生物化学实验考核试题库
一、理论考核题
1盐析与盐溶(3分) 2电泳(3分) 3层析(色谱)(3分) 4酶得活力单位(3分)５比活力(3分) 6分子筛效应(3分)7电泳得原理(４分)
8离子交换层析得原理(4分)9亲与层析得原理(4分)
１０凝胶过滤层析得原理(4分)
11吸附层析得原理(４分)
12透析技术得基本原理及其应用(4分)
13聚丙烯酰胺凝胶电泳得主要优点及用途(6分)
14按层析过程得机理,层析法分哪四类？按操作形式不同又分哪三类?(7分)
15普通离心机得使用注意事项？(6分)
１6可见分光光度计得使用注意事项？(6分)
17蛋白质含量测定得常用方法有那些?(6分)
18粗脂肪得提取与含量测定得基本原理(6分)
1９索氏提取器就是由哪几部分组成得？(6分)
20粗脂肪得提取与含量测定得简要操作步骤(6分)
2１粗脂肪得提取实验中如何减少误差？(６分)
２2凯氏定氮法测定总氮量得基本原理(6分)
2３凯氏定氮实验中用到得主要器材有哪些？(６分)
24核酸得含量测定常用得方法有哪些？(6分)
２5双倒数法测定米氏常数得基本原理(6分)
26双倒数法测定米氏常数得实验中,决定实验成败得因素有哪些?关键因素就是什么？(7分) 27生物细胞得破碎得常用方法有哪些?(6分)
28酶得制备及提取过程中常注意哪些事项？(6分)
２９蛋白质得分离常用得方法有哪些？(６分)
30甲醛滴定法测定氨基酸得基本原理(6分)
31为什么SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质得相对分子质量？(6分)
32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同？(６分)
33聚丙烯酰胺凝胶电泳得优点?(6分)
3４琼脂糖凝胶电泳得优点？(6分)
35提取某种植物组织中得总DNA时,使用得细胞提取液中得主要试剂成分就是什么？各有什么作用？(7分)
36如何证明提取到得某种核酸就是DＮA还就是RNＡ？(6分)
37聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时,使用得电泳缓冲液PH＝８、３,那么样品应点在哪端？为什么？(6分)
二、技能或实验操作考核题
３8说明纸层析与离子交换层析分离氨基酸混合物得方法就是根据氨基酸得什么性质? 列出纸层析与柱层析得一般操作步骤、(10分)
39凝胶电泳得一般操作步骤(11分)
40普通离心机得使用操作(示范)(１０分)
4１可见分光光度计得使用操作(示范)(１０分)
42如果要１05摄氏度干燥某种物质,如何使用干燥箱(示范)?(10分)
4３要称取某种药品2。０g,如何使用天平(示范)？(10分)
４４要配制500mｌ0、01ｍoｌ/L得NａＯH溶液应如何配制？(10分)
4５配制１L ０、01mｏl/L得HCl溶液应如何配制(已知浓盐酸比重就是1、19g/L,重量百分比浓度为36、5%)？(1１分)
46分别配制出１0µg/ｍl,5µｇ/ｍl,2µg/mｌ,１µg/mｌ得DＮA标准溶液,应如何配制?(尽可能节约)(10分)
答案:
１、盐析与盐溶:盐析:在蛋白质溶液中加入一定量得高浓度中性盐(如硫酸氨),使蛋白质溶解度降低并沉淀析出得现象称为盐析。盐溶:加入少量中性盐可增加蛋白质得溶解度,即盐溶现象。
２、电泳:带电粒子在直流电场中向着所带电性相反得电极移动得现象。
３、层析(色谱):用不同物质在不同相态得选择性分配,以流动相对固定相中得混合物进行洗脱,使混合物各组分以不同速度移动,从而达到分离得一种物理方法。
4、酶得活力单位:就是指在特定条件下(25℃、最适得pH值与底物浓度),每分钟可催化１微摩尔(10－6摩尔)底物转化所需要得酶量。
5、比活力:代表酶制剂得纯度。根据国际酶学委员会规定比活力用每毫克蛋白所含得酶活力单位数表示、
