MTT法绘制生长曲线
一细胞生长曲线：
A、目的：学习细胞生长曲线的测定方法，观察细胞生长基本规律。
B、背景知识
细胞生长曲线是观察细胞生长基本规律的重要方法。只有具备自身稳定生长特性的细胞才适合在观察细胞生长变化的实验中应用。因而在细胞系细胞和非建系细胞生长特性观察中，生长曲线的测定是最为基本的指标。
原理（选填项目）：
细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。
C、材料
（一）仪器
1. 净化工作台
2. 离心机
3. 恒温水浴箱
4. 冰箱（4℃、-20℃）
5. 倒置相差显微镜
6. 培养箱（37℃、5%CO2、饱和湿度）
（二）玻璃器皿
1. 吸管（弯头）
2. 培养瓶
3. 玻璃瓶（250ml、100ml）
4. 废液缸
（三）塑料器皿
1. 吸头
2. 枪头
3. 24培养板
4. 胶塞
（四）其他物品
1. 微量加样枪
2. 红血球计数板
（五）试剂
1. D-Hanks液
2. 小牛血清
3. RPMI1640
4. 双抗（青霉素、链霉素）
5. 0.08%胰酶
（四）、操作步骤
1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液；
2. 计数，精确地将细胞分别接种于21～30个大小一致的培养瓶内或培养孔（以24孔培养板为宜），每瓶或孔细胞总数要求一致，加入培养液的量也要一致。
3. 每天或每隔一天取出3瓶（孔）细胞进行计数，计算均值。培养3～5d常要给未计数的细胞换液。
4. 以培养时间为横轴，细胞数为纵轴（对数），描绘在半对数座标纸上，连接成曲线后即成该细胞的生长曲线。
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（五）、注意事项
1．细胞生长曲线虽然最为常用，但有时其反映数值不够精确，可有20～30%的误差，需结合其它指标进行分析。
2．现在很多实验室利用培养板采用MTT法进行生长曲线测定，较为简便。3．标准的细胞生长曲线近似“S”形，一般在传代后第一天细胞数有所减少，再经过几天的潜伏适应期，然后进入对数生长期，达到平台期后生长稳定，最后到达衰老。
4．在生长曲线上细胞数量增加1倍时间称为细胞倍增时间，可以从曲线上换算出。
二、四唑盐试验（MTT）比色试验
（一）、目的
学习四唑盐比色试验，检测细胞存活和生长情况。
（二）、原理和背景。
四唑盐是一种能接受氢原子的染料，简称MTT。活细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的紫色结晶物，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。
（三）、材料
A、仪器
1. 净化工作台
2. 离心机
3. 恒温水浴箱
4. 冰箱（4℃）
5. 倒置相差显微镜
6. CO2培养箱
7. 振荡混合仪
8. 酶联免疫检测仪
9. 移液枪
10. 电磁力搅拌机
11. 微孔滤器
B、玻璃器皿
1. 吸管
2. 小烧杯（100ml）
3. 废液缸
C、塑料器皿
1. 吸头
2. 枪头
3. 96孔培养板
4. 15ml离心管
5. 50ml离心管
6. 胶塞
D、其他物品
1. 微量加样枪
2. 红血球计数板
F、试剂
1. D-Hanks液
2. 小牛血清
3. RPMI1640
4. 双抗（青霉素、链霉素）
5. 0.08%胰酶
6. 二甲基亚砜（DMSO）
7. MTT溶液：称取250mgMTT，放入小烧杯中，加50ml培养液或平衡盐溶液在电磁力搅拌机上搅拌30min，用0.22um的微孔滤器除菌，分装，4℃保存备用，两周内有效。
（四）、操作步骤
1. 接种细胞：用0.08%胰蛋白酶消化单层培养细胞，用含10%胎牛血清的
RPMI1640培养液配成单个细胞悬液，以每孔103～104个细胞接种于96孔培养板中，每孔体积200ul。
2. 培养细胞：将培养板移入CO2孵箱中，在37℃、5% CO2及饱和湿度条件下培养。（培养时间取决于实验目的和要求）
3. 呈色：每孔加入MTT溶液（5mg/ml）20ul，37℃孵箱中继续孵育4h，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液。对于悬浮生长的细胞，需离心（1000rpm，5min），然后弃去孔内培养液。每孔加入150ul DMSO，振荡10min，使结晶物充分溶解。
4. 比色：选择490nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值，记录结果。以时间为横轴，光吸收值为终轴绘制细胞生长曲线。
（五）、注意事项
1．选择适当的细胞接种浓度。在进行MTT试验前，对每一种细胞都应测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，然后确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间。
2．避免血清干扰，一般选小于10%胎牛血清的培养液进行试验。
3．设空白对照，与试验平行设不加细胞只加培养液的空白对照孔。最后比色时，以空白孔调零。
四唑蓝(MTT)法测定细胞生长曲线及生长速度：MTT法绘制3组细胞的生长曲线，分别将细胞用无血清培养液配制成单细胞悬液,计数后接种于96孔板(1×104)/孔，设立空白组培养7 d,每天每组细胞各取6孔,每孔加入MTT溶液0.5 g/L,37℃继续培养4 h,弃去培养上清液,每孔加入二甲基亚砜(DMSO)150 μl,振荡使结晶物充分溶解,选择492 nm波长,在酶联免疫检测仪上测定各孔波长吸光度(A)值的差值,以时间为横轴, A值为纵轴绘制生长曲线。
