现代分子生物学复习知识点
1．现代分子生物学研究内容：DNA重组技术（基因工程），基因表达调控研究，生物大分子的结构与功能研究，基因组、功能基因组与生物信息学研究。
2．人类基因组研究包括遗传图（Genetic Map）绘制、物理图（Physical Map）构建、测序、转录图（Expression Profiling）绘制和人类基因组的序列图及基因鉴定等方面的工作。
3．DNA的双螺旋模型特点：螺旋直径2nm，相邻碱基平面垂直距离0.34nm,螺旋结构每隔10个碱基对（base pair, bp）重复一次，间隔为3.4 nm。其意义：该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础。该模型的提出是20世纪生命科学的重大突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个生命科学飞速发展的基石。
4．一级结构的表示法：结构式，线条式，字母式
5．双螺旋DNA的松开导致负超螺旋，而拧紧则导致正超螺旋。负超螺旋是细胞内常见的DNA高级结构形式。正超螺旋是过度缠绕的双螺旋，目前仅在一种嗜热菌内发现了活体内的正超螺旋。
超螺旋DNA的性质：结构紧密，粘度较低，浮力密度大，沉降速度快。
6．复制子(replicon)：从复制原点到终点，组成一个复制单位，称为复制子。
7．复制眼（Replication eye）：在一个长的未复制区域内DNA已经复制的区域
8．复制叉（Replication fork）:双螺旋DNA两条亲本链分开使复制能进行的部位。
9．半保留复制 (semiconsertive replication)：由于子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制。
10．半不连续复制（semidiscontinuous replication)：DNA 复制时前导链合成是连续的；而后随链合成是不连续的。
11．核小体(nucleosome)：染色质的基本结构亚基，由约200 bp的DNA和组蛋白八聚体所组成。每个核小体含有约200bp的DNA，核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4各2份拷贝，1份拷贝的H1组蛋白位于核小体外侧。H1组蛋白不同组织和物种之间有明显的差异(在酵母中不存在)。微球菌核酸酶(micrococcal nuclease)处理染色体可得到单个核小体。每个核小体有2圈DNA。
染色体作为遗传物质的特征：分子结构相对稳定；能够自我复制，使亲、子代之间保持连续性；能指导蛋白质合成，从而控制整个生命过程；能产生遗传的变异。
12．染色质(chromatin)：是指细胞周期间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白和少量RNA组成的复合结构，因其易被碱性染料染色而得名。
13．染色体(chromosome)：是指在细胞分裂期出现的一种能被碱性染料强烈染色，并具有一定形态、结构特征的物体。携带很多基因的分离单位。只有在细胞分裂中才可见的形态单位。
14．染色体的组成：组蛋白，非组蛋白，DNA ，少量RNA
15．组蛋白的特性（组蛋白分为H1、H2A、H2B、H3、H4）：（1）进化上的极端保守性（2）无组织特异性（3）肽链上AA分布的不对称性（4）组蛋白的修饰作用（5）富含赖氨酸的组蛋白H5。
16．原核生物基因组结构特点：（1）基因组小；大多只有一条染色体，且DNA含量（2）结构简练；不转录部分很少且常是控制基因表达的序列（3）存在转录单元；多顺反子mRNA，这些功能相关的RNA和蛋白质基因协同表达。（4）有重叠基因；同一段DNA能携带两种一同的蛋白质信息，主要是：一个基因完全存在于另一个基因内。部分重叠：两个基因只有一个碱基对的重叠。
17．真核生物基因组结构特点：（1）含有大量重复序列；（2）功能DNA序列大多被非功能DNA所隔开；（3）存在C值矛盾。
18．C值（C-value)：单倍体基因组中DNA的总量.在真核生物中，每种生物的单倍体，基因组的DNA总量总是恒定的，称为C-值
19．C值矛盾（C-value paradox)：一个有机体的C值与它的编码能力缺乏相关性称为 C值矛盾。
20．C值是每种生物的一个特征，不同生物之间差别很大
21．细胞在每次分裂的过程中，整个基因组都必须精确地复制一次。如何保证这一点？两个原则：(1) DNA 复制的启动决定了细胞的进一步分裂；(2) 复制过程完成前，细胞是不会发生分裂的。
22．一个DNA分子可能含多个复制子。在复制的启动位点具有起始点（origin)，在复制的终止位点具有终点（terminus)。起始点仅作用于所在复制子。
23．在每个细胞周期中，每个复制子发生一次复制，且只发生一次。
24．质粒一般是一个自主环状的DNA基因组，构成一个独立复制子；原核生物基因组中一般只含一个复制子，在唯一的起始点启动就会引起整个基因组复制；真核生物基因组含多个复制子（一般40-100kb/个）。
25．复制叉移动方向的确定：放射性自显影法；单向复制；双向复制。
26．线性DNA复制时末端问题的解决方案：(1）通过将线性复制子转变为环状或多聚分子。(2）某种蛋白质可能会介入，在真正的末端上启动。(3）DNA可形成特殊的结构，如在末端形成发夹。使分子没有游离末端。(4）末端是可变的，而不是精确确定的。
27．端粒(telomere)是真核细胞内染色体末端的蛋白质-DNA结构，其功能是完成染色体末端的复制，防止染色体免遭融合、重组和降解.从单细胞的有机体到高等的动植物，端粒的结构和功能都很保守。
28．端粒酶(telomerase)是一种核糖核蛋白,自身携带模板的反转录酶，催化端粒DNA的合成，能够在缺少DNA模板的情况下,能够以自身携带的RNA为模板，逆转录合成端粒DNA并添加于染色体末端，从而维持了端粒长度的稳定。
29．环状DNA的复制：θ-复制；滚环复制；D-环复制。
30．拓扑异构酶的种类分为Ⅰ型和Ⅱ型。原核拓扑构酶Ⅰ：切断一条DNA链，形成酶-DNA共价中间物而使超螺旋DNA松弛，然后再将切断的单链DNA连接起来。每次改变一个连环数；拓扑异构酶Ⅱ：使DNA 的两条链同时发生断裂和再连接，使正超螺旋转化为负超螺旋，每次改变两个连接数。
31．原核生物（大肠杆菌）DNA聚合酶的种类及其功能：
（1）DNA聚合酶I ：103 kDa的单链多肽，可以被蛋白酶切成两段，C端的2/3区域，又称为Klenow 片段，同时具有DNA聚合酶活性和3’－5’核酸外切酶活性(校正错配核苷酸)，既可合成DNA链，又能降解DNA；N端的1/3具有5’－3’核酸外切酶活性（切除RNA引物）。
（2）DNA聚合酶II：具有3’－5’核酸外切酶活性，目前认为主要是起修复DNA的作用。
（3）DNA聚合酶III：具有DNA聚合酶活性和3’－5’核酸外切酶活性，是大肠杆菌DNA复制中链延长反应的主导聚合酶。
32．真核生物DNA聚合酶的种类及其功能：真核生物DNA聚合酶与细菌DNA聚合酶基本性质相同。但真核生物DNA聚合酶一般都不具有核酸外切酶活性，推测一定有另外的酶在DNA复制中起校正作用。
33．DNA聚合酶造成的复制错误可分为两类：移码【frameshift指一个核苷酸的插入或缺失】和替换【substitution指掺入错误核苷酸（不正确配对）】。
34．真核生物DNA的复制：a、多个复制元（multiple replicon ），双向复制；b、复制元相对较小(13-900kb),复制速度较慢,大约500~5000bp/min（3000bp/min）冈崎片段100～200NT；c、复制终止通过复制叉的相遇而终止。
35．自发突变（spontaneous mutation)：由于正常的细胞活动，或细胞与环境的随机相互作用，这些过程所引起的生物DNA序列的改变。
36．诱发突变（induced mutation): 特定的化学或物理因素引起的DNA序列改变。
37．下降突变（down mutation）大多数突变是使启动子的功能减弱或消失。这种突变称为下降突变;
38．上升突变（up mutation）少数突变能使启动子的功能增强，称为上升突变。
39．DNA突变的具体表现：1、碱基对的置换（substitution：转换【(Transition）最普通的一种点突变，指一种嘧啶被另一种嘧啶代替，一种嘌呤被另一种嘌呤代替。使GC对被AT对替换，或者相反。】和颠换【(Transversion)另一种不常见的点突变，嘌呤被嘧啶代替或者相反，因此AT对变成了TA、GC对。】；2、移码突变（frameshift mutation）由碱基的缺失或插入造成。
40．DNA的损伤修复：错配修复；切除修复；DNA直接修复；重组修复；SOS反应诱导的修复。
错配修复（Mismatch repair)：原核细胞内存在Dam甲基化酶，能使位于5`GA TC序列中腺苷酸的N6位甲基化。复制后DNA在短期内（数分钟）为半甲基化的GATC序列，一旦发现错配碱基，即将未甲基化链切除一段包含错误碱基的序列，并以甲基化的链为模板进行修复。
DNA直接修复（direct repair）：生物体内存在多种DNA损伤以后而并不需要切除碱基或核苷酸的机制，把损伤的碱基回复到原来状态的一种修复方式称为DNA的直接修复。
重组修复（Recombination repair）：又被称为“复制后修复”，它发生在复制之后。机体细胞对在复制起始时沿未修复的DNA损伤部位可以先复制再修复，即先跳过该损伤部位，在新合成链中留下一个对应于损伤序列的缺口，该缺口由DNA重组来修复。即从同源DNA的母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处，然后用再用新合成的序列来补上母链的空缺。
切除修复（excision repair)：碱基切除修复（base-excision repair)【糖苷水解酶：细胞中的各种，能特异切除受损核苷酸上的N-β-糖苷键，在DNA链上形成AP位点(去嘌呤或去嘧啶位点)。AP核酸内切酶：能在AP位点附近（5`或3`位置）将DNA链切开。核酸外切酶：移去包括AP位点核苷酸在内的小片段DNA。DNA 聚合酶I：合成新片段。DNA连接酶：连接切口而修复。】和核苷酸切除修复（nucleotide-excision repair）【当DNA链上相应位置的核苷酸发生损伤，导致双链之间无法形成氢键，在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损伤部分切除掉，并以完整的那一条链为模板，合成出切去的部分，然后使DNA恢复正常结构的过程。】SOS反应诱导的修复（SOS response）SOS反应：细胞DNA受到损伤或复制系统受到抑制的紧急情况下，为求得生存而出现的应急效应。SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA 修复方式。留下的错误较多，故又称为错误倾向修复（error-prone repair），使细胞有较高的突变率。
41．DNA的转座（transposition），或称移位，是由可移位因子(transposable element)介导的遗传物质重排现象。是存在于染色体DNA上可自主位移（非复制性）和复制位移（复制性）的基本单位。
42．两种不同类型的转座：复制型转座（replicative transposition）【作为自身移动的一个部分，转座子被复制，所移动和转位的仅仅是原转座子的拷贝，这样转座过程伴随着转座子拷贝数的增加。】和非复制型转座【原始转座子作为一个可移动的实体直接由一个部位转移到另一个部位】
43．转座子是基因组的正常组成成分，不以独立的形式存在（如噬菌体或质粒DNA）。转座的发生不依赖于转座子和靶位点之间任何的序列同源性，在基因组内由一个部位直接转移到另一个部位。转座以很低的频率发生，而且转座子的插入是随机的。转座子有时插入到一个结构基因或基因调节序列内，引起基因表达的改变。转座子也可以引起基因组序列的重排，它们的移动也和进化有关。