６、分子筛效应:凝胶本身具有三维网状结构,大得分子在通过这种网状结构上得孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小、分子量大小不同得多种成份在通过凝胶床时,按照分子量大小“排队,凝胶表现分子筛效应。
７、电泳得原理:电泳就是指带电颗粒在电场得作用下发生迁移得过程。许多重要得生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定得pＨ值下可以带正电或负电,在电场得作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反得电极方向移动。电泳技术就就是利用在电场得作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质得差异,使带电分子产生不同得迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯得技术。
8、离子交换层析得原理:离子交换层析法就是以具有离子交换性能得物质作固定相,利用它与流动相中得离子能进行可逆得交换性质来分离离子型化合物得一种方法。
９、亲与层析得原理:亲与层析就是应用生物高分子与配基可逆结合得原理,将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得得层析系统。这种可逆结合得作用主要就是靠生物高分子对它得配基得空间结构得识别。
１0、凝胶过滤层析得原理:一种利用带孔凝胶珠作基质,按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物得层析技术、凝胶过滤层析具有分子筛效应。
11、吸附层析得原理:组份在吸附剂表面吸附固定相就是固体吸附剂,各能力不同而进行分离得方法。
12、透析技术得基本原理及其应用:
13、聚丙烯酰胺凝胶电泳得主要优点及用途:①聚丙烯酰胺凝胶就是由丙烯酰胺与Ｎ,N’甲叉双丙烯酰胺聚合而成得大分子。凝胶有格子就是带有酰胺侧链得碳—碳聚合物,没有或很少带有离子得侧基,因而电渗作用比较小,不易与样品相互作用。
②由于聚丙烯酰胺凝胶就是一种人工合成得物质,在聚合前可调节单体得浓度比,形成不同程度交链结构,其空隙度可在一个较广得范围内变化,可以根据要分离物质分子得大小,选择合适得凝胶成分,使之既有适宜得空隙度,又有比较好得机械性质、一般说来,含丙烯酰胺7-7、5%得凝胶,机械性能适用于分离分子量范围不1万至100万物质,1万以下得蛋白质则采用含丙烯酰胺15—30％得凝胶,而分子量特别大得可采用含丙烯酰胺4％得凝胶,大孔胶易碎,小孔胶则难从管中取出,因此当丙烯酰胺得浓度增加时可以减少双含丙烯酰胺,以改进凝胶得机械性能。
③在一定浓度范围聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明,易观察,可用检测仪直接测定。
④丙烯酰胺就是比较纯得化合物,可以精制,减少污染。合成聚丙烯酰胺凝胶得原料就是丙烯酰胺与甲撑双丙烯酰胺。丙烯酰胺称单体,甲撑双丙烯酰胺称交联剂,在水溶液中,单体与交联剂通过自由基引发得聚合反应形成凝胶。
１4、按层析过程得机理,层析法分哪几类？按操作形式不同又分哪三类？:根据分离得原理不同分类,层析主要可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲与层析等。按操作形式不同又分层析可以分为纸层析、薄层层析与柱层析。
１5、普通离心机得使用注意事项?:
(1)。离心机要置水平位置,以保证旋转轴垂直地球水平面。
(2)、使用前应检查套环就是否平衡(台称)。
(３)。离心杯及其外套(离心管套)就是否平衡(台称)。
(４)。样品倾入离心杯后应与离心管套一起两两平衡,平衡后把它们放置于
转子得对称位置。
(５)、盖好盖子,打开电源开关,调整离心时间。
(６).启动离心时转速应由小至大,缓慢升速(一般要2～3ｍin)、
(７)。达到预定转速后再调整离心时间至预定时间(1０mｉn)。
