第五章食物屮毒性微生物的检验
第一节食物中毒概述
1、食物中毒的定义
指摄入了含有生物性、化学性有毒、有害物质的食品或者把有毒、有害物质当作食品摄入后出现的非传染性（不属于传染病）的急性、亚急性疾病。
食物屮毒是一种食源性疾病。暴饮暴食所致急性胃肠炎、食源性肠道传染病和寄生虫病、食物过敏、有毒食物的慢性损害和寄生虫病不属于食物中毒。
2、食物中毒的特点
（1）潜伏期短，多为集体暴发；
（2）临床表现相似，多以胃肠道症状为主；
（3）发病与某种食物有关，不食者不发病；
（4）一般无传染性。
（5）发病季节性强。
3、食物中毒的分类
（1）细菌性食物中毒
（2）真菌性食物屮毒
（3）有毒动植物性食物中毒
（4）化学性食物屮毒
4、细菌性食物中毒
1）细菌性食物中毒的定义
—指因摄入细菌或细菌毒素的食品引起的食物屮毒。
—细菌性食物中毒在国内外都是最常见的一类食物中毒。
2）流行病学特点
—发病率及病死率。
一发病季节性明显。全年皆可发生，但以5?10月较多。
—引起细菌性食物屮毒的主要食品。
主要食品：动物性食品，如肉、鱼、奶和蛋。其次：植物性食品，如剩饭、米糕、面类、发酵食品等。
3）细菌性食物中毒发生的原因及条件
食物被污染：在屠宰或收割、运输、贮藏、销售过程中受到致病菌的污染；
发生细菌繁殖：被致病菌污染的食物在较高的温度下存放，食品水分，pH及营养条件使致病菌大量生长繁殖或产生毒素；
食品在食用前未被彻底加热：污染食品未烧熟煮透或煮熟的食物受到生熟交叉污染或食品从业人员带菌者的污染；
4）细菌性食物中毒的种类
—感染型食物屮毒：进食大量活的细菌的食物，引起人体消化道的感染而造成的屮毒。
—毒素型食物中毒：细菌在食物中繁殖产生毒素而引起的食物中毒。
—混合型食物屮毒：细菌对肠道的侵入及其产生的肠毒素的协同作用而引起的食物屮毒。既有感染型又有毒素型。
5、预防原则
（1）加强食品卫生的监督与管理，防止食品在加工、运输、销售、贮存过程中被污染；
（2）低温保存食品，控制细菌繁殖和毒素形成；
（3）食品加热充分，彻底杀灭病原菌和破坏毒素；
（4）加强对食品加工从业人员的管理和卫生培训，进行就业前和定期体检。
第二节金黄色葡萄球菌及其检验
葡萄球菌在白然界中广泛存在于空气、土壤、水及物品上，特别是人和家畜的体表及外界相通的腔道检出率都相当高。
葡萄球菌常引起人及动物组织器官脓肿、创伤化脓及败血症、食物中毒。
一、生物学特性
（一）形态与染色
革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄状。无芽抱、鞭毛，大多数无荚膜。
致病性葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）菌体较小、约0.5-1 um.,普通0.4~1.2um。
（二）葡萄球菌的分类
金黃色葡萄球菌；表皮葡萄球菌；腐生葡萄球菌
（三）金黄色葡萄球菌培养特性
1、需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C、pH7.4o
2、对营养要求不高，在普通培养基中生长良好，加少量葡萄糠或血液生长更旺盛。
3、耐盐性强，在含10?15%培养基中能生长。
4、在肉汤中是混浊生长，时间过长，有少量沉淀。
5、在普通培养基上生长，可形成圆形，凸起，表面光滑，边缘整齐，不透明，直径1?2mm 的菌落，能产生黄色色素。
（四）金黄色葡萄球菌生化特性
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。在厌氧条件下分解甘露醇产酸。
甲基红阳性、V-P弱阳性，多数菌株分解尿素产氨，还原硝酸盐，不产呵味。
（五）抵抗力
1）在无芽泡的细菌中，葡萄球菌的抵抗力最强。
2）湿热80°C 30min才能将其杀死。
3）5%石炭酸，0.1%升汞中10?15min死亡。耐盐性强。龙胆紫液可抑制其生长。
4）对磺胺类药物敏感性较低。对红霉素、链霉素、氯霉素及四环素较敏感。
5）肠毒素的耐热性强。带有毒素的食物煮沸120min方能破坏其毒素。低温下2个月以上方失去毒力。
（六）金黄色葡萄球菌能产生的毒素和酶
1、溶血毒素：使红细胞溶解，培养时出现溶血坏。
2、肠毒素：可溶性蛋白。与食物中毒关系密切，耐热性强。100 °C煮沸3（）min不破坏，不受胰蛋白酶的影响，使得人、猫、猴引起急性肠胃炎症状。
3、血浆凝固酶：区分葡萄球菌是否具有致病性的重要标志。使血浆屮的纤维蛋白凝固在菌体表面。
4、杀白细胞素（杀白血球毒素）：破坏白细胞和巨噬细胞，使其失去活性，膨胀破裂。
5、溶纤维蛋白酶
6、DNA酶：与侵袭力有关。
7、透明质酸酶
二、金黄色葡萄球菌食物中毒
由肠毒素引起。通常是通过患病的动物产品以及患化脓创的食品加工人员及环境因素引起食品污染，条件适宜，就有毒素产生。
毒素进入人体后，潜伏期为1-5小时，最短15分钟，有发病快消失快的特点。
症状：先唾液分泌亢进，恶心、反复呕吐、腹痛、水样腹泻等，体温不高。病程1天，少死亡，预后良好。
三、金黄色葡萄球菌的检验
方法：增菌培养法、直接计数法
（一）增菌培养法的检验步骤（程序）
检样f稀释f 7.5%NaCl肉汤增菌培养一血平板>Baird—Parker平板分离一革兰氏染色镜检、血浆凝固酶试验一报告结果
（二）检验操作要点
1、增菌：7.5%NaC 1肉汤，3丁C 24h,呈均匀浑浊生长。
2、平板分离：
（1）血平板,37°C 24~48h
菌落成金黄色，有时为白色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有透明溶血圈。（菌体产生溶血毒素：使红细胞溶解）
（2）Baird—Parker 平板，37°C, 24h :
主要成分及作用：氯化锂、甘氨酸：抑制非致病性葡萄球的生长；丙酮酸钠：促进葡萄球菌生长；亚硏酸钾：抑制G-杆菌生长，可被金黄色葡萄球菌还原为硏盐呈黑色；卵黄：含蛋白质、卵磷脂、脂肪。菌体含卵磷脂酚，可分解卵磷脂，产生甘油脂和可溶性磷酸胆碱。在B-P平板上的菌落特征：圆形，光滑凸起、湿润、菌落直径2-3mm，呈灰色至黑色，边缘色淡周围为浑浊带，在其外层有一透明带。
3、镜检与血浆凝固酶试验
1）从B?P平板上挑収金黄色葡萄球菌的菌落进行革兰氏染色镜检。
2）如发现衙萄球菌，再做血浆凝固酶试验。
3）血浆凝固酶试验：把兔血浆滴加于载玻片的一端，然后挑取菌落与血浆充分混匀、在载玻片另一端以生理盐水代替血浆做阴性对照。混合后立即观察，若出现凝块即为阳性。
（二）直接计数法
1）釆用Baird—Parker平板，1ml样品稀释液分成0.3ml> 0.3ml> 0.4ml,接入三个平板,涂布，倒置培养。
2）平板上随机挑取五个可疑菌落，做血平板试验、镜检试验，血浆凝固酶试验。
3）计算出平板上金黄色葡萄球菌的比例数，计算出每g （ml）样品屮的菌数。
第三节沙门氏菌及其检验
一、概况
1、定义：沙门氏菌属（Salmonella）是一大群寄生于人类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌o 1885年Salmon分离到猪崔乱杆菌，且在研究中的贡献较大，遂定名为沙门氏菌属。
2、分类
沙门氏菌分为六个亚属，即I、II、III、IV、V、VI亚属。至今已发现2300多个血清型。根据其致病范围，可将其分为三大类群。
第一类群：专门对人致病。如伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌，乙型副伤寒伤门氏菌。第二类群：对动物有致病性，能引起人类食物中毒，称Z为食物川毒沙门氏菌群，如鼠伤寒沙门氏菌、
猪霍乱沙门氏菌等。
笫三类群：专门对动物致病，很少感染人，如马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌，但近年也有感染人的报道。
3、沙门氏菌食物中毒
1）沙门氏菌通过动物（或人）患病、带菌直接污染食品或通过外源性途径污染食品，主要以肉、蛋、乳和鱼类食品等多见。
2）屮毒症状主要为急性胃肠炎。潜伏期为6?12小时，最长可达24小时，病人临床表现为恶心、头痛、出冷汗、面色苍白，继而出现呕吐、腹泻、发热，体温高达38°C?40°C,大便水样或带有脓血、粘液，中毒严重者出现寒战、惊厥、抽搐和昏迷等，此菌屮毒死亡率较低。
二、生物学特性
1、形态与染色：革兰氏染色阴性，无荚膜，无芽砲，多数有鞭毛，有动力，短小杆菌。
2、培养特性：
1）需氧或兼性厌氧,最适温度37°C, pH7.2?7.4。
2）对营养要求不高，在普通培养基生长良好，37 °C, 24h,能形成屮等大小，直径2-3mm, 圆形或卵形。表面光滑湿润，无色半透明，边缘整齐的菌落。在液体培养基中，呈均匀混浊性生长，无菌膜。
