体外受精-胚胎移植的全程配合及护理
【摘要】: 本文总结介绍我院生殖中心2010 年1～12 月1325 例进行体外受精-胚胎移植( ivf-et)过程的配合及护理体会。认为重视心理护理,严格按照医嘱准时准量给药,做好取卵与移植术前、术中及术后的全方位护理及指导病人配合治疗，是ivf-et成功的重
要保证之一。
【关键词】: 体外受精; 胚胎移植; 护理
体外受精-胚胎移植术( ivf-et) ［1］是指用人工的方法从母体卵巢中获取多个卵子和父体的精子后, 在体外进行授精培养, 发
育形成胚胎后再放回母体的子宫内着床, 发育成胎儿的一种新技
术［2］, 俗称试管婴儿。目前, ivf-et 已成为治疗不育症的重要手段［3］。但ivf-et 技术难度大、治疗周期长,这就需要医、护、患三方面紧密合作。因此,护士正确执行医嘱,指导病人准确配合治疗是ivf-et 获得成功的重要保证。我院生殖中心2010 年1～12 月，共进行1325 例体外受精-胚胎移植, 现将过程的配合及护理情
况介绍如下。
1 临床资料
1．1 基本资料
2010 年1～12 月来我中心进行ivf-et 治疗的1325 例不孕夫妇，年龄：21-47岁，平均年龄34岁，不孕不育年限：1-10年，平均不孕不育年限：5年，其中，原发不孕612例，继发不孕714
胚胎移植和人工受精 一、胚胎移植又称受精卵移植：俗称人工授胎或借腹怀胎。它是将家畜的受精卵或发育数日的胚胎，从某一个体（供体）移植到同种动物的另一个体（受体），使之继续发育的技术。经胚胎移植产生的后代从受体得到营养发育成新个体，但其遗传物质则来自它的真正亲代，即供体动物和与之交配的公畜。 二、胚胎移植的关键技术：在国际上首次对体细胞克隆牛进行了超排处理，获得平均每头次可用胚胎6.5枚；应用玻璃化冷冻保存技术对体细胞克隆牛超排胚胎进行了冷冻保存、移植，并获得了健康的犊牛；研究了玻璃化冷冻对体内外生产牛胚胎细胞的损伤，提高了半胚裸露冷冻的保存效果，简化了冷冻解冻程序，冷冻裸露半胚移植妊娠率达到了47.1%。其胚胎移植的主要技术环节： (一)供体母牛和受体母牛的选择； (二)供体母牛和受体母牛的同期发情； (三)供体母牛的超数排卵； (四)胚胎的采集和质量检查； (五)胚胎冷冻保存； (六)胚胎移植； (七)受体母牛移植后的妊娠检查。 三、胚胎移植技术在畜牧业发展中的重大意义： 利用胚胎移植，可以开发遗传特性优良的母畜繁殖潜力，较快地扩大优秀种公牛和核心母牛的数量。采用胚胎移植则使优良母畜免去了冗长的妊娠期，胚胎取出后不久即可再次发情、配种和受精，从而能在一定时间内产生较多的后代。如果向母畜注射促性腺激素，还可诱发其在一个发情期中排出比自然情况下更多的卵子，取得多个胚胎供移植之用。尽管单个胚胎的生产成本较高，但由于种公牛和种母牛较高的经济价值和社会价值，以及利用胚胎移植在育种方面可以获得同胞或同卵双生牛进行后裔测定等优势，因此，该技术在种公牛的选育和优质核心母牛群的培育以及加快育种步伐方面均具有极大的优越性。另外，由
高二生物选修三导学案使用时间: 2014年3月25日编制:高海乐杨建磊张双双 审核: 包科领导: 班级：小组：姓名：评价： 专题三胚胎工程 3．2体内受精、早期胚胎培养和胚胎移植 【学习目标】 1.熟练掌握体外受精、胚胎移植的过程，能正确理解胚胎移植的生理学基础。 2.自主学习，合作探究，学会应用试管动物技术解决实际问题。 3.全力以赴，感受生物科技发展带给人类的贡献。 【学习重难点】 重点：1.体外受精的主要步骤 2.胚胎移植的过程和生理学基础 难点：1.精卵的采集与培养 2.胚胎移植的生理学基础 【使用说明及学法指导】 1.先通读教材，划出重点，然后再完成导学案，并把不明白的问题标出来，再翻阅课本，解决问题。 有些问题需要认真思考和总结，切忌抄课本和资料。 2.A层完成掌握学案，并完成课后题的相关内容。B层掌握好学案的内容，C层完成好学案。 预习案 1.勾画并记忆试管动物技术的概念，写出体外受精的三步聚？ 2.结合课本，写出收集卵母细胞和精子的方法各有哪些？ 3.在体外使精子获能的主要方法有哪两种?受精时的外界培养液有哪两种？ 4．早期胚胎培养的目的及培养液的成分？ 5.勾画并记忆胚胎移植的概念及进行胚胎移植的原因；写出胚胎工程的最后一道工序？ 6. 在课本中勾画并记忆胚胎移植中供体牛和受体牛各自的作用。写出胚胎移植的意义是什么？ 7.胚胎移植的生理学基础是什么？ 8.同期发情处理、超数排卵采用的激素分别是什么？冲卵指的是什么？
巩固训练 （A/B/C层）1．下列关于精子的说法，不正确的是( ) A．精子的发生从初情期开始 B．它与卵细胞的受精发生在子宫内 C．精细胞变形为精子时保留的细胞器主要是线粒体 D．精细胞变形为精子时细胞内的一些物质最后脱落 （A/B/C层）2．下列有关卵子的产生说法中，正确的是（） A．哺乳动物卵泡的形成是在初情期 B．排出成熟卵子细胞的过程即为排卵 C．卵子形成时的分裂过程均在卵巢内完成 D．卵子产生中的减数第二次分裂是在精子和卵子的结合过程中完成的 （A/B/C层）3．在受精作用过程中，体现受精实质的是（） A．同类生物的精子和卵细胞互相识别B．精子的头部进入卵细胞 C．卵细胞膜增厚形成受精卵膜D．雄原核与雌原核互相融合 （A/B/C层）4．2009年2月2日，山东省干细胞工程技术研究中心的科学家宣布成功克隆出5枚符合国际公认技术鉴定指标的人类囊胚。该课题首席专家称他们掌握此项技术不是为了制造克隆人，而是进行人类治疗性克隆研究。下列有关囊胚和桑椹胚的说法中，不正确的是（） A．桑椹胚的各细胞结构功能基本相同 B．囊胚期细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变 C．囊胚期细胞分化是由遗传物质突变引起的 D．囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起的 （A/B层）5.下图是某种动物发育的几个阶段，下列有关叙述不正确的是（） A．在由2～11的过程中，可能发生细胞的增殖和衰亡 B．在1～11的过程中细胞的全能性逐渐减小 C．图示细胞的增殖方式是有丝分裂 D．细胞分化过程从2开始
