洁净区浮游菌测试记录表
目的 建立浮游菌检测操作规程，规范人员操作，保证洁净环境能达到洁净要求。 范围 本规程适用于本公司洁净室（区）中浮游菌的监测。 依据 YY0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》、GB/T16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》 职责 品管部负责洁净室（区）中浮游菌的监测。 浮游菌测试步骤 测试前仪器、培养皿表面应严格消毒 采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100及洁净室的采样器宜预先放在被测房间内。 用消毒剂擦拭培养皿的外表面。 采样前，先用消毒剂清洗采样器的顶盖、转盘以及罩子的内表面，采样结束，再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。 采样口及采样管，使用前必须高温霉菌，如用消毒剂对采样管的外壁及内壁进行消毒时，应将管中残留液倒掉并晾干。 采样人员应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒或无菌手套操作。 采样仪器经消毒后先不放入培养皿，开启浮游菌采样器，使仪器中的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min，并检查流量并根据采样量调整设定采样时间。 关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子。 置采样口于采样点后，开启浮游菌采样器进行采样。 培养 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 采用大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)配制的培养皿经采样后，在30℃-35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20℃-25℃培养箱中培养，时间不少于5d。 每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。 菌落计数 用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用5-10倍放大镜检查，是否遗漏。 若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍可以2个或2个以上菌落计数。 6.测试规则 测试条件 在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件，例如：这种预先测试可包括：
QCA/QC-SOP05-003 1.主题内容和适用范围 本规程规定了公司洁净室（区）中浮游菌的测试条件，测试方法及控制标准。 本规程适用于公司洁净室（区）浮游菌的测定和洁净度等级的验证。 2.相关文件 《药品生产质量管理规范》 2010年版 《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》 GB/T16293—2010 3.术语 3.1洁净室（区） 对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其使用，均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。 3.2洁净工作台 一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。其特点是自身能够供给经过过滤 的空气或气体，如垂直层流洁净工作台、水平层流洁净工作台、自净器等。 3.3菌落 细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个数 表示。 3.4浮游菌 用本规程提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条 件下繁殖到可见的菌落数。 3.5浮游菌浓度 单位体积空气中含浮游菌菌落的多少，以计数浓度表示，单位是个/m3或个/L 。 3.6静态测试 洁净室（区）净化空气调节系统已处于正常运行状态，工艺设备已安装，洁净室（区） 内没有生产人员的情况下进行的测试。 3.7动态测试 洁净室(区)已处于正常生产壮态下进行的测试。
4.职责 中心化验室微生物限度检查室人员负责浮游菌的定期检测工作。 5.质量标准 6.材料与设备 6.1设备 浮游菌采样器、净化工作台、恒温培养箱、烘箱、高压蒸汽灭菌器、放大镜、显微镜、电冰箱、 菌落计数器。 6.2用具 培养皿（平皿）：?90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。钢精锅：10000ml。三角瓶：300ml。天平、称样纸、勺。此外还需要棉塞、牛皮纸、线绳、微波炉、玻璃棒、海棉擦、毛刷等用具。 6.3空白培养皿的准备 6.3.1包扎 取洁净、干燥的培养皿用牛皮纸或专用包皮布包严扎紧待灭。 6.3.2灭菌 灭菌采用湿热灭菌法。条件：0.12Mpa、121℃，20min。灭菌时要注意按照操作规程操作高压蒸汽灭菌器。 6.3.3传输 将灭菌并用余热烘干后的平皿，传至准备间，并用紫外线照射备用。空白平皿一般在注皿前24小时内灭菌，传入。 6.3.4质量要求 已备好待用的平皿应确保无损、无污、无菌、干燥。 6.4培养基的准备及灭菌
