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土壤中拮抗放线菌的筛选与鉴定

土壤中拮抗放线菌的筛选与鉴定
土壤中拮抗放线菌的筛选与鉴定

土壤中拮抗放线菌的筛选与鉴定

一、培养基

1 放线菌培养基

高氏一号液体培养基:可溶性淀粉20g,KNO3 1g,K2HPO4 0.5g,NaCl 0.5g,MgSO4.7H2O 0.5g,FeSO4·7H2O 0.01g,H2O 1000mL,pH 7.2~7.4。

黄豆粉固体培养基:大豆粉20g(沸水煮30min,过滤保留滤液),蔗糖10g,可溶性淀粉5g,蛋白胨2g,酵母膏2g,NaCl 2g,CaCO31g,MgSO4·7H2O 0.5g,KH2PO40.5g,琼脂15g,H2O 1000mL,初始pH7.0。

放线菌发酵培养基:大豆粉20g(沸水煮30min,纱布过滤后保留滤液),蔗糖10g,可溶性淀粉5g,蛋白胨2g,酵母膏2g,NaCl2g,CaCO31g,MgSO4·7H2O 0.5g,KH2PO40.5g,H2O 1000mL,初始pH7.0。

2 放线菌形态及培养特征研究用培养基

察氏培养基(ISP1):蔗糖30g,NaNO32.0g,K2HPO41.0g,MgSO4.7H2O 0.5g,KCl 0.5g,FeSO4·7H2O 0.01g,H2O 1000mL,pH 7.2~7.4。

麦芽膏-酵母膏培养基(ISP2):酵母膏4.0g,葡萄糖4.0g,麦芽膏10.0g,微量盐溶液1mL,H2O 1000mL,琼脂20g,pH 7.0~7.4。

燕麦片培养基(ISP3):燕麦片20g(加1000mL 水煮20 分钟,然后用离心或过滤得澄清滤液并补足1000mL),微量盐溶液1mL,pH 7.2(微量盐溶液:FeSO4.7H2O 0.1g,MnCl2.4H2O 0.1g,ZnSO4.7H2O 0.1g,H2O 100mL)。

甘油-天门冬酰胺培养基(ISP5):L-天门冬酰胺1.0g,甘油10.0g,K2HPO41g,微量盐溶液1mL,琼脂20g,pH 7.0~7.4。

无机盐淀粉培养基:可溶性淀粉10g,K2HPO41.0g,MgSO4.7H2O 1.0g,CaCO32.0g,(NH4)2SO42.0g,微量盐溶液1mL,H2O 1000mL,pH 7.4。

马铃薯培养基:去皮马铃薯块200g(1000 毫升水,80℃煮1小时,然后离心或过滤得上清液),葡萄糖20g,pH 7.4。

营养琼脂培养基:蛋白胨10g,牛肉膏5.0g,H2O 1000mL,pH 7.4(亦可补加葡萄糖10g)。

葡萄糖-天门冬酰胺培养基:葡萄糖10g,L-天门冬酰胺0.5g,K2HPO40.5g,牛肉膏2g,H2O 1000mL,pH 7.2。

3 测定生理生化特性供试培养基

淀粉水解测定培养基:可溶性淀粉10g,K2HPO45.65g,NaCl 0.5g,KNO31g,MgCO31g,琼脂15g,H2O 1000mL,pH 7.2~7.4。

纤维素水解培养基:MgSO4.7H2O 0.5g,NaCl 0.5g,K2HPO40.5g,KNO31g,H2O1000mL。滤纸条(5cm×0.8cm)灭菌20 分钟。(pH7.0~7.2)

明胶液化培养基:蛋白胨5g,葡萄糖20g,明胶200g,H2O 1000mL,明胶灭菌10min,pH7.0(灭菌3 次,每次20min,灭菌后立即浸入冷水中冷却。)

牛奶凝固与胨化培养基:脱脂牛奶1000mL,CaCO30.02g,pH 7.2~7.4,间歇灭菌三次(脱脂牛奶的制备:取新鲜牛奶,煮沸后冷却,经两次离心(3000r/min,10min)脱脂,除去上层油脂,即得脱脂牛奶)。

石蕊溶液配制:称取2.5g 石蕊浸泡在100ml 蒸馏水中过夜,使石蕊充分溶解,然后过滤备用。石蕊牛奶的制备:2.5%的石蕊液与脱脂牛奶以4:100(V/V)比例混合,牛奶呈紫丁香色,分装于试管中,灭菌备用。接种前抽检灭菌是否彻底。

硫化氢产生测试培养基(柴斯钠培养基):蛋白胨10g,柠檬酸铁0.5g,K2HPO41g,琼脂15g ,H2O 1000mL,pH 7.2。

黑色素产生培养基:酪氨酸(L-Tyr)1g,酵母膏1g,NaCl 8.5g,琼脂20g,H2O1000mL,pH 7.2。

硝酸盐还原试验培养基:MgSO4.7H2O 0.5g,NaCl 0.5g,K2HPO40.5g,KNO31g,NaCl

0.5g,H2O 1000mL,A 溶液:对氨基苯磺酸0.5g,醋酸(80%醋酸,加2 倍水稀释)150mL;

B 溶液:二苯胺0.1g,H2O 20mL)

二苯胺试剂(二苯胺0.5 g 溶于100 mL 浓硫酸中,用20 mL 蒸馏水稀释)

碳源利用培养基:(NH4)2SO4 2.64g,KH2PO4 0.5g,K2HPO4 0.5g,MgS04.7H2O 0.5g,CuSO4.5H2O 0.0064g,FeSO4.7H2O 0.0011g,MnC12.4H2O 0.0079g,ZnsO4.7H2O 0.00l5g,琼脂粉15.0g,蒸馏水1000mL。

二、实验操作步骤

1拮抗菌的形态鉴定

1)菌株形态学特征观察

采用插片法,将菌株接种到高氏一号培养基(固体培养基)中盖玻片与培养基的内侧交界线上,置于28℃培养7、14、28 d。用无菌镊子小心取出盖玻片,擦去背面培养物,然后将有菌的一面朝上放在洁净载玻片上直接镜检。

2)菌株的培养特征观察

将菌株接种到察氏琼脂、葡萄糖-天门冬素琼脂、酵母膏-麦牙浸膏琼脂(ISP2)、燕麦片琼脂(ISP3)、无机盐淀粉琼脂(ISP4)、甘油-天门冬素琼脂(ISP5)、马玲薯琼脂,置于28℃培养,分别在7、14、28 d 后观察其孢子链、气生菌丝体颜色(即孢子链未形成前的颜色)、基质菌丝体的颜色和是否产生可溶性色素。取成熟期的颜色特征为其培养特征,作为定种的依据。

2 菌株的生理生化特性的测定

1)明胶液化试验

在明胶培养基表面(斜面)接种鉴定菌,28℃下培养30d,在第5、10、20、30d各观察一次。观察前放入冰箱冷却20分钟。以液化时间的早晚及程度为依据,确定液化的快慢和强弱。每个菌株3次重复。

2)淀粉酶的测定

将菌种接种于淀粉培养基平板上,采用点接法,培养10天或20天后往培养基表面倒入碘液,如有淀粉酶产生,即将淀粉变成糊精或利用吸收,遇到碘液不变成蓝色,却形成透明圈;圈的大小表示淀粉酶产生的强弱。如不产生淀粉酶,则菌落周围部位遇碘时呈蓝色。3)硝酸盐还原

