艾滋病筛查实验室标准操作规程血液样本的采集、编号、运 输、处理、保存 sop 版 本号：第五版 标准操作规程（SOP） 编号：DZJY/ZY450-01 题目：血液样本的采集、编号、运输、处理、保存 版本：第五版 作者：曲文才 日期：2010/05/20 页数：３ 联系人：曲文才 SOP 1 版本号：第五版 艾滋病筛查实验室标准操作规程血液样本的采集、编号、运 输、处理、保存sop
版本号：第五版 一、目的 确保样品的采集、运输、处置、保存得到有效的管理, 保证样品的良好、完整、不被 污染、且不污染环境, 样品在检测前保存完好、完整, 编号清晰。保证分析数据、血样 的准确性和具有可追溯性。 二、范围 适用于 HIV实验室样品的采集、运输、处置、保存。 三、责任 操作人员严格按要求执行。 四、定义 无 五、背景 本 SOP 是为配合 HIV实验室检测，现场样品从采集到检测前的工作而制定的, 以确保 检测样品良好、完整、不被污染、且不污染环境。 六、程序 1、采集 (1) 所需材料 : 乳胶手套, 工作服, 帽子, 口罩, 注射器, 止血带, 医用酒精棉球, 无菌棉签, 医用酒精, 碘伏, 采血枕, 一次性纸垫, 试管及试管架。 (2) 采血方法 : ●采血员洗手, 戴手套, 帽子, 口罩。 ●70% 酒精清洁采血工作台面, 铺上一次性纸垫。 ●在采血枕上铺上一次性纸垫。 ●让调查对象坐在凳子上, 露出一只胳膊直至上臂, 袖口不可过紧。 ●将胳膊放在采血枕上, 掌心向上, 用止血带在上臂扎紧, 肘部应低于心脏水平线。 ●在肘前区寻找鼓起的静脉，并且该静脉与周围组织固定良好，触摸该静脉，确认是静 脉。 ●用碘伏成同心圆状向外消毒, 不得用手接触己消毒部位。 ●用酒精成同心圆状向外消毒。 ●待酒精彻底干燥后, 让调查对象用力握拳。 ●沿血流方向, 以与前臂成 150°将针头插入静脉内。 ●血液流入采血管, 松开止血带, 让调查对象慢慢松开拳头, 待血液到达采血量要求 后, 将采血针头拔出的同时用无菌棉球按住采血伤口。 ●采血管编号后直立、按顺序插入试管架内。 ●嘱咐调查对象按住棉球 5 分钟以上, 抬起胳膊使之高于心脏水平 ; 将针头弃入金 属制容器桶, 一次性纸垫等放入垃圾桶。 (3) 血清采集 ●取静脉血3ml，室温放置2小时，待血液凝固、血块收缩后，3000rpm离心15分钟， 吸出血清备用，编号登记。 ●抗凝血样品采集：用注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管内，反复 SOP 2 版本号：第五版
昆虫标本的采集、制作及保存方法（全） 采集、制作及保存昆虫标本是从事农林昆虫学研究的基本技术。由于自然界的各种昆虫生活方式和环境各异，其活动能力和行为千差万别，有的昆虫形态也常模拟环境，因而必需有丰富的生物学和有关的采集知识，才能采得完好的所需标本。采集和制作大量标本后，还必须有科学的保管方法，使标本经久不坏。 第一节昆虫标本的采集方法 一、采集用具的构造和使用 （一）捕虫网是采集昆虫最常用的工具，按结构和用途不同，可分为以下四种类型。 1. 空网（图1） 用来采集蝴蝶、蜂类、蜻蜓等善飞的昆虫。网圈用粗铁丝弯成，直径约33cm，两端长出的末端弯成小钩，固定在网柄上。为了携带方便也可作成对折形。网柄长约1m，用木棍、竹竿制成。网袋用透气、坚韧、淡色的尼龙纱、珠罗纱、纱布等制成。网的长度应超过网圈直径的一倍。袋底略圆，以利于将捕获的昆虫装进毒瓶。袋口用布镶边，内穿网圈。 图1 捕虫网 1. 空网的装置 2. 网圈连接网柄的方法 3. 网袋的裁制 4. 可拆卸、折叠的网圈 2. 扫网制作方法与空网相同。但因用来扫捕树丛、杂草丛中隐蔽的昆虫，因而要用较结实的白布或亚麻布制作网袋，网框、网柄都要选择坚固的材料，以承受网扫时较大阻力。扫网的网底也可做成开口式，用时将网底扎住，网扫后打开网底，可将昆虫直接倒入容器或毒瓶。 3. 刮网（图2）在树皮上采集昆虫时，可用粗铝丝作架，前面连接上一段有弹性的钢条，缝上白布的网袋，底端可捆扎上个小瓶，以便接虫。 4. 水网（图3）用来采集水生昆虫。根据水域深浅，河、溪的宽狭，水草的稀密及所采的昆虫种类来选择网的规格和种类。作水网的材料要坚固耐用，用
尿液标本的收集、保存与处理 一、尿液标本收集 为保证尿液检查结果的准确性，必须正确留取标本。收集容器要求：①清洁、干燥、一次性使用，有较大开口便于收集；②避免阴道分泌物、月经血、粪便等污染；③无干扰化学物质（如表面活性剂、消毒剂）混入；④有明显标记的如病人姓名、病历号、收集日期等，并必须粘贴在容器上；⑤能收集足够尿液，最少12ml，最好超过50ml，如收集定时尿，容器应足够大，并加盖，必要时加防腐剂；⑥如需培养应在无菌条件下，用无菌容器收集中段尿液。 尿标本收集后应及时送检及检查，以免发生细菌繁殖、蛋白变性、细胞溶解等。尿标本也应避免强光照射，以免尿胆原等物质因光照分解或氧化而减少。 二、尿标本种类 按检查目的，常可采用下列标本： 1．晨尿即清晨起床后的第一次尿标本，为较浓缩和酸化的标本，血细胞、上皮细胞及管型等有形成分相对集中且保存得较好，也便于对比。适用于可疑或已知泌尿系疾病的动态观察及早期妊娠试验等。但由于晨尿在傍胱内停留时间过长易发生变化。因此有人推荐用清晨第二次尿标本检查来取代晨尿。 2．随机尿（随意一次尿）即留取任何时间的尿液，适用于门诊、急诊患者。本法留取尿液方便，但易受饮食、运动、用药等影响，可致使浓度或病理临界浓度的物质和有形成分漏检，也可能出现饮食性糖尿或药物如维生素C等的干扰。 3．