洁净区浮游菌测试记录表 测试依据GB/T 16293-2010 《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》 测试状态□静态□ 动态其他测试合格情况□温湿度□ 压差□换气次数规定：生产车间的浮游菌测试与检验室的浮游菌测试分 a ( F1～ F21 ) 和 b（F22～39）两部分进行。 培养基制备及测每次：称取g培养基溶于ml水中，℃湿热灭菌min ，待冷却至℃时，在无菌操作要求下将培养基分装φmm 培养皿中，约 ml/皿。用 75% 试方法描述 酒精消毒仪器盘，放入培养皿，盖上。根据洁净室洁净度级别设定采样量，校正流量，启动采样。 采样结束仪器自动停止，取出培养皿。同法做空白对照。收集培养。 采样器名称浮游空气尘菌采样器 采样器型号 测试点示意图：↓ a (1 ～ 30 )↓ b（ 31～ 40）生产生产二更手消间内包材内包手消间检验二更检验一更1234装33 3431 32一更洗中工洁暂配（ 1）检验缓冲阳性对照 衣控器具存消2737 38 57具1113毒25 2628）35 6891214液（ 2） 1015162936 生产缓冲17 1830）微检室 3940称备清洗配制 19 2021 2223 24 洁净度级别300， 000 级100， 000 级10， 000 级100 级 判定标准----≤ 500≤ 100≤ 5 a 培养温度℃ a 培养时间月日时至月日时 b 培养温度℃ b 培养时间月日时至月日时 房间名称生产二更手消间洗衣中控工器具洁具暂存称备测试点12345678910111213141920采样量 (L)100100100100100100100100100100100100100100100100培养后菌落数 ( 个 ) 平均浓度 ( 个 /m3) 结果判定 房间名称配消毒液清洗内包材内包装生产缓冲检验二更手消间测试点1516212225262728171831323334采样量 (L)100100100100100100100100500500500500培养后菌落数 ( 个 ) 平均浓度 ( 个 /m3) 结果判定------------ 房间名称 检验缓冲阳性对照微检室 测试点353637383940 采样量 (L)500500500500500500 培养后菌落数 ( 个 ) 平均浓度 ( 个 /m3)
1.目的：建立沉降菌、浮游菌检测的标准操作程序，用以规范检测操作。 2.范围：适用于公司内部生产洁净区内的沉降菌、浮游菌检测工作 3.责任：中心检验室主任、检验员对本规程的执行负责。 4.内容： 浮游菌检测 4.1.1 检测前的准备 4.1.1.1按照药典规定制作平皿培养基。 4.1.1.2领出检测仪器，去掉防尘护罩。 4.1.1.3先用喷洒方法对仪器及采样管进行消毒，无法喷洒的地方应用擦拭或 浸泡办法进行消毒，消毒后置放十分钟使仪器基本干燥。 4.1.1.4将采样器放在采样工作台面上，拧下采样盖，使整个缝隙完全暴露在 空气中，便于直接采样。 4.1.1.5当在较高位置取样时，可把仪器采样盖拧紧，插上采样塑料管，把管 子延伸到所要采样的空间。 4.1.1.6打开采样器透明外罩，迅速将准备好的平皿放入采样托盘内，拿去平 皿上盖，立即拧上透明外罩密封。 4.1.1.7拧松外罩顶部装有指针的螺母，让指针自然下落或使指针底部刚接触 到培养基为止。 4.1.1.8调节狭缝螺母，使狭缝上升直至到头，再反方向调节使狭缝面下降， 将齐狭缝大螺母侧面的色标线与指针于水平线上。（保持狭缝的底平面与培养基表面相距1-3mm）。
4.1.1.9将指针向上轻轻拔起，使其底部离开培养基表面，并拧紧螺母，使之 固定不动。 4.1.2 采样操作 4.1.2.1将采样器后面板上的电源插上，按下仪器面板上的电源开关，指示灯亮， 时间显示窗内的数码应为“P”。 4.1.2.2根据采样现场环境的洁净度，选择采样时间中的某一档，并按下相应按 钮，指示灯亮，数码由“P”显示为“Y”，约经10分钟后气泵自动开启进 行采样。当采样时间达到时，气泵自动停止运行，数码显示终点采样时间。 4.1.2.3关掉电源开关，打下仪器的活动透明外罩，迅速把平皿上盖盖上并从仪 器中取出。 4.1.2.4按照上述方法，再放入新的平皿，进行第二次采样，直到采样完毕。4.1.2.5采集样品的平皿应置入培养箱，在培养48小时后，按检验规程检查菌 落数。 4.1.2.6采样工作结束，关断仪器电源，将程序： 4.2沉降菌检测 4.2.1消毒φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。 4.2.2称取普通肉汤琼脂培养基31克，加蒸馏水1000ml，加热溶解分装，经 116℃30分钟灭菌备用。 4.2.3在无菌条件下将消毒的培养基注入培养皿中备用。 4.2.4放平板前应先洗手，穿消毒好的无菌衣、裤、帽、口罩。 4.2.5将已制备好的培养皿按净化级别要求选择放置位置和平皿块数。 4.2.6到车间打开培养皿盖，使培养基表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。 4.2.7全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。（温度30℃~35℃， 时间不少于48h）。 4.2.8每批培养基应有对照试验，可选2~3只培养皿作对照培养，以检验培养 基本身是否污染。
1.目的：建立一个洁净室（区）浮游菌测定的标准操作规程，确保洁净室（区）洁净程度。 2.范围：适用于洁净室和洁净区、无菌室或局部空气净化区域（包括洁净工作台）的浮游菌的测定和环境的验证。 3.责任：质量管理部QA监测员对本规程的实施负责。 4.程序： 4.1.术语和定义：下列术语和定义适用于本标准操作规程。 ：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU。通常用个数表示。 ，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 ，以计数浓度表示，单位是个/m3或个/L。 ，由使用者自行设定微生物含量等级。当检测结果超过该等级时，应启动监测程序对该区域的微生物污染情况立即进行跟踪。 ，由使用者自行设定一个微生物含量等级，从而给定了一个正常状态相比最早警戒的偏差值。当超过该最早警戒的偏差值时，应启动保证工艺或环境不受影响的程序及相关措施。 4.2.测试方法 ，经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数，以判定该洁净室的微生物浓度。 ，其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。 洁净室（区）的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的
