农业生物技术学报Journal of Agricultural Biotechnology 2006,14(2):255~258
*基金项目：国家自然科学基金(No.39870421),国家烟草专卖局项目(No.G1*******)和浙江省重点科研项目(No.2003C22007)资助。
作者简介:朱惠琴女，1969年生，硕士。
**通讯作者。Author for correspondence.E-mail ：
·研究论文
·烟草染色体倍性快速鉴定方法*
朱惠琴1，2
,张宪银1,薛庆中1**
(1.浙江大学农业与生物技术学院，
杭州310029;2.青海大学农牧学院，西宁810003)摘要:对两个杂交组合(G28×NC2326和K326×Coker176)F 1烟草(
)花药培养诱导出763个不同倍性
植株。基于植株的花和种子结实率常规鉴定倍性水平比较，用气孔保卫细胞叶绿体数目预测植株倍性准确率达93.52%。表明采用气孔保卫细胞叶绿体计数法可以在苗期快速、准确地确定植株染色体倍性。同时,在移栽前间接地鉴定、筛选出叶绿体数<14的单倍体苗，作进一步秋水仙碱加倍处理，以减少对单倍体材料的浪费，加快DH 群体构建速度。
关键词:烟草；倍性；叶绿体；DH 群体中图分类号:S184
文献标识码:A
文章编号:1006-1304(2006)02-0255-04
Rapid Determination of Ploidy Level of Chromosome in Tobacco(
)
ZHU Hui-qin 1，2
,ZHANG Xian-yin 1,XUE Qing-zhong 1**
(
)
The ploidy level of 763anthers deirived from both crosses (G28×NC2326and K326×Coker176)of tobbaco ()were determined.The result of identification by counting the number of stoma chloroplast in guard cell was consistent with
those observations of flower and seed fertillity of the plants,with the average accurate rate of 93.52%,showing that measurement of the number of stoma chloroplast in guard cell could be considered as a fast and accurate method to determine haploid,diploid or poly-ploid of tobacco in the seedling stage.In order to reduce the waste of haploid plants and speed up establishment DH population,it was feasible to select out undoubted haploid plants with <14chloroplast number in stoma treated with colchicine when young plantlets just transplanted in the
field.
tobacco;ploidy level ;chloroplast;DH population.
从烟草花药培养诱导的植株几乎全部是单倍
体，通常需要对单倍体植株进行秋水仙碱处理，完成
染色体的人工加倍。但如果加倍频率不理想时，
通过对处理植株的染色体倍性早期快速鉴定，对尚未加
倍的单倍体材料，继续加倍，
是构建DH 群体十分重要的技术环节。传统的倍性鉴定是基于对根尖细胞染色体计数，但是，普通烟草染色体数多(2=48)、且小，经药物处理后中期的染色体长度也仅为2~4μm (Li,1991)，制作细胞染色体制片需要相当熟练的实践技能，并且这种方法过程烦琐、费工费时。虽然已有其它替代鉴定方法的报道(Chandler and Lyrene,1982;Powell .,1988;Sari .,1999)，但未曾作
过大规模的筛选，其实用性尚待验证。
本实验根据构建烟草DH 群体的需要，通过多种方法比较，重点探
讨气孔保卫细胞叶绿体数目鉴定法应用价值，成功地构建了2个DH 群体;完善了烟草染色体倍性早期快速鉴定的方法。
1材料和方法
1.1供试品种
在烟草(
)现蕾期采集G28×NC2326和K326×Coker176两组合F 1花蕾，取花药培养在H 培养基上(Bourgin and Nitisch ，1967)诱发单倍体试管苗，小植株用秋水仙碱添加二甲基亚砜(DMSO)进行加倍处理获得加倍单倍体植株，随后种植并观察加倍单倍体植株性状。
农业生物技术学报2006年
图1.烟草不同倍性植株的保卫细胞及其叶绿体
Fig.1.Stomata guard cells and their chloroplast at different ploidy levels in tobacco
A.单倍体;
B.二倍体;
C.多倍体.A.Haploid;B.Diploid;C.
Polyploid.
1.2倍性鉴定方法
对经过加倍处理的烟草，从第4片真叶完全出现开始，撕取样叶的下表皮于载玻片上并滴加10000mg/L 的碘-碘化钾(1∶3)染色，加盖玻片后，在40×的显微镜下计数保卫细胞内的叶绿体数；每叶片随机选取5个气孔，观察叶绿体数目并计算平均数。在开花期观察不同倍性材料的开花及其结实情况并验证叶绿体鉴定结果。
对各组合的单倍体、二倍体及多倍体材料按1、4、7、10和13叶位的完全展开叶片分别取样，制片观测气孔叶绿体保卫细胞数目。
2结果和分析
2.1保卫细胞叶绿体数与染色体倍性的相关性
不同组合和倍性间气孔叶绿体数目平均值及方差分析(表1)显示：气孔保卫细胞叶绿体数目随倍性增加而增加，不同倍性烟草植株气孔保卫细胞叶绿
体数目的平均值差异极显著(<0.01)，
而不同组合同一倍性间差异不显著(>0.05)。因此，烟草植株气孔保卫细胞叶绿体数目平均值可以作为染色体倍性水平的鉴定依据(图1)。
烟草植株为异源四倍体，其染色体数为2n=4x=48，单倍体的染色体数n=24；烟草加倍单倍体气孔保卫细胞叶绿体数平均为21.28，单倍体为11.02，多倍体为32.25(表1)，加倍单倍体和单倍体气孔保卫细胞叶绿体平均值之比为1.9∶1，通过χ2检验，符合二倍体和单倍体2∶1比例。
2.2利用保卫细胞叶绿体计数法鉴定倍染色体性
对763个花粉植株，显微镜统计第4叶气孔保卫细胞叶绿体数目，以预测染色体倍性结果(表2)。与常规花和育性差异鉴定倍性的方法比较，用气孔保卫细胞叶绿体数目鉴定植株倍性的准确率达93.52%。G28×NC2326和K326×Coker176组合的准
确率分别为95.45%和92.11%，说明该方法应用于烟草染色体鉴定非常有效。
表1烟草不同倍性植株气孔叶绿体数的比较Table 1Comparisons of stomata guard cells and their chloroplast at different ploidy levels in tobacco
不同字母表示平均值在5%或1%水平差异显著。Different letters show significant differences between mean values according to Duncan significance test at 5%or 1%level.