餐后尿通常于午餐后2小时收集患者尿液，此标本对病理性糖尿和蛋白悄快活的检查出更为敏感，因餐后增加了负载，使已降低阈值的肾不能承受。此外由于餐后肝分泌旺盛，促进尿胆原的肠肝循环，而餐后机体出现的碱潮状态也有利于尿胆原的排出。因此，餐后尿适用于尿糖、尿蛋白、尿胆原等检查。 4．3h尿收集上午3小时尿液，测定尿液有形成分，如白细胞排出率等。 5．12h尿晚8时排空傍胱并弃去此次的尿液后，留取至次日晨8时夜尿，作为12小时尿有形成分计数，如Addis计数。 6．24h尿尿液中的一些溶质（肌酐、总蛋白质、糖、尿素、电解质及激素等）在一天的不同时间内其排泄浓度不同，为了准确定量，必须收集24小时尿液。于第一天晨8时排空膀胱，弃去此次尿液，再收集至次日晨8时全部尿液，用于化学分的定量。 7．其它包括中段尿、导尿、耻骨上膀胱穿刺尿等。后两种方法尽量不用，以免发生继发感染。尿标本收集的类型、分析项目、应用理由及注意见表5-1。
血液标本的采集和冻存 一、全血收集 请按照实际使用的收集方法，如注射器收集或真空收集管等，参考相应的厂商提供产品说明进行操作。采集好全血，将采集好的全血转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，可放入液氮。 二、血浆收集为获得血浆进行实验，应使用抗凝管采集全血，并尽快进行血浆分离：1000g离心10分钟，分离血浆和细胞组分。将采集好的血浆转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，可放入液氮。 注：血浆收集应使用抗凝管，抗凝剂可以用柠檬酸钠或EDTA等，但一定不要使用肝素抗凝，因为肝素对RNA实验有较大影响。 三、血清收集为获得血清进行实验，应使用凝血管采集全血，采血后两小时内分离血清。采血后轻轻倒转采血管混合4~5次，直立置于室温待血液完全凝固（一般约一小时），1000g离心10分钟，分离血清。将采集好的血清转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，可放入液氮。 四、血清、血浆和全血样本的保存和运输 → microRNA芯片检测血清、血浆或全血标本约需要1~2ml的量（即每份样品2~4管，每管3-5ml）。→在样品保存及转移的过程中，应避免反复冻融样品。 注：保存血清，血浆或者全血所使用的1.5 ml冻存管或离心管，操作中使用的枪头等必须高温灭菌，装好样品后管口需要以封口膜封好。 五、血细胞采集：因外周血成熟红细胞无细胞核，通常只采集白细胞（主要用于DNA检测），且需用红细胞裂解液裂解或低渗法并去除红细胞，避免其影响结果。（一）低渗法去除红细胞试验步骤： 1、取人肘静脉血5ml，EDTA抗凝，2500rpm离心10min。 2、小心吸取上层血浆，分装到3个0.5ml离心管中。 3、在血细胞中加入3倍体积的溶血液，摇匀，冰浴15min。 4、2500rpm离心10min，弃上清。 5、加入10ml溶血液，摇匀，冰浴15min。 6、3000rpm离心10min，弃上清。 7、倒置离心管，去掉残液。 8、得白细胞，－80C冻存。 试验要求：采血至分离白细胞之间隔时间在室温下放置不超过2h，4℃放置不超过5h，以防白细胞自溶。 （二）裂解液法去除红细胞方法： 1.新鲜抗凝血，离心弃去上清液； 2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液，按1:6-10的比例向细胞沉淀中加
读《先进的昆虫学技术》和《收集和保存昆虫的技术与方法》有感阅读了这两篇关于昆虫采集和保存的文章后确实获益匪浅。多数人会采集他们所能见到的一些昆虫，而作为高校大学生的我们一般要求采集尽可能多的种群。面对如此多样的采集对象和如此繁杂的采集工具和方法，应该用什么采集？怎么采集呢？一般说来，标本采集的时间、地点、数量以及龄期等都需要按照采集目的确定。现将采集昆虫时涉及较多的基本工具和方法简要介绍如下： 一捕虫工具 1.1 捕虫网 目前利用较多的采虫工具是捕虫网，由于采集的对象和目的不同, 捕虫网又可分成捕网（主要捕捉空中飞行或悬停在枝叶端的昆虫,如蝴蝶、蜂和蜻蜓）、扫网（用于捕捉杂草、灌丛中隐蔽不易发现的各种昆虫, 如甲虫）、水网（用于采集水面及水中昆虫）和刮网（用于采集树干、树皮下的昆虫）等。由于实验中捕网应用较广，下面就将捕网的制作方法简要介绍如下： 捕网由网袋、网圈和网柄三部分组成。网袋一般做成直径30-38cm的圆锥形体，网袋除了必须通风、阻力小以外, 还要保证材料轻便、柔软、耐用和颜色较浅。网圈一般用8号铅丝、铜丝、钢丝或纲条弯成直径80cm的圆形,一端留出12cm, 另一端留出10cm的长度, 分别相向折成直角。两端的终端2cm处再弯成直角, 以便插人网柄。为便于携带可把网圈截成2-3段,接处用铆钉或铁箍箍住,制成折叠式。网柄以松木、竹等轻体材料制成。一般直径19mm,长度105-140cm为适宜, 表面饰漆, 以防虫蛀及干裂。另外由于捕捉不同的昆虫, 捕网构造也可改变。如捕捉蝴蝶的网圈口径要再大些, 网柄要长些。 1.2 毒瓶 采到昆虫后，有时需要及时放入毒瓶内杀死。常用的毒瓶一般选用质量较好的磨砂广口瓶，瓶口一定要严紧且瓶盖不易脱落，这样毒气才不致外溢，才能保证使用安全。另外也可以利用罐头玻璃瓶加配塑料盖来制作毒瓶。一般毒瓶的制作有两种方法：专业采集用的毒瓶，常使用氰化钾做毒剂，这种毒瓶的毒力特别强，昆虫入瓶后即可迅速致死。由于该种毒剂有剧毒，所以在制作、使用以及保管等方面要特别注意安全。例如，在瓶外连同瓶底加粘一层胶布或透明胶带防护，可以更加安全耐用。为携带方便，常在毒瓶体外配装背带。 一般采集昆虫用的毒瓶，其毒剂是多种多样的，有用脱脂棉蘸上适量乙醚或醋酸乙烷作毒剂，放在瓶底，上面盖一块硬纸板或薄塑料板，板上穿些小孔，使用起来也有毒效。适于