穿戴方式。 选择合适的浮游菌采样器，包括采用无油的抽气泵，较低的气流流速和较大的采样流量，以保证培养基表面的水分不被吹干。 本测试需要具备仪器、辅助设备和培养基如下： 浮游菌采样器、培养皿、培养基（见本标准附录B）、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器。 浮游菌采样器一般采用撞击法机理，可分为狭缝式采样器、离心式或针孔式采样器。狭缝式采样器由内部风机将气流吸入，通过采样器的狭缝式平板，将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。离心式采样器由于内部风机的高速旋转，气流从采样器前部吸入从后部流出，在离心力的作用下，空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。针孔式采样器是气流通过一个金属盖吸入，盖子上市密集的经过机械加工的特制小孔，通过风机将收集到得细小的空气流直接撞击到平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。 本标准操作规程中使用的浮游菌采样器为狭缝式采样器。 ，定期对仪器作检定，使用校验合格，且在使用有效期内的仪器。 ，若必需，则先清洁表面，或在相应的洁净室内准备和存放（用保护罩或其他适应当地外罩保护仪器）。 ，上面应蒙上一张透明不沾尘的覆盖物，在A级洁净室内不能用铅笔和橡皮。 ，预热至稳定后，方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正，同时检查采样
浮游菌检测操作规程
1.目的 建立浮游菌检测操作规程，规范人员操作，保证洁净环境能达到洁净要求。 2.范围 本规程适用于本公司洁净室（区）中浮游菌的监测。 3.依据 YY0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》、GB/T16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》 4.职责 品管部负责洁净室（区）中浮游菌的监测。 5.浮游菌测试步骤 5.1测试前仪器、培养皿表面应严格消毒 5.1.1采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100及洁净 室的采样器宜预先放在被测房间内。 5.1.2用消毒剂擦拭培养皿的外表面。 5.1.3采样前，先用消毒剂清洗采样器的顶盖、转盘以及罩子的内表面，采 样结束，再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。 5.1.4采样口及采样管，使用前必须高温霉菌，如用消毒剂对采样管的外壁 及内壁进行消毒时，应将管中残留液倒掉并晾干。 5.1.5采样人员应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换 培养皿前，双手用消毒剂消毒或无菌手套操作。 5.1.6采样仪器经消毒后先不放入培养皿，开启浮游菌采样器，使仪器中的 残余消毒剂蒸发，时间不少于5min，并检查流量并根据采样量调整设定采样时间。 5.1.7关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子。 5.1.8置采样口于采样点后，开启浮游菌采样器进行采样。 5.2培养
5.2.1全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 5.2.2采用大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)配制的培养皿经采样后，在30℃- 35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20℃-25℃培养箱中培养，时间不少于5d。 5.2.3每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3 只培养皿作对照培养。 5.3菌落计数 5.3.1用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点 计，然后用5-10倍放大镜检查，是否遗漏。 5.3.2若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍可以2个或2个 以上菌落计数。 6.测试规则 6.1测试条件 在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件，例如：这种预先测试可包括：a）温度和湿度的测试，洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18℃-26℃，相对湿度在 45%-65%为宜），同时应满足测试仪器的使用范围； b）室内送风量或风速的测试，或压差的测试； c）高效过滤器的泄漏测试。 6.2测试状态 静态和动态均可进行测试。 静态测试时，室内测试人员不得多余2人。 测试报告中应标明测试时所采用的状态和室内测试人员数。 6.3测试时间 6.3.1对于非单向流洁净室（区），测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。 6.3.2在动态测试时，则需记录生产开始的时间以及测试时间。 6.4采样点数目及其布置 6.4.1采样点数目
******公司验证文件 目录 1.概述 2．验证目的 3. 清洁消毒程序、消毒剂种类及使用范围、验证原理、验证人员及职责 4. 验证内容 5. 验证实施步骤 6. 可接受限度标准 7．验证实施 8．验证结论判定 9．验证周期 10．附录 10.1 验证取样记录 10.2 验证检测结果记录
１.概述 公司新建厂房包括口服固体车间、软乳膏剂车间（激素类、非激素类）、***原料药车间，车间洁净区级别为D级。针对洁净区域的清洁消毒程序已经建立，在新厂房投入正常运行之前，有必要对洁净区的清洁消毒效果进行验证，防止对药品生产造成污染以及交叉污染，保证药品质量。本方案拟通过连续三个周期的洁净区清洁消毒后取样进行清洁消毒效果验证。 ２.验证目的 对洁净区内地漏、传递柜、墙面、顶栅、地面、操作台等按清洁消毒程序进行清洁消毒后进行相应检测，确认清洁消毒效果能够达到预定要求，符合产品生产工艺要求，从而验证相关清洁消毒程序的合理性、有效性和稳定性。 3. 清洁消毒程序、消毒剂种类及使用范围、验证原理、验证人员及职责： 3.1待验证清洁消毒程序： 3.2消毒剂种类及使用范围： 3.3验证原理：