钙离子载体对牛精子体外受精及胚胎发育的影响 彭礼繁１，罗光彬?，（１．沈阳农业大学动物胚胎工程实验室，辽宁沈阳李东全－，陈自洪ｚ，石德顺ｚ １１０１６ｌ；２．广西大学动物繁殖研究所，广西南宁５３０００５） 摘要：在牛精子获能液中添加不同浓度的钙离子载体，应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育作了研究。通过对顶体反应、超激活、活率和早期胚胎发育率的观察，筛选出获能液中最适的钙离子载体浓度，作用时间及其有利于早期胚胎发育的最佳浓度。结果表明：钙离子载体在诱导牛精子获能上存在一个浓度一时间阅值，其最佳浓度和时间组合是Ｏ．１ｕＭ处理２ｍｉｎ或者０．１５ｕＭ处理Ｏ。５ｍｉｎ，此时的囊胚率最高；钙离子载体的添加不能诱导牛精子获能的发生． 关键词：钙离子载体；牛；精子；体外受精；胚胎发育 中图分类号：Ｓ８１４．４文献标识码：Ａ文章编号：１００５—８５６７（２００８）０４一００３５一０４ 目前，学术界对Ｃａｚ＋在精子获能中的作用存在争议。有人认为获能过程中精子细胞内ｃａ２＋浓度不变，但多数学者认为精子细胞内的ｃａｚ‘嶂衣度增加。Ｂａｌｄｉ等【－１证实人精子在获能前２ｈ，细胞内Ｃａ２＋浓度从７０ＩｌＭ增至２５０ｐＭ。Ｃｒｏｓｓ认为Ｃａ２＋在精子获能中的作用是通过刺激腺苷酸环化酶（ＡＣ）的合成来增加环腺苷酸（ｃＡＭＰ）的合成幽，而ｗａｓｃｏ则认为Ｃａｚ＋能通过ｃＡ＾ＩＰ酶来降解ｃＡＭＰ合成［３］。此外Ｂａｋｅｒ等认为细胞内Ｃａ２＋的增加会抑制细胞内ＡＴＰ的利用，从而妨碍ＰＴＰ团。Ｃａｚ＋在精子获能中的分歧，原因可能在于对顶体反应中Ｃａ２＋作用的认识不同，以及研究Ｃａ２＋作用和相关事件的复杂性。自从Ｙａｎａｇｉｍａｃｈｉ等发现Ｃａｚ＋对精子顶体反应起重要作用，同时证明ＩＡ（ＩｎｖｉｔｒｏＡｒｔｉｆｉｃｉｔｉｏｎ）能诱导精子获能促使顶体反应的发生后，Ｃａｚ＋载体在获能中的作用引起了关注网。目前，Ｃａ斗载体在牛（Ｆｕｋｕｄａ等，１９９０；Ｊａｎｕｓｋａｕｓｋａｓ等，２０００）、羊（张嘉保等，１９９０）、猪（Ａｔｓｕｓｈｉ等，２００４）和水牛（Ａｂｄｕｌ等，２００５）的精子体外获能中，均获得成功。但是由于钙离子载体．Ａ２３１８７作用剧烈，处理时间过长或浓度过高，会导致精子死亡。目前，在牛精子获能中钙离子载体的添加量还不是很清楚，为此我们进行了钙离子载体对牛精子体外受精及其早期胚胎发育的影响试验，筛选出获能液中最适的钙离子载体浓度及其有利于牛早期胚胎发育的最佳浓度，从而为牛胚胎体外生产商品化奠定基础。 １材料与方法 １．１材料 １．１．１主要仪器荧光显微镜、生物显微镜附显收稿日期：２００８一０４—２４相系统、Ｃ０。培养箱、倒置显微镜及显微操作系统等来自于沈阳农业大学动物胚胎工程实验室。１．１．２主要试剂ＴＣＭ一１９９、Ｄ—ＰＢＳ、钙离子载体－Ａ２３１８７、Ｂ０（体外获能液）等均购于ｓｉｇｌｎａ公司。１．１．３试验材料采集与保存牛卵巢采自沈阳市于洪区金氏牛羊屠宰场，在牛宰后３０ｍｉｎ内采集卵巢，保存在３５℃左右的装有灭菌生理盐水的保温瓶中，生理盐水中添加Ｏ．２ｍｇ／ｍＬ青霉素和０．２ｍｇ／ｍＬ链霉素，２ｈ内带回实验室。牛冷冻精液购自辽宁省肉牛繁育中心，０．２５ＩｎＬ／管。 １．２方法 １－２．１卵泡卵母细胞的采集和成熟培养按文献［１蛐３介绍的方法进行。 １．２．２成熟卵母细胞的体外受精（肝素受精法）成熟培养后，把卵母细胞先用洗涤液洗３次，再用处理好的精液洗涤１次，移入覆盖于石蜡油下的微滴中进行获能（受精）处理。精液处理方法：细管冻精于３９℃温水中解冻后，检查其活率。活率合格后，置于灭菌离心管中，加入精子洗涤液，混匀后ｌ５００ｒ／ｍ离心５ｍｉｎ，弃上清液（两次）。然后加入获能（受精）液，再ｌ０００ｒ／ｍ离心ｌｍｉｎ，弃去沉淀。最后再加入获能液，１５００ｒ／ｍ离心５ｍｉｎ，弃上清液，用获能液调整精子浓度到１×１０６个／ｍＬ。１．２．３成熟卵母细胞的体外受精（钙离子载体受精法）细管冻精于３９℃温水解冻后，检查其活率，活率合格后，置于灭菌离心管中，加入精子洗涤液，混匀后１５００ｒ／ｍ离心５ｍｉｎ，弃去上清液（两次）。最后再加入获能液，准确计时，计时结束后，马上加入等体积的钙离子载体阻断剂，并充分 万方数据
不孕症病人体外受精与胚胎移植的护理 Ｎｕｒｓｉｎｇ ｃａｒｅ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｍｂｒｙｏ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ 陈向红，陈玉珍，陈惠仪，蒙顺好，阙文清 Ｃｈｅｎ Ｘｉａｎｇｈｏｎｇ，Ｃｈｅｎ Ｙｕｚｈｅｎ，Ｃｈｅｎ Ｈｕｉｙｉ，ｅｔ ａｌ （Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｓｕｎ Ｙａｔ－ｓｅｎ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｕｎ Ｙａｔ－ｓｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０１２０Ｃｈｉｎａ） 摘要：［目的］探讨整体护理干预对不孕症病人体外受精与胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）治疗的影响。［方法］将２０１１年１月—２０１１年１０月接受ＩＶＦ－ＥＴ治疗的１ ４６１例病人随机分为护理干预组和对照组，对照组给予常规护理，护理干预组实施整体护理，比较两组病人的术后妊娠率。［结果］护理干预组病人的妊娠率明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。［结论］不孕症病人采用ＩＶＦ－ＥＴ结合整体护理，可有效提高妊娠成功率。 