精心整理 : 系统逐个扫 并按检验项 然后 1.2、验证：进入各实验室的样本在进行操作前,工作人员应再次认真查对姓名,联号,住院号,病区床号,项目等对不符合要求者应作记录,并及时通知采样科室,正确及时地补采样,以免延误病人的检测结果报告,对书写不清楚的申请单,当事者要及时与病房联系(可电话),明确受检者姓名,住院号,性别,年龄,病区,床号和检验项目等。
1.3、转送：在查对过程中一旦发现有其他实验室(包括病理科)或本科各实验室的样本,要提高责任性,及时地转送(可电话通知)有关实验室(尤其是争论急诊项目)切勿延搁样本,延误检测,影响检验结果和报告时间,对人为造成的样本遗失,漏检和由之延误检测违反承诺限时报告引起病人纠纷和投诉,将追究当事者和当事实验室责任。 急诊标本及各病房零散标本：由采血室人员登记并转送相关实验室 1.4、外单位送检：外单位送检的样本,一律登记后,再转交各实验室检测,报告结果由检测者传真发 出或由服务台人员转发。 1.5 收集,对超时样本要求(急诊样本除外), 1.6 ,对采样 困难者要主动跟踪样本, 1.7,要随时登记和交班,以免漏检,遗失和 延误检验,,一律追究责任。对特殊样本或 ,所谓特殊样本是指难于采集的样本,以及特殊病人的样本一律实行"首接"(包括进修生和实习生,违者根据实际情况分别追查当事者或带教老师责任)一旦收到样本后,均须负其责任,不得以任何借口推托,及时和正确保管和转送样本到有关实验室或有关人员,同时作交班记录和双签名。 2、样品使用 2.1.将当天送来的标本，根据编号的基本原则，给当天的标本编好号，每个样本的每个检测项目对应一个唯一的编号。 2.2.每张单和对应的样品管上条码号标记相同。
临床标本采集与运送规范 检验标本包括血液标本和其他各种体液标本。检验标本的采集是保证检验结果准确的前堤，要求规范采集并正确送检，特制定本规范。一、尿液标本的采集规范 (一)尿常规检查标本 1、使用清洁干燥容器，住院病人以清晨第一次尿为主，门、急诊患者可随时留取新鲜尿液约20ml送检。 2、尿标本应避免经血、白带、类使等混入。 3、标本留取后及时送检，不得超过1小时，以免细菌在尿中生长繁殖。 (二)尿培养标本 1.需留取清洁中断尿，注意无菌操作，避免污染。 2.病人先清洗外阴部，自行排尿，排尿过程中尿液不要中断，弃前段尿，用无 菌管接中断尿，塞好瓶塞后立即送检。 3.患者应停用抗生素三天后作尿培养检查。 4.尿中应加入防腐剂。 (三) 24小时尿标本 1、准备清洁干燥带盖的广口容器，容量为3000-5000mL。 2、病人于晨7时将尿全部排尽弃去，然后开始留尿，将24小时内历次所排尿液均留于容器中，包括次日晨7时所排最后一次尿。 3、测量尿液总量(mI)并记录，将全部尿液充分混均后，取出20- 50m1，
置于清洁干燥有盖容器中立即总检。 4、若天气炎热，可根据检验要求放入适量的防腐剂。 二、血液标本采集规范 1、理想的采集血标本的时间是早晨7: 00~8 : 00。 2、采集血液标本的真空采血管与容器注射器应干燥，针头不能过细， 3、血培养标本应在发热初期或发热高峰期采血。一般要求选择在应用抗生素治疗前采血，对已用药而不能终止的患者，也应在下次用药之前采血。 4.采血部位和数量成人首选肘部血管:正中静脉、贵要静脉、头静脉等，婴幼儿可采用大隐静脉、颈外静脉、股静脉等。 5、禁止在静脉输液的同侧肢体采集血标本。 6、采集血液标本时应根据检验日的及要求，准确采集标本量。 7、分装血液标本时应取下针头，将血液沿试管壁缓慢推入试管或其他相应容器。 8、对于抗凝的标本，要温和地使血液与抗凝剂混匀，防止剧烈摇动使细胞损伤。 9、标本送检:血液标本采集后应及时送检，血气分析应在30min内检测，慢则会因为全血中RBC的代谢，不断地耗02产生CO2，致使pHPO2降低PCO2 升高，而影响结果的准确性 血标本采集后应尽快送检，时问最好不超过2 h ①建立标本传送系统，加强对送检人员的培训、教育及监督。
实用帖｜血液样本的采集与保存 在脊椎动物中，外周血一直被认为是侵害性较小、富有价值的检测样本。在许多生物样本库中，由于血液样本的常规收集、处理及保存方法简便、成本低且富含可利用成分和生物分子，因此是进行多种项目分析的理想实验材料。然鹅，科研僧们历经千辛万苦最后发现获得的血液样本RNA降解了。。。。额，这就很惆怅了。 所以呢，在样本采集、处理及储存过程中必须格外注意，从根本上确保获得高质量的RNA。 今天小编和大家一起来聊一聊在进行RNA实验时血液样本如何进行收集与保存。 血液的组成 首先来熟悉一下血液的组成。 人类的血液由血浆和血细胞组成。其中血浆约占血液的55%，是水，糖，脂肪，蛋白质，钾盐和钙盐等的混合物。血细胞约占血液的45%，主要分为红细胞、白细胞和血小板。而哺乳动物成熟的红细胞和血小板是无核的。
血浆和血清 血浆是离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，其中含有纤维蛋白原，不含游离的Ca2+，若向血浆中加入Ca2+，血浆会发生再凝固。 血清是离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体，其中已无纤维蛋白原，但含有游离的Ca2+，血清中少了很多的凝血因子但多了很多的凝血产物。