本次验证采用棉签擦拭法取样，对清洁后洁净区墙面、地面、操作台面、传递柜、等表面进行取样，检测微生物残留，将所得结果和可接受限度标准进行比较，如果检测结果均低于可接受的残留限度，证明有关清洁消毒程序是科学、有效和安全的。 3.4验证人员及职责： 4. 验证内容： 本方案拟连续三个周期对清洁后的固体车间、两个软乳膏剂车间、***原料药车间洁净区进行表面擦拭取样,考察残留微生物，将检测结果与可接受的限度标准进行比较，若检测结果均符合标准要求，则可证实清洁消毒程序的有效性及稳定性，相关操作程序可行。反之，则需对清洁消毒程序进行改进并重新验证确认。 因洁净区设备均单独进行了设备的清洁验证，所以，本验证只针对洁净区内除设备表面外的其他表面取样检测。 5. 验证实施步骤 5.1 验证前提条件 5.1.1 生产车间厂房按规范要求设计、建造并已峻工；纯化水系统已完成性能确认并正常运行供水；车间洁净区空调净化系统已完成性能确认，静态检测各项指标（温度、湿度、压差、换气次数、尘埃粒子、沉降菌、照度）均达到D级洁净区的要求。 5.1.2 车间操作人员均有健康档案，均经过GMP知识、岗位操作SOP、设备及洁净区清洁SOP培训并经考核合格。 5.1.3 验证所使用的设备、仪器经过校验并在校验有效期内。 5.2清洁和消毒：
1.目的 建立浮游菌检测操作规程，规范人员操作，保证洁净环境能达到洁净要求。 2.范围 本规程适用于本公司洁净室（区）中浮游菌的监测。 3.依据 YY0033-2000《无菌医疗器具生产管理规范》、GB/T16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》 4.职责 品管部负责洁净室（区）中浮游菌的监测。 5.浮游菌测试步骤 测试前仪器、培养皿表面应严格消毒 采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100及洁净室的采样器宜预先放在被测房间内。 用消毒剂擦拭培养皿的外表面。 采样前，先用消毒剂清洗采样器的顶盖、转盘以及罩子的内表面，采样结束，再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。 采样口及采样管，使用前必须高温霉菌，如用消毒剂对采样管的外壁及内壁进行消毒时，应将管中残留液倒掉并晾干。 采样人员应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒或无菌手套操作。 采样仪器经消毒后先不放入培养皿，开启浮游菌采样器，使仪器中的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min，并检查流量并根据采样量调整设定采样时间。 关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子。 置采样口于采样点后，开启浮游菌采样器进行采样。 培养 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 采用大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA)配制的培养皿经采样后，在30℃-35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20℃-25℃培养箱中培养，时间不少于5d。 每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养
皿作对照培养。 菌落计数 用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用5-10倍放大镜检查，是否遗漏。 若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍可以2个或2个以上菌落计数。 6.测试规则 测试条件 在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件，例如：这种预先测试可包括： a）温度和湿度的测试，洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18℃-26℃，相对湿度在 45%-65%为宜），同时应满足测试仪器的使用范围； b）室内送风量或风速的测试，或压差的测试； c）高效过滤器的泄漏测试。 测试状态 静态和动态均可进行测试。 静态测试时，室内测试人员不得多余2人。 测试报告中应标明测试时所采用的状态和室内测试人员数。 测试时间 对于非单向流洁净室（区），测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。 在动态测试时，则需记录生产开始的时间以及测试时间。 采样点数目及其布置
目的：建立洁净（区）室浮游菌检测标准操作规程。 范围：适用于洁净（区）室浮游菌监测。 责任：QC人员负责实施，QA人员负责监督。 内容： 1取样前准备工作： 1.1 依据检测区域的取样点数，按照《培养基配制、灭菌标准操作程序》制备适量的营养琼脂培养基。 1.2 在超净工作台内，以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装，待培养基凝固后移出洁净区。 1.3 将制备的营养琼脂平皿倒置于隔水式恒温水浴培养箱内于30～35℃培养48小时。取出逐个检查，确认无菌落数后即可使用。 1.4采样：将上述制备好的营养琼脂平皿交与QA人员取样。 2.仪器、设备和培养基： 2.1所用的仪器、设备和培养基： 2.1.2 浮游菌采样器 2.1.3 培养皿（φ90mm×15mm） 2.1.4 培养基（营养琼脂培养基） 2.1.5 恒温培养箱 2.2 仪器、设备、培养基的要求： 2.2.1 浮游菌采样器： 2.2.1.1 浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。 2.2.1.2 应严格按仪器说明书的要求进行操作。