关键词：不孕症；体外受精；胚胎移植；护理Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｐｒｏｂｅ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｈｏｌｉｓｔｉｃ ｎｕｒｓｉｎｇ ｉｎｔｅｒ－ｖｅｎｔｉｏｎ ｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｍｂｒｙｏ ｔｒａｎｓｆｅｒ（ＩＶＦ－ＥＴ）ｆｏｒ ｐａ－ｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｗａｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｆｏｒｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｄａｔａ ｏｆ ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ １４６１ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｈｏ ａｃｃｅｐｔｅｄ ＩＶＦ－ＥＴ ｉｎ ａｆｆｉｌｉ－ａｔｅｄ Ｓｕｎ Ｙａｔ－ｓｅｎ ｍｅｍｏｒｉａｌ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｆｒｏｍ Ｊａｎ．ｉｎ ２０１１ｔｏ Ｏｃｔ．ｉｎ ２０１１．Ａｌｌｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｎｕｒｓｉｎｇ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｒａｎｄｏｍｌｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｐｏｓｔ－ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｐｒｅｇｎａｎｃｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｂｅｔｗｅｅｎｂｏｔｈ ｇｒｏｕｐｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｐｒｅｇｎａｎｃｙ ｒａｔｅ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ ｎｕｒｓｉｎｇ ｉｎｔｅｒｖｅｎ－ｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＩＶＦ－ＥＴ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｔｏ ｈｏｌｉｓｔｉｃ ｎｕｒｓｉｎｇ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ ｃａｎ ｅｆ－ｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ｓｕｃｃｅｓｓ ｒａｔｅ ｏｆ ｐｒｅｇｎａｎｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｉｎｆｅｒｔｉｌｉｔｙ；ｖｉｔｒｏ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ；ｅｍｂｒｙｏ ｔｒａｎｓｆｅｒ；ｎｕｒｓｉｎｇ 中图分类号：Ｒ４７３．７１ 文献标识码：Ｂ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－４７４８．２０１２．０９．００１ 文章编号：１６７４－４７４８（２０１２）３Ｃ－０７６９－０２ 体外受精与胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）是一项高、精、尖的助孕技术，是近年来治疗不孕症的主要手段之一，首先取出不孕夫妇女方的卵子和男方的精子，精子经过密度梯度离心加上游法洗涤，并于卵子取出３ｈ～４ｈ后加进培养皿中进行体外受精并培养成胚胎，４８ｈ～７２ｈ后再将胚胎植入母体宫腔内以达到妊娠目的［１］。我国育龄女性中约有１０％患有不孕症，不孕原因包括输卵管性不孕、免疫性不孕、子宫内膜异位症及多囊卵巢综合征等，男性病人有弱精、少精症［２］，其有效治疗手段均可选择ＩＶＦ－ＥＴ，但研究发现配合整体护理干预可以明显提高病人术后的妊娠率，因此值得深入研究。本组回顾了２０１１年１月－２０１１年１０月在我院接受ＩＶＦ－ＥＴ治疗的１ ４６１例病人的临床资料，探讨整体护理干预对不孕症病人ＩＶＦ－ＥＴ治疗的影响。 １ 资料与方法 １．１ 一般资料 本组１ ４６１例接受ＩＶＦ－ＥＴ治疗的不孕症病人，经诊断女方宫腔形态均正常，年龄２２岁～４３岁（３０．８岁±５．５岁），男方年龄２４岁～４７岁（３４．１岁±４．９岁）；不孕年限２年～２１年（９．３年±５．５年）；原发性不孕６５９例，继发性不孕８０２例；不孕原因：输卵管不孕５１６例，排卵障碍２７例，男方因素２１７例，子宫内膜异位４４例，原因不明６２例；双方因素４２５例，多重因素１７０例。随机分为护理干预组７３０例和对照组７３１例，两组病人在性别、不孕年限及不孕因素等方面均无统计学意义（Ｐ＞０．０５），具有可比性。 １．２ 方法 １．２．１ 治疗方法 根据病人个体情况制订治疗方案，本中心常用的方案有：长方案、短方案、微刺激方案、拮抗剂方案及超长方案。实施短方案、微刺激方案、拮抗剂方案的病人于月经周期１ｄ～３ｄ使用降调节药物和促排卵药物；超长方案适合子宫内膜异位症的病人，需要治疗一段时间后才进入试管婴儿周期；实施长方案的病人在其月经周期２０ｄ左右使用降调节的药物，然后于下次月经３ｄ～５ｄ加用促排卵药物，连续使用１０ｄ左右，每次使用的剂量是根据病人的卵巢功能来决定的，待卵泡成熟，加用绒毛膜促性腺激素促卵泡最后成熟，３４ｈ～３６ｈ后经阴道在Ｂ超监测下穿刺取卵。取男方精子做精液优化处理后，与卵子行体外受精，在体外培养４８ｈ～７２ｈ后，再将胚胎植入到母体宫腔内，并于术后２周检查病人妊娠是否成功。 １．２．２ 护理方法 对照组实施常规护理，护理干预组实施整体护理，具体方法有如下。