测定细菌生长曲线 一、实验目的 1．了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时； 2．学习液体培养基的配制以及接种方法； 3．反复练习无菌操作技术； 4．了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同； 5．掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法； 二、实验原理 将一定量的菌种接种在液体培养基内，在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。 测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。将所测得的光密度值（OD600）与对应的培养时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌和死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。 从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G表示，其计算公式为： G＝（t2-t1）/[(lgW1-lgW2)/lg2] 式中t2和t1为所取对数期两点的时间，W1和W2分别为对应时间测得的细胞含量或OD。 三、实验器材 大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板； 培养基(100mL/250mL三角瓶×10瓶/大组):牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基； 取液器(5000ul, 1000ul 各一支)，无菌1000ul吸头若干，无菌5000ul吸头若干，比色皿10个及共用参比杯一个，培养箱3台，722s分光光度计； 四、实验步骤 1．活化菌种 将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡培养18h，另外准备单菌落平板各1块； 2．接种 6人大组分为3个小组，按表1接种。 表1.各培养基接入菌种及培养条件
儿童体格生长发育体格评价 一、体格生长的常用指标 1、身长(length) 身长为头部、脊柱与下肢骨骼长度的总和。新生儿出生时仅50厘米。0～6个月的婴儿每月平均增长厘米，7～12个月的婴儿每月平均增长厘米，生后第2年身长共增长10厘米左右，以后儿童身高（height）每年增长值波动在5～厘米左右。接近青春期儿童身高每年增长达8厘米左右，女童较男童略早开始2年。身高估算公式： 2～10岁儿童身高（厘米）= 年龄 X 7 + 70 2、体重(weight) 新生儿出生体重平均3公斤， 6个月内婴儿体重每月平均增长600克～700克，6～12个月体重每月平均增长250克～300克，之后儿童体重每年增长约2公斤。接近青春期儿童体重每年增长可达6公斤左右。体重估算公式： 小于6月婴儿体重 = 出生体重（公斤） + 月龄 x 7～12月婴儿体重 = 6（公斤） + 月龄 x 1～10岁儿童体重（公斤）= 年龄 X 2 + 7（或8） 3、头围(head circumference) 新生儿出生时头围34厘米，1岁内增长迅速，上半年8厘米，下半年4厘米，1岁时达46厘米。1岁后增长速度减慢，2岁时48厘米。若有头小畸形，提示脑发育不良；若头围过大，则要怀疑脑积水。 4、胸围(chest circumference) 胸廓与肺的发育可以用胸围测量。胸围在第一年发育最快，1～1岁半超过头围，第二年增长速度明显减慢，平均增长3厘米，以后每年平均增加约1厘米。 5、上臂围(arm circumference) 测量上臂围可以筛选营养不良儿童。1～5岁儿童上臂围多在～厘米间，>厘米示营养良好，<厘米为营养不良。 6、坐高(sitting height) 坐高指由头顶至坐骨结节的长度，坐高可显示躯干的生长。儿童1岁后身高增加主要是下肢增长，坐高占身高的比例随年龄而降低。一般出生时为66%，4岁时60%，10岁时54%。当儿童患克汀病、软骨发育不良时，坐高占身高百分比明显增大。 7、前囟(anterior fontanel) 新生儿出生时头顶部有两个骨性间隙，额骨与顶骨之间的菱形间隙称前囟，顶骨与枕骨之间的三角形间隙称后囟。前囟出生时约～2厘米，数月内随头围的增长而变化，6个月后则逐渐骨化缩小，一般在12~18个月闭合。后囟出生时很小，1～2个月即闭合。囟门闭合情况反映颅骨骨化过程。若囟门闭合早，则要警惕头小畸形；囟门闭合晚，多见于佝偻病、脑积水、克汀病等。同时囟门也是观察婴儿颅内疾病的一个窗口，当小儿患脑炎、脑膜炎而颅压升高时，前囟会变得饱满，而婴儿因腹泻致脱水时，会出现前囟凹陷。 8、牙齿人有两副牙齿，即乳牙(terminent teeth)和恒牙(permanent teeth)。乳牙共20颗。婴儿出生时无牙，一般在4~6个月左右萌出，全副乳牙2岁半出齐。自6岁左右，儿童开始换牙。在全副乳牙之后长出第一颗恒牙（第一磨牙），即出现24颗牙齿。然后基本按从前至后的顺序逐个替换同位乳牙。12岁长出第二磨牙，18岁以后出现第三磨牙（智齿），但也有人终生不长此牙。
细菌生长曲线的测定 1 目的 1.1 了解细菌生长曲线特点及测定原理 1.2 学习用比浊法测定细菌的生长曲线 2 原理 将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。因此通过测定微生物的生长曲线，可了解各菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。 测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和实验室条件选用。本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，此法快捷、简便。 3 材料 3.1菌种 某细菌 3.2培养基 液体培养基 3.3 仪器和器具 721分光光度计，比色杯，恒温摇床，无菌吸管，试管，三角瓶。 4 流程 种子液→标记→接种→培养→测定 5 方法 5.1种子液制备 取细菌斜面菌种1支，以无菌操作挑取1环菌苔，接入肉膏蛋白胨培养液中（液体培养基接种法），静止培养24h作种子培养液。 5.2标记编号 取盛有50mL无菌肉膏蛋白胨培养液的250mL三角瓶11个，分别编号为0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。