2.2.1.3 采样器必须按仪器的检定周期，定期对仪器作检定，以保证测试数据的可靠性，检验项目有：定时器，转盘转速，流量计。 1.2.1.4 每次测试前应先接通电源，启动真空抽气泵，然后调节流量计和定时器。 2.2.1.5 空气采样量根据需要选定，已知采样器的流量（L/min）,设定采样时间（min）两者相乘即得采样量（L）。 2.2.1.6 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造，采样管严禁渗漏，内壁应 光滑，采样管的长度应根据测定点的高度定，尽量减少弯曲。 3. 测试方法： 3.1 测试用仪器、培养皿表面必须严格消毒。 3.1.1 采样器进入被测房间前先用消毒剂灭菌。 3.1.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面。 3.1.3 采样前，先用消毒剂消毒采样器的顶盘、转盘以及罩子的内外面，采样结束再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。 3.1.4 采样口及采样管使用前必须高温灭菌，如用消毒剂对采样管的外壁、内壁进行消毒，应将管中的残留液倒掉并晾干。 3.1.5 采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒。 3.2 采样程序： 3.2.1 仪器经消毒后先不放入培养皿，开动真空泵抽气，使仪器的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min，并调好流量、转盘转速。 3.2.2 关闭真空泵，放入培养皿，盖上盖子后调节采样品缝隙高度。
浮游菌的测试规程 1 目的阐述洁净室（区）中尘埃粒子的测试方法和就尘埃粒子而言的空气洁净度的记录。 2 围适用于洁净室（区）中尘埃粒子洁净度的监测和洁净度等级的验证。 3 职责质监员负责洁净区（室）尘埃粒子的测试 质量保证部经理负责监督。 4 容 4.1术语和定义 下列术语和定义适用于本规程。 4.1.1菌落colony forming units 微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU。通常用个数表示。 4.1.2浮游菌airborne microbe 用本规程提及的方法收集悬浮在高空气中的活微生物颗粒。通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 4.1.3浮游菌浓度airborne microbe concentration 单位体积空气中含浮游菌菌落数的多少，以技数浓度表示，单位是/m3或个/L 4.1.4纠偏限度action levels 对于受控的洁净室（区），由使用者自行设定微生物含量等级。当检测结果超过该等级时，应启动检测程序对该区域的微生物污染情况立即进行跟踪。 4.1.5警戒线度alert levels
对于受控的洁净室（区），由使用者自行设定一个微生物含量等级，从而给定了一个与正常状态相比最早警戒的偏差值。当超过该最早警戒的偏差值时，应启动保证工艺或环境不受影响的程序及相关措施 4.2测试方法 4.2.1方法提要 本规程采用的方法是计数浓度法。即通过收集悬游在空气中的生物性粒子于专门的培养菌（选择能证实其能够支持微生物生长的培养基），经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数，以判定该洁净室的微生物浓度。 4.2.2人员的职资及培训 洁净室（区）的测试人员应进行本专业的培训并获得相应的资格后才能才能履行对洁净室（区）测试的职责，其中包含涉及的卫生知识和基本的微生物知识。 洁净室（区）的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不能带进D级以上的区域。 4.2.3 仪器、辅助设备和培养基 选择合适的浮游菌采样器，包括采用无油的抽气泵，较低的气流流速和较大的采样流量，以保证培养基表面的水分布被吹干。 本测试需要具备仪器、辅助设备和培养基如下： a)浮游菌采样器； b)培养皿； c)高压消毒锅； d)培养基； e)恒温培养箱； 4.2.4 浮游菌采样器原理浮游菌采样器一般采用撞击法机理，可分为夹缝式采样器、离心式或针孔式采样器。夹缝式采样器由部风机将气流吸入，通过采样器的夹缝式平板，将采集空气喷射并撞击到缓慢的平板培养基表面，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。离心式采样器由于部风机的高速旋转，气流从才样器的前部进入后部流出，在离心力的作用下，空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固型培养条上，附着活的微生物粒子经培养后形成菌落。针孔式采样器是气流通过一个金属盖吸入，盖子上是密集的经过机械加工的特制小
洁净区浮游菌监测规程 1. 目的 为了对药品生产环境等洁净室（区）的微生物污染程度进行严格监测和控制，对洁净区域内空气进行浮游菌监测。 2. 范围 本程序适用于生产车间洁净区域浮游菌的监测及超警戒限和超纠偏限情况处理。 3. 责任者 -质量部经理 负责培训QA人员按本规程实施环境监测，并监督监测过程符合本规程的要求。 ● QA 负责按本规程的要求进行环境监测，确保洁净区生产环境符合GMP的要求。。 4. 仪器与材料 ● FKC-III浮游菌采样器，采样量：100L/min ● HG303-3电热恒温培养箱 ● YXQ-SG41-280型电热手提式压力蒸汽灭菌器 ●培养皿（φ9cm×15mm）