采血管的选择 采血管，大家都不陌生，去医院抽个血，一定会用到采血管，那么问题来鸟，这么多颜色的采血管，有什么区别呢？下面小编来给大家介绍一下采血管的分类及不同颜色试管帽代表的含义。 1.蓝色头盖管（含有柠檬酸钠抗凝剂的采血管） 2.黑色头盖管(含有 0.109mol/L 柠檬酸钠) 3.紫色头盖管(含有乙二胺四乙酸以及其盐的采血管) 4.绿色头盖管（肝素抗凝管） 5.灰色头盖管(含有草酸钾/氟化钠） 6.橘红色头盖管（促凝管） 7.金黄色头盖管（含有惰性分离胶及促凝剂的采血管）
生物化学检验室标本处理与保存 一、ISO15189相关条款： 5.4 检验前程序 5.4.5 原始样品应可追溯到具体的个体（通常由检验申请表）。实验室不应接受或处理缺乏正确标识的原始样品。 若原始样品识别方式不确定或原始样品中的被分析物不稳定（如脑脊液、活检标本等），及原始样品不可替代或很关键，实验室可选择先处理样品，待申请医师或采集原始样品者承担识别和接受样品的责任和/或提供适当的信息后再发布结果。这种情况下，负责识别原始样品者宜在申请表上签字或可被追溯至申请表。无论何种原因，若在无法满足上述要求的情况下进行了检验，宜在报告上明确责任人。留待进一步检验（如病毒抗体，与临床症状有关的代谢产物）的样品也宜同样标识。 5.4.6 实验室应监控样品运送到实验室的过程，样品运送应符合如下要求： a) 根据申请检验项目的性质和实验室相关规定在一定时间内运达； b) 在原始样品采集手册规定的温度范围内运送并使用指定的保存剂以保证样品的完整性； c) 应以确保对运送者、公众及接收实验室安全的方式运送，并应遵守国家、区域和地方法规的要求。 5.4.7 应在接收记录簿、工作记录单、计算机或其他类似系统中对收到的所有原始样品进行记录。应记录收到样品的日期和时间，同时应记录样品接收者的标识。 5.4.8 应制定有关接受或拒收原始样品的标准并文件化。如果接受了不合格原始样品，应在最终报告中说明问题的性质，如果适用，在解释结果时也应说明。 5.4.9 实验室应定期评审静脉穿刺取血（及取其他样品如脑脊液）所需的样品量，以保证采样量既不会不足也不会过多。 5.4.10 被授权者应对申请和样品系统地评审，并决定所做检验项目及所用检验方法。 5.4.11 如适用，实验室应对接收、标记、处理和报告其所收到的有特殊紧急标记的原始样品的程序文件化。程序应包括对申请表和原始样品上所有特殊标记的详细说明、原始样品送达实验室检验区的机制、应用的所有快速处理模式和所有应遵循的特殊报告标准。 5.4.12 取自原始样品的部分样品应可追溯至最初的原始样品。 5.4.13 实验室应有针对口头申请检验的书面政策。 5.4.14 样品应于规定的一定时间内在保证其性状稳定的条件下保存，以能在出具结果报告后复检或做附加检验。 二、程序文件 JY/CX/022 样本管理程序 【标本的接收和拒收】 4.6 合格标本 4.6.1 合格标本条件包括但不限于以下方面：①检验申请明确，内容完整：检验申请必须符合JY/CX/020《检验申请单管理程序》要求，同时必须有采样者签名。②标识清楚正确：有双标识及采样时间；标识粘贴端正；标本标识内容与申请单符合。③标本送达时间：采样后在规定时间内送检，采样后必须立即送检的常规项目：血氨、血气分析、乳酸以及各种细菌培养；采样后0.5小时内送检的常规项目：血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、真菌、疟原虫检查等。
干制标本制作 干制标本是指以干燥方法制成的标本，其优点是制做简单，勿须其它溶液或容器保存，但干制标本由于脱水容易收缩变形，且容易虫蛀霉变。现以昆虫成虫为例对干制标本加以说明。 （一）采集昆虫 1.使用工具 捕虫网：活泼的昆虫一般适宜用网来捕捉。所以采集昆虫必须要有捕网、扫网及水网。捕网通常用纹帐或白尼龙纱制成网圈，用粗铁丝制成环形，直径约30厘米左右，底袋呈圆锥形。网柄长约1米左右。扫网主要适于在草丛中捕捉昆虫。可用麻布或亚麻布制成，比捕网略小一些。网柄要短（长约一尺半左右）而粗，网要坚固。此外，扫网是网底开。水网和捕网大致相同，但是用细布制成，并且网比较浅，而网柄较长。 毒瓶：采集时，一般应带两个毒瓶，一个瓶毒杀蝴蝶及蛾类昆虫，另一瓶毒杀其它类的昆虫。毒瓶可用直筒形瓶制成，也可用广口瓶或平底试管等制成。毒杀剂可采用氰化钠或氰化钾等，也可用敌敌畏、氨水、乙醚等。 三角纸包：外出采集，采到昆虫不能立即做成标本，可先用三角纸包包好，编号记载后，带回驻地或学校制做。三角纸包的大小可由昆虫的大小决定。取较柔软难透水的纸一张折成三角袋。 采集箱：野外采集时，有些标本需要当时就进行针插，所以要有一个放标本的盒子。一般用保存针插标本的木标本盒就可以，另外也可以用轻的木料作成采集箱（见图7）。箱盖和箱底高度一样（约4厘米），都贴上软木板便于插标本。箱的大小关系不大，也可分为几格放其它物品，除针插标本外，可把纸三角袋和纸包标本放在箱内，以免压坏。 2.采集昆虫的方法 网捕：网捕主要用来捕捉会飞的昆虫，或停在植物上的昆虫。网捕的方法如下：当昆虫飞来，迎面用网捕捉，当虫子入网后，使网底向上甩，连虫子同网底一齐翻到上面来，然后再用手或试管伸入网内将虫子取出来。 扫捕：此法主要用在大片的草丛和茂密的灌木中。当采集者走到茂密的藏有虫子的草丛中时，用扫网在上面左右摆动，一面扫一面前进，将有许多小虫子集中到网底，或者被甩入网底，连接着胶管中。尤其在途中采集而时间仓促的时候，边扫边走也可以得到许多标本。 灯光诱集：夜间，灯下会有许多昆虫飞来，停在窗上，墙上，或绕灯而飞，所以在灯下常常能采到许多昆虫标本。方法如下：野外采集可以临时拉线挂一盏200瓦电灯或点一盏汽油灯，在灯的后面张开一块白布，下面用石头压住。这样可以诱来非常多的各种昆虫，最多的是大小不一的蛾类，它们多停在白布上。这时，只要多备几个毒瓶就可以大量收集昆虫。 （二）制作标本 1.标本制作前需要准备的工具