3、生化特性
1）发酵葡萄糖，甘露醇，山梨醇产酸产气（鸡伤寒沙门氏菌少数不产气）。
2）不发酵乳糖，蔗糖，侧金盏花醇。
3） V-P试验（?），多数产生H2S （+ ）,不产靛基质（-）,不分解尿素（-）,苯丙氨酸脫氨酶试验（?）。
4、抵抗力
对热、消毒药及外界坏境的抵抗力不强，不耐热，60°C, 20-30min即被杀死。
冷冻对于沙门氏菌无杀灭作用，即使在?25°C低温环境屮仍可存活10个月左右。
5、抗原结构与分类
1）O抗原：也称菌体抗原，细胞壁最外层的多糖■类脂■蛋白质复合物。耐热，100°C 2.5h 不被破坏。可将菌体进行分群或组。（A、B、…乙01、02、…），引起人类疾病的主要在A-F群，且此几个群包含了95%以上的沙门氏菌。
2）H抗原：也称鞭毛抗原，鞭毛蛋白。不耐热，60°C 15min可破坏。每群（组）沙门氏菌根据H抗原进行分型或种。（分为两相；第一相（特异相）（a、b、???z, zl,z2,…z55）,第二相（非特异相）（1、2、…）
3）Vi抗原：也称表面抗原（荚膜抗原），糖脂，具有阻抑O抗原发生凝集的现象，极少数菌含有。不耐热，60°C 30min或100 °C 5 min即可破坏。
6、致病性
沙门氏菌经口进入人体以后，在肠道内大量繁殖，经淋巴系统进入血液。随后，沙门氏菌在肠道和血液屮受到机体的抵抗而被裂解、破坏，释放大量内毒素，使人体屮毒，出现屮毒症状。
三、微生物检验
（一）基本程序
检样-＞增菌（前增菌）一分离培养?生化试验初步鉴定一血清学反应最后鉴定一报告
1、前增菌
目的：冻肉、蛋品，乳品及其它加工食品，菌体受损处于濒死状态。首先需要进行前增菌。即用
无选择性的培养基使处于濒死状态的菌恢复活力。
方法：食品制成1： 10稀释液，用不加任何抑菌剂的培养基：缓冲蛋白陈水（BP）进行增菌。时I'可一般为4h。干蛋品增菌时间：18-24h。
未经过加工的食品，检验沙门氏菌不需前增菌，直接进行选择性增菌即可。
2、选择性增菌
目的：使沙门氏菌优势繁殖，其他细菌受到抑制。
方法：直接进行选择性增菌的食品应制成1： 1稀释液以提高检出率，因为食品中的沙门氏茵数量较少。
常用培养基：亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）； I川硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）、氯化镁孔雀绿增菌液（MM）,此培养基中都含有抑制剂。
培养基的选择：SC +TTB或SC +MM
增菌时间：18?24h。
3、平板分离
目的：在培养基中加入指示系统，主要使沙门氏茵和埃希氏菌的菌落特征分开。
分离培养基：
（1）亚硫酸祕琼脂（BS）（含硫化氢指示系统）。
（2）DHL、HE、WS、SS琼脂（含乳糖指示系统、硫化氢指示系统）。
方法：取一环增菌液分别划线接种于：亚硫酸钳琼脂平板（BS）和DHL琼脂平板（或HE、SS、WS琼脂平板）各一个，于36±1°C分别培养18—24小时（DHL、HE、SS）或40—48小时（BS）。两种指示系统：
1）乳糖指示系统：含乳糖和酸碱指示剂，分离沙门氏菌亚属I、II、IV、V、VI和埃希氏菌。
I、II、IV、V、VI亚属：乳糖试验阴性；埃希氏菌阳性，使培养基中指示剂（如：中性红、漠麝香草酚蓝）颜色变化，通过菌落颜色变化可将其分开。
2）硫化氢指示系统：含二价铁盐和含硫氨基酸，分离III亚属和埃希氏菌。
III亚属：乳糖试验阳性，其硫化氢试验阳性，埃希氏菌阴性，通过菌落颜色区分，III亚属菌落为黑色，或中心为黑色。
表2沙门氏菌各属在选择性培养基上的菌落特征
4、生化试验鉴定到属
目的：经选择性培养，只能说明对能是沙门氏菌，因为肠杆菌科中的某些菌屈和沙门氏菌菌落特征相似，埃希氏属屮极少部分菌株也不发酵乳糖，故需进一步鉴定。
方法：1）典型沙门氏菌的反应：
（1）初步生化试验：三糖铁试验（表3）；
（2）进一步生化试验：靛基质、pH7.2尿素酶、KCN、赖氨酸脱竣酶试验。
若反应结果如表4-A1 :可判断为沙门氏菌属。
2）非典型反应：若以上五项生化试验的结果如表4?A2、Bl,补做其他生化试验（如：廿露醇、山梨醇、ONPG试验等），以判定结果。（只有斜面产酸、同时硫化氢阴性的菌株可排除是沙门氏菌）
5、血清学分型试验
1）目的：确定菌型。
市售沙门氏血清有11种因子血清、30种因子血清、57种因子血清和163种因子血清,能分别鉴定个别常见、最常见、常见、所有的沙门氏菌的菌型。
2）鉴定原则：先用多价血清鉴定，再用单因子鉴定；先用常见菌型的血清鉴定，后用不常见菌型的血清鉴定。
3）方法：采用玻片凝集试验。对于沙门氏菌，先用A-F群的血清鉴定，后用A-F群外的血清鉴定，以确定O群；确定O群后，再用H因子血清确定菌型。根据O因子血淸和H因了血清鉴定的结果确泄O抗原和H抗原，最后查沙门氏菌抗原表，确泄菌型。
6、检验结果的报告
1）凡血清学鉴定与生化反应均符合者，报告发现沙门氏菌。
经检验，XXX食品发现有沙门氏菌。
2）凡血清学鉴定与生化反应均不符合者，报告未发现沙门氏菌。
第四节肉毒梭菌及其检验
一、生物学特性
1、形态与染色特征：革兰氏阳性短粗杆菌，芽范呈椭圆型，粗于菌体，位于次极端，使细菌呈汤匙状或网球拍状。有周身鞭毛，无荚膜。
2、培养特征
1）严格厌氧，可在普通琼脂平板和血平板上生长。
2）普通琼脂上形成灰白色，半透明、边缘不整齐，呈绒毛网状、向外扩散的菌落。
3）血液琼脂：菌落周围有溶血区。
4）肉渣肉汤：呈均匀浑浊生长，产生大量气体。
5）发育最适温度为28?37 °C , pH为6.8—7.6,产毒的最适pH为7.8—8.2。
3、生化特性
分解葡萄糖、麦芽糖、果糖，产酸产气。
液化明胶，缓慢液化凝固血清，产生H2S （ + ）,不能还原硝酸盐。
4、抵抗力
1）肉毒梭菌芽泡体抵抗力很强，耐煮沸1?6小时，若藏深藏于食品中，或者数量过多，虽经高温灭菌，有吋也不易杀死芽抱。
2）肉毒毒素80°C 30分钟或100°C 10分钟才能完全破坏。对酸的抵抗力比较强，可在胃液24小时不被破坏，可被胃吸收。
5、菌型与毒素
根据所产生肉毒毒素的抗原性不同，肉毒梭菌可分为7个型（A、B、C、D、E、F、G）, 引起人类疾病的以A、B型最为常见。
肉毒毒素的毒性比鼠化钾强1万倍，是已知最剧烈的毒素，对人的致死量为0」?l.Ougo
二、肉毒梭菌食物中毒
肉毒梭菌常出现在未经妥善消毒的肉食罐头或放置时间过长的肉制品，所产的肉毒毒素是一种与神经亲和力较强的毒素，毒素能阻止乙酰胆碱的释放，导致肌肉麻痹和神经功能不全。在临床上表现以屮枢神经系统中毒症状为主。潜伏期长短不一，短者2小时，长者可达数天，一般为12?24小时。
早期为瞳孔放大、明显无力、虚弱，晕眩，继而出现视觉不清和雾视，愈来愈感到说话和吞噬困难，通常还可见到呼吸困难。体温一般正常，胃肠道症状不明显。病程一般为2?3天，也有长达2?3星期之久的。
肉毒屮毒死亡率较高，据报道可达30%?50%。
三、肉毒梭菌检验
肉毒毒素的检出被看做是肉毒中毒实验室诊断的根本方法。
检样经均质处理后，及时接种培养，进行增菌、产每培养，同时进行毒素检测试验。毒素检测试验结果证明检样中有无肉毒毒素及有何型肉毒毒素存在。
1、样品采集
食品：按常规；人体：呕吐物、血、胃液。
2、样品处理
液体：直接接种；
固体，半固体:加入等量明胶磷酸盐缓冲液研碎后接种（肉毒素在偏酸的明胶溶液中较稳泄）3、增菌培养：接种于庖肉培养基屮，30°C厌氧培养5d,若无长，再培养10d,到期无生长，报告“未发现肉毒梭菌”，有生长，取培养液离心，上清液进行毒素检测，沉淀用于分离培养。4、毒素检测
1）制备注射液一腹腔注射一检出试验一证实试验
2）取离心上清液和胰酶处理液分别注射小白鼠2只，每只0. 5mL,观察4天。对照：注射经灭菌的明胶磷酸盐缓冲液注射液0. 5mL。如有肉毒毒素存在，小白鼠一般注射后24h 内发病、死亡。最快从lOmin开始。主要症状为竖毛，四肢麻痹，全身瘫痪，呼吸困难，呈现峰腰，最终死于呼吸麻痹。
凡能致小鼠发病或死亡者，取上清液3份作证实试验。
1份加等量多型混合肉毒抗毒素诊断血清。混匀，37°C作用30min；
1份加等量明胶磷酸盐缓冲液，混匀，煮沸10分钟；
1份加等量明胶磷酸盐缓冲液，混匀即可。
3份混合液备注小鼠2只，每只0. 5mL o观察4天，若含抗血清和加热处理的注射液不致小鼠死亡，未经处理的注射液致小鼠死亡，则可判定食品中有肉毒毒素的存在，必要吋进行毒力测定和定型试验。
5、分离培养
（1）分离培养：选取经毒素检测证实含有肉毒毒素的增菌培养物的沉淀物，加无菌生理盐水稀释至原体积，取菌液划线接种于卵黄琼脂平板，35°C厌氧培养48h,菌落及其周围培养基表面覆盖着特有的虹彩样（或珍珠层样）薄层，G型除外。