2.3不同叶位对保卫细胞叶绿体数的影响
对1、4、7、10和15叶不同叶位气孔保卫细胞叶
绿体的测定结果表明，除第1叶外，第4、7、10和15
叶气孔保卫细胞叶绿体数的平均数非常接近(表3)。
由此可见，
取第4叶或以上叶片进行鉴定，其结果稳定可靠；以4叶以下作鉴定材料，倍性单株间差异显著，鉴定误判率达45%左右；同时，4叶以下的组织太幼嫩难于制片观察。故本实验采用第4叶统计气孔保卫细胞叶绿体数目作鉴定，并据此构建DH 群体。
2.4不同倍性植株气孔叶绿体数的分布
对单倍体，二倍体和多倍体植株气孔保卫细胞叶绿体数分布χ2检验，分别近似符合N (11.01，2.98)，N (21.28，4.74)，N (32.25，4.94)的正态分布(图2)。其中，单倍体叶绿体数多分布在6~13，二倍体多分布在12~26，多倍体大多分布在21~38范围内。因
此，将叶绿体数12、26和32确定为区分单倍体、
二倍体、多倍体的染色体倍性指标(表4)。虽然少量植
倍性水平组合Crosses
平均值Ploidy levels G28×NC2326
K326×Coker176
Average 单倍体Haploid 12.69.4311.02aA 二倍体Diploid 20.9621.621.28bB 多倍体Polyploid
32.34
32.15
32.25cC
256
第2期朱惠琴等：烟草染色体倍性快速鉴定方法
组合Crosses 表2用保卫细胞叶绿体计数鉴定倍性水平的准确率
Table 2Accuracy of determination ploidy levels by the count of chloroplast number of stomata guard cells in tobacco
表3烟草不同倍性植株不同叶位气孔保卫细胞叶绿体数
Table 3Stomata guard cell chloroplast number of leaf position at different ploidy levels in tobacco
表4烟草不同倍性植株气孔叶绿体数分布频率
Table 4Destribution frequencies of stomata chloroplast number at different ploidy levels in tobacco
叶绿体计数鉴定
花和育性鉴定
By conting chloroplast
By observing flower and fertility
单倍体二倍体多倍体单倍体二倍体多倍体Haploid Diploid Polyploid Haploid Diploid Polyploid G28×NC2326428206154581991475495.45K326×Coker17633524338272323512492.11Total
763
449
192
85
431
182
78
93.78准确率/%Accuracy
叶位保卫细胞数平均值变幅变异系数/%
Leaf positions No.of guard cells
Average
Ranges
CV
单倍体Haploid
113347.894~1430.53484011.024~1617.32775011.564~1817.651073511.884~1817.3215724
12.01
6~19
18.00
二倍体Diploid
144018.9212~2728.46470221.2814~288.09712521.9612~268.781020521.8316~268.9615100
22.33
16~26
8.96
多倍体Polyploid
15628.3222~3626.6544532.2526~4211.5575032.7526~3811.34103233.0227~4311.9615
35
33.95
27~46
11.01
株各倍性间叶绿体数出现一定程度的重叠(图2)，但
只要计数足够多，其准确率相当高。
本实验中每单株平均计数80个气孔。
倍性水平叶绿体数Chloroplast number
Ploidy levels <1212~1314~1516~1718~2021~2526~29>30单倍体Haploid 68.9627.94 3.100000二倍体Diploid 0 2.12 5.6715.655.9517.63 3.030多倍体Polyploid
4.79
12
83.21
3讨论
有关染色体倍性鉴定通常有直接和间接鉴定两
类方法。采用根尖压片法对染色体直接计数，是最精
确和应用最早的方法(Li,1991)，但这种方法要求具
有相当熟练的实验技能及一定的实验室设备。某些作物的染色体数目多或本身很小给直接计数带来困难，通过形态学性状作间接鉴定则所需时间较长。目
株数Plant No.257
农业生物技术学报2006年
前借助流式细胞分析仪(Flow Cytometry)识别染色
体倍性，只需提取少量DNA ，在苗期即可鉴定(De Laat .,1987)，但由于需要昂贵的仪器设备且较高费用，其应用的范围受到很大限制。而测量气孔大小和保卫细胞叶绿体数目则简单、省力(Chandler and Lyrene ，1982)，但以气孔长度进行倍性分类的误
判率高(Ho .,1990)。在不同倍性植株间，
气孔大小特别是气孔长度的差异小于气孔保卫细胞叶绿体
数，以保卫细胞叶绿体数为基础的倍性鉴定，
也是一种快速、简便的鉴定方法(刘仁祥和黄莺,1998)，但有重叠情况的发生(Powell .,1988)，故其实用性尚待进行验证。本研究较系统比较了单倍体，二倍体
及多倍体植株气孔保卫细胞叶绿体数及其变异，
通过大规模的验证表明，利用气孔保卫细胞叶绿体计数法间接鉴定，结果和田间结实情况的吻合率在93%以上；我们确认气孔保卫细胞叶绿体计数是判定烟草倍性水平的一种有效方法，处理一份材料仅需1~2min ，而且对于未加倍成功的材料，可及早采取补救措施提高对材料的利用率，能够满足鉴定大量处理材料，筛选足够数量的加倍单倍体来构建
DH 群体。作者还提出在移栽前，
将叶绿体数<14的单倍体苗筛选出，继续加倍处理，
以减少对单倍体材料的浪费，加快DH 群体构建速度。
参考文献
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图2.烟草不同倍性植株气孔叶绿体数分布
Fig.2.Distribution of stomata chloroplast number at different
ploidy level plants in tobacco
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（烟草行业）中级烟草行业职业技能鉴定题库模拟试 卷一(年最新)
