缓冲溶液习题Newly compiled on November 23, 2020
第四章 缓冲溶液
难题解析
例4-1 计算pH=，总浓度为 mol·L -1的C 2H 5COOH(丙酸,用HPr 表示)- C 2H 5COONa 缓冲溶液中，C 2H 5COOH 和C 2H 5COONa 的物质的量浓度。若向1 L 该缓冲溶液中加入 mol HCl ，溶液的pH 等于多少
分析 ⑴ 用Henderson —Hasselbalch 方程式直接计算丙酸和丙酸钠的浓度。 ⑵ 加入HCl 后，C 2H 5COOH 浓度增加, C 2H 5COONa 浓度减小。
解 ⑴ 查表4-1，C 2H 5COOH 的p K a = ，设c (HPr) = x mol·L -1。则c (NaPr) =（）mol·L -1
pH ＝p K a +lg Pr)
(H )
Pr (-c c =+lg 1-1L m ol L m ol )20.0(??--x x =
解得 x = 即c (HPr) = mol·L -1
c (NaPr) = - mol·L -1 = mol·L -1
⑵ 加入 mol HCl 后：
pH ＝p K a +lg )HPr ()Pr (-n n =+lg 0.010)m ol
(0.0850.010)m ol
(0.12+-=
例4-2 柠檬酸（缩写H 3Cit ）常用于配制供培养细菌的缓冲溶液。现有500 mL 的 mol·L -1柠檬酸溶液，要配制pH 为的缓冲溶液，需加入 mol·L -1的NaOH 溶液多少毫升
分析 配制pH 为的缓冲溶液，应选NaH 2Cit-Na 2HCit 缓冲系， NaOH 先与H 3Cit 完全反应生成NaH 2Cit ，再与NaH 2Cit 部分反应生成Na 2HCit 。
解 查表4-1,柠檬酸的p Ka 2= ，设H 3Cit 全部转化为NaH 2Cit 需NaOH 溶液V 1 mL
⑴ H 3Cit(aq) + NaOH(aq)NaH 2Cit(aq) + H 2O(l)
mol·L -1 × V 1 mL = mol·L -1 × 500 mL
V 1 = 250
即将H 3Cit 完全中和生成NaH 2Cit ，需 mol·L -1NaOH 溶液250 mL ，生成NaH 2Cit mol·L -1 ×500 mL=100 mmol
设NaH 2Cit 部分转化为Na 2HCit 需NaOH 溶液V 2 mL ，
⑵ NaH 2Cit(aq) + NaOH(aq)
Na 2Hcit(aq) + H 2O(l)
则n (Na 2HCit ) = mmol ， n (NaH 2CitB) = (100 - mmol ，
pH = p Ka 2 + lg )
Cit H ()HCit (-2-2n n = ＋lg )mmol 0.400-(100mmol 400.022V V = V 2 = 157 共需加入NaOH 溶液的体积为
V 1 mL + V 2 mL = (250 + 157) mL = 407 mL
例4-3 已知巴比妥酸 (C 4H 4N 2O 3)的p K a = 。今有500 mL 总浓度 mol·L -1、pH 为的巴比妥酸－巴比妥酸钠缓冲溶液，欲将溶液的pH 调整到，需加入NaOH 多少克调整前后缓冲溶液的缓冲容量各为多少
分析 用Henderson —Hasselbalch 方程式分别求出加入NaOH 前后缓冲系中巴比妥酸及巴比妥酸钠的浓度，再求缓冲容量。
解 ⑴ 在pH 为的缓冲溶液中
= + lg
)
O N H (C )O N H (C L 0.200mol 32443244-1
c c -? 解得 c （C 4H 4N 2O 3）= mol·L -1
c （NaC 4H 3N 2O 3）= - mol·L -1 = mol·L -1
β =1
--1
-1L
0.066)mol (0.134L 0.066mol L 0.134mol 2.303?+????= mol·L -1
⑵ 设将pH 调整为需加入固体NaOH x g ：
= + lg
1
-1-1-1-mol 40g g
0.50L L 4mol 13.0mol 40g g
L 50.0L 66mol 0.0?-
???+
??x x 解得： m =
c （C 4H 4N 2O 3）= mol·L -1 –
L
50.0m ol g 401g .11-??= mol·L -1
c （NaC 4H 3N 2O 3）= mol·L -1 + L
50.0mol g 40 1.1g 1
-??= mol·L -1
β =1
--1
-1L
0.12)mol (0.079L 0.12mol L 0.079mol 2.303?+????= mol·L -1 例4-4 用 mol·L -1的H 2C 8H 4O 4(邻苯二甲酸)溶液和 mol·L -1的NaOH 溶液，配制pH 为的缓冲溶液100 mL ，求所需H 2C 8H 4O 4溶液和NaOH 溶液的体积比。
分析 NaOH 与H 2C 8H 4O 4完全反应生成NaHC 8H 4O 4，再与NaHC 8H 4O 4部分反应生成Na 2C 8H 4O 4。
解 缓冲系为-4
48O H HC —-
2448O H C ,查表4-1，p K a2=。设需H 2C 8H 4O 4溶液V 1 mL ，需NaOH 溶液的总体积为V 2 mL ，依题意第一步反应需NaOH 溶液的体积亦为V 1 mL 。对于较复杂的平衡体系，可用列表法找出平衡时各物质的量。
⑴ H 2C 8H 4O 4(aq) + NaOH(aq) -4
48O H HC (aq) + H 2O(l) 起始量mmol + + 变化量mmol V 1 + 平衡量mmol 0 0 +
⑵ -4
48O H HC (aq) + NaOH(aq) -
2448O H C (aq) + H 2O(l)
起始量mmol + +变化量mmol - - +平衡量mmol [ 0 = =
p K a2 + lg )
O H HC ()O H C (-448-2448n n = + lg mmol
)10.0050.0(mmol
)025.010.0(2112V V V V --=
解得 5.22
1 V V
学生自测题
一、判断题（对的打√，错的打×）
1. 缓冲溶液就是能抵抗外来酸碱影响，保持溶液pH 绝对不变的溶液。（ ） 2、在一定范围内稀释缓冲溶液后，由于[共轭碱]与[共轭酸]的比值不变，故缓冲溶液的pH 和缓冲容量均不变。（ ）
3、可采用在某一元弱酸HB 中，加入适量NaOH 的方法来配制缓冲溶液。（ ）
4、总浓度越大，缓冲容量越大，缓冲溶液的缓冲能力越强。（ ）
5、正常人体血浆中，碳酸缓冲系的缓冲比为20：1，所以该缓冲系无缓冲作用。 （ ）
二、选择题（将每题一个正确答案的标号选出）
1、下列混合溶液中，具有缓冲作用的是 （ ）
A ．50 mL c （KH 2PO 4）= mol·L -1的溶液+50 mL c （NaOH ）= mol·L -1的溶液。
B ．50 mL c （HAc ）= mol·L -1的溶液+25 mL c （NaOH ）= mol·L -1的溶液。
C ．50 mL c （NH 3）= mol·L -1的溶液+25 mL c （HCl ）= mol·L -1的溶液。