44．转座子(transposon 或transposable element,Tn)是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位。转座子每次移动时携带着转座必需的基因一起在基因组内跃迁，所以转座子又称跳跃基因（jumping gene）。
45．转座子的分类：插入序列和复合型转座子(Tn)。
46．转座作用的遗传学效应：○1转座引起插入突变；○2转座产生新的基因；○3转座产生染色体畸变；○4转座引起生物进化。
47．转录(transcription ）：从DNA到RNA的过程，基因表达的核心步骤。
48．翻译（translation)：从RNA到蛋白质的过程，基因表达的最终目的。
49．不对称转录(asymmetric transcription)双链DNA分子上分布着很多基因，并不是所有基因的转录均在同一条DNA单链上，而是一些基因在这条单链转录，另一些基因的转录在另一条单链上，DNA双链一次只有一条链(或某一区段)可作为模板转录，称之为不对称转录。
50．转录产物类型：信使RNA;转移RNA ；核糖体RNA ；其他一些小RNA。
51．基因表达盒结构组成：RNA聚合酶（RNA polymerase); 启动子(Promoter); 转录起始点(startpoint); 终止子(Terminator); 上游(Upstream); 下游; 近端; 远端。
52．由启动子到终止子之间的序列称为转录单位(transcription unit)
53．原核生物RNA聚合酶：有四种不同类型的亚基α2ββ'ωσ；在不同的菌种之间，α、β和β` 亚
基的大小相似，但σ亚基的变化较大。
α亚基可能参与核心酶的组装及启动子的识别。并参与RNA聚合酶与一些转录调控因子间的作用。
β亚基具有与底物（NTP及新生的RNA链）结合的能力。
β’亚基可能与模板结合。β亚基和β’亚基提供了RNA聚合酶的活性中心，其一级结构与真核生物RNA 聚合酶大亚基有同源性。
σ亚基的功能是帮助全酶识别启动子并与之结合。σ亚基也可被看作一种辅助因子，因此又可称为σ因子（sigma factor）。
54．有关RNA聚合酶的几个知识点：只有全酶才能在正确位置起始转录。核心酶能在DNA模板上合成RNA，但不能在正确位置起始转录。σ亚基与核心酶结合疏松，很容易与核心酶分离。σ因子仅能保证细菌RNA聚合酶稳定地结合到启动子上，它通常在RNA链合成8~9个碱基后释放。在某些细胞内含有能识别不同启动子的σ因子。
55．真核生物RNA聚合酶:
但在细菌中，一种RNA聚合酶几乎负责所有mRNA、tRNA和rRNA的合成
56．启动子(Promoter)：位于转录起始点附近，且为转录起始所必需的序列元件。能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。
57．启动子的作用特点:（1）一个基因可同时拥有一个及以上启动子（2）启动子位置不定，一般在转录起始点上游。（3）可与增强子共同控制转录起始和强度。（4）发挥功能时除需RNA聚合酶外，还需转录调控因子与启动子区各种调控元件相互作用
58．增强子(Enhancer):位于离转录起始点较远的位置上，具有参与激活和增强转录起始功能的序列元件。一类能增强真核生物启动子功能的顺式作用元件（DNA序列）。【增强子、启动子交错覆盖/连续；（没有增强子，启动子不表现活性；没有启动子，增强子无法发挥作用；）增强子作用不受序列方向的制约；有组织特异性。】
59．增强子的作用特点:①可提高相应基因转录效率，可远距离起作用，在基因的上游或下游都可；②作用与其序列的正反方向无关；③要有启动子才能发挥作用；④必须与特定蛋白质因子结合后才能发挥增强转录的作用；⑤一般具有组织或细胞特异性。
60．原核生物启动子的结构:在原核生物的启动子中有4个区域：转录起始点、－10区又称Pribnow box[TATAAT区]、－35区[TTGACA区]、－10与－35之间的序列。
61．转录起始点:转录起始点在多数情况下为嘌呤，常见的序列为CAT，A为转录起始点。
62．RNA转录的基本过程: 转录的起始;RNA链延伸;转录的终止
63．三元复合物(ternary complex)的组成：RNA聚合酶、DNA和新生RNA
64．大肠杆菌的两类终止子:不依赖ρ因子型终止子（二级结构中的发夹(长度7-20 bp); 发夹靠近基部通常有一个G-C富集区；转录单位最末端的连续约6个U残基组成的片段。这两个特点都是终止所必需的。）;ρ-依赖型终止子（ρ因子是大肠杆菌的一种基本蛋白质，只在终止阶段发挥作用，由6个相同亚基组成。作为RNA聚合酶的辅助因子行使功能。大肠杆菌中的ρ-依赖型终止子占所有终止子的一半左右。）65．RNA合成的抗终止的两种作用方式①抗终止蛋白作用于RNA聚合酶。②破坏终止点RNA的茎-环结构，即破坏mRNA终止子特定的二级结构。
66．原核生物与真核生物mRNA的特征比较:
○1转录发生的区域化部位:细菌mRNA的转录和翻译发生在单一的细胞区域化部位；其转录、翻译、降解间隔时间很短，甚至有时是偶联在一起。真核生物mRNA合成与成熟完全在细胞核内发生，而翻译在细胞质中完成；其转录、翻译、降解三者间间隔时间较长。
○2结构特征：原核生物mRNA(1)许多是以多顺反子形式存在；(2) 5`端无帽子结构；(3) 3`端没有或只有较短的poly(A)。/真核生物mRNA结构特征：(1) 许多是以单顺反子形式存在；(2) 真核生物mRNA的5`
端存在“帽子”结构；(3) 绝大部分真核生物mRNA 3`端含poly(A) 尾巴(4) 真核生物mRNA中常含有内含子
○3生命周期：原核生物mRNA寿命较短，通常只能翻译几分钟；真核生物mRNA寿命较长，可持续翻译几小时。
67．mRNA 5`末端帽子特征的生物学功能：○1使mRNA免遭核酸酶的破坏，保持其结构的稳定性；○2利于蛋白质起始因子的识别，从而促进翻译的起始。
3`端含poly(A)尾巴生物学功能：○1保持mRNA的稳定性，防止被降解；○2与翻译起始有关。
68．基因（gene):指能编码独立产物序列的特有DNA序列，基因表达的过程可以终止于RNA或蛋白质。
69．顺反子(cistron):指由编码一种蛋白质的DNA单位组成Or 编码单条多肽链的一个遗传功能单位，即转录单位。
70．断裂基因(interrupted gene): 对一个可表达为蛋白质的基因，如果其初始转录产物(前体mRNA)与有生物学功能的成熟mRNA相比，如其间含有不能编码为蛋白质的间隔序列，则这个基因称为断裂基因。
71．内含子(intron) ：断裂基因中，转录但通过将两端的序列（外显子）剪接在一起而被去除的转录产物所对应的DNA片段。
72．外显子(exon): 断裂基因中，在成熟mRNA产物中存在的任何片段。
73．真核生物mRNA的加工、修饰：mRNA 5`端的加帽；mRNA 3`端的多聚腺苷酸化；前体mRNA内含子的删除
74．核酶(ribozyme) ：具有酶促活性的RNA称为核酶。意义：核酶的发现，对中心法则作了重要补充；核酶的发现是对传统酶学的挑战；利用核酶的结构设计合成人工核酶。
75．遗传密码(genetic code): DNA（或mRNA）中核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系。
76．密码子(codon)：mRNA上每3个相邻核苷酸编码多肽链中一个氨基酸，这三个核苷酸称一个密码子或三联体密码
77．三种终止密码子：UAA(赭石ochre密码)、UGA(蛋白石opal密码)和UAG(琥珀amber密码)并不代表任何氨基酸，它们是终止密码子，不能与tRNA的反密码子配对，但能被终止因子或释放因子识别，终止肽链的合成。
78．遗传密码的性质：○1简并性与兼职性；○2普遍性与特殊性；○3密码子-反密码子识别的摆动性；○4读码的连续性。
79．摆动假说(wobble hypothesis)是由Crick.F（1966年）提出的。即当tRNA的反密码子与mRNA的密码子配对时，密码子的前两对严格遵守碱基互补配对法则，但第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，这种现象称为密码的摆动性或变偶性。
80．RNA的编辑(RNA editing): 某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，它导致了DNA所编码的遗传信息的改变。
81．tRNA的基本结构：是三叶草型的二维结构；各种tRNA均含有70~80个碱基，其中22个碱基是恒定的。具五臂四环结构。tRNA的稀有碱基含量非常丰富。tRNA “L”构型的结构力：碱基堆积力和氢键。
82．tRNA的加工内容：①在核酸内切酶RNaseP作用下，从5′末端切除多余的核苷酸。②在核酸外切酶RNaseD作用下，从3′末端切除多余的核苷酸。③核苷酸转移酶催化，3′末端加CCA-OH，为tRNA 加工特有反应。④核酸内切酶催化进行剪切反应，剪掉内含子，由连接酶连接外显子部分。⑤化学修饰，如甲基化、脱氨基、还原反应
83．一个tRNA究竟能识别多少个密码子是由反密码子的第一位碱基的性质决定的。
84．tRNA特异性只取决于反密码子,与携带的氨基酸无关。模板mRNA只能识别特异的tRNA而不是氨基酸。
85．tRNA的功能：○1运输的工具，运载氨基酸；○2解读mRNA上的遗传信息。
86．tRNA的分类：○1起始tRNA和延伸tRNA○2同工tRNA；○3校正tRNA。
87．无义突变(nonsense mutation): 指DNA上任何代表氨基酸的密码子变为终止密码子的改变。
88．核糖体的大、小亚基的功能：○1小亚基：与模板mRNA和起始tRNA结合位点。通过密码子与反密码子的配对，识别并结合模板mRNA，蛋白质合成中A位、P位、E位的一部分等○2大亚基：（1）具有三个不同的tRNA结合点；结合多肽链，催化肽键形成、蛋白质合成中A位、P位、E位的一部分等【A位(aminoacyl site)：又称受位或氨酰基基位，可与新进入的氨基酰tRNA结合；P位(peptidyl site)：又称给位或肽酰基部位，可与延伸中的肽酰基tRNA结合。E位(exit site)：又称排出位，空载tRNA脱离核糖体前的结合位点.】（2）具有转肽酶活性：将给位上的肽酰基转移给受位上的氨基酰tRNA，形成肽键。（3）具有GTPase活性，水解GTP，获得能量（4）具有起始因子、延长因子及释放因子的结合位点。
89．核糖体发挥生物学功能的5个基本部位：①mRNA结合部位；②结合AA-tRNA部位（A位）③结合肽基tRNA部位（P位）；④空载tRNA移出部位（E位）；⑤形成肽键的部位。此外，还有用于起始和延伸的各种蛋白质因子结合部位。
90．氨酰-tRNA合成酶会引入两种错误：一种是将错误的氨基酸加在tRNA上；另一种是将氨基酸加在错误的tRNA上。前者现错的可能性更大。
91．蛋白质的生物合成包括五个阶段：氨基酸活化；肽链的起始；肽链的伸长；肽链的终止；新合成多肽链的折叠和加工。
92．氨基酰-tRNA的写法：原核生物(Prokaryote)：fMet-tRNAfMet；fMet-tRNAfMet；fMet-tRNAifMe；真核生物(Eukaryote)：Met-tRNAiMet ；Met-tRNAeMet。原核生物的起始tRNA是fMet-tRNAfMet；真核生物的起始tRNA是Met-tRNAMet。
93．真核生物中，任何一个多肽合成都是从生成甲硫氨酰-tRNAiMet开始的。
94．原核生物的启始因子（initiation factor,IF）：
○1IF-1：作为完整起始复合体一部分：与30S亚基结合在A位，阻止氨酰-tRNA进入；阻止30S与50S 亚基结合。
○2IF-2：结合特定起始因子tRNA，控制它进入核糖体；有核糖体依赖GTP酶活性；
○3IF-3：稳定30S亚基；辅助30S亚基与mRNA上起始点特异性结合；