标本采集、送检、运送、接收、处理、保存和销毁 规程 1、目的 保证标本采集到贮存过程符合本实验室检测及法律法规的要求,保证标本质量。 2、适用范围 本站血液检测标本、检测留样标本及临床送检标本。 3、职责 采血人员或相关工作人员负责标本的采集、送检、运送和交接;血库工作人员负责血液检测样本的临时接收和暂存;检验人员负责标本的接收、处理、保存和销毁;办公室负责组织检验科业务人员对标本采集人员进行相关培训。 4、作业步骤 4.1样本采集要求: 4.1.1:知情同意:标本采集应征得献血者知情同意,内容包括:告知采集(留取)标本量,以及用途(仅用于本站血液检测)。 4.1.2:采集: a.初筛检测样本:采集前严格核对献血者和登记表,抽取1-2ml 的献血者血液于含饱和EDTA-Na2 /K2抗凝剂50ul的普通塑料试管中或含有抗凝剂的真空管中。贴好与献血者登记表一致的献血序列码。 b.献血后血液检测样本:
(1)留取要求:献血者献血后采集人员从血袋/留样袋中留取双份 血样用于实验室的一检和二检,两支血样试管,一支为含分离胶的促 凝真空管(黄盖),应先留取(不能混入血袋中保养液),另一支为EDTAK2抗凝真空管(紫盖),每支试管留取3-5ml血液,留取后立即轻轻上下颠倒至少3次与抗凝剂/促凝剂充分混匀,贴上与献血登记表、血袋标识条码一致校验码为07的献血序列码。 (2)序列码粘贴要求:序列码粘贴不歪斜、无褶皱,沿负压管盖下竖直粘贴,血型标识向上,条码清晰; (3)校对要求:一次只对一袋血液和同源样本进行贴签留样;所留 标本必须按规程进行操作,并经过Spring采血管理模块对采血袋、登记表和标本管三个序列号一致后方可进入下一流程。 (4)临时储存:血液标本留取结束后及时放在2-10℃环境中保存。 c.临床送检标本要求: (1)疑难血型鉴定及交叉配血:使用一次性真空采血管采集受检者血样6-10ml,一支EDTA-K2抗凝,另一支未抗凝,每支3-5ml。标识清楚,贴有与申请单一致的序列码,申请单注明被检者姓名、性别、年龄、临床诊断,病史及检测项目等信息,48h内采集。 (2)新生儿溶血病检查样本:使用一次性真空采血管采集母亲和新生儿血样各1-2ml,EDTA-K2抗凝(紫盖)。标识清楚,贴有与申请单一致的序列码,申请单注明被检者姓名、性别、年龄、临床印象及住院号床号等信息。于4℃保存72小时内检测。 4.2运输要求:
微生物标本采集、送检及处理原则 一、标本采集的一般原则： 1、病程早期、急性期或症状典型时，使用抗生素前。 2、无菌采集应无污染，严格进行无菌操作。 3、根据目的菌的特性用不同的方法采集适量标本，采集量不应过少。 4、注意在不同病程采集不同部位标本。 5、采集标本时要防止传播和自身感染。 二、标本的处理： 1、标本保存在4℃环境中，在2h之内送检。脑脊液则要在25 ℃保存，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h。对环境敏感的细菌应保温并立即送检。 2、标本中可能含有致病菌，必须注意安全防护。切勿污染环境。对于烈性传染病标本运送时更要由专人运送，严格按规定包装。 3、厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送。 Ⅰ血液及骨髓标本： 血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法。如从患者血液中检出细菌，一般应视为病原菌。 常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球菌、链球菌（A、B群、肺炎链球菌等）、肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、伤
寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等。 1、采血时间及次数 2、抽血部位及抽血量 3、报告方式：培养5d无菌生长者报告“培养5d无菌生长”。 查见细菌报告菌名和药敏结果。 4、菌血症、败血症的诊断标准：1）两次培养均出现同一种细菌（可排除污染）； 2）发病星期后血中抗体滴度上升。 Ⅱ脑脊液标本： 脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有重要价值。正常人的脑脊液是无菌的，检出细菌提示有细菌性（急性化脓性、结核性等）脑膜炎。 常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、链球菌（A、B群和肺炎链球菌）、葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等。 1、涂片检查： (1) 一般细菌涂片检查：例如：革兰阴性、凹面相对的球菌，可能是脑膜炎奈瑟菌；链状排列的革兰阳性球菌；长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌，可能是流感嗜血杆菌。 (2)结核分枝杆菌涂片检查 (3)新生隐球菌涂片检查
