一、光合细菌及其作用
l、光合细菌概述
光合细菌(Photo Synthetic Bacter ia简称PSB)属细菌的一类，有紫硫菌、绿硫菌、紫色非硫细菌和绿色非硫细菌。我们主要介绍紫色非硫细菌，它们是兼性厌氧菌，属原核生物，光能异养型原核生物门，红色光合细菌纲，红螺菌目，红螺菌科，红假单胞菌属。它们以光和热为能源，主要利用有机物中的碳，同化其它营养元素进行生长繁殖，是高营养、高效能、多用途的有益微生物。
光合细菌又称光养细菌，是能进行光合作用的一群原核生物。广泛分布于湖泊、海洋、土壤中，是地球上最古老的生物之一。人类对光合细菌的认识始于19世纪30年代，我国早在20世纪50年代就对光合细菌进行了一些基础理论研究，1987年11月在上海召开的“第一届光合细菌国际学术会议”大大推动了我国光合细菌的基础性研究、应用研究也取得很大的进展。诸多研究结果表明，光合细菌在农业、环保医药等方面均有较高的应用价值。现已开发的光合细菌包括l目、2亚目、4科、19属共约49种，其中应用于水产养殖中较多的是红色无荡菌科，一般以紫色非硫细菌和紫硫细菌较为普遍。近20年来，以小林正泰(1981)、小川巅夫(1985)等人为代表的一批学者首先把它应用于高浓度有机废水处理，并把它作为优质钙料和饵料，开展了水产、畜牧养殖等多方面实验。取得了显著成效。此后，我国学者亦于近年对光合细菌在水产上的应用进行了多方面的研究。
2、光合细菌生物学特性
光合细菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处，主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧区。光合细菌的适宜水温为15℃—40℃，最适水温为28℃-36℃。它的细胞干物质中蛋白质含量高达到60%以上，其蛋白质氨基酸组成比较齐全，细胞中还含有多种维生素，尤其是B族维生素极为丰富，Vb2、叶酸、泛酸、生物素的含量也较高，同时还含有大量的类胡萝卜素、辅酶Q等生理活性物质。因此，光合细菌具有很高的营养价值，这正是它在水产养殖中作为培水饵料及作为饲料添加成分物质基础。
3、光合细菌作用原理
光合细菌在有光照缺氧的环境中能进行光合作用，利用光能进行光合作用，利用光能同化二氧化碳，与绿色植物不同的是，它们的光合作用是不产氧的。光合细菌在自身的同化代谢过程中，又完成了产氢、固氮、分解有机物三个自然界物质循环中极为重要的化学过程。这些独特的生理特性使它们在生态系统中的地位显得极为重要。
在水产养殖中运用的光合细菌主要是光能异养型红螺菌科(Rhodospirillaceae)中的一
些品种，例如沼泽红假单胞菌(Rhodop seudanonas palustris).在自然界淡、海水中通常每毫升含有近百个PSB菌，光合细菌的菌体以有机酸、氨基酸、氨和醣类等有机物和硫化氢作为供氧体，通过光合磷酸化获得能量，在水中光照条件下可直接利用降解有机质和硫化氢并使自身得以增殖，同时净化了水体。除此之外，细胞内还含有碳素储存物质糖原和聚B一羟基丁酸、辅酶Q、抗病毒物质和生长促进因子，具有很高的饲料价值，在养殖业上有广阔的应用前景。PSB在厌氧光照条件下，能利用低级脂肪酸、多种二羧酸、醇类、糖类、芳香族化合物等低分子有机物作为光合作用的电子受体，进行光能异养生长。在黑暗条件下能利用育机物作为呼吸基质进行好氧或异养生长。光合细菌不仅能在厌氧光照下利用光能同化CO．，而且还能在某些条件下进行固氮作用和在固氮酶作用下产氢。另外，有些菌种在黑暗厌氧条件下经丙酮酸代谢系统作用也可产氢。光合细菌还能利用许多有机物质如有机酸。醇、糖类转化某些有毒物质如H2S和某些芳香族化合物等。PSB通过生物转化，可合成无毒、无副作用且富含各类营养物质的菌体蛋白，不仅改善了生态环境，还为养殖业提供了高质量的饲料
原料。PSB菌体中对动物生长有促进作用的维生素B12、生物素、泛酸、类胡萝卜素、叶绿素以及与造血、血红蛋白形成有关的叶酸的含量远高于一般微生物，尤其含有人工不能合成的生物素D-异构体。这些物质在动物机体内都具有显著生理活性在水产养殖中，养殖池按水中溶解氧含量的大小由表层向底部可分为好氧区和厌氧区。表层生物繁殖旺盛，水质一般较好，底层则积累了鱼虾的排泄物和未消耗尽的食物残料，有机质丰富，造成微生物的大量繁殖，消耗了水中大量的氧气，导致地底层形成无氧环境，硫酸盐还原菌大量繁殖，产生对鱼虾有毒害作用的硫化氢、酸性物质等。养殖地底层的这种环境正好是适于光合细菌生存的条件一是具有厌氧条件，二是光线通过上面覆盖的有氧水层这个光线过滤器，使光合细菌可以吸收到适宜生长的450-550 pⅢ波长光。光合细菌利用池底的鱼虾排泄物、食物残料以及有毒有害的硫化氢、酸性物质作为基质大量繁殖，提高水体中溶解氧含量，调节pH，并使氨氮。亚硝酸态氮、硝酸态氮含量降低，池底淤泥蓄积量减少，有益于藻类和微型生物数量的增加，使水体得以净化。PSB可进行光合成、有氧呼吸、固氮、固碳等生理机能，且富含蛋白质、维生素、促生长因子、免疫因子等蕾养成分，在功能上可与抗生素相媲美，并且更具有安全性，是生物工程具有前景的研究领域之一。光合细菌制剂还具有独特的抗病、促生长功能，大大提高了生产性能，在应用方面显示了越来越巨大的潜力。其它在净化水质、鱼虾养殖、畜禽饲养、有机肥料及新能源的开发方面有着广阔的应用前景。
二、光合细菌培养条件
1、营养条件
光合细菌细胞体构成的元素主要有：碳、氢、氧、氮、磷、钾、钠、镁、钙、硫和一些微量元素等，它们也是所有生物细胞构成的主要物质．一般情况下，细胞鲜重：水占80%-90%、无机盐1%-1.5%、蛋白质7%-10%、脂肪1%-2%、糖类和其它有机物I%-1.5%。其中干细胞含碳45%-55%，氢5%- 10%、氧20-30%、氮5%-13%、磷3%-5%、其它矿物元素3%-5%o光合细菌的细胞壁具有半透性，能选择性地让一些营养元素按一定比例进入，在酶的作用下合成自己的细胞组织和裂变的新个体。
营养元素的全面和搭配的合理，是营养条件的关键。根据这一要求，选用多种无基原料，科学配方，经特殊加工而成的。光合细菌培养基一，基本符合光合菌的生繁殖所需的营养要求，无毒副作用，使用安全；固状结晶体便于包装和运输，而且有2年的保质期。用其生产菌液每毫升含有30-50亿个活体，质量明显优于市场出售的同类产品。
光合细菌培养基，是光合细菌生长繁殖所需各种营养元素的组合体。每种原料都能得以充分利用，最大限度地生产高浓度的菌液，这无论是对于用户、经销商还是厂家都有很大的益处，对在工业和农业中的推广和普吸将产生深远的影响。
2、环境条件
有了营养全面的光合细菌培养基，只是给光合细菌提供了“食物”，还需要有适宜光合细菌生长的环境条件，才能培养出优质的菌液，环境条件具体有以下几个方面：(l)培养介质：含菌量较低的清洁淡水、海水或加食盐的淡水。从经济、实用的角度考虑，地下水含菌量低，为最佳水源；清洁的地表水也可使用：含氯量较高的自来水应敞口放置两三天后使用；蒸馏水及纯净水固然很好，但是成本太高。
(2)酸碱度：（pH）值：7.5-8.5最佳（适应范围6-10）。
(3)水硬度: PH值中性时10度以下，即调节PH值至8左右时，培养介质中的乳白色沉淀物不宜过多。
(4)温度：25℃-34℃最佳(适应范围15℃-40 ℃)。
(5)光照：3000LX-4000LX最佳，即每25千克菌液需要60瓦左右的电灯光照强度，当然太阳光最好且无需成本。
(6)透气性：密闭培养效果最好。
(7)容器：透明的容器或透明塑料袋。大规模培养可用土池、水泥池等，菌液深度30厘米以下为佳。
3、培养工具的消毒方法
1．加热消毒法：利用高温杀死微生物的方法。
（1）直接灼烧：此法可直接把微生物烧死，灭菌彻底，但只适用于小型金属或玻璃工具的消毒。
（2）煮沸消毒：一般煮沸5～10分钟，适用于小型容器、工具的消毒。
（3）烘干箱消毒：亦称为恒温干燥箱消毒法。
2．化学药品消毒法：适用在批量培养中，大型容器、工具、玻璃钢水槽和水泥池中。
（1）酒精：浓度为70％的酒精常用于中、小型容器的消毒。用纱布蘸酒精在容器、工具的表面涂抹，10分钟后，用消毒水冲洗两次即可。
（2）高锰酸钾：按300ppm配成高锰酸钾溶液，把洗刷洁净的容器、工具放在溶液中浸泡5分钟，取出，再用消毒水冲洗2次～3次即可。
三、光合细菌的培育方法
采取直接购进光合细菌培养基，按照培育方法加入菌种和水，即可在3-5天时间培养出大量的合格光合细菌菌液，产品符合国家相关标准（每毫升含光合细菌30亿以上）。
自行培育光合细菌的方法非常简单，因而适合用户在普通家庭条件下进行生产培育。培育光合细菌主要注意应满足适宜的温度和光照，一般采取室外培育或室内培育。由于冬季温度较低，出太阳的时候较少，使用光合细菌也相对较少，而且室内培育需要保温和补光，增加了培育成本，所以温度低的季节一般不进行培育，若低温季节确需使用光合细菌，可以在温度较好的季节增加培育量，保存光合细菌以各使用。所以培育光合细菌普遍采用室外光培育方法。
l、室外阳光培育光合细菌
首次培育光合细菌的量，主要看我们的菌种有多少，若我们有足够的菌种，则首次培育即可进行大批量培育，但如果我们的菌种数量较少或我们的使用量本身不大，则可以使用塑料瓶等小型容器进行小批量的培育。
（1)少量培育光合细菌方法
首次培育由于光合细菌菌种数量不多，或是使用光合细菌的量不大，可以先少量培育生产或先行扩种，以后再大批量生产。一袋光合细菌培养基可生产100公斤光合细菌，生产时光合菌菌种加入量不低于培养量的20%、食盐加入量为培养量的1.8%。