①健康教育：围术期实施一对一的健康教育；每天下午由专人组织病人上课，初期以自愿为原则，以后规定进入周期治疗的病人都必须听课；为进入周期的病人派发一些文字资料，由护理人员交代不同阶段注意事项，态度亲切；教育内容包括不孕症、ＩＶＦ－ＥＴ的相关知识，检查治疗的目的、方法，试管婴儿流程，费用介绍、成功率，手术过程示意，预期结果、注意事项，如何配合治疗等；为病人提供相关报刊、书籍或健康教育手册［３］，同时告知病人可电话咨询任何相关问题。②心理护理：护理人员需重视病人的心理变化情况，主动关心病人，耐心听取病人主诉，并予以适当的心理疏导；耐心告知病人治疗的良好预后，以安抚病人的不良情绪；鼓励病人多与他人交流，以分散注意力。③围术期护理：取卵前要详细告知病人取卵过程及注意事项，包括用药及注射情况、饮食情况、术前排尿及阴道灌洗方法等。态度亲切热情，耐心解答病人疑问，以安抚病人紧张等负面情绪。取卵时，护理人员全程陪同，指导病人正确的体位和减轻疼痛的方法，术前可采用镇痛或麻醉止痛来减轻病人术中的疼痛。取卵后，告知病人手术情况，取卵的数目，有无阴道塞纱，定时为病人测量血压，肌肉注射黄体酮或绒毛膜促性腺激素，并告知下次回院时间及做好胚胎移植的准备。胚胎移植时，嘱咐病人适量饮水至膀胱中度充盈时进行，同样，在移植
作者姓名：吴侠 论文题目：牛胚胎发育过程组蛋白修饰及克隆胚胎表观遗传重编程的作者简介：吴侠，男，1980年09月出生，2003年07月师从于内蒙古大学旭日干教授，于2008年07月获博士（硕士）学位。 随着十年前第一只体细胞克隆哺乳动物的诞生，近年来，体细胞核移植技术已经在其他物种中得到实现，且体细胞核移植技术已经越过了种属的界限。但就目前的技术水平而言，体细胞克隆胚胎怀孕率低、出生后胎儿异常的问题依然没有解决，这些问题的存在严重制约了体细胞克隆技术的广泛应用。许多研究证实，供体细胞核在受体卵母细胞中的不完全或异常表观遗传重编程是导致克隆胚胎发育异常的重要原因。基因组DNA甲基化、组蛋白的共价修饰是重要的表观遗传修饰，二者具有复杂而广泛的生物学功能。正常生殖细胞发生及胚胎发育过程，染色体要经历广泛的DNA甲基化、去甲基化，核小体核心组蛋白也要通过各种共价修饰调节染色体功能，从而完成遗传信息的传递和调控胚胎的发育。目前，对于克隆胚胎重编程机理的研究还处于初级阶段，虽然证实克隆胚胎存在DNA甲基化的异常，但是组蛋白共价修饰是否也存在异常，还不是很清楚。为了深入探讨克隆胚胎组蛋白修饰的重编程，进而改善克隆效率，阐明胚胎的发育机理，本研究探讨了牛卵母细胞体外成熟、体外受精及胚胎体外发育过程中组蛋白修饰的动态变化，比较了体外受精胚胎与克隆胚胎早期发育过程中组蛋白修饰的差异。使用组蛋白去乙酰化酶抑制剂对供体细胞及受体卵母细胞进行了处理，检测了药物对供、受体表观遗传修饰，以及克隆胚胎发育的影响，并对处理后供体核在去核卵母细胞中组蛋白修饰的重编程进行了分析。 1. 牛卵母细胞减数分裂、体外受精及胚胎体外发育过程中组蛋白修饰动态变化的研究 本研究探讨了组蛋白H3、H4不同甲基化、乙酰化修饰位点在牛卵母细胞成熟、体外受精及胚胎体外发育不同阶段的动态变化。结果显示，组蛋白H3、H4甲基化，乙酰化具有明显的阶段性变化。牛卵母细胞成熟过程不同组蛋白不同修饰位
1 1 范围 本标准规定了绵羊的胚胎生产和移植的供体羊的选择和饲养管理、供体羊的超数排卵及人工授精、手术冲卵技术及胚胎质量鉴定、冻胚的解冻、受体羊的选择及饲养管理、胚胎手术移植技术和妊娠受体羊的饲养管理技术。 本标准适用于秦皇岛地区绵羊的胚胎生产和移植。 2 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 DB 1303/T 098-2000 羊的人工授精技术操作规程 3 3 供体羊的选择和饲养管理 3.1 3.1 供体羊的选择 a）a）体羊品种优良、生产性能好； b）b）传性稳定、谱系清楚； c）c）体质健壮。繁殖机能正常，无遗传和传染性疾病。年龄在2岁至7岁为宜； d）d）具有畜牧部门颁发的种畜禽鉴定合格证书。 3.2 3.2 供体羊的饲养管理 3.2.1 3.2.1 保持饲养环境稳定，饲养环境卫生、干燥、棚舍温度适宜。避免应激反应。 3.2.2 3.2.2 制定合理的供体羊日粮配方，保证正常的营养平衡。 3.2.3 3.2.3 满足供体羊清洁饮水的需要。 4 4 供体羊的超数排卵及人工授精 4.1 4.1 超数排卵 4.1.1 4.1.1 超数排卵的季节和发情周期：绵羊最适超数排卵季节为9月下旬至11月上旬。绵羊的发情周期在15d—17.5d。供体母羊在超数排卵前需观察1—2个完整的发情周期。 4.1.2 4.1.2 用于超数排卵的激素选择 FSH—P（垂体促滤泡素） LH—P（垂体促黄体生成素） ICI80996（氯前列烯醇） 4.1.3 4.1.3 激素剂量（注射总量/只） FSH—P剂量（肌注）：120IU—160IU LH—P剂量：根据FSH的注射剂量，肌注100—120IU。 ICI80996：肌注0.08mg/次，注射两次/d。 4.1.4 4.1.4 超数排卵方法 FSH—P 3天注射法 以母羊发情之日作为发情周期的0d，在母羊发情周期的第13d或13.5d（周期大于17.5d的羊在第13.5d）开始，每天早：（6：00—7：00）和晚（18：00—19：00）各注射1次FSH，连续3天，递减注射。 FSH、LH用生理盐水稀释。 在第5、6次注射FSH—P时，同时肌肉注射ICI80996。 确定供体羊发情后立即注射LH。如果FSH—P未注射完供体羊已发情，停止注射FSH—P，立即注射LH。