将待测菌接种于硝酸盐液体培养基中,置28℃培养箱中培养7d,14d。以不接种作空白培养液对照。在干净的空试管或白色盘中倒入少许培养液,再各加1滴A液和B液,在对照管中同样加入A、B液各1滴。当培养液中滴入A,B液后,若溶液变为粉红色、玫瑰红色、橙色、棕色等,表示有亚硝酸盐存在,硝酸盐反应阳性。如无红色出现,则可加入1-2滴二苯胺试剂,此时如果成蓝色,则表示培养液中仍有硝酸盐存在而无亚硝酸盐反应,则还原作用为阴性。若不成蓝色,表示硝酸盐和新形成的亚硝酸盐都己还原成其它物质,仍按阳性对待。该反应是在较为厌氧的条件下进行的,所以分装培养液时液面易高些。由于亚硝酸盐可以是硝酸盐还原最终产物,也可以是整个还原过程的中间产物,而且各种菌还原速度相差较大,所以培养18~24h的第一次观察应及时。

4)牛奶石蕊试验

在脱脂的牛乳中加l%的石蕊指示剂,分装试管,在115℃条件下灭菌IOmin。接种放线菌后培养,定期观察6周。

5)H2S的产生

将菌株接种到含柠檬酸铁的有机斜面上,置28℃培养10d左右(视菌苔生长成熟为宜)观察结果。若培养基中出现黑褐色沉淀,表示试验为阳性。反之,不变色者为阴性。

6)纤维素水解试验

配制适合放线菌生长而不含碳源的合成基础培养液,分装试管后,以滤纸作纤维素(碳源),把其切成宽1cm、长6cm的滤纸条,加入试管中,一半浸在液内,一半露在液外,将菌株接种在液外一段滤纸条上,置28℃培养30d后观察。若该菌能将滤纸条分解成一团松散的纤维,或使之折断者为阳性,说明该菌株产生纤维素酶。反之,滤纸无变化者为阴性。7)产黑色素实验

将菌株接种到黑色素形成培养基,28℃培养4~5 d,若出现黑色表明具有酪氨酸酶活性,反之则没有。

8)碳源利用实验

碳源利用基础培养基经高压灭菌后,无菌操作加入各种无菌碳源。本实验采用的碳源为:D-果糖,D-木糖,D-半乳糖,D-甘露醇,L-阿拉伯糖,肌醇,L-鼠李糖,D-葡萄糖,蔗糖,棉子糖。各种碳源的灭菌采用乙醚法——称取一定量的碳源干品,装在已灭菌的烧瓶内,然后加足量乙醚,置与通风开启的超净工作台内,直到乙醚挥发干,之后再加无菌水配成10%的溶液。使用时按比例加到灭过菌的基础培养基中使其最终浓度为1%。此外还需要一个未加含碳化合物的碳源利用基础培养基作为空白对照。

4 16SrDNA序列分析

1)供试菌株的活化

将试菌株分别配成菌悬液涂布于高氏一号平板上,28℃培养7d左右,菌丝生长茂盛时即可用于提取DNA。

2)菌株DNA的提取

①将供试菌菌丝小心刮下来置于研钵中,加入液氮迅速研磨成粉末状,将粉末装入1.5rnL 灭菌离心管中,并加入600ulDNA提取液。

②摇匀,65℃水浴1h。

③从水洛锅中取出离心管,于12200rpm离心10min,取上清液于另一离心管中。

④加入等体积的氯仿异戊醇(24:1)抽提细胞蛋白,并充分摇匀(10min)后,于12200rpm离心5min,吸取上清液于一新的离心管中,重复此步骤1一2次。

⑤把上层水相转入1.5mL离心管管中,加入0.6倍体积的冰异戊醇轻轻混匀,沉淀DNA,置于一20℃冷冻过夜。

⑥12200rpm下离心15min,小心弃掉上清液。用70%乙醇,100%乙醇各清洗一次,除去残余的杂质。

⑦在超净工作台下吹干DNA沉淀。加入10μlTE缓冲液,于-20℃保存待用。

DNA的检测。

3)采用琼脂糖凝胶电泳检测DNA

(l)稀释缓冲液的制备:取5倍TBE缓冲液l00mL,配制成1xTBE稀释缓冲液,待用。

(2)胶液的制备::称取0.32g琼脂糖,置于100mL三角瓶中,加入30mL 1xTBE稀释缓冲液,加热至琼脂糖全部熔化,取出摇匀。加热过程中不时摇动,使附于瓶壁上的琼脂糖颗粒进入溶液。加热时盖上封口膜,以减少水分蒸发。

(3)胶板的制备:将电泳胶槽平放,插上梳子,梳齿下缘与胶槽底面保持1~左右的空隙。

在冷却至50~60℃的琼脂糖胶液中加入Goldview染色剂,充分混匀至不烫手后将琼脂糖倒入胶槽内,使胶液形成均匀的胶层。半小时后拔出梳子。将胶槽放入电泳槽内,然后向槽内加入l x TBE稀释缓冲液至液面恰好没过胶板上表面。注意排除气泡。

(4)加样:取3μL Marker,5ul DNA与3μL 溴酚蓝溶液混匀,用移液枪小心加入样品槽内。

(5)电泳:加完样品后,合上电泳槽盖,立即接通电源。前3min用150v电压,3min后控制电压保持在80v左右。当澳酚蓝移动到距凝胶前沿约2cm时,停止电泳。

(6)检测:将凝胶放入紫外检测仪中,260nm紫外光下检测。

4)16SrDNA序列的PCR扩增

拮抗菌株的基因组DNA提取后通过进行16SrDNA序列PCR扩增,增大特异片段的含量并满足测序需要。

(1)引物

采用由上海生工生物工程技术服务有限公司合成的放线菌通用引物

上游引物:F: 5′-AGAGTTTGATCCTGGCTAG-3′

下游引物:R: 5′-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3′

(2)PCR体系环境

本试验中PCR体系为50μL,其中PCRTaq酶(5U/μL),10xBuffer(Mg2+ free),d NTP Mixture(各2.5mM),Mg2+(2.5mmol/L),合成引物pl,p2(10μ mol/L)。

扩增体系:

10×Buffer(Mg2+) 5μL

dNTP(10mmol/L) 1μL

引物1: 2.5μL

引物2: 2.5μL

Taq 酶(5U/μL)0.8μL

Mg2+ 4μL

双蒸水32.2μL

DNA 模板2μL

总体积50μL

(3)PCR程序参数设定

94℃变性5min;94℃变性40s;55℃复性40s ;72℃延伸1.5min;35 个循环;72℃延伸7min;4℃保存。

(4)扩增产物的电泳检测

PCR结束后,以l x TBE为电极缓冲液,将扩增产物在Gold view(0.5μg/mL)的1%琼脂糖凝胶上电泳分离,选用DNA/EcoRI+Hindln作为Marker,电压80v,电泳1.5-2h后在透过式紫外灯下观察并照相记录。

检测后的PCR产物经海生工生物工程技术服务有限公司纯化并测序。

专家鉴定意见范文

2020 专家鉴定意见范文Document Writing

专家鉴定意见范文 前言语料:温馨提醒,公务文书,又叫公务文件,简称公文,是法定机关与社会组织在公务活动中为行使职权,实施管理而制定的具有法定效用和规范体式的书面文字材料,是传达和贯彻方针和政策,发布行政法规和规章,实行行政措施,指示答复问题,知道,布置和商洽工作,报告情况,交流经验的重要工具 本文内容如下:【下载该文档后使用Word打开】 专家鉴定意见范文1 齐xxx同志主持的全国教育科学“xx”规划重点课题《日本侵华教育史》,圆满地完成了预定的研究计划,取得了具有较高学术价值的研究成果。 这项研究有重要的历史意义、重大的理论价值和深刻的现实政治意义。 日本帝国主义在侵华期间推行殖民教育是其整个侵华政策的重要组成部分。课题组把教育放在日本帝国主义对华军事侵略、政治奴役、经济掠夺的整体战略中进行研究,深刻揭露了殖民-主义奴化教育的本质,有力地回击了日本右翼势力为其侵略罪行辩解的谬论。 这项研究是系统、深入、全方位展开的。在地域上,从东北沦陷区扩展到全国其他地方,包括台湾、华北、汪伪政权、伪蒙疆政权等;在内容上,包括了教育政策、制度及实施状况和后果,并将中国人民反对奴化教育的斗争进行了研究和总结,从而提高