烟草行业职业技能鉴定题库试卷 中级烟草专卖管理员技能模拟试卷 1．考试时间：150分钟。 2.请首先按要求在试卷的标封处填写您的姓名、考号和所在单位的名称。 3.请仔细阅读各种题目的案例，在规定的位置填写您的答案。 4.不要在试卷上乱写乱画，不要在标封区填写无关内容。 5．书面完成，计算题可使用计算工具，满分100分。 第壹部分第二部分第三部分第四部分第五部分总分总分人 得分 得分 评分人 壹.证件管理(满分20分) （壹）（10分）小丁是某市烟草专卖局工作人员，主要负责烟草专卖品准运证的审查、制证。壹日，小丁收到了壹份烟草专卖品准运证申办申请，经初步审查后，小丁认为申办人提供的资料已经齐全，而且该准运证也属于其所在烟草专卖局签发。因此，小丁根据授权在“烟草专卖品准运证计算机网络管理系统”首页进入“卷烟准运证”模块后，准备通过系统开具准运证。 问题： 1、按规定，烟草专卖行政主管部门签发烟草专卖品准运证应该经过那三个步骤？ 答：烟草专卖行政主管部门签发烟草专卖品准运证应该经过以下三个步骤： （1）对申办人提交的相关材料进行审核；
（2）符合办理烟草专卖品准运证条件的，经主管领导批准后，由专人负责办理； （3）不符合办理烟草专卖品准运证条件的，不予签发，应当通知申办人，且说明理由。2、按规定，准运证签发的时间几天？遇计算机故障、不可抗力等特殊情况，经办人应该如何处理？ 答：对符合办理烟草专卖品准运证条件的，烟草专卖行政主管部门应当在收到全部申请材料之日起1个工作日内办理，且将烟草专卖品准运证交付申办人。 3、如果该准运证申请审批后，发现因打印等错误需要作废，如果是申办单位作废，小丁应该告诉申办单位如何处理？如果是审批机关错误需要作废，小丁应该如何处理？ 答：如遇计算机故障、不可抗力等特殊情况，经主管办理烟草专卖品准运证的负责人批准后，能够自收到办理申请之日起3个工作日内办理完毕，且将烟草专卖品准运证交付申办人。（二）(10分) 小丁是A地壹烟草工业X公司市场部员工，壹次领导安排其从外省B市某烟草企业带回壹批滤嘴棒。但由于小丁是刚从卷烟生产点调进市场部的，以前从没有办理过滤嘴棒的运输证明。在出发前，小丁上网查了壹下申办准运证所需要的材料，且在单位内开了壹张介绍信。但由于是第壹次申办，在小丁只带了介绍信就到B市烟草专卖局去了。当时是小陈作的接待。问题：（1）如果你是小陈，你应该告诉小丁，下次来时应带齐哪些资料？ 答：应当告知小丁带齐以下材料：（1）申请人的委托书和申办人身份证明；（2）合法有效的购销合同（调拨单）、电子交易合同或拍卖成交确认书；（3）烟草专卖品准运证申办单。（2）如果你是小陈，如果下次小丁再来时，在签发准运证前，应当对小丁的申请审查哪些内容？ 答：应当对小丁的申请审查以下内容：（1）申办材料是否真实。申办人提出申请，必须有真实、准确的意思表示，不能含糊其辞，使烟草专卖品准运证的签发机关难以判断。（2）申办
附件 胎儿染色体非整倍体（ T21、 T18、 T13） 检测试剂盒（高通量测序法）注册技术审查指 导原则 本指导原则旨在指导注册申请人对胎儿染色体非整倍体 （T21、T18 、T13）检测试剂盒（高通量测序法）注册申报资料 的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审 评提供参考。 本指导原则是针对该类试剂的一般要求，申请人应依据产品的 具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相 应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行 充实和细化。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注 册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满 足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要详细阐明理由， 并对其科学合理性进行验证，提供详细的研究资料和验证资料，相 关人员应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下 制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展， —1——
本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、范围 胎儿染色体非整倍体（Fetal Chromosome Aneuploidies ）中 的21 三体、 18 三体、 13 三体（ Trisomies 21、 Trisomies 18、Trisomies13 ，即 T21 、T18、T13）是临床上最常见的染色体非整 倍体疾病。其对应的分别为 21-三体综合征（又称唐氏综合征，先天愚型 或 Down 综合征）、18-三体综合征（又称 Edwards 综合征）和 13-三体 综合征（又称 Patau 综合征），发病率分别约为 1/700、1/6000、1/10000，患儿绝大多数存在严重智力障碍及器官畸形。 产前筛查和产前诊断是为避免产生遗传缺陷患儿提供的手 段。常规的产前筛查方法包括：早孕期的超声与血清学联合筛查和中 孕期母体血清学筛查。筛查结果为高风险的孕妇经建议经产前诊断进 行最终确认，由孕妇知情选择。胎儿染色体异常的产前诊断金标准 为介入前产前诊断手术 ,是指通过绒毛取材术 /羊膜腔穿刺术 /经皮脐 血管穿刺术，取相应细胞采用细胞生物学方法对 胎儿染色体进行核型分析。 高通量测序方法检测胎儿染色体非整倍体的原理是：孕妇母体 血浆中存在胎儿游离DNA （cell-free DNA ，cfDNA ），长度约为 75bp— 250bp，几乎全部来源于胎盘的滋养层细胞，其浓度和 孕周密切相关并以一定比例（ 5%— 30%）稳定存在于母体外周血 浆中。高通量测序方法通过取母体血浆提取包含正常母体和胎 —2——
证件-许可证 一、办理许可证变更需要提交什么材料（3种）？ ○1申请表○2个体工商户经营者、法定代表人或企业负责人的身份证明○3与变更事项相关的证明材料 二、办理变更审批机关审查的方式有（1点）？审查的内容（3点）？ 审查方式：书面审查 审查内容：○1材料的合法性、规范性、完整性○2申请变更事项是否在已取得的行政许可内容范围内○3受理机关认为需要实地核查的由本机关指派两名以上专卖管理人员进行实地核查 三、办理许可证延续需要提交什么材料？（2种） ○1申请表○2个体工商户经营者、法定代表人或企业负责人的身份证明 四、办理延续审批机关审查的方式有（3种）？审查的内容（3种）？ 审查方式：○1书面审查○2实地核查○3守法情况调查 审查内容：○1书面审查材料的合法性、规范性、完整性○2理机关认为需要实地核查的，实地核查现有经营条件能力是否符合烟草专卖零售许可的法定条件○3守法情况调查主要调查被许可人有效期内的守法情况，重点调查有无严重违法行为。 五、停业和歇业的区别是停业是暂停经营，歇业是不再经营，办理许可证停业、歇业、恢复、补办需要提交什么材料？（2种，同延续） ○1申请表○2个体工商户经营者、法定代表人或企业负责人的身份证明 六、撤回是指该许可证是完全合法的，但因（法律法规修改废止或办理该零售许可证的客观情况发生重大变化，将对公共利益造成不良影响），如经营场所周围开设中小学等情形，可以撤回许可证，撤回的程序？