得分：_______ 南京林业大学
研究生课程论文
2015 ～20016 学年第二学期
课程号：
课程名称：
论文题目：
学科专业：森林保护
学号：3150462
姓名：王立超
任课教师：黄麟
二○一六年六月
内容
本文研究松材线虫、松墨天牛和真菌在松树中的共生关系
实验材料和方法：
（1）真菌
小长喙霉在PDA平板上、25℃条件下培养一周，使用前在5℃条件下保存。
灰葡萄孢在10 mL的大麦籽粒上培养。
（2）线虫
强毒虫株松材线虫T-4在25℃条件下在灰葡萄孢上培养，使用前在5℃条件下保存。松材线虫悬浊液包括成虫和幼虫，悬浊液浓度为50000条/mL。
（3）昆虫
松墨天牛在恒定条件下培养（25℃，16h光照、8h黑暗），让其繁殖10代，第七代到第十代成虫用来在赤松小苗上产卵，收集天牛所产的卵并将其放置在湿纸巾上，在一天之内孵化的幼虫用于实验。
（4）松枝
2014年六月采伐两颗12年生（胸径分别为3.9和5.2cm）的赤松和两颗12年生的黑松（胸径分别为8.1和9.0cm），分别在实验1和实验3中使用。2015年二月采伐3颗12年生的赤松用于实验2，胸径分别为7.4、7.6和8.4cm，2014年十月采伐一颗12年生的赤松用于实验4，其胸径为6.8cm。树枝截为15cm一段，在树枝的两端用石蜡密封起来，每个实验组树枝的树木特定的每组树枝之间不存在显著差异
(5)接种
使用凿子和镊子在离树端13.7mm处从木质部分离树皮（面积22.3mm×17.3mm），用刻刀在漏出的木质部中间挖一个直径6-7mm圆形刻槽用以放置松墨天牛幼虫，一份带有灰葡萄孢或则没有灰葡萄孢的面积为5×5mm的PDA培养基放置在远离树端、接近圆形刻槽的位置。用到划长16.8mm、最大宽度为14.3mm的三角形裂口，在漏出的韧皮部接种20uL的线虫悬浊液（1000条线虫）或者是无菌纯净水。两个树皮伤口最小距离平均为13.7mm，两个伤口接种后覆盖原来的树皮，用封口膜包起来，即使不接种松墨天牛幼虫，也挖一个小刻槽，实验4中松树枝条不用接种松材线虫悬液或水，不会在树皮上形成倾
斜伤口。
实验一、
为了确定松墨天牛幼虫和小长喙霉对松材线虫种群生长的影响，一组赤松枝条接种松材线虫、松墨天牛和小喙长霉。第二组枝条接种松材线虫、松墨天牛和PDA，第三组枝条接种松材线虫和小喙长霉，第四组枝条接种松材线虫和PDA。他们被垂直放置使线虫远离容器底部。25℃，16h光照、8h黑暗，相对湿度100%条件下常温培养，用纯净水保持湿度。
接种18天后，从松枝上剥离树皮，从枝条上取幼虫和幼虫粪便，记录韧皮部和木质部上蓝变面积确定小喙长霉的繁殖情况，从纵向韧皮部上剥离四份之一到二分之一的树皮，将树皮外层剥离，收集里面树皮以获得韧皮部样品，再将里层树皮的韧皮部剪切为1-2mm大小的树皮块，使用一把15mm宽的刀片，从接种松墨天牛幼苗和松材线虫的地方包括髓取木质部样品，记录木质部样品真菌繁殖情况，粪便、韧皮部和木质部分别在25℃下使用贝尔曼漏斗法分离48-72h，计算分离线虫浓度，材料在60℃下烘5-12d，称重，线虫密度表示每克材料干重中松材线虫的数量。
分别使用电子天平和游标卡尺测量幼虫体重和头壳宽度，分别精
确到0.1mg和0.05mm，根据头壳宽度确定幼虫龄期：0.585–
1.170,1.260–1.935, 1.980–3.150和3.150–4.365 mm分别为一龄、二龄、三龄和四龄虫。
实验二、
确定赤松中韧皮部、木质部和天牛幼虫蛀屑线虫密度的不同，在2015年2月26日将刚孵化的幼虫、1000条松材线虫和一份接有小长喙霉的PDA接种在10条直径相似的上述赤松枝条上，2015年3月26日分别将韧皮部、木质部和幼虫蛀屑用以分离线虫，确定线虫密度，
实验三、
确定松材线虫种群和小喙长霉对松墨天牛生长发育的影响，四组黑松枝条接种松材线虫、松墨天牛和小喙长霉三个物种组成的四种组合。方法和实验一方法相同，培养条件相同。
每天观察松枝，记录松墨天牛羽化情况，分性别记录成虫数量，体重和鞘翅长分别精确到0.1mg和0.05mm。没有松墨天牛出现的松枝在接种153-164d后分离，称量幼虫的鲜重和记录头宽、颜色、肠内排泄物的有无以及幼虫所在的位置。
实验四、
为确定松墨天牛幼虫对小喙长霉繁殖的影响，6个赤松枝条接种小喙长霉和松墨天牛幼虫，接种22d后，剥离松枝树皮，幼虫蛀屑和幼虫取样，测量幼虫体重和头壳宽度
文章结构
设计思路
实验一
为研究赤松枝条中松墨天牛幼虫和小喙长霉菌对松材线虫种群的影响，实验选取年龄和粗度相似的赤松为材料，分四组实验进行，一组赤松实验材料只接种松材线虫、一组赤松材料接种松材线虫和松墨天牛，一组赤松材料接种松材线虫和小喙长霉菌，最后一组赤松实验材料接种松材线虫、松墨天牛和小喙长霉菌，四组实验之间彼此形成对照，通过测量不同接种组合、不同部位的松材线虫密度和松墨天牛的体重和头宽指标来确定三者之间的相互影响。
实验二
为研究韧皮部、木质部和天牛幼虫粪便中线虫密度的不同，刚孵化的松墨天牛、松材线虫和小喙长霉菌接种在10个粗细相似的赤松
枝条上，按照实验一发法在各部位取样，测定松材线虫密度。
实验三
为研究松材线虫种群和小喙长霉菌对松墨天牛生长发育的影响，在四组黑松实验材料上按照实验一中接种方法接种松材线虫、松墨天牛和小喙长霉菌三个物种的组合。每天观察记录松墨天牛成虫出现情况，测定体重和鞘翅长度指标。在接种后153-164天后，解剖没有松墨天牛出现的松树枝条，称量记录活天牛幼虫的头宽、身体颜色、排泄物状态和其在松树枝条内所在的位置。
实验四
研究松墨天牛对小喙长霉菌影响，6个赤松枝条接种松墨天牛和小灰长霉菌，24天后，在接种位置上剥离树皮，从松树枝条上取下幼虫和幼虫粪便，取整个松树枝条四分之一到二分之一的树皮（包括天牛取食过的树皮，不包括石蜡覆盖的树皮）去除外层树皮，韧皮部切成1-2cm宽的小块，使用手钻在接种松墨天牛和小喙长霉菌的位置取韧皮部包括髓，松墨天牛粪便、韧皮部和木质部放在聚乙烯袋子里，-20℃下保存，两天后，在真空状态下冻干。测定麦角固醇含量。
