现代生物技术在水产动物疾病诊断上的应用
生命科学与技术学院水产养殖06-4班安海燕 0601101401
随着养殖规模的不断扩大，集约化程度的不断提高，一方面推动了养殖业的迅速发，增加了经济效益；另一方面也带来一个不容忽视的问题－疾病滋生，有严重困扰着养殖业的步伐。如何寻求一种有效的途径来缓解疾病给养殖业带来的危害与损失，一直是人们所关注的主题。近些年来，生物技术的蓬勃发展，给水产养殖业带来了新的挈机。国内外诸多学者将这一新兴科技用于病害防治，取得了不少成果，并显示出良好的发展前景。水产动物疾病诊断技术的发展与相应的病原研究的深入程度密切相关，近20年来，用现代生物学技术检测病毒、细菌性病害的发展迅速，主要有荧光抗体技术、免疫酶技术、单克隆抗体技术、核酸杂交技术、聚合酶链反应(PCR)技术等。由于上述检测技术的灵敏度高、特异性强、实用性好等特点，在国内外已成为多种水产动物病毒、细菌等病害的常规诊断方法。对鲑鳟鱼、对虾等的主要病毒和细菌病原的相应免疫学或分子生物学病原检测技术多数都开发成了商品化的试剂盒。
近年来,根据目前国内外研究的动向,随着分子生物学技术在水产领域的广泛应用，分子生物学技术已经体现出极高的应用价值和经济价值。它对解决水产业的技术难题、开创新的领域、改造产业的传统模式起着十分重要的作用。包括我国在内的许多国家都在大力研发与水产业有关的分子生物学技术，并着力于开发新的优良养殖种类、培育高产抗逆的良种以及探寻检测和防治病害的新技术、新方法等。因此应用分子生物学技术进行水产养殖品种的疾病诊断领域具有强大的发展潜力。目前生物技术在水产养殖病原体检测上的应用，我国水产养殖业尤其是虾类、贝类、鱼类受到病原微生物的侵扰十分严重，如何对水产动物疾病进行快速、准确的预报与诊断，是摆在养殖业面前的第一道门坎。近些年来，生物技术的发展已为病原体的检测提供了快速、高效、灵敏的技术手段。
同时，免疫学快速诊断技术是一项特异、敏感和简便的技术，广泛应用于许多领域，尤其在生物医学的理论研究和临床诊断方面更是发挥了不可替代的作用。其主要包括血清凝集试验，免疫荧光抗体和免疫酶标技术在水产动物疾病诊断上的应用具有灵敏度高、特异性强、定位准确和应用广泛等优点。现代生物技术结合免疫学对免疫检测技术、核酸检测技术、核酸技术与免疫学相结合方法等
进行了研究与应用。
单克隆抗体
单克隆抗体是由单个细胞传代所产生的高纯度、高特异性的抗体。它与常规血清抗体相比，具有更强的特异性与针对性，且制备简单，因而在病原检测中得以广泛应用。80年代后期，已成功研制出传染性胰腺坏死病毒、出血病毒等单克隆抗体，并用于鱼类多种疾病的诊断。近年来。有学者已成功制备了抗鳗弧菌的单抗和抗嗜水气单胞菌的单抗。我国在单克隆抗体技术中，将其应用于检测草鱼出血病毒和对虾白斑病毒，均获得了较为
酶联免疫吸附
酶联免疫吸附检测(ELISA)是将抗原或抗体吸附在载体表面，通过酶与底物显色来检测特异性抗原或抗体的技术。该技术具有反应迅速、特异性强、灵敏度高等特点。目前，ELISA在鱼类病原体检测上的应用较广，国内诸多学者将此技术用于疾病检测上，如李焕荣等(1997)应用Dot－ELISA快速检测出了嗜水气单胞菌的致病因子胞外蛋白酶AhECPase54；黄?(1995)应用单克隆抗体酶联免疫技术检测到了对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒；陈怀青等(1993)应用Dot－ELISA检测到了鱼类致病性嗜水气单胞菌hec毒素。国外对此项技术的研究较国内早，广泛用于对疖疮病、红嘴病、细菌性肾脏病以及爱德华菌病等的快速检测与诊断。此外，Noel等将ELISA用于菲律宾哈上，成功检测出了弧菌PI满意的效果。
核酸探针
核酸探针是指利用特定标记的DNA或RNA探针与病原生物中的与探针互补的靶核苷酸序列进行杂交，以此来确定宿主是否携带病毒的一类分子生物学技术。该方法以其灵敏度高、特异性强、简便快速等特点，在病原检测中倍受青睐。Futo，Hiney(1992)将此技术应用诊断细菌性鱼病，Comps等(1996)采用地高辛标记的RNA探针检测FEV病毒在鱼类中的表达，Bruce等(1994)利用DNA探针检测对虾杆状病毒。日本学者也采用地高辛标记的DNA探针进行菌落杂交，用于鳗弧菌的鉴定。我国学者对导致我国对虾大规模死亡的病原－皮下及造血组织坏死杆状病毒(HHNBV)，已成功研制出核酸探针试剂盒，用于虾病的诊断。该法简便快捷，操作性强，已获国家专利。
聚合酶链反应
酶链反应(PCR)技术是指在引物的指导下，体外酶促反应，迅速扩增DN**段的一种方法。该法反应十分迅速，几小时内便可扩增到108－10倍，因而PCR 技术具有高度的灵敏性。目前PCR在水产动物病原的操作中，已成功应用于毛蛤甲肝病毒，对虾桃拉病毒、的检测白斑病毒等，并研制出了诊断白斑病毒的检测试剂盒，可用于幼虾、成虾以及亲虾的带毒检测，同时还可对养殖环境中的宿主、底质、饵料等进行检测。另外有学者也报道了应用PCR技术检测贝类肠道病毒以及周围水体内的病菌等。
PCR与其他技术的联用
PCR不仅自身可以用来检测病原体,也可以与其他技术相结合充分发挥其优点。例如Sukhum-sirichart等(2002)通过在反应体系中加入地高辛标记的dUTP,采用将PCR和酶联免疫吸附试验相结合(Polymerase Chain Reaction-Enzyme-Linked-Immuno-sorbent Assay,PCR-ELISA)从虾中检测出了对虾肝胰腺细小病毒(Hepatopancreatic Par-vovirus,HPV),通过比较实验,说明其灵敏度是southern杂交(Southern hybridization)的10倍,是常规PCR的20倍。该法避免了PCR中使用溴化乙锭的缺点,但是它也有实验成本较高的缺点。Schwab等采用一种从嗜热菌Thermus thermophilus中提取出的耐热性的同时具有反转录酶和聚合酶活性的酶rTth,与RT-PCR结合建立了DEIA(DNAenzyme immunoassay)法检测出了诺沃克样病毒(Nor-walk-like viruses,NLVs),由于该法的结果是用数字表示的,这样也避免了电泳和Southern杂交时人的主观判断。del Cerro等等利用基于TaqMan探针的PCR检测了病原F.psychrophilum.。Heath等等利用竞争PCR扩增鱼类的一种病原体Piscirick-ettsia salmonis的核糖体RNA基因间(Internal Tran-scribed Spacer,ITS)的部分序列,并用DGGE(变性梯度凝胶电泳)检测到了结果。
16S rRNA技术
16S rRNA是核糖体RNA的一种，具有分子量适中、所含的遗传信息丰富等特点。在结构上分为保守区（Conserved domain）和可变区（Variable domain）。保守区能反映生物物种的亲缘关系，可变区能揭示生物物种的特征核酸序列，被认为是最适细菌系统发育和分类鉴定的指标。目前16S rRNA序列分析已广泛用