（2）产毒培养：挑収可疑菌落接种于庖肉培养基，30°C培养5d。
（3）培养检查：取庖肉培养液接种两个卵黄琼脂平板，分别在35°C的需氧和厌氧条件下培养48h,观察生长情况及菌落特征。肉毒梭菌只在厌氧条件下才能生长，并具上述菌落特征。革兰氏染色镜检。
6、结果：报告一：检样屮含有某型肉毒素。
报告二：检样中含有某型肉毒梭菌。
报告三：由检样分离的菌株为某型肉毒梭菌。
第五节溶血性链球菌及其检验
一、生物学特性
（一）形态与染色：1）呈球形或卵圆形，直径0.5um?lum ,链状排列（长短不一）。2）革
兰氏染色阳性，衰老培养物常成阴性。3）无芽抱、无鞭毛、在血清肉汤中形成荚膜。
（二）链球菌分类1、按溶血能力分类：（1）甲型（a ）溶血性链球菌（2）乙型（B ）溶血性链球菌（3）丙型（丫）溶血性链球菌（4）亚甲型溶血性链球菌
与人类疾病有关的大多属于乙型溶血性链球菌。
2、按血清学分类
1）根据族特异性抗原的不同，将乙型分族：用英文字母区分，共分18族：ABCDEFG
HKLMNOPQRST
2）根据表面抗原，即型特异性抗原的不同分型：用阿拉伯数字表示，如：A族由于M抗原不同分60多个型。
3）（三）培养特性
1）多数为需氧或兼性厌氧，少数为微需氧或专性厌氧。
2）对营养要求高，普通培养基不能良好生长，需加血清液、腹水等。
3）最适温度37°C pH7.4-7.6o
4）在血清肉汤培养基中，溶血菌株，形成长链，呈絮状或颗粒状沉淀生长；不溶血性菌株，形成的菌链较短，均匀浑浊生长；半溶血性菌株的生长情况介于两者之间。
5）在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、圆形突起的细小菌落，直径0.5—0.75mm, 针尖大小，菌落周围出现溶血环。
（四）生化特性
均分糖葡萄糖产酸。
对乳糖、甘露醇、水杨葫等的分解因菌株而异。
能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶、不分解菊糠。
A族菌对杆菌肽敏感。
（五）溶血性链球菌可产生的毒素和酶
1、溶血素；
2、红疹毒素（致热外毒素）；
3、透明质酸酶；
4、链激酶；
5、杀白细胞素；
6、链道酶（脱氧核糖核酸酶）、核糖核酸酶、蛋白酶、致病毒素等。
（六）抵抗力
抵抗力一般不强，D族除外，60°C 30min即被杀死，对常用消毒剂敏感。
乙型链球菌对青霍素、红霍素、氯霍素、四环素、磺胺均敏感。
（七）致病性
溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。
三、检验程序
在非沿海地区，食用受此茵污染的盐渍食品亦常有屮毒发生。
二、生物学特性
（一）形态与染色：革兰氏阴性无芽泡多形态杆菌，单端鞭毛、两端浓染。杆状、棒状、弧状，甚至球状、丝状等。
（二）培养特性
1）需氧或兼性厌氧。在2?3 %NaCl培养基中生长最好，无盐或食盐＞11%不能生长。最适温度37°C, pH7.4-8.0o
2）固体培养基（SS琼脂）上菌落光滑湿润，无色透明，具辛辣刺鼻的特殊气味，菌落完整，较扁平，如蜡滴，常与培养基紧粘而不易刮离。
3）在氯化钠血琼脂上可见溶血环。
4）在氯化钠蔗糖琼脂上菌落呈绿色。
三）生化特性
1）分解Glu产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖。
2）H?S （― ）、V-P （―）、靛基质（一）、精氨酸（一）
3）甲基红（ + ）、赖氨酸（ + ）、溶血+/-
（四）抵抗力：本菌嗜盐畏酸，在2%醋酸屮或50%的食醋屮lmin即可死亡。不耐热，56°C、5min即可杀死；90°C. lmin灭活。对低温及高浓度氯代钠抵抗力甚强。
（五）致病性：该菌株可产生一种耐热性溶血素，溶解人红细胞，引起人的急性胃肠炎。
二、食物中毒症状
潜伏期l?26h不等，主要症状有恶心、呕吐、上腹部阵发性剧烈腹痛、频繁腹泻、水样或带粘液便，无里急后重，每日5?6次，体温39°C。重症病人可有脱水、血压下降、意识不清等。病程2?4天，一般预后良好，无后遗症，少数病人因休克、昏迷而死亡。
三、检验程序
嗜盐性试验：将可疑培养物接种于不同盐浓度（0、3、7、9、11%）的氯化钠腺水屮，37°C 培养24h,观察生长情况。在盐含量为3?7%生长良好；在0、11%不生长者进行下一步的生化试验。
临床微生物学检验技术复习练习试题 厌氧性细菌及检验 选择题 A 型题 1．下列产生外毒素的细菌中哪种细菌产生的毒素引起食物中毒 A 霍乱弧菌 B 肉毒杆菌 C 白喉杆菌 D 链球菌 E 破伤风杆菌 2．预防和治疗破伤风的方法是: A 清创处理 B 有效抗生素治疗 C 注射破伤风抗毒素血清 D A+B E A+B+C 3．当一民工因铁钉深刺足底造成外伤送医院急诊时，医生应首先考虑给予注射 A．破伤风类毒素 B．破伤风抗毒素 C．白百破三联疫苗 D．丙种球蛋白 E．破伤风菌苗 4.王某，48岁，建筑工人；因牙关紧闭、四肢痉孪而入院。8天前，右脚被铁钉扎伤，伤口深，但几日后自愈。5日后右腿有些麻木和疼痛，且咀嚼不便，吞咽困难，最后全身抽搐，四肢痉挛。入院诊断为破伤风，请问下述哪项是最佳治疗原则 A 注射青霉素 B 注射破伤风抗毒素和白百破疫苗 C 注射破伤风抗毒素和青霉素 D 注射破伤风抗毒素 E 注射青霉素和白百破疫苗 5．鉴定破伤风杆菌有无致病性的最重要的根据是 A G+细长杆菌 B 顶端圆形芽孢 C 有周身鞭毛 D 专性厌氧生长 E 产生特异性外毒素 6．破伤风梭菌除致破伤风病外，还能引起何种疾病E A．菌血症 B．食物中毒
C．组织坏死 D．坏死性肠炎 E．以上均不是 7．下列搭配哪项不恰当： A 大肠杆菌EHEC组——出血性肠炎 B 炭疽杆菌——气性坏疽 C 破伤风杆菌——脐带风 D 淋球菌——尿道炎 E 脑膜炎球菌——流行性脑脊髓膜炎 8．不是肉毒梭菌特点的是 A 芽胞位于菌体次极端，菌体呈网球拍状 B 严格厌氧 C 致病物质主要是肉毒毒素 D 引起疾病主要是细菌性食物中毒 E 肉毒毒素作用机制是阻止神经组织释放乙酰胆碱 B型题 A 常因滥用抗生素所致的疾病 B 常经呼吸道所致的疾病 C 常经消化道所致的疾病 D 常经产道所致的疾病 E 常因战伤所致的疾病 1．假膜性肠炎 2．气性坏疽 3．肉毒中毒 X型题 1．可能引起食物中毒较常见的细菌有 A 金葡菌 B 伤寒杆菌 C 产气荚膜杆菌 D 破伤风杆菌 E 副溶血性弧菌 2．产气荚膜芽孢梭菌引起的疾病有 A 气性坏疽 B 坏死性肠炎 C 产褥热 D 食物中毒 E 伪膜性肠炎 3．有迁徙性生长现象的是 A 链球菌 B 变形杆菌
《微生物检验技术》期末考试试题(A 卷) 一、名词解释(每小题3分，共15分) 1、菌落 2、正常菌群 3、消毒 4、噬菌体 5、最小抑菌浓度（MIC ） 二、填空题（每空1分，共25分） 1．细菌的特殊结构 有 、 、 、 。 2.细菌生长繁殖的条件是 、 、 和气体。 3．病原菌的致病作用与 、 及 有密切关系。 4.诊断血清是用 免疫家兔等动物后取其 而制成的。一般置于 保存，使用时应避免 ， 降低效价。
5．K—B法中抑菌圈直径的大小与药物的最低抑菌浓度呈关系，即抑菌圈愈大，MIC值、细菌对药物的敏感程度。 6．、和可作为甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌的鉴别试验。 7．淋病奈瑟菌主要以方式传播，引起。 8.细菌对待测药物的敏感程度可分为、、 三级。 三、选择题(每小题1.5分，共30分)： 1、属于非细胞型微生物的是（） A、真菌 B、细菌 C、放线菌 D、病毒 E、螺旋体 2、革兰染色所用染液的顺序是（） A、稀释复红—碘液—95％乙醇—结晶紫 B、稀释复红—95％乙醇—碘液—结晶紫 C、结晶紫—碘液—95％乙醇—稀释复红 D、结晶紫—95％乙醇—碘液—稀释复红 E、稀释复红—结晶紫—碘液—95％乙醇 3、靛基质试验又称（） A、甲基红试验 B、尿素分解试验 C、硫化氢生成试验 D、吲哚试验 E、糖发酵试验 4、对人体无害的细菌代谢物是（）
A、热原质 B维生素 C、外毒素 D、内毒素 E、侵袭性酶 5、正常人体不存在细菌的部位是（） A、体表 B、口腔 C、大肠 D、尿道口 E、血液 6、实验室对接种针（环）、试管口的灭菌方法是（） A干烤法 B、流通蒸汽法 C、烧灼 D、焚烧 E、煮沸法 7、卡介苗是由何种变异而产生的（） A、形态变异 B、结构变异 C、毒力变异 D、耐药变异 E、酶活性变异 8、病原菌侵入血流并在其中大量繁殖，产生毒性代谢产物，引起严 重的全身症状，称为（） A、毒血症 B、菌血症 C、败血症 D、脓毒血症 E、 病毒血症 9、哪种动物不是微生物学检验中常用的实验动物（） A、小白鼠 B、豚鼠 C、裸鼠 D、家兔 E、马 10、下列哪项不是金黄色葡萄球菌的特点（） A、凝固酶试验阳性 B、产生溶血素 C、分解 甘露醇 D、产生耐热核酸酶 E、胆汁溶菌试验阳性 11、在普通琼脂平板上生长的化脓性细菌是（） A、金黄色葡萄球菌 B、乙型链球菌 C、肺炎