（6点） ○1原许可证审批机关将拟撤回的事项和理由告知被许可人 ○2由原许可证审批机关具体承办部门填写《烟草专卖零售许可证依职权办理审批表》报审批机关负责人批准 ○3在决定前，书面告知持证人享有陈述权、申辩权，当事人提出陈述申辩的，应充分听取并做解释说明 ○4原许可证审批机关依法作出决定 ○5制作并向被许可人送达《撤回烟草专卖零售许可证决定书》办理注销手续 ○6因撤回给被许可人造成财产损失的依法予以补偿。（作出相关决定之日起20日内，通过公告栏、烟草专卖许可证信息系统等方式向社会公告） 七、申请人在办证时隐瞒有关情况或者提供虚假材料的，怎么办？ 不予受理或不予发证。申请人在一年内不得再次提出烟草专卖行政许可申请 八、如果隐瞒材料申请后，取得了许可证，怎么办？办理程序是？ 应由原许可证审批机关或其上级机关依法撤销该许可证。三年内不得再次申请办证。 程序：○1原许可证审批机关或其上级机关对拟撤销的烟草专卖零售许可事项违法情况进行调查核实○2由原许可证审批机关或其上级机关具体承办部门填写《烟草专卖零售许可证依职权办理审批表》报审批机关负责人批准○3在决定前，书面告知持证人享有陈述权、申辩权，当事人提出陈述申辩的，应充分听取并做解释说明○4原许可证审批机关或其上级机关依法作出撤销该零售许可的决定○5制作并向被许可人送达《撤销烟草专卖零售许可证决定书》办理注销手续，收回许可证，无法收回予以公告○6如因审批机关的过错引起撤销烟草专卖零售许可，给被许可人的合法权益带来损害依法需要赔偿的，原许可证审批机关依法予以补偿。（作出相关决定之日起20日内，通过公告栏、烟草专卖许可证信息系统等方式向社会公告）九、撤销的条件有？（理解即可）
烟草行业岗位技能鉴定 四级烟草专卖管理师理论知识试卷 注意事项 1、考试时间：90分钟。 2、请首先按要求在答题卡上填写您的基本信息，科目编号：201。 3、请仔细阅读各类试题的答题要求，在答题卡规定的位置填涂您的答案。 4、不要在试卷上乱写乱画。 5、本卷满分100分。 一、单项选择题（第1题～第60题。每题选择一个正确的答案，请在答题卡上把相应题号下答案字母涂 黑。每题1分，满分60分。） 1．在烟草制品运输过程中，应随货同行有()。 A、准运证和购销合同原件 B、发票 C、准运证复印件 D、购销合同复印件 2．关键信息分析的基本原则不包括()。 A、准确性原则 B、完整性原则 C、主观性原则 D、协调性原则 3．在行文关系上，不同系统的机关、部门之间的关系为()。 A、上下级关系 B、隶属关系 C、平级关系 D、不相隶属关系 4．名晾晒烟的名录由()规定。 A、国务院烟草专卖行政主管部门 B、省级烟草专卖行政主管部门 C、县级烟草专卖行政主管部门 D、国务院计划部门 5．下列不属于零售许可档案应当包含的内容的是()。 A、行政许可卷宗封面和卷内文书目录 B、零售许可相对人应当提交的所有申请材料 C、与行政许可相关的内部审批文书 D、零售户经营过程中违法经营被处罚的处罚决定文书 6．不正当竞争行为，是指经营者违反法律规定，损害其他经营者的合法权益，扰乱()的行为。 A、市场秩序 B、社会经济秩序 C、社会经营秩序 D、社会生产秩序 7．自然人犯罪主体可以分为一般主体与特殊主体，特殊主体较一般主体的特殊性在于()。 A、达到刑事责任年龄 B、具备刑事责任能力 C、具有特定身份 D、实施危害社会的行为并且依法应当承担刑事责任8．国家烟草专卖局和中国烟草总公司于1985年成立了()，这是中国唯一具有烟草进出口经营权的工贸总公司。 A、中国烟草国际有限公司 B、中国烟草进出口公司 C、国家烟草专卖局 D、中国烟草总公司 9．烟草专卖行政主管部门发现查获的案件不仅有违反烟草专卖法律法规的行为，还有违反工商行政法规的违法行为，烟草专卖行政主管部门需要将案件()工商行政执法机关。 A、内部移送、全案移送 B、内部移送、部分移送 C、外部移送、全案移送 D、外部移送、部分移送 10．按照《烟草零售业态分类标准》，下列选项中不属于烟草零售便利店业态特点的是()。 A、采取自选销售方式，结算在收银处统一进行 B、服务时间16小时以下
染色体异常基因检测 染色体 染色体是组成细胞核的基本物质，是基因的载体。人类体细胞有23对染色体，其中22对为男女所共有，称为常染色体；另外一对为决定性别的染色体，男女不同，称为性染色体；男性为XY，女性为XX。 染色体异常 体细胞或性细胞内染色体发生异常改变称为染色体异常，可分为数目异常和结构异常两大类。染色体异常可以自发地产生，称为自发突变；也可以通过物理的、化学的和生物的诱变作用而产生；还可以由亲代遗传所致。 染色体异常是导致出生缺陷、先天性遗传病、自然流产、不孕不育等的重要遗传因素。新生儿染色体异常的发病率为1/60。 常见的染色体微缺失/微重复综合征有300种，多会导致不同程度的发育异常和智力障碍，常伴有五官、内脏、四肢等方面的畸形，严重危害患者健康，给家庭和社会带来极大负担。 染色体异常基因检测 核子基因基于新一代高通量测序仪开发的染色体异常检测方法，可对流产组织、脐带血、绒毛、羊水、外周血等多种来源的样本进行测序分析，一次性检测23对染色体非整倍体、300种常见微缺失/微重复综合征及其他100kb以上的染色体异常，全面排查流产、胎儿异常、新生儿/儿童表型异常、不孕不育原因。 临床应用： 1、流产组织染色体异常检测：查明反复流产、异常妊娠的原因，指导再次生育。 2、胎儿染色体异常检测：排查胎儿异常的原因。 3、新生儿/儿童染色体异常检测：为发育异常、智力障碍，多发畸形等患儿排查染色体异常因素，为疾病确诊和治疗提供指导信息。 4、成人染色体异常检测：排查不孕不育、不良孕产史的遗传因素。 ????
技术优势： 1、全面覆盖：一次性检出23对染色体非整倍体和300种常见染色体微缺失/微重复综合征。 2、分辨率高：可检出100kb以上的染色体微缺失/微重复和低至5%的嵌合体。 3、准确度高：检测准确率>99% 4、自动解读：对检测到的微缺失/微重复，自动关联国际主流染色体异常数据库（Decipher、ISCA、OMIM、Clinvar）进行解读。 检测适用人群： 1、反复性流产，需要查明流产原因并确认再次生育方案的家庭。 2、超声显示结构异常或宫内发育迟缓的胎儿及父母。 3、临床表型为发育异常、智力障碍、多发畸形等患儿及父母。 4、具有染色体疾病家族史的夫妇及胎儿。 5、曾生育染色体疾病患儿的夫妇。 6、不孕不育或有不良孕产史的夫妇。 ????