于水产动物病原菌的鉴定。Ragnhild等（1995）通过对分离于大西洋鲑鱼、虹鳟鱼、大菱鲆和鳕鱼中的致病弧菌的16S rRNA序列进行比对，对鱼类致病弧菌进行分类。Carlos等（1999）通过对26株不同来源的鱼病菌的16S rRNA基因序列的分析，确定了鱼出血性败血病血症病原美人鱼发光杆菌的分类地位，并建立了基于16S rRNA基因的巢式PCR病原检测方法。Cerda等（2001）利用一种特异的16SrRNA基因探针对V.vulnificus 病毒进行检测。邹玉霞等（2004）通过对大菱鲆出血症病原菌的16S rRNA 基因进行系统发育学分析，确定了该病原菌为鳗弧菌。耿毅等（2006）从发生急性流行性传染病的斑点叉尾鱼回肝脏、肾脏分离到一高致病性的菌株，经16S rRNA序列分析，鉴定其为嗜麦芽寡养单胞菌。
细胞培养
当前，动物细胞培养也作为一类技术用于水产动物病原体的检测。如Lu等(1995)应用对虾淋巴器官原代培养细胞检测对虾黄头杆状病毒(YBV)。此外，水产动物细胞培养也可用于筛选抗菌药物、培育新型品种以及生产各类疫苗和免疫制剂等。
限制性酶酶切检测
限制性酶可识别DNA上较短的序列，在识别位点上切开DNA，单个核苷酸变化即可导致限制性酶切位点的增加或缺失。因此，酶切后产生的片段数目发生了改变，即所谓的限制性片段长度多态性(RFLP)。根据酶切后的DNA片段在凝胶电泳上进行分离，染色后即可观察各个不同大小的片段，进行遗传变异的分析。这种诊断对于病原微生物是相当有效而直接的方法。如Katja Einer-Jensen等通过RFLP技术分析鱼体棒状病毒血红素败血病病毒的基因型。
荧光抗体技术
荧光抗体技术是根据抗原抗体具有高度特异性的反应，把荧光素作为抗原标记物，在荧光显微镜下检查呈现荧光的特异性抗原复合物及其存在部位，在水产动物病原体的检测上得到了一定的应用。鄢庆枇等应用荧光抗体技术检测牙鲆体内的弧菌。
近半个世纪以来，随着水产动物疾病研究广泛地与其它先进技术手段相结合，尤其与分子生物学技术的结合，为水产动物疾病快速诊断技术的研发带来了
福音。快速准确的病原体检测手段，高效免疫疫苗的制备都在很大程度上缓解了病害所带来的严重损失。然而目前许多快速诊断技术都处实验室研究阶段，将这些快诊技术应用于生产，还有待于条件方法的优化以及仪器设备成本的降低。随着研究的深化，水产动物疾病的快速诊断技术也在不断向前发展，基因芯片（又称DNA芯片）技术的研发也渐有突破。日本水产综合研究中心已经成功开发出利用DNA晶片快速诊断鱼类细菌性疾病的新技术，利用DNA晶片的诊断法与过去只能检出特定病原菌的PCR法或培养法相比，不但在检察时间或步骤上缩短许多，在成本上也比较便宜。利用该技术，以往被归为不明原因的细菌性疾病也能在一次的诊断中检测出来。应用基因芯片技术快速诊断技术确实是一种敏感性强、精确度高的有效检测手段。
国际上正在着手建立水产病害检疫网络和规范，其相关的病原快速检测技术将得到不断完善并规范化。现代免疫学、分子生物学和生物化学等高新生物技术，如核酸探针、PCR、荧光抗体检测技术、酶联免疫技术等在疾病诊断和病原生物检测中将得到广泛应用，技术的商品化程度将大大提高。对病原生物核酸序列的掌握为核酸探针和PCR引物的人工合成提供越来越多的便利。借助上述手段，检测技术将能精细到对病原分类分型鉴定和致病因子的测定。
水产养殖生物病害学疾病学 试卷一 一、填空题（每空0.5分，共30分） 1.病原是致病微生物和寄生虫的统称，其中，致病微生物包括__________、__________ 、____________和______________；寄生虫包括___________、______________、_____________、_____________、____________、___________和____________。 2.疾病的发生是____________、____________和____________三者相互作用的结果；疾病的经过包括____________、___________和___________三个时期；疾病的结局有_________、__________和__________三种方式。 3.决定病原体能否致病的因素包括____________、____________和______________；病原对宿主的危害作用包括_____________ 、____________、____________ 、____________和____________。 4.NH3-N中毒往往发生在水体的pH值偏_______时，H2S中毒容易发生在水体的pH值偏________时；浮头发生在水体的DO值偏________时，气泡病发生在水中的DO值偏_______时；如果浮头在夜晚12时就开始出现，说明______________，如果浮头仅发生在凌晨6时以后，则说明_______________。 5.细菌疫苗的类型主要有______________和______________；细菌疫苗的接种方法主要有______________、________________、______________和_____________。 6.抗原是能刺激机体产生__________和____________，并能与之结合而引起特异性
水产动物疾病学综合实验安排 第一天第二天第三天第四天第五天 上午现场调查 给药方法操作： 泼洒法 挂袋挂篓 口服法鱼苗鱼种检查 成鱼检查 收集 锥体虫并染 色 染色： 锚头鳋、 中华鳋、 鲺 考试 下午鱼类甲壳动物病及 其病原体的观察 收集锚头鳋、中华鳋等 成鱼检查 收集车轮虫、锚 头鳋、中华鳋、 鱼虱等 收集车轮虫 并染色 染色交寄生虫染 色切片标本
水产动物疾病学综合实验指导 一、实验目的与要求： 1. 水产动物疾病学综合实验是为了满足现代水产养殖行业对生产、培养科研技术操作人员的需要，使学生掌握水产动物疾病学的基本知识及基本技能，同时培养学生的创新、创业及社会服务能力，成为水产养殖行业防病治病的技术人才。 2. 通过实验了解水产动物疾病种类及其特点；能较准确地诊断水产动物疾病。 3. 能正确地使用渔药，能有效地防治水产动物疾病。 二、实验内容： 1. 现场调查； 2. 渔药使用：泼洒法；挂袋挂篓法；口服法； 3. 显微镜诊断疾病； 4. 寄生虫标本的收集与染色； 三、实验操作及其步骤： 1.现场调查： 池塘是水生动物生存的基础，疾病的发生除了由病原生物直接感染和侵袭外，首先应了解池塘周围的环境和水体物理、化学因素的变化对养殖生物发病的影响。发病现场的调查可为全面查明发病原因，及时发现和正确判断病鱼提供依据。 ①调查发病养殖水体环境和发病史 发病养殖水体环境是指养殖水体周围有哪些工厂，工厂是否排放污（废）水，这些污（废）水是否含有对鱼类有毒的物质，是否经过处理后排放等。同时，还要着重强调调查养殖水体情况，了解放养前清塘的方法、清塘药物的剂量、清塘