习题库 项目一食品中的微生物及其检验 一、名词解释 1、微生物： 2、食品微生物检验： 3、食品变质： 4、腐败： 5、酸败： 6、菌落总数： 7、大肠菌群： 8、MPN： 二、填空题 1、食品中的微生物的主要来源是、和。 2、引起食品腐败变质的原因主要有、、和 等方面，其中，最普遍、最主要的因素是。 3、分解蛋白质的微生物以为主，其次是和。 4、分解糖类的微生物以为主，其次是和。 5、分解脂肪的微生物以为主，其次是和。 6、国家食品卫生标准一般包括三个方面的内容：、 和。 7、微生物指标一般分为、和三项。 8、食品微生物检验包括和两个方面。 三、选择题 1、下列描述的微生物特征中，不是所有微生物共同特征的是（） A.个体微小 B.分布广泛 C.种类繁多 D.可无致病性 E.只能在活细胞内生长繁殖 2、土壤中，数量和种类最多的微生物是（）
A、细菌 B、霉菌 C、酵母菌 D、放线菌 3、我国城市饮用水卫生标准规定（） A、每1000ml水中大肠杆菌＜3个 B、每1000ml水中大肠杆菌＜30个 C、每100ml水中大肠杆菌＜3个 D、每100ml水中大肠杆菌＜30个 E、每500ml水中大肠杆菌＜3个 4、我国城市饮用水卫生标准规定（ E ） A、每ml水中细菌总数＜1000个 B、每ml水中细菌总数＜10个 C、每100ml水中细菌总数＜10个 D、每500ml水中细菌总数＜10个 E、每ml水中细菌总数＜100个 四、判断题 1、菌落计数以菌落形成单位（CFU）表示。（） 2、MPN是指可能产气的数量。（） 3、食品中病原微生物的检验，可以检验出少量的病原微生物（） 五、问答题 1、食品微生物检验的特点有哪些？ 2、食品微生物检验的任务是什么？ 3、食品微生物检验的内容主要包括哪些方面？每一个方面的检验项目是什么？ 4、食品质量的评价指标有哪些？并具体解释之。 5、食品微生物检验的意义是什么？ 6、食品中细菌总数检验的意义是什么？ 7、食品中大肠菌群检验的意义是什么？ 项目二食品微生物检验的基本条件与设备 一、名词解释 1、分辨力：
临床微生物学与检验测试题及答案——细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1.血清学诊断 2.培养基 3.基础培养基 4.选择培养基 5.鉴别培养基 6.菌落 二、填空题 1.实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、、有直接关系。 2.辅助诊断风湿热的抗“O”实验属于。 3.血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的和.第二次抗体效价比第一 次时方有诊断意义。 4.对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有、和。 5.进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于培养基或培养基。 6.细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有、和三大类。 7.属于直接凝集反应的血清学试验有和。 三、单项选择题 1.目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述不正确的是 A.减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B.减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C.减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D.减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA，故适用于免疫缺陷或低下的患者 E.减毒活疫苗一般只需接种一次即能达到免疫效果，而灭活疫苗需接种多次 2.白百破三联疫苗的组成是
A.百日咳类毒素，白喉类毒素，破伤风类毒素 B.百日咳死疫苗，白喉类毒素，破伤风类毒素 C.百日咳死疫苗，白喉死疫苗，破伤风类毒素 D.百日咳活疫苗，白喉活疫苗，破伤风死疫苗 E.百日咳活疫苗，白喉死疫苗，破伤风死疫苗 3.使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是 A.丙种球蛋白 B.胎盘球蛋白 C.抗毒素 D.白细胞介素 E.干扰素 4.关于胎盘球蛋白的叙述，错误的是 A.由健康产妇的胎盘和婴儿脐带中提取制备 B.一般含IgM C.一般不会引起超敏反应 D.主要用于麻疹，甲型肝炎和脊髓灰质炎等病毒性疾病的紧急预防 E.免疫效果不如高效价的特异性免疫球蛋白 5.伤寒病人发病第一周内，分离病原菌应采取的标本是 A.血液 B.尿液 C.粪便 D.呕吐物 E.脑脊液 6.咽喉假膜标本涂片染色后，镜检出有异染颗粒的棒状杆菌，其临床意义在于诊断 A.结核病 B.军团病 C.白喉
微生物室上岗人员操作技术基础测试卷A(化妆品） 说明：1.本试卷命题范围为化妆品微生物检测标准汇编·操作规程及相关专业基础知识 2.本测试为闭卷考试，满分为120分，时间为120分钟 3.本测试在人员入职后进行，以检验人员对工作的掌握程度。 姓名：测试时间：年月日 阅卷：成绩： 一、填空题（44*1） 1. 化妆品微生物检验项目包括：、、 、、。 液体供检样品前处理时，水溶性样品用溶解，油溶性样品用溶解。 4.在测定霉菌和酵母菌时，虎红培养基中含有，以抑制其他细菌的生长。 5. 化妆品粪大肠菌群检测时，报告被检样品中检出粪大肠菌群应符合的条件：、、 、。 6.金黄色葡萄球菌革兰氏染色镜检结果为：革兰氏，排列成 状，芽孢，荚膜，致病性葡萄球菌。 7.在电压220V时，普通30W直管型紫外线灯，在室温为20~25℃的使用情况下，紫外线辐射强度（垂直1m处）应≥ 8.卵磷脂吐温80培养基灭菌条件为℃高压灭菌分钟. 9.金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 平板上, 菌落直径为 ,颜色呈 ,边缘为色 ,周围为一带 ,在其外层有一 .圈。一般认为阳性的金黄色葡萄球菌菌株有致病力. 10.检测粪大肠菌群时，所用的双料乳糖胆盐培养基中，溴甲酚紫的作用是 培养基原理是：蛋白胨提供源和源；糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸氢二钾是；琼脂是培养基凝固剂； 伊红和美蓝是剂和剂，可抑制革兰氏阳性菌，在酸性条件下产生沉淀，形成色菌落或具黑色中心的外围的菌落。 12.高压灭菌锅必须每个月进行一次灭菌效果评价，用菌进行评价检验，而平时也要用进行检测。 13. 10-1 和10-2两个稀释度每ml的菌落数分别是260,28，则菌落总数报告值为
一、名词解释 菌落 菌落总数 大肠菌群 志贺菌属 乳酸菌 培养基 灭菌 二、多选 1关于乳及乳制品中大肠杆菌的说法正确的是()。 A：37℃培养24h能发酵乳糖 B：37℃培养24h可产酸，但不产气C：为需氧或兼性厌氧菌 D：革兰氏阴性有芽孢杆菌 2罐头食品判定为商业无菌应满足的要求是()。 A：经审查生产记录，属于正常 B：保温后开罐经感官检查、pH测定无微生物增殖现象 C：抽取样品经保温试验，未发生泄漏 D：涂片镜检或接种培养无微生物增殖现象 3常见的平板划线法有ac A：连续划线法 B：环形划线法C：分区划线法 D：穿刺法 4分离纯化方法有acd A：倾注平板法 B：斜面穿刺法 C：平板划线法 D：涂布平板法 5常用的接种方法有以下几种abc A：划线接种 B：涂布接种 C：穿刺接种 D：倾注接种 6检测的原始数据 A：可以由同一个人记录和校核 B：不能由同一个人记录和校核C：可由主检人担当记录人，但不能同时担当校核人 D：由计算机自动采集时，记录一栏可以不签 7下列关于准确度和精密度说法正确的是()。 A：准确度决定了检验结果的可靠程度 B：准确度是指测定值与平均值的符合程度 C：精密度是有系统误差决定的 D：精密度是保证准确度的先决条件