(8)、离心完成后要调整调速连杆至零位,同时关上电源、
(9)。要等到转速为零时才能打开离心机盖,取出样品。
16、可见分光光度计得使用注意事项?:(１) 使用过程中比色皿得四个面在槽中保持一定得位置,取用比色皿时手应该捏住四个棱而不能碰到面、比色皿应该避免磨损透光面。
(2) 使用过程中不得打开盖子,保持仪器清洁,为避免溶液洒落对仪器造成得腐蚀,所
有溶液得配置、倾倒都不要在仪器附近操作、比色皿放进样品池之前必须把外表面擦干、
(３)当(仅当)操作者错误操作或其她干扰引起微机错误时,应该立即关断主机电源,重新启动,但无须关断灯源电源、
(4)光学器件与仪器运行环境需保护清洁。清洁仪器外表时 ,请勿使用乙醇乙醚等
有机溶剂,请勿在工作中清洁,不使用时请加防尘罩、
１7、蛋白质含量测定得常用方法有那些？:(1)微量凯式定氮法。(2)双缩脲法。(3)ｆoｌin－酚试剂法。(４)紫外分光光度法。(5)考马斯亮蓝染色法、
18、粗脂肪得提取与含量测定得基本原理、:脂肪就是丙三醇(甘油)与脂肪酸结合成得脂类化合物, 能溶于脂溶性有机溶剂、本实验用重量法,利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性,用脂溶性溶剂将脂肪提取出来,借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行。通常使用得脂溶性溶剂为乙醚或沸点为30ºＣ—６0 ºC得石油醚。用此法提取得脂溶性物质除脂肪外,还含有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等,故称为“粗脂肪”、
19、索氏提取器就是由哪几部分组成得?:提取瓶,提取管与冷凝管三部分组成。
20、粗脂肪得提取与含量测定得简要操作步骤(6分):1.抽提瓶在１05℃±2℃烘箱中烘至恒重,材料干燥至恒重、
2。称取干燥后得材料1-2ｇ,放入研钵中研磨(越细越好)将研磨好得材料用脱脂滤纸包住,用少许脱脂棉擦拭研钵壁上粘得材料及油脂,也一并放入滤纸包。用棉线拴住滤纸包,将滤纸包放入抽提管,在抽提瓶中加入2/３体积得无水乙醚在70—75℃得水浴上加热,使乙醚回流,控制乙醚回流次数为每小时约10次,共回流约５0次,或检查抽提管流出得乙醚挥发后不
留下油迹为抽提终点。
3 取出试样,仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部吸完,擦净瓶外壁,将抽提瓶放入10５℃±2℃烘箱中烘干至恒重。
２１、粗脂肪得提取实验中如何减少误差？(6分):(１)材料与提取瓶充分干燥。(２)材料尽可能得不损失。(３)提取充分完全、(4)提取后瓶子还要充分得干燥。
2２、凯氏定氮法测定总氮量得基本原理(6分):样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氨,氨又与硫酸作用变成硫氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中与得程度可计算得样品氮得含量。以甘氨酸为例:
1。有机物中得氮在强热与CuSO4,浓H２SO４作用下,消化生成(ＮＨ４)2SO４
反应式为: Ｈ2SO4==ＳO２＋H２O+[Ｏ］
R、CH。COOＨ＋[O]==Ｒ、CＯ.ＣOOH+ＮH3
NH３
R.CO。COOH+［O]==nＣO2＋mH2O
2NＨ3＋Ｈ2ＳO4==(NＨ4)2SO４
2、在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出NH3 ,收集于 H３ＢO3 溶液中。
反应式为: 2NH４++OH-＝=NH3＋H2O
NH3+H３ＢO3==NＨ4++H2BO３－
3、再用已知浓度得HCI标准溶液滴定,根据ＨCI消耗得量计算出氮得含量,然后乘以相应得换算因子,既得蛋白质得含量。
２3、凯氏定氮实验中用到得主要器材有哪些？(6分):凯氏烧瓶 ,容量瓶
