将材料上的泥土和灰尘及杂质冲洗干净，用解剖刀切取所需组织放入大烧杯中，用75%的酒精浸泡消毒30s，用无菌水冲洗3次，再将材料移入0.1%升汞溶液浸泡10分钟,然后在超净台内用无菌水冲洗6次。材料消毒完成。 3、外植体的制备 将消毒好的材料用无菌滤纸吸去多余的水份,然后在无菌超净工作台上的接种盘内，借助解剖刀剥离茎尖，剥取茎尖大小通常在0.3mm左右。以上操作均
云南大学本科学生毕业实习报告表 学院生命科学学院 专业园艺 学号20101070202 姓名陈灵剑 实习地点（单位）万家欢蓝莓庄园太阳魂葡萄酒庄云南省林科院云南农业大学蜂蜜研究所云南食用菌研究所云南省花卉研究所昆明制药厂医学生物所 实习时间2013 年7 月17 日至2013 年7 月25 日 2013 年10 月21 日
实习内容： 一、万家欢蓝莓庄园（2013年7月17日） 1、概况： 万家欢集团模式：果树种植—旅游—度假 近期以鲜果采摘，同时发展旅游为主；长远来说，以发展商品农业为主（对蓝莓进行深加工处理）。另外还发展养殖，只要为龟向山羊。 2、特色： 蓝莓庄园：品种以灿烂、WJH-CL-8-A为主 北美红杉大道、云南樱花、棕榈园也是一大特色 果园中红梨、苹果间作，与草木间作为景 3、介绍： 蓝莓：灌木，果实为浆果，产于北美，引进后早期在北方种植，适宜土壤PH为4.5-5.5，最适宜PH为5，需有机质较多，通透性要求较高，根系为短根系，种植时多为1m的株距，2m的行距。由于蓝莓中含有花青素、维机酸等物质，有利于人体健康，常年服用蓝莓有抗癌作用。万家欢采用容器苗，有大容器苗、中容器苗、小容器苗等，使用滴灌技术，育苗方面采用扦插育苗、组织培养，主要为扦插育苗。 北美红杉：是一种杉科北美红杉属落叶乔木，原产美国加利福尼亚州海岸，特大乔木，原产地高达110米，胸径达8米，常绿性；叶有鳞状叶与线形叶二型，球花雌雄同株；雄球花单生枝顶或叶腋；雄蕊多数；雌球花单生枝顶，下有多数鳞状叶；北美红杉树姿雄伟，枝叶密生，生长迅速。适用于湖畔、水边、草坪中孤植或群植，景观秀丽，也可沿园路两边列植，气势非凡。
《园林植物组织培养》课程标准 适用专业：园林技术、烟草栽培技术 第一部分前言 植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物材料（器官、组织、细胞、原生质体等）培养在人工控制的条件下，使其再生形成完整植株的技术。进入21世纪，生物技术发展迅猛，在植物生产中的应用愈来愈多，植物组织培养也成为生产中不可或缺的一种手段。基于工作过程的《植物组织培养》课程开发与设计，坚持以服务为宗旨，以就业为导向，直接面向生产实践，构建学校与企业供需和谐的技术平台，通过分解组培工作过程能力，将组培企业生产环节模块化，工作过程项目化、任务化，采用多种教学方法与手段，培养具有敬业精神和协作能力的专业技术人才。 一、课程性质 《植物组织培养》是园林技术、烟草栽培技术专业学习领域中的专业核心技术课程，是基于植物组织培养生产过程，突出培养学生组织培养操作技能应用的一门工学结合的课程。 本课程重视实践能力的培养，强调通过项目实战、理论与实训一体等方法，激励学生主动思考和大胆实践，进而形成积极的职业态度和和熟练的职业能力。 该课程以《植物及植物生理》、《植物生长与环境》等为前导课程，学习完本课程，学生直接进入顶岗实习阶段，在园林技术专业职业能力培养中起到了明显的支撑作用。 二、课程设计思路 围绕“工学结合，能力为本”的理念，通过校企合作，共同开发，根据组培具体工作岗位的典型工作任务，依照岗位对组培工作的职业能力要求，兼顾学生未来的可持续发展，运用项目引导教学、现场教学、企业实景教学等多种教学方法和手段，以培养学生组培职业工作能力为重点，选取教学内容。 1、面向职业岗位，注重素质结构 本课程是面向组培企业培养基制作工、组织培养接种工和组培苗驯化管理员3个岗位的需要，培养掌握组培核心职业能力的专业人才，提倡在全面素质结构基础上培养职业能力。 2、基于工作过程，建立职场环境 根据组培工作的内容，依照一般组培的工作流程，组织课程内容。依托“洋兰组培生产任务”、“铁皮石斛有机基质无土栽培技术研究”等课题，充分利用真实职业环境，组织参与真实职业活动，积累经验，锻炼学生的心智，培养学生合作共事能力，并使学生熟练掌握职业所需的主要知识、技能、态度和关键能力。 3、采用项目途径，开展体验参与 本课程构建“教、学、做一体”教学模式，以项目为载体，让学生在教师的指导下，通过实践、参与和合作等方式，实现项目目标，感受成功。在学习过程中进行情感和策略调整，以形成积极的学习态度，促进职业能力的提高。 4、注重过程评价，促进学生发展 建立能激励学生学习兴趣和自主学习能力发展的评价体系。注重学生学习的积极性和自信心。评价要有利于促进学生综合能力和健康人格的发展，促进教师不断提高教育教学水平，促进本课程的不断发展与完善。