结果和结论
实验一
在接种18天后，解剖松树枝条，在树皮下发现20只活的天牛幼虫和4只死的天牛幼虫，活天牛幼虫包括1个一龄幼虫、2个二龄幼虫和17个三龄幼虫，平均体重99.2mg，平均头壳宽2.23mm，在幼虫肠道内发现粪便。解剖实验表明在单独接种松材线虫的11个松树枝条中有6个松树枝条可观察到小喙长霉菌，在接种松材线虫和人松墨天牛的12个松树枝条中有9个松树枝条可观察到小灰长霉菌，在单独接种小灰长霉菌的所有松树枝条上的木质部和韧皮部均有真菌分布。在未接种松墨天牛幼虫的松树枝条，木质部和韧皮部的分别分离到线虫量为2.2g和2.9g，在接种松墨天牛幼虫的松树枝条上，木质部、韧皮部和粪便中分别分离到3.6g、3.2g和0.29g松材线虫。平均线虫密度随接种位置、松墨天牛幼虫及真菌的有无而不同，在未接种真菌的松树枝条木质部的松材线虫密度小于其他接种位置的松材线虫密度，小于接种真菌的松树枝条。未接种松墨天牛幼虫的松树枝条线虫密度大于接种松墨天牛幼虫的松树枝条线虫密度。双因素方差分析表明，在接种松墨天牛幼虫的受接种位置和真菌有无影响，但不受接种位置和真菌互作影响，松材线虫密度在粪便中最大，其次为木质部，最小为韧皮部。
实验二
在接种刚孵化的松墨天牛幼虫的赤松枝条中存在天牛粪便，解剖发现9个活的天牛和1个死亡的天牛幼虫，活天牛幼虫平均体重为118.4mg，头壳宽2.19mm，表明活天牛为三龄幼虫，死亡天牛头壳宽为1.35mm，说明此为二龄幼虫，解剖实验发现在10个松树枝条的韧皮部存和5个松树枝条的部分木质部存在真菌。韧皮部、木质部和粪便线虫密度为5.3g、3.3g和0.52g。双因素方差分析表明，线虫密度受接种位置影响，但不受松树枝条影响，松材线虫密度最大为天牛粪便、其次为韧皮部和木质部。
实验三
在接种幼虫后的71天到167天期间出现23只雌天牛和30只雄天牛，在接种后153-164天后解剖松树枝条发现在木质部蛹室内发现11只活天牛幼虫和9只死亡天牛幼虫，活天牛幼虫平均体重为982.3mg，头壳宽为3.89mm，体色为黄白色到黄色，表明他们是四龄幼虫。方差分析表明成虫的体重不受真菌接种实验、线虫接种、性别、
树皮面积和彼此之间互作关系影响。方差分析也表明天牛鞘翅长度受真菌和松材线虫互作关系、真菌、松材线虫和树皮面积三者互作关系的影响，但是不受真菌、线虫和树皮面积的影响。雌天牛的鞘翅比雄天牛鞘翅长。鞘翅长度与树皮面积呈负相关关系。方差分析显示接种天牛幼虫后，天牛成虫出现时间不受真菌、线虫、树皮面积和天牛性别以及彼此之间互作关系的影响。
实验四
在接种22天后，在松树枝条发现6只活天牛幼虫，平均体重171.2mg，平均头壳宽为2.4mm，表明他们为三龄幼虫。天牛粪便的麦角固醇含量最大，其次为韧皮部和木质部，方差分析显示三者之间存在极显著差异。
创新性
指导意义
实验过程控制单因素变量，实验测定的指标多样，可以从不同角度反映实验结果，实验分析多样化，实验数据多次筛选，层层分析，
增加数据可靠性。
不足之处
实验中只考虑线虫取食小喙长霉菌，没有考虑线虫取食松树枝条活细胞的
实验四研究松墨天牛对小喙长霉菌影响，实验中在6个赤松枝条上均接种松墨天牛幼虫和小喙长霉菌，但未在赤松枝条上单独接种小喙长霉菌作为对照。
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APF-I型松墨天牛化学引诱剂及诱捕器防治推广示范方案为进一步加大松材线虫病传播媒介松墨天牛的防治力度，最大限度地减少疫情传播蔓延，巩固、提高防控成效，根据国家林业局有关要求，市林业局决定2013年在全市31个区县和缙云山管理局开展APF-I型松墨天牛高效化学引诱剂（简称APF-I诱剂）及诱捕器防治推广示范工作，APF-I诱剂及诱捕器购置费由市财政统一安排。根据APF-I诱剂及诱捕器的特点、松墨天牛在我市的发生规律及防控工作需要，特制定本方案。 一、APF-I诱剂及诱捕器简介 APF-Ⅰ诱剂及诱捕器是专用于监测和防治松材线虫病传播媒介昆虫松墨天牛的新成果、新产品，具有以下特点： （一）前移防治关口，突破技术瓶颈。松材线虫主要依靠松墨天牛携带和取食松枝造成的伤口传入松树，松墨天牛补充营养期是传播松材线虫的重要时期。现有天牛诱剂主要是作用于产卵期的松墨天牛成虫，能有效降低下一代天牛的虫口密度，但对防止疫情传播的作用较小。APF－Ⅰ诱剂是含虫源性物质的一种化学诱剂，主要诱捕交尾产卵前补充营养期的松墨天牛成虫，诱捕器含水基润滑涂层材料，对APF－Ⅰ诱剂诱捕效率具增效作用。APF－Ⅰ诱剂的应用，解决了取食传播期松墨天牛成虫的防治难题，对控制松材线虫病疫情具有里程碑意义。 （二）作用距离远，持效期长。APF－Ⅰ诱剂诱芯贮存有效期＞
10个月（-20－10℃），野外持效期＞30天（20－25℃），靶标敏感距离＞150 m（106亩）。诱捕器使用寿命≥3年。 （三）操作方便，成本较低。APF－Ⅰ诱剂主效成分采用塑料袋封装，体积小，重量轻，比同类瓶装液体诱剂更便于野外大量携带。1套APF－Ⅰ诱剂及诱捕器（12个诱芯、1个诱捕器）可覆盖106亩松林，保守使用按覆盖50亩计算，每亩直接成本10.4元，持效时间6个月，能覆盖全部成虫活动期。与轻型直升飞机防治相比较：飞机防治的特点是作业效率高、劳动强度低。同一区域施两次药，每亩直接成本40元，持效期可达1个半月，为成虫活动期的1/4，直接成本为APF－Ⅰ的2.9倍。 （四）诱捕效率高。重庆、四川、湖南、广东、福建使用APF －Ⅰ诱剂与同类其它诱剂对比诱捕结果，APF－Ⅰ诱剂分别为同类诱剂的7.2倍、2.3倍、42.8倍、12.5和8.4-42倍。表明APF－Ⅰ诱剂具有很高的松墨天牛诱捕效率和广泛的地理适用性。 二、示范点选择及布局 （一）集中设置。APF-Ⅰ诱剂及诱捕器防治范围以疫点乡镇（林场）为单位逐个推进，或根据疫点分布情况选择集中连片的区域实施（可跨乡镇）。 （二）防止人为扩散。松材线虫病发生区县：原则上只在疫点小班使用。非松材线虫病发生区县：优先考虑重点预防区及天牛密度大的林分。疫点小班周边2公里范围内禁止开展引诱防治，特别是与疫区发生小班毗邻的非疫情区县、乡镇，严禁设置诱捕点。