后放养鱼种的时间、鱼种消毒的药量等。这些与养殖生物疾病的发生关系较大，同时还应了解养殖水体近几年发生疾病的危害程度，以及所采用的防治方法和效果等。 ②了解池塘水质状况 水温水温是养殖生物疾病发生的重要因素，水温高低与疾病的发生和流行有着密切的关系。一般病毒性鱼病和细菌性鱼病，在水温为25~30℃时传染性最强，32℃以上和18℃以下时感染减弱。因此江苏、浙江和湖南、湖北一带，每年5~6月和8~9月份是细菌病、病毒病流行高峰。暴发性鱼病需要需要的水温范围较大，流行的时间也更长些。有些寄生虫病，如车轮虫病和指环虫病是夏季危害鱼苗、鱼种的流行病，而有些疾病如水霉病、小瓜虫病、斜管虫病和鱼波豆虫病，通常在20℃以下发病，属于低温季节的流行病。 A.谁的酸碱度（pH）由于高密度养殖，池塘有机质多氢离子浓度微偏高 （pH偏低），易发生水霉病。酸性水也常常引起嗜酸性卵甲藻病的暴发。在氢离子浓度较低（pH较高）的盐碱养殖水体，水温较低时易大量繁殖三毛金藻，分泌毒素，致使池鱼中毒死亡。 B.溶解氧水中含氧量的多少关系到养殖生物的生长和生存，同疾病的发生 有明显的相关性。正常池塘的溶解氧含量要求4毫克/升，最低不能低于1毫克/升，对于各种不同的鱼类和不同的生长阶段，因其生理需求不一样而对溶氧的需求不同。溶解氧长时间过低会影响鱼类生长，降低鱼体的抗病能力，同时为病原菌的繁殖，生长创造了条件。 C.检测水质对发病水体进行水的pH、溶解氧、氨氮、亚硝酸盐、磷酸盐、 硬度、化学耗氧量的分析，了解水质的基本营养盐变化情况，对可能因环境因子致病的因素应根据具体情况选择分析。 ③调查饲养管理情况 A.了解鱼种放养情况: 放养数量过多就会出现相互拥挤、摄食不足、生长不良 的现象，导致养殖生物体对疾病的抵抗能力降低，有利于病原菌的感染和传播。夏花培育至冬片鱼种一般亩放养量为7000~10000尾。 B.了解投饲和施肥状况: 投喂的饲料不新鲜或不按照“四定”投喂，鱼类很容 易患细菌性肠炎病。夏天在池塘内施用不经发酵的有机肥，易使池塘水质恶化、缺氧、并促使致病菌核寄生虫大量繁殖。
一、名词解释。 （1）疾病：疾病是机体在一定的条件下，受病因损害作用后，因自稳调节紊乱而发生的异常生命活动过程。 （2）拮抗作用当两种或两种以上药物共同使用时，其作用因相互抵消或减弱，称拮抗作用。： （3）组织损伤：是组织的物质代谢障碍所致的形态结构、功能和代谢三方面的变化。（4）贫血：贫血是指机体外周血红细胞容量臧少，低于正常范围下限的一种常见的临床症状。 （5）最小有效量：指药物作用于机体,使机体出现有效作用或出现药理效应的剂量, （6）半数致死量：表示在规定时间内，通过指定感染途径，使一定体重或年龄的某种动物半数死亡所需最小细菌数或毒素量。 （7）保虫寄主：某些蠕虫成虫或原虫某一发育阶段既可寄生于人体，也可寄生于某些脊椎动物，在一定条件下可传播给人。 （8）再生：机体内死亡的细胞和组织可由邻近健康的细胞分裂新生而修复，这种细胞的分裂新生称为再生。 （9）原发性感染：指病原体直接浸入健康鱼体而引起的鱼病。 （10）萎缩：发育成熟的器官、组织或细胞发生体积缩小的过程。 （11）再感染：同一传染病在完全痊愈后,经过长短不等的间隙再度感染 （12）最大耐受量：指药物在除急性毒性动物实验外的实验中不引起实验动物死亡的最大剂量或浓度。 （13）病原菌：是指能入侵宿主引起感染的微生物。 （14）专性寄生：寄生物一旦离开宿主生物就不能继续生存的现象。 （15）渔药：用以预防、控制和治疗水产动植物的病虫害，促进养殖品种健康生长，增强机体抗病能力，改善养殖水体质量，以及提高增养殖渔业产量所使用的物质。” （16）积水：积水是指体液在体腔内积聚的现象。 （17）代偿：在致病因素的作用下，体内出现代谢、功能障碍或组织结构破坏时，机体通过相应器官的代谢改变、功能加强或形态结构变化来补偿的过程。 （18）炎症：机体遭受有害刺激（如微生物、寄生虫、理化因子等）后所产生的防卫性反应，其作用为清除入侵体内的有害刺激物。 二、填空题 1、引起病理性萎缩常见的原因有：营养不良萎缩、压迫性萎缩、 缺血性萎缩、神经性萎缩和废用性萎缩等。 2、黄鳝常见的寄生虫病有锥体病、毛细线虫和棘头虫。 治中常用的给药方法有挂袋挂篓、注射、内服、浸浴、涂抹 、全池泼洒和浸沤等。 4、复口吸虫典型的生活史有七个阶段：卵→毛蚴→胞蚴→ 雷蚴→尾蚴→囊蚴→成虫。 5、目前，主要养殖品种常见的疾病有病毒性疾病、细菌性疾病、真菌性疾病、 寄生性疾病和非寄生性疾病等。 6、鱼类疾病的发生需经过潜伏期、前驱期和充分发展期三个时期。 7、代偿是机体的重要损伤反应，主要有代谢性代偿、功能性代偿和结构性 代谢等三种表现形式。 8、鲤春病毒主要危害一龄以上（多大规格）鲤鱼，主要流行于
疾病学复习资料 病原对宿主的危害 1夺取营养 2机械损伤 3分泌有害物质 有些病原有严格的专一性，如鰤本尼登虫，就专门寄生在鱼的皮肤；也有对宿主非专一性，如刺激隐核虫可以寄生在数十种海水鱼，小瓜虫可寄生多种淡水鱼。 疾病的控制包括三部分；诊断、预防、治疗 疾病诊断基本原则： 1诊断方法：先外后内、先腔后实、先肉眼后镜检。 2诊断材料：具典型症状的活的或刚死不久的材料。 诊断流程 宏观观察诊断 1观察症状和寻找病原：体液、体表、肌肉、内脏等部位有无颜色变化、有无炎症、充血、出血溃疡等症状，肉眼检查有无异 物。 2调查饲养管理情况：养殖品种和放养密度，放养量，摄食情况和活动情况。 疾病的综合预防 水产疾病的防治原则：无病早防、有病早治、防重于治 为什么水产病害学要实施综合预防？ 发现难生活于水中，不易发现 诊断难原因复杂，常为综合或并发感染 治疗难 a 水体施药用量大，治疗难以彻底 b 患病后食欲减退，口服用药难以理想 c 许多药物具有抗药性，反复使用无效 疾病的综合预防措施 1彻底清池清淤、药物消毒 2 保持适宜的水深和水色 A水深的调节：以淡黄色、淡褐色、黄绿色为好 黄褐色、绿色、蓝绿色、红色 b水色的调节方法：换水、适当改变水体的营养成分等 c科学用水和管水：PH、溶氧度、盐度、亚硝酸盐等指标。 3放养健壮的种苗和适宜的密度 4饵料应质优量适
5改善养殖水体生态环境条件 6操作要细心 7经常进行检查—寻唐 8在日常管理中要防治病原传播 9定期药物预防 10完善并严格执行检验检疫制度，建立预警预报。 11人工免疫 12选育抗病力强的新品种：SRP品种选育、杂交育种。 疾病的治疗 目的：通过药物控制或消灭病原或改善环境及营养条件 治疗的时机：早发现早治疗 一改善和优化养殖环境 a合理放养放养密度要合理；混养的种类搭配要适合。 b保证充足的溶解氧 c不滥用药物 d适时适量使用环境保护剂石灰类、光合细菌等 二增强养殖群体抗病力 1、培养和放养健壮苗种 1）SPF亲本 2）PVP-1洗卵 3） 使用清洁水 4）忌高温育苗、忌滥用抗生素 5）饵料优 2、免疫接种 3、选用抗病力强的养殖种类 4、降低应激反应 应激源：凡是偏离养殖动物正常生活范围的异常因素，如高 温等 应激反应：养殖动物对偏离养殖动物正常生活范围的异常因 素的躲避现象 三控制和消灭病原体 1使用无病原污染的水源 2池塘彻底清淤消毒 3强化疾病检疫 4建立隔离制度 5实施消毒措施 四加强饲养管理 思考题：1、水产动物疾病学 2、水产动物疾病发生的原因 3、水产动物疾病的诊断流程（诊断原则） 4、水产动物疾病的综合预防措施？