D ．500 mL c （NaHCO 3）= mol·L -1的溶液+5 mL CO 2饱和水溶液（常温下CO 2
的摩尔溶解度为 mol·L -1）。
E ．l 升纯水中加入c （HAC ）= mol·L -1和c （NaAc ）= mol·L -1的溶液各1
滴。
2、由相同浓度的HB 溶液与B - 溶液等体积混合组成的缓冲溶液，若B -的K b =×10-10
，则此缓冲溶液的pH 为（ ）
A ．
B ．
C ． D. E ．
3、用相同浓度的HCl 溶液和NH 3·H 2O 溶液（p K b ＝）配制pH = 的缓冲溶液，HCl
溶液和NH 3·H 2O 溶液的体积比应为（ ）
A ．1∶1
B ．1∶2
C ．2∶1
D ．3∶1
E ．1∶3 4、配制pH=的缓冲溶液，下列缓冲对中最合适的是（ ）
A ．NaHCO 3-Na 2CO 3（H 2CO 3的p K a2 = ）
B ．HAc - NaAc （HAc 的p K a = ）
C ．NH 4Cl – NH 3·H 2O （NH 3·H 2O 的p K b = ）
D ．Na 2HPO 4 – Na 3PO 4（H 3PO 4的p K a3 = ）
E ．C 2H 5COOH –C 2H 5COONa （C 2H 5COOH 的p K a = ）
5、已知常温下H 3PO 4的p K a1=，p K a2=, p K a3=。下列缓冲对中，最适合于配制pH 为的缓冲溶液的是（ ）
A. H 3PO 4 -42PO H
B.-42PO H -24HPO
C.-24HPO -34PO
D. H 3PO 4 -34
PO E. H 3PO 4 -24HPO 三、填空题
1、缓冲容量的影响因素中，缓冲比对缓冲容量的影响是：对同一缓冲溶液，当总浓度相同时，缓冲比越接近于 （1） ，缓冲容量越 （2） 。
2、NaHCO 3和Na 2CO 3组成的缓冲溶液，抗酸成分是 （3） ，抗碱成分是（4） ，计算该缓冲溶液pH 的公式为 （5） 。该缓冲系的有效缓冲范围是 （6） 。（已知：H 2CO 3的p K a1=，p K a2=）
3、影响缓冲容量的两个重要因素是（7） 和 （8） 。
四、问答题
1、什么是缓冲溶液 试以血液中的H 2CO 3--
3HCO 缓冲系为例，说明缓冲作用的原理
及其在医学上的重要意义。
2、影响缓冲溶液的pH 的因素有哪些为什么说共轭酸的p K a 是主要因素 五、计算题
1.临床检验得知患者甲、乙、丙三人血浆中-
3HCO 和溶解态CO 2(aq)的浓度如下： 甲 [-3HCO ] = mmol·L -1，[CO 2(aq)] = mmol·L -1 甲 [-3HCO ] = mmol·L -1，[CO 2(aq)] = mmol·L -1 甲 [-3HCO ] = mmol·L -1，[CO 2(aq)] = mmol·L -1
已知在血浆中校正后的1p a
K '（H 2CO 3）=，试分别计算三位患者血浆的pH 。并判断谁为酸中毒，谁为碱中毒，谁为正常
2．现有(1) mol·L -1 HCl 溶液，(2) mol·L -1 HAc 溶液，(3) mol·L -1 NaH 2PO 4 溶液各50 mL ，欲配制pH = 的溶液，问需分别加入 mol·L -1 NaOH 溶液多少毫升配成的三种溶液有无缓冲作用哪一种缓冲能力最好
学生自测答案
一、判断题
1. ×
2.×
3. √
4.×
5. × 二、选择题
1. B
2. A
3. B
4. C
5. A 三、填空题
1．（1）1；（2）大
2．（3）Na 2CO 3 （4）NaHCO 3 （5） ]
[NaHCO ]
CO [Na lg p pH 332a2+=K （6）pH = ~
3. （7）总浓度 （8）缓冲比 四、简答题
1. 能抵抗少量外来强酸、强碱而保持溶液pH 基本不变的溶液称为缓冲溶液。
H 2CO 3 --3HCO 是血浆中最重要的缓冲系，二者之间存在如下质子转移平衡：
H 2CO 3 + H 2O
-
3
HCO + H 3O +
当体内酸性物质增加时，血液中大量存在的抗酸成分-
3HCO 与H 3O +结合，上述平衡向
左移动，使[H 3O +]不发生明显地改变。同理，当体内碱性物质增加时，H 3O +将质子传递
给OH -，生成H 2O ，上述平衡向右移动，使大量存在的抗碱成分H 2CO 3离解，以补充被消耗的H 3O +，达到新的平衡时，[H 3O +]也不发生明显地改变。虽然其缓冲比为20∶1，已超出体外缓冲溶液有效缓冲比（即10∶1 ~ 1∶10 ）的范围 ，但碳酸缓冲系仍然是血液中的一个重要缓冲系。这是因为在体外的实验系统中，当缓冲作用发生后，因对抗
H 3O +或OH -而消耗了的-
3HCO 或H 2CO 3的浓度得不到补充和调节，抗酸或抗碱成分会被
耗尽。而体内是一个“敞开系统”，当缓冲作用发生后，-3HCO 或H 2CO 3浓度的改变可由
肺的呼吸作用和肾的生理功能获得补充和调节，使得血液中的-3HCO 和H 2CO 3的浓度保
持相对稳定。 总之，由于血液中多种缓冲系的缓冲作用和肺、肾的调节作用，使正常人血液的pH 维持在 ~ 的狭小范围内。
2. 影响缓冲溶液的pH 的因素有共轭酸的p K a 和缓冲比，由于缓冲比处在对数项中，对pH 值的影响较小，故不是主要因素，所以，共轭酸的p K a 是决定缓冲溶液pH 的主要因素。
五、计算题
1.解 患者甲血浆的pH 为：
患者乙血浆的pH 为： 患者丙血浆的pH 为：
血浆的正常pH 为~，当pH ＜时属于酸中毒，当pH ＞时属于碱中毒。因此患者甲属于正常，患者乙属于酸中毒，患者丙属于碱中毒。
2.解 （1）当加入50 mL mol·L -1 NaOH 溶液时，NaOH 和HCl 刚好完全反应生成 mol·L -1 的NaCl 溶液，pH=，此时溶液无缓冲作用。
（2）设在HAc 中需加入x L NaOH ，才能形成HAc – Ac -缓冲系，有 此时，缓冲比为166，溶液的缓冲能力很小。
（3）依题意，选择-42PO H --
24HPO 为缓冲对，需加入y L NaOH ，则
y = (L) = （mL ）
此时，缓冲比为，溶液的缓冲能力较强。
章后习题解答
习题
1. 什么是缓冲溶液 试以血液中的H 2CO 3--
3HCO 缓冲系为例，说明缓冲作用的
原理及其在医学上的重要意义。
答 能抵抗少量外来强酸、强碱而保持其pH 基本不变的溶液称为缓冲溶液。
血液中溶解的CO 2与-3HCO 组成缓冲系。正常人体[-
3HCO ]/[CO 2(aq)]为20/1，
pH=。若pH<，发生酸中毒，pH>，发生碱中毒。当酸性代谢产物增加时，抗酸成
分-3HCO 与H 3O +结合，增加的H 2CO 3可通过加快呼吸以CO 2的形式呼出；消耗的
-
3
HCO 则由肾减少对其的排泄而得以补充；当碱性代谢产物增加时，[OH -
]与H 3O +
生成H 2O ，促使抗碱成分H 2CO 3离解以补充消耗的H 3O +。同理，减少的H 2CO 3及增加
的-3HCO 可通过肺和肾来调控。血液中的H 2CO 3–-
3HCO 缓冲系与其他缓冲系共同作
用，维持pH 为~的正常范围。
2. 什么是缓冲容量影响缓冲溶量的主要因素有哪些总浓度均为·L -1的 HAc-NaAc 和H 2CO 3--3HCO 缓冲系的缓冲容量相同吗