松墨天牛怎么防治？ 松墨天牛为天牛科墨天牛属的一种昆虫，是我国松树的重要蛀干害虫，也是松树的毁灭性病害松材线虫病的主要媒介昆虫，在松材线虫的扩散和侵染的过程中起着携带、传播和协助病原侵入寄主的关键性作用，下面我们就一起来看一看松墨天牛怎么防治吧！
上年10月至4月(蛹、成虫期) 1、将已被侵害的原木和松杆集中，用塑料薄膜盖住，四周均匀放置熏蒸剂后迅速将薄膜边缘用土压住封闭，一般熏蒸2～3天即可。 2、用蒸汽热、炕房热烘处理或恒温50℃条件热处理24小时，虫害木除害熏蒸处理必须在成虫扬飞前，药剂用磷化铝4克/立方米、溴甲烷16克/立方米或硫酰氟。 3、将采伐期调整到秋末，将销售期调到冬、春季，以便在天牛为害之前将采伐下的松杆全部销售完，避免人为虫源地的发生。 4、12月清理虫害木、衰弱木、被压木和林下灌木、杂草等可降低林间松褐天牛虫口密度。 5、利用天然地理条件开辟4千米宽隔离带，可有效阻止松褐天牛扩散。 6、虫害木伐倒后林外存放12个月，新伐虫害木剖成厚度2厘米以下的木板，可杀死绝大多数松褐天牛。
5月至8月(扬飞成虫期) 1、设置饵木诱杀，诱饵木间隔100米以上，每点砍伐活松树1株，分成3段，堆成三角形架，枝桠堆放在三角架下，间隔一定时间在三角架上添加1段新伐树段。 2、林中设置诱捕器可监测其发生及种群变动情况，撞板漏斗型或撞板水盆型诱捕器效果最佳，引诱剂按33网格状布局。用450瓦高压汞灯诱杀松褐天牛，效果较好。 3、喷洒50%杀螟松或25%灭幼脲Ⅲ号胶悬剂1000～1500倍液，4月中旬和5月中旬用50%杀螟松·噻嗪酮100倍液，5月中旬和6月中旬喷洒2次400～500倍保松灵，6月中下旬超低容量喷雾8%绿色威雷900毫升/公顷，在松褐天牛补充营养期12%倍硫磷乳油150倍+4%聚乙烯醇100倍+2.5%溴氰菊酯乳油2000倍液喷雾防治。
松褐天牛的防治技术 松褐天牛别称松黑天牛，为松树的主要蛀干害虫，在松树分布地区发生极为普遍且危害严重，不仅使松树死亡，而且还是松材线虫病的主要传播媒介，做好松褐天牛的防治工作对保护松树资源和生态环境十分重要，下面我们就一起来看一看松褐天牛的防治技术吧！
国内分布 松褐天牛在国内分布于江苏、安徽、浙江、江西、湖南、福建、广东等省，主要为害马尾松，其次为害冷杉、云杉、雪松、落叶松等生长不良的树木或新伐倒木，特别是遭受马尾松毛虫为害后生长衰弱的松树，此虫大量侵入，极易引起成片松树枯死。
生长习性 松褐天牛在本地每年发生1代，以老熟幼虫在被害树干木质部内越冬，翌年3月下旬越冬幼虫在虫道末端蛹室化蛹。4月中旬成虫开始羽化，咬羽化孔飞出，啃食嫩枝、树皮补充营养，5月为盛期。成虫具有趋光性，性成熟后，在树干基部或粗枝条的树皮上，咬一眼状刻槽，然后于其中产一至数粒卵。孵化的幼虫蛀入韧皮部、木质部与边材，蛀成不规则的坑道。
防治方法 1、诱捕器诱杀：将诱捕器用铁丝挂在2棵松树之间，下端距地面约1.3米，诱芯瓶内放置药棉，倒入引诱剂，集虫器内倒入半桶水，用铁丝固定在漏斗颈上。诱捕器主要设在林内空气较为流通的地方，相隔距离100～150米。每隔3天观察1次，并将集虫器处理干净，每隔7天换1次引诱剂。 2、白僵菌防治：球孢白僵菌对松褐天牛具有较强的致病性，配合使用松褐天牛引诱剂，由于引诱剂的作用，天牛羽化时聚集到所布点周围的松树上取食被缠在树干上无纺布中的球孢白僵菌而感染，并传染其他松褐天牛，从而达到灭杀松褐天牛成虫的目的。 3、营林防治 ①人工清理：对林地内的枯死树、濒死树、受害严重的病虫害木及时进行砍伐、清理，使之不利于松褐天牛生殖繁衍，做好防范、监测工作。 ②封山育林：加大封山育林力度，严格控制阔叶林采伐，逐步改变林分结构，定向培育混交林，提高森林生态系统的自控能力。 ③营造混交林：严格控制人工林抚育强度，逐步将同龄林、大面积纯林改造成为混交林、复层林，增加松褐天牛天敌种类，达到生态平衡。 4、化学防治
松墨天牛发生规律及生物特性 松墨天牛既是松材线虫病的主要传播媒介，同时又是松林的重要蛀干昆虫。松墨天牛会蛀食树干和大枝条的韧皮部和木质部，破坏组织，影响水分、养分运输，松材线虫又会趁机感染进入松树内部，引起松树枯死，严重降低松树出材率、材质，造成大量的经济损失。 松墨天牛的发生规律一般由所处地区决定。江苏、浙江、安徽等省、山东烟台地区松墨天牛1 年发生1代；在广东1年发生2、3代，以2代为主；在南部山区1 年发生3代；在粤北偏北地区1年发生1代。 松墨天牛有着成虫，卵，幼虫，蛹四种形态，并且部分形态中有着多种阶段。不同形态不同阶段的松墨天牛，对松树造成的伤害也各不相同。 一．成虫 1）羽化：成虫在蛹室内羽化后，先向外咬羽化孔道，成虫咬羽化孔时的木屑呈粉状，羽化孔道垂直于树干。 2）补充营养与产卵：在林间，成虫寻找松树嫩枝树皮补充营养。5-9天后开始交尾产卵，产卵前在树皮上咬刻槽，造成泪滴状松脂流下，一刻槽产卵1粒，少数可产2、4粒。松墨天牛产卵和取食交替进行，产卵期颇长，平均5天左右。 二．卵 长约4毫米，乳白色，略呈镰刀形。6月中旬开始孵化，7月上、中旬是卵孵化高峰期。三．幼虫 1）1龄幼虫：在韧皮部取食，，排出褐色蛀屑 2）2龄幼虫：在边材表面取食，幼虫向前蛀食将蛀屑推至身后，在内皮和边材形成不规则的平坑，导致树木输导系统受破坏。