池塘养殖水生动物病害防控技术措施 朱玲1，李正友1，姚俊杰2，谢巧雄3，申晓东1，周洲1 （1．贵州省水产研究所，贵州贵阳550025；2．贵州大学动物科学学院，贵州贵阳550025； 3．贵州省水产技术推广站，贵州贵阳550003） 中图分类号：S943文献标识码：B文章编号：1007－1474（2014）05－0066－03 水生动物病害是渔业生产的大敌，已成为制约水产养殖业发展的一个重要因素，直接影响水生生物的养殖效果、经济效益和消费者的健康。病害的 收稿日期：2014－04－11 基金项目：贵州省特色水产产业技术体系项目（GZCYTX2013－01102）；国家大宗淡水鱼产业技术体系项目（Nycytx－49－47） 作者简介：朱玲（1963—），女，高级水产工程师，从事水产养殖技术研究。E－mail：linlinshuang1027@sina．com 发生往往与养殖环境、苗种质量等密切相关，因此在渔业生产过程中，病害防治必须遵循“预防为主，防重于治”的方针，只有采取综合防控技术措施，才能避免或减少渔业生产过程中病害的发生，取得显著的经济效益和社会效益。现将池塘养殖水生动物病害的防控措施介绍如下，供参考 櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋櫋 。 3．3播种方式一年生牧草以条播为好，便于田间管理和施肥。禾本牧科草行距20cm，播幅30 40cm；豆科行距25cm，播幅40 50cm；高秆饲草行距35 40cm；穴播每穴2 3粒种子，或育苗移栽2 3株。多年生牧草以开沟箱播为宜，沟宽25cm，深20cm，箱宽80 100cm。播种深度要根据牧草种子的大小确定覆盖土层的厚度，种子细小宜浅盖，一般只盖土1 2cm，大粒种子盖土2 3cm，土壤湿润浅盖，土壤干燥稍深盖，土壤疏松稍深盖，粘性土浅盖。 4田间管理 4．1苗期除杂优良牧草品种在苗期长势不如杂草，为不让杂草与牧草争夺土壤养分而影响牧草正常生长，牧草幼苗3 4叶时应进行人工清除杂草，避免因杂草生长过旺覆盖牧草幼苗影响产量，高杆饲草还需进行中耕除杂。 4．2施肥苗期每667m2以氮肥5kg进行提苗助长，以后每次刈割前2 3天每667m2追施复合肥10kg，确保刈割后牧草快速生长，提高产量。 4．3刈割时间禾本科牧草在抽穗期刈割，豆科牧草在现蕾期刈割。 4．4留茬高度矮秆饲草刈割时留茬4 5cm，高杆饲草刈割时留茬15 20cm。为使牧草提高单产，可适当增加刈割次数。矮秆牧草品种长到30cm，高秆饲草长到1 1．5m即可刈割，并及时追施肥料。 5刈割利用技术 5．1饲喂方法刈割的青料因畜禽的种类不同饲喂方法各异，饲喂家禽可直接饲喂，也可或切细或打浆混粮饲喂。高秆饲草铡成3 5cm，幼嫩饲草加30%干草，成熟饲草可直接饲喂。 5．2青干草的制作牧草生长旺季家畜利用不完，可制成青干草。选择晴天将抽穗的禾本科牧草、现蕾期豆科牧草刈割后散在地面曝晒2 3天，待水分干至70% 80%后，收集扎把运回到草料棚放在草架上保存，冬季铡细饲喂家畜。 5．3青贮料的制作青饲不完的优良牧草可制作青贮饲料，原料晾至水分65% 70%，切碎成2 3cm，一次性装窖，压实压紧，贮料高出窖池20 30cm，塑料厚膜密封，膜长于窖口边缘30cm，用泥浆压实，窖口边缘膜又折回用土压实，窖面用软草覆盖10 15cm再盖20 30cm细土即可，经40 50天发酵结束，可保存1年。取喂时从一角开始至上而下，按当天用量取喂。取后当时密封，以免杂菌形成二次发酵造成烂料。喂料要由少到多过渡，以免造成拉稀，妊畜不可饲喂，以免引起流产。 · 66 ·贵州畜牧兽医2014年第38卷第5期
常见动物疫病的诊断 山羊胸膜肺炎：采集病死羊的肺组织及胸腔渗出液，在血清琼脂平板上37℃培养3―5天后观察，结果可见形成菲薄透明的露滴样菌落。用低倍显微镜观察，可见菌落中央有乳头状突起，细菌为细小的多形性菌体。根据临床症状、剖检变化和实验室检验，诊断为羊传染性胸膜肺炎。诊断方法：实验室诊断，培养菌落。适用范围：各种大小的羊。 所需器材及实验试剂：恒温培养箱，血清琼脂培养皿，显微镜。成本预算：结合试剂、器材的损耗，约20元∕头份 山羊钩端螺旋体病：实验室诊断采用血清学试验。诊断方法：实验室诊断，检测血液中的钩端螺旋体细胞。适用范围：各种大小的病羊。直接镜检钩端螺旋体。采血液、尿液、脑脊液、肝、肾、脾、脑等病料。血液、尿、脊髓液以3000转/分钟离心30分钟，取沉淀物制成压滴标本，在暗视野显微镜下检查；肝、肾、脾组织先制成1:5～10悬液，经1500转/分钟离心5～10分钟，其上清液再以3000转/分钟离心30分钟，沉淀物制片镜检。也可将病料接种于柯索夫、希夫纳培养基或鸡胚培养(25～30℃)，每隔5～7天取料暗视野检查。见有钩端螺旋体，即可确诊。 所需器材及实验试剂：血清琼脂培养皿，显微镜。 成本预算：结合试剂、器材的损耗，约20元∕头份
鸡曲霉菌病和球虫病： 抹片镜捡：适用于。诊断曲霉菌病时，取肺部或气囊上的结节病灶，置破片上，用另一玻片压碎、抹簿，必要时加一滴清水，在低倍显微镜下观察有无菌丝和袍子。诊断球虫病时，在病变肠段刮取粘膜少许，或取内容物少许，置琐片上，抹薄，加一二滴清水，于低倍微镜下观察有无卵囊和裂殖体。 所需器材及实验试剂：玻片，无菌水，显微镜。 成本预算：结合试剂、器材的损耗，约5元∕只份 禽霍乱等细菌性传染病的诊断 染色片镜检：适用于，分为制片、染色、镜检三个步骤。 第一制片：以无菌操作剪下一小块肝或脾，将切面在无菌玻片上轻压一下，留下压迹，晾干。这样制作的标本称为触片。如果检验血液或其它液态病料，则用无菌玻片的一端蘸取少许病料，在另一无菌破片上均匀推出一条薄的涂面，晾干。这样制作的标本称为涂片。触片或涂片制好后，要用火焰固定，即在酒精灯火焰的上方迅速地来回通过3—4次，使片温大约达到60℃．便起到固定作用。 第二染色：方法有很多种，常用的为美蓝染色和革兰氏染色。 美蓝染色：以美蓝(亚甲蓝)的饱和酒精溶液30毫升加苛性钾水溶液(1：10000)100毫升，即配成染色液(平时配好备用)。将染色液滴于触片或涂片上，约2分钟，倾去，再用水冲洗，用吸水纸吸干，即可镜检。此法简单，但不能分辨病菌是革兰氏阳性还是阴性。
复习题 1、水产动物细胞和组织变性的类型有哪些？ 类型 （1）颗粒变性：一种最早和最轻微的细胞变性，很容易恢复，其特点是变性细胞体积肿大，胞浆内水分增多，出现许多微细红染的蛋白性颗粒，故称颗粒变性。 (2).水泡变性 水泡变性是指在细胞的胞浆内或胞核内出现多量水分形成大小不等的水泡的现象. (3).脂肪变性是指在实质细胞的胞浆内出现脂滴或脂滴增多的现象，简称脂变。 3、阐明水产动物疾病发生的因素？ 1. 环境因素 A. 自然条件 (1)．养殖水体的空间因素: 养殖密度。 (2)．养殖水体的水质因素：水质的好坏（溶氧、PH值等）。 (3)．养殖水体的底质因素: 淤泥的影响。 B. 人为因素 （1）放养密度过大或搭配比例不当（青鱼与鲤鱼的搭配）。 （2）饲养管理不当（用药方法、用药量不当，饲料投喂不当等）。 （3）机械损伤（操作不当造成鱼体受伤，而继法感染，引起发病，水霉病）。 2. 生物因素 主要包括病毒、细菌、真菌、藻类、原生动物、蠕虫、蛭类、甲壳动物、钩介幼虫、螨类等生物性因素。 3. 机体自身因素 主要是指鱼体自身的抗病能力，这与鱼的种类、年龄、生活习性和健康状况等方面有关。 疾病的发生，不是孤立的单一因素的结果，而是外界条件和内在的机体自身的抵抗力相互作用的结果，要综合加以分析，才能正确找到疾病发生的原因，