8列关于准确度与精密度关系的正确说法是()。 A：准确度高精密度一定高 B：精密度高不一定准确度就高 C：准确度高精密度不一定就高 D：精密度和准确度没有任何关系 9金黄色葡萄球菌主要特征abc A：耐盐 B：溶血 C：血浆凝固酶阳性 D：触酶试验阴性 10适合厌氧培养的细菌abc A：大肠杆菌 B：肉毒梭菌 C：志贺氏菌 D：蜡样芽孢杆菌 11微生物菌落总数不确定度评定必须考虑的因素有 A：人员 B：设备 C：环境 D：试剂 12按照《GB/T4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定》进行测定时，样品稀释溶液必须使用灭菌()，一个样品分别在两个培养皿中各加入培养基大约15mL。 A：磷酸盐缓冲液 B：生理盐水 C：缓冲胨水 D：碱性胨水 13能够通过食物传播的致病菌 A：霍乱弧菌 B：单核细胞增生李斯特氏菌 C：志贺氏菌 D：副溶血性弧菌 14常用的细菌生化反应包括() A：糖发酵试验 B：V-P试验 C：甲基红试验 D：枸橼酸盐利用试验 16沙门氏菌属的形态特征是()。 A：革兰氏阴性杆 B：有芽抱 C：有荚膜 D：大多数有动力、周生鞭毛 17志贺氏菌属的形态特征为()。 A：革兰氏阴性杆菌 B：无芽抱 C：无荚膜，无鞭毛 D：不运动，有菌毛 18一般来说，当食品中含有()时，含有志贺氏菌的可能性极大。 A：大肠菌群 B：大肠杆菌 C：沙门氏菌 D：葡萄球菌 19葡萄球菌属的形态特征是()。 A：革兰氏阳性球菌 B：无鞭毛 C：有芽孢 D：一般形成荚膜 20链球菌的形态特征是()。 A：革兰氏阳性 B：形成芽抱 C：无鞭毛 D：不运动 21属于肠杆菌科中埃希氏菌族的是()。 A：葡萄球菌 B：溶血性链球菌 C：沙门氏菌 D：志贺氏菌 22能有效防止沙门氏菌病发生的方法有()。 A：蒸煮 B：巴氏消毒 C：存放适宜温度 D：以上都不是 23有关微生物的描述正确的是()。
主治医师 (临床医学检验学)-微生物和微生物学检 验(B型题) 1、皮窗试验是测定中性粒细胞的功能 A.趋化性 B.调理功能 C.吞噬功能 D.杀菌功能 E.抗原递呈功能 2、Boyden小室法是测定中性粒细胞的功能 A.趋化性 B.调理功能 C.吞噬功能 D.杀菌功能 E.抗原递呈功能 3、NBT还原试验是测定中性粒细胞的功能 A.趋化性 B.调理功能 C.吞噬功能 D.杀菌功能
E.抗原递呈功能 4、用光学显微镜可以直接检查 A.DNA B.包涵体 C.衣壳 D.包膜 E.RNA 5、病毒的辅助结构 A.DNA B.包涵体 C.衣壳 D.包膜 E.RNA 6、用变形杆菌代替立克次体与患者血清作凝集反应的试验是 A.肥达试验 B.神奈川试验 C.锡克试验 D.ELEK试验 E.外一斐试验
7、用于肠热症的辅助诊断试验是 A.肥达试验 B.神奈川试验 C.锡克试验 D.ELEK试验 E.外一斐试验 8、用于巧克力琼脂平板的阳性质控菌株是 A.脆弱拟杆菌 B.副溶血弧菌 C.黏质沙雷菌 D.粪肠球菌 E.淋病奈瑟菌 9、用于TCBS平板的阳性质控菌株是 A.脆弱拟杆菌 B.副溶血弧菌 C.黏质沙雷菌 D.粪肠球菌 E.淋病奈瑟菌
10、用于厌氧血平板的阳性质控菌株是 A.脆弱拟杆菌 B.副溶血弧菌 C.黏质沙雷菌 D.粪肠球菌 E.淋病奈瑟菌 11、用于鉴别石膏样毛癣菌和红色毛癣菌的培养基是 A.沙保弱培养基 B.马铃薯葡萄糖琼脂 C.脑心葡萄糖血琼脂 D.皮肤真菌试验培养基 E.尿素琼脂 12、用于培养深部真菌，使二相性真菌呈酵母型的培养基是 A.沙保弱培养基 B.马铃薯葡萄糖琼脂 C.脑心葡萄糖血琼脂 D.皮肤真菌试验培养基 E.尿素琼脂 13、用光学显微镜可以直接检查的是
《微生物学检验》期末考试题-A 一.名词解释(每题3分共24分) 1.菌落 2.病毒 3.S PA 4.溶源性细菌 5.非发酵菌 6.菌群失调 7.选择性培养基 8.MIC 二.单项选择题(将答案填入表中相应位置，每题1分,共20分) 1.细菌蛋白质合成的场所是 A．中介体 B.质粒 C.核蛋白体 D.线粒体内膜 E.性菌毛 2.细菌细胞壁特有的化学结构是( ) A脂蛋白 B.胆固醇 C.脂多糖 D.肽聚糖 E.磷壁酸 3.细菌内毒素的化学成分是 C A.磷壁酸 B.脂蛋白 C.脂多糖 D.细菌素 E.荚膜多糖 4.在下列病原菌中能够产生自溶酶，胆汁溶菌试验阳性的细菌是 C A.淋球菌 B.白喉杆菌 C.肺炎链球菌 D.溶血性链球菌 E.结核杆菌 5.BCG是结核分枝杆菌的变异株，它属于 A.形态变异 B.菌落变异 C.结构变异 D.毒力变异 E.耐药变异 6.用TCBS平板分离培养病原菌是 A A.霍乱弧菌 B.结核杆菌 C.痢疾杆菌 D.嗜盐性弧菌 E.非发酵菌 7.用溴麝香草酚蓝作为指示剂的培养基是 A.尿素培养基 B.MIU培养基 C.O/F培养基 D.糖发酵培养基 E.EMB培养基 8.编码细菌耐药性的质粒是 A.F质粒 B.R质粒 C.Col质粒 D.Vi质粒 E.K质粒 9.可迟缓发酵乳糖的志贺菌是 A.痢疾志贺菌 B.福氏志贺菌 C.鲍氏志贺菌 D.宋内志贺菌 E.以上都不是 10.下列哪一类大肠埃稀菌在临床上可引起霍乱样腹泻 A.ET EC B.EP EC C.EIEC D.EH EC E.EAgg EC 11.下列毒素中引起猩红热的毒素是 A.葡萄球菌肠毒素 B.霍乱肠毒素 C.链球菌的致热外毒素 D.白喉外毒素 E.沙门菌肠毒素 12.以溶血形式作为分类主要依据的病原菌是 E
食品微生物检验技术复 习题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
名词解释 样品（sample）是指从某一总体中抽出的一部分。 食品采样（sampling）是指从较大批量食品中抽取能较好地代表其总体样品的方法。 接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 菌落总数：指一定数量或面积的食品样品，在一定条件下进行细菌培养，使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落，然后进行菌落计数所得的菌落数量。 V-P试验：某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。 生理生化试验：微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 硫化氢（H2S）试验：有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，而产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。 增殖培养基: 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。 外源性污染：食品在生产加工、运输、贮藏、销售食品过程中不遵守操作规程或不按卫生要求使食品发生污染称为外源性污染，也称为第二次污染． 环状沉淀反应：是一种定性试验方法，可用已知抗体检测未知抗原。将已知抗体注入特制小试管中，然后沿管壁徐徐加入等量抗原，如抗原与抗体对应，则在两液界面出现白色的沉淀圆环。 微生物性食物中毒：食用被微生物或微生物毒素污染的食品而引起的中毒称为微生物性食物中毒。 无菌接种操作：培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上，这过程叫做无菌接种操作。 菌落：指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。 细菌总数：指一定数量或面积的食品样品．经过适当的处理后，在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。 大肠菌群：系指一群在37度能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽胞杆菌。 淀粉水解试验：某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。 糖酵解试验：不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。甲基红（Methyl Red）试验：肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至以下，使甲基红指示剂变红。 靛基质（Imdole）试验：某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。尿素酶（Urease）试验：有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。