血液标本的收集和保存方法 说明：一般建议用新鲜的血液标本进行实验。如果标本已经保存较长时间，请联系康成公司技术部，以确认样本是否适合进行实验。 一、 全血收集 请按照实际使用的收集方法，如注射器收集或真空收集管等，参考相应的厂商提供产品说明进行操作。采集好全血，将采集好的全血转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，请放入液氮。 二、 血浆收集 为获得血浆进行实验，应使用抗凝管采集全血，并尽快进行血浆分离：1000g离心10分钟，分离血浆和细胞组分。将采集好的血浆转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，请放入液氮。 图片来源：Exiqon ‘ Quantification of MicroRNA expression in Blood Plasma/Serum Samples’ 注意：血浆收集应使用抗凝管，抗凝剂可以用柠檬酸钠或EDTA等，但一定不要使用肝素抗凝，因为肝素对RNA实验有较大影响 三、 血清收集 为获得血清进行实验，应使用凝血管采集全血，采血后两小时内分离血清。采血后轻轻倒转采血管混合4~5次，直立置于室温待血液完全凝固（一般约一小时），1000g离心10分钟，分离血清。将采集好的血清转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，请放入液氮。 四、 血清、血浆和全血样本的保存和运输 → microRNA芯片检测血清、血浆或全血标本约需要1~2ml的量（即每份样品2~4管）。 →在样品保存及转移的过程中，应避免反复冻融样品。 →运输过程必须使用足量干冰保证始终低温。干冰量至少为8公斤（足量），且运输用厚壁泡沫箱，且需用封箱带密封。 注： 保存血清，血浆或者全血所使用的1.5 ml冻存管或离心管，操作中使用的枪头等必须高温灭菌，装好样品后管口需要以封口膜封好。
临床常见微生物标本的采集与运送 唐玉英 正确的标本采集，运送，保存和处理对于微生物检验工作质量至关重要，为了准确检出病原菌，避免漏检与误诊，临床医护人员和实验室工作人员应掌握微生物标本的选择，采集，运送，保存及处理的一般原则。 一标本采集的一般原则 1.早期采集采集时间最好在病程早期，急性期，且必须在使用抗菌药 物之前采集，确保病原菌的检出。 2.无菌操作采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近或皮肤黏膜正 常菌群的污染，使病原菌与正常菌群混淆，造成临床误诊。采集的标本 应存放在无菌容器内，容器不能使用消毒剂处理，标本中也不能添加防 腐剂，以免降低病原菌的检出。 3.适量的标本标本量过少可能导致假阴性结果。 4.适当的采集方法对于厌氧菌，需氧菌或兼性厌氧菌的采集方法是不 同的，用于厌氧菌培养的标本应尽量用注射器采集抽取物，室温保存， 不能冷藏和冷冻。 5.盛放标本的容器采集标本应存放在无菌，防漏，应带有螺旋盖的容 器内。 二标本的运送 1.标本采集后立即送检，若有延迟也应在2小时内送到实验室，否则会 影响病原菌的检出，一般性的细菌培养标本若需延迟送检时，应置于4 度冰箱保存，且不能超过24小时。 2.临床标本最佳运送时间取决于标本的量，少量液体（小于1ml）或组织
（小于1cm3）应在15~30分钟内送到实验室，较多量的标本置于运送培养基中可放12~24小时，厌氧培养标本原则上是床边接种，如延迟送检，需保存在厌氧运送培养基中，室温保存，不得超过24小时。 三不同标本的采集，运送 （一）血液标本采集，运送 1.血培养指针当患者出现：发热（大于38度）或低温（小于36度），寒战，白细胞增多,皮肤黏膜出血，休克，多器官衰竭，血压降低，c反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，具备上述一种或几种体征时，临床怀疑菌血症应采集血液标本进行血培养，对入院危重感染患者应在未使用抗菌药物治疗前，及时做血培养。 2.对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。必须同时或间隔短时间内采集２套以上血培养标本。成年患者：推荐同时采集２－３套（不同部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本），采血量每瓶不少于5ml;婴幼儿患者：推荐同时采集２次（不同部位）血培养标本,采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）.在采取血培养后的2—5天内，无需重复采取血培养。两个例外：细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症。 3. 血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。检出率与采血量成比例增长，每增加1ml的血液，病原菌的检出率就会相应增加。儿童患者血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人。采用一对（需氧瓶+厌氧瓶）组合，比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌。采血量不能满足推荐的量时，应首先满足需氧瓶的
