生物制药试题答案
一、主观填空题（共 7 道试题，共 20 分。）
1. 生物药物按生理功能和用途分类分为（治疗药物，预防药物，诊断药物,其它)
2. 单克隆抗体的分离方法有（凝胶过滤，阴离子交换层析，亲和层析）
3. 真核基因在大肠杆菌中表达的形式（以融合蛋白的形式表达药物基因，以非融合蛋白的形式表达药物基因，分泌型表达蛋白药物基因）
4. 常用的阳性克隆检测方法有（免疫酶技术，免疫荧光技术和放射免疫技术）
5. 目前常用的骨髓瘤细胞系多来自（BALB/c）小鼠和(Lou)大鼠，因此免疫动物也多采用相应的品系，最常用的也是(BALB/c小鼠)
6. 质粒分裂不稳定产生的原因（一是含粒菌产生不含质粒子代菌的频率，质粒丢失率与宿主菌、质粒特性和培养条件有关；二是这两种菌比生长速率差异的大小。）
7. 克隆真核基因常用的方法（反转录法，反转录-聚合酶链反应法，化学合成法）
二、名词解释（共 6 道试题，共 30 分。）
1. 生物药物生物技术药物，天然生化药物，微生物药物，海洋药物和生物制品统称为生物药物。
2. 基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所以加工过程。
3. 透析培养是利用膜的半透性原理使培养物和培养基分离，其主要目的是通过去除培养液中的代谢物来解除其对生产菌的不利影响。
4. 单克隆抗体（McAb）是针对一个抗原决定簇的抗体，又是单一的B淋巴细胞克隆产生的，故称单克隆抗体。
5. 补料分批培养是将种子接入发酵反应器中进行培养，经过一段时间后，间歇或连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生长的培养方法。
6. 质粒的结构不稳定是DNA从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。
三、简答题（共 5 道试题，共 50 分。）
1. 简述基因工程药物的质量控制？
1.生物活性测定
2.理化性质鉴定
（1）非特异性鉴别（2）特异性鉴别（3）相对分子质量测定（4）等电点测定（5）肽图分析（6）氨基酸组成分析（7）部分氨基酸序列分析（8）蛋白质二硫键分析
3.蛋白质含量测定
4.蛋白质纯度分析
5.杂质检测
（1）蛋白质杂质（2）非蛋白质杂质
6.稳定性考察
7.产品一致性的保证
2. 脾细胞和骨髓瘤细胞融合后，如何筛选杂交瘤细胞？其原理是什么？
将融合后的细胞立即移入选择性培养基中进行培养。常用的选择培养基为HA T培养基，它是用次黄嘌呤（H），氨基嘌呤（A）和胸腺嘧啶（T）配制的。其中氨基嘌呤（A）能阻断DNA合成的主要途径，瘤-瘤融合细胞和瘤细胞因不能合成DNA而死亡。脾-脾融合细胞和瘤细胞在这样的组织培养条件，几天内亦迅速死亡。由于SP2/O等骨髓瘤细胞都是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）缺乏株，脾细胞内却有这种酶，因此脾-瘤融合的杂交瘤细胞可利用HGPRT，用次黄嘌呤（T）合成DNA，是杂交瘤细胞得以生长。
3. 蛋白质药物的分离纯化方法？
1.离子交换层析
2.疏水层析
3.亲和层析
4.凝胶过滤层析
4. 简述基因工程药物生产的基本过程？
基因工程药物的生产是一项十分复杂的系统工程，可分为上游和下游两个阶段。上游阶段是研究开发比不可少的基础，主要是分离目的基因、构建工程菌（细胞）。下游阶段是从工程菌（细胞）的大规模培养直到产品的分离纯化、质量控制等。大致分为一下几个步骤：获得目的基因→组建重组质粒→构建基因工程菌（细胞）→培养工程菌→产物分离纯化→除菌过滤→半成品检定→成品检定→包装
5. 影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素？
1.外源基因的剂量
2.外源基因的表达效率
（1）启动子的强弱（2）核糖体结合位点的有效性（3）SD序列和起始密码的间距（4）密码子组成
3.表达产物的稳定性
4.细胞的代谢负荷
5.工程菌的培养条件