解 缓冲容量是衡量缓冲溶液缓冲能力大小的尺度，表示单位体积缓冲溶液pH 发生一定变化时，所能抵抗的外加一元强酸或一元强碱的物质的量。影响缓冲容量的主要因素是缓冲系的总浓度和缓冲比：缓冲比一定时，总浓度越大缓冲容量越大；总浓度一定时，缓冲比越接近于1缓冲容量越大。总浓度及缓冲比相同
的HAc-NaAc 和H 2CO 3--3HCO 缓冲系的缓冲容量相同。
3. 下列化学组合中，哪些可用来配制缓冲溶液
(1) HCl + NH 3·H 2O (2) HCl + Tris (3)HCl + NaOH (4) Na 2HPO 4 + Na 3PO 4 (5) H 3PO 4 + NaOH (6)NaCl + NaAc 解 可用来配制缓冲溶液的是：(1) HCl + NH 3·H 2O 、(2) HCl + Tris 、(4) Na 2HPO 4 + Na 3PO 4和(5) H 3PO 4 + NaOH
4. 将 mol·L -1吡啶(C 5H 5N ，p K b =和 mol·L -1HCl 溶液等体积混合,混合液是否为缓冲溶液求此混合溶液的pH 。
解 C 5H 5N 与HCl 反应生成C 5H 5NH +Cl -(吡啶盐酸盐)，混合溶液为 mol·L -1
C 5H 5N 和 mol·L -1 C 5H 5NH +Cl -缓冲溶液，p K a = - =
5. 将 gNa 2CO 3和 gNaHCO 3溶于水制备250 mL 缓冲溶液，求溶液的pH 。
解 0.119m ol m ol
84.0g 10.0g
)HCO (1
3=?=
--
n 6. 求pH=，总浓度为 mol·L -1的HCOOH (甲酸)–HCOONa(甲酸钠)缓冲溶液中，甲酸和甲酸钠的物质的量浓度(HCOOH 的p K a =
解 设c (HCOONa) = x mol·L -1, 则c (HCOOH) = mol·L -1 – x mol·L -1 解得 c (HCOO -) = x mol·L -1 = mol·L -1
c (HCOOH)= - mol·L -1= mol·L -1
7. 向100mL 某缓冲溶液中加入 g NaOH 固体，所得缓冲溶液的pH 为.。已知原缓冲溶液共轭酸HB 的p K a =，c (HB)=·L -1，求原缓冲溶液的pH 。
解 n (NaOH) =1L
1000mL
100mL mol 0.20g/40g 1?
?-= mol·L -1 加入NaOH 后，
解得 [B -] = mol·L -1
原溶液 45
.5L mol 25.0L mol 35.0lg 30.5pH 1
1
=??+=-- 8. 阿司匹林(乙酰水杨酸、以HAsp 表示)以游离酸(未解离的)形式从胃中吸
收，若病人服用解酸药，调整胃容物的pH 为，然后口服阿司匹林 g 。假设阿司匹林立即溶解，且胃容物的pH 不变，问病人可以从胃中立即吸收的阿司匹林为多少克 (乙酰水杨酸的Mr=、p K a =
解 95.2(HAsp)
)
(Asp lg 48.3(HAsp))(Asp lg p pH a =+=+=--n n n n K
依题意 0.0036mol mol 180g 0.65g
n(HAsp))n(Asp 1
-=?=+-
解得 n (HAsp) = mol
可吸收阿司匹林的质量 = mol × g·mol -1 = g
9. 在500 mL mol·L -1 C 2H 5COOH （丙酸，用HPr 表示）溶液中加入 g ，求所得溶液的近似pH 和校正后的精确pH 。已知C 2H 5COOH 的p K a =，忽略加入NaOH 引起的体积变化。
解 ⑴ 求近似pH
pH = p K a 4.78mol
1.8g/40g L 0.20mol 0.500L mol 1.8g/40g lg 4.87(HPr))(Pr lg 1
-1--1
-=?-???+=+n n ⑵ 求精确pH ，丙酸钠是强电解质
I =21
∑c i z i 2 = 21(
0.500L
0.045mol
×12+0.500L 0.045mol ×12) = mol·L -1 ≈ mol·L -1
当Z = 0，I = 时，校正因数 11.0)
HB ()B (lg -=-
γγ pH = p K a 67.4)11.0(78.4Pr)
H ()
(Pr lg Pr)H ()(Pr lg
=-+=++--γγn n 10. 某医学研究中，制作动物组织切片时需pH 约为的磷酸盐缓冲液作为固定液。该固定液的配方是：将29 g Na 2HPO 4·12H 2O 和 g NaH 2PO 4·2H 2O 分别溶解
后稀释至1 L 。若校正因数lg )
PO H ()HPO (-4224γγ-=，计算该缓冲溶液的精确pH 。 解 c (Na 2HPO 4) =
1L
mol 358.0g 29g
1??-= mol·L -1
c (NaH 2PO 4) =
1L
mol 156g 2.6g
1??-= mol·L -1
pH=p K a2 + )PO H ()HPO (-4224γγ-
+lg )
PO H ()(HPO 4224-
-c c = + + lg 11L 0.017m ol L 0.081m ol --??= 11. 将 mol·L -1HAc 溶液和 mol·L -1
NaOH 溶液以3:1的体积比混合，求此缓冲溶液的pH 及缓冲容量。
解 HAc 溶液和NaOH 溶液的体积分别为3V 和V ，
c (HAc) = ×3V - × V ) mol·L -1 / (3V + V ) = mol·L -1
c (Ac -) = mol·L -1 × V / (3V + V ) = mol·L -1
12. 某生物化学实验中需用巴比妥缓冲溶液，巴比妥(C 8H 12N 2O 3)为二元有机酸（用H 2Bar 表示，p K a1＝。今称取巴比妥 g ，先加蒸馏水配成100 mL 溶液，在pH 计监控下，加入 mol·L -1NaOH 溶液 mL ，并使溶液最后体积为1000 mL 。求此缓冲溶液的pH 和缓冲容量。（已知巴比妥的Mr=184 g·mol -1）
解 H 2Bar 与NaOH 的反应为
H 2Bar(aq) + NaOH(aq)＝NaHBar(aq) +H 2O(l)
反应生成的NaHBar 的物质的量n (NaHBar) ＝c (NaOH)V (NaOH)＝ mol·L -1× mL ＝25 mmol ，剩余H 2Bar 的物质的量为
n 余(H 2Bar)＝n (H 2Bar) - n (NaOH)＝
1
-mol
1844.18?g g ×1000 - 25 mmol ＝75 mmol pH ＝p K a +lg Bar)(H )
(HBar 2n n -＝+lg 75mmol
mmol 25＝
β＝×00mL)
25)mmol/10(7500mL)(25mmol/1000mL)(75mmol/10+?＝ mol·L -1
13. 分别加NaOH 溶液或HCl 溶液于柠檬酸氢钠（缩写Na 2HCit ）溶液中。写出可能配制的缓冲溶液的抗酸成分、抗碱成分和各缓冲系的理论有效缓冲范围。如果上述三种溶液的物质的量浓度相同，它们以何种体积比混合，才能使所配制
的缓冲溶液有最大缓冲容量（已知H 3Cit 的p K a1=、p K a2=、p K a3=）`
解.