3）3-4龄幼虫：向木质部内蛀害。约在秋天穿凿扁圆形孔侵入木质部3-4厘米后向上或向下蛀纵坑道，纵坑长约5-10厘米，然后弯向外蛀食至边材，在坑道末端筑蛹室化蛹，整个坑道呈“U”字形。幼虫蛀食时发出嚓嚓的响声，蛀屑纤维状，除蛹室附近留下少许蛀屑外，大部均推出堆积树皮下，坑道内很干净。 四．蛹 老熟幼虫做好蛹室后不久，虫体缩短变粗，呈淡黄色，不取食也不排蛀屑，经5一7天预蛹期便头部向上，面朝树皮开始化蛹。 根据每个阶段松墨天牛不同的蛀食特点，我们能找到诊断松墨天牛虫害的早期依据。如成虫在树皮上咬刻槽，产生的泪珠状松脂，及幼虫在木质部外蛀食形成的白色或褐色蛀屑与粪便的混合物，都可作为松树被松墨天牛为害的早期诊断依据。
浅谈松褐天牛的危害及 防治 公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]
浅谈松褐天牛的危害及防治 东至县龙泉镇林业站许义龙 松褐天牛又名松黑天牛、是松树的主要蛀干害虫，在松树分布地区发生极为普遍，且危害严重，它不仅使松树死亡，而且还是松材线虫病的主要传播媒介。松材线虫病又称松树爱滋病，是国际检疫对象。而东至县龙泉镇与江西省松材线虫病疫区波阳、彭泽两县紧密相邻，交通十分便利，因此做好松褐天牛的防治工作，对保护本地松树资源和生态环境十分重要。下面就本人在实践中如何进行褐天牛防治谈一下自己的观点： 一、国内分布与危害情况 松褐天牛在国内分布于江苏、安徽、浙江、江西、湖南、福建、广东等省。主要为害马尾松，其次为害冷杉、云杉、雪松、落叶松等生长不良的树木或新伐倒木，特别是遭受马尾松毛虫为害后生长衰弱的松树，此虫大量侵入，极易引起成片松树枯死。 二、生物学特性 松褐天牛历经卵、幼虫、蛹、成虫完成整个生命周期。松褐天牛以老熟幼虫在木质部坑道中越冬。次年 4 月越冬幼虫在虫道末端蛹室中开始化蛹 ,5 月成虫开始羽化 , 羽化后成虫咬 1 个圆形羽化孔出树 , 取食松树幼枝嫩皮补充营养。成虫具弱趋光性 , 喜在疏林、光线充足的林地内活动产卵 , 产卵时 , 先在病树或衰弱树干或枝上咬 1 个近圆锥形的产卵痕 , 每痕产卵 1 粒 ,5 月下旬至 7 月为卵期。幼虫共
5 龄 ,1 龄幼虫在内皮取食 ,2 龄幼虫在边材表面取食 , 在内皮和边材形成不规则的平坑 ,3 ～ 4 龄幼虫穿凿扁圆形孔侵入木质部 3 ～ 4 ｃｍ后向下蛀纵坑道 , 纵坑长 5 ～ 10cm, 然后弯向外蛀食至边材 , 整个坑道呈“Ｕ”字形 ,5 龄幼虫在虫道末端咬成宽大的蛹室 , 化蛹前以木屑堵塞蛀屑两头 , 蛹期半个月左右。 三、松褐天牛与松材线虫病 松材线虫病是松树的毁灭性病害，被成为松树的癌瘤。松材线虫病入侵树体后 , 在其摄食过程中破坏树脂管道组织的上皮细胞和薄壁细胞 , 阻碍树脂渗透 , 使立木输导功能减弱 , 造成代谢障碍。同时 , 被破坏的组织常充满细菌 , 分泌有害毒素 , 加快松树的死亡速度。其严重性还在于它的繁殖能力特别强。一条雌成虫平均产卵 100 粒左右。在其增殖阶段 , 4 ～ 5 天繁殖 1 代。一株 15 ～ 20 年生大树夏季接种一对雌雄成虫 , 经 3 个月增殖即可达到足以使立木枯死的数量。如在夏季一次接种 5000 ～ 10000 条 , 经 14 ～ 20 天可使 15 ～ 20 年生的松树枯死。绝大多数松材线虫在病材中可一直生存到松褐天牛羽化出孔。 松褐天牛是松材线虫病最主要的媒介昆虫。成虫羽化后体表即有线虫附着 , 大部分线虫在体内 , 以头、胸部最多 , 可分布在整个气管系统内 , 松褐天牛携带松材线虫的携带率为 62 5% ～ 100% 。一头成虫携带线虫数量最高可达 289000 条 , 平均携带量 4601 ～ 18445 条/ 头。在成虫羽化外出后 2 ～ 3 周 , 线虫脱离天牛虫体 , 脱出率为43% ～ 70% 。脱离的线虫侵入树干危害。防治松材线虫病的关键是控制
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910378616.5 (22)申请日 2019.05.08 (71)申请人 福建英格尔生物技术有限公司 地址 363122 福建省漳州市漳州开发区丽 江路8号怡心天地3幢1702室 (72)发明人 金化亮 关雄 何学友 蔡守平 梁景华 林永旋 (74)专利代理机构 厦门市精诚新创知识产权代 理有限公司 35218 代理人 汤云武 (51)Int.Cl. A01M 1/02(2006.01) (54)发明名称一种松墨天牛的诱捕装置(57)摘要本发明公开一种松墨天牛的诱捕装置，包括顶盖、接虫漏斗，接虫漏斗为上大下小结构，接虫漏斗的下端连接集虫容器，其还包括多个挡虫叶片，每个挡虫叶片的一侧设有缺口，多个挡虫叶片利用带有缺口的一侧相互靠在一起并通过第一连接件绑在一起，多个缺口形成松墨天牛诱芯的容置空间，相邻的挡虫叶片形成设定的夹角，每个挡虫叶片的上端一部分穿过顶盖并与顶盖连接在一起，每个挡虫叶片的下端通过第二连接件与接虫漏斗固连在一起。进一步，所有穿过顶盖的挡虫叶片的上端部分通过第三连接件连接在一起，所述第三连接件形成诱捕装置的悬挂部。本发明拆装方便，便于制造和包装，制造成本和物流成本都较低，可有效降低松墨天牛的防治 成本。权利要求书1页 说明书4页 附图6页CN 110150247 A 2019.08.23 C N 110150247 A