了研究的层次和水平。 这项研究在坚持鲜明的政治方向的同时,坚持了严肃的科学态度,研究者搜集运用了大量历史文献资料、图片和亲历者口述史料,以无可争辩的事实为研究成果提供了丰富的依据。 这项研究在国内外产生了广泛的影响。在研究过程中,课题组多次召开国际性研讨会,数百名外国学者包括日本学者到会,对中者的研究给予了充分的肯定。 在日本侵略问题上,中国和东南亚以及世界各国人民同日本等某些右翼势力的斗争,反对日本复活军国主义图谋的斗争,将是长期的。因此,这项研究有必要继续下去。 鉴定组专家一致同意通过课题成果鉴定。 专家鉴定意见范文2 齐红深教授主持的“xx”全国教育科学规划重点课题“日本侵华教育史研究”意义重大、目的明确、成果丰富。总的说,已经基本达到课题设计方案的目标。 1.日本侵华时期的一系列教育政策是日本侵略政策的重要组成部分。深入研究日本侵华时期的教育,不仅具有重要的学术价值,同样具有重要的现实意义。它对于当前的外交斗争、对于提高中华民族的危机意识等,都具有重要的作用。 2.齐红深教授和课题组成员不仅出于强烈的爱国主义精神,而且立足于实事求是的科学精神,对日本侵华时期教育的受害人进行访谈,既保护了大量珍贵的历史资料,又使研究具有较强的科学性、学术性。

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个人工作表现鉴定意见 每年都应该对个人工作表现有一个完整的回顾,下面就是我为您收集整理的个人工作表现鉴定意见的相关文章,希望可以帮到您,如果你觉得不错的话可以分享给更多小伙伴哦! 个人工作表现鉴定意见一 光阴似箭,一晃三年的酒店生活快过去了,工作以来,在单位领导的精心培育和教导下,通过自身的不断努力,无论是思想上、学习上还是工作上,都取得了长足的发展和巨大的收获思想上,自觉遵守酒店的的规章制度,坚持参加酒店的每次的培训。要求积极上进,爱护酒店的一砖一瓦,一直严谨的态度和积极的热情投身于学习和工作中,虽然有成功的泪水,也有失败的辛酸,然而日益激烈的社会竟争也使我充分地认识到成为一名德智体全面发展的优秀工作者的重要性。 在学习上,严格要求自己,凭着对专业知识和技能的强烈追求,端正工作态度,作到了理论联理实际;除了专业知识的学习外,还注意各方面知识的扩展,广泛的涉猎其他部门、学科的知识,从而提高了自身的一专多能的长处及思想文化素质,包括生活中也学到了养成良好的生活习惯,生活充实而有条理,有严谨的生活态度和良好的生活作风,为人热情大方,诚实守信,乐于助人,拥有自己的良好做事原则,能与同事们和睦相处。 工作上,本人自201X年工作以来,先后在餐饮部、总台、

房务中心等部门工作过,在去房务中心工作之前,酒店重新装修期间还参加酒店自办的培训,那时候是学习客房的操作技能,不管在哪个部门,都严格要求自己,刻苦钻研业务,就是凭着这样一种坚定的信念,争当行家里手。为我以后的工作顺利开展打下了良好的基础。 记得,刚进餐厅时,那时候的酒店生意爆满,而我虽然是刚从母校那学习了一些理论知识,但这一现状不能满足工作的需求。为了尽快掌握服务行业,每天坚持来到酒店学习酒店制度及理论知识等等,到了工作时间,就和那些前辈们学习实际操作及帮忙做点小事情,到了晚上思家的心情与日俱增,那时经理知道后常给我们开会,聊聊工作的不便及心中的不满加上自身不足,以给予工作上支持精神上的鼓励,经过较长时间的锻炼、克服和努力,使我成为一名合格的服务者,就样度过一年半的餐饮工作,让我收获最多的也就是在餐饮的时候,它让我了解到了人们最基本的交际场合中的礼仪,对待客人要热情、友好、耐心、周到。这也是我本人性格中所缺乏的、所没有的,也让我明白与同事之间相处也需要这种精神。其实这也是改变不好性格的良好途径。 我后来工作的时间大部分在客房,为了能更好的服务顾客,针对不同层次、不同需求的顾客,我给予不同的帮助和服务,这就要求着我不仅要有全面的专业知识和广泛的信息来源,与各部门也要保持紧密的联系。更重要的是传达信息的急时性、准确性。这些从前厅所学到的也就让我在房务中心的工作得心应手。

放线菌筛选的一般方法(1)

放线菌筛选的一般方法 摘要:放线菌是重要的抗生素产生菌,主要分布在土壤中(主要是链霉菌),其数量仅次于细菌。放线菌是革兰氏阳性细菌。因菌落呈放线状而的得名。常以孢子或菌丝状态存在,在自然界中分布很广,主要以孢子繁殖。由于土壤中的微生物是各种不同种类微生物的混合体,为了研究某种微生物,就必须把它们从这些混杂的微生物群体中分离出来,从而获得某一菌株的纯培养。 关键词:放线菌筛选微生物 1 放线菌的情况 放线菌(Actinobacillus)是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强大的原核生物。因在固体培养基上呈辐射状生长而得名。大多数有发达的分枝菌丝。菌丝纤细,宽度近于杆状细菌,约0.5~1微米。可分为:营养菌丝,又称基质菌丝,主要功能是吸收营养物质,有的可产生不同的色素,是菌种鉴定的重要依据;气生菌丝,叠生于营养菌丝上,又称二级菌丝。是一群革兰氏阳性、高(G+C)mol%含量(>55%)的细菌。放线菌因菌落呈放线状而的得名。 放线菌与人类的生产和生活关系极为密切,广泛应用的抗生素约70%是各种放线菌所产生。一些种类的放线菌还能产生各种酶制剂(蛋白酶、淀粉酶、和纤维素酶等)、维生素(B12)和有机酸等。弗兰克菌属(Frankia)为非豆科木本植物根瘤中有固氮能力的内共生菌。此外,放线菌还可用于甾体转化、烃类发酵、石油脱蜡和污水处理等方面。少数放线菌也会对人类构成危害,引起人和动植物病害。因此,放线菌与人类关系密切,在医药工业上有重要意义。 放线菌在自然界分布广泛,主要以孢子或菌丝状态存在于土壤、空气和水中,尤其是含水量低、有机物丰富、呈中性或微碱性的土壤中数量最多。放线菌只是形态上的分类,属于细菌界放线菌门。土壤特有的泥腥味,主要是放线菌的代谢产物所致。它是一个原核生物类群,主要以孢子繁殖,其次是断裂生殖。与一般细菌一样,多为腐生,少数寄生。 2 放线菌的培养基 高氏一号合成培养基是培养放线菌的培养基。这种培养基是采用化学成分完全了解的纯试剂配制而成的培养基,高氏一号培养基:碳源为可溶性淀粉、氮源为KNO3、NaCl、 K2HPO4?3H2O、MgSO4?7H2O作为无机盐,FeSO4?7H2O作为微生物的微量元素,提供铁离子等组成。 高氏一号合成培养基需要K2HPO4?3H2O 0.125g,可溶性淀粉5g,硝酸钾 0.25,MgSO4?7H2O 0.125g,FeSO4?7H2O 0.025g,氯化钠0.125g,琼脂5g,水250ml。配制时,先依次加入上述药品(除琼脂外)顺序溶解,加入无菌水至250ml,调节pH=7.4,再加入琼脂不断搅拌震荡至溶化后, 121℃灭菌20分钟。 3 土壤中放线菌的分离 编号,分装取6套无菌平皿,在皿底贴上标签,注明土壤稀释液的稀释度(10-3、10-4、10-5)。每个稀释度做两个培养皿。然后在每皿中倒入已溶化并冷凝至50℃左右的高氏一号培养基15~20ml左右,待冷凝成平板。另取5支盛有9ml一只盛有10ml无菌水的试管,排列于试管架上,依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。 稀释倾注分离称1g土样放入10ml无菌水试管中振荡10min,即10-1的土壤悬液,静置30s。用无菌吸管无菌操作取10-1浓度的土壤悬液1ml并加入编号10-2的无菌试管中,并吹吸吸管2~3次,吸时伸入管底,吹时离开水面,使其混合均匀。即为10-2浓度的土壤稀释液。依此类推,直到稀释至10-5的试管中(每个稀释度换1支无菌吸管)。 4 倒平板分离培养 于上述盛有不同稀释度菌液的培养皿中,倒入溶化后冷却至45℃左右的高氏培养基约