氧化酶（Oxidase）试验：氧化酶亦即细胞色素氧化酶，为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶，氧化酶先使细胞色素C氧化，然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。硫化氢-靛基质-动力（SIM）琼脂试验：试验方法：以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度，置36±1℃培养18~24h，观察结果。培养物呈现黑色为硫化氢阳性，混浊或沿穿刺线向外生长为有动力，然后加Kovacs氏试剂数滴于培养表面，静置10min，若试剂呈红色为靛基质阳性。培养基未接种的下部，可作为对照。选择培养基:在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。鉴别培养基: 在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。 无菌技术:指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。 粪大肠菌群：系一群需氧及兼性厌氧，在℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。玻片凝集法：是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。试管凝集法：是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其含量。常用于协助诊断某些传染病及进行流行病学调查。 沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合，在有适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应（Precipitation）。絮状沉淀反应：将已知抗原与抗体在试管（如凹玻片）内混匀，如抗原抗体对应，而又二者比例适当时，会出现肉眼可见的絮状沉淀，此为阳性反应。琼脂扩散试验：利用可溶性抗原抗体在半固体琼脂内扩散，若抗原抗体对应，且二者比例合适，在其扩散的某一部分就会出现白色的沉淀线。每对抗原抗体可形成一条沉淀线。有几对抗原抗体，就可分别形成几条沉淀线。大肠菌群MPN：大肠菌群MPN是采用一定的方法，应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值。 大肠菌群值：大肠菌群值是指在食品中检出一个大肠菌群细菌时所需要的最少样品量。内源性污染：凡由动物体在生活过程中，由于本身带染的微生物而造成食品的污染者，称为内源性污染，也称第一次污染．食品腐败变质：是指食品受到各种内外因素的影响，造成其原有化学性质或物理性质发生变化，降低或失去其营养价值和商品价值的过程．
农产品质量检测专业及绿色食品生产与经营专业2015级《食品微生物检测技术》课程期末考试卷 （A卷） 一、名词解释（总分10分，每题2分） 1．菌落 2．菌落总数 3．培养基 4．乳酸菌 5．大肠菌群 二、填空题（总分20分，每空1分） 1．与食品工业密切相关的乳酸菌主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和链球菌属中的等。采用法，检测酸奶中的各种乳酸菌可以获得满意结果。 2．我国卫生部颁布的食品微生物指标主要有、和三项。 3．在菌体形态观察中，需进行制片后才能进行显微镜下观察，观察细菌时采用的制片方法是，观察真菌采取的制片方法是。 4．微生物生长需要的营养要素有、、、、生长因子和能源。 5．根据细菌的生长曲线，可将细菌的生长分为、、、 四个时期，作为研究材料应取的细菌最合适。 6．一般培养基的制备主要程序可分为：称量、、调节pH、过滤、、加塞包扎、 和无菌检查等步骤。 7．无菌室的熏蒸消毒，主要采用熏蒸消毒法，测定无菌室无菌程度一般采用法。 三、单项选择题（总分20分，每题1分，将答案写在下面） 1——5：6——10： 11——15：16——20： 1.紫外线的杀菌机理可能是（） A.紫外线的高热作用 B.紫外线的辐射作用 C.紫外线凝固细菌蛋白质 D.紫外线干扰细菌DNA复制与转录
2.革兰氏染色的关键操作步骤是（） A.结晶紫染色 B.碘液固定 C.酒精脱色 D.复染 3.热力灭菌法分干热和湿热灭菌两类，并在同一温度下湿热灭菌效力较干热要强这是因为（） A.可迅速提高温度 B.湿热有一定潜热、穿透力大，促进菌体蛋白凝固 C.迅速破坏细菌的酶系统 D.促进糖类分解 4.关于金黄色葡萄球菌的描述不正确的是（）。 A.球状菌 B.G+ C.在血平板上形成的菌落为黑色D能产生凝固酶 5.GB/T4789.2-2010菌落总数检验方法是（）。 A.平板涂抹法 B.显微镜检查法 C.平板菌落计数法 D.菌落计数器法 6.检测金黄色葡萄球菌所用的增菌液是（） A.7.5%氯化钠肉汤 B.普通肉汤 C.蛋白胨水 D.TTB 7.在测定菌落总数时，首先将食品样品作成（）倍递增稀释液。 A.1：5 B.1：10 C.1：15 D.1：20 8.奶粉检验取样前，操作人员应（） A.用95％的酒精棉球擦手 B.用75％的酒精棉球擦手和容器口周圈 C.用65％的酒精棉球擦容器口周围 D.用酒精灯烤容器口周围 9.某微生物在有氧和无氧时均可以生长并可以利用氧，它属于（）。 A.微好氧菌 B.好氧菌 C.厌氧菌 D.兼性厌氧菌 10.一般培养基高压蒸汽灭菌的条件是：（） A.121℃/15-30min B.115℃/15-30min C.130℃/15-30min D.65℃/15-30min 11.采用湿热高压蒸汽灭菌，（）是影响灭菌质量的关键。
微生物检验试题 1.下列对微生物概念表述正确的是 A.仅存在于人体 B.结构复杂，形体微小 C.可用肉眼进行观察 D.原虫不属于微生物 E.卡氏肺孢子虫属于微生物 2.下列不属于原核细胞型微生物的是 A.大肠埃希菌B新型隐球菌 C肺炎衣原体D厌氧性放线菌 E解脲脲原体 3.属于非细胞型微生物的是 A.朊粒 B.细菌 C.真菌 D.衣原体 E.支原体 4.医院感染是指 A.患者在住院前三天发生的感染 B.患者在住院前一天发生的感染 C.患者在住院期间发生的感染 D.患者出院后一天发生的感染 E.患者在住院后三天发生的感染 5.下列对临床微生物检验的工作原则表述错误的是 A.确保临床标本可靠 B.微生物学定性分析 C.全面了解机体病原微生物 D.快速准确提供信息 E.加强与临床联系 6.革兰阳性细菌细胞壁具有很强抗原性的成分是 A.外膜 B.肽聚糖 C.磷壁酸 D.聚糖骨架 E.五肽交联桥 7.下列菌有细胞壁外膜层的是 A.粪肠球菌 B.溶血葡萄球菌 C.新型隐球菌 D.产酸克雷伯菌 E.克柔假丝酵母菌 8.具有脱硫氢基作用的细菌是 A.金黄色葡萄球菌 B.肺炎链球菌 C.脑膜炎奈瑟菌
D.奇异变形杆菌 E.流感嗜血杆菌 9.能使菌体蛋白变性或沉淀的消毒剂是 A.高锰酸钾 B.过氧乙酸 C.过氧化氢 D.低浓度苯酚 E.高浓度苯酚 10.监测高压灭菌器灭菌效果应选用 A.嗜热脂肪芽胞杆菌ATCC7953 B.金黄色葡萄球菌A TCC25923 C.大肠埃希菌ATCC25922 D.枯草芽胞杆菌黑色变种ATCC9372 E.铜绿假单胞菌ATCC27853 11.不属于口腔中常见正常菌群的是 A.卡他布兰汉菌 B.大肠埃希菌 C.甲型和丙型链球菌 D.表皮葡萄球菌 E.白假丝酵母菌 12.淘米水样粪便、有腥臭味，符合的疾病是 A.细菌性痢疾 B.重症霍乱 C.病毒性腹泻 D.阿米巴痢疾 E.肠伤寒 13.鉴定致病性金黄色葡萄球菌最常用的试验是 A.耐热DNA酶试验 B.血浆凝固酶试验 C.甘露醇分解试验 D.KIA E.MIU 14.抗酸染色检查的是 A.大叶性肺炎 B.细菌性脑膜炎 C.细菌血流感染 D.结核病、麻风 E.淋病 15.具有嗜冷性的菌为 A.奇异变形杆菌 B.产酸克雷伯菌 C.小肠结肠炎耶尔森菌 D.黏质沙雷菌 E.摩氏摩根菌