第一章 动物胚胎技术：以动物生殖细胞和胚胎为主要研究对象，以生物科学为基础，研究调控和提高动物繁殖力的一门学科 第二章 精细管上皮周期：某个特定时间有一个特定的细胞组合，然后间隔一段时间后，在同一横断面又会出现相同的细胞组合 精细管上皮波：从精细管纵切面上看，细胞组合也是有规律的出现，即沿着纵切面每间隔一段距离会观察到相同的细胞组合 促性腺激素释放激素（GnRH） 促卵泡素（FSH） 促黄体素（LH） 催产素（OXT） 催产素和精氨酸加压素（AVP） 表皮生长因子（EGF） 胰岛素样生长因子（IGF） 转化生长因子β（TGF-β） 转化生长因子α（TGF-α） 胶质细胞系来源的神经营养因子（GDNF） 干细胞因子（SCF） 精子：有头部、颈部、尾部组成，精子的形态的差异主要在头部 卵泡：分为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、三级卵泡 征集：生长卵泡池中一群小卵泡开始迅速生长 选择：只有部分被征集的卵泡继续发育，以致最终确立优势卵泡的过程 优势化：优势卵泡迅速发育而其他同时被征集的卵泡的生长和发育被抑制 自发排卵：卵泡成熟后不需外界刺激即可排卵和自动形成黄体 诱发排卵：动物经过交配或人为刺激子宫颈才能引起排卵。 旁分泌：某种组织内一种类型的分泌的活性物质作用于同一组织中另一类型细胞，调节其功能、生长和分化 自分泌：某种细胞的因子作用于同一类型的细胞或自身细胞的现象 第三章 获能：动物刚射出的精子不能穿入卵子，只有在雌性生殖道内经历一段时间，在形态和生理上发生一系列变化，才具备受精能力的生理现象。 去能：获能精子一旦与浆液和附睾液接触，已获能的精子就会失去授精能力 发生泡破裂：卵细胞成熟后，这一时期细胞核的变化包括两个衔接的过程 早期胚胎发育阶段：1、卵裂2、桑椹胚3、囊胚4、胚胎的原肠化胚胎的扩张或伸长6、胚胎迁移和分布
人工授精和试管婴儿的流程区别 人工授精和试管婴儿的流程区别怎样？童梦健康管理为你分析：人工授精多适用于不育男性，还属于体内受精，而试管婴儿是体外受精，适用于不孕女性，这两种方式在一定程度上有效提高怀孕几率。 人工授精和试管婴儿适合哪些人 人工授精是指采用非性交的方式将精子递送到女性生殖道中以达到使女子受孕目的的一种辅助生殖技术。是指采用非性交的方式将精子递送到女性生殖道中以达到使女子受孕目的的一种辅助生殖技术。主要用于男性不育症。 人工授精适用于： 1、睾丸性无精子症、梗阻性无精子症。严重的少精子症、弱精子症和畸精 子症。 2、输精管复通失败或射精障碍。 3、男方和(或)家族有不宜生育的严重遗传性疾病。 4、母儿血型不合不能得到存活的新生儿。 5、其中，除睾丸性无精症外，其他需行供精人工授精技术的患者，医务人员必须向其交代其可以通过卵胞浆内单精子显微注射技术获得自己血亲关系的 后代。 试管婴儿是体外受精-胚胎移植技术的俗称，是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴 儿。
试管婴儿适用于： 1、严重输卵管疾病，如患盆腔炎导致输卵管堵塞、积水，输卵管结核而子宫内膜正常，异位妊娠术后输卵管堵塞、输卵管发育不全，输卵管结扎术后，宫 外孕等双侧输卵管切除等。 2、子宫内膜异位症、子宫腺肌症。 3、免疫性不孕症，如存在抗精子抗体、抗子宫内膜抗体等。 4、男性因素，即少精症、弱精症、畸精症。 5、原因不明性不孕症。 6、其它原因的不孕治疗无效者。 7、有遗传性疾病需要做移植前诊断者。 8、其它：如卵泡不破裂综合症等。 人工授精和试管婴儿的流程区别 人工授精是将丈夫的精液或者精子库健康供精者提供的冷冻精子优化处理后注入女性生殖道内，仍然属于体内授精。 而体外受精-胚胎移植,俗称“试管婴儿”，是将不孕夫妇的精子和卵子取出，在体外完成受精和胚胎的早期发育，然后将早期胚胎放回母亲子宫内,使其继续 发育,生长直至足月分娩，属于体外授精。
体外受精—胚胎移植及其衍生技术临床操作规程第一节不孕症的诊断 一对夫妇在没有采取避孕措施的情况下，有规律性生活1年而未能自然妊娠，即诊断为不孕症（WHO，1995）。首诊时详细询问并记录患者的不孕时间、既往性生活史、既往妊娠史、既往检查及结果、遗传病史、家族史，了解患者是否可能暴露于毒性物质,夫妇双方有无酗酒、吸烟、非处方镇静剂的使用、吸毒等，详细询问可能影响生育能力的疾病史，包括糖尿病、内分泌疾病、自身免疫性疾病，了解月经周期、经量、经期、是否痛经等，询问患者性生活的频率,了解有无性功能障碍，并根据情况建议不孕症夫妇接受以下检查,以明确不孕症病因。 1、女方因素 （1）月经第2~5天，抽血检查性激素水平：FSH、LH、E2、PRL、T。 （2）月经干净3~7天，输卵管碘油造影检查或腹腔镜检查。 （3）阴道B超自然周期排卵监测，至卵泡破裂。 （4）黄体中期（监测排卵后1周）抽血检查孕激素水平。 （5）必要时宫腔镜检查了解子宫腔内病变。 （6）抗精子抗体。 2、男方因素 （1）精液常规分析，结果异常需复查1~2次 （2）按Kruger严格形态标准进行精子形态分析 （3）连续3次精液离心检查均未发现精子者建议行以下检查： 经直肠精囊、前列腺彩超（TURS） 染色体核型分析 性激素：FSH LH T PRL E2 睾丸/附睾穿刺，了解睾丸/附睾中是否有成熟活动精子 （4）抗精子抗体
第二节体外受精与胚胎移植的适应症与禁忌症 一、体外受精与胚胎移植的适应症： 1、女方各种因素导致的配子运输障碍。 2、排卵障碍。 3、子宫内膜异位症。 4、男方少、弱精子症。 5、不明原因的不育。 6、免疫性不孕。 二、体外受精与胚胎移植禁忌症： （1）如有下列情况之一者，不得实施体外受精-胚胎移植及其衍生技术 ①男女任何一方患有严重的精神疾患、泌尿生殖系统急性感染、性传播疾病； ②患有《母婴保健法》规定的不宜生育的、目前无法进行胚胎植入前遗传学诊断的遗传性疾病； ③任何一方具有吸毒等严重不良嗜好； ④任何一方接触致畸量射线、毒物、药物并处于作用期； （2）女方子宫不具备妊娠功能或严重躯体疾病不能承受妊娠。 第三节体外受精与胚胎移植助孕前常规检查 1、全身体格检查：血压、脉搏、身高、体重（BMI）、皮肤粘膜、心脏、肺脏、乳房、肝脏、脾脏、肾脏、脊柱、四肢等。 2、女性生殖系统检查：有无生殖道畸形、分泌物异常，宫颈有无糜烂，子宫大小、质地、位置、活动度，附件有无包块及其大小。 3、实验室检查： 女方检查项目男方检查项目 血常规血型（ABO Rh）尿常规血型（ABO Rh） 白带常规细胞涂片或阴道镜精液常规 支原体衣原体淋球菌支原体衣原体淋球菌