课题鉴定意见例文

课题鉴定意见例文 本文是关于课题鉴定意见例文,仅供参考,希望对您有所帮助,感谢阅读。 专家鉴定意见样稿 受****教育科学规划领导小组办公室委托,专家组于2020年*月*日,对******(学校)***同志承担的****(省市区)教育科学“十一五”规划课题“*****的研究”(编号:********)成果进行了鉴定验收, 课题结题鉴定意见。专家组通过认真审阅课题研究报告,查看课题研究相关资料,经讨论,形成如下鉴定意见:注:所有课题均按此方式叙述。 一、课题选题具有较强的实践价值。该课题以阻碍学生自主管理能力发展的现实问题的解决为目标,紧紧抓住班集体建设这一途径进行学生自主能力培养的研究,对教育改革背景下创建提高学生自主能力的德育新模式具有重要的现实意义。 二、课题研究的组织管理工作扎实有效。课题组组织结构合理,能认真组织开展各项培训活动,结合本校实际进行统筹规划,协调指导,从课题的提出、研究方案的制定、课题研究的组织实施,到研究成果的总结提升,都尽可能做到了规范、科学, 三、课题研究方法选用恰当,科学性、操作性较强。该课题主要采用教育行动研究的方法,遵循引导教师边研究边实践、着力于解决教育实践中的具体问题、改善教育者的教育行为、提高教育智慧的思路进行研究。课题研究具有较强的实效性和一定的创新性。 四、课题资料全面、详实、丰富。课题研究过程中注意搜集、整理各种资料,并用文字、照片、录像等多样化的形式进行了记录,真实反映了课题研究的过程和轨迹,有利于研究者进行进一步的反思和提升,并为同类研究提供了操作性较强的做法和经验。 五、该课题研究构建sop学生养成目标体系、形成了“成长三部曲”德育课程、建立了班级自主管理的德育机制、开发了“我与**共成长”月主题教育活动、构建了相对完善的“**之星”多元评价机制、提炼了“提高小学生自主能力的班

自我鉴定 部门考核鉴定意见范文

部门考核鉴定意见范文 对员工的考核在各个公司都存在,部门考核时,对员工的鉴定意见对比员工的工作表现来写。本文是为大家整理的部门考核鉴定意见范文,仅供参考。 部门考核鉴定意见范文篇一 xx同志自我单位工作以来能立足本职,刻苦学习,工作热心负责,认真完成各项工作任务,在实践中各项能力得到了进一步提升,工作经验得到了进一步丰富,个人综合素质得以提高,现就xx同志近三年工作情况鉴定如下: 思想上,该同志政治立场坚定,能坚持学习邓小平理论、三个代表重要思想、科学发展和党的各项方针政策,具有共产主义远大理想和中国特色社会主义的坚定信心,在思想上、组织上、行动上始终与党中央保持一致。 学习上,该同志能够做到自加压力,认真学习,勤于思考,注重实效。坚持理论联系实际,积极参与党委组织的学习和各类培训活动,积极参加各种活动实践,不断提高自身素养。 工作上,该同志认真负责,勤奋好学,踏实肯干,在工作中遇到不懂的地方,能够虚心向富有经验的领导请教。三年来,协助党务副书记完成了十二规划编写、集团网站开通等工作,组织开展了一系列共青团活动,提升了团组织在青年中的影响力和号召力。在单位开展的各项活动中凸显较强的组织能力和解决问题能力。

作风上,该同志能够自觉遵守党纪国法和廉政准则的各项规定,自觉遵守我单位的各项规章制度,在工作中,严于律己,办事光明磊落,并能与单位同事和睦相处,交流融洽,善于取长补短,虚心好学,注重团队合作,做到了自重、自省、自警、自励。 总之,该同志综合素质较好,工作能力较强,政治表现良好,法纪观念充实,服从安排听从指挥,与同事友好相处。希望该同志能够继续加强学习,扎实工作,不断创新,通过实践不断完善自我,相信会在今后的工作中取得出色的成绩。 部门考核鉴定意见范文篇二 工作以来,在单位领导的精心培育和教导下,通过自身的不断努力,无论是思想上、学习上还是工作上,都取得了长足的发展和巨大的收获,现将工作总结如下: 思想上,积极参加政治学习,坚持四项基本原则,拥护党的各项方针政策,自觉遵守各项法规。 工作上,本人自xx年工作以来,先后在某某部门、某某科室、会计科等科室工作过,不管走到哪里,都严格要求自己,刻苦钻研业务,争当行家里手。就是凭着这样一种坚定的信念,我已熟练掌握储蓄、会计、计划、信用卡、个贷等业务,成为xx行业务的行家里手。 记得,刚进xx行,为了尽快掌握xx行业务,我每天都提前一个多小时到岗,练习点钞、打算盘、储蓄业务,虽然那时住处离工作单位要坐车1个多小时,但我每天都风雨无阻,特别是冬天,冰天雪地,怕挤不上车,我常常要提前两、三个小时上班,就是那时起我养成了