《微生物学与检验》题库及答案 一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体： 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调：12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象： 24.菌血症 25菌丝： 二.填空题 1 L 型细菌是指（）。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为（）。 3 细菌 H-O 变异是指（）。 4 药敏试验所用标准培养基是，所用菌液相当于（）个细菌／ ml ，细菌接种采用（）划线接种法。 5 细菌致病因素包括（）、（）和（）。 6 细菌引起的全身感染包括（）、（）、（）和（）四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的（）。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是（）。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线（），无动力细菌穿刺接种线（）。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产（）和（）。 11 靛基质试验的原理为，细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成（），此代谢产物与加入的试剂反应，生成（）。 12 链球菌根据溶血现象分为（）、（）和（）三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为（）性，链球菌触酶试验结果为（）性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是（）。 15 抗 O 试验是测定病人血清中（）抗体效价的试验，用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是（）和（）。 17 IMViC 试验包括（）、（）、（）和（）四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现（）菌落，不分解乳糖则为（）菌落。 19 KIA 斜面红色表明，底层黄色、有气泡表明（）、（），有黑色沉淀表明（）试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括（）和（）。 21 AIDS 的传染源是（）和（），传播途径主要有（），（）和（）。 22 真菌菌落有（）、（）和（）三种。 23 病毒培养方法有（）、（）和（）。 24 病毒的基本结构由（）和（）组成，有些病毒还具有（）。 25 流感病毒根据抗原结构不同分（）、（）、（）三型，其中容易引起流感大流行的是其中的（）型。 26 防止微生物进入机体和物品的操作方法称为（）。 27 含菌量较多的标本（如粪便）的接种通常采用（）接种法。
临床微生物学检验技术试题及答案 A1题型 1. 机体抵抗病原微生物的屏障结构包括 A、皮肤与粘膜 B、血脑屏障 C、胎盘屏障 D、免疫系统 E、A、B和C 答案E 2. 有关内毒素的描述哪项是错误的 A、均由革兰氏阴性菌产生 B、其化学成分为脂多糖 C、160℃，2~4小时才被破坏 D、毒害效应具有组织器官选择性 E、毒性作用较弱 答案D 3. 下列描述哪项是错误的 A、病原菌致病力的强弱度称为毒力 B、毒力主要由侵袭力和毒素所决定 C、破伤风毒素属于内毒素 D、侵袭力是指病原菌突破宿主机体的防御功能，并能在体内定居、繁殖和扩散的能力 E、以上均不是 答案C 4. 下列哪种成分不属于外毒素 A、脂多糖 B、痉挛毒素 C、肉毒毒素 D、表皮剥脱毒素 E、霍乱肠毒素
答案A 5. 下列哪种成分不属于外毒素 A、金黄色葡萄球菌肠毒素 B、产毒性大肠杆菌肠毒素 C、白喉毒素 D、表皮剥脱毒素 E、类脂A 答案E 6. 内毒素的毒性作用包括 A、发热反应 B、白细胞反应 C、内毒素血症与内毒素休克 D、以上都是 E、A和C 答案D 7. 慢性志贺菌感染的病程一般在（）以上 A、两周 B、一个月 C、两个月 D、六周 E、七周 答案C 8. 志贺菌随饮食进入体内，导致人体发病，其潜伏期一般为 A、一天之内 B、1-3天 C、5-7天 D、7-8天 E、8天以后 答案B 9. 下列关于结核分支杆菌描述正确的是
A、类脂质为胞壁中含量最多的成分 B、产生外毒素 C、产生内毒素 D、耐药性低 E、一般采用革兰氏染色 答案A 10. 我国的卫生标准中，每升饮用水中不得超过（）个大肠杆菌 A、1 B、3 C、5 D、7 E、8 答案B 11. 大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A、产酸 B、产酸产气 C、产酸不产气 D、产气不产酸 E、以上都不产生 答案B 12. 下列何种细菌为革兰氏阴性菌 A、脑膜炎奈瑟菌 B、结核分支杆菌 C、铜绿假单细胞 D、枯草芽孢杆菌 E、白喉棒状杆菌 答案C 13. 下列何种细菌为革兰氏阳性杆菌 A、大肠杆菌 B、铜绿假单细胞
临床微生物学检验技术试题及答案A1题型 1、人类ABO血型抗原包括 A、A抗原 B、B抗原 C、O抗原 D、AB抗原 E、A抗原和B抗原 答案：E 2、ABO血型物质在人体中可引起哪几种Ab产生 A、抗B抗体 B、抗AB抗体 C、抗A抗体 D、抗O抗体 E、抗A和抗B抗体 答案：E 3、免疫耐受就是 A、非特异性无反应性 B、特异性无反应性 C、机体无反应性 D、免疫抑制性 E、对任何抗原都不反应 答案：B 4、迟发型皮肤过敏反应与下列哪种物质有关 A、IgE B、IgA C、活化B细胞 D、活化T细胞 E、活化NK细胞
答案：D 5、佐剂作用是 A、将Ag送入机体各部位 B、将Ag固定在局部 C、增强Ag免疫原性 D、赋予Ag免疫原性 E、增强机体对Ag的免疫应答 答案：E 6、下列哪种物质既有非特异性免疫也参与特异性免疫反应 A、IgG B、干扰素 C、IgA D、前列腺素 E、补体 答案：E 7、TDH 细胞是 A、产生Ab细胞 B、天然杀伤细胞 C、细胞毒细胞 D、迟发变态反应T细胞 E、依Ab杀伤T细胞 答案：D 8、关于霍乱弧菌是否侵入上皮细胞，下列说法正确的是 A、不侵入 B、侵入 C、在特定条件下侵入 D、具有侵袭基因的霍乱弧菌侵入 E、侵入后局限于上皮细胞内 答案：A 9、葡萄球菌能产生多种溶血素，其中最主要的是
A、α、β溶血素 B、α、γ溶血素 C、β、γ溶血素 D、δ、ε溶血素 E、α、γ溶血素 答案：A 10、与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是 A、产生外毒素 B、具有内毒素 C、产生溶血素 D、产生绿脓素 E、具有菌毛 答案：D 11、有荚膜的流感嗜血杆菌含有荚膜多糖抗原称作： A、V抗原 B、M抗原 C、A抗原 D、X抗原 E、S抗原 答案：B 12、下列关于铜绿假单胞菌叙述中，正确的是 A、革兰氏阳性球菌 B、革兰氏阳性杆菌 C、无芽孢 D、具有荚膜 E、无鞭毛 答案：C 13、下列何种微生物具有荚膜结构 A、军团菌 B、支原体
临床检验试题—微生物检验考试试题及答案(1)——肝炎病毒 一、概念 1.HBsAg 2.HBcAg 3.HBeAg 二、填空题 1．肝炎病毒有、、、和五种类型。 2．肝炎病毒中，由粪-口途径传播的有、；由血液和垂直途径传播的有、、；属于DNA病毒的有；属于缺损病毒的是；已有疫苗可主动免疫的是和；可进行细胞培养的是。 3．HBV的外衣壳由、和蛋白组成，构成HBV的；内衣壳由组成；核心由和组成。 4.甲型肝炎的传染源主要为和，猩猩和猿猴作为传染源的意义不大。 5.甲型肝炎的血清抗体中，表示现症感染的抗体是，而表示既往感染的抗体是。 6.乙型肝炎表面抗原（HbsAg）阳性者血清标本，在电子显微镜下可观察到3种不同 形态结构的颗粒，其传染性也不同，即小球形颗粒和以及。 7.乙型肝炎基因组为双股环壮DNA，内含4个开放读框（ORF），分别称为S 区，C区，和。 8.乙型肝炎病毒感染主要经4种传播途径，即血液传播，日常生活密切接触传播，和。 三、单选题 1.乙型肝炎病毒的核酸类型是 A.单股RNA B.双股RNA C.双股线状DNA
D.双股环状DNA E.单股DNA 2.可致慢性肝炎或肝硬化的病毒为 A. HAV，HBV和HCV B. HBV，HCV和HDV C. HCV，HDV和HEV D. HDV，HEV和HAV E. HEV，HAV和HBV 3.可传播乙型肝炎病毒的途径有 A.分娩和哺乳 B.共用牙刷，剃须刀等 C.输血，血浆及血液制品 D.性接触 E.以上均可 4.不符合血清HBsAg（+）， HbeAg（+）和抗HBc（+）的解释是 A.急性乙型肝炎； B.慢性乙型肝炎； C.乙型肝炎恢复期； D.无症状抗原携带者； E.血清有强传染性。 5.关于HAV，错误的是 A.是单股正链RNA病毒； B.能在体外细胞中培养； C.特异性预防可接种疫苗；