以下以培育生产100公斤光合细菌为例介绍整个培育方法。
培育100公斤光合细菌所需原料：“鳝宝”光合细菌培养基一袋（440克）、光合细菌菌种20公斤、食盐1.8公斤、清洁水80公斤。这里需要注意的是水为不含消毒剂、杀菌剂的清洁水源，一般采用地下水提前一天曝气即可。如果没有地下水而采用自来水，需提前2-3天盛入容器进行曝气。
培育容器：可用20个容积为5公斤的透明塑料桶（一般装食用油的油桶，每桶可装5公斤，清洗干净即可），或者采用7-8条鱼苗袋。也可采用透明的装纯净水的水桶或矿泉水瓶子。培育生产时将一袋光合菌基、20公斤菌种、1.8公斤食盐及80公斤水充分混合均匀，然后分装到塑料桶或鱼苗袋中密封，置于室外阳光下培育即可。具体做法为：先取少量水将光合菌基一袋溶化后倒入一能盛装100公斤的容器，再取少量水将1.8公斤食盐溶化倒入其中，然后加入20公斤光合细菌菌种，最后加入清洁水直至整个培养液达1 00公斤，加入过释不断搅拌，让原料充分混合均匀，配好后将培养液分装到塑料桶或鱼苗袋密封培育。
将塑料桶或鱼苗袋放到室外阳光下培育，如果阳光过于强烈以致室外温度超过35℃时，应适当遮阳以降温，培育过程中每天摇动培育容器1-2次，晚上不作任何处理。经光照培育，菌液颜色会变成粉红色，随着培育时间的加长，其颜色会逐步转变成紫红色，这个过程一般需7天左右。
产品检测：培育完成的光合细菌是否合格从颜色、气味、PH值三个方面检测。合格的产品颜色应该是紫红色，开盖能闻到一股特殊的臭味，用PH试纸测试其PH值应在8以上。
光亨细菌的培育时间与培育时的天气状况相关，如果天气较好阳光充足，一般7天左右即可培育完成，如果遇阴天或气温偏低培育时间会延长。培育合格的光合细菌即可使用，也可作菌种继续扩大培育。
(2)批量光合细菌培育方法
通过陆续培育获得了一定量的菌种后，即可根据自己的使用量进行批量生产培育。以下
以生产1000公斤光合细菌为例介绍整个培育方法。
培育1000公斤光合细菌所需原料：“鳝宝”光合细菌培养基10袋（4400克）、光合细菌菌种200公斤、食盐18公斤、清洁水800会斤。这里需要注意的是水为不含消毒剂、杀菌剂的清洁水源，一般采用地下水提前一天曝气即可。如果没有地下水而采用自来水，需提前2-3天曝气。
培育容器：批量培育光合细菌一般采用塑料袋（青贮饲料的筒状塑料袋）较为经济实用，剪取一段6米左右长度的塑料袋备用。批量培育应选择地势平坦，阳光充足的地方。地面最好是平整光滑的水泥地面，一定要光滑以防弄破塑料袋，如果地面粗糙，应先用尼龙袋等垫好再放培育塑料袋。
培育生产时将塑料袋一端用绳子捆牢，用一塑料桶盛装清洁水30-50公斤，往桶中加入10袋光合菌基和18公斤食盐充分搅拌溶化，然后将桶中溶液倒入塑料袋，倒入溶液的时候同时加入清洁水和光合菌种，光合菌种量为200公斤，加入水的量为800公斤，完成后将袋口捆牢，然后将培育袋两端分别提几下，让培养液混合均匀，操作时注意掌握分寸，不要弄破塑料袋为宜。
培育袋在室外阳光下培育，如果阳光过于强烈以致室外温度超过35℃时，应适当遮阳以降温，培育过程中每天摇动培育容器1-2次，晚上不作任何处理。经光照培育，菌液颜色会变成粉红色，随着培育时间的加长，其颜色会逐步转变成紫红色，这个过程一般需要7天左右。
(3)培育过程中的注意事项
a: 培育时间：光合细菌的培育时间一般为7天左右，但如果遇到光照少或温度偏低，培育时间会延长。很多用户反应首次培育时温度和光照都较好，但培育7天左右都还不合格，这主要是光合细菌还没有适应当地的水质，建议首次培育时可加大光合细菌菌种比例就可解决，培育合格后的菌液再生产时就正常了。
b: 培育的菌液颜色偏淡：这主要是由于菌神加入量过少、菌种老化、杂菌过多、光照不足、温度过高或过低、水的硬度过高，将其调节正常即可解决。
c: 培育的菌液颜色变黑：主要是气温较高的季节，刚培育好的菌液因长时间失去光照。应及时将其移到阳光下补光，基本可以变红。
d：培育的菌液颜色变绿：可能是菌液中绿硫菌大量繁殖所致，建议培育时容器一定要清洗干净，更换水源采用新的菌种再行培育。
2、室内灯光培育光合细菌
光合细菌主要采用自然光照培育，操作简便，生产成本低，较容易大批量生产，所以建议大家根据自己的用量，在温度较好、光照较好的季节大量生产，以供满足生产需要。尽量不在温度较低、光照较差的季节生产，如早春、晚秋和冬季，因在这些时候生产需要增温和补光，增加培育设施成本和能源成本，从而使培育光合细菌成本增加，进行大批量生产操作较为困
难。
若在早春、晚秋和冬季温度较低时确需培育光合细菌，就应采取增温补光方式进行培育，与自然培育不同的是需要准备增温补光装置和保温设施。
增温补光装置：一般使用白炽灯泡，灯泡功率根据生产量及当时气温而定，一般使用40w-200w不等，保证生产时温度达20℃以上40℃以下为宜。
保温设施：培育保温装置一般采用大纸箱或自制木箱等，箱的大小据生产量而定。
培育容器：一般采用容积5公斤的透明塑料瓶（清洗衣干净的色拉油瓶即可），便于放入纸箱或木箱中进行培育。
先按生产比例在一塑料桶中加入清洁水、光合细菌培养基、食盐和光合菌种，原料要求及配制方法参考室外阳光培育光合细菌。加入原料后充分搅拌配制成培养液，然后将培养液装入塑料瓶，再将塑料瓶放入纸箱，在纸箱顶部吊一个白炽灯泡，然后盖好纸箱进行培育。培育中注意观察箱内情况，若箱内温度过高或过低应及时更换灯泡，适当调节灯泡高度，以防止灯泡过低烫坏光合细菌，每天开箱将塑料瓶提出摇晃后再放入，并调换塑料瓶位置（即将中间部分调到边上），以保证菌液受光均匀。
经常检查灯泡情况，不要靠箱l太近，以防止火灾发生。—般7天左右检查培育光合菌的颜色、PH值及臭味，培育合格即可使用，若指标未达到应继续培育。
四、培养管理
光合细菌的培养日常管理包括测试、观察和分析处理等三个方面。
1.测试
（1）搅拌：光合细菌培养过程中必须搅拌或充气，其作用是帮助沉淀的光合细菌上浮获得光照，保持菌细胞的良好生长，每天至少摇动3次，定时进行。
（2）调节光照度：培养光合细菌需要连续进行照明，白天可利用太阳光源培养，晚间则需人工光源照明，或完全利用人工光源培养。人工光源一般使用碘钨灯或白炽灯泡。一般培养光照强度控制在2000lx～5000lx之间。
（3）调节温度：在光合细菌的培养过程中，一般在23℃～39℃均能正常生长繁殖，但如果温度过低，可以把培养容器放在箱子里，利用白炽灯炮散发的热提高箱内温度，并根据需要调整箱子的密封程度达到调节温度的目的。
（4）酸碱度的测定和调整：为了延长光合细菌的指数生长期，提高培养基的利用率和单位水体的产量，测定和调整pH值是一项重要措施。一般采用加酸的办法降低菌液的酸碱度，醋酸、乳酸均可使用，而最常用的是醋酸。在日常的管理工作中，必须每天测定菌液的pH 值，当pH值上升超出最适范围，即加酸调整。
（5）测定光密度（O.D.）值：光密度值和细胞干重之间是近似线性关系，这种相关关系常用来测定培养物的浓度。首先根据测定的数据画出相关的标准曲线图，然后测定菌液的光密度值，即可根据标准曲线大致估算出菌细胞的浓度。光密度值常用分光光度计测定。在日常管理工作中，通过测定菌液的光密度，可以了解光合细菌的生长繁殖情况。
2.生长情况的观察和检查：在培养过程中，可以通过观察菌液的颜色及其变化来了解光合细菌生长繁殖的大致情况。菌液的颜色是否正常，接种后颜色是否由浅迅速变深，均反映光合细菌生长是否正常以及繁殖速度的快慢。此外，通过测定菌液的光密度值及其变化情况，能更准确地了解菌体的生长繁殖情况。接种后，光密度值迅速加大，表示生长正常、繁殖迅速。如果光密度值不增加以及菌液颜色不正常、出现菌体附壁等现象，说明培养效果不良。必要时还可以通过显微镜检查，了解细菌生长情况。
3.问题的分析和处理：通过日常管理、检测、观察和检查，了解光合细菌的生长情况，就可以结合当时环境条件的变化进行分析，找出影响光合细菌正常生长的原因，采取相应的对策。影响光合细菌生长的原因很多，从内因看菌种本身是否优良，即接种的母种的质量是
否优良；从外因看，不外乎是光照、温度、营养、敌害、厌气程度等方面。
五、光合细菌的保存
光合细菌生长繁殖除营养条件外，还与光照和温度有关。温度适宜，即使光照不足，也会生长，只是速度缓慢；温度较低，即使光照充足，也很难生长甚至停止生长；温度过高，则会老化而死。因此保存菌液，温度是关键。
成品菌液应存放在温度较低的地方，1 5℃以下为最佳，并保持一定的光照（每天不低于2小时），这是因为光合细菌在营养、光照、温度都适宜的情况下，形成一定速度的生长态势，即“生长惯性”处在生长高峰期的光合细菌生长惯性很强，此时如果突然失去光照或光照很弱，5-10天后，会出现生长旺盛的光合细菌因光合作用失衡，而导致菌体细胞大量死亡，使菌液发黑，并有恶臭。刚开始发黑时，施以适当光照即能缓解。所以刚培养好的菌液应尽量降温，逐步减少光照，以减弱生长惯性。到了生长惯性很弱或没有的时候，光合细菌就进入稳定期（保存期），此时阴凉避光保存会延长保存期，一般可保存6个月左右。
一般情况下，用户在生产过程中，对菌液的保存无须作特别处理。气温高的季节，在阳光下培养，成熟的菌液仍置于阳光下，不必避光，保存期2-3个月，在此期间可反复培养续种，秋天气温下降后，培养好一批菌液过冬，冰冻前移至室内避光保存，保存期可达8个月左右。光合细菌保存期的长短，主要取决于温度的高低，温度越低，保存期越长，反之越短。在夏季高温季节，若暂时不使用，若要保存菌种，最好在中途进行适量的培育续种，这时一般用保存时间不超过3个月的菌种续种为好，然后将培育的菌液保存，或将少量菌液放入保鲜室进行长期保种。