_大豆根瘤菌剂载体的选择及最佳施用浓度筛选

第33卷第2期2014年 4月 大豆科学SOYBEAN SCIENCE Vol.33No.2Apr. 2014 大豆根瘤菌剂载体的选择及最佳施用浓度筛选 刘庆莉1,王金生1,刘丽君1,林蔚刚1,王红蕾2,张俐俐3,吴俊江 1 (1.黑龙江省农业科学院大豆研究所,黑龙江哈尔滨150086;2.黑龙江省农业科学院信息中心,黑龙江哈尔滨150086;3.黑龙江省农业科学院,黑龙江哈尔滨150086) 摘要:为筛选出适宜根瘤菌吸附且能促进大豆生长、提高产量的优质载体,并且在优质载体的条件下,筛选出大豆 根瘤菌液的最佳使用浓度,通过3种载体吸附不同浓度根瘤菌液拌种大豆盆栽播种后,对大豆的生物量、结瘤及产量的对比发现:不同载体介入、大豆接入根瘤菌后均对大豆的生物量及结瘤产生一定的促进作用。根瘤菌以草炭和蛭石为载体,更有利于促使大豆植株生长,积累更多的干物质;草炭的促进结瘤作用持续效果时间较长,液体的持续效果时间最短,而蛭石的持续效果时间相对比较居中;以草炭和蛭石作为根瘤菌载体,低浓度的根瘤菌液接入更能发挥其提高产量的作用,以液体作为根瘤菌载体,根瘤菌接入浓度较高才能发挥其提高产量的作用。结合生产成本来看, 草炭土更适宜作为自主研发根瘤菌剂的载体,同时推荐根瘤菌使用浓度为1.4?108 菌细胞 ·mL -1。关键词:大豆根瘤菌;结瘤;载体 中图分类号:S565.1文献标识码:A 文章编号:1000- 9841(2014)02-0207-04收稿日期:2013-10-11基金项目:国家“十二五”科技支撑计划(2012BAD14B06);现代农业产业技术体系(CARS-004);黑龙江省自然科学基金(C201104);哈尔滨市科技创新人才研究专项资金(2013RFXYJ043)。 第一作者简介:刘庆莉(1971-),女,技师,主要从事大豆耕作与栽培研究。E-mail :liuqingli1971@126.com 。通讯作者:吴俊江(1970-),男,博士, 研究员,主要从事大豆耕作与栽培研究。E-mail :nkywujj@163.com 。Chosen of Soybean Rhizobia Carrier and Screening of the Best Concentration LIU Qing-li 1,WANG Jin-sheng 1,LIU Li-jun 1,LIN Wei-gang 1,WANG Hong-lei 2,ZHANG Li-li 3,WU Jun-jiang 1 (1.Soybean Research Institute ,Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences ,Harbin 150086,China ;2.Information Center of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences ,Harbin 150086,China ;3.Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences ,Harbin 150086,China ) Abstract :In order to screen the carrier that was more appropriate for the absorption of rhizobia ,improving yield and quality of inoculated soybean ,and screen the best soybean rhizobia bacterial concentration at levels of quality carrier ,three carriers ab-sorbed different soybean rhizobia bacterial concentration with seed dressing were performed according to the biomass ,nodular rate and yields of soybean plant by soil pot experiments.The results showed that different carriers and inoculating soybean rhi-zobia could improve the biomass and nodular rate of soybean plant.Peat and vermiculite were used as carriers of rhizobia could remarkably promote the growth of soybean plant and enhance dry matter accumulation ;thus the lasting effect of nodular was the longest ,followed by vermiculite and liquid.Low level bacterial concentration could remarkably increased soybean yield and quality with peat and vermiculite as carriers ,however the opposite when used liquid as carriers.In conclusion ,in view of the cost ,peat was more appropriate for soybean rhizobia ,and the best bacterial concentration was 1.4?108 cells ·mL -1.Key words :Soybean rhizobia ;Nodulation ;Carrier 施用根瘤菌菌剂能促进大豆结瘤, 有效提高豆科植物的产量,减少生产中的化肥使用量,降低生产成本,而且可以提高土壤肥力,同时,由于根瘤菌剂耐污染能力强[1] ,还可以减少因长期使用化肥对 环境的破坏 [2-3] ,对无公害大豆生产以及降低农民 投人, 保护环境等具有十分重要的作用[4-5] 。因此 引起了人们的极大兴趣和广泛关注,已成为豆科植 物增产的主要研究方向。 近年来随着新技术特别是分子生物学技术的发展,各种高效菌种不断被选育或改造,制备菌剂的工艺、保藏菌剂的方法也不断完善和发展,配制成的菌剂的效果越来越好,在农业生产中得到了广泛利用。与此同时,诸如发酵水平低、保质期短和 技术不成熟、质量不过关等问题限制了根瘤菌剂的产业化和大面积推广应用。其中,菌种质量的高低一直是影响其应用效果的一个突出问题;载体也是大豆根瘤菌肥料质量控制的一个关键因素 [6] 。作 为根瘤菌的载体很多, 如草炭、蛭石、珍珠岩、煤炭、草炭、膨润土和高岭土等。草炭、蛭石由于其营养与pH 适中,表面积比较大和吸附性好,有利于根瘤菌的存活及菌剂保存,是理想的载体 [7-9] 。另外,草 炭和蛭石等资源丰富,价格低廉,适合于在根瘤菌剂生产中应用推广,已成为当代根瘤菌类肥料的主要类型。 本文的研究目的是筛选出适宜根瘤菌吸附且接种大豆能促进大豆生长、提高产量的优质载体,

单位鉴定意见范文

单位鉴定意见范文 当你工作有了出色的表现时你就想往更高的方向发展了,这时候用人单位的意见很重要,下面是我整理的关于单位对个人工作鉴定意见,欢迎大家收藏! 工作鉴定意见一: ***同志于***年***月抽调到***工作,在其工作的一年里,能协助组长、配合同事完成组内和办公室领导交办的所有工作,做到了学习勤奋上进、工作踏实肯干、作风正派严谨,在各方面都取得较好的成绩。现对其鉴定如下:政治坚定。该同志能以马列主义、邓小平理论、"三个代表"等重要思想为指导,认真贯彻落实科学发展观,坚决执行党的各项方针政策,政治立场坚定。 学习勤奋。该同志能把学习作为自我完善和提高的重要途径,坚持经常学习政策理论文献和业务知识,做到勤学善思、学以致用,同时,在工作中善于总结好的做法,对涉及灾后重建的法规政策能熟练掌握。 工作务实。该同志在工作中能坚持用心谋事、务实干事,做到勤勤恳恳、任劳任怨。该同志作为重建组的工作人员,始终能做到服从领导及办公室主任的安排,认真履行岗位职责,与同事经常加班加点勤奋工作,较好地完成了各项工作任务。一是积极协助办公室主任做好办公室日常事务处理、重建组与相关单位之间的协调工作,推进了工作整理合力的形成。如:协助恢复重建项目单位办理开工前的相关手续、布置重建组工作会议事务安排和需各恢复重建项目单位通力合作的重点工作等。二是发挥自身较丰富的基层工作经历和工作经验,积极向领导谏言献策,为办公室内部管理、重建组工作加快推进尽了一份力量。 成绩斐然。该同志在抽调期间,用心草拟重建组及其办公室文件和相关材料,协助同事完成领导讲话、工作总结等其他材料的草拟撰写工作。一年里,该同志草拟、协助草拟的文件就达30余个,材料数10个。同时协助办公室主任完成重建资料的领取与发放、报表的收集与上报工作。按照重建组在每个阶段的要求和组长的安排,能同组内同志深入恢复重建项目单位巡视检查,推进了全县政权基础设施灾后重建工作的开展。 作风正派。该同志能坚持严于律己,做到生活正派、情趣健康;注重团结友好,做到真诚待人、主动热情;恪守规章制度,做到按章办事、谨慎认真。

利用不同的方法筛选和鉴定转化子

生物工程上游技术实验综合实验设计 利用不同的方法筛选和鉴定转化子 生命科学学院 生工121 指导老师: 田长恩、周玉萍 摘要 本次实验我们小组通过含Amp的培养基初步筛选出转化子、菌落直接PCR、摇菌培养观察细菌表达形态等一系列实验方法,从6个转化子中筛选出了2个目的重组子.,从而达到实