植物组织培养实验复习题 一、名词解释 1、大量元素:指含量占生物总重量万分之一以上的元素，包括C、H、O、N、P、S、K、C、Mg等。 2、微量元素:含量占生物总重量万分之一以下的元素。 3、植物生长调节剂:人工合成的对植物的生长发育有调节作用的化学物质。 4、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官 5、细胞全能性：植物体的每个细胞都含有该植物全部的遗传信息。 6、基础培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配置的营养基质。 7、愈伤组织:人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁细胞。 8、褐变:植物组织中多酚氧化酶被激活，使酚类物被氧化成醌类物，可抑制其他酶活性，毒害外植体。 9、茎尖脱毒:茎尖分生区的病毒传播速度很慢，利用茎尖组培获得无病毒苗，来达到脱毒的目的。 10、不定芽：凡从叶、根或芽节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽。 11、污染率：污染数除以接种数，再乘以100%。 12、诱导率：愈伤数除以未污染数，再乘以100%。 13、成活率：成活数除以未污染数，再乘以100%。 14、接种：将表面消毒的外植体转接到无菌的培养基上的过程。 15、消毒：消灭材料上的病菌（不损伤植物材料）。 16、灭菌：利用物理或化学的方法，达到组织培养所学的无菌环境。 17、母液：欲配培养液的浓缩液。 18、无病毒苗：指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要危害病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。 19、植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在无菌培养基上和人工控制的环境中，使其生长、分化、增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。 20快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式 21、继代培养：继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上的培养方式。 22、生根培养：将长到一定长度的微枝（>10mm）转移到生根培养基上培养。 23、玻璃化现象：试管苗的茎叶变成透明水渍状，生长畸形，增殖系数明显下降，难以诱导生根，即使诱导生根，其根系质量极差，移栽成活率极低。 24、暗培养： 25、液体培养：将所需培养物的悬浮液在液体培养基中培养的方法。 26、脱分化：一个成熟细胞回复到分生状态或胚性细胞状态的现象。 27、分化：由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变或发育方式改变的过程。 28、热处理脱毒：利用高温下使植物组织中的病毒部分钝化或完全失去活性的方法。 1 / 6 29、微尖嫁接技术：把极小（<0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生砧木上（无菌种子培养获无菌
植物组织培养研究性学习报告 署名:徐峰刘忠和张小艾王晓瑜 内容摘要:本课题主要介绍植物组织培养的基本原理、方法和操作,以实用为 目的,使我们在了解基本原理的基础上,重点掌握实际操作技术 关键词 :植物组织培养概念植物组织培养原理组织培养培养基配制植物组织培养过程 前言:植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十多年来由于组织培养 基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。目前，植物组织培养已成为现代植物基因工程不可或缺的技术，并在科研与生产实践中起着越来越重要的作用。 正文: 1 植物组织培养的基本概念 植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、原生质体等在人工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。 2原理 植物组织培养的依据是植物细胞的“全能性”及植物的“再生作用”。1902年，德国著名植物学家 G．Haberlandt根据细胞学理论提出了一个观点，“高等植物的器官和组织可以不断分割，直至单个细胞，即植物体细胞，体细胞在适当的条件下具有不断分裂、繁殖并发育成完整植株的潜力”。1943年，美国人White在烟草愈伤组织中偶然发现形成一个芽，证实了G．Haberlandt 的论点。 不同植物所需要的生长条件不同，所用的培养基也有所不同。较常用的基础培养基有MT、MS、 SH、N6、White等。在组织培养中，愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。通过在基础培养基里添加一定浓度的外源激素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终获得再生植株或次生物质。 用于植物组织培养的材料称为外植体，其主要形式有器官、胚胎、单细胞、原生质体等。根据外植体的不同，所需要的培养基种类、培养条件、外源激素的种类及比例等均不同。植物组织培养中，影响培养力的因素是多方面的，诱导愈伤组织成败的关键在于培养条件，植物激素是诱导愈伤组织和绿苗分化的关键因素。 最常用的诱导愈伤组织的生长素是IAA、NAA和2，4一D，所需浓度为O．01～ 10 mg／L。最常用的细胞分裂素是KT和ABA，使用浓度为O．1～10 mg／L。 KT的主要作用是促进细胞分裂和愈伤组织分化。ABA对植物体细胞胚的发生