权 利 要 求 书1/1页CN 110150247 A 1.一种松墨天牛的诱捕装置，包括顶盖、接虫漏斗，接虫漏斗为上大下小结构，接虫漏斗的下端连接集虫容器，其特征在于：还包括多个挡虫叶片，每个挡虫叶片的一侧设有缺口，多个挡虫叶片利用带有缺口的一侧相互靠在一起并通过第一连接件绑在一起，多个缺口形成松墨天牛诱芯的容置空间，相邻的挡虫叶片形成设定的夹角，每个挡虫叶片的上端一部分穿过顶盖并与顶盖连接在一起，每个挡虫叶片的下端通过第二连接件与接虫漏斗固连在一起。 2.根据权利要求1所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：所有穿过顶盖的挡虫叶片的上端部分通过第三连接件连接在一起，所述第三连接件形成诱捕装置的悬挂部。 3.根据权利要求1所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：所述挡虫叶片为长方形，挡虫叶片的四个角设有连接通孔，所述接虫漏斗上端边缘也设有多个连接通孔，第二连接件穿过一个挡虫叶片下端外侧角落的连接通孔和接虫漏斗上端边缘一个连接通孔把挡虫叶片的下端与接虫漏斗固连在一起。 4.根据权利要求1所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：所述挡虫叶片为长方形，挡虫叶片的四个角设有连接通孔，所述接虫漏斗上部设有多个插接通孔，每个挡虫叶片的下端外侧的角从接虫漏斗内侧穿过一个所述插接通孔并使得该挡虫叶片的下端外侧角落的连接通孔处于接虫漏斗的外侧，第二连接件穿过所有挡虫叶片下端外侧角落的连接通孔把挡虫叶片的下端与接虫漏斗固连在一起。 5.根据权利要求1所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：所述缺口为方形，缺口上面和下面的挡虫叶片上设有连接通孔。 6.根据权利要求5所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：第四连接件穿过所有挡虫叶片缺口上面的连接通孔把所有挡虫叶片绑在一起，该第四连接件形成所述诱芯的悬挂部； 第五连接件穿过所有挡虫叶片缺口下面的连接通孔把所有挡虫叶片绑在一起，该第五连接件形成所述诱芯的固定部；所述诱芯固定在第四连接件和第五连接件之间。 7.根据权利要求1所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：所述接虫漏斗为倒锥形状，所述接虫漏斗的下端设有连接部；所述集虫容器为集虫瓶，集虫容器与接虫漏斗下端的连接部采用卡接或螺纹连接方式相连接，或所述集虫容器通过一接口配件与接虫漏斗下端的连接部相连接，集虫容器的底部和侧面均设有多个排水孔。 8.根据权利要求1所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：所述挡虫叶片的双面和所述接虫漏斗内表面涂有防逃逸的光滑层。 9.根据权利要求1所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：所述顶盖为圆锥形，顶盖上设有多个与挡虫叶片上端相套接的套接通孔；所述挡虫叶片和所述顶盖由钙塑板制成。 10.根据权利要求1至9任一项所述的一种松墨天牛的诱捕装置，其特征在于：所述挡虫叶片为三个或四个，所述挡虫叶片为三个时，相邻挡虫叶片形成的夹角为120°，所述挡虫叶片为四个时，相邻挡虫叶片形成的夹角为90°。 2
防治松墨天牛的化学杀虫剂概述 李美娜,颜铖颖,郑扬航 (福建农林大学林学院,福州350002) 摘要:松墨天牛是一种重要的林业害虫,为松材线虫病的主要传播媒介。介绍防治松墨天牛化学杀虫剂的种类、特点及相关应用试验结果,为合理使用防治松墨天牛的化学杀虫剂提供参考。关键词:化学杀虫剂;松墨天牛;综述;防治中图分类号:S763.306 文献标识码:A 文章编号:1674-1161(2017)05-0013-02 松墨天牛(Monochamus alternatus Hope )又称松褐天牛、松天牛,属昆虫纲鞘翅目(Coleoptera)天牛科(Cerambycidea)墨天牛属(Monochamus)。我国最早报道松材线虫病是1982年在南京中山陵,目前疫区已经扩展到全国14个省(自治区、直辖市),经济损失逐年增加。有效控制松墨天牛不但能减少对松树的直接伤害,还可以控制松材线虫病的发生和蔓延。 1化学杀虫剂的特点 化学杀虫剂具有胃毒、触杀、内吸及渗透性极强的特点,对松墨天牛的击倒力强,防治快速高效,在实际中应用普遍。此外,它的残效期长,特别适宜在我国南方4—6月雨水较多的林区使用。 2防治松墨天牛的化学杀虫剂 2.1氯化烟碱类杀虫剂 2.1.1 噻虫啉 氯化烟碱类杀虫剂是一种作用于昆虫 烟碱型乙酰胆碱受体的杀虫剂,具有胃毒、触杀和内吸作用。其低毒、低残留,对松墨天牛具有致命性,且持效期长,能在一定程度上控制松墨天牛的传播和蔓延。 效果较好的噻虫啉药剂有2%噻虫啉微胶囊悬浮剂、1%噻虫啉微胶囊颗粉剂和48%噻虫啉水悬浮剂。在最佳用药剂量下,上述药剂基本能保持28d 左右的持效期。戴玉斌使用2%噻虫啉微胶囊进行林间松墨天牛防治试验,施药1个月后,诱木刻槽数量依然较少。 2.1.2吡虫啉 吡虫啉是氯化酰胺类杀虫剂的代表。张 垒岩等利用97%吡虫啉原药、70%喹硫磷原油等6种药剂,对松墨天牛进行药效试验,发现吡虫啉和喹硫 磷防治松墨天牛的作用明显优于其他药剂。2.2有机磷类杀虫剂 2.2.1 含杂环有机磷 闽水发用20%毒死蝉微胶囊悬 浮剂300倍液处理松墨天牛,试验结果表明:处理后的30d 内,马尾松树干上的流脂处和产卵刻槽均有显著降低;防治至少需要喷雾3次。 2.2.2 磷酸酯及膦酸酯 周叶森在四川省广安市进行 80%敌敌畏乳油防治松墨天牛试验,试验结果表明: 树干注射比虫道注射和毒签的防治效果好,且不同浓度的毒签防治和虫道注射的效果差异不显著。2.3拟除虫菊酯类杀虫剂 拟除虫菊酯类杀虫剂对害虫有胃毒和触杀作用,且触杀作用强于胃毒作用。同时,此类杀虫剂速效性好,击倒力强,药剂保存在微胶囊内的效果更好。其相关杀虫机理为:当松墨天牛踩触到该杀虫剂后,微胶囊破裂释放出的药剂粘附于其足跗节及腹部节间褶,并通过节间膜进入体内,使神经组织受到干扰后出现麻痹,并渐渐无法活动和取食,最后死亡。