验的基本目的,基本掌握了转基因生物筛选鉴定的基本方法。 关键词 筛选、菌落直接PCR、摇菌培养、电泳 引言 在质粒载体上进行克隆时,由于重组质粒转化的大肠杆菌的量少,连接产物没有也不可能在经过分离纯化而获得纯的重组质粒,连接产物中混有载体自连而成的空载体、载体与目的片段连接而成的目的重组质粒和载体与非目的片段连接而成的非目的重组质粒。同时,宿主的转化效率极低,因此,绝大部分宿主是没有被转化的,所以很有必要对转化产物进行筛选与鉴定。首先,通过抗生素抗性从转化后代中筛选出转化子。然后,通过菌落直接PCR从转化子中筛选出候选转基因生物。最后,摇菌培养观察菌株表达形态。 通过抗生素抗性筛选,从转化后代中筛选出转化子。因为非转化菌没有质粒而缺乏相应的抗生素抗性,所以可将转化产物涂布在含有相应抗生素的培养基上筛选,只有含有相应抗性的抗生素抗性基因才能生长繁殖形成菌落。 通过菌落直接PCR从转化子中筛选出转基因生物,扩增出特殊目的基因片段,判断所得转化子是否为重组子。但因为PCR技术的高灵敏性,往往会产生假阳性结果,所以有必要进一步进行鉴定.。从候选重组子中进行摇菌培养关注菌株表达形态,若出现荧光蛋白则说明菌株成功转化并表达了GFP荧光蛋白。 三、使用仪器、材料 1、材料:实验九准备好的菌株。 2、实验仪器及设备:PCR仪、恒温摇床、台式高速离心机、恒温水浴锅、琼脂糖凝胶电泳装置、电热恒温培养箱、电泳仪、超净工作台、微量移液抢、1.5mL离心管等。 3、主要试剂:10×PCR buffer 、dNTP mixture 、前向引物(P1) 、反向引物r(P2) 、 rTaq 酶、灭菌蒸馏水、LB液体培养基: 四、实验步骤 1、转化子筛选:在实验九含有Amp的筛选培养基中长出的菌落中挑选出6个白色单菌 落,并做好标记,这6个单菌落即为转化子。 2、菌落直接PCR:用无菌牙签把6个白色单菌落,先在编好号的6支PCR反应管中的 底部分别涂擦,然后在PCR管中配制60μL反应体系.并按每管9μL分装好反应体系。反应体系如下: DNA template buffer (用牙签挑取菌落在PCR管中涂抹) 10×PCR buffer 6μL

微生物--土壤放线菌的分离与鉴定

土壤放线菌的分离与鉴定实验设计报告 学院:生命科学学院 班级: 2013级生科2班 组长:刘瑜 2013506076 组员:汤界世 2013506070 李宇秀 2013506071 于淑婷 2013506075 陈洁作 2013506079

郑国梁 2013506083 2015年10月15日 一、实验目的 1、了解采集土样的要求和方法。 2、掌握由土壤中分离稀有放线菌的基本原理和操作技术。 3、学习并掌握土壤稀释法和微生物的纯培养技术。 4、学习并掌握抗生菌的鉴别方法。 二、实验原理 土壤是微生物的大本营,其中的放线菌多以链霉菌为主,因此人们通常将除链霉菌以外的其它放线菌统称为稀有放线菌。一般地,放线菌在比较干燥、偏碱性、含有机质丰富的土壤中数量居多。若以常规方法进行分离,得到的几乎全部是链霉菌。然而,当采用加热处理土样、选用特殊培养基或添加某种抗生素等方法时,均可提高稀有放线菌的获得率。由土壤中分离放线菌的方法很多,其中包括稀释法、弹土法、混土法和喷土法等,本实验主要采用稀释法,并通过选用特

殊培养基的方法,来获得放线菌。

放线菌菌丝由基内菌丝,气生菌丝和孢子丝组成。其菌丝体在培养基内,即基内菌丝或称营养菌丝体。基内菌丝体一般没有横隔,由于菌丝体长入培养基内和培养基表面,并纠缠在一起形成密集的菌落,所以用接种针将整个菌落培养基挑起而不破裂。基内菌丝体大部分呈黄、橙、蓝、紫、绿、徽,但也有无色在显微镜下观察时,气生菌丝体颜色较深,且较基内菌丝体粗两倍左右。气生菌丝体发育到一定阶段,在它上面形成孢子丝。孢子丝形状有直、波曲、螺旋、轮生之分。螺旋有松、紧、大、小之分,其螺旋的方向也有左旋与右旋之分,大多数种为左旋,少数为右旋。孢子具有不同的形状,有球形、椭球形、杆状、柱状,在光学显微镜下就能看清楚。根据菌体基内菌丝,气生菌丝和孢子丝的这些特征即可判断出分离出的菌体为放线菌。 三、实验材料试剂与仪器设备 1、材料:土壤样品(采集生科院门前草地土壤、16号楼内花圃土壤各500g) 2、试剂:1)培养基(高氏一号培养基):可溶性淀粉(20.0g)、硝酸钾(1.0g)、磷酸氢二钾(0.5g)、硫酸镁(0.5g)、氯化钠(0.5g)、硫酸亚铁(0.01g)、水1000ml、pH7.2-7.4

培养单位鉴定意见怎么写

培养单位鉴定意见怎么写 实习生去找实习工作的时候,等到工作的培养,单位会根据你的实习工作情况给出合理的鉴定意见。下面由本小编精心整理的培养单位鉴定意见,希望可以帮到你! 培养单位鉴定意见:态度端正 1. xx-x同学,实习期间工作认真,勤奋好学,踏实肯干,在工作中遇到不懂的地方,能够虚心向富有经验的前辈请教,善于思考,能够举一反三。对于别人提出的工作建议,可以虚心听取。在时间紧迫的情况下,加时加班完成任务。能够将在学校所学的知识灵活应用到具体的工作中去,保质保量完成工作任务。同时,该学生严格遵守我公司的各项规章制度,实习期间,未曾出现过无故缺勤,迟到早退现象,并能与公司同事和睦相处,与其一同工作的员工都对该学生的表现予以肯定。 2. 实习鉴定实习期间勤奋认真,有很强的适应能力和创新意识,能够利用所学的知识迅速投入到实际的计算机应用程序编写当中,并能够结合自己的特点发挥优势弥补不足,在实习过程当中迅速的成长起来,不仅历练了自身,也为我单位带来了一股新风,受到合作伙伴的一致好评! 3. 勤奋好学,遵守厂规厂纪,带来先进管理理念.工作能力及专长在不断的社会实践中,自己以认真敬业,责任心强,工作效率高,执行公司指令坚决得到了各实习单位的认可。 4. 实习实习期间工作认真,勤奋好学,踏实肯干,虚心好学。

善于思考,能够举一反三。。能够将在学校所学的知识灵活应用到具体的工作中去,保质保量完成工作任务。同时,该学生严格遵守我公司的各项规章制度,实习期间,未曾出现过无故缺勤,迟到早退现象,并能与公司同事和睦相处,与其一同工作的员工都对该学生的表现予以肯定。 5. 实习期间,态度端正,学习踏实,工作认真,注重理论和实践相结合,将大学所学的课堂知识能有效地运用于实际工作中,在我部"重庆热线"实习时能创造性、建设性地并能独立开展工作;能吃苦耐劳,工作责任心强,注重团队合作,善于取长补短,虚心好学,具有一定的开拓和创新精神,接受新事物较快,涉猎面较宽,在计算机通讯领域不断地探索,有自己的思路和设想。 6. 该同学在我单位实习期间,遵守单位规章制度,学习认真,勤于思考,勤于实践,能灵活运用专业知识解决实际问题,给本单位留下良好的印象。 7. 该生在实习过程能够积极主动探索未知,发现问题,团结同事,互助协作。此间表现优秀,体现出了应有的精神和风采,圆满完成了本次实习。 8. xx-x同学在我部实习期间,态度端正,学习踏实,工作认真,注重理论和实践相结合,将大学所学的课堂知识能有效地运用于实际工作中,在我部"重庆热线"实习时能创造性、建设性地并能独立开展工作;能吃苦耐劳,工作责任心强,注重团队合作,善于取长补短,虚心好学,具有一定的开拓和创新精神,接受新事物较快,涉猎面较