采取相应的治疗措施。 4、药物治疗过程中有哪些不良反应？ （1）副作用：是指在常用治疗剂量时产生的与治疗无关的作用或危害不大的不良反应。 （2）毒性反应：是药物对机体的损害作用。一般是剂量过大，用药时间过长或个体敏感性较高时引起。 （3）过敏反应： （4）继发反应：是药物治疗作用引起的不良反应。 （5）后遗效应：指停药后血药浓度已降至阈值以下时的残存药理效应。 5、阐明水产动物抗菌药物的作用机制？ 抗菌药物的作用机制 （1）抑制细胞壁的合成：细菌胞体外有一层坚韧的细胞壁，具有维持细菌形态和保护功能。抗菌药物（如青霉素类）可药物通过各种环节抑制细胞壁粘肽的合成，最终使细胞壁缺损，导致菌体破裂溶解死亡。 （2）增高细菌胞浆膜的通透性：位于细胞壁内侧的胞膜是脂质和蛋白质分子构成的渗透屏障，具有物质交换，合成粘肽，保护菌体等功能。一些抗菌药物（多粘菌素、制霉菌素等)可与细胞膜结合导致胞浆膜通透性增加，使细菌体内氨基酸、嘌呤、蛋白质、盐类外逸，导致细菌死亡。 （3）抑制蛋白质合成如四环素类、大环内酯类等。 （4）抑制叶酸代谢：磺胺类抑制细菌二氢叶酸合成酶，抑制四氢叶酸合成，阻碍核酸前体物质嘌呤、嘧啶的形成，从而抑制细菌的生长繁殖。 （5）抑制核酸合成：喹诺酮类可抑制DNA螺旋酶，进而抑制DNA的合成。 6、水产动物疾病的预防有哪些措施？ 预防水产动物疾病的措施 1.改善生存环境 （1）建设符合防病要求的养殖场
简答题 第一章 1.水产动物病害学的定义是什么？ 水产动物病害学： 是研究水产养殖动物（鱼、虾、贝等）疾病发生的原因、病理机制、流行规律以及诊断、预防和治疗方法的一门综合性学科。 2.水产动物病害研究发展具有哪些主要特点？ 3.简述我国水产动物病害防治的发展过程。 4.水产动物病害防治与其他学科的关系如何？ 水产动物病害防治与其他学科的关系 1.与水产动物本身的生物学知识有关： 如各种水产养殖动物的形态学、分类学、生态学和生理学等； 2.与病原体的生物学知识有关： 如寄生虫学和微生物学等； 3.与养殖水体环境化学知识有关： 如水化学和环境与水质监测技术等 4.与病害监测技术有关： 如生物制片技术、PCR 技术和电镜技术等； 5.与病害防治研究与应用知识有关： 如病理学、药物学、药理学和水产动物免疫学等。 第二章
1.影响海.病原： 又称病原体，是能引起疾病发生的致病微生物和寄生虫的统称。 2.病原的种类 1）致病微生物： 包括病毒、细菌、真菌和单细胞藻类等 2）寄生虫： 包括原生动物、吸虫（单殖吸虫和复殖吸虫）、绦虫、线虫、棘头虫、寄生蛭类、寄生甲壳类等。 1、产动物疾病发生的主要因素有哪些？ 水温（T水）、盐度、溶解氧、酸碱度、透明度、硫化氢、氨氮、亚硝酸盐、余氯、营养不良、动物本身先天或遗传的缺陷、机械损伤。 2.宿主、病原体和环境间的相互关系如何？ 病原体疾病的发生往往不是某个单一因素影响的结果，而是病原、宿主和环境相互作用的结果。 3.病原体疾病的来源与传播方式有哪些？ 4.病原对宿主有哪些危害作用？影响病原体致病的因素有哪些？ 病原对宿主的危害： 1)机械损伤： 寄生虫的吸盘、钩和口器损伤皮肤、鳃等组织 结果： 功能伤失；继发炎症感染 2)夺取营养：
水产动物疾病学复习题 ?一、名词解释（共8分，每小题2分） ?继发性感染：已遭受病原感染的个体再次遭到不同病原的侵袭。 ?原发性感染：指病原体直接浸入健康鱼体而引起的鱼病。 ?再感染：第一次患某种疾病痊愈后，第二次又患同样的疾病。 ?重复感染：第一次患某种疾病后，一般症状已消失，但仍遗留有病原体，机体和病原体间保持着暂时的平衡，当新的同种病原体入侵后，平衡被破坏，就会重新发病。 ?拮抗作用：当两种或两种以上药物共同使用时，其作用因相互抵消或减弱，称拮抗作用。 ?充血：机体的某一区域（组织或器官）的含血量超过正常的现象。 ?栓塞：在正常状况下并不存在于血液中的某些物质或小块，随血流而被带到较小的血管中，引起管腔阻塞的过程。 ?炎症：机体遭受有害刺激（如微生物、寄生虫、理化因子等）后所产生的防卫性反应，其作用为清除入侵体内的有害刺激物。 ?水肿：组织间隙大量液体的积储。 ?萎缩：物质代谢发生改变，使组织或器官的体积较正常缩小的过程。 ?湖靛：池中微囊藻（主要是铜绿微囊藻及水花微囊藻大量繁殖）在水面形成一层翠绿色的水花。 ?泛池是因为池塘水体中溶解氧降低到不能满足鱼类生理上最低需要时，造成鱼类呼吸困难，窒息死亡。?二、填空题（共17分，每空0.5分） ?1、根据症状区分，草鱼出血病有(肠炎型、红肌肉型、红鳍红鳃盖型)三种类型。 ?2、贝类的血液一般无色，如扇贝、牡蛎、文蛤等，是因为其血液含（血蓝蛋白）。 ?3、有些种类血液是红色的，如泥蚶，魁蚶等，是因为其血液中含（血红蛋白）。 ?4、锥体虫寄生在鱼的（血液）里，通过（水蛭）传播。 ?5、病原对宿主的危害主要有（夺取营养、机械损伤、分泌有害物质）三个方面。 ?6、药物的剂量必须达到(最小有效剂量)才能产生效应，但是超过(最大剂量)又会引起中毒。 ?7、敌百虫在碱性条件下迅速降解为（敌敌畏），其毒性增强近10倍，它是一种胆碱脂酶抑制剂。 ?8、草鱼细菌性烂鳃病的典型症状是(烂鳃和开天窗)。 ?9、白头白嘴病主要危害鱼的（苗种）阶段。 ?10、漂白粉是一种混合物，它的有效成分是（次氯酸钙）。 ?11、病毒进入机体的途径大致可分为两大类，即（水平感染）与（垂直感染）。 ?12、发现鱼浮头的急救办法有（加注新水、开机增氧机、泼洒增氧药物）等。 ?13、鱼苗转塘时，两水体的温差不超过±(2)℃，鱼种转塘时，两水体的温差不超过±(5)℃。 ?14、在复口吸虫的生活史中，（螺类）为第一中间宿主，（鱼类）为第二中间宿主，鸥鸟为终末宿主。?15、病鱼“跑马”的主要原因是（缺乏适口饵料）（池塘漏水）（车轮虫寄生）。 ?16、竖鳞病的主要症状为（全身鳞片竖立），主要危害（鲤鱼、金鱼）。 ?17、疾病发生与（环境）、病原体与鱼类的体质有关。 ?18、大黄使用前用（氨水）浸泡12小时，目的是使蒽琨衍生物游离出来。 ?19、鲢碘泡虫主要寄生在白鲢的(神经系统)和(感觉器官)。 ?20、烂鳃病的主要症状表现为病鱼鳃丝（溃烂），常粘有污泥。患严重烂鳃病的病鱼，鳃盖内表皮中间部分常被腐蚀成一个圆形或不规则的病灶区，这个病灶区俗称（开天窗）。 ?21、水产动物传染性疾病的病原体可大致分为（病毒）、细菌、真菌和（单细胞藻类）。 ?22、九江头槽绦虫生活史需经（卵）、（钩球蚴）、（原尾蚴）、（裂头蚴）才能发育为成虫。 ?23、九江头槽绦虫的中间寄主是(剑水蚤)。九江头槽绦虫寄生在鱼体的（肠道）部位。 ?24、清塘时经常使用的两种药物有(生石灰)和(漂白粉)，其中(生石灰)还具有增加肥效和调节pH的作用。?25、疾病的发展过程可分为（潜伏期）、（前驱期）、（发展期）三个时期。