95．延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF)：○1原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts)、EF-G；○2真核生物：EF-1 、EF-2
96．真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落
97．分子伴侣(chaperone)：结合在一些不完全装配或不恰当折叠蛋白上，帮助它们折叠或防止它们聚集的蛋白质。其生物学功能：○1帮助新生蛋白质正确折叠；○2纠正错误折叠或介导其降解。
98．青霉素、四环素和红霉素只与原核细胞核糖体发生作用，阻遏原核生物蛋白质的合成，抑制细菌生长。氯霉素和嘌呤霉素既能与原核细胞核糖体结合，又能与真核生物核糖体结合，妨碍细胞内蛋白合成，影响细胞生长
99．抗生素(antibiotics)是微生物产生的能够杀灭或抑制细菌的一类药物。
100．蛋白质易位（protein translocation）蛋白质插入或穿过生物膜的过程。蛋白质易位的两种方式：共翻译易位和翻译后易位。
101．信号肽(signal peptide): 能启动蛋白质运转的任何一段多肽。信号肽结构特点：○1常位于蛋白质N 末端，可切割；○2长度：15 - 30个残基；○3序列内有一个全部或大部分疏水组成的疏水核心；○4靠近该序列N 端常有几个正电荷氨基酸；○5其C-末端靠近切割处常带数个极性氨基酸，离切割点最近那个氨基酸常带很短侧链(Ala或Gly )。
102．信号肽与蛋白质转运的关系：○1完整信号肽是保证蛋白质转运的必要条件；○2仅有信号肽不足以保证蛋白质转运发生；○3信号序列切除并不是转运所必需；○4并非所有运转蛋白质都有可降解的信号肽。
103．蛋白质共翻译易位的基本过程：蛋白质共翻译易位可分两个阶段：首先：带有新生肽链的核糖体与膜结合；然后：新生肽链进入膜通道并易位。
104．核酸的凝胶电泳：琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为0.2~50kb之间。聚丙烯酰胺凝胶，其分辨范围为1个碱基对到1000个碱基对之间。
105．电泳操作的基本程序：称样；溶解；加热；制板；倒胶；取样；点样；电泳；检测。
106．核酸的分子杂交（Nucleic Acid Hybridization）：具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下，按碱基配对原则形成双链的过程。
107．探针（Probe):一段带有检测标记的与目的基因或目的DNA特异互补的已知核苷酸序列。
108．聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction；PCR）：在引物指导下由酶催化的对特定克隆或基因组DNA序列进行的体外扩增反应。
109．核酸测序的常用方法：○1末端终止法；○2化学裂解法；○3DNA测序自动化。
110．什么是基因的表达调控？基因表达调控有什么意义？
答：围绕基因表达过程中发生的各种各样的调节方式都通称为基因表达调控（gene regulation或gene control）。意义：○1适应环境、维持生长和增殖；○2维持个体发育与分化；改变基因表达的情况以适应环境，在原核生物、单细胞生物中尤其显得突出和重要，因为细胞的生存环境经常会有剧烈的变化。所以，基因表达调控是生物适应环境生存的必需。基因表达调控是生物体内基因表达的调节控制机制，使细胞中基因表达的过程在时间、空间上处于有序状态，并对环境条件的变化做出适当反应的复杂过程。基因表达调控是生物体内细胞分化、形态发生和个体发育的分子基础。要了解动、植物生长发育的规律、形态结构特征和生物学功能，就必须弄清楚基因表达调控的时间和空间的概念。基因表达调控是现阶段分子生物学研究的中心课题。
111．什么是组成型表达？什么是适应型表达？（基因表达的方式）
答：组成性表达(constitutive expression)指合成速率不受环境变化而变动的一类基因表达。适应性表达(adaptive expression)指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达。
112．基因表达调控主要在哪些水平上进行？
答：基因表达调控的多层次性，主要表现在：○1转录水平上的调控（transcriptional regulation）；○2转录后水平上的调控（post-transcriptional regulation），包括：mRNA加工成熟水平上的调和翻译水平上的调控。
113．简述原核基因表达调控的几个重要概念？
答：顺式作用元件和反式作用因子：基因活性的调控主要通过反式作用因子（通常是蛋白质）与顺式作用元件（通常在DNA上）相互作用而实现。顺式作用元件是指对基因表达有调节活性的DNA序列，其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因；同时，这种DNA序列通常不编码蛋白质，多位于基因旁侧或内含子中，如启动子和终止子，都是典型的顺式作用元件。反式作用因子是能调节与它们接触的基因的表达的各种扩散分子（通常是蛋白质），如RNA聚合酶、转录因子。
结构基因(structural gene)是编码蛋白质或RNA的基因。细菌的结构基因一般成簇排列，多个结构基因受单一启动子共同控制，使整套基因或都表达或都不表达。
调节基因(regulator gene)是编码合成那些参与其他基因表达调控的RNA或蛋白质的特异DNA 序列。
操纵基因(operator)是操纵子中的控制基因，在操纵子上一般与启动子相邻，通常处于开放状态，使RNA 聚合酶能够通过并作用于启动子启动转录。但当它与调节基因所编码的阻遏蛋白结合时，就从开放状态逐渐转变为关闭状态，使转录过程不能发生。
阻遏蛋白(aporepressor)是负调控系统中由调节基因编码的调节蛋白，它本身或与辅阻遏物(corepressor)一起结合于操纵基因，
阻遏操纵子结构基因的转录。阻遏蛋白可被诱导物变构失活，从而导致不可阻遏或去阻遏。细胞内有许多种蛋白质的数量几乎不受外界环境的影响，这些蛋白质称为组成蛋白或持家蛋白。
调节蛋白是一类特殊蛋白，它们可以控制和影响一种或多种基因的表达。有两种类型的调节蛋白，即正调节蛋白和负调节蛋白，前者是激活蛋白，而后者属于阻遏蛋白。
操纵子(operon) ：是原核生物在分子水平上基因表达调控的单位，由调节基因、启动子、操纵基因和结构基因等序列组成。
某些特定的物质能与调控蛋白结合，使调控蛋白的空间构像发生变化，从而改变其对基因转录的影响，这些特定物质可称为效应物（effector）。
114．试述原核生物基因调控机制的类型与特点？
答：
115．什么是葡萄糖效应？简述cAMP-CAP的作用？
答：有葡萄糖存在的情况下，即使在细菌培养基中加入乳糖、半乳糖、阿拉伯糖或麦芽糖等诱导物，与其相对应的操纵子也不会启动，产生出代谢这些糖的酶来，这种现象称为葡萄糖效应或称为降解物抑制作用。因为添加葡萄糖后，细菌所需要的能量便可从葡萄糖得到满足，葡萄糖是最方便的能源，细菌无需开动一些不常用的基因去利用这些稀有的糖类。葡萄糖的存在会抑制细菌的腺苷酸环化酶活性，减少环腺苷酸（cAMP）的合成，与它相结合的蛋白质，即环腺苷酸受体蛋白CRP又称分解代谢物激活蛋白CAP，因找不到配体而不能形成复合物.复合物是启动基因转录的正调节物质（CRP与启动子结合是激活转录的必要条件，而cAMP与CRP的结合能增强CRP对DNA双链的亲和力），从而抑制糖类代谢操纵子的表达。降解物抑制作用是通过提高转录强度来调节基因表达的，是一种积极的调节方式。
116．细菌应急反应的信号是什么？诱导物是什么？什么叫超级调控因子？
答：细菌的应急反应信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。产生这两种物质的诱导物是空载tRNA。超级调控因子或称为魔斑：在氨基酸缺乏时，rel+菌株能合成鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp），而rel-菌则不能。因为这两种物质是在层析谱上检出的斑点故当时称魔斑(magic spot) 。
117．乳糖操纵元结构？
答：调节基因；操纵基因；?-半乳糖苷酶；半乳糖苷透性酶；乙酰基转移酶。
118．试述衰减作用如何调控大肠杆菌中色氨酸操纵子的表达？
答：转录的弱化理论认为，mRNA转录的终止是通过前导肽基因的翻译来调节的，在前导肽基因中有两个相邻的色氨酸密码子，在翻译时对tRNATrp的浓度十分敏感。当培养基中色氨酸的浓度低时，负载有色氨酸的tRNATrp也少，由此推断，翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢，当4区被转录完成时，核糖体才进行到1区（或停留在两个相邻的色氨酸密码子处），这时的前导区结构是2-3配对，不形成
3-4配对的终止结构，所以转录可继续进行，直到将色氨酸操纵子中的结构基因全部转录完毕为止。当培养基中色氨酸浓度高时，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在4区被转录之前，核糖体就到达2区，这样使2-3不能配对，3-4区可以自由配对形成茎-环式的终止子结构，使转录终止。
119．基因表达(gene expression)细胞在生命过程中，把蕴藏在DNA中的遗传信息经过转录和翻译，转变成为具有功能的蛋白质分子的过程。
120．基因组(genome) 是指生物有机体的单倍体细胞中的所有DNA，包括核中的染色体DNA和线粒体、叶绿体等亚细胞器中的DNA。
121．细胞分化发育的不同时期，基因表达的情况是不相同的，这就是基因表达的阶段特异性(stagespecificity)。生物体中，各种基因在不同的组织、器官中表达的差异性。不同组织细胞中不仅表达的基因数量不相同，而且基因表达的强度和种类也各不相同，这就是基因表达的组织特异性(tissue specificity)。
122．某些基因表达产物是细胞或生物体整个生命过程中都持续需要而必不可少的，这类基因可称为看家基因(housekeeping gene)，其数量不受外界环境影响。
123．组成性基因表达也不是一成不变的，其表达强弱也是受一定机制调控的。无时间和空间特异性，几乎在生命的全过程和生物体的所有细胞中持续表达。
124．应环境条件变化基因表达水平增高的现象称为诱导(induction)，这类基因被称为可诱导的基因(inducible gene)；相反，随环境条件变化而基因表达水平降低的现象称为阻遏(repression)，相应的基因被称为
可阻遏的基因(repressible gene)。表达升高的为诱导，表达降低的为阻遏。
125．调节基因编码的调节物质通过与DNA上的特定位点结合控制转录是调控的关键。调节物与DNA 特定位点的相互作用能以正调控的方式（启动或增强基因表达活性）调节靶基因，也能以负调控的方式（关闭或降低基因表达活性）调节靶基因。DNA位点通常位于受调节基因的上游，但也有例外。调节本身也可有被调控，最典型的就是被一些小分子所调控，面这些小分子的产生是周围环境所致。
126．细菌细胞有两种类型的效应物：(1)诱导物:能引起诱导发生的分子：有些阻遏蛋白在自然状态下结合在操纵基因上，当有诱导物存在时，诱导物与阻遏蛋白结合，促使后者空间构象变化，使阻遏蛋白与操纵基因亲和力下降而解离下来，RNA聚合酶能够进入启动子区域，开启了结构基因的转录表达。由诱导物存在而使基因表达开放的调节又称为可诱导调节。如大肠杆菌的乳糖操纵子中的乳糖。(2)辅阻遏物:能导致阻遏发生的分子：有些阻遏蛋白本身不具有结合操纵基因的活性，当细胞中有辅阻遏物存在时，它可以结合到阻遏蛋白分子上，提高阻遏蛋白与操纵基因的亲和性。由辅阻遏物参与引起的调节又称为可阻遏的调节。如大肠杆菌的色氨酸操纵子中，色氨酸与阻遏蛋白结合，使后者表现出结合操纵基因的活性，阻止了RNA聚合酶与启动子结合的结合，使操纵子关闭。
127．原核生物和真核生物蛋白质合成起始异同点：