大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA） 5. 正文 5.1 测试条件 5.1.1 洁净室的温度与相对湿度与该区域生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18-26℃，相对湿度在45-65%），同时应满足浮游菌采样器的使用范围。 5.1.2 静态和动态两种状态均可进行测试。在静态测试时，对非单向流洁净区，应在净化空调系统自净30分钟后开始；对单向流洁净区（净化操作台），应在风机开启30分钟后进行。 5.1.3 静态测试时，室内测试人员不得多于2人。 5.2 测试准备 5.2.1 测试前仪器、培养皿表面应进行消毒。 5.2.2 用75%乙醇擦净培养皿的外表面。 5.2.3 用75%乙醇消毒采样器的顶盖，对多孔采样头采用180℃干热灭菌。 采样器经消毒后先不放入培养皿，开启采样器，使仪器中的残余乙醇挥发，时间不少于5min，并检查流量，根据采样量调整设定采样时间。 5.2.4 最小采样量
哈药集团生物工程有限公司 标准操作规程 目的：建立洁净区工作服（鞋）收集、洗涤、灭菌、发放的标准操作规程，防止污染和交叉污染。 范围：适用于洁净室洗衣灭菌操作工对相应级别洁净区所使用工作服（鞋）的清洁灭菌。 责任：车间工艺员负责起草本程序，按本程序对相关人员进行培训，并对实施情况进行检查。洗衣灭菌岗位操作工应严格按本程序操作。岗长、工段长要保证岗位操作人员按本程序进行操作。制剂一车间主任负责对本规程的实施进行监督。QA检查员负责对本程序中的质量控制项进行检查。 程序： 洁净服清洁灭菌操作规程： 级洁净区洁净服的清洁 收衣 每二天，洁净室工作结束后，操作人员按个人编号将已用过的洁净服放入相应的洁净服储槽内，集中放置D级洗衣室洁净服回收处，并挂有《待清洁》状态标识牌。 次日，洗衣操作人员将待清洗洁净服袋打开，按类别逐件检查，有损坏应及时修补或更换，有明显污迹处，特别用手工处理一遍。
.洗涤 洗衣机的操作按《洗衣机使用标准操作规程》（SOP-EM-J0039-02）进行，洗衣机每次无菌服的最大洗涤量不超过10件，每机洗10件无菌服加入洗衣液30ml。每减少一件无菌服，洗衣液减少3ml，但每次机洗，洗衣液最少用量为20ml。洗衣液使用量用瓶盖量取，一瓶盖洗衣液约为90ml。 不同洁净级别的洁净服分别洗涤、整理，洁净头套需专洗。 洁净服洗涤时以纯化水及洗衣液进行粗洗，然后以纯化水漂洗。 .整衣 将洗涤干燥好的洁净服从洗衣机内取出，送至整衣操作台。 检查衣物有无破损，并进行整理，将洁净服折叠整齐后。 .配衣 将整衣完毕的洁净服按编号装入相应的洁净服袋内。并装入同一编号的头套。根据生产计划，按所需洁净服的工号，将整理好的洁净服袋分别装入已清洁的贮槽中，挂好《已清洁》状态标识牌（清洁者、QA检查员、有效期）。 已清洁的洁净服在72小时内有效，如超过规定期限，需重新清洁。洁净服保管环境的洁净级别也要同使用环境的洁净级别相符，即要保持在D级。 发放 每两天生产结束后，岗位操作人员将清洁后的洁净服放置在D级更衣室内，同时填写无菌服洗涤操作记录。 级、B级洁净区无菌服的清洁灭菌 收衣 每天在洁净室工作结束后，操作人员按个人编号将已用过的无菌服放入相应的无菌服袋内，集中装入外表贴挂标识（级别、编号）的专用贮槽内，并传递至收衣室（102工段传递至洗衣整衣室）。
..................................................制药厂 GMP文件 名称浮游菌检查操作规程第1 页共1 页附件0个 编号颁发部门 制定人审核人批准人 制定日期审核日期批准日期 分发至生效日期 目的：建立正确的洁净实验室、洁净厂房浮游菌检查操作规程，确保操作的规范化与检验结果的准确性，保证药品在规定洁净级别内进行。 范围：用于有净化级别的实验室、厂房。 责任人：QC负责人、QA洁净度检测人员、微生物检验人员、设备科相关人员对本规程的实施负责。 依据：《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》，《药品生产质量管理规范》（2010年修订） 内容： 1 洁净室：对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间区域 2 洁净工作台：一种工作台或者与之类似的一个封闭围挡工作区。其特点是自身能够供给经过过滤的空气或气体，如垂直层流洁净罩、水平层流罩、垂直层流洁净工作台、水平层流洁净工作台、自净器等。 3 浮游菌：用本规程中的方法收集悬浮在空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 4 测试方法：使用计数浓度法。即通过收集悬浮在空气中的生物性粒子于专门的培养基（选择能证实其能够支持微生物生长的培养基），经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数，以判定该洁净室（区）的微生物浓度。 5 仪器、辅助设备和培养基 5.1 浮游菌采样器 5.2 培养皿：一般采用90mm×15mm的培养皿，使用前将其置于121℃湿热灭菌25分钟、干燥。 5.3 培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）。 5.4 生化培养箱：定期对培养箱、温度计进行检测。 5.5 高压蒸汽灭菌器 6 采样方法 6.1 采样点的布置（GB-T16292-2010） 表1 洁净区浮游菌最少采样点数目 面积（m2）A级C级D级 ＜10 2~3 2 2 ≥10~＜20 4 2 2 ≥20~＜40 8 2 2 ≥40~＜100 16 4 2 ≥100~＜200 40 10 3 ≥200~＜400 80 20 6
1目的： 本文规定了洁净室中浮游菌的测试方法。以达到对其空气洁净度的评定。2范围： 适用于洁净区中浮游菌的监测和对洁净区等级的验证。 3检测仪器： 浮游菌采样器、真空抽气泵、高压消毒锅、恒温培养箱。 4.检测依据： GB/T 16293—2010医药工业洁净室浮游菌的测试方法。 5. 测试前的准备： 5.1洁净室的温度应控制在18℃～26℃，相对湿度应控制在45％～65％之间。 5.2风速或压差的测试应符合要求。 5.3 静态测试时，室内测试人员不得多于2人。 5.4 对单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少10min后开始。5.5 对非单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。 5.6 采样点数目，见表1。 表1 最少采样点数目