六、光合细菌的简易提纯
“鳝宝”光合细菌培养基是不含任何有机质的纯无基配方，绝大多数细菌都不可能在此培养基中生长。但由于光合细菌的菌体富含蛋白质，死亡的菌体也可以给一些杂菌提供生存发展的机会，因此使用本方法培育光合细菌，
只是尽最大可能避免了杂菌的入侵，但若操作不当，也有感染杂菌的可能。如果你的菌种通过多代培育，感觉培育生长速度明显不如以前，就应考虑更换菌种或是进行菌种提纯。
l、调节PH值去除杂菌
光合细菌适宜PH值在8.0左右，在9-10的高碱度情况下仍能生长，而一般杂菌适宜的PH 值在7.2-7.6左右。若把菌液的PH值调节至9.0，杂菌难以耐受甚至死亡，而光合细菌则可以承受并能生长，这样可以筛除一部分杂菌。
2、选用优质菌种
细菌的生长繁殖一般按倍数增长，假设菌种内的杂菌含量较高，培养几次后它们在菌液中的比例不会减少，有些杂菌的生长速度较光合细菌快，比例可能还会增大。老化的光合细菌活性较差，菌液内的有害代谢物质较多。此时应另选浓度高、活性强、杂菌少、鲜红色的菌液。
3、加大接种量以抑制杂茵
大规模生产过程中，由于水源、容器及空气的杂菌是不可排除的，因而应加大接种量使光合细菌占绝对优势，这样才能培育出高质量的菌液。光合细菌含量高了，还能释放抑菌酵素，抑制杂菌的生长。正常的接种量应不低于20%-25%，在提纯菌种和续种时可将光合菌种量扩大到50%，这样培养周期短、质量好。
七、光合细菌的使用方法及注意事项
1、净化水质、防鱼病
现在泥鳅、黄鳝、四大家鱼、虾等水产养殖密度逐步加大，加上大量投喂人工饵料等，水质很容易恶化，为解决这个问题，我国水产养殖正在普遍推广光合细菌来净化水质。光合细菌在水产上的应用是因为其具有优良的特性，光合细菌的固氮作用将水体中的游离氮气固定在
自身体内，使得生态系统中的氮含量增加，这对氮限制的水体更有意义。光合细菌能驱除水体中的小分子有机物、硫化氢等有害物质，降低池塘有机物的积累以净化水质，并能促进物质循环利用。光合细菌能显著抑制某些致病菌的生长繁殖，达到以菌治菌的目的。光合细菌主要靠生长繁殖来利用水体中的有机物和铵盐等来净化水质，只有当菌体达数量达到相当的规模时才能显现明显的净化效果，所以要达到较明显的净化效果需要在养殖塘提前就使用光合细菌，不要等到水体都大量出现污染情况时才使用光合细菌，否则在短期内起不到明显的净化效果。在以往的使用中，有些养殖户反应说用了光合细菌效果不明显，这主要是其养殖水体都已经很污染了，才开始泼洒光合菌，所以刚用后没有看到水质明显变好。
实际使用时应在苗种投放池塘前7-15天，或高温季节到来前1个月左右即开始施用，成鱼养殖一般每亩每次使用光舍细菌5公斤，兑水20倍左右（即兑水100公斤）均匀泼洒，每隔10-15天泼洒一次。光合细菌宜在晴天有阳光时使用，不宜在阴雨天天使用。光合细菌不能与消毒、杀菌剂混合使用，养殖过程中防治病害使用了消毒、杀菌药品，一般需要5天以后才能泼洒光合细菌，所以应安排好日常防病用药与使用光合细菌的时间。
使用光合细菌后的效果随着使用时间的增长越来越明显，刚开始使用时从表面不易直观的看到使用效果，特别是水体已经较污染的情况下才使用光合细菌，使用后短时间感觉效果不明显。要直观的判定用后是否有效，可以在使用前测下池塘水体的氨氮、溶解氧等水体指标，使用后再测试水体指标对比，就可以直观的知道水体有害物质在降低，水质在逐步变好。光合细菌对鱼的传染病，特别是细菌和真菌病害有很好的防治效果。养殖过程中每隔10-15天泼洒一次，既起到净化水质的作用，又起到较好的防病作用。
2、用于培育苗种
光合细菌对促进幼体生长、变态和和提高成活率都有很好的效果，一是净化水质，改善幼体的生存环境；二是作为饵料被水花苗、贝类的幼体和对虾的蚤状幼体等摄食。从幼体破膜至出苗的整个育苗期间均可施用光合细菌，每天早晚各投一次，将光合细菌稀释后全池泼洒，或与豆浆、蛋黄等饵料混合投喂。水花鱼苗投放后1-7天内，按5ppm（即每立方米水体5毫升）全池泼洒光合细菌，以后视水质情况适当增加。同时以干料的4%加入豆浆中投喂．10天后在泼洒豆浆中加入5%-10%的光合细菌，每天二次。
3、作为动物性生物饵料的饵料
有研究表明，光合细菌的菌体无毒，营养丰富，蛋白质含量高达64.1%-66%，脂肪7.18%，粗纤维2.78%，碳水化合物23 %，灰分4.28%，每克干菌体相当于21KJ热量。PSB不仅蛋白质丰富，而且氨基酸组成齐全，光合细菌蛋白水解后，其氨基酸含量丰富。
轮虫、枝角类、丰年虫等浮游动物是养殖业中常用的饵料。由于光合细菌营养非常丰富且个体较小，因此是枝角类和轮虫等饵料生物最适宜的饵料之一。
朱厉华等（1997）用光合细菌混以藻类培养轮虫，轮虫的增殖率明显高于单一的藻类、酵母培养组；小林正泰(1981)将光合细菌与酵母、小球藻三者对枝角类、轮虫的增殖效果进行比较，结果以光合细菌为好。王金秋等(1999)报道，养殖水体因投喂光合细菌，水体中的枝角类和昆虫生长繁殖速度加快，数量增加。张明等(1999)证明，用光合细菌培养的枝角类数量是酵母和小球藻培养的2-4倍：培养的蚤和轮虫的氨基酸含量明显增加，品质也更加接近天然生长的浮动物。
4、作饲料添加剂
光合细菌本身营养丰富，形成菌团后能被鱼类摄食，作饵料添加剂可提高饵料转化效率，增强鱼的抗病力。光合细菌的使用量为1.2%-3%o其方法是先将光合细菌和水稀释，后均匀喷洒于配合饲料或鲜活饵科上，光合细菌本身含有丰富的维生素B12、菌绿素、类胡萝卜素等，拌匀立即投喂。饲料在加工过程中不宜加入光合细菌，以免加工过程中的高温破坏菌体的有效成份或将它们杀死。
光合细菌不仅在泥鳅、黄鳝、虾、蟹、四大家鱼等水产养殖中广泛应用，并且在种植业和环保方面也广泛使用，这里就不再作详细介绍。
5、维护水体微生态平衡
水产养殖场的水体中存在着各种各样的微生物，有些是有益的，有些是有害的；也有些是处于中间状态的叫“条件致病微生物”，即正常情况下，这类微生物不致病，遇水质污染，鱼类免疫功能下降时，它们便大量繁殖危害鱼类。
通常人们采用消毒杀菌剂来控制，但随着施用次数的增加，病原微生物的耐药性也相应地增强，为了达到预防和治疗的效果，每次施用的剂量不得不逐渐加大，这不仅增加了用药成本，而且还污染了水体，造成水产品质量下降，甚至不能食用。
如何控制病原微生物的生长繁殖，又不使其不产生抗药性，不污染水体呢？答案是现成的，用光合细菌预防鱼病，完全可克服消毒杀菌剂的缺点，它不仅可降解或清除水体中包括鱼药在内的有害化学物质，占绝对优势的光合细菌还可与病原微生物争夺营养、空间，使其无法进行大量生长繁殖，同时还不存在病原微生物耐药性问题，从而不易形成致病的环境条件，鱼类也就不易发病。
鱼类的病害防治原则是：防重于治。只有在日常的渔业生产中，维持水体中微生态系统平衡，使有益微生物始终占绝对优势，尽量不给病原微生物有大量生长繁殖的机会，才是健康养殖的出路之一，如果平时不能有效地预防，到了出现症状再去治疗，包括鱼药成本在内的重大生产损失将是不可避免的。
6、间接增氧作用
PSB生长繁殖时，不需要氧气，也不释放氧气，它是通过吸收水体中的耗氧因子，而产生了间接地增加氧气的作用。
7、使用光合细菌的注意事项
在养殖水体中施用或在饲料中添加光合细菌能改善水质，减少耗养，促进鱼虾生长，提高产量。使用光合细菌要注意以下几点：
一、适时使用。光合细菌宜掌握在水温20摄氏度以上时使用。低温及阴雨天不宜使用。
二、看水使用。水肥时施用光合细菌可促进有机污染物转化，避免有害物质积累，改善水体环境和培育天然饲料，保证水体溶氧。水瘦时要先施肥再使用光合细菌，这样有利于保持光合细菌在水体中的活力和繁殖优势，降低使用成木。此外，酸性水体不利于光合细菌生长，应先施用适量生石灰，水体PH值达标后再使用光合细菌。
三、与肥配用。在池塘施用粪肥或化肥时，配合施用光合细菌效果更为明显，可避免肥料用量过大，水质难以把握的缺点，并可防止藻类老化造成水质变坏。
四、酌量使用。鱼池使用时，每立方水体用2至5克光合细菌拌粉碎的干肥泥均匀撒于鱼池，以后每隔20天左右每立方水体用1至2克光合细菌，对水后全池泼洒。用于饲料添加投喂鱼虾时，按1％的比例拌入。用于疾病防治时，可连续使用。每立方水体鱼池用1至2克，对水后全池泼洒。
五、使用禁忌。光合细菌制剂是活体细菌，药物对它有杀灭作用，因此不可与消毒杀菌剂同时使用。水体消毒后须经过一周方可使用。
八、光合细菌在养殖和种植上的用法用量
（一）PSB在水产及畜禽养殖中的应用剂量及注意事项。
一、水产养殖中原来传统的消毒杀菌方法利少弊多。如用生石灰消毒，生石灰含氯、产酸、产硫、影响有机质分解。用漂白粉，水温越高效果越差，PH越高效果越差。用高锰酸钾，如在碱性及微酸性环境下使用，二氧化锰褐色沉淀易沉积，对鱼虾鳃部有影响，易发生呼吸
道感染。总之，使用化学药物杀菌消毒，对鱼虾生长和发育均有影响，对防病抗病效果并不佳，同时有害细菌也会产生抗药性，使化学药物的杀菌效果越来越不理想，也越来越难治理。
二、光合细菌在水产中的作用：光合细菌是有益细菌，具有促进动物消化吸收，刺激生长发育，提高免疫功能，抑制各种病菌浸入的特效。光合细菌对改善水质有奇效，将光合细菌撒入污染严重的池塘中，一般在3小时后，水质开始转清，第二天去看，与周围没撒光合细菌的池塘相比，水质有天壤之别，一看便知。若鱼病很严重，每天均有死鱼浮面的话，则用了光合细菌后，第二天去看，浮面的死鱼显著减少，直到消失，与周围形成鲜明对比。用了光合细菌，还可有效地帮助鱼虾安全越冬，冬季不但不减产，反而有增产。用了光合细菌的水产品，颜色鲜艳，个体整齐，鱼肉鲜嫩！用光合细菌稀释10倍后，对鱼虾进行药浴，可使鱼虾成活率达到90%以上，发粘细菌病、烂鳃病、打印病、成活率达60~100%，水霉病、赤鳍病、擦伤病成活率达近100%，比其它化学药物相比，更加安全可*，无任何药浴副作用。用了光合细菌一般亩产提高15-23%，饵料系数下降18-23%，成活率提高20-60%，个体增重15%，投入产出比达1：10以上。每亩增效益达800元以上。