128．原核生物和真核生物转录的差异：
129．原核与真核生物RNA翻译的异同：
130．基因调控的指挥系统也是多样的，不同的生物使用不同的信号来指挥基因调控。在转录水平上对基因表达的调控决定于DNA的结构、RNA聚合酶的功能、蛋白因子及其他小分子配基的相互作用。
131．转录因子（transcription factors）是转录起始过程中RNA聚合酶所需的辅助因子。真核生物基因在无转录因子时处于不表达状态，RNA聚合酶自身无法启动基因转录，只有当转录因子(蛋白质)结合在其识别的DNA序列上后，基因才开始表达。被称为转录因子（transcription factors）的DNA结合蛋白与基因调控区中特殊的效应元件（response elements，RE）DNA序列相互作用，调节RNA聚合酶活性，达到控制基因转录的目的。转录因子的功能：转录因子起着激活剂作用，还是起着阻遏物的作用取决于细胞的生理状态和不同启动子之间的DNA序列差别。
132．原核生物的基因调控主要发生在转录水平上，根据调控机制的不同可分为：负转录调控和正转录调控。在负控诱导系统中，阻遏蛋白与效应物（诱导物）结合时，结构基因转录；在负控阻遏系统中，阻遏蛋白与效应物(辅阻遏物)结合时，结构基因不转录。阻遏蛋白作用的部位是操纵区。在正转录调控系统中，调节基因的产物是激活蛋白（activator）。
133．弱化子是指当操纵子被阻遏，RNA合成被终止时，起终止转录信号作用的那一段核苷酸。弱化子对基因活性的影响是通过影响前导序列mRNA的结构而起作用的。起调节作用的是某种氨基酰-tRNA的浓度。
134．弱化子对基因活性的影响，属于这种调节方式的有大肠杆菌中的色氨酸操纵子、苯丙氨酸操纵子、苏氨酸操纵子、异亮氨酸操纵子等等。
135．操纵子学说的核心是使基因从表达抑制状态中解脱出来进行转录，是从负调节的角度来考虑基因表达调控的。
136．空载的tRNA会激活焦磷酸转移酶。
137．操纵子学说是关于原核生物基因结构及其表达调控的经典学说，由法国巴斯德研究所的Francois Jacob与Jacques Monod于1961年首先提出的。因此他们二人于1965年荣获诺贝尔生理学奖。
138．大肠杆菌能以乳糖（Lactose）为唯一碳源生长，这是由于它能产生一套利用乳糖的酶。大肠杆菌乳糖操纵子是大肠杆菌DNA的一个特定区段，由调节基因I，启动基因P，操纵基因O和结构基因Z、Y、A 组成。P(promoter)区是转录起始时RNA聚合酶的结合部位。O(operator)区是阻遏蛋白的结合部位，其功能是控制结构基因的转录。平时I基因经常进行转录和翻译，产生有活性的阻遏蛋白(弱启动子控制的永久性表达)。lacI基因编码的阻抑物(repressor)，Z编码β-半乳糖苷酶；Y编码β-半乳糖苷透过酶；A编码β-半乳糖苷乙酰基转移酶。β-半乳糖苷酶是一种β-半乳糖苷键的专一性酶，除能将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖外，还能水解其他β-半乳糖苷。β-半乳糖苷透过酶的作用是使外界的β-半乳糖苷（如乳糖）能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。β-半乳糖苷乙酰基转移酶的作用是把乙酰辅酶A上的乙酰基转到β-半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。（注:该酶不参与乳糖代谢！在细胞中有许多能被半乳糖苷酶降解的半乳糖苷类物质，其分解产物不能进一步代谢，积累，抑制细胞生长。半乳糖苷乙酰化后，即无毒. 所以lacA虽不在乳糖降解中起作用，但可抑制有害物质的积累）。
139．乳糖操纵子的控制模型，其主要内容如下：①Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA 分子所编码。②这个mRNA分子的启动子紧接着O区，而位于I与O之间的启动子区（P），不能单独起动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。③操纵基因是DNA上的一小段序列（仅为26bp），是阻遏物的结合位点。④当阻遏物与操纵基因结合时，lac mRNA的转录起始受到抑制。⑤诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵基因结合，从而激发lac mRNA的合成。当有诱导物存在时，操纵基因区没有被阻遏物占据，所以启动子能够顺利起始mRNA的合成。
140．本底水平表达(background level constitutive syntyesis)：指在非诱导状态下有少量的lac mRNA合成(大约每个世代每个细胞只合成1-5 个mRNA分子) 。
141．细菌中的cAMP含量与葡萄糖的分解代谢有关。当细菌利用葡萄糖分解产生能量时，cAMP生成少而分解多，cAMP含量低；相反，当环境中无葡萄糖可供利用时，cAMP含量就升高。细菌中有一种能与cAMP 特异结合的cAMP受体蛋白CRP(cAMP receptor protein)，当CRP未与cAMP结合时它是没有活性的，当cAMP 浓度升高时，CRP与cAMP结合并发生空间构象的变化而活化，称为CAP(CRP-cAMP activated protein)，能以二聚体的方式与特定的DNA序列结合。
142．在lac操纵子的启动子Plac上游端有一段序列与Plac部分重叠的序列，能与CAP特异结合，称为CAP结合位点（CAP binding site）。CAP与这段序列结合时，可增强RNA聚合酶的转录活性，使转录提高50倍。相反，当有葡萄糖可供分解利用时，cAMP浓度降低，CRP不能被活化，lac操纵子的结构基因表达下降。由于Plac是弱启动子，单纯因乳糖的存在发生去阻遏使lac操纵子转录开放，还不能使细菌很好利用乳糖，必需同时有CAP来加强转录活性，细菌才能合成足够的酶来利用乳糖。lac操纵子的强诱导既需要有乳糖的存在又需要没有葡萄糖可供利用。通过这机制，细菌是优先利用环境中的葡萄糖，只有无葡萄糖而又有乳糖时，细菌才去充分利用乳糖。
143．CAP的结合对DNA构型的影响：CRP在它的结合位点可使DNA成＞90℃弯曲；弯曲使CAP能与启动子上的RNA pol 接触。
144．乳糖操纵子正性调节：1）无乳糖也无葡萄糖存在时：阻遏基因转录翻译阻遏蛋白R，R与操纵基因结合，阻止结合在启动子上的DDRP前移，结构基因不被转录。2）当无乳糖，有葡萄糖时：由于葡萄糖不能使阻遏蛋白失活，乳糖操纵子关闭，另外，由于有葡萄糖，cAMP含量低，CAP的正性调节不起作用。所以，无乳糖时，无论有无葡萄糖，操纵子关闭。3）既有乳糖，又有葡萄糖时：乳糖与阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白变构，失去与操纵基因结合的能力而脱落；由于有葡萄糖，cAMP含量低，CAP的正性调节不起作用，抑制乳糖操纵子的转录，使细菌只能利用葡萄糖。4）有乳糖，无葡萄糖时：由于不含葡萄糖，细胞内cAMP 含量高，cAMP与CAP结合成复合物，与DNA结合，并推动DDRP向前移动，促进转录。乳糖与阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白变构，失去与操纵基因结合的能力而脱落，结合在启动子上的DDRP向前移动，结构基因被转录翻译，合成与乳糖代谢有关的酶类从而利用乳糖。所以，有乳糖时，只有没有葡萄糖，操纵子才开放有葡萄糖存在，操纵子关闭。【当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用；如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时,细菌首先利用葡萄糖】
145．阻遏系统：一级开关，主管转录是启动；粗调开关；弱化作用:决定已经启动的转录是否继续下去;细调开关。
146．基因表达的转录调控是生物最经济的调控方式，既然用不着某种蛋白质，就用不着转录了。但转录生成mRNA以后，再在翻译或翻译后水平进行“微调”，是对转录调控的补充，它使基因表达的调控更加适应生物本身的需求和外界条件的变化。
147．人类细胞单倍体基因组就包含有3×109bp总DNA，约为大肠杆菌总DNA的1000倍，是噬菌体总DNA的10万倍左右！大肠杆菌约有4000个基因，人则约有3～5万个基因。
真核基因表达调控的最显著特征是能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因，从而实现"预定"的、有序的、不可逆转的分化、发育过程，并使生物的组织和器官在一定的环境条件范围内保持正常功能。
148．真核生物基因调控，根据其性质可分为两大类：第一类是瞬时调控或称可逆性调控，它相当于原核
细胞对环境条件变化所做出的反应，包括某种底物或激素水平升降，或细胞周期不同阶段中酶活性和浓度的调节。第二类是发育调控或称不可逆调控，是真核基因调控的精髓部分，它决定了真核细胞生长、分化、发育的全部进程。
149．在真核生物中基因表达的调节其特点是:（1）多层次;2）无操纵子和衰减子;3）个体发育复杂;4）受环境影响较小。
150．核小体是染色质的基本单位。真核染色体上三要素：DNA复制起始点、着丝点(centromere)和端粒(telomere)。着丝粒（centromere)：细胞分裂时染色体与仿锤丝相连结的部位，为染色体的正常分离所必需。端粒(telomere)：真核生物线状染色体分子末端的DNA区域.具有防止DNA末端降解，保证染色体的稳定性的功能。
151．真核基因的典型结构及特点：1)真核基因组结构庞大：由DNA、组蛋白、非组蛋白(P25)等大分子组成。其基本结构物质是DNA和组蛋白。2)重复序列：单拷贝序列；中度重复序列；高度重复序列。3)基因不连续性(interrupted gene)：因的编码序列在DNA分子上是不连续的，为不编码的序列所隔开。4) 存在许多基因家族(gene family)：来源相同、结构相似、功能相关的基因组成为单一的基因簇或称基因家族。
152．单拷贝序列(single copy sequences)：一个基因组中只有一个或几个拷贝的序列；长度约为
750-2000bp，相当于一个结构基因的长度，占基因组的40-80%。例如结构基因基本上属于不重复序列，如蛋清蛋白、蚕的丝心蛋白等。中度重复序列(moderate repetitive sequences)：重复次数在101-104之间;多数长100-500bp，占基因组10-40%。各种rRNA、tRNA及某些结构蛋白基因（如组蛋白基因）。高度重复序列(high repetitive sequences)—卫星DNA ：这类序列一般较短，长10-300bp，重复次数>lO5，占基因组DNA序列总量的10-60%，人的基因组中这类序列约占20%，功能还不明了。重复序列的存在是真核生物DNA区别于原核生物DNA的一个重要特征。
153．从不连续基因到成熟mRNA之间存在着一个基因转录的中间体,叫做初级转录物，叫做不均一核RNA(heterogeneous nuclear RNA, hnRNA), 这个基因的初级转录物既含有外显子又含有内合子序列，从不均一核RNA到成熟mRNA要经过一转录后的加工拼接过程。真核生物基因的不连续性和转录后加工是真核基因有别于原核基因的又一重要特征。在真核生物中也有些基因是不含内含子的。
154．基因家族的分类：简单多基因家族；复杂多基因家族。
155．基因扩增（amplification）是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，它使细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要，是基因活性调控的一种方式。
156．基因重排(rearrangement)：将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录，这种方式被称为基因重排。