初级专卖技能鉴定考试资料 王某为A县烟草专卖局辖区内持证零售户,经营地址为A县壮志路20号,其烟草许可证有效期限为2004年6月30日—2008年6月30日。王某经营期内一直 遵守法规,2007年4月王某因故不愿继续从事烟草零售业务,将其经营的副食店 连同其许可证一并转让给李某,由李某经营。回答下列问题: 1、请选择正确答案: (1)王某因故不愿继续经营,应向A县专卖局提出:( A ) A歇业申请、B停业申请、C注销申请、D不必提出任何申请 （2）李某欲从事卷烟零售业务应提出：（ C ） A停业申请、B歇业申请、C新办申请、D不必提出任何申请 2、李某从事烟草零售业务应向A县专卖局提供哪些申请材料？ 答：李某从事烟草零售业务应向A县专卖局提供如下申请材料烟草专卖零售许可：1烟草专卖许可整新办申请表2个体工商户、法人代表或企业的身份证明3房屋权属证明或房屋租赁协议4审批机关的规定需要提供的其他材料 3、A县烟草专卖局在审查李某的申请时，如果对审批结果有重大利益关系的零 售户张某提出听证的，A县专卖局应当如何处理？听证规则有哪些？ 答：如果对审批结果有重大利益关系的零售户张某提出听证的，A县专卖局应当做如下处理：烟草专卖行政主管部门审查许可申请时，利害关系人认为审批结 果涉及其重大利益关系，可以提交烟草专卖许可证听证申请书，烟草专卖行政 主管部门认为有听证必要的，应当出具烟草专卖许可证听证通知书并组织听证。 3.听证规则 听证应当按照下列程序进行： （1）烟草专卖行政主管部门应当于举行听证的7日前通知申请人和已知的利害关系人举行听证的时间、地点，必要时予以公告。 （2）听证应当公开举行。 （3）为确保听证的公正性，听证制度一般实行职能分离原则、回避制度。 （4）听证应当进行质证和申辩。 （5）听证应当制作笔录。 4、2008年5月王某在许可证有效期渐满30日前，到A县专卖局申请延续，当A 县烟草专卖局查实李某使用王某的许可证，A县专卖局是否应当延续？为什么？答：不予延续。根据《烟草专卖许可证管理办法》极相关法规规定，零售许可 证持证人姓名更改（主体变化）、零售许可证核定的经营地址地名更改（经营
烟草行业岗位技能鉴定 注意事项 2. 请首先按要求在试卷的标封处填写您的姓名、考号和所在单位的名称。 3. 请仔细阅读题目，在规定的位置填写您的答案。 4. 不要在试卷上乱写乱画，不要在标封区填写无关内容。 5. 书面完成，满分100分。 2. 判断题（正确的填"，错误的填X,每题 2分，共6分） （1） 烟草专卖零售许可证的许可范围包括卷烟零售、 雪茄烟零售、罚没烟草专卖品零售。（） （2） 宜安县烟草专卖局对相对人提出的申请，应当自依法作出行政许可决定之日起 30日内通 过公告栏、烟草专卖许可证信息系统等方式，将许可有关内容予以公告。 （） （3） 持证经营户不得买卖、出租、出借烟草专卖许可证，但是可以和店铺一同转让给其他经营 户。（） 称 名 位 单 五级烟草专卖管理师岗位技能鉴定试卷 1.考试时间：120分钟。 第一部分 第二部分 第三部分 总分 总分人 得 分 得分 评分人 复核人 号 证 考 准 第一题：许可证办理（15分） 李某在甲省A 市宜安县经营一家烟酒副食商店，持有宜安县烟草专卖局发放的烟草专卖零 售许可证，许可证核定的经营地址是和平路 25号。2015年3月，李某将烟酒副食商店迁到开 放路25号并向宜安县局提出了相关申请，宜安县局经审查后予以审批同意。 2015年6月，宜 安县局进行许可证检查时发现，李某自行对许可证的有效期进行了涂改。 请根据材料回答下列问题： 1.单项选择题（请选择正确的答案， 将相应字母填入括号内, 共6分） （1） 针对经营地址的改变，李某应向宜安县烟草专卖局提出 A 、新办 B 、变更 C 、延续 （2） 宜安县烟草专卖局对李某的申请作出准予许可决定之日起, 售许可证送达给李某。 A 、10 B 、20 C 出现错误选项不得分， 每题2分, （） 申请。 D 、停业 应在（） 日内将烟草专卖零 、30 D （3 ）李某涂改许可证有效期的行为，违反了烟草专卖零售许可证使用 （） 的要求。 A 、亮证经营 、服从后续监管 C 、不得涂改、伪造、变造烟草专卖零售许可证 D 、不得转让烟草专卖零售许可证
附件 胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测试剂盒（高通量测序法）注册技术 审查指导原则 本指导原则旨在指导注册申请人对胎儿染色体非整倍体 （T21、T18、T13）检测试剂盒（高通量测序法）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。 本指导原则是针对该类试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要详细阐明理由，并对其科学合理性进行验证，提供详细的研究资料和验证资料，相关人员应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下 制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展， —1—
本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、范围 胎儿染色体非整倍体（Fetal Chromosome Aneuploidies）中的21三体、18三体、13三体（Trisomies 21、Trisomies 18、Trisomies13，即T21、T18、T13）是临床上最常见的染色体非整倍体疾病。其对应的分别为21-三体综合征（又称唐氏综合征，先天愚型或Down综合征）、18-三体综合征（又称Edwards综合征）和13-三体综合征（又称Patau综合征），发病率分别约为1/700、1/6000、1/10000，患儿绝大多数存在严重智力障碍及器官畸形。 产前筛查和产前诊断是为避免产生遗传缺陷患儿提供的手段。常规的产前筛查方法包括：早孕期的超声与血清学联合筛查和中孕期母体血清学筛查。筛查结果为高风险的孕妇经建议经产前诊断进行最终确认，由孕妇知情选择。胎儿染色体异常的产前诊断金标准为介入前产前诊断手术,是指通过绒毛取材术/羊膜腔穿刺术/经皮脐血管穿刺术，取相应细胞采用细胞生物学方法对胎儿染色体进行核型分析。 高通量测序方法检测胎儿染色体非整倍体的原理是：孕妇母体血浆中存在胎儿游离DNA（cell-free DNA，cfDNA），长度约为75bp—250bp，几乎全部来源于胎盘的滋养层细胞，其浓度和孕周密切相关并以一定比例（5%—30%）稳定存在于母体外周血浆中。高通量测序方法通过取母体血浆提取包含正常母体和胎 —2—
初级烟草专卖管理员岗位技能鉴定试卷 一.证件管理（满分30分） 第一题：许可证办理（15分） 位于甲省A市B县的红旗卷烟厂，专门从事卷烟、雪茄烟的生产业务，并按照法定程序领取了烟草专卖生产企业许可证。 请根据试题的提示，回答下列问题。 1．请选择正确的答案，将相应字母填入题内的括号中，出现错误选项不得分。（每题2分，共8分）（1）红旗卷烟厂申请烟草专卖生产企业许可证应向（）提出许可申请。 A、A市烟草专卖局 B、国家烟草专卖局 C、甲省烟草专卖局 D、B县烟草专卖局（2）红旗卷烟厂于2014年10月12日向相关部门提出了烟草专卖生产企业许可证新办申请，受理机关审查后发现该申请属于本机关管辖范围内，且申请材料齐全、符合法定形式，应当做出（）的决定。 A、不受理 B、当场受理 C、准予许可 D、不予受理 （3）受理机关审查后，应当将申请材料和审查意见（）日内报送审批机关。 A、30 B、20 C、8 D、5 （4）烟草专卖生产企业许可证上所登记的事项不包括（）。 A、企业名称 B、企业类型 C、企业住所D供货单位 2.