三、在肉禽蛋禽中的应用：在禽类的饮水中加入光合细菌2%。对蛋禽而言，可降低死亡率12-32%，提高增重率20%左右，提高了抗病力，免疫力。提高产蛋率4-15%，降低碎壳蛋的数量5-15%，提高蛋品哈氏单位3%，达到82.22以上，提高蛋黄色度8%，用罗氏比色扇法测定蛋黄色度可达8.33。对肉鸡，可提高增重12.3%，提高饲料报酬25%，成活率提高5%，经济效益对比提高50%。同时，可显著降低肉蛋产品中的兽药残留，改善品质，避免出口的绿色检疫关贸壁垒。
光合细菌对各种水产养殖动物都有益，尤其是育苗阶段的效果特别地明显，具有成活率高于对照20—60%，用于成鱼育肥，增产20%左右，饵料系数下降20%左右，个体增重15%，且无任何副作用。
育苗用量：每平方米用100克。间隔10天用一次。
鱼育肥：首次用7公斤一亩，以后用4—5公斤/亩，间隔15天用一次。
鱼苗或病鱼药浴：用光合细菌稀释10倍，把鱼苗或病鱼放入游15分钟即可。药浴后，可使药浴鱼虾成活率提高90%，如患粘细菌病、烂鳃病、打印病后成活60-100%，患水霉病、赤鳍病、擦伤病后成活近100% 且无任何药浴副作用。
饲料中用量：鱼苗5%，成鱼3%，禽畜3%-5%，现拌现喂，饮水添加3%。现拌现喂。
施用方法：适当用水稀释后全池洒匀，若先用生石灰后2小时，再用PSB则效果更好。
注意事项：不可与消毒杀菌剂同时使用，水体消毒须1周后方可使用。晴天水温在20度以上时使用效果较好。液体PSB拌入料中后应于当天用完。酸性水体易使鱼生病，且不利于PSB生长，应常用生石灰调节水体pH值。
（二）在种植业上的应用：
由于大量无机肥料与化学农药的使用，造成土壤残留农药的毒害，土壤盐化、板结严重，土壤肥力趋于衰竭。因此，有识之士都大力提倡使用有机肥料和“生物农药”。而光合细菌已被证明既是一种优质的有机肥料，又能增强植物的抗病能力。光合细菌可作为底肥、或以拌种和叶面喷施等方式应用。
光合细菌能使农作物增产增质的原因，似可归纳为以下2个主要方面：
（l）光合细菌能促进土壤物质转化，改善土壤结构，提高土壤肥力，促进作物生长。光合细菌大都具固氮能力，能提高土壤氮素水平，通过其代谢活动能有效地提高土壤中某些有机成分、硫化物、氨态氮，并促进有害污染物（如农药、化肥）的转化。同时能促进有益微生物的增殖，使共同参与土壤生态的物质循环。此外，光合细菌产生的丰富的生理活性物质如脯氨酸、尿嘧啶、胞嘧啶、维生素、辅酶Q、类胡萝卜素等都能被植物直接吸收，有助于改善作物营养，激活植物细胞的活性，促进根系发育，提高光合作用和生殖生长能力。
（2）光合细菌能增强作物抗病防病能力。光合细菌含有抗细菌、抗病毒的物质，这些物质能钝化病原体的致病力以及抑制病原体生长。同时光合细菌的活动能促进放线菌等有益微生物增殖，抑制丝状真菌等有害菌群生长，从而有效地抑制某些植病的发生与蔓延。
水稻、小麦：每次亩用5千克叶面喷施。水稻秧苗期、孕穗期各用一次；小麦冬肥、拔节期各用一次。
油菜：基肥亩用15千克浇根。窜苔前亩用15千克叶面喷施。
瓜果类蔬菜：每次亩用10千克，幼苗期稀释浇根一次，现蕾期喷一次。
叶菜类蔬菜：每次亩用20千克，生长期浇根或叶面喷施，7天用一次。
花卉：移载后每亩40千克浇根，生长期每亩20千克喷施，15天一次。
茶树：播种基肥亩用80千克。冬肥亩用40千克浇根。萌发期前亩用20千克浇根，叶片生长期亩用15千克喷施，每15天一次。
果树：冬肥亩用40千克浇根。新叶长成后亩用20千克叶面喷施。
（三）使用方法
（1）将光合细菌菌液稀释20-30倍全池均匀泼洒。
（2）将菌液用沸石粉吸附或拌和细土后撒入池中。
（3）将菌液拌和饲料后投喂。
（4）将菌液稀释10倍后，浸泡鱼种。
（5）拌种、浇根、叶面喷施。
（四）.注意事项
（1）不可与消毒杀菌剂混合使用，水体消毒须1周后方可使用。
（2）使用前，将菌液光照10小时以上，使用效果更好。
（3）晴天水温20℃以上时使用效果较好。
（4）拌入的饲料应于当天投喂完毕。
（5）应灵活掌握用量和使用的连续性，因为光合细菌在水体中只有形成优势群落后，才能发挥最大的作用。宜春专利中心提供光合细菌发生剂。
（6）水体呈碱性时施用效果最好。酸性水体易使鱼类生病，应常用生石灰或烧碱调节pH值至中性或偏碱程度。
（7）光合细菌菌液不能用金属器皿贮存。
（8）培育鱼苗时，在苗种入池前7天全池泼洒，以利于浮游生物生长。
（9）植物萌发期，施用效果最好。
一．使用方法： 1.水体喷洒。适合改良水质，防治鱼病和培养优良藻类时使用。选择晴天上午或下午，将扩繁好的光合细菌菌液用池水稀释后，全池均匀泼洒，一般用量：苗种池：150ml/L每5―10天用一次。成鱼池：第一次5ml/L以后2ml/L，或第一次5―8公斤/亩，以后3―5公斤/亩，每10―20天用一次。施光合细菌的次数最好根据水质情况具体研究，水质好可每隔15天施一次，水质较差、较肥，应每隔7―10天施一次。由于光合细菌形态微细，比重小，若采用直接泼洒养殖水体的方法，其活菌不易沉降到池塘底部，无法起到良好的改善底环境效果。因此建议全池泼洒时，尽量将其与沸石粉合剂合用这样既能将活菌迅速沉降到底部，同时沸石也可起到吸附氨的效果，或拌土洒入鱼池。 2.饲料添加。内服拌饵作为饲料添加剂使用时，将扩繁好的光合细菌菌液喷洒干饲料中拌匀，如用投饵机投喂的可拌菌后散开吹晒一段时间再喂，当天拌当天喂完。 二、注意事项： 1.不可与消毒杀菌剂混合使用，使用前后一周内不得使用消毒剂，否则杀死光合细菌影响使用效果。 2.使用前，将菌液光照10小时以上，使用效果好，晴天水温20℃以上时使用；阴雨天勿用。 3.水体呈碱性时施用效果好。用生石灰或烧碱调节PH值至中性或偏碱程度。 4.应灵活掌握用量和使用的连续性，因光合细菌在水体中只有形成优势群落后，才能发挥作用。 5.光合细菌菌液不能用金属器皿贮存。 6.培育鱼苗时，在苗种入池前7天全池泼洒，以利于浮游生物生长；光合细菌菌液与粪肥配合使用，效果明显，增产增效特别显著。 7.若要同时施用不同的净水制剂，应该注意制剂之间的共容性。例如：硝化细菌和光合细菌并不适合同时放养在同一水池中，因为它们净化水质的过程互有抑制作用，可能会降低其净化效果。
常用抗生素 氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml） 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） 溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） 溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 链霉素（streptomycin）（50mg/ml） 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 四环素（tetracyyline）（10mg/ml） 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨10g 酵母提取物5g 氯化钠10g 如果需要用1N NaOH（～1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。(实验室一般都不调PH) SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨20g 酵母提取物5g 氯化钠0.5g 1 mol/L 氯化钾2.5ml
光合细菌（Photosynthetic bacteria，简称PSB）是具有原始光能合成体系的原核生物的总称，它广泛存在于自然界的水田、湖泊、江河、海洋、活性污泥及土壤内，是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。 第一节光合细菌的生物学和营养价值 一、光合细菌的生物学 光合细菌包括产氧光合细菌（蓝细菌）和不产氧光合细菌两大部分，在实际中应用的大部分是不产氧型光合细菌。不产氧光合细菌包括紫细菌、绿细菌和日光杆菌属、红色杆菌属等总共 27个属 66个种。不产氧光合细菌是代谢类型复杂、生理功能最为广泛的微生物类群。各种光合细菌获取能量和利用有机质的能力不同，它们的代谢途径随环境变化可以发生改变。光合细菌从营养类型看包括光能自养型、光能异养型及兼性营养类型；从呼吸类型看包括好氧、厌氧和兼性厌氧型。 光合细菌是革兰氏阴性菌，在10～45℃范围内均可生长繁殖，最佳温度在30～40℃。绝大多数光合细菌的最佳pH值范围在7～8.5之间。钠、钾、钙、钴、镁和铁等是光合细菌生理代谢中的必需元素。 二、光合细菌的营养价值 光合细菌的菌体无毒，营养丰富，蛋白质含量高达65%，而且氨基酸组成齐全，含有机体需要的8种必需氨基酸，各种氨基酸的比例也比较合理。PSB还含有丰富的B族维生素，尤其是B12、叶酸、生物素的含量相当高是啤酒酵母和小球藻的20到60多倍。