一、1水生动物疾病学主要研究对象是硬骨鱼类、甲壳动物（虾、蟹类）、软体动物（鱿鱼、章鱼、贝类）和棘皮动物（海胆） 2水生动物：是指在水中生活的动物，它包括一直在水中生活的一级水生动物（鱼虾）等还包括曾经在陆地生活，又返回到水中的二级生物和昆虫（鲸等）。 3疾病：机体在一定条件下，受病原损害作用后因自身调节紊乱而发生的异常生命过程。 4病原：又称病原体，是能引起疾病发生的致病微生物和寄生虫的统称。 5水生动物疾病学：是研究水生动物疾病发生的病因、致病机理、流行规律以及诊断技术、预防措施和治疗方法的科学。 6传染病：指由特定病原微生物引起，有潜伏期和临床表现并且有传染性和流行性的疾病。 7免疫：指生物机体识别自身和非自身物质，对自身物质形成天然免疫耐受，对非自身物质产生清除作用的一种生理学反应。 8免疫学：是研究机体免疫系统识别并清除有害生物及其成分（体外入侵，体内产生）的应答过程、机制及应用的科学。 9原生动物的分类：鞭毛虫纲；纤毛虫纲；孢子虫纲；肉足虫纲 10原生动物的结构：表膜，膜质，膜核 11真菌的分类：酵母菌；霉菌；蕈菌 12水生动物病毒形态特征：DNA病毒，RNA病毒，朊病毒 13蠕虫病：1指环虫病主要寄生于鱼鳃上；2复口吸虫病（白内障病，瞎眼病）主要感染鲢，鳙鱼苗：3华枝睾吸虫，成虫寄生于人及哺乳动物的肝脏，胆管内，幼虫寄生于鱼，虾内。 14绦虫病：九江头槽绦虫寄生于鱼的肠道内。 15线虫病：鲤时子宫线虫病：寄生鱼的鳞片下面，肌肉。 16甲壳类寄生虫病：锚头鳋病 17诊断方法：1一般诊断法：问诊，触诊，叩诊，听诊，闻诊。2实验室方法：涂片法3特殊诊断法：PCR，Elisa,定位DNA，定位RNA技术.4形态学诊断，显微镜，电镜等。 18草鱼三大病：赤皮病，肠炎病，烂鳃病。 19中国四大家鱼：青鱼，草鱼，鲢鱼，鳙鱼 20赤潮：在海洋，特别是内湾及浅海区常常发生由于某些浮游生物异常繁殖，并高度密集，引起水质败坏，发臭，海水变色的现象，由于常出现红色，水随风起伏进退，看起来像一种红色浪潮。所以称为赤潮. 21疾病的分类：1按病原分：①致病微生物（病毒，细菌，真菌，单细胞藻类），②寄生虫（原虫，吸虫，绦虫，线虫，棘头虫，寄生蛭类，寄生甲壳类）2 按病因分①生物性病因（微生物性病原，寄生虫性病原）②非生物性病因（非正常的环境因素，营养不良，动物本身先天或遗传缺陷，机械损伤） 22鱼类疫苗有：病毒疫苗；细菌疫苗；寄生虫疫苗 23鱼类免疫接种的方法：浸泡接种（适用于小鱼，量多时）；注射法（适用于大鱼，数量少）；延长浸泡法（与浸泡接种无太大差异）；口服法；喷淋法。 24 PCR：多聚酶链式反应，是在模板DNA，引物和4种脱氧核苷酸存在条件下依赖于DNA聚合酶的酶促反应。 二、问答题 1病原，宿主，环境三者之间的关系： ㈠病原1决定病原体致病的因素：①病原体的毒力大小，②存在状态，③数量多少2病原体的来源：①原发性来源：疾病来自于发病的的动物或其尸体，如：感染白斑病的病虾或其尸体；预防：及时捞出或隔离患病的个体。②次(继)发性来源：疾病来自于带有病原的水体、饵料和工具等。预防：四消——鱼种消毒、饵料消毒、食场消毒和工具消毒 3.病原对宿主的危害：①夺取营养②机械损伤③释放有毒物质 4病原的特点：有些病原有严格的“专一性”，如鰤本尼登虫，就专门寄生在鰤鱼的皮肤；也有对宿主非专一性，如刺激隐核虫可以寄生在数十种海水鱼，小瓜虫可寄生多种淡水鱼。 ㈡宿主：疾病的发生：①与宿主的大小与性别有关，②与宿主的遗传因素有关，③与宿主的营养状况有关，④与宿主的免疫能力有关 ㈢环境因素：1水温：① T水过低：生物体抵抗力下降；②T水过高：易发生缺氧；③T水的骤变：引起休克、痉挛乃至死亡2.水质变化：①透明度：浮游生物、泥沙、其他悬浮物质②H2S、NH3-N等物质超标易发生中毒；③余氯：氯气是很好的水体消毒剂，但过量会引起生物死亡。④水质污染：工业、农业、生活污水等⑤pH、盐度变化3溶解氧（DO）：DO过高气泡病；DO过低：缺氧浮头泛池4.二氧化碳：5.人为因素：①种苗放养密度不当；②种苗搭配比例不适；③饵料管理不当；④药物使用不当。 2.水生动物免疫系统与其他动物免疫系统的共性： ①几乎所有硬骨鱼都有特异性和非特异性免疫应答机制。②存在主要组织相容性符合体，T细胞受体、CD4、CD8、淋巴细胞因子、补体等一系列基因；③具备细胞免疫、体液免疫和局部粘膜免疫功能；④免疫球蛋白（IgM）广泛存在于鱼类的体液循环系统和局部粘膜免疫系统。 3.水生动物免疫系统的特点：①鱼类是变温动物，只有免疫球蛋白―IgM。②不具备典型的二次免疫应答机制。③免疫应答受到多种因素的影响（水温、季节、关照周期及水中的有机物重金属离子）④种类繁多，种属关系复杂，免疫机制差异很大。 4.免疫器官：1，初级免疫器官（中枢免疫器官）：骨髓类似器官和组织：主要指骨膜和肾脏（低等脊椎动物没有骨髓），其之所以被纳入了免疫系统是因为它们介导了鱼类的免疫应答;胸腺：靠近腮腔，终身存在。2，次级免疫器官（外周免疫器官）：脾脏和肠道相关淋巴结组成
水产动物疾病学综合实验安排 水产动物疾病学综合实验指导 一、实验目的与要求： 1. 水产动物疾病学综合实验是为了满足现代水产养殖行业对生产、培养科研技术操作人员的需要，使学生掌握水产动物疾病学的基本知识及基本技能，同时培养学生的创新、创业及社会服务能力，成为水产养殖行业防病治病的技术人才。 2. 通过实验了解水产动物疾病种类及其特点；能较准确地诊断水产动物疾病。 3. 能正确地使用渔药，能有效地防治水产动物疾病。 二、实验内容： 1. 现场调查；
2. 渔药使用：泼洒法；挂袋挂篓法；口服法； 3. 显微镜诊断疾病； 4. 寄生虫标本的收集与染色； 三、实验操作及其步骤： 1. 现场调查： 池塘是水生动物生存的基础，疾病的发生除了由病原生物直接感染和侵袭外，首先应了解池塘周围的环境和水体物理、化学因素的变化对养殖生物发病的影响。发病现场的调查可为全面查明发病原因，及时发现和正确判断病鱼提供依据。 ①调查发病养殖水体环境和发病史 发病养殖水体环境是指养殖水体周围有哪些工厂，工厂是否排放污（废）水，这些污（废）水是否含有对鱼类有毒的物质，是否经过处理后排放等。同时，还要着重强调调查养殖水体情况，了解放养前清塘的方法、清塘药物的剂量、清塘 后放养鱼种的时间、鱼种消毒的药量等。这些与养殖生物疾病的发生关系较大，同时还应了解养殖水体近几年发生疾病的危害程度，以及所采用的防治方法和效果等。 ②了解池塘水质状况 水温水温是养殖生物疾病发生的重要因素，水温高低与疾病的发生和流行有着密切的关系。一般病毒性鱼病和细菌性鱼病，在水温为25~30℃时传染性最强，32℃以上和18℃以下时感染减弱。因此江苏、浙江和湖南、湖北一带，每年5~6月和8~9月份是细菌病、病毒病流行高峰。暴发性鱼病需要需要的水温范围较大，流行的时间也更长些。有些寄生虫病，如车轮虫病和指环虫病是夏季危害鱼苗、鱼种的流行病，而有些疾病如水霉病、小瓜虫病、斜管虫病和鱼波豆虫病，通常在20℃以下发病，属于低温季节的流行病。