溶液组成
缓 冲 系
抗酸成分 抗碱成分 有效缓冲范围 β最大时
体积比 Na 2HCit+HCl H 2Cit --HCit 2-
HCit
2-
H 2Cit
-
~ 2:1 Na 2HCit+HCl H 3Cit-H 2Cit -
H 2Cit -
H 3Cit ~ 2:3 Na 2HCit+NaOH HCit 2--Cit
3- Cit
3-
HCit
2-
~
2:1
14. 现有(1) mol·L -1NaOH 溶液，(2) mol·L -1NH 3溶液，(3) mol·L -1Na 2HPO 4 溶液各50 mL ，欲配制pH=的溶液，问需分别加入 mol·L -1 HCl 溶液多少mL 配成的三种溶液有无缓冲作用哪一种缓冲能力最好
解 ⑴ HCl 与NaOH 完全反应需HCl 溶液50 mL 。 ⑵ HCl(aq) + NH 3·H 2O(aq) = NH 4Cl(aq) + H 2O(l) NH 4+的p K a = ，
解得 V (HCl) = 50 mL
⑶ HCl(aq) + Na 2HPO 4(aq) = NaH 2PO 4(aq) + NaCl(aq) H 3PO 4的p K a2=，
解得 V (HCl) = 31 mL
第一种混合溶液无缓冲作用；第二种pH
15. 用固体NH 4Cl 和NaOH 溶液来配制1 L 总浓度为 mol·L -1，pH=的缓冲溶液，问需NH 4Cl 多少克求需 mol·L -1的NaOH 溶液的体积（mL ）。
解 设需NH 4Cl 的质量为 x g
p K a (NH 4+) = - =
得 mol·L -1 × V (NaOH) = [x / g·mol -1 - mol·L -1 × V (NaOH)]
又 [ mol·L -1 × V NaOH) + (x / ·mol -1 - mol·L -1 × V (NaOH))] / 1L
= mol·L
-1
解得 x = , V (NaOH) = L 即：需NH 4Cl g ，NaOH 溶液 L 。
16. 用 mol·L -1H 3PO 4溶液和 mol·L -1NaOH 溶液配制100 mL pH=的生理缓冲溶液，求需H 3PO 4溶液和NaOH 溶液的体积（mL ）。
解 设第一步反应需H 3PO 4和NaOH 溶液体积各为x mL ⑴ H 3PO 4(aq)+ NaOH(aq)= NaH 2PO 4(aq) + H 2O(l)
x mLH 3PO 4与x mLNaOH 完全反应，生成NaH 2PO 4 mol·L -1 × x mL = x mmol
⑵ 第二步反应：设生成的NaH 2PO 4再部分与NaOH y mL 反应，生成Na 2HPO 4，其与剩余NaH 2PO 4组成缓冲溶液
NaH 2PO 4(aq) + NaOH(aq) = Na 2HPO 4(aq) + H 2O(l) 起始量mmol + + 变化量mmol +
平衡量mmol (x -y) 0 +
y
x y
= 依题意又有 2x + y = 100 解得 x = ，y =
即需H 3PO 4溶液 mL ，NaOH 溶液 + mL = mL 。
17. 今欲配制37℃时，近似pH 为的生理缓冲溶液，计算在Tris 和Tris·HCl 浓度均为 mol·L -1的溶液l00 mL 中，需加入 mol·L -1HCl 溶液的体积（mL ）。在此溶液中需加入固体NaCl 多少克，才能配成与血浆等渗的溶液（已
知Tris·HCl 在37℃时的p K a ＝，忽略离子强度的影响。）
解 ⑴
V (HCl) = mL
⑵ 设加入NaCl x g ，血浆渗透浓度为300 mmol ·L -1
m L
6.147m L
6.47L m ol 050.0m L 100L m ol 050.0)Tris (11??-??=
--c = mol·L -1 m L
6.147m L
6.47L m ol 050.0m L 100L m ol 050.0)HCl Tris (11??+??=
?--c = mol·L -1 （ + 2×）mol·L -1 +
=????--mL
6.147mol g 5.58L mL 1000g 21
1
x mol·L -1 x = ，即需加入NaCl g
18. 正常人体血浆中，[-3HCO ]＝ mmol·L -1、[CO 2(aq)]＝ mmol·L -1。若某人因腹泻使血浆中[-3HCO ]减少到为原来的90%，试求此人血浆的pH ，并判断是否会引起酸中毒。已知H 2CO 3的p K a1ˊ=。
解 pH= p K a1′7.36L
1.2mmol 0.90L 24mmol lg 6.10(aq)][CO ][HCO lg 11
23=???+=+--- pH 虽接近，但由于血液中还有其他缓冲系的协同作用，不会引起酸中毒。
Exercises
1. How do the acid and base components of a buffer function Why are they typically a conjugate acid-base pair
Solution A buffer solution consists of a conjugate acid-base pair. The conjugate base can consume the added strong acid, and the conjugate acid can consume the added strong base, to maintain pH 。The conjugate acid-base pairs of weak electrolytes present in the same solution at equilibrium.
2. When H 3O + is added to a buffer ，does the pH remain constant or does it change slightlyExplain.
Solution The pH of a buffer depends on the p K a of the conjugate acid and the buffer component ratio. When H 3O + is added to a buffer ， the buffer component ratio
changes slightly ，so the pH changes slightly.
3. A certain solution contains dissolved HC l and NaCl. Why can’t this solution act as a buffer
Solution This solution can’t act as a buffer. HCl is not present in solution in molecular form. Therefore, there is no reservoir of molecules that can react with added OH - the Cl - does not exhibit base behavior in water, so it cannot react with any H 3O + added to the solution.
4. What is the relationship between buffer range and buffer-component ratio Solution The pH of a buffer depends on the buffer component ratio. When [B -]/[HB]=1, pH = p K a , the buffer is most effective. The further the buffer-component ratio is from 1，the less effective the buffering action is. Practically, if the [B -]/[HB] ratio is greater than 10 or less than , the buffer is poor. The buffer has a effective range of pH = p K a ±1.
5. Choose specific acid-base conjugate pairs of suitable for prepare the following beffers （Use Table 4-1 for K a of acid or K b of base ）：
（a ）pH≈；（b ）pH≈；（c ）[H 3O +]≈×10-9 mol·L -1；
Solution （a ）HAc and Ac - （b ）-42PO H and -24HPO （c ）+4
NH and NH 3 6. Choose the factors that determine the capacity of a buffer from among the following and explain your choices.
(a) Conjugate acid-base pair (b) pH of the buffer (c) Buffer ranger (d) Concentration of buffer-component reservoirs
(e) Buffer-component ratio (f) p K a of the acid component
Solution Choose (d) and (e). Buffer capacity depends on both the concentration of the reservoirs and the buffer-component ratio. The more concentrated the components of a buffer, the greater the buffer capacity. When the component ratio is close to one, a buffer is most effective.
7. Would the pH increase or decrease, and would it do so to a larger or small extent, in each of the following cases:
(a) Add 5 drops of mol·L -1 NaOH to 100 mL of mol·L -1 acetate buffer (b) Add 5 drops of mol·L -1 HCl to 100 mL of mol·L -1 acetate buffer (c)
Add 5 drops of mol·L -1 NaOH to 100 mL of mol·L -1 HCl
(d) Add 5 drops of mol·L -1 NaOH to distilled water
Solution （a ）The pH increases to a small extent;（b ）The pH decreases to a small extent;（c ）The pH increases to a small extent;（d ）The pH increases to a larger extent.