判断题（将判断结果填入括号中，正确的填“√”，错误的填“×”。每题2分，共4分。） （1）行政机关实施行政许可的期限以工作日计算，但包括法定节假日。（） （2）行政许可依法需要听证、检验、检测和专家评审的，所需时间不计算在规定期限内。（） 3．对于红旗卷烟厂提交的申办烟草专卖生产企业许可证的申请，审批机关如果不能在规定期限内做出许可决定的，应该怎么做？（3分） 第二题：准运证办理（15分） 2014年12月，甲省A市烟草专卖局与公安机关联合行动，查获一辆装运国产卷烟的大货车。随车人员李某向执法人员提供了该批卷烟的准运证复印件及卷烟电子交易合同原件。李某交代：该批卷烟是由乙省B市烟草公司调运至甲省C市烟草公司的，按法定程序申办了烟草专卖品准运证，准运证有效期限填写为15天。由于该批卷烟数量较大，李某安排了两部车装运，该批卷烟准运证原件放在另一辆车上。执法人员对电子交易合同进行查验，发现电子交易合同有以下特征：大小为21.7cm*29cm，白底黄字，右上侧印有“随货同行”字样，合同右上角识别号与印刷号一致，合同鉴章包含电子合同章和“会员代表（确认经办人）数字签名，但数字签名有重复。 请根据试题的提示，回答下列问题。 1、请选择正确的答案，将相应字母填入题内的括号内中，出现错误选项不得分。（2分） 下列哪项说法是正确的（）。
烟草行业岗位技能鉴定 四级烟草专卖管理师岗位技能鉴定试卷答案 一、证件管理（20分） 第一题：许可证办理（12分） 1.实地核查完成后，如申请人拒绝在《经营场所实地勘查表》上签字，应如何处理？（2分） 答案： 由2名以上专卖管理人员（1分）在核查记录上注明情况（1分）。 2.甲县烟草专卖局建立的零售户信息档案主要内容应该有哪些？（4分） 答案： 零售户信息档案主要内容包括：经营人员基本信息（1分），经营场所基本信息（1分），经营内容基本信息（1分），其他相关信息（1分）。 3.请指出甲县烟草专卖局在工作中的错误之处，并给出正确做法。（6分） 答案： （1）小李当即告知赵某不受理错误（1分），应当即时作出不予受理的决定，并告知赵某向乙县烟草专卖局申请（1分）。 （2）小吴、小何共同实施核查错误（1分），应2名以上专卖管理人员共同实施核查（1分）。 （3）不能装订入册的材料另行归档错误（1分），应放入材料袋随卷归档，并在零售许可卷内备考表中注明（1分）。 第二题：准运证办理（8分） 1.甲省A市烟草专卖局审批办理该准运证申请有哪些时限规定？（6分） 答案： 对符合办理烟草专卖品准运证条件的，应在收到全部申请材料之日起（1分）1个工作日内（1分）办理，并将烟草专卖品准运证交付申办人。如遇计算机故障、不可抗力等特殊情况（1分），经主管办理烟草专卖品准运证的负责人批准后（1分），可以自收到办理申请之日起（1分）3个工作日内（1分）办理完毕，并将烟草专卖品准运证交付申办人。 2.除材料中已涉及的凭证外，依据哪些凭证开具的准运证也应用新模式进行准运证制证？（2分） 答案： 依据工业企业联营加工交易合同（1分）、中国卷烟销售公司调运单（1分）开具的准运证也应用新模式进行准运证制证。 二、市场管理（30分） 第一题：日常检查（15分） 1.结合材料，请指出一中队的检查日志存在哪些错误？应如何改正？（6分） 答案： （1）检查人员未填写完整（1分）。应将所有参加专卖执法的人员，即小张、小李、小刘都写上（1分）。 （2）检查区域填写不详细（1分）。检查区域要尽量写详细，应具体将人民路、西湖路、建设路、菜园路都写上（1分）。 （3）遗漏了市场检查情况部分（1分）。应增加市场检查情况部分，将小小烟酒店、老王日杂店等市场检查情况列入市场检查情况部分（1分）。 2.一中队开展专卖管理信息分析时应遵循哪些步骤？（9分） 答案：
基础知识部分： 一、选择题 1.以下关于职业道德的说法中，你认为正确的是（）。 A任何职业道德的适用范围都是普遍的 B职业道德与职业责任无论在形式上还是目标上，都是完全一致的 C职业道德不具有连续性 D某一特定行业的职业道德只适用于专门从事本职业的人 E加强职业道德会增加投入，但从总体上看可降低企业的经营成本 2.职业道德是指从事一定职业劳动的人们，在特定的工作和劳动中以其（）和特殊社会手段来维系的，以善恶进行评价的心理意识、行为原则和行为规范的总和。 A纪律约束 B理想目标 C评价标准 D内心信念 3.某一特定行业的职业道德也只适用于专门从事本职业的人，这体现了职业道德的哪一方面的特征（）。 A范围上的有限性 B 功能上的普遍性 C内容上的稳定性和连续性 D形式上的多样性 4.下列关于职业道德的说法中，正确的是（）。 A职业道德的形式因行业不同而有所不同 B职业道德在内容上具有变动性 C职业道德在适用范围上具有普遍性 D讲求职业道德会降低企业的竞争力 5.下列关于职业道德的论述中，你认为正确的是（）。 A加强职业道德能保证企业的正常经营，但总体会减少企业收益 B加强职业道德能改变人们的思想观念，但与推进技术进步无关 C加强职业道德只是一项经营之外的事务，往往会加大企业和员工的负担 6.下列关于企业文化和职业道德的说法中，正确的是（）。 A员工接受并履行企业价值观是企业顺利实现发展目标的前提 B职业道德与企业文化没有太多的关联性 C员工的文化素质是在上学期间习得的，与企业文化无关 D企业形象是外在现象，与企业文化没有内在联系 7.下面不属于烟草专卖执法行为“六条禁令”的是（） A严禁不出示证件执法或单人执法 B严禁打人骂人和侮辱，危急情况下可暂扣阻碍执行公务人员的人员 C严禁配备警械执法检查 D严禁酒后执法或驾驶机动车辆 8.下面属于烟草专卖执法行为“六条禁令”的是（） A严禁不出示证件执法，情况紧急时可以单人执法 B严禁打人骂人和侮辱，危急情况下可暂扣阻碍执行公务人员的人员
染色体疾病的产前诊 断
染色体疾病的产前诊断 时间:2013-01-31 来源:网络综合整理 染色体病是指由染色体异常引起的疾病。据估计染色体异常占出生儿的 1/150～1/120。产前诊断中最常见的染色体异常有：染色体数目异常、染色体结构异常和微结构异常染色体疾病。据文献报道我国每年出生染色体异常的新生儿约10万人，在活婴儿中染色体异常者占0.3%。因此，普及染色体疾病的产前筛查和产前诊断，对降低出生缺陷的发生有着非常重要的意义。 下面就常见的染色体疾病及染色体病的产前筛查和染色体疾病的产前诊断作简单的阐述。 一、染色体数目异常疾病 染色体数目异常是临床上最主要的染色体病，其中以13号、21号、18号，X、Y染色体异常最为常见，占染色体非整倍体畸变95%以上。这些染色体异常占全部染色体病的80%～90%。常见的可以进行产前诊断的染色体病有以下几种。 （一）21三体综合征 21三体综合征（trisomy 21 syndrome）又称先天愚型综合征和唐氏综合征（Down syndrome），是胎儿和新生儿中最常见的非整倍体染色体异常。在新生儿中的发病率为1/600，在受精卵中为1/150。主要的临床特征为：智力低下，特殊面容，眼裂上斜，鼻梁扁平，舌大、外伸和流涎。约40%患者伴有先天性心脏病。 患者核型绝大多数（92.5%）为单纯型21三体，即47，XX，（xy），＋21； 4.8%为易位型（如14/21、21/22易位）；少数为嵌合型。单纯型21三体几乎都是新突变，与父母核型无关，它是减数分裂染色体不分离所致。单纯型21