5.3接种培养 用2mL无菌吸管分别准确吸取2mL种子液加入已编号的11个三角瓶中，于37℃下振荡培养。然后分别按对应时间将三角瓶取出，立即放冰箱中贮存，待培养结束时一同测定OD 值。 5.4生长量测定 将未接种的肉膏蛋白胨培养基（空白对照）倾倒入比色杯中，选用600nm波长分光光度计上调节零点，作为空白对照，并对不同时间培养液从0h起依次进行测定，对浓度大的菌悬液用未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定，使其OD值在0.10.～0.65以内，经稀释后测得的OD值要乘以稀释倍数，才是培养液实际的OD值。 6 结果 6.1 将测定的OD值填入下表： 时间(h) 对照 0 1.5 3 4 6 8 10 12 14 16 20光密度值（OD600） 0 6.2 以上述表格中的时间为横坐标，OD600 值为纵坐标，绘制细菌的生长曲线。 Point： 1液体培养基的配制以及接种方法 2无菌操作技术 3直接计数法
一、实验方案设计
实验数据原始记录： 随时间的变化大肠杆菌液吸光度的数据（括号内数字表示稀释倍数）
3.5 曲线图时间/h 0 1 3.75 6 7 8 8.5 9 10 OD600 0.073 0.073 0.079 0.282 0.456 1.105 1.168 1.662 2.284 时间/h 11 12 13 14 18.33 20.5 23 24 OD b。 2.564 2.016 3.020 2.605 3.315 2.860 3.024 3.324 时间/h 0 1 3.75 6 7 8 8.5 9 10 11 13 18.33 20.5 0应0 0.073 0.073 0.079 0.282 0.456 1.105 1.168 1.662 2.284 2.564 3.020 3.315 2.86 时间/h 0 1 3.75 6 7 8 8.5 9 10 11 OD6b0 0.073 0.073 0.079 0.282 0.456 1.105 1.168 1.662 2.284 2.564 前小时的大肠杆菌的吸光度数据 六?参考文献 前12小时的大肠杆菌的生长曲线图 [1] .牛天贵?食品微生物学实验技术?第1版?北京：科学出版社，2010. [2] .杨革.微生物学实验教程.第2版.北京：科学出版社，2010. [3] .何国庆，贾英民，丁立孝等.食品微生物学.第2版.北京：中国农业大学出版社，2009. [4] .周德庆，胡宝龙.微生物学实验教程.第2版.北京：高等教育出版社，2006.
七?教师对实验方案设计的意见 签名： 年月日 、实验报告 宴验现象验现象、实验结果的分析及其结论 分随着培养时间的增加，培养基里的液体变得越来越混浊，所散发出来的味道也越来越浓，味道很难闻。实验结果随着培养时间的增加，培养基里的液体变得越来越混浊，所散发出来的味道也越来越浓，味道大肠杆菌难培养基因为大肠杆菌增长迅越来越后来数量达一定数量后此时培养基内的营养物质已被进行营尽，养和空间肠杆菌进行营些大肠杆间的死亡争，最后数量肠杆菌死亡，直最后数量不断减尙，。直至变为0。 ②通过对大肠杆菌生长曲线的测定，了解了细菌生长 的特点，是：刚开始时细菌缓慢增长，后来增 长迅速，呈“ J”型，最后细菌生长缓慢，数量达到顶峰，在一段时间内保持不变。 因实验测量的时间不够合理等各种因素，因此用原始数据绘制出来的大肠杆菌的生长曲线图不够有规律，经修正后生长曲线比较好。 结论: 细菌的生长曲线分为延缓期、生长期、稳定期和衰亡期。体内及自然界细菌的生长繁殖受机体 免疫因素和环境因素的多方面影响，不会出现象培养基中那样典型的生长曲线。掌握细菌生长规律，可有目的地研究控制病原菌的生长，发现和培养对人类有用的细菌。 这4个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所不同。因此通过测定微生物的生长曲线，可了解细菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。
近日，卫生部制定并公布了《中国7岁以下儿童生长发育参照标准》。该标准制定的数据来源于“2005年第四次九市儿童体格发育调查”中城区数据。参照标准主要有体重、身高以及头围等，且配有方便、实用的生长曲线图。 “生长曲线图是家长监测孩子生长发育情况更简单、直观的工具。”省儿童医院儿保科主任刘丽君说，儿童生长指标在上下两实曲线之间都属正常，接近中间的实曲线则为平均水平，接近上下两条虚曲线则说明孩子的指标稍高或稍低于正常范围。 家长判断孩子的生长情况，应该动态地观察不同阶段的数据，把各个阶段监测到的数值连成一条曲线，若这条曲线在正常范围内，且与参考曲线呈大体平行，这说明孩子的生长发育是比较正常的。否则，出现偏高或偏低的情况，应尽早带孩子到医院进行检查。 刘丽君主任指出，在孩童生长发育正常的情况下，1岁之前前6个月每个月到医院监测一次，第9个月和12个月各监测一次；1—3岁之间，则半年监测一次；3—7岁至少每年监测一次。若孩子生长发育出现异常，则需根据医生建议定期监测。 此外，对于头围的监测在囟门未闭合之前显得更为重要，主要在孩童2岁之前。头围的增长代表大脑发育情况，若头围过大，则要警惕有脑积水，头围过小则会增加有小头畸形的可能性。 刘丽君主任指出，从临床上来看，贫血、营养不良、微量元素缺乏、呼吸道疾病、肠道疾病等多发于1—3岁的孩童，从而影响孩子的正常发育水平。这个年龄段，家长们更应该注意孩子的营养状况。 如今，厌食的孩子越来越多，但经医生检查后发现，大多为非疾病性厌食，主要是家长们喂养方式不当造成的情绪厌食症，如有的家长以叫骂方式强迫孩子进食等导致孩子厌食。刘丽君主任建议家长们，应在孩子主动进食的情况下科学合理喂养孩子。而且，孩子的食谱应多样化，给孩子多食用一些含优质蛋白的食物，讲究营养均衡。另外，许多家长认为孩子又白又胖才健康，让孩子过多地进食，实际上孩子的体重不应超出儿童生长发育参照曲线的正常范围。孩童肥胖是成人代谢综合征的高发危险因素，会增加患高血压、高血脂、糖尿病等心脑血管疾病的风险。她主张孩子少吃高糖、高脂以及油炸快餐食品。 □本报记者方素菊.corrTxt_01{border-top:1px dashed #F0C8C8;margin-top:10px;}.corrTxt_01 h3{font-weight:bold;padding:5px 0 0 3px;line-height:25px;margin:0;}.corrTxt_01 ul{padding:0 0 0 18px;}.corrTxt_01 ul li{font-size:14px;line-height:%;}.corrTxt_01 a {text-decoration:none;}> 相关阅读：诠释10-11月龄生长发育规律家长应为孩子制作生长曲线图视频：婴儿生长发育及护理保健视频：2-3岁孩子生长发育指标家长应走出孩子生长发育误区为何5月是儿童生长高峰期？视频：婴儿生长发育知多少早产儿面临三大生长挑战4-5个月婴儿生长发育规律 了解育儿知识，看育儿博文和论坛，上手机新浪网亲子频道
實驗六細菌生長曲線之測定 ◎ Exp 11. Turbidity of bacteria 一、目的： 在進行細菌生長曲線之測定前，必須先了解 U-2001 Spectropho- tometer 操作方法，才能將細菌的數量以吸光值的方式表示出來。二、原理： 請詳讀整理 p. 90-92，學會調整 Optical density (O.D.) 【Exp 13.會用到】。 三、器材： 1. culture：(每組) 24 hr Escherichia coli (broth) 2. medium： (每組) Nutrient broth 3. equipment ： 1 ml pipette，pipette aid，cuvette，拭鏡紙，廢菌液杯，裝蒸餾水的洗 瓶，滅菌空試管，U-2001 Spectrophotometer，振盪器。 四、實驗步驟 ※由助教先示範操作方法，再由學生自行操作與測量待測液之吸光值。 1. 了解 U-2001 Spectrophotometer 操作方法： a. 溫機約 15 分鐘。 b. MENU → (主目錄) 選 1. Photometer →輸入波長 600 nm 及 ABS → Forward → c. Nutrient broth 歸零 autozero → (前、後二支 cuvette) ※1 d. 取出後面之 cuvette ，倒入待測液※2，等到右上方數據穩定後，按 下 Start →記錄。 ※1 cuvette 有石英管 (測波長 340 nm 以下)、玻璃管、塑膠管等材質，本實驗使用塑膠材質之比色管。 ※2 每次測定前需先用蒸餾水滴洗cuvette，再以待測液潤濕，倒掉，再裝入待測液，測完倒掉，用蒸餾水滴洗。測定之前
实验九测定细菌生长曲线 [实验目的] 1．了解细菌生长曲线特征：2．学习液体培养基的配制以及注意事项。3．学习液体种子和固体种子的不同接种方法和注意事项。4．利用细菌悬液浑浊度间接测定细菌生长。 [仪器和材料] 1．实验材料 (1)大肠杆曲，枯草杆曲培养液及大肠杆菌平板。 (2)牛肉膏蛋门胨葡萄糖培养基(150ml／250ml 三角瓶X 4瓶／大组)，配方：牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，葡萄糖10g，加水至1000ml，pH7．5。 2．实验仪器 取液器(5000μl，1000μl，200tμl 各一支)；培养箱．摇床，722s分光光度汁；1000μl 无菌吸头100个；5000μl 无菌吸头2个；1ml或4ml玻璃或塑料比色皿4个，共用参比杯一个。 [实验原理] 将一定量的细菌接种在液体培养基内．在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线(图9 1)。 单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。 生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程动态。不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的． 测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法等。本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与浑浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。将所测得的光密度值(测OD550或OD620或OD600或OD420，可任选一波长)与对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。 从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G表示。其计算公式为； G=(t2-t1)/[(1gW1—lgW2)／lg2] 式中tl和t2为所取对数期两点的时间；w1和w2分别为相应时间测得的细胞含量(g/L)或OD。 [实验步骤] 1．准备菌种：将大肠杆菌，枯草杆菌分别接种到装有牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基的三角瓶中，37℃，200r／min振荡培养14-18h．另外准备大肠杆菌单菌落平板l块(37'C培养24h)。 2．接种：分别将1．5ml(1％接种量)和4-5ml(3％接种量)大肠杆菌菌液和一个大肠杆菌单菌落接人含150ml培养液的三角瓶中．37℃，200r／min振荡培养；把4．5ml枯草杆菌(3%接种量)接入含150ml培养液的三角瓶中，37℃，200r／min振荡培养。 3．测量；每培养1h取样一次．净培养(不包括取样时间)10h结束培养，测量培养液pH值。零小时也要测。 如果选用4ml比色皿取500μl培养液到2000μl蒸馏水中(稀释5倍)，以蒸馏水为对照，测OD650。或OD620或OD600或OD420任选一波长)，如果选用lml比色皿，可以取1000μl培养液，以蒸馏水为对照，直接测OD620 、OD600或OD420(任选一波长)，当OD值大于0.6时，下一样品要稀释1倍测量． [实验结果]．