8. Which of the following solutions will show buffer properties (a) 100 mL of mol·L -1 NaC 3H 5O 3 + 150 mL of mol·L -1 HCl (b) 100 mL of mol·L -1 NaC 3H 5O 3 + 50 mL of mol·L -1 HCl (c) 100 mL of mol·L -1 NaC 3H 5O 3+ 50 mL of mol·L -1 NaOH (d) 100 mL of mol·L -1 C 3H 5O 3H + 50 mL of mol·L -1 NaOH
Solution (b) and (d)
9. A chemist needs a pH buffer. Should she use CH 3NH 2 and HCl or NH 3 and HCl to prepare it Why What is the disadvantage of choosing the other base
Solution The p K a of CH 3NH 2·HCl is . The p K a of +4
NH is . The p K a of the former is more close to . A buffer is more effective when the pH is close to p K a . She should choose CH 3NH 2. The other is not a good choice.
10. An artificial fruit contains g of tartaric acid H 2C 4H 4O 6，and g its salt ， potassium hydrogen tartrate ，per liter. What is the pH of the beverage K a 1=×10-3
Solution 16.345.1lg .00.3mol g 1.15011.0g mol g 2.18820.0g
lg 00.3)
O H C (H )O H (KHC lg p pH 1
1
6442644a 1
=+=??+=+=--n n K 11. What are the [H 3O +] and the pH of a benzoate buffer that consists of mol·L -1 C 6H 5COOH and mol·L -1 C 6H 5COONa K a of benzoic acid=×10-5。
Solution 13.485.0lg 20.4L
0.33mol L 0.28mol lg 20.4COOH)H (C )COO H (C lg p pH 1--1
5656a =+=??+=+=-c c K [H +]=×10-5 mol·L -1
12. What mass of sodium acetate (NaC 2H 3O 2·3H 2O,Mr=·mol -1) and what volume of concentrated acetic acid ·L -1) should be used to prepare 500 mL of a buffer solution at pH= that is mol·L -1 overall
Solution c (CH 3COO -) + c (CH 3COOH)= mol·L -1
n (CH 3COO -) + n (CH 3COOH) = mol·L -1 × 500 mL ×
10-3 L·mL -1 = mol
n (CH 3COOH) = mol, n (CH 3COO -) = mol Mass of sodium acetate = mol × g·mol -1 = g
13. Normal arterial blood has an average pH of . Phosphate ions form one of the key buffering systems in the blood. Find the buffer-component ratio of a KH 2PO 4/Na 2HPO 4 solution with this pH p K a2ˊof -4
2PO H = Solution ]
PO H []HPO [lg 80.640.74224--
+=
广域网技术课程设计报告 设计题目：广域网技术综合实验 目录 1.概述 (2) 1.1目的 (2) 1.2课程设计的任务 (2) 2.设计的内容 (2) 2.1拓扑图 (2) 2.2课程设计的内容 (3) 3.总结 (4) 3.1课程设计进行过程及步骤 (4) 3.1.1基本配置 (4) 3.1.2 DHCP的配置 (7)
3.1.3配置路由协议 (8) 3.1.4 帧中继配置 (9) 3.1.5 PPP的配置（chap） (11) 3.1.6 ACL的配置 (11) 3.1.7 NAT配置 (12) 3.1.8验证 (12) 3.2所遇到的问题，你是怎样解决这些问题的 (15) 3.3体会收获及建议 (15) 4.教师评语 (15) 5.成绩 (15)
1.概述 1.1目的 通过一个完整的广域网技术综合打实验，促使大家能够从整体上把握WAN广域网连接，并且能从更深层次上来理解搭建整体网络的一个完整流程，同时增强实际动手能力。 熟练掌握广域网上设备的常用配置：实现PPP配置、帧中继封装、ACL访问控制列表设置、NAT网络地址转换、DHCP动态地址分配等协议，巩固所学广域网技术，并加深对其概念的理解。 1.2课程设计的任务 （1）DHCP及其中继的配置与验证 （2）PPP的配置与验证 （3）帧中继的配置与验证 （4）RIP的配置与验证 （5）标准ACL的配置与验证 （6）NAT的配置、地址映射与验证 2.设计的内容 2.1拓扑图 注：下图的拓扑图为某企业的网络规划图，包含有核心层、汇聚层、及接入层。核心层组要由接入R1及电信ISP组成，汇聚层主要由总部R2及分支R3组成，接入层由S1、S2、S3、S4交换机组成。在接入层R1上通过配置ACL及NAT保护内网的安全。 图2-1
常见缓冲溶液的配制 缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。PH缓冲系统对维持生物的正常pH 值，正常生理环境起重要作用。多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们时蛋白质、重碳酸盐缓冲体系。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。 在生化研究工作中，常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH 值的变化往往直接影响到我们工作的成效。如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大，会使酶活性下降甚至完全失活。所以我们要学会配制缓冲溶液。 由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。 柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。 磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。 三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris一缓冲液，在4℃时是8.4，在37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下，缓冲能力很差。 缓冲液的pH值由哪些因素决定？ 设缓冲系统的弱酸的电离常数为K（平衡常数），平衡时弱酸的浓度为[酸]，弱酸盐的浓度为[盐]，则由弱酸的电离平衡式可得下式： 根据此式可得出下列几点结论： （1）缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关。弱酸一定，但酸和盐的比例不同时，可以得到不同的pH值。当酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PK值相同。 （2）酸和盐浓度等比例也增减时，溶液的pH值不便。 （3）酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为最高，比例相差越大，缓冲效率越低，一般地说缓冲液有效缓冲范围为PK±1pH。 从上述可知，只要知道缓冲对的PK值，和要配制的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度）时，可按公式计算出[盐]和[酸]的量。这样算涉及到对数的换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，经计算已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系列出了表格。讲义附录部分节录有磷酸缓冲液的配制表。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算处所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。 经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。 所以500ml 0.1M磷酸缓冲液需要Na2HPO4量为: 需Na2HPO4量为 : 计算好后，按计算结果称好药品，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入50ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，便得所需的缓冲液。 各种缓冲溶液的配制，均按下表按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确的浓度才能进行，如醋酸、NaOH等 常用体系 1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M） X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200ml pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml 2.2 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0