PSB 菌体内含有较高浓度的类胡萝素，而且种类繁多，迄今已从光合细菌中分离出80种以上的类胡萝卜素。除此之外，细胞内还含有碳素储存物质糖原和聚β一羟基丁酸、辅酶Q、抗病毒物质和生长促进因子，具有很高的营养价值。 光合细菌在虾、贝类的幼体培育中应用非常广泛，其一方面能净化水质，改善幼体的环境条件，另一方面作为饵料被幼体摄食（贝类幼体相对虾幼体的蚤状阶段都能直接摄食光合细菌），对促进幼体生长、变态和提高成活率有明显效果。 第二节光合细菌的培养方法 一、培养方式 光合细菌的大量培养通常采用全封闭式厌气光照培养和开放式微气光照培养两种方式。 （一）全封闭式厌气光照培养 全封闭式厌气光照培养是采用无色透明的玻璃容器或塑料薄膜袋，消毒后装入消毒好的培养液，接入20％～50％的菌种母液，使整个容器均被液体充满，加盖（或扎紧接口）， 造成厌气的培养环境，置于有阳光的地方或用人工光源进行培养，定时搅动，在适宜的温度下，一般经过5～10天的培养，即可达到指数生长期高峰，此时可采收或进一步扩大培养。 （二）开放式微气光照培养 开放式微气光照培养一般采用容量为l00～200升的塑料桶为培养容器。在桶底部装一气石，培养时微充气、使桶内的光合细菌呈上下缓慢翻动。在桶的正上方距捅面30厘米左有装一有罩的白炽灯泡，使被面照度达2000 lx左右。培养前先把容器消毒，加入消毒好的培养液，接入20％～50％的菌种母液，照明，微充气培养。在适宜的温度下，一般经7～10天的培养，即可达到指数生长期高峰，此时，进行采收或近一步扩大培养。 两种培养方式相比，以厌气培养方式较为理想，微气培养方式虽然设备比较简单，易于大量培养，但杂菌污染程度大，培养达到的菌细胞密度低。 二、菌种分离、保藏 培养光合细菌首先要有菌种。目前，应用于水产养殖业的光合细菌，主要是红螺菌科即紫色非硫细菌中的一些种类。它们共同的特征是具鞭毛，能运动，不产生气泡，细胞内不积累硫磺。光合细菌分离成功的关键在于选择适宜的富集、分离培养基，和提供适于光合细菌生长需要的厌气环境及适宜的温度、光照条件。 （一）采样 红螺菌科细菌可用有机物作为光合作用的供氢体兼碳源，广泛分布在被有机物污染的地方，如河底、湖底、海底、水田、沟渠和污水塘的泥土以及豆制品厂、淀粉厂和食品工业 等废水排水沟处呈橙黄色或粉红色的泥土中。浅水处直接用杯舀取少量泥土作样品，深水处借用采水器和采泥器采样。 （二）富集培养 富集培养均采用液体培养基。将采回的样品(土壤或水)装入玻璃圆筒或大型试管或具塞的磨口玻璃瓶中，倒入配制好的培养液，充分搅拌。为造成厌气环境，在玻璃圆筒或大型
光合细菌培养基配方 光合细菌是兼性厌氧的，不同的光合细菌用的培养基不一样我现在就在做关于光合细菌的问题，这几中细菌都是常见的细菌，培养基在许多微生物上后面都有，光合细菌的富集培养基是： NH4Cl0.1g NaHCO3 0.1g KH2PO4 0.02g CH3COONa 0.1-0.5g MgSO4.7HO2 0.02g NaCl0.05-0.2g 三生长因子１ml 微量元素溶液１ml 蒸馏水９７ml ＰＨ７.０ 生长培养基加氮源（谷氨酸钠）和碳源（乙酸．丙酸．丁酸盐等）及可．其他菌的分离只要选择不同的培养基就可以选择分离啊 光合细菌富集纯化详见网易网盘 光合细菌培养基配方 氯化氨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化镁0.2克，氯化钠2克，酵母膏0.1克，水900毫升。 各成份溶解后15磅灭菌20分钟，然后无菌的加入过滤的碳酸氢钠5.0克/50毫升水；50毫升过滤的乙醇。用过滤的0.1N 磷酸调PH=7.0即可。 响应面设计法优化光合细菌培养基配方。培养基成分中醋酸钠和蛋白胨对于光合细菌的生长影响最为显著，最优培
养基配方为：醋酸钠1．145g／L、蛋白胨0．055g／L、碳酸氢钠0．6g／L、硫代硫酸钠0．4g／L、氯化钠0．3g／L、硫酸镁0．1g／L、磷酸二氢钾0．05g／L。在此条件下，光合细菌生长最为良好，经过5d培养以后，培养液OD600可以达到0．5以上 光合细菌(含生产工艺) 优良的光合细菌菌种的外观质量是啥样？ 一般优良的光合细菌菌种和产品的外观质量有以下几点： 1、外观上看比较均匀，基本无上下分层。相反，市场上有许多光合细菌是上下分层的，包括我中心初期的产品也是这样，上层比较清淡，下层则比较深厚，上层颜色浅，下层颜色深，最底层可能还会有一层黑黑的沉淀。 而优秀的光合细菌菌种和产品，上下都是比较均匀的，没有较明显的分层，颜色比较均匀，外观看起来也悦目。（当然，除了培养基溶解时，会与硬水中的重金属离子反应产生的絮装沉淀除外） 这种上下无分层，颜色均匀，不是靠加悬浮剂，或增稠剂而造成的，而是自然培养出来的，不加任何修饰而成的。少数地方，由于水质的原因，可能会产生稍稍的差别。 2、没有粘壁现象。很多市场上的产品都有粘壁现象，即在容器的壁上形成一层红紫色的颜色层，就象是油漆一
光合细菌的功能及其在动物 养殖中的应用 2003-09-25 摘要光合细菌是一类能进行光合作用 而不产氧的特殊生理类群原核生物的总称。它可 以利用光能，固氮合成有机物，也能通过多种方 式和途径转化不同类型的有机物和无机物质，而 且还具有独特的抗病、促生长以及提高畜禽生产 性能的作用，因而在畜禽以及水产动物养殖中具 有应用的潜力。 本文就光合细菌的功能及其在动物养殖中的应 用状况作一综述。 关键词光合细菌；生物学功能；畜禽；水产 养殖 中国分类号：S816．7 文献标识码： A 文 章编号：1004－－0084（2003）07－0006－03 光合细菌（Photosynthetic bacteria，简称PSB） 是具有原始光能合成体系的原核生物的总称，它 广泛存在于自然界的水田、湖泊、江河、海洋、 活性污泥及土壤内，是一类以光作为能源、能在 厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有 机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合 作用的微生物。 PSB包括产氧光合细菌（蓝细菌）和不产氧光合 细菌两大部分，在实际中应用的大部分是不产氧 型光合细菌。不产氧光合细菌包括紫细菌 （Purple gacteria）、绿细菌（Green bacteria） 和日光杆菌属（Heliobacterium）、红色杆菌属 （Erythrobacter）等总共 27个属 66个种，近
几年来陆续还有一些新种报道。 1 光会细菌的生理特性及其功能 1．1亚光合细菌的生理特性 PSB是革兰氏阴性菌，菌体有球形、椭圆型、半环型，也有杆状和螺旋状。有些菌种的细胞形态还会随培养条件和生长阶段的不同而发生变化。光合细菌在10－45℃范围内均可生长繁殖，最佳温度在30－40℃。绝大多数光合细菌的最佳pH 值范围在7－8．5之间。钠、钾、钙、钴、镁和铁等是光合细菌生理代谢中的必需元素。 不产氧光合细菌是代谢类型复杂、生理功能最为广泛的微生物类群。各种光合细菌获取能量和利用有机质的能力不同，它们的代谢途径随环境变化可以发生改变。光合细菌从营养类型看包括光能自养型。光能异养型及兼性营养类型；从呼吸类型看包括好氧。厌氧和兼性厌氧型。 1．2光合细菌的生物学功能 l．2．l营养功能 有研究表明，PSB的菌体无毒，营养丰富，蛋白质含量高达64．15％－66．0％，而且氨基酸组成齐全，含有机体需要的8种必需氨基酸，各种氨基酸的比例也比较合理。PSB还含有丰富的B 族维生素，其含量见表1。PSB菌体内含有较高浓度的类胡萝素且种类繁多。迄今已从光合细菌中分离出80种以上的类胡萝卜素，并不断有新的报道。除此之外，细胞内还含有碳素储存物质糖原和聚β一羟基丁酸、辅酶Q、抗病毒物质和生长促进因子，具有很高的饲料价值，在养殖业
光合细菌培养参数的研 究 YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
光合细菌PS3培养参数的研究 摘要:为有效提高光合细菌邢3在工厂化生产中的生物量,对其主要培养参数进行了系统的研究。所涉及的培养参数包括:光源、光照度、溶解氧、培养基pH、盐度、接种浓度等。结果表明:PS3在厌氧条件下生长较好,而其最适接种浓度、光照度、光源、pH及盐度分别为10%、4以刃h(钨丝灯)、一、5。 关键词:光合细菌;培养参数 ThestudyoncultivatingParametersofPhotosyntheticbacteria PS3 光合细菌(photosyntheticbacteria)广泛分布提供质优价廉的产品,本实验对光合细菌PS3培养 于淡水、海水、极地或温泉(包括高热水体)以的主要参数进行了较系统的观察和研究,现将实验 及高盐、高有机质含量等不同的生态环境中,是一情况总结如下。 类行不产氧光合作用、具有复杂代谢功能的微生 花”上石草.:二二或二议一二二几二”公二二万二1材料与方法物,它能利用多种基质,可营异养、自养或兼性营一’,‘,’‘’‘’一 养;存在着好氧、厌氧和兼性厌氧类型[l]。光合菌株 细菌在维持自然界的生态平衡、废污水的处理等方试验菌株PS3由中国水产科学研究院南海水产 面有着重要作用,同时光合细菌作为单细胞生物可研究所饲料与健康养殖开发中心富集、分离。 以从中获得较丰富的单细胞蛋白,其广泛应用于农实验方法 牧渔业尤其在水产养殖中的应用更为广泛〔,一3〕。为本实验所采用的培养条件是不同光源和光照 生产更好的优质菌液,促进工厂化生产,为养殖业度、溶解氧、培养基pH值、盐度、接种浓度。试 收稿日期: 资助项目: 作者简介: 通讯作者: 2以」6切刀3;修回日期:2〕拓刀8一17 广东省重大科技兴渔项目(B200201A01);国家“十五”科技攻关计划专题(2004BA526BO202) 洪敏娜(1980一),女,技术员,从事水产微生态制剂的研究与开发。E一mail:hmnIgso@163.。。m 杨莺莺南方水产第2卷 -今-荧光灯(1500lx)fiuorescent 一.一钨丝灯(600lx)tungsten -查-钨丝灯(1500lx)tUngsten -片-钨丝灯Q700lx)tungsten -喂卜-钨丝灯(4000lx)tungsten 叫.-自然光(50000~70000lx)naturallighting