一、操作目的 本程序用于有效地保障临床输血相容性检验标本的正确采集、接收、保存及销毁，使标本中的待检成分尽可能不受影响，保证临床输血相容性试验结果准确可靠。 二、适用范围 ABO血型鉴定，RH血型鉴定，红细胞不规则抗体筛查，特殊介质交叉配血（卡氏配血法）实验的血液标本采集。 三、操作步骤 （一）申请单的填写 1. 临床医生须熟知采供血机构所提供的血液及其成分的规格、性质、适应症，剂量及用法。应完整填写输血申请单各项内容，包括患者姓名、性别、出生日期/年龄、科别、床号、门诊/住院号、申请序号、标本类型、临床诊断或主要症状、孕产史、输血史、预定输血日期、预定输血成分、预定输血量、ABO血型、RH血型、血红蛋白值、HCT、血小板、采集标本者、采集标本日期和时间、送标本者、送标本时间、接收标本日期和时间及特殊说明，如应用的药物等。 2. 临床医护人员必须根据检验申请单所需检验项目，做好患者准备和标本采集。 3. 输血科人员必须等收到临床医生书面或电子检验申请单时，才可接收标本进行检验。特殊情况，在临床医生电话说明下，可在收到检验申请单之前先接受标本进行检验。 4. 输血申请单必须清洁、完整，不得被标本污染，重要信息不得涂改。
（二）患者准备 1. 临床医护人员必须对患者讲清楚输血目的，安慰患者，努力减轻患者的疑虑和恐惧心理。标本采集前应征得受血者知情同意。 2. 常见的引起抗球蛋白试验阳性的药物有: ①奎尼丁可与患者血清中抗(IgM)及补体形成免疫复合物附着于红细胞表面；②大剂量青霉素与血清抗体(IgG)结合附着于红细胞表面；③头孢菌素与抗体（(IgG、IgA或其他非特异性抗体)反应，使红细胞膜变形，但不发生溶血；④α-甲基多巴所致自身免疫性反应。可引起抗球蛋白试验阳性的药物的有：解热镇痛剂、抗生素（头孢菌素、硫胺、四环素、链霉素、异烟肼）、心血管药物（普鲁卡因酰胺、肼苯哒嗪、双氢克尿噻、甲基多巴），其他如氯丙嗪。 3. 交叉配血用血标本的采集时，前次输血3-14天，本次交叉配血标本应在输血前24h内采集；前次输血15天以上，本次配血标本应在72h内采集；长期重复性输血患者不要求每天采集血标本，但72h至少进行一次红细胞不规则抗体筛选。 （三）静脉血液标本采集的技术要点 1. 准备好标本采集所用的容器（枸橼酸钠抗凝真空管-蓝色帽管）、器材等，应在容器上注明：患者姓名、住院号等信息。注意：标签粘贴不可将标本完全遮盖，应在容器上保留观察窗，以便检验人员对标本是否合格进行判断。 2. 采血时患者应松弛，环境温暖，防止静脉痉挛，止血带的压力应尽可能小，止血带压迫时间不应超过2min，否则可造成局部血液的
血液标本的采集方法及注意事项 生化检验用的血液标本可来自于静脉、动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本，静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。 （一）静脉采血法 1.采血步骤 采血前要核对病人姓名、年龄、性别、编号及检验项目等，按试验项目要求，准备好相应的容器，如空白试管、抗凝管或促凝管等。病人应取坐位或卧位，采血部位通常是前臂肘窝的正中静脉。若用普通采血法，采血后应取下针头，将血液沿管壁缓慢注入试管内。 2.注意事项 （1）很多生化成分受膳食影响，因此，采血前要确认病人是否空腹。 （2）避免充血和血液浓缩：采血时应动作迅速，尽可能缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过半分钟，否则将使生化结果升高或下降。 （3）若病人正在进行静脉输液，不宜在输液同侧手臂采血；若女性病人做了乳腺切除术，应在手术对侧手臂采血。 （4）采血的体位：体位改变可引起一系列的生理变化，使血液中的许多指标发生改变。一般采取直立位采血，其二标本的测定值比卧位高5％～15％。因此，采血时要注意保持正确的体位（坐位或卧位），以及体位的一致性。 （5）采血时只能向外抽，决不能向静脉内推，以免注入空气，形成气栓而造成严重后果。 （6）防止溶血：造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清洁；穿刺不顺利，组织损伤过多；淤血时间过长；抽血速度太快；血液注入容器时未取下针头或注入速度过快产生大量泡沫；震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后，未取针头直接将血注入真空管内，也易造成溶血。体内溶血属合格标本，但应在报告单上注明。 （二）动脉采血法 肱动脉、股动脉、桡动脉以及其它任何部位的动脉都可以作为采血点，但多选择肱动脉和桡动脉。在摸到明显搏动处，按常规消毒，左手固定搏动处，右手持注射器，针头成60°角刺入，血液将自动进入注射器内。 （三）真空采血法 双向针一端插入真空试管内，另一端在持针器的帮助下刺入静脉，血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血，避免了血液外溢引起的污染，并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和试验用途。