没被踩破的胶囊可以保持持效期,避免浪费。 3%氯氰菊酯微囊剂释放速度稳定,比较适合在 农田使用;8%氯氰菊酯微囊剂(绿色威雷)若没有外力影响,有效成分可以长时间保存,适合防治森林中的松墨天牛。2.4抗生素类杀虫剂 抗生素类杀虫剂既有胃毒作用又兼具触杀作用,具有毒性低、特异性强、残留少、无公害等特点,对松墨天牛有较高的活性,防治过程中对人蓄伤害低,利于对松墨天牛进行综合防治。赖福盛等研究发现,将 1%阿维菌素触破式微胶囊剂稀释成150倍,每隔10d 喷洒1次,在成虫羽化前25d 设置饵木并使每两株之间的距离相隔150m 左右,可以大大降低松墨天 收稿日期:2017-04-10 作者简介:李美娜(1996—),女,从事森林保护方面的研究。 第5期总第275期 No .5Total No.275 2017年5月May 2017 农业科技与装备 Agricultural Science&Technology and Equipment
浅谈松褐天牛的危害及防治 东至县龙泉镇林业站许义龙 松褐天牛又名松黑天牛、是松树的主要蛀干害虫，在松树分布地区发生极为普遍，且危害严重，它不仅使松树死亡，而且还是松材线虫病的主要传播媒介。松材线虫病又称松树爱滋病，是国际检疫对象。而东至县龙泉镇与江西省松材线虫病疫区波阳、彭泽两县紧密相邻，交通十分便利，因此做好松褐天牛的防治工作，对保护本地松树资源和生态环境十分重要。下面就本人在实践中如何进行褐天牛防治谈一下自己的观点： 一、国内分布与危害情况 松褐天牛在国内分布于江苏、安徽、浙江、江西、湖南、福建、广东等省。主要为害马尾松，其次为害冷杉、云杉、雪松、落叶松等生长不良的树木或新伐倒木，特别是遭受马尾松毛虫为害后生长衰弱的松树，此虫大量侵入，极易引起成片松树枯死。 二、生物学特性 松褐天牛历经卵、幼虫、蛹、成虫完成整个生命周期。松褐天牛以老熟幼虫在木质部坑道中越冬。次年 4 月越冬幼虫在虫道末端蛹室中开始化蛹 ,5 月成虫开始羽化 , 羽化后成虫咬 1 个圆形羽 化孔出树 , 取食松树幼枝嫩皮补充营养。成虫具弱趋光性 , 喜在疏林、光线充足的林地内活动产卵 , 产卵时 , 先在病树或衰弱树干或枝上咬 1 个近圆锥形的产卵痕 , 每痕产卵 1 粒 ,5 月下旬至 7 月为卵期。幼虫共 5 龄 ,1 龄幼虫在内皮取食 ,2 龄幼虫在边材表面取食 , 在内皮和边材形成不规则的平坑 ,3 ～ 4 龄幼虫穿凿扁
圆形孔侵入木质部 3 ～ 4 ｃｍ后向下蛀纵坑道 , 纵坑长 5 ～ 10cm, 然后弯向外蛀食至边材 , 整个坑道呈“Ｕ”字形 ,5 龄幼虫在虫道末端咬成宽大的蛹室 , 化蛹前以木屑堵塞蛀屑两头 , 蛹期半个月左右。 三、松褐天牛与松材线虫病 松材线虫病是松树的毁灭性病害，被成为松树的癌瘤。松材线虫病入侵树体后 , 在其摄食过程中破坏树脂管道组织的上皮细胞和薄壁细胞 , 阻碍树脂渗透 , 使立木输导功能减弱 , 造成代谢障碍。同时 , 被破坏的组织常充满细菌 , 分泌有害毒素 , 加快松树的死亡速度。其严重性还在于它的繁殖能力特别强。一条雌成虫平均产卵 100 粒左右。在其增殖阶段 , 4 ～ 5 天繁殖 1 代。一株 15 ～ 20 年生大树夏季接种一对雌雄成虫 , 经 3 个月增殖即可达到足以使立木枯死的数量。如在夏季一次接种 5000 ～ 10000 条 , 经 14 ～ 20 天可使 15 ～ 20 年生的松树枯死。绝大多数松材线虫在病材中可一直生存到松褐天牛羽化出孔。 松褐天牛是松材线虫病最主要的媒介昆虫。成虫羽化后体表即有线虫附着 , 大部分线虫在体内 , 以头、胸部最多 , 可分布在整个气管系统内 , 松褐天牛携带松材线虫的携带率为 62 5% ～ 100% 。一头成虫携带线虫数量最高可达 289000 条 , 平均携带量4601 ～ 18445 条 / 头。在成虫羽化外出后 2 ～ 3 周 , 线虫脱离天牛虫体 , 脱出率为 43% ～ 70% 。脱离的线虫侵入树干危害。防
松墨天牛诱捕器参数 中空PP材质，绿色； 主要构件包括顶盖、十字挡板、漏斗、防逃逸接头和集虫瓶； 具有单独的防松墨天牛逃逸接头； 顶盖、十字挡板和漏斗均可折叠，便于野外携带； 十字挡板长84±1 cm，宽35±1 cm，中央开口14±0.5 cm×5±0.5 cm，内有1金属挂钩；顶盖对角长53±1 cm，漏斗对角长50±1 cm；集虫瓶高≥28 cm，直径≥11 c m； 集虫瓶底部预留漏水孔，用户可自行选择瓶底是否积水； 十字挡板表面和漏斗内侧有防辐射增效涂层； 安装简便，仅用1根铁线和4根小扎带即可完成安装； 安装好后的诱捕器顶盖和漏斗之间的最小距离≥60 cm； 整体质量≤0.9 kg，使用寿命≥3年；
APF-Ⅰ持久增强型诱芯参数 特制铝箔外包装； 诱芯袋形，宽12±0.5 cm×长16±0.5 cm，全密封，黑色； 诱芯具有两层缓释膜，确保在野外保持较长高效持续期；外层缓释膜黑色，内层缓释膜透明，并在两侧各开9个直径为0.5±0.1 cm的圆孔； 单个诱芯质量200±5 g； 高效持续期≥60天，有效期≥90天； 诱芯贮存有效期≥10个月，靶标敏感距离≥150 m。
太阳能杀虫灯技术参数 （1）符合GB/T24689.2-2009 植保机械的国家标准，通过符合GB/T 24689.2-2009国家标准的国家农机具质量监督检验中心出具的检验报告。 （2）诱集光源：频振灯管(波长320～680nm)，单灯管，功率15-20W；灯管启动时间：≤5s （3）整灯功率：≤20W （4）工作电压：DC12V （5）灯体高度：≥2800mm；灯杆材质：镀锌管材,直径60mm：抗风力10级以上。 （6）太阳能电池组件材质：多晶硅，功率40W； （7）蓄电池：免维护铅酸蓄电池12V/22Ah，每天工作6-8小时，连续三天阴雨天气可正常工作。 （8）高压网丝：电压：4500±200V，高压电网具有安全保护措施。诱集害虫撞击面积：0.18㎡，电击高压网采用竖立不锈钢网丝，竖网间距6-8mm，网丝直径2mm，竖立耐用、不易沾虫； （9）设计寿命：30年（灯管和蓄电池除外） （10）单灯控制面积范围:30-50亩； （11）接虫装置：透明旋转卡扣型接虫盒，便于接虫和防止未死害虫逃离。 （12）防雷击、耐高温、耐腐蚀、误触安全；