光合细菌的分离、培养和鉴定 摘要：从南湾水库大坝下层水域取水样获得一株光合细菌。采用多种培养基分离方法分离出纯培养物。进行了菌落形态学观察和亚显微观察。于不同条件下培养后分别测定光密度和生长曲线。实验证实分离到的菌种为沼泽红假单胞菌。 关键词：生长曲线；沼泽红假单胞菌；光合细菌 The separation and culture and identified of photosynthetic bacteria Abstract:A strain sample of photosynthetic bacteria was got from the lower water in South Bay Reservoir. using a variety of separation methods to get pure cultures. It was cultured with various medium to culture the pure strains. Transmission election micrographs and microscope were observed of the strain. The optical density (OD) and the growth curve were measured under different conditions. The results suggested that the strain was Rhodopseudomonas palustris. Keywords:Colony and cell; Growth curve; Rhodopseudomonas palustris; Photosynthetic bacteria 引言 光合细菌由于碳、氮代谢途径和光合作用机制的独特性和其生理类群的多样性, 而被大量关注。多年来, 光合细菌一直被作为研究光合作用以及生物固氮作用机理的重要材料。经过研究发现光合细菌在环保、农业、医药等方面均有较高的应用价值。下面就光合细菌目前的开发应用研究近况作一概述。 光合细菌细胞营养价值极高。首先，光合细菌细胞干物质中蛋白质含量高达60%以上, 比目前生产的单细胞蛋白酵母中蛋白质的含量还高。而且其蛋白质氨基酸组成齐全, 是一种优质蛋白源。其次，光合细菌细胞含有多种维生素, 特别是B族维生素, VB12、叶酸、泛酸、生物素的含量远远高于酵母菌。另外, 光合细菌细胞还含有大量的类胡萝卜素、辅酶Q等活性物质。因此, 光合细菌具有很高的营养价值。在水产养殖中, 光合细菌可被用于饵料或饲料添加剂。光合细菌促进鱼虾的生长, 无论是成活率或是产量的提高均可达10%-40%以上。同时，光合细菌还具有防治鱼虾疾病,净化养殖场所水质等方面的功能。使用光合细菌喂养的家禽, 成活率可提高5%-7%, 料肉比降低33%左右，肉鸡增重15%-17%, 产蛋率提高12.7%。而且所产
填空题： 1.在所有卤虫品系的脂肪酸组成中几乎没有_DHA__，所以对卤虫必须进行营养强化。 2.微藻藻种保藏的基本条件是_低温和弱光__。 3.光合细菌培养基灭菌的方式有_常压蒸汽灭菌和过滤灭菌__和高压蒸汽灭菌。 4.“绿水育苗”是指在育苗过程中利用__微藻___的育苗方式。 5.微藻基因工程育种是引入__外源基因__在微藻内表达以改良微藻遗传品质的方法。 6._褶皱臂尾_轮虫在海水鱼虾蟹苗种培育过程中应用最为广泛。 7.在开放式培养螺旋藻时，施用__碳酸氢铵__可以杀死藻液中的轮虫和原生动物，还可以作为肥料。 名词解释： 1.营养强化:指针对生物饵料的营养缺陷，有意识地通过其摄食特定食物进行改善和补偿，达到营养平衡和满足鱼虾幼体发育的 需求。 2.诱变育种: 是指人为地利用物理的或化学的因素，诱发微藻产生遗传变异，通过对突变体的选择和鉴定，培育出有利用价值 的新品种或新的种质资源 3.单种培养: 指在培养过程中不排除细菌存在的一种培养方式 4.生物饵料:指经过筛选的优质饵料生物，进行人工培养后投喂给养殖对象食用的活的饵料。 5.指数生长期: 指微藻细胞迅速地生长繁殖，细胞数目以几何级数增加的时期. 判断题: 1、所有卤虫卵都是在低盐度下有较高的孵化率。 X 2、小新月菱形藻的最佳培养生态条件和应用途径与三角褐指藻相似。√ 3、角毛藻在低盐度下比高盐度下生长好。√ 4、褶皱臂尾轮虫对低氧含量甚至短时间缺氧的耐受力很强，因此，在高密度培养时，不需要充氧。X 5、微藻对二氧化碳的需要量大，但给微藻培养液过量通入二氧化碳，会对微藻产生毒害作用。√ 6、实验室小型培养微藻，海水的消毒通常采用有效氯消毒。X 7、不同光合细菌体内的颜色在固定的培养条件下具有特征性，因此，每个菌种的颜色不会随着培养条件的变化而发生变化。X 8、刚产出的卤虫休眠卵就具有较高的孵化率。X 9、目前培养的桡足类主要是隶属于猛水蚤目和哲水蚤目的种类。√ 10、轮虫的营养价值与所摄食的饵料有关。√ 选择题: 1、标准的血球计数板盖上盖玻片后，一个大格所在区域的体积是__C_____。 A: 1mm3B: 10mm3C: 0.1mm3D: 0.1mL 2、敌害生物对微藻培养的危害作用主要有_D___。 A:掠食 B:通过分泌有害物质对微藻起抑制和毒害作用 C:竞争营养盐 D: A+B 3、土池培养浮游动物饵料时，采用施放___C______肥料培育浮游植物较佳。 A:无机肥B:有机肥C:无机肥+有机肥D:粪肥 4、红螺菌科光合细菌的获能方式有__D__。 A:光合磷酸化B:氧化磷酸化 C:呼吸作用D: A+B+C 5、用藻类二次强化培养轮虫所需的时间一般至少要在_A___以上。 A:6-12小时B:24-36小时 C:36-48小时D:1-3小时 6、分布于咸水中的枝角类是__A__。 A:蒙古裸腹溞 B:大型溞 C:多刺裸腹溞 D:鸟喙尖头溞 7、在轮虫培养过程中，若以酵母为饵料进行培养，则适宜的轮虫接种量是_C___。 A:0.1个/ml～0.5个/ml B:1个/ml C:14个/ml～70个/ml D:200个/ ml 8、采用酒精对皮肤和器皿表面进行消毒时，常采用的浓度是___C______。 A: 40-45‰B: 60-65‰C: 70-75‰D:80-85‰ 9、在下列藻类中，最佳培养条件为高温、强光和强碱性的是__A__。 A:极大螺旋藻 B:湛江等鞭金藻 C:中肋骨条藻 D:小球藻 10、生产上螺旋藻的培养方式是_A___。
光合细菌的培养操作教程 1、配制光合细菌菌液： （1）配制比例： 光合细菌培养基、清水、菌种的配制比例为：0.5:80:20。 示例1：0.5公斤（500克）培养基+ 80升水+ 20升菌种（接种），配成100升的光合细菌菌液。 示例2（少量培养）：0.05公斤（50克）培养基+ 8升水+ 2升菌种（接种），配成10升的光合细菌菌液。 （2）配制方法： 下面以配制100升光合细菌菌液为例来说明配制方法： ①溶化培养基：取培养基0.5公斤（500克），用少量水溶化（可以用50℃左右的热水，溶化培养基的速度会快些），搅拌均匀，然后倒入一个容量在100升以上的容器中； ②配制培养液：往容器中加水到80升，80升培养液配制完成； ③接种：再加入20升菌种，并搅匀，100升菌液配制完成；
④装瓶（袋）：将配制好的菌液装入干净的透明容器（瓶、壶、塑料袋等），容器中留5%的空气在里面，密封待用。 菌液配制说明及注意事项： a. 以上各成分的数量是以配制100升菌液为例来说明配制方法的，如配制其他数量的光合细菌菌液，各成分数量按比例增减即可; b. 培养用水源的选择： 一般含杂菌较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水都可以，如井水、河水、自来水、蒸馏水和纯净水等，甚至干净的池塘水也行。 从经济、实用的角度考虑，地下水（如井水）含杂菌低，是最理想的培养水源； 清洁的地表水也可使用,如河水、池塘水等； 含氯量较高的自来水应敞口放置两天或调PH值至偏碱后使用； 蒸馏水及纯净水固然很好，但成本太高，可用于提纯菌种； c. 培养用容器的选择： 必须为透明容器并清洗干净，透明的容器可让光合细菌最大限度的吸收到充分的光线，少量培养如饮料瓶、食用油壶等，规模培养如透明塑料桶、透明塑料袋等。 d. 菌种的接种量： 一般接种量为20-50%，即培养液与菌种的比例为4:1（4升培养液加1升菌种）到1:1（1升培养液加1升菌种），接种量最低不能低于20%。 接种量越高，光合细菌菌种越容易形成优势菌群而抑制其他杂菌生长，培养速度快，且培养成熟的浓度更高。但产出效率也越低，光合细菌易老化。 接种量越低，培养产出效率越高，但如果低于20%的接种量，光合细菌不容易形成优势菌群，培养初期易染杂菌，培养的成功率低。 我们推荐的接种量为20%，如果用太阳光培养，推荐的接种量为25-40%。