编写：胡帆第1版，第0次修订 洁净室浮游菌的测试方法审核：王冬梅发布日期：年月日批准：梁灏方实施日期：年月日 ≥200～＜400802066 ≥400＜1000160401313 ≥1000～＜20004001003232≥20008002006363 注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积；对单向流洁净室，指的是房间面积。 5.7 对100级洁净区可在离操作处30cm处设测点，对每10000级工作区可在工作面处设测点。 5.8 采样点的布置 洁净室(区)采样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于稀疏。下列采样点的图示可作参考。 洁净棚(层流罩)，洁净工作台等局部空气净化设施的采样点布置： .1 水平单向流
编写：胡帆第1版，第0次修订 洁净室浮游菌的测试方法审核：王冬梅发布日期：年月日批准：梁灏方实施日期：年月日 2 垂直单向流 5.9 最小采样量，见表： 洁净度级别采样量L/次 100级10000 1000级500 10000级100 300000级100 注：每次采样点一般采样一次。 5.10 采样注意事项： 5.10.1 工作区测点离地面0.8～1.5m左右。 5.10.2 送风口测点位置离开送风面30cm左右。 5.10.3 对单向流或送风口，采样器采样管口应正对气流方向。对非单向流，采样
测试依据 测试状态 培养基制备及测 试方法描述 采样器名称 测试点示意图: 洁净区浮游菌测试记录表 GB/T 16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》 □静态 口动态 □温湿度 口 压差 □换气次数 规定：生产车间的浮游菌测试与检验室的浮游菌测试分 a （ F1?F21 ）和b （F22?39）两部分进行。 每次：称取 g 培养基溶于 ml 水中， C 湿热灭菌 min , 待冷却至 =时，在无菌操作要求下将培养基分装Q — mm 培养皿中,约 ml/ 皿。用75% 酒精消毒仪器盘，放入培 养皿，盖上。根据洁净室洁净度级别设定采样量, 校正流量，启动采样。 采样结束仪器自动停止，取出培养皿。同法做空白对照。收集培养。 浮游空气尘菌采样器 J a (1 ?30 ) 生产 生产二更 手消间 一更 1 2 3 4 洗 中 工 洁 暂 配 衣 控 器 具 /、 存 消 5 7 具 /、 11 13 毒 6 8 9 12 14 液 10 15 16 生产缓冲 17 18 配制 其他测试合格情况 采样器型号 内包材 25 26 ml J b (31 ?40) 内包 手消间 检验二更 检验 装 33 34 31 32 一更 (1) 检验缓冲 阳性对照 27 37 38 28) 35 (2) 29 36 30) 微检室 39 40 洁净度级别 300, 000级 100, 000级 10, 000 级 100级 判定标准 — < 500 < 100 < 5 a 培养温度 C a 培养时间 月 日 时至 月 日 时 b 培养温度 C b 培养时间 月 日 时至 月 日 时 房间名称 生产二更 手消间 洗衣 中控 工器具 洁具 暂存 称备 测试点 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 19 20 采样量（L ） 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 培养后菌落数 （个） 平均浓度（个/m 3 ） 结果判定 房间名称 配消毒液 清洗 内包材 内包装 生产缓冲 检验二更 手消间 测试点 15 16 21 22 25 26 27 28 17 18 31 32 33 34 采样量（L ） 100 100 100 100 100 100 100 100 500 500 500 500 培养后菌落数 （个） 平均浓度（个/m 3 ） 结果判定 —— 房间名称 检验缓冲 阳性对照 微检室 测试点 35 36 37 38 39 40 采样量（L ） 500 500 500 500 500 500 培养后菌落数 （个） 平均浓度（个/m 3 ） 清洗 称备 19 20 21 22 23 24
灰尘清洁和清洁记录表区域：清洁原因：生产前，生产中和生产日期后清洁项目负责人签署的标准清洁条件以供确认备注清洁和清洁人员的签名及时操作控制台设备电源线开关地面通道除尘管道风机配电箱工具箱消防器材原料，包装材料，成品等控制台设备电源线开关地面通道除尘风道风机配电箱工具箱消防设备原料，包装材料，成品等控制台设备电源线开关地面通道除尘导管风机配电箱工具箱消防器材原料，包装材料，成品等控制台设备电源线开关地面通道除尘导管风机配电箱工具箱消防器材原料，包装材料，成品等操作盒平台设备电源线开关地面通道除尘管道风机配电箱工具箱消防器材原料，包装材料，操作平台设备电源线开关地面通道除尘管道风机配电箱工具箱消防器材原料，包装材料，成品及其他控制台设备电源线开关地面表面通道除尘风道风机配电箱工具箱消防器材原料，包装，成品等操作平台设备电源线开关地面通道除尘风道风机配电箱工具箱消防器材原料，包装，成品等。注意：1.清洁在清洁项目上积聚的所有灰尘，以确保周围没有死角，整洁。2.清洁条件栏应注明是否满足。注意：请注意缺陷。表格编号：fr-xz-146版本：A0 区域：日期清洁项目标准清洁条件清洁工的签名和时间负责人的签名以供确认备注：月日：①操作控制台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道⑥风扇，fan配电箱，工具箱，消防设备，10种原材料包装材料，成品等。①操作台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道⑥风扇⑦配电箱⊿工具箱∷消防设备10原材料，包装材料，成品①操作台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道﹣风扇，配