竭诚为您提供优质文档/双击可除细菌生长曲线的测定实验报告 篇一：细菌生长曲线 实验九测定细菌生长曲线 [实验目的]1．了解细菌生长曲线特征：2．学习液体培养基的配制以及注意事项。3．学习液体种子和固体种子的不同接种方法和注意事项。4．利用细菌悬液浑浊度间接测定细菌生长。 [仪器和材料] 1．实验材料 (1)大肠杆曲，枯草杆曲培养液及大肠杆菌平板。 (2)牛肉膏蛋门胨葡萄糖培养基(150ml／250ml三角瓶x4瓶／大组)，配方：牛肉膏5g，蛋白胨10g，nacl5g，葡萄糖10g，加水至1000ml，ph7．5。 2．实验仪器 取液器(5000μl，1000μl，200tμl各一支)；培养箱．摇床，722s分光光度汁；1000μl无菌吸头100个；5000μl 无菌吸头2(:细菌生长曲线的测定实验报告)个；1ml或4ml
玻璃或塑料比色皿4个，共用参比杯一个。 [实验原理] 将一定量的细菌接种在液体培养基内．在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线(图91)。 单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。 生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程动态。不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的．测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法等。本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与浑浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。将所测得的光密度值(测oD550或oD620或oD600或oD420，可任选一波长)与对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。 从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以g表示。其计算公式为；
学前儿童生长发育的评价方法 （一）常用的评价方法 生长发育评价在儿少卫生工作中应用广泛，主要用于：①评价个体、群体儿童少年现时的生长发育水平，处于什么等级。②筛查、诊断生长发育障碍、评价营养和生活环境因素对生长发育的影响，提供保健咨询建议。③列入社区健康水平的指标体系，通过观察指标变化，评价各项学校卫生措施的实效，作为实施学校卫生监督的依据。根据这些需要，生长发育评价的基本内容包括生长发育水乎、生长发育速度、各指标相关关系等三个方面。 选择合理的评价方法，是进行正确评价的关键。迄今没有一种方法能完全满足对个体、群体儿童的发育进行全面评价的要求。因此，应根据评价目的选择适当的方法，力求简单易行，直观而不需要附加计算；可结合体格检查、生活环境条件、健康和疾病状况进行综合分析，以得出较全面、准确的评价结果。 （二）指数法 指数法利用数学公式，根据身体各部分的比例关系，将两项或多项指标相关联，转化成指数进行评价。本方法计算方便，便于普及，所得结果直观，应用广泛。常用指数有： （1）身高体重指数，表示单位身高的体重，体现人体充实度，也反映营养状况。 （2）身高胸围指数，反映胸廓发育状况，借以反映体型。 （3）身高坐高指数，通过坐高和身高比值，反映人体躯于和下肢的比例关系，反映体型特点。可根据该指数大小，将个体的体型分为长躯型、中躯型和短躯型。 （4）BMI指数（body mass index，BMI，体重kg／身高m2），又称体重指数。近年来受国内外学者高度重视，认为它不仅能较敏感地反映身体的充实度和体型胖瘦，且受身高的影响较小，与皮脂厚度、上臂围等反映体脂累积程度指标的相关性也高。我国已建立的"学龄儿童青少年BMI超重、肥胖性别一年龄别筛查标准"，是BMI在儿童生长发育领域的具体应用。l8岁时该指数≥24和≥28，可分别筛查为超重和肥胖。 （5）握力指数和背肌力指数：均利用肌力与体重的密切关系，借助单位体重的握力和背肌力校正体重的影响，分别显示上臂和腰背部的肌肉力量，比原指标更具可比性。 （6）肺活量指数：分别利用肺活量和体重、身高的密切关系，利用单位体重或身高校正肺活量，以更确切反映机体肺通气能力的大小。 由于身体指数存在显着的种族、域乡、性别、年龄和身高等差异，应结合专业知识应用，注意克服指数的机械性弱点。制定和应用评价标准时应注意以下问题：①不能忽视身高因素。同性别、年龄而身高不同的儿童，身材高大而粗壮者和身材矮小而瘦弱者可同样被评价为"体型匀称".克服方法是利用年龄别身高标准，先筛出那些生长发育迟滞者。②充分注意指数（尤其源自体格指标者）鲜明的种族、地区差异。③大多数指数呈非正态分布。因此，最好依据百分位数法先将指数分若干等级，确定其等级含义。 （三）等级评价法 等级评价法是离差法（用于评价个体、群体儿童少年生长发育现状的常用方法）中最常用的一种。它利用标准差与均值的位置远近，划分等级。评价时将个体该发育指标的实测值与同年龄、同性别相应指标的发育标准比较，以确定发育等级。国内最常用五等级评价标准见表9-1. 一般生长发育评价中，身高和体重是最常用的指标。个体的身高、体重值在判定标准均值±2个标准差范围内（约占儿童总数的95％）均可视为正常。但在均值±2个标准差外的儿童少年，不能据此定为异常；需定期连续观察，结合其他检查，慎重做出结论。个体的体重有升有降，易受内外环境影响。若儿童体重连续数月下降，则应先排除疾病再评价营养状况。 等级评价法亦可用于集体儿童的发育评价，称"等级百分数法".评价时先将两个班或两所学校所有学生的测量资料，分别按不同发育指标，采用统一标准，对照相应的等级评价标准，确定各个体的等级。