F-2型松墨天牛引诱剂对云杉花墨天牛的诱捕效果研究 为弄清楚松墨天牛引诱剂对云杉花墨天牛的诱捕效果，2018年5月-7月选择F-2型松墨天牛引诱剂進行林间诱捕效果实验，结果表明，F-2型松墨天牛引诱剂对云杉花墨天牛雌虫诱捕效果良好，平均引诱活性为21.76头/诱捕器。诱捕器悬挂高度为2m时，诱捕效果最好。 【Abstract】In order to find out the trapping effect of attractant for monochamus alternatus to the monochamus saltuarius gebler，F-2 attractant for monochamus alternatus was selected for the experiment of trapping effect in forest from May to July，2018. The results show that the F-2 attractant for monochamus alternatus has a better trapping effect of the female monochamus saltuarius gebler，and the average seductive activity is 21.76 per trap. When the hoisting height of the trap is 2m，the trapping effect is the best. 标签：云杉花墨天牛;引诱剂;诱捕效果 1 引言 松材线虫病是松树的一种毁灭性流行病，在我国南部地区，松墨天牛（Monochamus alternatus）是该病害的主要传媒昆虫[1-2]。随着该病传入辽宁省后，松材线虫病在北方地区的寄主植物和媒介昆虫也随之发生了变化。寄主植物由南方的马尾松变成了北方的油松、红松等树种，媒介昆虫也由松墨天牛变为了云杉花墨天牛[3-5]。为弄清云杉花墨天牛的种群动态规律和松墨天牛引诱剂对云杉花墨天牛的诱捕效果，选择F-2型松墨天牛引诱剂进行林间诱捕实验，为北方地区松材线虫病防控提供技术支撑。 2 实验材料与方法 2.1 试验地选择 试验地位于抚顺市抚顺矿业集团有限责任公司林业处上夹河林场，是以油松、红松等为优势种的纯林或混交林，实验观测地设置在上年度有云杉花墨天牛发生的林地内，林间地势较为平坦。 2.2 试验材料 供试诱捕器为十字交叉型诱捕器（BF-1型诱捕器），供试诱芯为F-2型松墨天牛引诱剂。 诱捕器和引诱剂均由杭州费洛蒙生物科技有限公司提供。 2.3 试验方法
松墨天牛防治技术 松墨天牛是我国松树的重要蛀干害虫，也是松材线虫病(Bursaphelench us xylophilus)的主要媒介昆虫。 拉丁学名：Monochamus alternatus Hope 异名：Monochammus tesserula Wirte 英文名：Pine longicom beetle;Pine sawyer 分类地位：鞘翅目(Coleoptera)，天牛科(Cerambycidae)，沟胫天牛亚科 (Lamiinae)。 中文别名：松褐天牛、松天牛 分布：中国北京、河北、上海、江苏、浙江、福建、广东、广西、湖南、四川、西藏、陕西、河南、台湾；国外分布于越南、老挝、朝鲜、日本。 寄主：主要有马尾松、冷杉、云杉、红松、黑松、雪松、落叶松、油松、华山松、柏、杉。 危害：成虫补充营养，啃食嫩枝皮，造成寄主衰弱，幼虫大量钻蛀树势衰弱或新伐倒的树干，引起成片松树枯死。此外，成虫还是松材线虫病的主要传播媒介，一旦传入，将会造成松林大面积死亡。
形态特征 成虫：体长10~30mm，宽4.5~9.5mm，橙黄色至赤褐色。每个鞘翅上有5条纵纹，由方形或长方形黑色及灰白色绒毛斑点相间组成，斑纹特殊，故与其他种易于区别。头部额区刻点细密，头顶处较粗糙并略有皱纹。口器为下口式，侧观其额面与体轴近似垂直。触角栗色或称棕褐色，雄虫触角比雌虫的长。第三节比柄节长约一倍，并略长于第四节，柄节上具封闭式端疤。雄虫第一、二节全部及第三节基半部，具稀疏的灰白色绒毛，触角全长超过体长的1.5倍。雌虫除末端一、二节外，其余各节除端处留有深色环以外，均具稀疏的灰白色绒毛，触角长度近似于体长或仅超过体长的1/3。前胸宽胜于长，刻点粗糙多皱纹，中瘤不显著，两侧具一对较大的刺突，其端处稍呈圆锥形。前胸背板上有二条明显的橙黄色纵带与三条黑褐色纵带间隔排列。前足基节窝为封闭式，中足胫节处侧缘端处具一斜沟。小盾片上密被橙黄色绒毛。翅基部有颗粒状突起和粗大的刻点，呈半规则排列，翅面上具方形或长方形黑色、褐锈色及灰白色绒毛，组成大小不等的斑块，镶嵌成不规则的五条纵纹。翅端