电箱，工具箱，消防设备，原材料，包装材料，成品等。①操作台②设备③电源线路开关④地面通道⑤除尘管道⑥风扇⑦配电箱⊿工具箱∷消防设备10原料，pac装箱材料，成品等。①操作台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道，风扇，配电箱，工具箱，消防设备，原材料包装材料，制成品等①操作台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道⑥风扇⑦配电箱⊿工具箱∷消防设备10原料，包装材料，成品等①操作台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道﹣风扇，配电箱，工具箱，消防设备，原材料，包装材料，成品等。注意：1.清洁清洁物品上积聚的所有灰尘，以确保周围没有死角；周围环境整洁。整洁的月日整洁的月日整洁的月日整洁的月日整洁的月日整洁的月日清洁整洁车间现场除尘和清洁记录表2。清洁条件栏指示是否它符合或不符合标准。注意：请注意缺陷。表格编号：fr-xz-146版本：A0清洁原因：生产前，生产中和生产后区域：日期清洁项目标准清洁条件清洁工的签名和时间负责人的签名以供确认备注：月日：①操作控制台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道⑥风扇，fan配电箱，工具箱，消防设备，10种原材料包装材料，成品等。①操作台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道⑥风扇⑦配电箱⊿工具箱∷消防设备10原材料，包装材料，成品①操作台②设备③电源线开关④地面通道⑤除尘管道﹣风扇，配电箱，工具箱，消防设备，原材料，包装材料，成品等。①操作台②设备③电源线路开关④地面通道⑤除尘管道⑥风扇⑦配电箱⊿工具箱∷消防设备10原料，pac装箱材料，成品等。①操作台②设备③电源线开关④地面通道⑤
洁净室（区）浮游菌测试操作规程 1 范围：本标准规定了医药工业洁净室和洁净区中浮游菌的测试条件和测试方法。 本标准适用于医药工业洁净室和洁净区，无菌室或局部空气净化区域（包括洁净工作台）的浮游菌的测试和环境的验证。 2 引用标准：GB/T 16293―2010 药品生产管理规范（1998修订）附录。 3 4 测试方法 4.1 方法提要 本标本采用的方法是计数浓度法。即通过收集悬游在空气中的生物性粒子于专门的培养基（选择能证实其能够支持微生物生长的培养基），经若干时间和适宜的生长条件下让其繁殖到可见菌落计数，以判定该洁室的微生物浓度。 4.2人员的职责及培训 洁净室（区）的测试人员应进行本专业的培训并获得相应的资格后才能才能履行对洁净室（区）测试的职责，其中包含涉及的卫生知识和基本的微生物知识。 洁净室（区）的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不能带进100000级以上的区域。 4.3 仪器、辅助设备和培养基 选择合适的浮游菌采样器，包括采用无油的抽气泵，较低的气流流速和较大的采样流量，以保证培养基表面的水分布被吹干。 本测试需要具备仪器、辅助设备和培养基如下： a) 浮游菌采样器； b) 培养皿； c) 高压消毒锅； d) 培养基； e) 恒温培养箱； 4.4 浮游菌采样器原理 浮游菌采样器一般采用撞击法机理，可分为夹缝式采样器、离心式或针孔式采样器。夹缝式采样器由内部风机将气流吸入，通过采样器的夹缝式平板，将采集空气喷射并撞击到缓慢的平板培养基表面，附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。离心式采样器由于内部风机的高速旋转，气流从才样器的前部进入后部流出，在离心力的作用下，空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固型培养条上，附着活的微生物粒子经培养后形成菌落。针孔式采样器是气流通过一个金属盖吸入，盖子上是密集的经过机械加工的特制小孔，通过风机将收集到的细小的空气直接撞击到平板培养基表面，附着的活物微生物粒子经培养成型后形成菌
浮游菌测试规程规范 浮游菌的测试规程 1目的阐述洁净室（区）中尘埃粒子的测试方法和就尘埃粒子而言的空气洁净度的记录。2范围适用于洁净室（区）中尘埃粒子洁净度的监测和洁净度等级的验证。 3职责质监员负责洁净区（室）尘埃粒子的测试 质量保证部经理负责监督。 4内容 4.1术语和定义 下列术语和定义适用于本规程。 4.1.1 菌落colony forming units 微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU
通常用个数表示。 4.1.2 浮游菌airborne microbe 用本规程提及的方法收集悬浮在高空气中的活微生物颗粒。通过专门的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 4.1.3 浮游菌浓度airborne microbe concentration 单位体积空气中含浮游菌菌落数的多少，以技数浓度表示，单位是/m3或个 /L 4.1.4 纠偏限度action levels 对于受控的洁净室（区），由使用者自行设定微生物含量等级。当检测结果超过该等级时，应启动检测程序对该区域的微生物污染情况立即进行跟踪。 4.1.5 警戒线度alert levels 对于受控的洁净室（区），由使用者自行设定一个微生物含量等级，从而给定了一个与正常状态相比最早警戒的偏差值。当超过该最早警戒的偏差值时，应启动保证工艺或环境不受影响的程序及相关措施 4.2测试方法 4.2.1方法提要 本规程采用的方法是计数浓度法。即通过收集悬游在空气中的生物性粒子于专门的培养菌（选择能证实其能够支持微生物生长的培养基），经若干时间和 适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数，以判定该洁净室的微生物浓度。 4.2.2人员的职资及培训 洁净室（区）的测试人员应进行本专业的培训并获得相应的资格后才能才能履行对洁净室（区）测试的职责，其中包含涉及的卫生知识和基本的微生物知识。 洁净室（区）的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不能带进D级以上的区域。 4.2.3仪器、辅助设备和培养基 选择合适的浮游菌采样器，包括采用无油的抽气泵，较低的气流流速和较大的采样流量，以保证培养基表面的水分布被吹干。