体外受精与胚胎移植技术介绍-好孕国际生殖医疗 自从1978年世界上首例经体外受精-胚胎移植（简称IVF-ET)的婴儿诞生以来，人类辅助生殖技术经历了飞速发展的阶段。这项技术不同于过去单纯的人工授精或胚胎移植。人的体外受精-胚胎移植技术包括诱发超排卵、采集卵子、精子体外获能、体外受精和受精卵体外培养及胚胎移植，其中诱发超排卵、体外受精和胚胎移植三项是关键技术。近几年，在传统的试管婴儿的技术方法基础上又提出了配子输卵管移植和阴道培养法。前者是取出精子和卵子后，再将精子与卵子注入输卵管内，这样可以大大缩短精、卵在体外的时间；后者是取出精子和卵子于特制小管中，立即将其移植到女方的阴道中存放48小时，在阴道中精子与卵子受精、分裂发育为胚胎，再将其移回子宫内继续发育。 体外受精与胚胎移植技术原理 体外受精与胚胎移植技术（IVF-ET）是将不孕症患者夫妇的卵子与精子取出体外，在体外培养系统中受精并发育成胚胎后，蒋胚胎移植入子宫腔内以实现妊娠技术。是用人工方法取出精子与卵子，在体外受精、发育至一定阶段后，再将胚胎移植到母体子宫内继续发育至足月出生。体外受精-胚胎移植技术要求具备很强的理论基础、严格的实验条件及熟练的实验操作。由于人胚胎体外培养的环境条件不可能达到与体内情况完全一样，应尽快把胚胎移植到母体子宫内。 IVF-ET技术妊娠成功的关键在于：1必须准确判断母体排卵时间和安全无损伤的获取成熟卵子；2必须创造适合精子和卵子在体外能够很好的结合并继续发育的环境，即体外受精并将受精卵培养3-5天；3必须准确无误的把受精卵重新种植到母体子宫腔内合适的位置上。 IVF的方法主要包括超促排卵与卵泡监测、取卵手术、精卵体外处理、体外受精、胚胎的体外培养、胚胎移植等步骤。 好孕国际生殖医疗体外受精与胚胎移植过程及技术优势 体外受精与胚胎移植技术主要治疗女性原因引起的不孕症：输卵管问题、内分泌问题、宫腔问题等等体现的优势在于 1、超促排卵及排卵监测： 为了适时从卵巢采集排卵前成熟或接近成熟的卵母细胞，精确的监测排卵前卵泡成熟的过程非常关键。利用自然月经周期采卵往往只能取到一个卵细胞。为了增加成功的机会，增加发育的卵泡以获取多个卵子，云南九洲医院采用刺激周期的方法，即超促排卵，一次可取得3个以上的卵母细胞。促排卵周期主要通过B超观察卵泡大小，结合内分泌激素测定，以便调整促性腺激素的用量。要准确掌握取卵时机。当2-3个以上的卵泡直径大于1.8cm，且1.4cm以上的卵泡数与E2水平相当，便可注射人绒毛膜促性腺激素（HCG)促使卵泡最终成
人性化护理在体外受精与胚胎移植中的护理进展 发表时间：2019-05-15T16:10:15.443Z 来源：《航空军医》2019年2期作者：钟家莹[导读] 近年来，人性化护理受到关注，本文对人性化护理在体外受精与胚胎移植中的应用进行如下综述。 （广西壮族自治区卫生计生委生殖中心 530022） 摘要：体外受精与胚胎移植也称为试管婴儿，是一种治疗不孕症的新的手段，有利于提升长期不孕症患者的受孕率。不孕症的治疗周期长，治疗费用高，治疗程序繁杂，患者在治疗期间往往心理负担过重，需要有效的护理，改善患者的身心状态，促进护患关系的和谐，从而使患者接受更好的治疗。近年来，人性化护理受到关注，本文对人性化护理在体外受精与胚胎移植中的应用进行如下综述。 关键词：人性化护理；体外受精；胚胎移植 不孕不育症是一种临床常见病和疑难病，是世界范围内的医学和社会问题。体外受精与胚胎移植是治疗不孕症的现代先进技术，主要包括三部分，促进排卵、取卵术、胚胎移植，在术前促进患者排卵，术后过程中采集精子和卵子，进行体外受精，在试管内养成胚胎，然后向子宫移植，在子宫着床，达到妊娠的目的[1]。患者在治疗时存在各种担忧，许多患者精神高度紧张，有较大的心理负担。身体过度疲劳、情绪过分激动等，都会影响治疗结果。人性化护理使被动服务变为主动服务，配合患者的治疗，消除患者的负面情绪，对提高治疗效果有重要的意义。 1.治疗前的人性化护理 为患者设置人性化的治疗环境，在诊室门口可以张贴精美的宣传画，放置有关疾病的医院介绍手册、健康教育卡片等，方便患者自由翻阅，了解相关知识。保持适宜的温度和湿度，以良好的环境接待患者，使患者轻松等待，也能学到相关知识[2-3]。护理人员要不断学习，提高自己的理论知识和操作技能水平，保持良好的仪表，与患者亲切交流，准确解答患者的疑问，向患者介绍疾病知识、治疗方法等，为患者提供全方位的服务，构建和谐的护患关系。 2.治疗期的人性化护理 2.1促排卵期 患者由于缺乏了解，以及社会、家庭等因素的影响，在治疗中承受较大的心理负担。护理人员要热情接待患者和家属，了解患者的心理状态，向患者讲解相关知识，提高患者的认知，鼓励安抚患者，疏导患者的不良情绪，减轻心理压力、焦虑、抑郁等[4-5]。根据患者的具体情况，制定科学的护理方案。告知患者治疗的过程，成功率，注意事项，以及并发症等。使患者树立治疗的信心，保持良好的心态，尽快配合进入治疗。 患者需要接受许多注射治疗，护理人员要提高自身专业水平，尽量做到无痛注射，注意患者的主诉，及时解答患者的疑问[6]。患者可能出现一些药物副反应，比如乳房疼痛、轻度胃肠道症状、硬结疼痛、注射部位红肿等，严重的甚至出现卵巢过度刺激综合征。护理人员要提前告知患者，使患者有充分的准备，密切观察患者的病情变化，合理预防可能的副作用，减少不良反应的发生。 2.2取卵期 取卵术前要向患者详细介绍手术的过程，以及相关注意事项，告知患者取卵不需要开刀。取卵前会使用镇痛剂，取卵操作时主要是使用取卵针经阴道抽取卵泡液[7-8]。术前控制室保持相对湿度50%-60%，温度24℃-26℃。冲洗液加温到37℃。患者术前要排空膀胱，护理人员协助患者到手术床，指导患者保持正确的体位，注意术中保暖，以及尊重患者的隐私，尽量减少身体的暴露，麻醉用药为丙泊酚和酒石酸布托啡诺。 术中密切观察患者的神志、面色等，发现异常及时处理。指导患者配合手术，使患者明确手术的安全性，询问患者的感受，减轻患者的紧张[9]。可以告知患者手术进度，提高患者的信心，工作人员要减少不必要的交谈，保持患者心理放松，顺利完成手术。 术后告知患者和家属手术顺利，使他们能够放心，协助患者进入休息室。丈夫洗手取精。向患者告知可能出现的状况，比如受精失败、阴道流血、腹痛、腹胀等，出现异常要及时就诊[10]。