本技术公开了一种光电感应松墨天牛智能诱捕器，包括诱捕器，所述诱捕器包括遮帽和下端盖，所述遮帽上连接设有太阳能板以及与所述太阳能板连接的电源盒，所述电源盒为诱捕器供电，所述遮帽与下端盖之间通过十字撞板连接，所述十字撞板截面呈十字型，所述十字撞板居中设有通槽，所述通槽内连接设有诱芯，所述下端盖底部连接设有集虫瓶，所述集虫瓶上连接设有光电感应计数器，所述光电感应计数器上连接设有GPRS发射模块，所述诱捕器通过GPRS发射模块连接外界智能数据汇总系统。本技术与现有技术相比的优点在于：实时准确记录松墨天牛成虫诱捕器诱捕松墨天牛成虫的数量以及时间、地点分布、发生情况。 权利要求书 1.一种光电感应松墨天牛智能诱捕器，包括诱捕器，其特征在于：所述诱捕器包括遮帽(1)和下端盖(2)，所述遮帽(1)上连接设有太阳能板(3)以及与所述太阳能板(3)连接的电源盒(4)，所述电源盒(4)为诱捕器供电，所述遮帽(1)与下端盖(2)之间通过十字撞板(5)连接，所述十字撞板(5)截面呈十字型，所述十字撞板(5)居中设有通槽(6)，所述通槽(6)内连接设有诱芯(7)，所述下端盖(2)底部连接设有集虫瓶(8)，所述集虫瓶(8)上连接设有光电感应计数器(8)，所述光电感应计数器(8)上连接设有GPRS发射模块(10)，所述诱捕器通过GPRS发射模块(10)连接外界智能数据汇总系统(11)。 2.根据权利要求1所述一种光电感应松墨天牛智能诱捕器，其特征在于：所述遮帽(1)呈上窄下宽的圆台状结构。 3.根据权利要求1所述一种光电感应松墨天牛智能诱捕器，其特征在于：所述下端盖(2)呈上宽下窄的漏斗状结构。 4.根据权利要求1所述一种光电感应松墨天牛智能诱捕器，其特征在于：所述光电感应计数器(8)设置于集虫瓶(8)连接下端盖(2)的瓶口处。 5.根据权利要求1所述一种光电感应松墨天牛智能诱捕器，其特征在于：所述智能数据汇总
得分：_______ 南京林业大学 研究生课程论文 2015 ～20016 学年第二学期 课程号： 课程名称： 论文题目： 学科专业：森林保护 学号：3150462 姓名：王立超 任课教师：黄麟 二○一六年六月
内容 本文研究松材线虫、松墨天牛和真菌在松树中的共生关系 实验材料和方法： （1）真菌 小长喙霉在PDA平板上、25℃条件下培养一周，使用前在5℃条件下保存。 灰葡萄孢在10 mL的大麦籽粒上培养。 （2）线虫 强毒虫株松材线虫T-4在25℃条件下在灰葡萄孢上培养，使用前在5℃条件下保存。松材线虫悬浊液包括成虫和幼虫，悬浊液浓度为50000条/mL。 （3）昆虫 松墨天牛在恒定条件下培养（25℃，16h光照、8h黑暗），让其繁殖10代，第七代到第十代成虫用来在赤松小苗上产卵，收集天牛所产的卵并将其放置在湿纸巾上，在一天之内孵化的幼虫用于实验。 （4）松枝 2014年六月采伐两颗12年生（胸径分别为3.9和5.2cm）的赤松和两颗12年生的黑松（胸径分别为8.1和9.0cm），分别在实验1和实验3中使用。2015年二月采伐3颗12年生的赤松用于实验2，胸径分别为7.4、7.6和8.4cm，2014年十月采伐一颗12年生的赤松用于实验4，其胸径为6.8cm。树枝截为15cm一段，在树枝的两端用石蜡密封起来，每个实验组树枝的树木特定的每组树枝之间不存在显著差异
(5)接种 使用凿子和镊子在离树端13.7mm处从木质部分离树皮（面积22.3mm×17.3mm），用刻刀在漏出的木质部中间挖一个直径6-7mm圆形刻槽用以放置松墨天牛幼虫，一份带有灰葡萄孢或则没有灰葡萄孢的面积为5×5mm的PDA培养基放置在远离树端、接近圆形刻槽的位置。用到划长16.8mm、最大宽度为14.3mm的三角形裂口，在漏出的韧皮部接种20uL的线虫悬浊液（1000条线虫）或者是无菌纯净水。两个树皮伤口最小距离平均为13.7mm，两个伤口接种后覆盖原来的树皮，用封口膜包起来，即使不接种松墨天牛幼虫，也挖一个小刻槽，实验4中松树枝条不用接种松材线虫悬液或水，不会在树皮上形成倾 斜伤口。
地面防控松褐天牛 一、采购项目：地面防控松褐天牛服务、噻虫啉药剂 包一：地面防控松褐天牛服务防控面积1万亩，防控2次； 包二：噻虫啉药剂共12吨。 二、技术要求及说明： 包一：地面防控松褐天牛服务 1、防控区域、面积：威海市文登区指定区域，防控面积1万亩，防控2次，共计2万亩次。 2、防控时间：第一次：2016年6月20日-2016年6月30日期间；第二次：2016年7月20日-2016年7月30日期间。（具体开始时间要根据虫情检测及天气确定） 3、喷药次数及药物含量要求：地面喷药（噻虫啉）2次或以上，喷施药物噻虫啉有效含量要达到1.5%以上，亩施药量600克以上/次。 4、报价供应商需提供40套诱捕器（含诱剂），按采购人的要求进行安放，并组织对地面防控区域防治前后的虫口密度进行测报，在药物有效期内（第一次防控施药结束至第二次防控施药结束后1个月内的时间）地面防控区域松褐天牛日均虫口密度需控制在0.6头以下。 5、其他要求： 1）报价供应商在报价文件中须提供安全承诺责任书，在防治过程中如发生安全责任事故和自行采购药剂引起的次生灾害问题由报价供应商自行承担全部责任
2）报价供应商报价文件中须提供本次项目的测报方案、详细施工方案及相关保障方案。 3）全部防控工作由报价供应商组织，所有防控费用包含在成交价格内（不含采购人提供药物的费用）。 4）报价供应商防治过程中使用的药物应符合国家的相关规定，自行采购的药物（噻虫啉）须提供由中华人民共和国农业部颁发的《农药登记证》或《农药临时登记证》，由药物生产厂家所在省质量技术监督部门颁发的《农药标准备案》及药物生产厂家由国家发改委颁发的《农药生产许可证》或工信部颁发的《农药生产批准证书》。 报价供应商必须在报价文件中提供加盖报价供应商公章的以上证书复印件，否则报价无效。 4、验收标准 在药物有效期内（第一次防控施药结束至第二次防控施药结束后1个月内的时间）松褐天牛日均虫口密度控制在0.6头以下。防治效果不达标的，日均天牛虫口密度每增加0.1头，扣减合同总价款的2%，对日均虫口密度连续2次测报超过1头及以上的区域，成交供应商要进行补防，补防费用由成交供应商承担。 包二：1.5%噻虫啉微囊粉剂共12吨 1、有效成份：噻虫啉； 2、含量：1.5%； 3、剂型：微囊悬粉剂； 4、包装规格：8公斤/桶； 5、生产日期：2015年7月以后 6、投标人提交的1.5%噻虫啉微囊粉剂应符合国家的相关规定，