单位对个人工作鉴定评语大全

单位对个人工作鉴定评语大 全 __x同志政治坚定,觉悟较高。他衷心拥护党的领导,响应党的号召,关心国家大事,积极践行我党全心全意为人民服务的宗旨,能够以马列主义、毛泽东思想、__理论和****重要思想为指导,创造性的开展工作,体现出了正确的无产阶级世界观、人生观和价值观。 __x同志有良好的个人形象和素养,专业技能或业务水平优秀,为公司业务创造更多机会和效益,受公司客户及合作企业好评,为公司创造出较好的企业效益或社会效益;工作认真负责,积极主动,服从整体安排,爱岗敬业,乐于助人,与同事相处融洽,业务知识扎实,业务水平优秀,能带动同事积极工作,胜任__x工作;工作出色,业务熟悉,为我们成立起榜样。 __x同志工作成绩进步大,悟性较强,能很快适应新的岗位,能随时根据工作需要调整工作方法和端正心态,不断反思自己,注重个人成长,能有效改进自己的工作方式,从而在工作中收到良好效果 __x同志勤恳务实,善于学习,对本职工作兢兢业业,注重个人成长;工作成绩进步大,业绩发展迅速,或有效改进自己的工作方式,从而在工作中收到良好效果;悟性较强,能很快适应新

的岗位,在新的业务区域可以立即开展工作;能随时根据工作需要调整工作方法和端正心态,不断反思自己,注重个人成长;能在业余时间精专业务知识,提高工作能力;悟性高,工作认真勤奋,吃苦耐劳,进步很快,在新人中起到了榜样作用 __x同志办事方法有改进,工作有进步,该优秀员工做事情踏踏实实、做人本分,能够虚心接受市场招商经理的建议,努力学习不足之处;大力开发所负责区域的空白品种,并积极和经理进行各种环节的沟通;在 __ 年 x 月份进步异常迅速;对待工作兢兢业业,处处为公司考虑,不记个人得失; __x同志工作认真,积极勤奋,进步很快。在短时间内掌握工作要点,在内勤中起了榜样作用。 学习态度__同志积极主动,态度端正。实习期间,她主动要求到各部门了解学习,努力从多方面开拓自己的眼界。她先后去了财务管理科、招标办公室、计划财务部、人力资源部、办公室、法律事务部、设备管理科、法制办公室等主要业务部门。通过学习书面材料和与各部室人员的交流,她比较全面地了解了我单位科室的主要职能和重点工作,还协助完成了一些她力所能及的行政事务工作。这种积极主动的工作态度获得了各科室人员的一致好评。 ×××同志谦虚谨慎,勤奋好学。他主动提高自己的综合素质,努力从多方面开拓自己的眼界。通过学习书面材料和与领导、同事的交流,比较全面地了解了我单位科室的主要职能和重点工作,还

克隆的筛选和快速鉴定

实验六克隆的筛选和快速鉴定 一、目的 掌握快速细胞破碎法测定大小不等的众多的质粒DNA;和菌落PCR快速鉴定克隆。 二、原理 在这个实验方法中,只需配制一种细胞缓冲液(它可以在室温下保存,长期使用)。利用破碎细胞缓冲液中的阴离子去污剂SDS在37℃溶解膜蛋白,使细胞破裂,并解聚核蛋白,SDS还能与蛋白质结合形成复合物,使得蛋白质沉淀。利用EDTA螯合金属离子,防止破碎细胞的脱氧核糖核酸酶对DNA的降解。然后高速离心,去除细胞碎片核大部分的染色体DNA和RNA蛋白,将含有质粒DNA的上清夜直接进行点样电泳和分离。在琼脂糖凝胶上分离开的个组分中,有染色体DNA,不同大小的质粒DNA和RNA,它们都可以经肉眼观察或拍照显示。 或者用设计好的引物,做菌落PCR快速鉴定克隆。 三、试剂与仪器 (一)试剂 1.破碎细胞缓冲液50mmol/L Tris-HCl (pH6.8)、1% SDS、2mmol/L EDTA、400mmol/L 蔗糖和0.01%溴酚蓝。 配制方法:1mol/L Tris-HCl (pH6.8) 10ml 20% SDS 10ml 250mmol/L EDTA 1.6ml 蔗糖27.2g 1.2%溴酚蓝 1.67ml 加ddH2O至200ml 2.10mg/ml 溴乙啶 3.TBE电泳缓冲液(5×) 4.Taq DNA聚合酶(5U/μl) 5.10×反应缓冲液(含25mmol MgCl2) 6.dNTP 7.点样缓冲液Loading buffer(10×):0.25%溴酚蓝,40%甘油。 (二)仪器 1.电泳仪2.1.5ml 离心管3.Tip 4.培养皿5.PCR扩增仪6.台式离心机 7.紫外分析仪8.恒温水浴 四、操作步骤 (一)快速细胞破碎法测定 1.取1.5ml离心管编号码,每管加入50μl破碎细胞缓冲液。 2 3.待转化的细菌菌落长到2mm时

根瘤菌及其应用

根瘤菌与豆科植物及其应用 摘要:自贝叶林克1888年首次从豆科植物根瘤中分离获得根瘤菌以来,国内外的许多学者都为揭开这一大自然的奥秘进行着孜孜不倦的研究,成为生命科学最为活跃的领域之一。人们从生物学,生态学,生理生化,分类和遗传等方面对根瘤菌进行了广泛研究,在根瘤菌和根瘤的形态结构,固氮酶的结构和功能,固氮机理和作用调件,根瘤菌在细菌分类学中的地位直到固氮基因,结瘤基因,固氮生态等应用方面都有着较快发展,20世纪90年代共生固氮体系已进入分子水平,研究转入根瘤菌与宿主豆目植物植物的相互识别和信息传递以及根瘤菌群体感应等方面。 关键词:根瘤菌生物固氮根瘤菌应用 一.根瘤菌的生物学特征 根瘤菌:根瘤菌主要指与豆类作物根部共生形成根瘤并能固氮的细菌,一般指根瘤菌属和慢生根瘤菌属;两属都属于根瘤菌目。根瘤菌侵入寄主根内,刺激根部皮层和中柱鞘的某些细胞,引起这些细胞的强烈和生长,使根的局部膨大形成根瘤;根瘤菌在根内定居,植物供给根瘤菌以矿物养料和能源,根瘤菌固定大气中游离氮气,为植物提供氮素养料,两者在拮抗寄生关系中处于均衡状态而表现共生现象。 根瘤菌的形态特征:根瘤菌是短杆状细菌,因生活环境和发育阶段的不同,在形态上有显著变化.根瘤菌在固体培养基上和土壤中呈杆状,端生或周生鞭毛能运动,革兰氏染色阴性,无芽孢,培养较久