53种常见缓冲液配制方法 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5 mol/L醋酸溶液15.0 ml，加乙醇60 ml和水20 ml，用10 mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000 ml，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14 g，加水800 ml，搅拌溶解，并稀释至1000 ml，用6 mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294 g，加0.2 mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40 ml使溶解，用1 mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100 ml，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06 g，加盐酸赖氨酸3.65 g、氯化钠5.8 g、乙二胺四醋酸二钠0.37 g，再加水溶解使成1000 ml，调节pH值至9.0，即得。 乌洛托品缓冲液取乌洛托品75 g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2 ml，再用水稀释至250 ml，即得。 巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42 g，加水使溶解并稀释至400 ml，用2 mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52 g与巴比妥钠30.9 g，加水使溶解成2000 ml，即得。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05 g，加氯化钠3.7 g及水适量使溶解，另取明胶0.5 g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2 mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.8，再用水稀释至500 ml，即得。 甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2 mol/L甲酸溶液25 ml，加酚酞指示液1滴，用2 mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2 mol/L甲酸溶液75 ml，用水稀释至200 ml，调节pH值至3.25～3.30，即得。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10 g，加水900 ml，搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000 ml，混匀，即得。 枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸4.2 g，加1 mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40 ml使溶解，再用20％乙醇稀释至100 ml，即得。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2，即得。
实验一缓冲溶液的配制和性质、溶液pH值测定 【实验目的】 1.学习缓冲溶液及常用等渗磷酸盐缓冲溶液的配制方法。 2.加深对缓冲溶液性质的理解。 3.强化吸量管的使用方法。 4.学习使用pHS-2C型酸度计。 5.培养环境保护意识。 【预习作业】 1.一般性溶液与缓冲溶液有什么不同？ 2.缓冲溶液的性质有哪些？ 3.如何衡量缓冲溶液的缓冲能力大小？缓冲溶液的缓冲能力与什么因素有关？ 4.实验是如何设计以验证缓冲溶液所具有的性质及缓冲容量的影响因素的，设计时有哪些注意事项？ 5.该如何检测缓冲溶液的pH值是否发生改变？是否均需要用pH计？ 6.本实验属定量测定还是定性测定或半定量测定？ 【实验原理】 普通溶液不具备抗酸、抗碱、抗稀释作用。 缓冲溶液通常是由足够浓度的弱酸及其共轭碱、弱碱及其共轭酸或多元酸的酸式盐及其次级盐组成的，具有抵抗外加的少量强酸或强碱、或适当稀释而保持溶液pH值基本不变的作用。 本实验通过将普通溶液和配制成的缓冲溶液对加入酸、碱或适当稀释前后pH数值的变化来探讨缓冲溶液的性质。 根据缓冲溶液中共轭酸碱对所存在的质子转移平衡： HB? B－+H3O+ 缓冲溶液pH值的计算公式为： 式中p K a为共轭酸解离常数的负对数。此式表明：缓冲溶液的pH值主要取决于弱酸的p K a 值，其次决定于其缓冲比。 需注意的是，由上述公式算得的pH值是近似的，准确的计算应该用活度而不应该用浓度。要配制准确pH值的缓冲溶液，可参考有关手册和参考书上的配方，它们的pH值是由精确的实验方法确定的。 缓冲容量（β）是衡量缓冲能力大小的尺度。缓冲容量（β）的大小与缓冲溶液总浓度、缓冲组分的比值有关。 缓冲溶液总浓度越大则β越大；缓冲比越趋向于1,则β越大，当缓冲比为1时，β达极大值。 实验室中最简单的测定缓冲容量的方法是利用酸碱指示剂变色来进行判断的。例如：本实验就使用了甲基红指示剂。 颜色红色橙色黄色医学上常用PBS(等渗磷酸盐缓冲盐水)作为体外细胞缓冲培养液。PBS是与人体血浆渗透压(280～320mOsmol·L-1)等渗，并与人体血液pH值(7.35～7.45)一致的含有NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4等物质的磷酸盐缓冲液。根据不同用途，PBS有不同的配制方法，如用于细胞培养的pbs配方为：8g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4，1.44g Na2HPO4，加水至800ml，用HCl调pH至7.4，补水至1L，消毒灭菌既得。
实验报告十 课程网络管理实验名称帧中继的配置 专业_ 数学与应用数学班级__双师1班_ __ 学号___105012011053 __ 姓名陈益梅同组姓名 实验日期：2014年6月17日报告退发(订正、重做) 一、实验目的 理解帧中继网络及其应用环境。掌握帧中继网络的配置。掌握静态路由/路由选择协议在帧中继网络环境中的使用。 二、实验内容 三、实验拓扑图及IP地址规划 PC机IP地址子网掩码网关 PC1 10.10.10.2 255.255.255.0 10.10.10.1 PC2 20.20.20.2 255.255.255.0 20.20.20.1 PC3 30.30.30.2 255.255.255.0 30.30.30.1
设备名接口名IP地址子网掩码网络号R1 f0/0 10.10.10.1 255.255.255.0 10.10.10.0 R1 S0/0/0 40.40.40.1 255.255.255.0 40.40.40.0 R2 f0/0 20.20.20.1 255.255.255.0 20.20.20.0 R2 S0/0/0 40.40.40.2 255.255.255.0 40.40.40.0 R3 f0/0 30.30.30.1 255.255.255.0 30.30.30.0 R3 S0/0/0 40.40.40.3 255.255.255.0 40.40.40.0 四、主要配置步骤 1、三台路由器接口分别配置ip地址。 Router(config)#hostname R1 R1(config)#int s0/0/0 R1(config-if)#ip address 40.40.40.1 255.255.255.0 R1(config-if)#no shutdown R1(config)#int f0/0 R1(config-if)#ip address 10.10.10.1 255.255.255.0 R1(config-if)#no shutdown Router(config)#hostname R2 R2(config)#int s0/0/0 R2(config-if)#ip address 40.40.40.2 255.255.255.0 R2(config-if)#no shutdown R2(config)#int f0/0 R2(config-if)#ip address 20.20.20.1 255.255.255.0 R2(config-if)#no shutdown
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 24 Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 ② 687·H2 柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12 ，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。 7．磷酸盐缓冲液
2 4·2H 2Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。 24·2H 2KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）
10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃） C HOCH2 NH2 分子量=121.14; 0. 1M 溶液为12.114克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 247·H 2硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
247·10H 2硼酸H 2BO 3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（ 0.05M ） 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根） 2 47·10H 2 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+22·10H 2
实验 3 广域网链路层协议配置实验 实验目的 掌握HDLC 、PPP 、FR 的配置 实验设备 Cisco 2621, Quidway 28系列路由器 实验概述 1. 实验环境 R A R B PC A PC B S0/0 S0/0 f0/0 f0/0 路由器各个接口的IP 地址设置如下： R A R B F0/0 202.0.0.1/24 202.0.1.1/24 S0/0 192.0.0.1/24 192.0.0.2/24 PC 机的IP 地址和缺省网关的IP 地址如下： PC A PC B IP 地址 202.0.0.2/24 202.0.1.2/24 Gateway 202.0.0.1/24 202.0.1.1/24
为了保证配置不受影响，请在实验前清除路由器的所有配置有重新启动（Cisco的路由器删除startup-config 文件，Quidway的路由器删除saved-config文件）。 2.实验步骤 1）配置路由器的接口IP地址和主机地址，修改路由器名称为RA和RB； 2）在路由器的串口上配置HDLC协议，查看路由器的配置文件，并测试PCA和PCB之间的连通性； 3）在路由器的串口上配置无验证的PPP协议，查看路由器的配置文件，并测试PCA 和PCB之间的连通性； 4）在路由器的串口上配置PAP认证的PPP协议，查看路由器的配置文件，并测试PCA和PCB之间的连通性； 5）在路由器的串口上配置CHAP认证的PPP协议，查看路由器的配置文件，并测试PCA和PCB之间的连通性； 6）在路由器的串口上配置帧中继协议，查看路由器的配置文件，并测试PCA和PCB之间的连通性。 实验内容 1．配置HDLC协议，测试PCA和PCB之间的连通性，填写表1。 在端口状态下命令：link-protocol hdlc （Quidway命令) encapsulation hdlc （Cisco命令） 表1 实验步骤观察内容 显示路由器的串口状态Command: show interface s0/0 或：display interface s0/0 Serial0/0 is up, line protocol is down Hardware is PowerQUICC Serial Internet address is 192.0.0.1/24 MTU 1500 bytes, BW 2000000 Kbit, DL Y 20000 usec, reliability 255/255, txload 1/255, rxload 1/255 Encapsulation HDLC, loopback not set 测试PC1/PC2连通状态Command: ping Pinging 202.0.1.2 with 32 bytes of data: Request timed out. Request timed out. Request timed out. Request timed out. Ping statistics for 202.0.1.2: Packets: Sent = 4, Received = 0, Lost = 4 (100% loss), 2．配置无验证的PPP协议，测试PCA和PCB之间的连通性，填写表2。在端口状态下命令：link-protocol ppp（Quidway命令) encapsulation ppp （Cisco命令）