第四章植物标本的采集、制作和保存 植物标本包含着一个物种的大量信息，诸如形态特征、地理分布、生态环境和物候期等，是植物分类和植物区系研究必不可少的科学依据，也是植物资源调查、开发利用和保护的重要资料。在自然界，植物的生长、发育，有它的季节性以及分布地区的局限性。为了不受季节或地区的限制，有效地进行学习交流和教学活动，也有必要采集和保存植物标本 “没有植物标本，也就没有植物分类学”。由此可见，掌握植物标本的采集、制作和保存的一整套工作方法，对一个植物学工作者和教师来讲，是极为重要的。 植物标本因保存方式的不同可分许多种，有腊叶标本、液浸标本、浇制标本、玻片标本、果实和种子标本等。本书介绍最常用的腊叶标本和液浸标本的制作方法。 一．腊叶标本的制作 将植物全株或部分（通常带有花或果等繁殖器官）干燥后并装订在台纸上予以永久保存的标本称为腊叶标本。这种标本制作方法最早于16世纪初由意大利人卢卡·吉尼（Luca Ghini）发明的，世界上第一个植物标本室建于1545年的意大利帕多瓦大学。一份合格的标本应该是：(1)种子植物标本要带有花或果(种子)，蕨类植物要有孢子囊群，苔藓植物要有孢蒴，以及其它有重要形态鉴别特征的部分，如竹类植物要有几片箨叶、一段竹竿及地下茎。(2)标本上挂有号牌，号牌上写明采集人、采集号码、采集地点和采集时间4项内容，据此可以按号码查到采集记录。(3)附有一份详细的采集记录，记录内容包括采集日期、地点、生境、性状等，并有与号牌相对应的采集人和采集号。 （一）、标本采集用具 1．标本夹：是压制标本的主要用具之一。一般长约43cm，宽30cm，以宽3cm，厚约5~7mm的小木条，横直每隔3~4厘米，用小钉钉牢，四周用较厚的木条(约2cm)嵌实。它的作用是将吸湿草和标本置于其内压紧，使花叶不致皱缩凋落，而使枝叶平坦，容易装订于台。 2．枝剪或剪刀：用以剪断木本或有刺植物。 3．高枝剪：用以采集徒手不能采集到的乔木上的枝条或陡险处的植物。 4．采集箱、采集袋或背篓：用以临时收藏采集品用，过去是用铁皮制成
临床常见的标本有血清（浆）、全血、分泌物、棉拭子、脓液、体液、新鲜组织、石蜡切片等，这些临床标本的处理和保存方法各有不同。 临床标本的处理 血清（浆）标本 一些病原体，如乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）、人类免疫缺陷病毒（HIV）等的PCR检测常采用血清或血浆标本。 HBV： 标本通常由医护人员采集，应注意避免溶血，如为血浆标本注意抗凝剂的选择，一般用EDTA-Na2或枸橼酸纳，不可使用肝素。标本为全血时，及时分离出血浆，提取病毒DNA进行检测。 HCV： 检测RNA病毒。由于RNA极易降解，标本的制备和保存方式往往可以影响测定结果。若用血浆标本，应使用EDTA抗凝。严禁使用肝素，因其对PCR扩增有抑制作用,且无法在核酸提取过程中去除。抗凝后6小时内分离血浆。如用血清标本，则应尽快（2小时内）分离血清进行检测，或-20oC保存。 全血标本 通常用来提取外周血单个核细胞核酸： 如基因组DN A、线粒体DN A、总RNA等。 抗凝剂： 一般使用EDTA-Na 2、枸橼酸xx，不使用肝素。
1）加适量的红细胞裂解液（破膜液），裂解全血中的红细胞。 2）再加适量的细胞核裂液（破核液），裂解白细胞中的细胞核，使核内DNA释放出来。 3）然后再加SDS（十二烷基硫酸钠）等去污剂，溶解脂蛋白，解聚核蛋白。 SDS可与蛋白质结成复合物，使蛋白质变性沉淀，但SDS在以后的核酸提取过程中必须除去。 痰标本 痰属于分泌物，临床上常用作结核杆菌DNA测定样本，由于痰标本中含大量粘蛋白和杂质，故在核酸提取时，一定要对标本进行前处理，即用4%NaOH 液化，去除粘蛋白，然后用煮沸或蛋白酶、酚/氯仿等经典法提取DNA。 具体方法： 用无菌平皿取患者肺深部咳出的痰液1-3ml，↓加入4倍体积4%NaOH，摇匀，室温下放置30分钟左右液化↓取 1.5ml EP管，加 0.5ml液化痰液，再加 0.5ml 4%NaOH室温放10分钟↓ 12000 rpm，离心15分钟↓弃上清，加无菌生理盐水1 ml，混匀，12000rpm离心5分钟↓弃上清，沉淀物用于DNA提取 棉拭子 用PCR方法检测性病病原体时（衣原体、支原体、淋球菌、梅毒螺旋体、人乳头状瘤病毒等），临床标本一般为棉拭子。标本取材是关键，衣原体等病原体感染上皮细胞，因此取材一定要取到细胞。
检验标本的采集与运送规范（护理） 一、血液常规采集与运送规范 （一）、常用真空采血管的种类 1、促凝管／分离胶促凝管（橙色／黄色）：用于医学检验中生化学、免疫学、 血清学、各种病毒检测及血库检查血液标本的采集与盛装。管壁经特殊处理，防止挂壁及溶血现象。 2、枸橼酸钠１:９（蓝色）管：用于凝血机制等检查，按抗凝剂与血样体积比为 1：9设定的真空采血管，具有准确的血液量与抗凝剂总量，配比精度较高。 3、肝素钠／锂（绿色／墨绿色）管：用于急诊生化、血液流变学、全血铅测定 的血液标本采集。对血液成份干扰少，不影响红细胞体积，不引起溶血。具有血浆分离速度快，与血清标本指标兼容性强等优点。 4、EDTA（紫色）管：抗凝剂为乙二胺四乙酸（EDTA，分子量292）及其盐， 适用于一般血液学检验，不适用于凝血试验及血小板功能检查，亦不适用于钙离子，钾离子，钠离子，铁离子，碱性磷酸酶，肌酸激酶和亮氨酸氨基肽酶的测定及PCR试验。 （二）多管采样时采集次序 多管采血时一般按下列顺序：凝血试验→血沉→血常规→其它。以防止凝血因子活化，或者血小板聚集而影响检验结果。 多项检测同时采血时应按下列顺序采血：①血培养；②无添加剂管或促凝管；③凝血管；④有添加剂管的顺序为：a．橼酸盐管；b．肝素管；c．EDTA管；d．草酸盐/氟化钠管。 （三）各种血标本的采集及注意事项 1、血常规检验标本 一般用EDTA-2K(EDTA-K2?2H2O) 1.5～2.2mg/ml抗凝（EDTA抗凝管,紫色帽）采血。 采血注意事项： 1)应按抗凝管刻度准确采静脉血至2ml。 2)采血后立即上下颠倒混匀（5～10次，不可用强力震荡,以免造成溶血。）；