实验八细菌生长曲线的测定及 血球计数板测定微生物生长 一、细菌生长曲线的测定及 ★细菌的生长曲线就是把一定量的菌体细胞接种到恒容积的液体培养基中，在适宜的条件下进行培养，在此过程中，其细胞数目将随培养时间的延续而发生规律性的变化，如以细胞数目的对数值(或O.D.值)为纵坐标，以培养时间为横坐标作一条曲线，即为细菌的生长曲线，它反映了细菌的群体生长规律。 ★大多数细菌的繁殖速率很快，在合适的条件下，一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次。 ★依据其生长速率的不同，可把细菌的生长曲线划分为延滞期，对数期，稳定期和衰亡期等四个时期。 ★微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标，OD是optical delnsity（光密度）的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。通常400～700nm 都是微生物测定的范围，505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。 ★本实验测定细菌生长曲线的方法是，将待测菌种接入一只大试管的培养液中，在适宜的培养温度和良好的通气状态下，定时取出此试管，在600纳米波长处测定菌液浓度(O．D．值)，在一定的范围内，菌液浓度与光密度值成线性关系。因此，根据菌液的O．D．值可以推知细菌生长繁殖的进程。将所测得的一组O．D．值与其相应的培养时间作图，即可绘制出该菌的生长曲线。 ☆实验操作 1、菌种培养：取大肠杆菌斜面菌种1支，以无菌操作挑取1环菌苔，接入肉膏蛋白胨培养液（LB）中，静止培养12--14h，备用。 2、制备LB培养基100ml置于200ml三角瓶内，备用。 3、标记：取11支无菌大试管，用记号笔分别标明培养时间，即0、1.5、3、 4、6、8、10、12、14、16和20h。 4、接种：分别用5ml无菌吸管吸取5ml大肠杆菌培养液(培养12~14h)转入盛有100ml LB液的三角瓶内，混合均匀后分别取5ml混合液放入上述标记的11支无菌大试管中。
世卫组织最新标准-（0-5 岁）体重生长曲线图~身咼生长曲线图? BMI生长曲线图 世界卫生组织的最新标准是完全根据母乳宝宝的生长情况制定的。而我国的标准是综合国内不同地区和不同喂养分方式的数据统计出来的。 但这样的数据并不能说明它更正确，而恰恰会由于混合或人工喂养宝宝的因素使数据偏高。 这些新指标是基于8440名母乳喂养的孩子的生长发育状况做出的。 与吃母乳的婴幼儿比起来，吃配方奶的孩子体重比吃母乳的孩子要增长得快些。而“世卫组织”旧的有关婴幼儿的成长发育指标却是根据吃配方奶的孩子的发育情况制定的，这就意味着这一套标准存在着重大缺陷。 从1997年到2003年间，世界卫生组织对包括巴西等6个国家的孩子进行了跟踪调查。这些孩子来自巴西、加纳、印度、挪威、阿曼和美国等6个不同的国家，身体都很健康，且他们的母亲都不吸烟，对孩子的照顾也非常周到。而之前的指标只是取单独一个国家的儿童为样本（也就是美国儿科学会公布的美国婴幼儿生长发育曲线）。 男宝体重生长曲线图— 女宝体重生长曲线图 男宝身高生长曲线图 女宝身高生长曲线图
男宝BMI生长曲线图 女宝BMI生长曲线图 新的婴幼儿生长发育指标中还包含了身体质量指数（BMI二体重（公斤）宁身高（米）的平方，单位为公斤/平方米）,这是WHC首次 在婴幼儿生长发育指标中引入此项指标。BMI为评估体重与身高比例 提供了工具，对于监控孩子的肥胖症非常有效。它是评估儿童健康的一个重大革新。 男宝宝体重生长曲线图 irihH-i rib rd r-■■? Mfa r?M ?f?专家认为，新指标的发表不会给中国孩子生长发育情况带来大影 响。我国每10年都要在北部、中部、南部各选三地，对0-18岁儿童 和青少年的身高、体重等情况进行调查统计，并综合了各种喂养方式，
实验日期：2017.11.1 实验班级：生物技术指导教师：张建丽 姓名：高熹学号：1120152430 测定细菌生长曲线 一．实验目的 1.通过对大肠杆菌生长曲线的测定，了解细菌生长的特点，综合训练微生物实验的基本实验技能。 2.巩固培养基的配制、灭菌、仪器的包扎、倒平板。 3.掌握用比浊法测定细菌的生长曲线。 二．实验原理 将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，一定时间测定培养液中的菌量，以菌量的数量作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、生长期、稳定期和衰亡期。将每一种一定量的细菌转入新鲜液体培养基中，在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段。 延迟期：又叫调整期。细菌接种至培养基后，对新环境有一个短暂适应过程（不适应者可因转种而死亡）。此期曲线平坦稳定，因为细菌繁殖极少延迟期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异，一般为1～4小时。此期中细菌体积增大，代谢活跃，为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。 对数生长期：又称指数期。此期生长曲线上活菌数直线上升。细菌以稳定的几何级数极快增长，可持续几小时至几天不等（视培养条件及细菌代时而异）。此期细菌形态、染色、生物活性都很典型，对外界环境因素的作用敏感，因此研究细菌性状以此期细菌最好。抗生素作用，对该时期的细菌效果最佳。 稳定期：该期的生长菌群总数处于平坦阶段，但细菌群体活力变化较大细菌浓度达到最大即环境最大容纳量。由于培养基中营养物质消耗、毒性产物（有机酸、过氧化物等）积累PH下降等不利因素的影响，细菌繁殖速度渐趋下降，相对细菌死亡数开始逐渐增加，此期细菌增殖数与死亡数渐趋平衡。细菌形态、染色、生物活性可出现改变，并产生相应的代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素、以及芽孢等。 衰亡期：随着稳定期发展，细菌繁殖越来越慢，死亡菌数明显增多。活菌数与培养时间呈反比关系，此期细菌变长肿胀或畸形衰变，甚至菌体自溶，难以辩认其形。生理代谢活动趋于停滞。故陈旧培养物上难以鉴别细菌。 体内及自然界细菌的生长繁殖受机体免疫因素和环境因素的多方面影响，不会出现象培养基中那样典型的生长曲线。掌握细菌生长规律，可有目的地研究控制病原菌的生长，发现和培养对人类有用的细菌。 这4个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所不同。因此通过测定微生物的生长曲线，可了解个菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。 测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和实验室条件选用。本实