光合细菌及其在农业中的应用 光合细菌（Photosynthetic Bacteria，略作PSB）是一大类能进行光合作用的原核生物的总称。除蓝细菌外，都能在厌氧光照条件下，进行不产氧的光合作用。 根据“伯杰氏细菌鉴定手册”（第9版），不产氧型的光合细菌可分成以下6类，27属：●着色菌科（Chromatiaceae）（又称红色硫细菌、紫硫细菌），含9个属； ●外硫红螺菌科（Ectothiorhodospiraceae），含1属； ●红色非硫细菌（Purple nonsulfur bacteria），即原红螺菌科（Rhodospirillaceae），含6属； ●绿硫细菌（Green sulfur bacteria）即原绿菌科（Chlorobiaceae），含5个属； ●多细胞绿丝菌（Multicellular filamentous green bacteria），即原绿丝菌科 （Chloroflexaceae），含4属； ●盐杆菌（Heliobacterium），含2个属。 由于光合细菌在物质转化循环中的重要作用，以及菌体含有的丰富营养，使这类古老的微生物成为近二、三十年来人们开发利用的一大热点。大量的研究成果表明，光合细菌在农业、水产、污染治理与资源化等方面，有着巨大的实用价值，应用前景十分广阔。以下就光合细菌的主要性状、在农业等领域的应用、方法、作用原理等，作一简要介绍。 一、光合细菌的主要特征 1．光合细菌的形态学特征 ⑴PSB培养物的颜色 PSB因含有光合色素（细菌叶绿素、类胡萝卜素）而呈现一定颜色。除少数例外，一般说来，红螺菌科和着色菌科的菌呈红、粉红、橙黄、紫色或茶褐色；绿菌科和绿色丝状菌科的菌呈绿色。 红螺菌科和着色菌科的的培养物之所以呈现有黄色到紫色的各种鲜艳的颜色，这是由类胡萝卜素高浓度蓄积并掩盖了细菌叶绿素的色调而形成的。少数类胡萝卜素含量少的菌，或缺乏类胡萝卜素的变异株，便会显示细菌叶绿素的蓝绿色。 每个菌种各有自己的颜色，但由于培养条件的不同，其颜色会发生变化。例如，球形红菌（Rhodobacter sphaeroides）和荚膜红菌（Rhodobacter capsulatus）的厌氧液体培养物呈茶褐色，半好氧培养物呈红色。这是由于氧的存在使细胞内类胡萝卜素组成发生变化的缘故。 ⑵PSB细胞形状与大小 PSB菌体形态极其多样，有球状、卵状、杆状、弧状、螺旋状、环状、半环状、丝状，以及链状、锯齿状、格子状、网篮状等等。不仅不同的菌种有多种多样的形态，就是同一种类也往往由于培养条件和生长阶段等不同而使细胞形态发生变化。尽管如此，许多菌种在细胞形态上仍然是各具特征的。如球形红菌（Rhodobacter sphaeroides）的细胞为球状；红微菌属（Rhodomicrobium）细菌的细胞丝相连；绿突菌属（Prosthecochloris）的细胞为具突起之球菌等等。 细胞的大小因种类不同而变化很大。如Rhodocyclus gelatinosus在0.4~0.5*1~2微米，Chromatium okenii的细胞则大得多，大体在4.5~6.0*3~10微米。一般说来，红螺菌科细胞的大小为0.6~0.7*1~10微米；着色菌科细胞大小为1~3*2~15微米；绿菌科细胞大小为 0.7~1*1~2微米。 ⑶光合作用器官 PSB的细胞内存在着载色体（chromatopheres）或绿菌泡囊（chlorobium vesicles），光合色素是它们的基本组成部分。它们是光合细菌吸收光能并转变成化能，即进行光合磷酸化作用的所在部位。 载色体由细胞膜陷入细胞质内而形成，与细胞膜成连续的状态。在红螺菌科和着色菌科
光合细菌的分离培养 光合细菌（Photosynthetic Bacteria，略作PSB）是一大类能进行光合作用的原核生物的总称。除蓝细菌外，都能在厌氧光照条件下进行不产氧的光合作用。研究与应用的实践表明，光合细菌在高浓度有机废水处理与资源化、水产养殖的水质调控与促进健康生长、在农业生产中作为高效活性菌肥等方面，发挥着十分有益的和令人瞩目的作用。关于光合细菌的类群、形态与生理特征、在生态系统中的地位和作用等内容，请参考有关文献与专著。这里仅就光合细菌的分离、培养方法作一介绍。 1光合细菌的富集培养的一般方法 ①分离源 光合细菌四个科-红螺菌科(Rhodospirillaceae)、着色菌科(Chromatiaceae)、绿菌科(Chlorobiaceae)、绿色丝状菌科(Chloroflexaceae)的各种菌，广泛分布于地球生物圈的各处。作为光合细菌的分离源，一般可从富营养化的湖泊、池沼、海滩、以及水田、硫黄泉、灌水土壤、和污水厂活性污泥、畜牧场水沟等厌氧或缺氧环境采样。在较深的水体，可使用采水器采取厌氧层的水。在较浅的地方，可直接用吸管吸取带底泥的水。采样的同时记录水温、pH、有无H2S气味等项内容。将采集到的水样或泥样放在厌氧、低温条件下，带回实验室进行分离。 ②光合细菌富集培养基 用于光合细菌富集培养用的培养基有许多配方，这里仅介绍日本星野氏推荐的基本培养基I和基本培养基II。前者适合于红螺菌科的光合细菌，后者适用于着色菌科和绿菌科的菌。 基本培养基I： KH2PO4 0.5g K2HPO4 0.6g (NH4)2SO4 1.0g MgSO4·7H2O 0.2g NaCl 0.2g CaCl2·2H2O 0.05g酵母浸出汁 0.1g微量元素溶液（见后）1mL 生长因子溶液（见后）1mL蒸馏水1000ml以上配制成的培养基pH值约6.7 根据需要，可在上述培养基中添加一些成分，如富集的是缺少同化型硫酸还原系的菌种，则可在基本培养基I中加入0.01%硫代硫酸钠；如是海洋
光合细菌PS3培养参数的研究 摘要:为有效提高光合细菌邢3在工厂化生产中的生物量,对其主要培养参数进行了系统的研究。所涉及的培养参数包括:光源、光照度、溶解氧、培养基pH、盐度、接种浓度等。结果表明:PS3在厌氧条件下生长较好,而其最适接种浓度、光照度、光源、pH及盐度分别为10%、4以刃h(钨丝灯)、6.5一7.0、5。 关键词:光合细菌;培养参数 ThestudyoncultivatingParametersofPhotosyntheticbacteria PS3 光合细菌(photosyntheticbacteria)广泛分布提供质优价廉的产品,本实验对光合细菌PS3培养 于淡水、海水、极地或温泉(包括高热水体)以的主要参数进行了较系统的观察和研究,现将实验 及高盐、高有机质含量等不同的生态环境中,是一情况总结如下。 类行不产氧光合作用、具有复杂代谢功能的微生 花”上石草.:二二或二议一二二几二”公二二万二1材料与方法物,它能利用多种基质,可营异养、自养或兼性营一’,‘,’‘’‘’一 养;存在着好氧、厌氧和兼性厌氧类型[l]。光合1.1菌株 细菌在维持自然界的生态平衡、废污水的处理等方试验菌株PS3由中国水产科学研究院南海水产 面有着重要作用,同时光合细菌作为单细胞生物可研究所饲料与健康养殖开发中心富集、分离。 以从中获得较丰富的单细胞蛋白,其广泛应用于农1.2实验方法 牧渔业尤其在水产养殖中的应用更为广泛〔,一3〕。为本实验所采用的培养条件是不同光源和光照 生产更好的优质菌液,促进工厂化生产,为养殖业度、溶解氧、培养基pH值、盐度、接种浓度。试 收稿日期: 资助项目: 作者简介: 通讯作者: 2以」6切刀3;修回日期:2〕拓刀8一17 广东省重大科技兴渔项目(B200201A01);国家“十五”科技攻关计划专题(2004BA526BO202) 洪敏娜(1980一),女,技术员,从事水产微生态制剂的研究与开发。E一mail:hmnIgso@163.。。m 杨莺莺,E~mail:”y402@https://www.doczj.com/doc/fa7644699.html,南方水产第2卷 -今-荧光灯(1500lx)fiuorescent 一.一钨丝灯(600lx)tungsten -查-钨丝灯(1500lx)tUngsten -片-钨丝灯Q700lx)tungsten -喂卜-钨丝灯(4000lx)tungsten 叫.-自然光(50000~70000lx)naturallighting