动物疾病常用诊断方法 疾病是致病因素与动物机体相互斗争的过程。临床上主要诊断方法整体检查、器械检查、实验室检查、解剖等，从而查明疾病的发生过程，并得以确诊，并制定有效的防治措施。 一、整体检查: 整体检查主要是对动物的整体精神及健康情况进行检查，主要是用问诊、视诊、触诊、叩诊、听诊等方式对动物的精神状况、躯体生长情况进行整体的检查。 1、问诊:问诊主要是兽医与畜主进行交流，对患病动物进行调查的一种方法，并从中了解到患畜有哪些临床症状，饮食方面有何异常，当地有没有有流行病的发生，以前患畜有没有类似的临床症状，饲养管理方面有没有问题，通常饲养管理的好坏对于动物的健康影响甚大，易引起疾病的发生，比如饲料发霉变质，动物食用后易引起中毒，饲料中蛋白质缺乏，易导致动物毛色灰暗、粗糙、无光泽，动物抵抗力降低引起各类疾病的发生，公畜表现在精液品质差，受精率低等。通过以上交流使兽医从中拣出疾病发生的原因并措施。 2、视诊:主要是对动物的精神状态、躯体各部分及粪尿的变化情况观察，从而对动物的状况给予一定的评定，为疾病的诊断奠定基础。通常是绕动物躯体转一圈，看动物的精神状态如何，躯体各部分有无异常情况，阴道有无排泄异常的物质，粪便是否正常。 一般情况健康的动物精神状态表现在目光有神，两耳灵敏，人一接近就有反应，而有病的动物则表现在精神不正，倦怠乏力，反应迟钝，目光暗淡，头低耳耷。 健康动物肌肉丰满，皮毛色有光泽，肥瘦适当，骨骼结实，而饲养管理差，营养水平低的动物皮毛色泽淡，肥瘦不适当不均匀，蛋白质过低的动物皮毛色泽淡。有时动物寄生虫也可引起毛色暗淡。 往往有病的羊，鼻镜干燥，提示有肠道疾病，表现在廇胃积食、瘤胃迟缓等。 眼结膜正常粉红色，眼结膜苍白，提示有贫血、寄生虫病；潮红提示有酸中毒、炎症发生；眼胞浮肿，多见于水肿病；下陷多见于脱水表现下泻、大出血、大吐等; 一侧突起，可能是肿瘤；瞳孔缩小多见于胆碱类中毒，如有机磷中毒；瞳孔散大常见于垂危病者，是濒死前的一个征象，通常尿素中毒也能引
一、名词解释 1.水产动物病害学：是研究水产经济动物病害发生的病因，致病机理，流行规律，以及诊断技术，预防 施和治疗方法的科学。 2.病毒的传播方式：水平传播和垂直传播 3.渔药：是为提高增养殖渔业产量，用以预防、控制和治疗水产动、植物病、虫、害，促进养殖对象健 康成长，增强机体抗病能力，以及改善养殖水体质量所使用的一切物质。 4.渔药残留：水产养殖生物接触渔药后，药物的原形、代谢产物以及与该药物相关的杂质蓄积在其细胞、 组织或器官内，称为渔药残留。 5.渔药代谢动力学：是研究机体对药物的作用，研究渔药浓度在机体内随时间变化规律的科学，是临床 用药监测、预测渔药不良反应和制定最佳合理给药方案的理论依据 6.病毒的致病机制（感染后的表现）：顿挫感染、溶细胞感染和非溶细胞感染病毒感染类型：急性感 染、慢性感染、潜伏感染、慢发病毒感染 7.致病性：病原菌具有克服机体防御、引起疾病的能力 8.毒力：病原菌致病能力的强弱细菌的毒力分侵袭力和毒素 9.侵袭力：病原菌突破宿主防线，并能在宿主体内定居、繁殖、扩散的能力 10.细菌的感染途径：接触感染、创伤感染、消化道感染 11.细菌的感染类型：隐性感染、潜伏感染、带菌状态、显性感染 12.寄生：有的在某一部分或全部生活过程中，必须生活于另一生物之体表或体内，夺取该生物之营养而 生存，或以该生物之体液及组织为食物来维持其本身的生存并对该生物发生危害作用，此种生活方式13.寄生虫：暂时或长久性寄生在宿主的体表或体内，夺取宿主的营养并且给宿主造成不同程度危害的计 生动物 14.寄主种类：终末寄主，中间寄主，保虫寄主。
15.终末寄主：寄生虫的成虫时期或有性生殖时期所寄生的寄主 16.中间寄主：寄生虫的幼虫期或无性生殖时期所寄生的寄主。若幼虫期或无性生殖时期需要两个寄主， 则最先寄生的寄主称为第一中间寄主，其次寄生的寄主称为第二中间寄主。 17.保虫寄主：寄生虫寄生于某种动物体的同一发育阶段，有的可寄生于其他动物体内，这类其他动物常 成为某种动物感染寄生虫的间接来源，故站在某种动物寄生虫学的立场可称为保虫寄主 18.寄生虫的感染方式：经口感染，经皮感染（主动经皮感染、被动经皮感染） 19.栓塞：循环血液中出现不溶于血液的异常物质（栓子：固气液），随血液运行并阻塞血管的过程 20.血栓：在活体的心脏或血管内，血液发生凝固或血液中某些有形成分析出、黏集形成固体质块的过程， 称为血栓形成。固体质块称为血栓。 21.充血：器官或局部组织的血管内血液含量增多 22.出血：血液流出心脏或血管之外 23.梗死：由于动脉血流断绝，局部缺血引起的坏死 24.水肿：等渗性体液在细胞间隙积聚过多 25.萎缩：发育成熟的器官、组织或细胞发生体积缩小的过程 26.变性：是指细胞或细胞间质内，出现各种异常物质或原有正常物质的异常增多 27.细胞肿胀：指细胞内水分增多，胞体增大。胞浆内出现微细颗粒或大小不等的水泡 28.脂肪变性：细胞胞浆内出现脂滴或脂滴增多 29.坏死：活体内局部组织或细胞的死亡称为坏死 30.炎症：机体对致炎因素的局部操作所产生的具有防御意义的应答性反应 31.变质;炎症局部组织发生的变性和坏死称变质 32.再生：机体内死亡的细胞和组织可由邻近健康的细胞分裂新生而修复，这种细胞的分裂新生称为再生。 33.再生可分为：生理性再生、病理性再生
第十二章水生动物的病原微生物 第一节病原细菌 一、弧菌属：引起鱼的出血性败血症（弧菌病） （一）鳗弧菌：是弧菌病的主要病原菌，最初称鳗细菌 1、形态及染色特性：菌体弯曲，两端钝圆；单在或双在；菌体一端有单鞭毛，无荚膜和芽孢。革兰氏染色阴性。 2、生长要求及培养特征 生长要求：兼性厌氧条件；生长温度10-35°C，最适温度为20-25oC；PH为6-10，最适为8；Nacl浓度为0.5-6％，最适为1％。 培养特征：在普通琼脂平板上，形成圆形、隆起、半透明或不透明、灰白色或淡黄褐色、边缘整齐、有光泽的菌落。 3、抵抗力：本菌海水中存活2周以上；淡水中存活3-5h 4、致病性：引起大马哈鱼、虹鳟、鳗鲡、虾等多种鱼类的弧菌病。 5、微生物学检查 （1）涂片镜检（2）分离培养（3）血清学检查 6、防治原则： （1）弧菌病疫苗是最早应用于鱼类预防免疫的疫苗 （2）药物预防和治疗：运用四环素、磺胺、硝基呋喃类、萘啶酸等抗生素和化学治疗剂。 （二）奥氏弧菌：引起鲑科鱼类如大马哈鱼、小红点大马哈鱼、虹鳟等的弧菌病。 （三）杀鲑弧菌：为鲑科鱼类冷水性弧菌病的病原。本菌为弯曲杆菌，具极端丛鞭毛（9根以上）。引起贫血和全身各脏器的广泛出血。 （四）溶藻弧菌（五）非凝集性霍乱弧菌 （六）副溶血性弧菌：为海产鱼弧菌病的病原 二、气单胞菌属 （一）杀鲑气单胞菌：鲑科鱼类疖疮病病原 1、形态与染色特征：菌体呈球杆状；无鞭毛、芽孢和荚膜；成双、短链或丛状排列。革兰氏阴性菌。 2、生长要求及培养特征 生长要求：兼性厌氧，需精氨酸和蛋氨酸，适宜温度为22-25oC，PH为6-7，食盐浓度为0-3％。 培养特征：在普通琼脂上形成圆形、隆起、边缘整齐、半透明、松散的菌落。产生褐色色素。 3、抵抗力：本菌对土霉素、四环素、氯霉素、萘啶酸、喹啉酮等敏感。 4、病原性：引起鲑科鱼类疖疮病、鲤鱼红斑性皮炎和金鱼的溃疡病 5、防治：福尔马林灭活菌和减毒菌接种。