如果没有取到卵子，耐心向夫妻解释，做好安慰夫妻的心理工作。 2.3胚胎移植期 患者可能担心胚胎的质量、移植错误等问题，护理人员要消除患者的担忧，指导患者保持良好的心态，告知患者医院有严格的实验室管理制度，确保胚胎的正确。术前告知患者要忌食产气食物，进行胚胎移植当天，应尽量减少饮用水和汤[11-12]。移植前排大小便。通常胚胎移植术基本上无痛，但如果患者太紧张，刺激宫缩，可能出现腹痛等情况。护理人员要给予患者心理安慰，或者握住患者的手。术后休息两小时再离开医院。术后护理人员进行用药指导，指导患者黄体支持所用药物的用法、剂量、注意事项、相关反应等。指导患者日常合理饮食，以及复诊时间，如有异常要及时就诊。 3.治疗后的人性化护理 胚胎移植后到检验尿HCG期间，患者往往焦虑、紧张、期待，心理状态不稳定。护理人员要告知患者保持平和的心态，指导患者放松训练，自我管理和控制生理活动、心理活动等，预防和减少机体功能的紊乱。患者可以分散注意力，将注意力转移到工作和学习中，以良好的心态等待结果。患者出院时嘱咐患者胚胎移植后两周，做尿妊娠试验[13]。如果患者为阳性，两周后进行B超检查。发现有多胎妊娠，向患者告知相关危害。三个月内进行减胎手术，然后复查。患者妊娠后三个月内，要定期到医院观察。护理人员对患者进行孕期指导。三个月后定期产检，达到安全度过妊娠期的目的。如果患者手术失败，护理人员要做好家属的工作，给予患者情感支持，心理安抚，建议根据身心情况和经济条件，再次进行治疗。 在体外受精与胚胎移植中应用人性化护理，具有良好的效果。人性化护理坚持以人为本，并将此服务理念贯穿于整个护理工作中。人性化护理注重关心爱护每一位患者，从传统的被动护理向主动护理转变，给予患者人文关怀。通过人性化护理，能够减轻患者的不良情绪，提高患者治疗的信心。李洁萍[14]在研究中采用人性化护理方式，对比常规护理，人性化护理能够明显改善患者的焦虑、抑郁等不良情绪，具有临床应用价值。人性化护理更加全面，有针对性，满足患者生理、心理等各个方面的需求，减少影响治疗的不良因素，不仅能够促进患者的治疗，而且能够使患者更加满意，建立良好的护患关系和医患关系。王晓琳，刘春梅[15]在研究中，采用人性化护理的方式和常规护理进行对比，结果显示人性化护理的患者，护理满意率明显高于常规护理的患者。
体外受精和早期胚胎培养教学设计 学习目标： 1、简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 2、简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。 3、认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 学习重难点： 重点：（1）体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。 （2）哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 难点：哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。 学习过程： 【知识回顾】 回顾体内受精和早期胚胎发育的知识内容，思考哺乳动物体内胚胎的形成需要经过哪些过程？ 那么，哺乳动物体外胚胎的发育需要完成哪些环节？ 胚胎工程专家就是根据这几个环节来研究哺乳动物体外受精和早期胚胎培养方法的。 【自主探究】 一. 什么是试管动物技术？ 此技术是克隆吗？ 试管动物技术可以实现良种动物的快速大量繁殖。这项技术中首先要做的是体外受精和早期胚胎的培养。 二.体外受精 哺乳动物体外受精主要包括____________、_____________、______等几个主要步骤。 体外受精技术的理论基础是胚胎发育学，基本原理是人工模拟体内环境，包括营养、温度、pH等，使初级卵母细胞成熟，同时使精子获能，最终完成受精。 1.体外受精技术操作的对象是（） A．生殖细胞 B．受精卵 C．早期胚胎细胞 D. A,B,C都是 1.卵母细胞的采集和培养 （1）采集方法一：用处理，使其超数排卵，从中冲取卵子（针 对实验动物如__________、____________，以及家畜猪、羊等） 方法二：从屠宰母畜卵巢中采集，或借助________、内窥镜或等工具，直接从活体动物的中吸取______________（针对大家畜或大型动物，如牛） (2)卵母细胞的培养： 用方法一得到的卵子______与____________的精子在体外受精，用方法二采集的卵母细胞在体外人工培养成熟 例2．体外受精常用的采卵方法有 ①用促性腺素处理后，从输卵管冲取卵子②化学诱导法③电刺激法④从活体动物卵巢吸取卵母细胞 A．①② B．②③ C．①④ D．③④ 2. 精子的采集： 方法有、手握法和电刺激法等 3.精子的 ____ ： 方法有培养法（通过获能培养液）、法（通过肝素或钙离子载体A23187溶液等化学药物诱导精子获能,针对_______________等家畜的精子）
动物繁殖技术简介 摘要：动物繁殖技术是畜牧业生产中的关键技术环节，在优质、高产、高效的现代畜禽繁育中占有重要的地位。本文综述了人工授精技术，体外受精技术，性别控制，胚胎移植技术，克隆技术，转基因技术，B-型超声波诊断技术等九个方面的动物繁殖技术的进展。 关键词：人工授精；性别控制；胚胎移植；克隆；转基因 Brief Introduction of Animal Reproductive Technique Abstract: The animal breeding technology is a key technology in the production of animal husbandry, occupying an important position modern livestock and poultry breeding of high quality, high yield and high efficiency. This paper reviewed the development of the technique of animal breeding such as the artificial insemination, in vitro fertilization technology, sex control, embryo transfer technology, cloning, transgenic technology, b-type ultrasonic diagnosis, etc. Keywords: artificial insemination; Sex control; Embryo transfer; Cloning; Genetically modified 前言 动物繁殖技术是生物技术的重要分支。