下列各曲线表示儿童的平均生长情况（连续的曲线）以及经正规测量得出的数值范围。你可以通过给孩子称体重、定期测量其头围的尺寸，然后在图纸上画出他的生长曲线。他的曲线形态应与“平均”曲线极为接近才算健康和正常，因为“平均”曲线显示的是健康的生长速度。 头围 保健员或医生用卷尺恰在婴儿眉毛和两耳的上方绕过头部最膨大的部分一圈，测出的尺寸既是头围。在１岁以内，头围是比身长更容易测量的并用来评价婴儿健康生长的一项标准。 决定孩子衣服尺码的参考数据： 0～3个月身长60厘米体重到4.5公斤 3～6个月身长70厘米体重到6.5公斤 6～12个月身长80厘米体重到8.5公斤 12～18个月身长85～90厘米 18～24个月身长90～100厘米 孩子的身高 大约每6个月就给孩子测量1次身高，方法是：让孩子不穿鞋，两脚并拢地紧靠墙壁的某一固定的地方站好。将直尺与墙壁成直角地放在孩子的头上，按此高度在墙上作好标记，然后测量从地面到标记的距离，测出的数据既是孩子的身高。如果孩子在一短暂的阶段生长缓慢，你不必担心，但是如果连续两次测出的数值都很低的话，就要去看医生。
平均数 数值范围。次数值范围是在正常儿童中经可靠的测量得出的数值范围。94%的男孩都在这个数值范围之内。 婴儿的体重 婴儿体重的增加，在整个第一年中是反映其一般体质和健康状况的一项必不可少的指标。你可要求保健员或医生每个月给他称重一次，称重时只包一块干净的尿片。如果你怀疑他体重的增加可能不正常，可以要求增加称重次数。 孩子的体重
过了第一个生日以后可每6个月给他称重1次，称重时只包一块干净的尿片或全裸。孩子体重的增加不可能是稳定不变的，而是缓慢生长期与快速二者最后可相互补偿平衡。不应出现减重的情况，在他身高达到一定标准前，体重最多只会是出现一个暂停增加的阶段，如果孩子的体重有下降，或者连续两次测出的结果都比你预期的少，应征询医生的意见。
研究生班讲义 儿童体格生长及评价 (王惠珊) 一、体格生长的常用指标 1、身长(length) 身长为头部、脊柱与下肢骨骼长度的总和。新生儿出生时仅50厘米。0～6个月的婴儿每月平均增长2.5厘米，7～12个月的婴儿每月平均增长1.5厘米，生后第2年身长共增长10厘米左右，以后儿童身高（height）每年增长值波动在5～7.5厘米左右。接近青春期儿童身高每年增长达8厘米左右，女童较男童略早开始2年。身高估算公式： 2～10岁儿童身高（厘米）= 年龄 X 7 + 70 2、体重(weight) 新生儿出生体重平均3公斤， 6个月内婴儿体重每月平均增长600克～700克，6～12个月体重每月平均增长250克～300克，之后儿童体重每年增长约2公斤。接近青春期儿童体重每年增长可达6公斤左右。体重估算公式： 小于6月婴儿体重 = 出生体重（公斤） + 月龄 x 0.7 7～12月婴儿体重 = 6（公斤） + 月龄 x 0.25 1～10岁儿童体重（公斤）= 年龄 X 2 + 7（或8） 3、头围(head circumference) 新生儿出生时头围34厘米，1岁内增长迅速，上半年8厘米，下半年4厘米，1岁时达46厘米。1岁后增长速度减慢，2岁时48厘米。若有头小畸形，提示脑发育不良；若头围过大，则要怀疑脑积水。 4、胸围(chest circumference) 胸廓与肺的发育可以用胸围测量。胸围在第一年发育最快，1～1岁半超过头围，第二年增长速度明显减慢，平均增长3厘米，以后每年平均增加约1厘米。 5、上臂围(arm circumference) 测量上臂围可以筛选营养不良儿童。1～5岁儿童上臂围多在12.5～13.5厘米间，>13.5厘米示营养良好，<12.5厘米为营养不良。 6、坐高(sitting height) 坐高指由头顶至坐骨结节的长度，坐高可显示躯干的生长。儿童1岁后身高增加主要是下肢增长，坐高占身高的比例随年龄而降低。一般出生时为66%，4岁时60%，10岁时54%。当儿童患克汀病、软骨发育不良时，坐高占身高百分比明显增大。 7、前囟(anterior fontanel) 新生儿出生时头顶部有两个骨性间隙，额骨与顶骨之间的菱形间隙称前囟，顶骨与枕骨之间的三角形间隙称后囟。前囟出生时约1.5～2厘米，数月内随头围的增长而变化，6个月后则逐渐骨化缩小，一般在12~18个月闭合。后囟出生时很小，1～2个月即闭合。囟门闭合情况反映颅骨骨化过程。若囟门闭合早，则要警惕头小畸形；囟门闭合晚，多见于佝偻病、脑积水、克汀病等。同时囟门也是观察婴儿颅内疾病的一个窗口，当小儿患脑炎、脑膜炎而颅压升高时，前囟会变得饱满，而婴儿因腹泻致脱水时，会出现前囟凹陷。
实验七 测定细菌生长曲线 一、 实验目的 1. 了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时； 2. 学习液体培养基的配制以及接种方法； 3. 反复练习无菌操作技术； 4. 了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同； 5. 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法 二、 实验原理 将一定量的细菌接种在液体培养基内，在一定条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定的规律性，如以细菌的活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，成为生长曲线（如图一）。 