157．DNA甲基化与基因活性的调控：DNA甲基化能关闭某些基因的活性，去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。当组蛋白H1与含CCGG序列的甲基化或非甲基化DNA 分别形成复合体时，DNA的构型存在着很大的差别，甲基化达到一定程度时会发生从常规的B-DNA向
Z-DNA的过渡。由于Z-DNA结构收缩，螺旋加深，使许多蛋白质因子赖以结合的元件缩入大沟而不利于基因转录的起始。有实验用序列相同但甲基化水平不同的DNA为材料，比较其作为RNA聚合酶转录模板的活性，发现甲基的引入不利于模板与RNA聚合酶的结合，降低了其体外转录活性。
158．真核基因转录水平的调控：真核基因调控主要也是在转录水平上进行的。真核生物的转录调控大多数是通过顺式作用元件和反式作用因子复杂的相互作用来实现的。真核细胞的三种RNA聚合酶（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ）中，只有RNA聚合酶Ⅱ能转录生成mRNA。真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。
159．真核基因转录激活调节：（一）顺式作用元件：启动子和启动子上游近侧序列；增强子；反应元件；（二）反式作用因子：基本转录因子；特异转录因子；
160．反应元件特点：具较短的保守序列；与转录起始点的距离不固定；可位于启动子或增强子内。举例：
激素反应元件（HRE）。
161．应答元件：真核细胞DNA上存在能对特定环境因素作出应答反应的DNA序列．能专一结合特异性蛋白因子,从而调控基因特异表达。包括:热休应答元件；糖皮质激素应答元件；金属应答元件；血清应答元件。
162．反式作用因子（转录因子transcription factor):是能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。一类在真核细胞核中发挥作用的蛋白质因子。反式作用因子识别/结合顺式作用元件中的靶序列启动转录。
163．基本转录因子(general transcription factors)：是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA(mRNA、tRNA及rRNA)转录的类别。特异转录因子(special transcription factors)：为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。
164．反式因子有两个必需的结构域：○1DNA 结合结构域：与顺式元件识别、结合○2转录激活结构域：与RNA聚合酶结合(酸性激活域,谷氨酰胺富含域脯氨酸富含域)
165．反式作用因子的三个功能结构域：①DNA结合域（DNA binding domain），多由60-100个氨基酸残基组成的几个亚区组成；如螺旋-转角-螺旋；锌指；碱性-亮氨酸拉链；螺旋一环一螺旋（HLH）；同源域蛋白（hd)。②转录激活域（transcriptional activation domain），常由30-100氨基酸残基组成，这结构域有富含酸性氨基酸、富含谷氨酰胺、富含脯氨酸等不同种类；③连接区，即连接上两个结构域的部分。
166．转录活化结构域(transcriptional activation domain)：反式作用因子的转录活化功能取决于DNA结合域以外的由30-100个AA组成的区域，此区即为转录活化结构域。不同的转录活化域大体上有下列几个特征性结构：带负电荷的螺旋结构；富含谷氨酰胺结构；富含脯氨酸结构。
167．rRNA基因转录主要在细胞核仁内进行，初级转录产物45S前体rRNA很快就会被加工降解，生成不同相对分子质量的成熟rRNA。rRNA的化学修饰主要是甲基化，原核生物rRNA主要是碱基甲基化，而真核生物rRNA则主要是核糖甲基化。tRNA基因转录时也可能先生成前体tRNA，然后再进行加工成熟。一般认为，tRNA基因的初级转录产物在进入细胞质后，首先经过核苷的修饰，生成4.5S前体tRNA，再行剪接成为成熟tRNA（4S）。
168．mRNA的加工成熟主要包括在mRNA的5’末端加“帽子”，在其3’末端加上多聚（A），进行RNA的剪接以及核苷酸的甲基化修饰等。
169．真核生物的基因可以按其转录方式分为两大类：即简单转录单位和复杂转录单位（①利用多个5’端转录起始位点或剪接位点产生不同的蛋白质；②利用多个加多聚（A）位点和不同的剪接方式产生不同的蛋白质；③虽无剪接，但有多个转录起始位点或加多聚（A）位点的基因）。这两种转录方式虽然最终都产生蛋白质，但它们的转录后加工方式是不同的。
170．翻译水平的调控：1）真核生物mRNA的“扫描模式”与蛋白质合成起始；2）mRNA5’帽子结构的识别与蛋白质合成；3）mRNA稳定性与基因表达调控；4) 蛋白质因子的修饰与翻译起始调控。
171．癌基因（oncogene, onc）是细胞内控制细胞生长的基因，在异常表达时，这些基因不受体内各种调节因素的影响，可持续表达或过高表达，其产物可以使细胞持续增殖。癌基因分为病毒癌基因和细胞癌基因。
172．原癌基因（protooncogene）：正常细胞中存在癌基因，在正常情况下它们不具有致癌作用，但在一定情况下被激活后可变成具有致癌作用的癌基因，在正常情况下它们不但无害，而且对细胞的发育、生长和分化的调节起重要作用。
173．原癌基因的特点：广泛存在于自然界；在进化上高度保守；是调节细胞生长、发育和分化的重要蛋白质；在结构上与病毒癌基因相近；正常情况下表达水平很低；在一定条件下可被激活成癌基因。分类：与膜结合的蛋白；可溶性蛋白；核蛋白。
174．原癌基因激活的机制：点突变；LTR插入；基因重排（染色体易位）；基因缺失；基因扩增。
175．中国艾滋病流行分为三个时期：输入期（1985-1988）；播散期（1989～1993）；增长期（1994至今）。
现代分子生物学试题 邯郸学院12生技 Chapter 3 生物信息的传递——从DNA到RNA 一、名词解释： 1、Transcription 2、Coding strand (Sense strand) 3、Intron 4、RNA editing 5、Messenger RNA (mRNA) 二、判断正误： 1、基因表达包括转录和翻译两个阶段 2、mRNA是以有义链为模板进行转录的 3、转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生 4、σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始 5、聚合酶可以横跨40个碱基对，所以解旋的DNA区域也是40个碱基对 6、流产式起始是合成并释放2~9个核苷酸的短RNA转录物 7、启动子是有义链上结构基因5’端上游区的DNA序列 8、大肠杆菌基因中存在-10bp处的TTCACA区 9、-35区是指5’到3’方向-35区最后一个碱基离+1碱基为35个bp 10、真核基因几乎都是单顺反子 三、单选： 1、_______号帽子存在于所有帽子结构中 A、0号 B、1号 C、2号 D、以上全不是 2、在对启动子识别中起关键作用的是_______ A、α亚基 B、β亚基 C、σ因子 D、β’亚基 3、RNA聚合酶中提供催化部位的是_______ A、α+α B、α+β C、α+β’ D、β+β’ 4、_______是细胞内更新率极高不稳定的RNA A、mRNA B、rRNA C、tRNA D、snRNA 5、mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式是_______ A、5’端帽子 B、多聚腺苷酸尾 C、ρ因子 D、以上都不是 6、真核生物RNA聚合酶II所形成的转录起始复合物不包括_______ A、TBP B、TFIIA C、TFIIC D、TFIID 7、真核生物转录的所在空间是_______ A、细胞质 B、细胞核 C、核孔 D、线粒体 8、ρ因子本质上是一种_______ A、核苷酸 B、蛋白质 C、多糖类 D、碱基
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、
现代分子生物学复习题
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染 小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚！
末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一 种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转 录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。 其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚！
考研普通生物学考研朱玉贤《现代分子生物学》考研 真题 第一部分考研真题精选 一、选择题 1DNA模板链为5′-ATTCAG-3′，其转录产物是（）。[浙江海洋大学2019研] A．5′-GACTTA-3′ B．5′-CUGAAU-3′ C．5′-UAAGUC-3′ D．5′-CTGAAT-3′ 【答案】B查看答案 【解析】在RNA转录过程中，RNA是按5′→3′方向合成的，以DNA双链中的反义链为模板，在RNA聚合酶催化下，以4种核苷三磷酸（NTPs）为原料，根据碱基配对原则（A-U、T-A、G-C）。因此答案选B。 2DNA的变性（）。[扬州大学2019研] A．可以由低温产生 B．是磷酸二酯键的断裂 C．包括氢键的断裂 D．使DNA的吸光度降低 【答案】C查看答案 【解析】DNA的变性是指当DNA溶液温度接近沸点或者pH较高时，DNA 双链的氢键断裂，最后完全变成单链的过程。DNA的复性是指热变性的DNA经缓慢冷却，从单链恢复成双链的过程。A项，DNA的变性是由于高温引起的，故A
项错误；B项，DNA的变性是核酸双螺旋碱基对的氢键断裂，但不涉及其一级结构的改变，故B项错误；D项，当DNA溶液温度升高到接近水的沸点时（DNA变性），260nm的吸光度明显增加，这种现象称为增色效应，故D项错误。 3密码GGC的对应反密码子是（）。[浙江海洋大学2019研] A．GCC B．CCG C．CCC D．CGC 【答案】B查看答案 【解析】根据碱基互补配对原则，G与C相互配对。因此答案选B。 4原核生物启动序列－10区的共有序列称为（）。[扬州大学2019研] A．TATA盒 B．CAAT盒 C．Pribnow盒 D．GC盒 【答案】A查看答案 【解析】绝大部分启动子都存在两段共同序列：位于－10bp处的TATA区和－35bp处的TTGACA区。因此答案选A。 5．色氨酸生物合成操纵子为下列（）方面的例子。[浙江海洋大学2019研] A．正调控可抑制操纵子 B．负调控可诱导操纵子 C．正调控可诱导操纵子