渔药与人药、兽药的差异 实验课程：水产动物疾病学 姓名:刘保 学院：水产学院 学号:2009308200422 专业班级:水族科学与技术0901班 指导老师：顾泽茂 完成时间：二○一二年二月二十五日
渔药与人药、兽药的差异 刘保 （华中农业大学水产学院，武汉430070） 摘要 随着我国医药学和畜牧业的快速发展,人药、兽药及渔药的需求量越来越大,人药、兽药及渔药的生产厂家和药物品种也越来越多。同时，由于药物生产和经营管理体制不顺、机制不全,致使大量的伪劣假冒和低质药品充斥市场，一些地方不规范用药、滥用药和凭经验用药现象时有发生，更有甚者，人药、兽药和渔药不分，用兽药替代渔药，用人药代替兽药或渔药，滥用现象十分严重，也十分普遍。虽然这类药物疗效显著，但引发的副作用较多，后果也较严重，如引发环境污染、引起药害、增加用药成本、耽误治疗良机、导致品种质量安全问题等。 为尽快扭转这种局面，大力普及规范用药知识，笔者在下面将对人药、兽药、渔药进行详细区分，对这些年来用药过程中存在的主要问题加以梳理、分析和归纳，就药物的合理使用加以说明，供广大从事医药事业特别是医生和兽医以及用药指导技术人员了解和掌握。 关键字：人药;兽药；渔药；药物；水产养殖
目录 1.药物 (4) 1.1.兽药 (4) 1.1.1.定义及分类 (4) 1.1.2.生产现状 (4) 1.1.3.成分 (5) 1.2.渔药 (6) 1.2.1.定义及分类 (6) 1.2.2.生产现状 (6) 1.2.3.疗效 (6) 1.3.人药 (7) 1.3.1.定义及分类 (7) 1.3.2.自身特性 (7) 2.药物滥用 (7) 2.1.现状 (8) 2.2.原因 (9) 2.3.危害 (10) 3.兽药、渔药和人药的区别 (10) 3.1.兽药与渔药 (10) 3.2.兽药与人药 (11) 4.科学用药方法 (12) 4.1.怎样安全使用兽药 (12) 4.2.怎样安全使用渔药 (13) 4.3.怎样有效遏制药物滥用现象 (14) 参考文献 (16)
免疫接种；是用人工方法使机体特异性免疫应答增强方法比如疫苗接种 心肌炎：指心肌兴奋性增强，收缩力减弱，心肌肌肉发生炎症一种疾病。临床常见疲乏、发热、胸闷、心悸、气短、头晕等犬细小病毒病：由犬细小病毒引起感染所引起一种以心肌炎和肠炎为主要特征的急性传染病，临床上发病快死亡率高 狂犬病：由狂犬病病毒感染所致的急性高度接触性人畜共患急性传染病。临床表现为特有的恐水、恐声、怕风、恐惧不安、咽肌痉挛、进行性瘫痪等。 咽炎：咽炎是咽粘膜，软腭，扁桃体及其深部炎症总称。临床表现咽部肿胀吞咽困难 肠套叠；指一段肠管及其附着肠系膜套入到附近一段肠腔内的肠变位 支气管炎：指气管、支气管粘膜及其周围组织的慢性非特异性炎症。临床上以长期咳嗽、咳痰或伴有喘息及反复发作为特征贫血：是指单位容积血液中红细胞数，红细胞比容，及血红蛋白数低于正常值临床综合症。 应激综合症；多种因素成为应激原而引起应激反应原因不明机理不明比如猝死综合征 瞬膜突出症：即第三眼睑突出症主要症状是瞬膜从内眼角露出或向外反转，眼分泌物增多，使结膜发生炎症1 在临床对宠物真菌病的主要 诊断方法是wood’s灯 2犬的正常体温指标是 37.5-39.5 3猫的正常体温指标是 38.0-39.5 4 弓形体的中间宿主和中末宿 主是猫 5 泌尿器官定位诊断最有意义 指标是尿沉渣 6 参与凝血活动的维生素是维 生素k 7 维生素E缺乏可导致白肌病 8 犬猫红细胞减少在临床上可 见造成骨髓造血机能抑制的疾 病 9 犬猫肺部听诊肺。随呼吸过程 出现空瓮音这说明病变时肺部 有大空洞 10 通过疝孔进去疝囊的内脏器 官是疝内容物 11 犬猫有机磷中毒特效解毒药 是解磷定 12犬猫氟中毒特效解毒药是解 氟灵（乙酰胺） 13 犬猫有机磷农药中毒胃内容 物大蒜味 14 貂发生自咬症的特征是周期 性兴奋 15氰氢酸特效解毒药是亚硝酸 盐 16亚硝酸盐特效解毒药是美兰 17 肝细胞严正临床表现实质 性黄垣 18 犬猫出现圆周运动可见于脑 多头蚴 19 犬猫尿道阻塞会出现肾后性 少尿 选择题 1 以下不是犬急性心肌炎症状 的是（四肢水肿） 2 犬猫便秘主要表现（里急后 重） 3 以下不是皮下水肿特点是（肿 胀界限不明显） 4 以下动物疾病体温不升高是 （食盐中毒） 5 皮下水肿具有以下特点（触压 处有明显波动感） 6 渗出性心包炎听诊出现（心包 拍水音） 7 按压触诊捻发状是（貂阿留申 病毒气肿） 8 貂阿留申病毒下列生化指标 降低的是(血清白蛋白) 1.犬瘟热病的流行病学特征，临 床症状，诊断和防治措施。 答：流行病学：CDV的自然宿 主为犬科动物，病犬是本病的主 要的传染源，主要传播途径是病 犬与健康犬直接接触，通过空气 飞沫经呼吸道感染或通过污染 的食物经消化道感染本病一年 四季均可发生，以冬春季多发， 有些地区流行与夏秋季，幼犬最 易感。临床上病犬以眼鼻有分泌 物，典型的双相热，白细胞减少， 消化道，呼吸道黏膜呈急性卡他 性炎症，后期有神经症状为特 征。少数病例出现鼻部和脚垫的 高度角化。诊断：根据临床症状、 病理剖解和流行病学资料仅可 以做出初步诊断，确诊必须进 行：病毒分离、病毒抗原检查和 包涵体检查。防治措施：本病无 特异疗法，在患病初期，大剂量 应用特异性犬瘟热病毒单克隆 抗体或大剂量高免血清，有一定 疗效。当出现神经症状是，应用 单克隆抗体有一定的治疗作用， 抗生素有助控制继续发感染，可 大量应用氨苄青霉素0.5~3.0g 静脉注射，有脱水症状者，应大 量补充葡萄糖和电解质溶液，并 配合维生素类药物，对出现脑神 经症状的犬，可用苯妥英钠、安 定等镇静类药物。 2.犬细小病毒病的流行病学特 征，临床症状，诊断和防治， 答：流行病学，感染犬是本病的 主要传染病，传播途径是健康犬 与患犬活被患犬污染的食物，粪 便，尿液，呕吐物，用具等直接 接触，通过消化道感染。本病一 年四季均可发生，但以冬春季多 发。症状，本病的发生在临床上 常以心肌炎或肠炎为主的综合 征表现，幼犬多以心肌炎型发 作。青年犬多以肠炎型表现，成 年犬少发，且致死率低。诊断， 根据流行病学，临床症状，病理 变化等，可对肠炎型作出初步诊 断，心肌炎型要结组织学变化及 心肌包涵体检查做出诊断，确诊 需要分离病毒电镜观察，血凝实 验，血凝抑制试验及免疫学诊 断。防治措施：平时做好免疫接 种发生疫情后，严格隔离病犬， 对犬舍。用具等用2%~5%的氢 氧化钠消毒。治疗，早期用康复 犬全血或用抗细小病毒高免血 清，肌肉或皮下注射。依据病情 纠正电解质和碱平衡，可用5% 葡萄糖生理盐水、林格试液等， 对呕吐严重的可用胃复安，阿托 品等，止血可用止血敏，对恢复 期可以给予易消化的流质食物。