各种缓冲液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.8 3.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升 pH(20℃)X Y pH(20℃)X Y 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 5 5 5 5 5 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 3.2 3.4 3.6 3.8 5 5 5 5 1.470 0.990 0.597 0.263 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升）0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。 Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
实验二缓冲溶液的配制和性质 一、实验目的 1、学习缓冲溶液的配制方法，并试验其缓冲作用。 2.、学习并掌握pHS-3C 型pH 计的正确使用方法。 二、实验原理 弱酸及其共轭碱（如HAc-NaAc）的水溶液，或者弱碱和它的共轭酸（如NH3.H2O-NH4Cl）的水溶液，能抵抗外来的少量酸、碱或稀释的影响而使其pH 值保持稳定，具有这种缓冲作用的溶液叫缓冲溶液。对于弱酸及其共轭碱组成的缓冲溶液，其pH值的计算公式为： pH=pka+lg(C共轭碱/C酸) 对于弱碱及其共轭酸组成的缓冲溶液，其pH值的计算公式为： pH=PK w - pk b+lg(C碱/C共轭酸) 缓冲溶液的有效缓冲范围为pKa±1。 三、仪器和药品 仪器：pHS-3C 型精密pH 计 试剂：HN3.H2O（1.0 mol.L-l）、NH4Cl（0.1 mol.L-l）、HAc（0.1 mol.L-l；1.0 mol.L-l）、NaAc （0.1 mol.L-l；1.0 mol.L-l）、NaOH（0.1 mol.L-l）、HCl（0.10 mol.L-l）、标准缓冲溶液。 四、实验内容 1、缓冲溶液pH值的配制及其pH值的测试 按下表配制4种缓冲溶液，测定前将溶液搅拌均匀，分别插入擦洗干净的复合电极，测定其pH值，待读数稳定后，记录测定结果，并进行理论计算，将理论计算值与测定值进行比较。 2、试验缓冲溶液的缓冲作用 在上面配制的第4号缓冲溶液中加入0.5ml（约10滴）0.10mol/L HCI溶液，摇匀，用酸度计测定其PH值，再加入1.0 ml（约20滴）0.10mol/L NaOH溶液，摇
实验完成后，清洗电极，整理仪器。 三、设计和配制PH=3.9、PH=6.0的磷酸盐缓冲溶液和PBS缓冲溶液PH=3.9,配一个磷酸溶液（pH应该在1.8左右），用NaOH调到想要的pH即可 PH=6.0,0.2 Mol/L Na2HPO4（12.2ml） 0.2Mol/L KH2PO4（87.8ml） 五、思考题 1、怎样根据缓冲溶液的PH值选定缓冲物质？ 2、为什么在通常情况下配制的缓冲溶液中酸（或碱）的浓度与其共轭碱（或共轭酸）的浓度接近？这种缓冲溶液的PH值主要决定于什么？ 3、将10mL0.2mol.L-1 HAc和10mL0.1mol.L-1 NaOH混合，问所得到溶液是否有缓冲作用？这个溶液的pH值在什么范围内？
计算机网络技术实践 实验报告 实验名称实验三 RIP和OSPF路由协议的配置及协议流程 姓名____ ______实验日期： ____________________ 学号___________实验报告日期： ____________________ 报告退发： ( 订正、重做 ) 一.环境（详细说明运行的操作系统，网络平台，机器的IP地址）●操作系统：Windows7 ●网络平台：虚拟网络（软件Dynamips） ●IP地址：127.0.0.1 二.实验目的 ●在上一次实验的基础上实现RIP和OSPF路由协议 ●自己设计网络物理拓扑和逻辑网段，并在其上实现RIP和OSPF协议 ●通过debug信息详细描述RIP和OSPF协议的工作过程。 ●RIP协议中观察没有配置水平分割和配置水平分割后协议的工作流程； ●OSPF中需要思考为什么配置完成后看不到路由信息的交互？如何解 决？ 三.实验内容及步骤（包括主要配置流程，重要部分需要截图） ●设计网络物理拓扑和逻辑网段
编写.net文件 autostart = false [localhost] port = 7200 udp = 10000 workingdir = ..\tmp\ [[router R0]] image = ..\ios\unzip-c7200-is-mz.122-37.bin model = 7200 console = 3001 npe = npe-400 ram = 64 confreg = 0x2102 exec_area = 64 mmap = false slot0 = PA-C7200-IO-FE slot1 = PA-4T s1/0 = R1 s1/1 s1/1 = R2 s1/2
不同缓冲液的缓冲范围 pH缓冲液 六十一秒的常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理（2007年6月16日更新）（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 甘氨酸分子量＝75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 （二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 ①使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。 （六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L） NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。冰乙酸11.8 mL稀释至1 L（需标定）。 （七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
（八）磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L） Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。 （九）巴比妥纳-盐酸缓冲液 巴比妥钠分子量＝206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。 （十）Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L） 50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100
（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L □配制方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 pH值浓HCl 7.4 约70mL 7.6 约60mL 8.0 约42mL 4. 将溶解定容至1L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。 2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl （pH8.8）□配制量1L □配制方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调pH值至8.8。 4. 将溶液定容至1L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。 3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L □配制方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。 1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL 500 mM EDTA（pH8.0）20mL 2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。 3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。 4. 室温保存。
（pH5.2）□配制量100mL □配制方法1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。 2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。 3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。 4. 高温高压灭菌后，室温保存。 5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl，2.7mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4 □配制量1L □配制方法1. 称量下列试剂，置于1L烧杯中。 NaCl 8 g KCl 0.2g Na2HPO4 1.42 g KH2PO4 0.27g 2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 滴加HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。 4. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵 □配制量100mL □配制方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100～200 mL烧杯中，加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。 2.加去离子水将溶液定容至100mL。 3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。 4.密封瓶口于室温保存。 注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。 7、Tris- HCl平衡苯酚□配制方法 1. 使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。 2. 操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱
常见缓冲溶液配制方法 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml 使精品文档，你值得期待 溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。 乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过。 巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。 枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)：取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2。 枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0)：甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml 混合，摇匀。 氨－氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0。 氨－氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml。 硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0)：取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml。 硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀。 硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0)：取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L 氢氧化钠溶液210ml。 醋酸盐缓冲液(pH3.5)：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示)，用水稀释至100ml，即得。 醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0)：取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)：取醋酸钠5.1g，加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)：取无水醋酸钠20g，加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)：取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml，加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml，再加水稀释至1000ml。
常用缓冲溶液的配制方法 磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 24Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含35.01克/ 升。 C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。 pH 4.0 20mL ：Na2HPO4 0.219g + C4H2O7·H2O 0.258g 柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ） 6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。 pH 4.0 20mL ： C4H2O7·H2O 0.275g + Na3 C6H5O7·2H2O 0.203g
乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ） Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。 pH 4.0 20mL ：NaAc 0.098g + HAc 0.282mL 甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ） 甘氨酸分子量=75.07; 0.2M 溶液含15.01克/升。 pH 10.0 20mL ：甘氨酸0.075g + NaOH 0.013g 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+ 无水Na 2CO 2分子量=105.99;0.1M 溶液为10.60克/升。 Na 2CO 2·10H 2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为28.62克/升。 Na 2HCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。 pH 10.0 20mL ：无水碳酸钠 0.127g +碳酸氢钠0.067g
缓冲溶液 难题解析 [TOP] 例4-1 计算pH=5.00，总浓度为0.20 mol·L -1的C 2H 5COOH(丙酸,用HPr 表示)- C 2H 5COONa 缓冲溶液中，C 2H 5COOH 和C 2H 5COONa 的物质的量浓度。若向1 L 该缓冲溶液中加入0.010 mol HCl ，溶液的pH 等于多少？ 分析 ⑴ 用Henderson —Hasselbalch 方程式直接计算丙酸和丙酸钠的浓度。 ⑵ 加入HCl 后，C 2H 5COOH 浓度增加, C 2H 5COONa 浓度减小。 解 ⑴ 查表4-1，C 2H 5COOH 的p K a = 4.87，设c (HPr) = x mol·L -1。则c (NaPr) =（0.20-x ）mol·L -1 pH ＝p K a +lg Pr) (H )Pr (-c c =4.87+lg 1-1L mol L mol )20.0(??--x x =5.00 解得 x = 0.085 即c (HPr) = 0.085 mol·L -1 c (NaPr) = (0.20 - 0.085) mol·L -1 = 0.12 mol·L -1 ⑵ 加入0.050 mol HCl 后： pH ＝p K a +lg ) HPr ()Pr (-n n =4.87+lg 0.010)mol (0.0850.010)mol (0.12+-=4.91 例4-2 柠檬酸（缩写H 3Cit ）常用于配制供培养细菌的缓冲溶液。现有500 mL 的0.200 mol·L -1柠檬酸溶液，要配制pH 为5.00的缓冲溶液，需加入0.400 mol·L -1的NaOH 溶液多少毫升？ 分析 配制pH 为5.00的缓冲溶液，应选NaH 2Cit-Na 2HCit 缓冲系， NaOH 先与H 3Cit 完全反应生成NaH 2Cit ，再与NaH 2Cit 部分反应生成Na 2HCit 。 解 查表4-1,柠檬酸的p Ka 2= 4.77，设H 3Cit 全部转化为NaH 2Cit 需NaOH 溶液V 1 mL ⑴ H 3Cit(aq) + NaOH(aq)NaH 2Cit(aq) + H 2O(l) 0.400 mol·L -1 × V 1 mL = 0.200 mol·L -1 × 500 mL V 1 = 250 即将H 3Cit 完全中和生成NaH 2Cit ，需0.400 mol·L -1NaOH 溶液250 mL ，生成NaH 2Cit 0.200 mol·L -1 ×500 mL=100 mmol 设NaH 2Cit 部分转化为Na 2HCit 需NaOH 溶液V 2 mL ， ⑵ NaH 2Cit(aq) + NaOH(aq) Na 2Hcit(aq) + H 2O(l)
内蒙古商贸职业学院计算机系 学生校内实验实训报告 2011 --2012学年第一学期 系部：计算机系 课程名称：网络技术及产品应用 专业班级：10级计算机系网络技术班 内蒙古商贸职业学院计算机系制
填写说明 1、实验项目名称：要用最简练的语言反映实验的内容，要与实验指导书或课程标准中相一致。 2、实验类型：一般需要说明是验证型实验、设计型实验、创新型实验、综合型实验。 3、实验室：实验实训场所的名称；组别：实验分组参加人员所在的组号。 4、实验方案设计（步骤）：实验项目的设计思路、步骤和方法等，这是实验报告极其重要的内容，概括整个实验过程。 对于操作型实验（验证型），要写明需要经过哪几个步骤来实现其操作。对于设计型和综合型实验，在上述内容基础上还应该画出流程图和设计方法，再配以相应的文字说明。对于创新型实验，还应注明其创新点、特色。 5、实验小结：对本次实验实训的心得体会、思考和建议等。 6、备注：分组实验中组内成员分工、任务以及其他说明事项。 注意： ①实验实训分组完成的，每组提交一份报告即可，但必须说明人员分工及职责。不分组要求全体成员独立完成的实验实训项目可由指导老师根据个人完成情况分组填写。 ②实验成绩按照百分制记，根据教学大纲及课程考核要求具体区分独立计算、折算记入两种情况。 ③本实验实训报告是根据计算机系实验的具体情况在学院教务处制的实验实训报告的基础上进行改制的。特此说明。
成绩单 组别：小组成员：杨林林赵俊旭 次数实验实训项目名称成绩 1 交换机端口隔离 2 跨交换机实现VLAN 3 单臂路由 4 无线网络 5 创建ACL访问列表 6 路由器配置为帧中继交换机 7 IPV6路由 8 密码恢复技术 9 配置PPP及PAP认证 10 DHCP与NAT配置 总成绩
常用缓冲液的配制（TBS，PBS） 科研探索2007-04-23 13:25:54 阅读728 评论0 字号：大中小订阅 这是各种缓冲液的配制方法 1. 0.01MPBS(PH7.2)液 NaCl 8g Na2HPO4 1.15g KH2PO4 0.2g （NaH2PO4） 加双蒸水至1000ml 2. 0.05MTBS(PH7.4)液 Tris(三羟甲基胺基甲烷) 12.1g Nacl 17.5g 加双蒸水至1500ml 在搅拌下加浓HCL至PH7.4，再加双蒸水至2000ml。 3. 0.02MTBS（PH8.2）液 Tris 4.84g Nacl 17.5g BSA 2.0g NaN3 1.0g 加双蒸水至1500ml 在搅拌下加浓HCL至PH8.2，再加双蒸水至2000ml。 （BSA—牛血清白蛋白；NaN3—叠氮钠，为防腐剂）。 4. 0.05MTB液（PH7.6） 先配制0.05MTB液： Tris 60.75g 1N HCL 约420ml 双蒸水至1000ml 配制方法：先以少量双蒸水（300ml）溶解Tris，加入HCL后，再用1N HCL 或1N NaOH将PH值调至7.6，再加双蒸水至1000ml。 用时将0.5MTB稀释10倍，即为0.05MTB液（PH7.6）液 磷酸缓冲液(Gomori缓冲液)
最通用的磷酸盐缓冲液是以其发明者Gomori命名的。该缓冲液是由单价磷酸二氢盐和双价磷酸一氢盐的混合物组成的。通过变化每种盐的量，就可配制出pH 5.8至pH8.0之间缓冲液(见表A1-3A和A1-3。磷酸盐有很高的缓冲能力，在水中高度可溶。但是，它们也有不少潜在的缺点： ?磷酸盐缓冲液抑制许多酶促反应和步骤，而这些酶促反应和步骤恰恰是分子克隆的基础，其中包括许多限制酶对DNA的切割，DNA的连接和细菌转化等。 ?因为磷酸盐在乙醇中沉淀，不能用于沉淀DNA和RNA。 ?磷酸盐螯合像Ca2+和Mg2+这样的阳离子。 表A1-3A 25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制 pH 1 mol/L K2HP04的体积/mL 1 mol/L KH2PO4的体积/mL 5.8 8.5 91.5 6.0 13.2 86.8 6.2 19.2 80.8 6.4 2 7.8 72.2 6.6 38.1 61.9 6.8 49.7 50.3 7.0 61.5 38.5 7.2 71.7 28.3 7.4 80.2 19.8 7.6 86.6 13.4 7.8 90.8 9.2 8.0 94.0 6.0 注：根据Green(1933)的资料汇编。 用蒸馏水将混合的两种1mol/L的贮存液稀释至1000mL。根据Henderson-Hasselbaleh方程计算其pH值： pH=pK'+Log ，在此，pK'=6.86(25℃) 表A1-3B 25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制 pH 1mol/L Na2HPO4的体积/mL 1mol/L NaH2P04体积/mL 5.8 7.9 92.1 6.0 12.0 88.0 6.2 1 7.8 82.2 6.4 25.5 74.5 6.6 35.2 64.8 6.8 46.3 53.7