动物繁殖技术从20世纪50年代人工授精技术到20世纪70年代胚胎移植技术的应用，似乎才真正开始动物繁殖技术的新纪元。动物繁殖技术在过去的50年里取得了显著进展，现代动物繁殖技术包括人工授精、同期发情、胚胎移植、胚胎分割、胚胎嵌合、体外受精、克隆技术和性别控制等等，其中人工授精和胚胎移植在现代畜牧业生产中发挥着极其重要的作用，尤其是人工授精技术，是迄今为止应用最广泛并最有成效的繁殖技术[1]。这是一个以人工授精起始的连续过程。随着体外受精、精子分离和核移植克隆等技术的发展，这些连续性的繁殖技术将是目前和未来提高生产力的强有力手段。
第1课时人工授精、胚胎体外培养和胚胎移植 [目标导读] 1.结合教材P31～33图文，简述哺乳动物人工授精技术的主要步骤。2.通过教材P33第3、4段内容，简述哺乳动物胚胎体外培养的方法。3.阅读教材P33～35内容，阐明胚胎移植前的准备。4.结合教材P36图2－16，理解胚胎移植的实施和胚胎移植技术的应用。 [重难点击] 1.人工授精技术的主要步骤。2.哺乳动物胚胎体外培养的方法。3.胚胎移植的准备、实施及应用。 “超时空女婴” 1986年白血病患者克里斯在16岁时(接受放疗前)冷冻了部分自己的精子。2008年，克里斯与妻子梅洛迪决定用22年前保存的冷冻精子接受试管受精手术。2008年6月，医生从梅洛迪的卵巢中提取出15枚卵细胞。最后共有7枚卵细胞受精发育成胚胎，医生将两枚胚胎植入到梅洛迪的子宫中。2009年2月25日，梅洛迪在一家医院中顺利生下了3.37千克重的女婴斯特拉。 美国医学专家称，冷藏了22年的精子依然能够孕育生命，创下了一项世界医学史纪录，斯特拉也被称作是“来自1986年的超时空女婴”。这个奇迹的诞生离不开体外授精及胚胎的早期培养等胚胎工程的实验技术，让我们一起来学习这些知识吧。 一、人工授精和胚胎体外培养 1.精子的获取 (1)采精方法：胚胎工程中通常使用射出精子，有时也使用附睾精子。常用人工采集的方式采集精液。 (2)精液的保存：采集的精液，通常需要加入特殊的稀释液，并在低温下保存，如果需要长时间保存，则须将精液保存在液氮(－196 ℃)环境中。 2.卵细胞的获取 (1)采集部位：卵巢、输卵管、子宫内。 (2)采集方法 ①超数排卵：注射外源促性腺激素(垂体产生的促卵泡激素和促黄体生成激素)，促使卵巢排出更多的成熟卵细胞。 ②采卵技术 a.手术采卵：冲洗输卵管采卵，针对一些家兔、绵羊等中小型家畜。
IVF-in vitro fertilization-体外受精联合胚胎移植技术，又称试管婴儿 IVF-in vitro fertilization-体外受精联合胚胎移植技术，又称试管婴儿，是指分别将卵子与精子取出后，置于试管内使其受精，再将胚胎移植回母体子宫内发育成胎儿。 学术术语来源--- 新鲜胚胎与冷冻胚胎移植在体外受精周期中疗效比较的Meta分析 文章亮点： 1 对于胚胎移植的方法，临床上一直存在争议，诸多研究以新鲜胚胎移植和冷冻胚胎移植的回顾性分析为主，缺乏两种方法对比的循证医学证据。 2 现有关于新鲜胚胎移植与冷冻胚胎移植在IVF周期中疗效的Meta分析，纳入研究文献方法学质量不高，或此类分析较少。此次Meta分析研究，全部纳入国外随机对照实验，方法学质量采用改良Jadad评分标准，全为高质量研究文献。 3 文章特点在于采用Meta分析比较新鲜胚胎移植与冷冻胚胎移植在IVF周期的临床疗效差异，发现新鲜胚胎移植与冷冻胚胎移植在流产率方面无明显差异，但冷冻胚胎移植在持续妊娠率及临床妊娠率方面较优。 关键词： 器官移植|器官移植循证医学|新鲜胚胎移植|冷冻胚胎移植|体外受精-胚胎移植|临床妊娠率|持续妊娠率|流产率|Meta分析 主题词： 胚胎移植；受精，体外；妊娠率；循证医学 摘要 背景：胚胎移植的方式主要包括新鲜胚胎移植和冷冻胚胎移植，但两种方法各有优缺点，哪种方法更有利于患者的受孕目前仍存在较大争议。 目的：系统评价新鲜胚胎移植与冷冻胚胎移植在体外受精-胚胎移植(IVF)周期中的临床疗效。 方法：计算机检索Medline、Cochrane Library、Ovid、EMBASE、中国生物医学、中国期刊全文和万方数据库，以及手工检索国内相关妇产科杂志。检索新鲜胚胎移植与冷冻胚胎移植在IVF周期中的疗效对比的随机对照研究文献，评价指标包括临床妊娠率、持续妊娠率、流产率等。由2名评价者按照纳入与排除标准选择试验，提取资料和评价质量，并采用RevMan 5.2软件进行Meta分析。 结果与结论：共纳入随机对照研究3篇，包括633例患者。Meta分析结果显示：冷冻胚胎组在持续妊娠率方面，优于于新鲜胚胎组[OR=0.60，95%CI(0.44，0.84)，P=0.003]；在临床妊娠率方面，冷冻胚胎组优于新鲜胚胎组[OR=0.60，95%CI(0.44，0.83)，P=0.002]；在流产率方面，2组比较差异无显著性意义[OR=1.23，95%CI(0.60，2.49)，P=0.57]。提示在IVF周期中，冷冻胚胎移植在持续妊娠率及临床妊娠率方面优于新鲜胚胎移植。但受纳入研究样本量及方法学质量限制，尚需开展更多大样本、高质量随机对照试验来增加证据的论证强度。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植；肝移植；移植；心脏移植；组织移植；皮肤移植；皮瓣移植；血管移植；器官移植；组织工程