三体的发生率与母亲的生育年龄密切相关，高龄孕妇生育21三体患儿的比例明显升高。 （二）18三体综合征 18三体综合征又称为Edward综合征，是一种严重的畸形，出生后不久死亡。患儿临床表现为头面、手足有严重畸形，头长而枕部凸出，犹如冬瓜样，称冬瓜头。眼距宽，眼球小，手紧握拳，足突出，向背部翘起，呈帆船状脚，95%的病例有先天性心脏病。 细胞遗体学检查80%患者核型为47，XY（或XX），＋18；另外10%患者为嵌合体，即46，XY（或XX）/47，XY（或XX），＋18；其余为各种易位，主要是18号与D组染色体的易位。 （三）13三体综合征 13三体综合征又称Patau综合征。新生儿中的发病率为1∶25 000。临床表现为智力发育障碍、小头、眼球小、前脑发育缺陷，常伴有腭裂。 细胞遗传学检查80%的病例为游离型13三体，核型为47，XX（或XY），＋13。其余的为嵌合型或易位型。易位型通常以13号和14号染色体罗泊逊易位居多。 （四）性染色体异常综合征 1. klinefelter syndrome综合征：又称先天性睾丸发育不全综合征。临床表现主要是小睾丸、无精子产生，97%患者不育。患者男性第二性征发育差，身材高，四肢长，可有智商低，精神异常及精神分裂症倾向。细胞遗传学检查绝大多数患者核型为47，XXY。大约有15%患者为嵌合体，其中常见的为46，XX/47，XXY；46，XY/48XXXY。额外的X是由于亲代减数分裂时X染色体不分离的结果。 2. XYY综合征：在男婴中发生率为1∶900。患者男性表型正常，身材高大，易兴奋，常有攻击行为。睾丸发育不全，生精过程障碍。XYY核型是父亲精子形成过程中第二次减数分裂时发生Y染色体不分离的结果。
无创胎儿染色体非整倍体产前检测技术的应用 无创胎儿染色体非整倍体产前检测技术是20多年来基因组学首个真正意义上能够进入临床应用领域的创新性突破，以下是搜集的一篇探究无创胎儿染色体非整倍体产前检测技术的，供大家阅读查看。 研究发现，孕妇外周血浆中存在胎儿游离DNA(cffD-NA)，长度在75bp和250bp之间，平均为166bp。怀孕4周可检出，8周后含量上升并稳定存在(7周建立胎儿胎盘循环)，其含量在5%～30%之间，能够通过高通量方法稳定检测出来。cffDNA以核小体形式稳定存在，在分娩后2h内快速消失从而不会影响下一胎的检测。因此，可以作为非创伤性产前检测的理想材料。 xx年8月，我院与中国医学遗传中心，湖南家辉遗传专科医院，北京贝瑞和康生物技术有限公司合作开展了“无创胎儿染色体非整倍体产前检测”，xx年8月-xx年8月，对257例孕13周～26周孕妇外周血进行了胎儿游离DNA检测。 检测的257例孕妇外周血中，253例正常，4例异常。其中:1例提示21-三体阳性，羊水结果证实(无假阳性，无假阴性)。1例提示18-三体阳性，羊水结果证实(无假阳性，无假阴性)。1例提示13-三体阳性，羊水结果正常(有假阳性，无假阴性)。1例提示母体性
染色体异常，对孕妇外周血进行染色体检查，结果为46，XXX/46，XX(60%∶40%)(无假阳性，无假阴性)羊水结果提示胎儿正常。阳性率为1.56%，灵敏度99%以上。 3.1国外临床试验结果:自1997年发现母体血液中存在胎儿游离DNA之后，无创伤的直接检测胚胎染色体异常成了一个重大的研究课题。xx年 ___中文大学和美国斯坦福大学的研究人员相继发表了应用高通量测序技术从母体血浆DNA中检测胎儿21三体的论文。xx 年 ___中文大学、美国Sequenom公司和VerinataHealth公司先后开展了应用高通量测序方法检测胎儿21、18、13号染色体的临床试验。 3.1.1 ___中文大学于xx年1月发表于英国医学 ___(BritishMedicalJournal)的文章表明，通过对753例高危孕妇的血浆DNA进行检测，准确检出86例唐氏综合征胎儿，灵敏度大100%，3例假阳性，无假阴性。 3.1.2Sequenom公司的临床结果于xx年3月发表于AJOG，该机构对449例高危孕妇的血浆DNA进行了检测，准确诊断出39例T21样本，1例假阳性，无假阴性，与 ___中文大学的结果非常相似。
初级烟草专卖管理员岗位技能鉴定试卷答案 一.证件管理（共30分） 第一题：许可证办理（20分） 1.选择题（每题2分，共8分） （1）C（2）B（3）C（4）D 2.判断题（每题2分，共4分） （1）×（2）√ 3.对于红旗卷烟厂提交的申办烟草专卖生产企业许可证的申请，审批机关如果不能在规定期限内做出许可决定的，应该怎么做？（3分） 答案：经审批机关负责人批准（1分），审批期限可以延长7日（1分）并出具烟草专卖许可证延长审批期限通知书（1分）送达申请人。 第二题：准运证办理（10分） 1．选择题（2分） D 2．判断题（每题2分，共4分） （1）√（2）√ 3．请问本案在准运证使用中是否有错？若有错，请给出正确做法。（5分） 答案：（1）有错（1分） （2）①准运证复印件随货同行错误（1分）；应为准运证原件随货同行（1分） ②两部车辆运输只开具了一份准运证错误（1分）；当所运输的烟草专卖品不能使用同一运输工具同时运输的，应分别开具准运证。（1分） 4．指出材料中电子交易合同特征的错误并改正，判断卷烟电子交易合同的真伪并说明理由。（4分） 答案：（1）大小21.7cm*29cm错误（0.5分），应为大小21cm*29.7cm；（0.5分） 白底黄字错误（0.5分），应为白底红字（0.5分） （2）卷烟电子交易合同是假的（0.5分），因为数字签名不具有唯一性（0.5分），它是判断电子交易合同真伪的主要依据（1分） 二.市场管理（共40分） 第一题：日常检查（20分） 1.（1）“荣发商行”食杂店的行为属于何种违法行为？该种违法行为的识别方法有哪些？（4分） 答案：（1）无烟草专卖零售许可证经营烟草制品零售业务（1分） 识别方法：检查该经营户是否持有合法、有效的烟草专卖零售许可证（1分）；检查该经营户是否有销售行为（1分）；检查该经营户所经营的烟草制品是否为国产真品烟草制品或合法进口的外国烟草制品（1分）。 （2）该违法行为应由哪个部门管辖？（2分） 应由甲县工商行政主管部门。（或答“工商行政主管部门”） （2分） 2.结合材料2，请简述法制宣传教育的对象有哪些？（6分） 答案：社会公众（2分）；专卖行政管理相对人（2分）；各级烟草专卖管理部门行政执法人员（2分） 3.结合材料3，请指出小张不正确的做法并改正。（8分） 答案：（1）小张第二次电话铃响才接电话是不正确的（0.5分）；应电话铃响3声前接听（0.5分）；