第一章、基因的结构和功能实体及基因组 1、基因定义 基因（遗传因子）是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，携带有遗传信息的DNA序列，是具有遗传效应的DNA分子片段，是控制性状的基本遗传单位，通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息，从而控制生物个体的性状表现。 2、DNA修复 DNA修复（DNA repairing）是细胞对DNA受损伤后的一种反应，这种反应可能使DNA结构恢复原样，重新能执行它原来的功能；但有时并非能完全消除DNA的损伤，只是使细胞能够耐受这DNA的损伤而能继续生存。也许这未能完全修复而存留下来的损伤会在适合的条件下显示出来（如细胞的癌变等），但如果细胞不具备这修复功能，就无法对付经常在发生的DNA损伤事件，就不能生存。对不同的DNA损伤，细胞可以有不同的修复反应。3、DNA损伤 DNA损伤是复制过程中发生的DNA核苷酸序列永久性改变，并导致遗传特征改变的现象。情况分为：substitutation （替换）deletion （删除）insertion （插入）exon skipping （外显子跳跃）。 DNA损伤的改变类型：a、点突变：指DNA上单一碱基的变异。嘌呤替代嘌呤（A与G之间的相互替代）、嘧啶替代嘧啶（C与T之间的替代）称为转换（transition）；嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤则称为颠换（transvertion）。b、缺失：指DNA链上一个或一段核苷酸的消失。c、插入：指一个或一段核苷酸插入到DNA链中。在为蛋白质编码的序列中如缺失及插入的核苷酸数不是3的整倍数，则发生读框移动（reading frame shift），使其后所译读的氨基酸序列全部混乱，称为移码突变（frame-shift mutaion）。d、倒位或转位：（transposition）指DNA链重组使其中一段核苷酸链方向倒置、或从一处迁移到另一处。 e、双链断裂：对单倍体细胞一个双链断裂就是致死性事件。 4、同源重组 同源重组，（Homologus Recombination)是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化，如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等；以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。同源重组反应通常根据交叉分子或holiday 结构（Holiday Juncture Structure) 的形成和拆分分为三个阶段，即前联会体阶段、联会体形成和Holiday 结构的拆分。 a、基因敲除 基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 b、因转移法 同源重组(homologousrecombination)是将外源基因定位导人受体细胞染色体上的方法，因为在该座位有与导人基因同源的序列，通过单一或双交换，新基因片段可替换有缺陷的基因片段，达到修正缺陷基因的目的。位点特异性重组是发生在两条DNA链特异位点上的重组，重组的发生需一段同源序列即特异性位点(又称附着点；attachmentsite，att)和位点特异性的蛋白因子即重组酶参与催化。重组酶仅能催化特异性位点间的重组，因而重组具有特异性和高度保守性。
名词解释： 基因是核酸中贮存遗传信息的遗传单位，是贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。 基因组（gencme）：细胞或生物中，一套完整单倍体遗传物质的总和（包括一种生物所需的全套基因及间隔序列）称为基因组。基因组的功能是贮存和表达遗传信息。 SD序列(Shine-Dalgarno sequence,SD sequence) 是mRNA能在细菌核糖体上产生有效结合和转译所需要的序列。SD序列与16S rRNA的3’末端碱基(AUUCCUCCAC-UAG-5’)互补，以控制转译的起始 分子克隆：克隆（clone）：是指单细胞纯系无性繁殖，现代概念是将实验得到的人们所需的微量基因结构，引入适当的宿主细胞中去，在合适的生理环境中进行无性繁殖，从而利用宿主的生理机制繁衍人们所需要的基因结构，并进行表达。由于整个操作在分子水平上进行，所以称为分子克隆（molecular cloning）。 动物克隆(Animal cloning)就是不经过受精过程而获得动物新个体的方法. 基因诊断：就是利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法，直接检测基因结构 （DNA水平）及其表达水平（RNA水平）是否正常，从而对疾病做出诊断的方法。 基因治疗就是将有功能的基因转移到病人的细胞中以纠正或置换致病基因的一种治疗方法，是指有功能的目的基因导入靶细胞后有的可与宿主细胞内的基因发生整合，成为宿主细胞遗传物质的一部分，目的基因的表达产物起到对疾病的治疗作用。 转基因动物就是把外源性目的基因导入动物的受精卵或其囊胚细胞中，并在细胞基因组中稳定整合，再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出来，采用借腹怀孕法寄养在雌性动物（foster mother）的子宫内，使之发育成具有表达目的基因的胚胎动物，并能传给下一代。这样，生育的动物为转基因动物。 探针：在核酸杂交分析过程中，常将已知顺序的核酸片段用放射性同位素或生物素进行标记。这种带有一定标记的已知顺序的核酸片段称为探针。 限制性核酸内切酶：限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）是一类专门切割DNA 的酶，它们能特异结合一段被称为限制酶识别顺序的特殊DNA序列并切割dsDNA。 载体：要把一个有用的基因（目的基因-研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫做载体（vector）。 限制性片段长度多肽性分析(RFLP):DNA片段长度多态性分析（restriction fragment length polymer-phism,RFLP）基因突变导致的基因碱基组成或(和)顺序发生改变,会在基因结构中产生新的限制性内切酶位点或使原有的位点消失. 用限制酶对不同个体基因组进行消化时，其电泳条带的数目和大小就会产生改变，根据这些改变可以判断出突变是否存在。 简答题： 1.蛋白质的生物合成过程中的成分参与，参与因子，作用？ mRNA是合成蛋白质的“蓝图（或模板）” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体作为合成多肽链的装配机（操作台） tRNA mRNA是合成蛋白质的蓝图，核糖体是合成蛋白质的工厂，但是，合成蛋白质的原料——20种氨基酸与mRNA的碱基之间缺乏特殊的亲和力。因此，需要转运RNA把氨基酸搬运到核糖体中的mRNA上 rRNA 核糖体RNA（rRNA）和蛋白质共同组成的复合体就是核糖体，核糖体是蛋白质合成的场所。
分子生物学试题（一） 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；
第2章染色体与DNA 名词解释 原癌基因：细胞与细胞增殖相关的正常基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 半保留复制：以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA 中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。 填空题 3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。 4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。 6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸切酶。 7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。 8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。 简述DNA复制的过程 DNA的复制过程可被分为3个阶段，即复制的起始、延伸和终止。每个DNA复制的独立单元主要包括复制起始位点和终止位点。 DNA复制的起始包括预引发和引发两个阶段。在预引发阶段，DNA解旋解链，形成复制叉，引发体组装；在引发阶段，在引发酶的催化下以DNA链为模板合成一段短的RNA引物。复制时DNA链的延伸由DNA聚合酶催化，以亲代DNA链为模板，引发体移动，从5′→3′方向聚合子代DNA链。当子链延伸到达终止位点是，DNA复制就终止了，切除RNA引物，填补缺口，在DNA连接酶的催化下将相邻的冈崎片段连接起来形成完整的DNA长链。 试述真原核生物的DNA复制的特点的不同之处 ①真核生物染色体有多个复制起点，多复制眼，呈双向复制，多复制子。原核生物的染色体只有一个复制起点，单复制子也呈双向复制。 ②真核生物冈崎片段长约200bp比原核生物略短。真核生物DNA复制速度比原核慢，速度为1000～3000bp/min(仅为原核生物的1/20～1/50）。 ③真核生物复制的终止在端粒处，原核生物的复制叉相遇时即终止。 ④真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制；而在快速生长的原核生物染色体DNA复制中，起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时，往往采用更多的复制起点。 ⑤真核生物有多种DNA聚合酶，DNA聚合酶δ是真正的复制酶，在PCNA存在下有持续的合成能力。PCNA称为增殖细胞核抗原，相当于大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的β-夹子，RFC蛋白相当于夹子装配器。 原核生物的DNA聚合酶有三种DNA聚合酶ⅢDNA的真正复制酶：多亚基酶，含十种亚基，该酶DNA合成的持续能力强。 ⑥真核生物线性染色体两端有端粒结构，它是由许多成串的重短复序列组成，端粒功能是稳定染色体末段结构，防止染色体间的末端连接，并可补偿滞后链5’-末段在消除RNA 引物后造成的空缺，使染色体保持一定长度。端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 ⑦RPA：真核生物的单链结合蛋白；RNaseH1和MF-1切除RNA引物，DNA聚合酶ε填补缺口。 简述半保留复制的生物学意义
第0章绪论 一、名词解释 1.分子生物学 2.单克隆抗体 二、填空 1．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 三、是非题 1、20世纪60年代，Nirenberg建立了大肠杆菌无细胞蛋白合成体系。研究结果发现poly(U)指导了多聚苯丙氨酸的合成，poly(G)指导甘氨酸的合成。（×） 四、简答题 1. 分子生物学的概念是什么？ 2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？ 3. 分子生物学研究内容有哪些方面？ 4. 分子生物学发展前景如何？ 5. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 6．简述分子生物学发展史中的三大理论发现和三大技术发明。 7. 简述分子生物学的发展历程。 8. 二十一世纪生物学的新热点及领域是什么？ 9. 21世纪是生命科学的世纪。20世纪后叶分子生物学的突破性成就，使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。试阐述分子生物学研究领域的三大基本原则，三大支撑学科和研究的三大主要领域？ 答案： 一、名词解释 1.分子生物学：分子生物学就是研究生物大分子之间相互关系和作用的一门学科，而生物大分子主要是指基因和蛋白质两大类；分子生物学以遗传学、生物化学、细胞生物学等学科为基础，从分子水平上对生物体的多种生命现象进行研究。