考试试题—微生物检验 考试日期：姓名：分数： 一、填空题 1、抽样量一般应为检验用量的 3 倍，抽样时如发现有异常或可疑的样品，应抽选有疑问的样品。 2、样品在检验前应保存在干燥处，并存放在有“待检验”标识的区域，待检样品严禁开启，以防样品检验前受到污染。 3、菌检室在检验前打开紫外灯消毒 30 分钟。 4、检验时，细菌使用营养琼脂培养基，酵母菌用 YPD琼脂培养基，霉菌用虎红琼脂培养基。 5、供试液分别稀释成 1：10，1：100，1：1000 等比例，用吸管吸取每一稀释级的供试液 1 ml，注入 2 个平皿中。 6、细菌培养是在 30-35 ℃下培养 48±2 小时。 7、菌检试验完成后，检验员应及时填写《菌检报告》，一式二份，送市场部一份，技术质管部一份。 8、霉菌、酵母菌培养是在 25-28 ℃下培养，药品培养 72±2 小时， 食品培养五天。 9、接到市场部的《菌检申请单》后，检验员按《菌检作业指南》进行 试验，并填写《菌检记录》。 10、消毒后，培养基须放在 45 ℃的水沐浴锅内恒温。 11、菌落计数，一般在平板背面用肉眼直接点数，必要时用放大镜，以防遗漏。 12、平板上有片状或斑样菌落蔓延生长以及平板受到污染时，该平板计数无 效。 13、同一稀释级的菌落数为2个平板的平均数，若2个平板菌落数相差在 1 倍以上时，该稀释级不宜采用。但2个平板菌落数均在 15 个以下时除外。 14、供试品一般按批号抽样，采用随机抽样方法抽样。 15、供试品制成供试液后，应在 1 小时内注皿操作完毕。 16、若只有一个稀释级的平均平板菌落数在计数范围内，将该稀释级的平均平板菌落数乘以稀释倍数，为报告菌数。
临床微生物学与检验测试题及答案一一细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1. 血清学诊断 o 拉圭苴 2. 培养基 3. 基础培养基 4. 选择培养基 5. 鉴别培养基 6. 菌落 二、填空题 1. 实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、____________________ 、____________________ 有直接关系。 2. 辅助诊断风湿热的抗“ O'实验属于_____________________ 。 3. 血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的____________________ 和 __________________ .第二次抗体效价比第一 次____________________ 时方有诊断意义。 4. 对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有____________________ 、 ___________________ 和___________________ 。 5. 进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于____________________ 培养基或 _____________________ 培养基。 6. 细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有____________________ 、 _____________________ 和______________________ 三大类。 7. 属于直接凝集反应的血清学试验有 _____________________ 和______________________ 三、单项选择题 1. 目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述 不正确的是 A. 减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B. 减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C. 减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D. 减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA ,故适用于免疫缺陷或低下的患者
检验技术资格考试考点精要——微生物学检验（中级） 1. 生物学按界门纲目科属种分类，种是最小单位。病毒分类：目、科、亚科、属、种。属名--VRir us 结尾的单词,亚科名--VRir inae结尾的单词,科名--VRir idae结尾的单词。目名—VRir ales。2004年ICTV公布病毒分为：73个科、11个亚种、289个属。 2. 结核菌可利用甘油为碳源，梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源，流感嗜血杆菌要Ⅴ，Ⅹ因子才能生长。 3. 药物敏感试验：纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。常用单片纸碟法、试管稀释法（以抗菌药物的最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点，该管含药浓度为最低抑菌浓度MIC或最低杀菌浓度MBC），两值越低则表示越敏感。MIC与抑菌圈呈负相关，即抑菌环直径越大，MIC越小。 各药敏纸片间距不少于24mm，距平板内缘不小于15mm。 药物敏感实验判定标准：抑菌圈直径（毫米）：20以上极敏、15~20高敏、10~14中敏、10以下低敏。不同的菌株、不同的抗生素纸片需参照NCCLs的标准或者CLSI标准。 多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6—9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。 4.常用的免疫技术：酶免疫技术（EIA）、协同凝集试验、免疫荧光技术（IF）、对流免疫电泳（CIE）、免疫印迹技术。 5.病原菌核酸的检测：核酸杂交、PCR技术、基因芯片技术。 PCR技术—是选择DNA或RNA体外扩增技术，用标本提取DNA为扩增模板，选用一对特异寡核苷酸为引物，PCR一般要经历三十多次循环，经不同温度变性93-94℃（作用1min氢键断裂形成单链DNA）、退火40-60℃（迅速冷却30-60s引物与DNA模板结合，形成局部双链）、延伸70-75℃（在TaqDNA聚合酶作用下，以A、T、G、C四种脱氧核苷酸为原料，从引物5’→3’端延伸，合成与模板互补的DNA链。），扩增产物用溴乙啶染色的凝胶电泳。其具有特异、快速、灵敏、特异性强、操作简便、能够定量。引物是PCR特异性的决定因素，PCR反应中TaqDNA聚合酶、引物加量过多，可引起非靶序列扩增。 变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变： 1）溶液粘度降低。2）溶液旋光性发生改变。3）增色效应。热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为" 退火"，Tm低25℃左右的温度是复性的最佳条件。核酸实验中经常以迅速冷却至4℃以下方式保持DNA的变性(单链)状态。 基因芯片技术（DNA芯片、DNA微阵列）—主要过程：DNA微阵列的制备、样品的制备、靶分子和探针之间的杂交、杂交信号的检测与分析。具有快速、敏感、高通量检测平台。 核酸杂交（基因探针杂交技术）--是指单链RNA和DNA或DNA和DNA或RNA和RNA，根据碱基配对原则，借氢键相连而形成杂交分子的过程。杂交百分率＞70%（≥69%）为高度同源性，同源性在60%以上是一个种，同源性在60%--70%是同一种内不同亚种，同源性在20%--60%同一属内不同菌种，同源性20%≤不同属的菌种。 AFLP的含义是----扩增片段长度多态性。有很大功能的DNA指纹技术。一种是罕见切割酶，一种是常用切割酶。具有RFLP技术的可靠性和PCR技术的高效性。 6.细菌诊断流程有：双岐索引法，表解法，数字编码鉴定法。致病性岛：由基因编码决定的一团与致病性相关的基因组。 7. 病原细菌确定原则：（郭霍Koch原则）1、从一种疾病病人中能有规律地发现一种细菌2、能够分离这种细菌获得纯培养3、把这种细菌的培养物引入易感动物体内，可以引起与病人类似的疾病4、在实验感染引起的疾病中仍然能够分离同一种细菌。 8.杆菌肽用于A（敏感）与非A群链球菌的鉴定。O/129抑菌试验对弧菌有用而对气单胞菌无