图一 微生物生长曲线示意图 单细胞微生物的发酵具有四个阶段，即Ⅰ调整期（延滞期）、Ⅱ对数期（生长旺盛期）、Ⅲ平衡期（稳定期）、Ⅳ死亡期（衰亡期）。 生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。 测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。将所测得的光密度值（OD600）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。 从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G 表示。其计算公式为： 2 lg /)lg (lg 121 2W W t t G --= 式中t1和t2为所取对数期两点的时间； W1和W2分别为相应时间测得的细胞含量（g/L ）或OD 。 三、 实验仪器、材料和用具 1. 实验材料:大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板； 2. 培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基
世卫组织最新标准 - (0-5岁)体重生长曲线图 ~ 身高生长 曲线图 ~ BMI生长曲线图 世界卫生组织的最新标准是完全根据母乳宝宝的生长情况制定的。而我国的标准是综合国内不同地区和不同喂养分方式的数据统计出来的。 但这样的数据并不能说明它更正确，而恰恰会由于混合或人工喂养宝宝的因素使数据偏高。 这些新指标是基于8440名母乳喂养的孩子的生长发育状况做出的。 与吃母乳的婴幼儿比起来，吃配方奶的孩子体重比吃母乳的孩子要增长得快些。而“世卫组织”旧的有关婴幼儿的成长发育指标却是根据吃配方奶的孩子的发育情况制定的，这就意味着这一套标准存在着重大缺陷。 从1997年到2003年间，世界卫生组织对包括巴西等6个国家的孩子进行了跟踪调查。这些孩子来自巴西、加纳、印度、挪威、阿曼和美国等6个不同的国家，身体都很健康，且他们的母亲都不吸烟，对孩子的照顾也非常周到。而之前的指标只是取单独一个国家的儿童为样本（也就是美国儿科学会公布的美国婴幼儿生长发育曲线）。
男宝BMI生长曲线图 女宝BMI生长曲线图 新的婴幼儿生长发育指标中还包含了身体质量指数（BMI=体重（公斤）÷身高（米）的平方，单位为公斤/平方米），这是WHO首次在婴幼儿生长发育指标中引入此项指标。BMI为评估体重与身高比例提供了工具，对于监控孩子的肥胖症非常有效。它是评估儿童健康的一个重大革新。 男宝宝体重生长曲线图 专家认为，新指标的发表不会给中国孩子生长发育情况带来大影响。我国每10年都要在北部、中部、南部各选三地，对0-18岁儿童和青少年的身高、体重等情况进行调查统计，并综合了各种喂养方式，
得出我国儿童的身高、体重等指标的参照值。 用生长曲线检测孩子的身高、体重的发育，比起简单用一个数字断定孩子是高是胖要更科学。使用方法如下： 1、做顺时记录。 每个月为孩子测量一次身高、体重，把测量结果描绘在生长曲线图上（不要在孩子生病期间测量），连成一条曲线。如果孩子的生长曲线一直在正常值范围内（3号线到-3号线之间）匀速顺时增长就是正常的。有些孩子的生长速度比较快，生长曲线呈斜线，只要一直在正常值范围内就不用担心。 误区：追求最高值，认为平均值以下就是不正常。 孩子的生长发育与遗传、饮食习惯等多种因素有关，每个孩子的生长发育曲线都不同。平均值曲线不是判断发育正常与否的标准。即使孩子的生长曲线一直在平均曲线之下，最低值曲线之上，只要一直在匀速顺时增长就是正常的。 2、做动态观察。 每2-3个月对生长曲线增长速度进行一次横向比较，如果出现突然增（减）速，就要提起注意，定期体检时可向医生讲述情况，听取医生的建议。 误区：生长曲线突破正常值才引起注意。 很多父母都是在孩子的身高、体重超出或低出正常值勤后才发现问题，似乎有点亡羊补牢。生长曲线总是超过2号线，或低于-2号线时，就应提起注意，是不是你的喂养方式有问题，或者孩子的健康
细菌生长曲线测定 生05 边晔2010030026 四班 同组成员：竞国梁夏川两位学弟 实验时间2012年11月29日 一、实验目的 1.了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时 2.学习液体培养基的配制以及接种法 3.反复练习无菌操作技术 4.了解不同细菌，不同接种法在同一培养基上生长速度的不同 5.掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的法 二、实验原理 将一定量的菌种接种在液体培养基，在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。 测定微生物生长曲线的法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。 本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。将所测得的光密度值（OD600）与对应的培养时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌和死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。 三、实验仪器、材料和用具 大肠杆菌，枯草杆菌，金黄色葡萄球菌菌液及平板； 培养基(100mL/250mL三角瓶X10瓶/大组)，牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基； 取液器(5000ul, 1000ul 各一支)； 培养箱，摇床，722s分光光度计； 比色皿3个+共用参比杯一个。 四、实验步骤 1.准备菌种（已做）：将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡 培养18h，另外准备单菌落平板各1块； 2.接种，分成3小组做，实验结果共享： 第（1）小组 1)取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃200rpm