2.单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 二、填空 1.结构分子生物学，基因表达与调控，DNA重组技术 三、是非题 四、简答题 1. 分子生物学的概念是什么？ 答案： 有人把它定义得很广：从分子的形式来研究生物现象的学科。但是这个定义使分子生物学难以和生物化学区分开来。另一个定义要严格一些，因此更加有用：从分子水平来研究基因结构和功能。从分子角度来解释基因的结构和活性是本书的主要内容。 2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？ 分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科，它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。狭义：偏重于核酸的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程，其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会，也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明，从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。这些生物大分子均具有较大的分子量，由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息，并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统，由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。 3. 分子生物学主要包含以下三部分研究内容：A.核酸的分子生物学，核酸的分子生物学研究核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递遗传信息，因此分子遗传学（moleculargenetics）是其主要组成部分。由于50年代以来
核酸结构与功能 一、填空题 1．病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA 。 2．AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。 3．X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为 3.4nm 。 4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）的亲和力 5．天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。 二、选择题（单选或多选） 1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。 这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 B．DNA突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 2．1953年Watson和Crick提出（ A ）。 A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述？（ CD ） A．哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．DNA的变性（ACE ）。A．包括双螺旋的解链 B．可以由低温产生C．是可逆的D．是磷酸二酯键的断裂E．包括氢键的断裂 5．在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成（AD ）。 A．基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋 B．依赖于A-U含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少 C．仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生 D．同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对 E．允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基 6．DNA分子中的超螺旋（ACE ）。
现代分子生物学试题及答案汇总-共32页 https://www.doczj.com/doc/b72973862.html,work Information Technology Company.2020YEAR
现代分子生物学习题及答案 一、填空题 1．基因工程是70年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是： (1)分子水平上的操作，(2)细胞水平上的表达 3．基因克隆中三个基本要点是：克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的限制性酶切图谱。5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自属名的第一个字母，第二、三两个字母取自_种名的前两个字母，第四个字母则用株名表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)减少酶量；(2)缩短反应时间；(3)增大反应体积等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_ EcoRl。 8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是GGCC，它们属于异源同工酶。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性： (1) 5'-3'合成酶的活性； (2) 3'-5'外切核酸酶的活性。 10．为了防止DNA的自身环化，可用碱性磷酸酶去双链DNA_5’端的磷酸基团。 11．EGTA是_Ca2+_离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_ 5'-3'合成酶的活性，而没有3'-5'外切酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用DNA聚合酶I的__5'一3'外切核酸酶和5'一3'合成酶的作用。
1．SD序列：起始密码子AUG上游5-10个核苷酸处，有一段可与核糖体16S rRNA配对结合的、富含嘌呤的3-9个核苷酸的共同序列，一般为AGGA(也有说是AGGAGG)，此序列称 SD序列(Shine-Dalgarno sequence) 2．顺式作用元件：cis-acting element是指对基因表达有调控活性的DNA序列，其活性只影响与其自身同处于一个DNA 分子上的基因 3．核小体nucleosome构成真核染色质的一种重复珠状结构，是由大约200 bp的DNA区段和多个组蛋白组成的大分子复合体。其中大约146 bp的DNA区段与八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两分子)的组蛋白组成核小体的核心颗粒，核心颗粒间通过一个组蛋白H1的连接区DNA彼此相连。 基因产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。 冈崎片段Okazaki fragment 在DNA不连续复制过程中，沿着后随链的模板链合成的新DNA片段， 模板链DNA双链中其序列与编码链或信使核糖核酸互补的那条链。在DNA复制或转录过程中，作为模板指导新核苷酸链合成的亲代核苷酸链。 基因家族真核生物的基因组中有很多来源相同、结构相似、功能相关的基因，将这些基因称为基因家族 蛋白质内含子其DNA序列与外显子一起转录和翻译，产生一条多肽链，然后从肽链中切除与内含子对应的aa序列，再把与外显子对应的氨基酸序列连接起来，成为有功能的蛋白质。 翻译内含子mRNA中存在与内含子对应的核苷酸序列，在翻译过程中这一序列被“跳跃”过去，因此产生的多肽链不含有内含子对应的氨基酸序列 Northern blot过电泳的方法将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分，然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段 Sorthern blot 蛋白激酶C protein kinase丝氨酸/苏氨酸激酶的家族成员。在多种免疫受体介导的信号转导中可被二酰甘油和钙离子所激活。 原癌基因proto-oncogene调控细胞生长和增殖的正常细胞基因。突变后转化成为致癌的癌基因。 多顺反子mRNA两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA)。多顺反子mRNA一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。 Alternative splicing在高等真核生物中，内含子通常是有序或组成型地从mRNA前体分子中被剪接，然而，在个体发育或细胞分化时，可以有选择地越过某些外显子或某个剪接点进行变位剪接，产生出组织或发育阶段特异性mRNA，成为内含子的可变剪接。 端粒酶端粒酶是一种含RNA链的逆转录酶，通过识别并结合于富含G的端粒末端，以所含的RNA为模板，逆转录合成端粒。 X染色体失活人和鼠的Xist（ Xi-specific transcript）基因只在失活的X染色体上表达，编码一功能性RNA分子，此分子能与Xic位点相互作用，引起后者构象变化，更容易与各种蛋白因子相结合，最终导致X染色体失活 锌指结构指的是在很多蛋白中存在的一类具有指状结构的结构域，这些具有锌指结构的蛋白大多都是与基因表达的调控有关的功能蛋白由一个含有大约30个氨基酸的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys和2个His配位的Zn构成， 反式作用因子trans-acting factor是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 染色质chromatin chromosome 指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构, 是间期细胞遗传物质存在的形式。 所谓C值，通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。 一般高等生物的C值均大于低等生物,但某些植物或两栖动物的C值比人高出几十倍,这种C值与进化复杂性不一致的现象称为C值反常现象或称为C值矛盾（C-value paradox） 断裂基因或不连续基因（interrupted/discontinuous genes） 所谓断裂基因就是基因的编码序列在DNA分子上是不连续的，为不编码的序列所隔开。编码的序列称为外显子（exon），不编码的序列称为内含子（intron）。 寡核苷酸（oligonucleotide）：一般是指二至十个核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段。 回文序列是指沿同一方向(如5’→3’)序列相同的结构，即碱基序列的反向重复(inverted repeats) 核酸的变性：是指核酸双螺旋区的氢键断裂，DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象 变性的DNA在适当的条件下，两条彼此互补的DNA单链可以重新缔合形成双螺旋结构，这个过程称之为复性 DNA复制时每个子代DNA分子的一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式称半保留复制