2017版四级烟草专卖管理师岗位技能鉴定试卷 第一部分第二部分第三部分第四部分总分总分人 得分 一、许可管理（共20分） 第一题：许可证办理（12分） 2016年1月15日，A县烟草专卖局办证大厅收到了赵某的烟草专卖零售许可证新办申请。证件管理员小伍审查材料后，发现申请人赵某未提交身份证明，当场书面告知其需要补正的材料。1月18日，管理员小伍电话告知赵某还应补交工商营业执照。赵某按要求补正了全部材料。后经核查，A县烟草专卖局认为赵某符合办证条件，于1月25日作出了准予行政许可的决定。证件管理员小伍、小陈于2月23日向赵某送达了行政许可决定书和烟草专卖零售许可证，之后用金属订书针装订文书并归档。 请根据材料回答下列问题： 1.A县烟草专卖局在办理赵某烟草专卖零售许可证的过程中有哪些不当之处？并给出正确做法。（6分） 2.A县烟草专卖局在书面审查时应主要审查哪些内容？（3分） 3.实地核查后，如赵某拒绝在核查记录上签字，应如何处理？（3分） 第二题：准运证办理（8分） 2016年8月29日（星期一），甲省中烟工业公司（位于甲省A市）根据购销合同，拟将450万支“腾龙”牌卷烟运输到乙省B市烟草公司，指派工作人员小刘通过“国家烟草专卖局专卖证件管理系统”向A 市烟草专卖局申请办理烟草专卖品准运证，并按规定提交了相关申办材料。A市烟草专卖局专卖科证件管理员小渝审查后，认为申请材料齐全，符合法定条件，于是提出办理意见后报主管专卖工作的李局长审批。8月31日，李局长审批同意后，A市烟草专卖局为该批卷烟开具了一份有效期为20天的准运证，并批准甲省
中烟工业公司本地制作该份准运证。 请根据材料回答下列问题： 1.甲省中烟工业公司申请该份准运证的凭证类型是什么？还有哪几类凭证类型？（3分） 2.请指出该份准运证办理过程中的角色分工，并指出该份准运证办理过程中的错误之处。（3分） 3.烟草专卖品准运证申办材料的保管期限是几年？该份准运证在使用后应由哪一方保管？（2分） 二、市场管理（共30分） 第一题：日常检查（15分） 2016年1月，张三向甲县烟草专卖局提交了烟草专卖零售许可证新办申请，甲县烟草专卖局依法作出了准予许可决定。3月，甲县烟草专卖局市管员王明在巡访中发现张三所经营的商店营业执照字号由“张三烟酒店”变更为“张三名烟名酒店”，但未申请变更登记，王明在日常检查台账上对该情况进行了记录。4月，甲县烟草专卖局向张三下达责令变更许可证通知书，张三依法申请变更许可证字号信息，甲县烟草专卖局准予变更。5月，市管员王明和柳书对“张三名烟名酒店”依法进行检查，查获张三销售的假冒商标卷烟硬中华2条，制作了现场勘验笔录，并依法对假烟先行登记保存，抽样进行卷烟真伪鉴别检测。王明和柳书在检查中还发现甲县烟草营销部送到“张三名烟名酒店”的“中华”（硬）卷烟比订单少了5条，没有给张三送货票据，张三销售的“中华”（大）卷烟标价1200元/条等情况，并记录在案。根据近期所掌握的专卖管理信息，甲县烟草专卖局组织人员对辖区持证户的守法经营情况进行了一次专题分析。 请根据材料回答下列问题： 1.请按照市场资料的性质对所涉及的市场资料进行分类。（9分）
染色体疾病的产前诊断 时间:2013-01-31 来源: 网络综合整理 染色体病是指由染色体异常引起的疾病。据估计染色体异常占出生儿的 前诊断中最常见的染色体异常有：染色体数目异常、染色体结构异常和微结构异常染色体 疾病。据文献报道我国 每年出生染色体异常的新生儿约 1 0万人，在活婴儿中染色体异常者 占 0.3%。因此，普及染色体疾病的产前筛查和产前诊断，对降低出生缺陷的发生有着非常 重要的意义。 面就常见的染色体疾病及染色体病的产前筛查和染色体疾病的产前诊断作简单的阐述。 、染色体数目异常疾病 染色体数目异常是临床上最主要的染色体病，其中以 13号、21号、18号，X 、Y 染色体异 常最为常见，占染色体非整倍体畸变 95%以上。这些染色体异常占全部染色体病的 80%- 90%。 常见的可以进行产前诊断的染色体病有以下几种。 （二） 18 三体综合征 18三体综合征又称为 Edward 综合征，是一种严重的畸形， 出生后不久死亡。 患儿临床表现 为头面、手足有严重畸形，头长而枕部凸出，犹如冬瓜样，称冬瓜头。眼距宽，眼球小， 手紧握拳，足突出，向背部翘起，呈帆船状脚， 95%的病例有先天性心脏病。 细胞遗体学检查 80%患者核型为47, XY （或XX ）,+ XY （或XX ） /47 , XY （或XX ） , + 18;其余为各种易位， （三） 13 三体综合征 13 三体综合征又称 Patau 综合征。新生儿中的发病率为 障碍、小 头、眼球小、前脑发育缺陷，常伴有腭裂。 1/150 - 1/120 。产 （一） 21 三体综合征 21 三体综合征 （ trisomy 21 syndrome ）又称先天愚型综合征和唐氏综合征 是胎儿和新生儿中最常见的非整倍体染色体异常。 在新生儿中的发病率为 中为 1/150 。主要的临床特征为：智力低下， 和流涎。约 40%患者伴有先天性心脏病。 患者核型绝大多数（ 92.5%）为单纯型 21 （如 14/21 、21/22 易位）；少数为嵌合型。 无关，它是减数分裂染色体不分离所致。单纯型 关，高龄孕妇生育 21 三体患儿的比例明显升高。 特殊面容， 三体，即 单纯型 Downsyndrome ）， 1/600 ，在受精卵 眼裂上斜，鼻梁扁平，舌大、外伸 47，XX ，（ xy ），＋ 21；4.8%为易位型 21 三体几乎都是新突变，与父母核型 21 三体的发生率与母亲的生育年龄密切相 18；另外 10%患者为嵌合体,即 46, 主要是18号与D 组染色体的易位。 1 : 25 000。临床表现为智力发育
染色体异常是什么原因引起的 *导读：染色体异常是什么原因引起的？染色体异常也称染色体发育不全，染色体是组成细胞核的基本物质，是基因的载体，染色体病即染色体异常，故而导致基因表达异常机体发育异常。…… 染色体异常是什么原因引起的？染色体异常也称染色体发 育不全，染色体是组成细胞核的基本物质，是基因的载体，染色体病即染色体异常，故而导致基因表达异常机体发育异常。 染色体异常的病因有以下几种： 1、物理因素：人类所处的辐射环境，包括天然辐射和人工辐射。天然辐射包括宇宙辐射，地球辐射及人体内放射物质的辐射，人工辐射包括放射辐射和职业照射等。 2、化学因素：人们在日常生活中接触到各种各样的化学物质，有的是天然产物，有的是人工合成，它们会通过饮食、呼吸或皮肤接触等途径进入人体，而引起染色体畸变。 3、生物因素：当以病毒处理培养中的细胞时，往往会引起多种类型的染色体畸变，包括断裂、粉碎化和互换等。 4、遗传因素：染色体异常常可以表现为家族性倾向，这提示染色体畸变与遗传有关。 5、自身免疫性疾病：自身免疫性疾病似乎在染色体不分离中起一定作用，如甲状腺原发性自身免疫抗体增高与家族性染色
体异常之间有密切相关性。 染色体异常分分类为：数量畸变包括整倍体和非整倍体畸变，染色体数目增多、减少和出现三倍体等；结构畸变染色体缺失易位倒位、插入、重复和环状染色体等又可分为常染色体畸变以及性染色体畸变和先天性睾丸发育不全等。 染色体异常治疗困难疗效不满意，导致的先天性智能障碍的治疗，也尚无有效药物，可尝试中药治疗与康复训练。所以该病的预防很重要，染色体发育不全治疗困难疗效不满意预防显得更为重要预防措施包括推行遗传咨询、染色体检测、产前诊断和选择性人工流产等，防止患儿出生。孕妇应该定期做产前检查，如果胎儿有问题，至少能及早发现。抽羊水诊断是能检验胎儿是否患有先天染色体缺陷的其中一个方法。