菌体粗大,染色不均。 生存习性:根瘤菌与植物的共生体系具有很强的固氮能力。已知全世界豆科植物近两万种。根瘤菌是通过豆科植物根毛、侧根杈口(如花生)或其他部位侵入,形成侵入线,进到根的皮层,刺激宿主皮层细胞分裂,形成根瘤,根瘤菌从侵入线进到根瘤细胞,继续繁殖,根瘤中含有根瘤菌的细胞群构成含菌组织。 根瘤菌进入这些宿主细胞后被一层膜套包围,有些菌在膜套内能继续繁殖,大量增加根瘤内的根瘤菌数,以后停止增殖,成为成熟的类菌体;宿主细胞与根瘤菌共同合成豆血红蛋白,分布在膜套内外,作为氧的载体,调节膜套内外的氧量。 类菌体执行固氮功能,将分子氮还原成NH3,分泌至根瘤细胞内,并合成酰胺类或酰尿类化合物,输出根瘤,由根的传导组织运输至宿主地上部分供利用。与宿主的共生关系是宿主为根瘤菌提供良好的居住环境、碳源和能源以及其他必需营养,而根瘤菌则为宿主提供氮素营养。 二.根瘤菌与豆科植物 根瘤菌(root nodule bacteria)是与豆科植物共生,形成根瘤并固定空气中的氮气供植物营养的一类杆状细菌。这种共生体系具有很强的固氮能力。已知全世界豆科植物近两万种。根瘤菌是通过豆科植物根毛、侧根杈口(如花生)或其他部位侵入,形成侵入线,进到根的皮层,刺激宿主皮层细胞分裂,形成根瘤,根瘤菌从侵入线进到根

考核鉴定意见范文

考核鉴定意见范文 考核鉴定意见怎么写?下面是给大家收集的考核鉴定意见范文,供大家阅读参考。 考核鉴定意见范文1 **,男,汉族,xxxx年10月出生,本科学历,xxx7年参加工作,xxx9年调入市政府办公室至今,现任政府办公室副主任。该同志政治、工作表现如下: 一、思想进步,政治可靠。多年来,认真学习马列主义、毛泽东思想、邓小平理论和“三个代表”重要思想,用党新时期的理论武装头脑,具有较高的政治理论基础;立场坚定,旗帜鲜明的拥护党的领导和党的各项重大决定,政治上始终同党中央保持一致,自觉抵制不良倾向,具有较强的政治敏感性;积极参加“三个代表”学教活动,注意用党员的标准严格要求自己,自觉维护党的形象,思想进步,具有牢固的为人民服务的宗旨意识。二、工作扎实,业务过硬。多年来,爱岗敬业,扎实工作,积极进取,创造性的开展工作。一是在工作中注重学习,虚心向新老同志请教,熟练掌握有关法律、法规知识,不断加强对环保、卫生、金融等多项分管工作政策及业务知识的学习,促进了工作方式向依法行政转变,达到了业务熟练,胜任本职工作。二是主动克服主管科室人员少、工作量大等困难,在工作中勤勤恳恳,任劳任怨,经常性加班加点毫无怨言,仅今年上半年就带领科室人员起草各类讲话、文件、总结、报告等公文近10xxxx件,约xxxx字,起到了领导参谋助手作用,并多次受到领导的好评和表彰。尤其是在

去年的抗击非典的斗争中,作为主管卫生工作的副主任,加班加点,配合市防治办及时起草疫情通报、阶段总结、防治动态等各类文稿近10xxxx,下达各类通知5xxxx次,有力推动了市防治办的各项工作的落实,为全市抗击典工作的胜利做出了应有的贡献。三是积极承担领导交办的其他工作,具有一定的协调和组织能力。 三、廉洁奉公,群众基础扎实。多年来,在工作、学习、生活中,认真遵守组织纪律和干部廉政条例,自觉抵制社会不正之风的影响,不吃、不拿、不贪、不占,做到了防微杜渐和自重、自省、自警、自励,与周围同志打成一片,和各科室关系融洽,具有较深厚扎实的群众基础。 考核鉴定意见范文2 ***同志自去年毕业开始在***信息系统(中国)有限公司实习。在我单位见习期间,能够严格遵守并执行公司的各项规章制度,能够积极主动的配合其他相邻工作同仁协调完成各种工作任务。认真学习业务知识,在很短的时间内就掌握了工作的要点和技巧,并将其合理的运用到工作中去。能够积极主动的向老员工学习,弥补自己的不足。工作积极主动,学习认真,尊敬他人,待人诚恳,能够做到服从指挥,团结同事,不怕苦,不怕累。并能够灵活运用所学的计算机专业知识解决工作中遇到的实际困难。一年来理论水平及操作技能均有很大程度的提高。在见习期间得到领导和同事们的一致好评。 考核鉴定意见范文3

信息检索信息搜索、鉴别和筛选

信息检索信息搜索、鉴别和筛选 一提到网络搜索,大家马上会想到谷歌和百度。当然,一遇到问题人们可能最先想到的就是这两大搜索引擎。但是呢,好的信息搜索并不只有这两个,每一种搜索引擎都有各自的利弊,选不对搜索引擎,就像选了不合脚的鞋一样,能走路,但艰辛痛苦,也跑不快走不远。使用搜索引擎首先要了解各种搜索引擎特点,否则你可能浪费大量时间。这次搜索,你应该使用百度还是Yahoo?Google还是百度?分析你的需求,选根据需求找拥有相应功能优势的搜索引擎。这里介绍一些: 1.方向着手 (1)从行业入手查找,比较好用的是“百度产品大全”(点击首页“更多”选项即可):行业报告——各行业官方报告、评定、专家解读,行业与单个品牌市场综述、分析,行业与单个品牌数据、过往新闻。当然这个不乏广告成分,所以需要鉴别,当心受骗。 (2)寻找特定领域的人了解情况,寻找合适采访对象,如专家学者、老一辈,想熟悉某个领域或了解某个城市、历史、词条……这些比较细致的东西,可以用“百度百科”,网友们集体贡献的智慧是无穷的,而且网友的料也是无穷的,你往往能有意外收获。

另外wikipedia(维基百科)也是巨型资料库,而且更新很快。 (3)Google有一个实用搜索功能是“大学搜索”,要知道现在多数有点名的所谓专家学者都没少在大学挂职,各种研究所、实验室、官方组织的这个那个不少也扎根大学,而大学又是产生思想文化的重要阵地。用这个搜索可以一网打尽和某所大学有关的所有东西。 (4)现在有一些新开发的搜索引擎,它们可以对网页库中的某类专门的信息进行一次整合。有人称之为:元搜索引擎。这种搜索引擎的特点是大大减少了你整合资料的时间。 比如比比猫(Bbmao)。这个搜索引擎的特点是:自动分类、自动去掉重复结果、汇集五大搜索引擎结果。智能分类,你可能在分类中发现一些你不曾想到的东西。 不过元搜索是不是好用,可能仁者见仁智者见智,但是只要适应了这种新方式,会给你带来很多方便。 2.技巧着手 (1)设计关键词:使用搜索引擎要避免大而空的关键词,它不知道你要找啥,就可能返回很多莫名其妙结果。

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5、该生勤奋好学、工作认真、服从上级安排、本厂对该生非常满意。 6、该生在我**部实习期间,表现相当好,工作认真负责,受到我部师傅的表扬。 7、本学员在本单位工作,基本能遵守国家法规和单位规章制度,按时上下班、待人有礼、业务成绩还可以,对器材有一定钻研能力,服从主管工作安排,希望日后工作更加刻苦,做一个对社会有贡献的人。 8、该同学在我公司实习期间,能配合公司各级主管安排,工作态度好,有责任心,与同事之间和睦相处,社交能力强。 9、在实习期间工作认真,勤奋好学。踏实肯干,虚心好学,善于思考,能举一反三,能将在学校所学的知识灵活应用到具体的工作中去,保质保量完成工作,并能与公司同事和睦相处,与其一同工作的员工都对该生的表现给与肯定。 10、该员工在工作期间,表现良好,同事之间相处比较融洽,乐意服从上司的任何安排,对于工作上的不懂的地方就问,并能主动提出自己的见解,这位员工我很满意。 11、部门鉴定实习期间,态度端正,学习踏/实,工

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