2011年 一、名词解释（每题3分）： 1、Okazaki fragments 2、Trans-acting factor 3、Multiple-cloning site 4、Micro RNA 5、Chaperone 二、简答题（每题5分） 1、简述蛋白质的四级结构； 2、真核细胞基因转录的主要调控点有哪些？ 3、表观遗传学机制如何调控染色体 4、简述真核细胞中RNA聚合酶的类型及功能； 5、真核生物RNA的类型； 6、什么是基因突变？真核细胞基因突变的主要类型？ 7、什么是"组学"？常有的组学技术有哪些？ 8、简述兔源多克隆抗体的制备过程； 9、研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法有哪些？ 三、问答题（每题10分）： 1、什么是蛋白质修饰？细胞内蛋白质修饰主要类型有哪些？其主要功能是什么？ 2、大规模临床证据显示非受体酪氨酸磷酸酶在乳腺肿瘤转移灶组织中高表达。请设计一个实验研究方案在细胞水平探讨该蛋白在肿瘤发生、转移过程中的可能作用。 3、什么是模式生物？为什么医学研究中需要模式生物？ 4、结合你的实际经历和知识背景，谈谈分子生物学在医学中的作用。 2010年 一、名词解释（每题3分）： 1、基因与基因组： 2、基因诊断： 3、半保留复制： 4、疾病模型与模式： 5、ncRNA： 二、简答题： 1、为什么个体基因型可以用于健康风险预测？ 2、蛋白质哪些理化性质可以用于检测和鉴定？ 3、蛋白质非共价键作用包括？蛋白质相互作用机制？ 4、细胞死亡的方式？ 5、肝细胞对医学的作用？ 6、基因转录、翻译和基因表达的区别？ 7、DNA损伤类型、检测方式？ 8、蛋白质为什么能够细胞定位？怎样检测蛋白质定位？ 9、为什么同一个体的细胞基因组相同，蛋白质组不同？怎样检测蛋白质组差异？ 三、问答题： 1、谈谈转化医学的定义? 你对转化医学研究有何建议？
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两 个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法、可以减少蛋白质合成 过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc构型、 L构型。在电泳中最前面 的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别 是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下 几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、 A、B、E 。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA‘TAQ 、引物、缓冲液、dNTP。 18.在琼脂糖电泳中，DNA会向正极移动。 19.染色体包括蛋白质、染色体两大部分。 20.环状DNA双链的复制主要可分为θ形、滚环形、D-环形三种类型。 21.转录的基本过程包括转录的起始、延伸、终止。 22.半乳糖对细菌有双重作用；一方面可以作为碳源供细胞生长；另一方面它又是细胞壁的成 分。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从 S2 开始，无G时转录从 S1 开始。 23.DNA重组技术也称为基因克隆或分子克隆。最终目的是把一个生物体中的遗传信息DNA转入 另一个生物体。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因或称外源基因，酶接连接到另一DNA分子上克隆载体，形成一个新 东隅已逝 1 桑榆非晚！
一名词解释 1缺口（gap）：DNA分子中，一条链上失去一段单链，称为gap。 切口（nick）：DNA分子中，一条链上失去一个磷酸二酯键称为nick。 DNA hellicase (DNA解链酶)：也叫DNA解螺旋酶，其通过水解ATP获得能量来解开双链DNA，每解开一对碱基，需水解2分子A TP→ADP+Pi(磷酸盐) 拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA 双链骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸 链得以穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。 3 无义突变(nonsense mutation)：DNA序列三联体密码子发生突变，导致AA密码子变为终 止密码子，称为无义突变，其导致翻译提前结束而常使产物失活 错义突变（missense mutation）：DNA序列三联体密码子发生突变导致pr中原来的AA被另一种AA取代。 4 转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5转录单位：RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定起点（启动子），并在一终点处（终止子）终止，此转录区域称为转录单位。一个转录单位可是一个基因，也可是多个基因。转录因子：RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子称为转录因子。其作用或是认别DNA的顺式作用位点，或是识别其他因子，或是识别RNA聚合酶。 6 复制子：DNA的复制单位。 终止子（Terminator）：模板DNA上提供转录停止信号得DNA序列。 7. 单顺反子mRNA：编码1条多肽链的mRNA RNA编辑：是某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，其改变RNA的序列，而导致DNA所编辑的遗传信息改变。 8 起始tRNA：有一类能特异的识别MRNA摸板上起始密码子的tRNA 多顺反子mRNA：编码多条多肽链的mRNA。 9 RNA的再编码（RNA recoding）:mRNA在某些情况下不是以固定的方式被翻译，而可以 改变原来的编码信息，以不同的方式进行翻译，科学上把RNA编码和读码 方式的改变称为…… 同工tRNA：几种搬运相同AA的tRNA成为同工tRNA。 10通读（readthrough）：有些纵止子的作用被特异的因子所阻止，使酶得以越过终止子继续转录，这种现象称为通读 10 翻译跳跃(translation jumping)：翻译中读码框架发生位移，核糖体跳过一个碱基或一大段 mRNA（如50nt）后读继翻译。这一过程称tranlational jumping 1基因家族：真核生物基因中许多来源相同、结构相近、功能相关的基因按功能成套组合，这样的一组基因称为基因家族，其编码另一个蛋白质家族。 2拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA双链 骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸链得以 穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。 3基因突变：指DNA的碱基顺序发生突然而永久性地变化，从而影响DNA的复制，并使DNA 的转录和翻译也跟着改变，因而表现出异常地遗传特征。 4 DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5信号肽：在多肽链合成过程中，先合成的一段多肽序列，该序列引导后合成的多肽链进入
分子生物学期末考试试题 一、名词解释 1、反式作用因子：能直接或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 2、基因家族：在基因进化过程中一个基因通过基因重复产生两个或更多的拷贝，这些基因构成一个基因家族，是具有显著性的一组基因，编码相似的蛋白质的产物。 3、C值矛盾：C值是指真核生物单倍体的DNA含量，一般的，真核生物的进化程度越高，C值越大，但在一些两栖类生物中，其C值却比哺乳动物大的现象。原因是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。 4、反式作用因子：是能直接或间接的识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质 5、核型：指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形态特征。 6、RNA editing：转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 7、分子伴侣（molecular chaperone）是一类序列上没有相关性担忧共同功能的保守性蛋白质，它们在细胞内能帮助其他多肽进行正确的折叠、组装、运转和降解7、 8、增强子：是指能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。 二、判断： 1、真核生物所有的mRNA都有polyA结构。（X ） 组蛋白的mRNA没有 2、由于密码子存在摇摆性，使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。（√ ） 3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源。（X ） 以NAD作为能量来源 4、tRNA只在蛋白质合成中起作用。（X ） tRNA还有其它的生物学功能，如可作为逆转录酶的引物
5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。（X ） RNA聚合酶的催化反应不需要引物 6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸（X ） 真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸 7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制（X ） 质粒具有复制起始原点，能在宿主细胞中独立自主地进行复制 8、RNA因为不含有DNA基因组，所以根据分子遗传的中心法则，它必须先进行反转录，才能复制和增殖。（X ） 不一定，有的RNA病毒可直接进行RNA复制和翻译 9、细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和ρ因子组成。（X ） 细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子组成 10、核小体在复制时组蛋白八聚体以全保留的方式传递给子代。（√ ） 11、色氨酸操纵子中含有衰减子序列（√ ） 12、SOS框是所有din基因（SOS基因）的操纵子都含有的20bp的lexA结合位点。（√ ） 三、填空： 1、原核生物的启动子的四个保守区域为转录起始点、-10区、-35区、-10区与-35区的距离。 2、根据对DNA序列和蛋白质因子的要求，可以把重组分为同源重组、位点专一性重组/特异位点重组、转座重组、异常重组四类。 3、研究启动子功能的主要方法是启动子的突变，研究酶与启动子间识别与结合的方法有足迹法和碱基修饰法。 4、真核生物中反式作用因子的DNA结合结构域有螺旋－转角－螺旋(HTH) 、碱性－螺旋-环-螺旋(bHLH) 、锌指(zinc finger) 、碱性－亮氨酸拉链(bZIP)。 5、根据DNA复性动力学，DNA序列可以分成哪四种类型？ 单一序列、轻度重复序列、中度重复序列、高度重复序列 四、选择题（10分，每题1分） 1、在真核基因表达调控中，( B )调控元件能促进转录的速率。 A、衰减子 B、增强子 C、repressor D、TATA Box 2、核基因mRNA、的内元拼接点序列为( D )。