光合细菌的培养及应用技术 1 引言 光合细菌（photosynthetic bacteria,简称PSB）是一群能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用有机物作供氧体兼碳源，进行不放氧光合作用的细菌，广泛分布于水田、湖沼、江河、海洋、活性污泥和土壤中，依据《伯杰细菌鉴定手册》（第九版）可分为6 个类群，27 个属。不产氧光合作用的红螺菌目分为紫细菌（purple bacteria）、绿细菌（Greenbacteria）和日光杆菌属（Heliobacteria）、红色杆菌属（Erybrobacter）。其中紫细菌中包含有红螺菌科（Rhodolspirillaceae）、着色菌科（Chromatiaceae）、外硫红螺菌科（Eceothiorhodospiraceae），包含16属49种。其中在生产上有意义的红螺菌科包括红螺菌属、红假单胞菌属和红微菌属[1]。PSB 均为革兰氏阴性细菌，一般为球型、卵形、杆形、弧形、螺旋形、环形、半环形丝形，也可随培养条件和生长阶段而改变，大部分单个存在。PSB的一般菌体组成及营养成分见表1[2].表1 光合细菌菌体的组成与小球藻等比较Tab. 1 Components comparison betweenphotosynthetic bacteria and ChlorellaP S B 含有较高的优良蛋白质，粗蛋白含量为 65.45%，含有17 种氨基酸而且消化率较高；粗脂肪约7%；可溶性糖类约20%；粗纤维约3%[1]；维生素B12 含量是酵母的200 倍、小球藻的4 倍[2]，生物素含量也比较丰富；菌体的脂类成份含有大量的叶绿素、类胡萝卜素和辅酶Q(泛醌),迄今已从PSB中分离出80 种以上的类胡萝卜素。叶绿素和类胡萝卜素对养殖生物的健康生长，增强对疾病的抵抗力有很大的益处。辅酶Q4 是与生命活动有重大关系的生理活性物质，PSB 中的含量特高，是酵母的13 倍。以上特点决定了PSB 可做为畜禽、鱼虾的饲料。但PSB 中缺乏ω3 系列20 碳以上的高度不饱和脂肪酸，单独作为仔鱼的初期饵料时，需与其它富含高度不饱和脂肪酸的饵料同时使用。 2 光合细菌的培养 水产养殖市场对PSB 活体菌种的需求缺口很大，为了满足水产养殖对PSB 活体菌种的需求，PSB的生产方法有很多，但是到目前为止，还没有进行产业化生产PSB的报道。冯云等[3]用50L的塑料桶来厌氧培养PSB，使培养密度达到2.1 × 109 个/ml；杨绍斌[4]在塑料大棚内建大小2000～5000L 的水池使其厌氧发酵富集扩大培养，培养液中含PSB 活菌数可达5 × 106 个／毫升；鄂春宇[5]用塑料薄膜袋培养PSB，培养密度达到2.5～3×105个/ml,12个月生产50 多吨，但是在PSB的密度检测时，很容易染菌。由中科院开发的PSB 大规模生产工艺，产品含菌量达到5 × 1010个／毫升，保质期3 个月以上，并可根据客户要求，设计和建设不同规模的生产线[6]。 2.1 菌种 菌种可从采集的池塘底泥或海水中重复富集、分离纯化获得.若用保存下来的菌种，在培养前必须提纯复壮，才能有效地进行扩大培养。光合细菌的生产需要采用优良菌种，要求菌种活性高，菌液中菌体分布均匀、无下沉现象，目前养殖中使用的PSB多为红螺菌科和一部分着色菌科的复合菌株[7]。 2.2 培养基及培养条件 PSB 培养中除碳、氮、磷等主要营养元素外，还需要一定量的镁、钙、钠和有关的微量元素，将所需的营养元素按一定的比例配成适于菌体生长繁殖的培养基。本实验室采用酵母膏、蛋白胨培养基，基本配方为:CaCL2 0.3g，MgSO4·7H2O0.5g，酵母膏3g，蛋白胨3g，蒸馏水1000ml，pH: 6.8. 如需制固体培养基再加2%琼脂。培养温度：25℃～30℃最佳，光照强度：2000LX～5000LX，PH：7.5～8.5 最佳。
红螺菌培养基： 1、富集培养基： 经典的紫色非硫细菌（红螺菌）的富集培养基的配方为：NH4Cl：0.1g；NaHCO3：0.1g；K2HPO4：0.02g；CH3COONa：0.1~0.5g；MgSO4·7H2O：0.02g；NaCl：0.05～0.2g；生长因子1ml，蒸馏水97ml，微量元素溶液 1ml，pH为7.0。 其中，①5％NaHCO 3 水溶液，过滤除菌取2m1加入无菌培养基中。②生长因子：维生素B10.001mg、乙尼克丁酸0.1mg、对氨基苯甲酸0.1mg、生物素0.001mg，以上药品溶于蒸馏水中，定容至10ml，然后过滤除菌。③ 微量元素溶液：FeCl 3·6H 2 O ：5mg；CuS0 4 ·5H 2 O：0.05mg；H 3 BO 4 lmg； MnCl 2·4H 2 O：0.05mg；ZnSO 4 ·7H 2 O：1mg；Co(NO 3 ) 2 ·6H 2 O： 0.5mg。以上药 品分别溶于蒸馏水中，并定容至1000m1。 除①、②、③外，各成分溶解后100 Pa灭菌20min。然后分别加入①、 ②、③，如加入0.1％～0.3％的蛋白胨则能促进该菌生长。 2、分离培养基： 传统的红螺科分离培养基的配方为：NH 4Cl：0.1g； MgCl 2 ：0.02g；酵 母膏：0.01g； K 2HPO 4 ：0.05g； NaCl： 0.2g；琼脂2g，蒸馏水90ml。 100Pa灭菌20min。 灭菌后，无菌操作加入经过滤除菌的0.5g/5mlNaHCO 3 ，再无菌加入过 滤除菌的0.1g或0.1mlNa 2S·9H 2 O（降低培养基的氧化还原值），最后再加 入5ml经过滤除菌的乙醇、戊醇或4％丙氨酸。用过滤灭菌的0.1mol/H 3PO 3 调pH至7.0。 摘自百度知道。 筛选富集培养基为: NH4Cl 1g/L, NaHCO3 1g/L, CH3COONa 3g/L, KH2PO4 0.3g/L, MgSO4 0.1g/L, 酵母膏0.5g/L, 微量元素母液1g, 自然pH值。扩大培养培养基以海水代替微量元素母液。1000~4000lx光照, (30±2)℃恒温培养。 参考文献：固定化海洋光合细菌处理生活污水的研究* 黄宝兴,李兰生,赵亮,张微,唐迎迎海洋湖沼通报 基础培养基:NH4Cl:1g; Na2HPO4: 0.5g; MgSO4: 0.2g; NaCl: 2g; NaHCO3: 5g; 酵母膏:2g ; 乙醇2ml，用0.1N H3PO4调至pH7.0。 划线培养基:采用固体琼脂培养基，即在基础培养基的基础上添加1.0%的琼脂。 以上培养基初始pH值均用H3PO4调至7.0，经121℃灭菌30分钟，NaHCO3过滤除 菌后加入。培养条件:光照培养箱温度控制在30℃、光照强度控制在3000uE.m-2s-1培养。光合细菌是一种兼性嫌气细菌，需要深层培养或在真空干燥器内达到嫌气或半嫌气状态，一般将混合菌放入培养液中先富集再分离。具体方法:将混合菌装入10ml试管中，加入培养
光合细菌的优化培养和生长动力学 摘要:对光合细菌(PSB)培养的最适温度、光照、pH、溶解氧等条件进行了较系统的研究.通过正交试验,得出PSB生长的 最适条件为光照度3000 lx、微好氧、30℃、pH 7.0.在此基础上,建立了PSB在模拟味精废水条件下以乙酸钠为底物的生长 动力学模型,其参数为:饱和常数Ks=0.20-0.24 g·L-1,最大比生长速率Lmax=0.038-0.044 h-1,试验表明该模型能够较 好地描述PSB的生长情况. 关键词:光合细菌;正交试验;优化培养;动力学模型 Optimal cultivation and growth kinetics of photosynthetic bacteria Abstract: This paper gives a detail study on the optimal growth conditions of temperature, illumination, pH and dissolved oxygen for photosynthetic bacteria. With the orthogonal experiment, the optimal culture conditions for the growth of photosynthetic bacteria were determined: illumination intensity 3000 lx, faintly aerobic, 30℃, pH 7.0. Under the optimal cultivation and the simulated monosodium-glutmate wastewater conditions, a kinetics model on the growth of photosynthetic bacteria in the substrate of CH3COONa was set up. The parameters in the model are as follows: the saturation constantKs0. 20-0.24 g·L-1and the maximum specific growth rateLmax0.038-0.044 h-1. The experiment results showed that this model could describe the growth data of PSB very well. Key words: photosynthetic bacteria; orthogonal experiment; optimal cultivation; kinetics model 光合细菌(photosynthetic bacteria,简称PSB)是自然界中广泛存在,比较古老的细菌类群,是一大类能 进行光合作用的原核生物的总称[1].近年来,随着人们对PSB形态、结构、生理生化以及生态等特性研究 和认识的不断深入,发现PSB,特别是其中的红螺菌科能利用多种硫化物或有机物作为其光合作用的供氢 体和碳源,在厌氧光照、好氧光照、甚至好氧黑暗环境中都能很好地增殖,且能耐受很高盐度和浓度的有机 物,具有很强的分解、去除有机物的能力,显示其在高浓度、高盐度有机废水处理中的独特优势和广阔应用 前景,成为废水处理技术研究的一个新方向[2].同时,因其菌体富含蛋白质和胡萝卜素,可作为单细胞蛋白 应用于种植业、养畜业和渔业以及作为各种食用色素[3-5].PSB的上述特点,吸引着人们对其进行发掘、研 究和商品化生产.研究PSB的优化培养条件和生长动力学,对其规模化生产和资源化开发利用