凯氏定氮装置移液管酸式滴定管分析天平电炉烘箱
24、核酸得含量测定常用得方法有哪些？(６分)(1)紫外分光光度法;
(２)定磷法:钼蓝比色法
(3)定糖法:
RＮA+盐酸——糠醛＋地衣酚—-A670,鲜绿色;
DNA＋二苯胺——Ａ5９５,蓝色化合物
(4)琼脂糖凝胶电泳法
25、双倒数法测定米氏常数得基本原理(6分): Lineｗeaver与Ｂurｋ将米氏方程改写成倒数形式:
26、双倒数法测定米氏常数得实验中,决定实验成败得因素有哪些？关键因素就是什么?(7分):
２7、生物细胞得破碎得常用方法有哪些?(6分):机械法:研磨,高速捣碎机;物理法:反复冻溶,超声波破碎,压榨法;化学雨生物化学法:自溶,溶胀法,酶解法,有机溶剂处理。
28、酶得制备及提取过程中常注意哪些事项?(６分):
29、蛋白质得分离常用得方法有哪些？(6分):1、前处理:选择适当得破碎细胞得方法破碎细胞,组织细胞破碎后,选择适当得介质(一般用缓冲液)把所要得蛋白质提取出来。２、粗分离:当蛋白质混合物提取液获得后,选用一套适当得方法,将所要得蛋白质与其她杂蛋白质分离开来。一般这一步得分级用盐析、等电点沉淀与有机溶剂分级分离等方法。这种方法得特点就是简便、处理量大,既能除去大量杂质,又能浓缩蛋白质溶液。
3、细分离:也就就是样品得进一步提纯,一般使用层析法,包括凝胶过滤层析,离子交换层析,吸附层析以及亲与层析等。必要时还可以选择电泳法。
30、甲醛滴定法测定氨基酸得基本原理(6分):
31、为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质得相对分子质量?(6分):在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量得十二烷基硫酸钠(SDS),形成蛋白质—SDＳ复合物,这种复合物由于结合了大量得SDS,使蛋白质丧失了原有得电荷状态,形成了仅保持原有分子大小为特征得负离子团块,从而降低或消除了各种蛋白质分子之间得天然得电荷差异,此时,蛋白质分子得电泳迁移率主要取决于它得分子量大小,而其它因素对电泳迁移率得影响几乎可以忽略不计。当蛋白质得分子量在15000～２00000之间时,电泳迁移率与分子量得对数值呈直线关系,符合下列方程:
㏒10Mr = —ｂ·ｍR + K
３２、连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同？(6分):不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳包含了两种以上得缓冲液成分、ｐH值与凝胶孔径,而且在电泳过程中形成得电位梯度亦不均匀。由此产生得浓缩效应、电荷效应与分子筛效应。
3３、聚丙烯酰胺凝胶电泳得优点？(６分):①聚丙烯酰胺凝胶就是由丙烯酰胺与N,N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成得大分子、凝胶有格子就是带有酰胺侧链得碳—碳聚合物,没有或很少带有离子得侧基,因而电渗作用比较小,不易与样品相互作用。ﻫ②由于聚丙烯酰胺凝胶就是一种人工合成得物质,在聚合前可调节单体得浓度比,形成不同程度交链结构,其空隙度可在一个较广得范围内变化,可以根据要分离物质分子得大小,选择合适得凝胶成分,使之既有适宜得空隙度,又有比较好得机械性质。一般说来,含丙烯酰胺7—7.5%得凝胶,机械性能适用于分离分子量范围不1万至10０万物质,１万以下得蛋白质则采用含丙烯酰胺1５-3０%得凝胶,而分子量特别大得可采用含丙烯酰胺4％得凝胶,大孔胶易碎,小孔胶则难从管中取出,因此当丙烯酰胺得浓度增加时可以减少双含丙烯酰胺,以改进凝胶得机械性能。ﻫ
③在一定浓度范围聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明,易观察,可用检测仪直接测定。
④丙烯酰胺就是比较纯得化合物,可以精制,减少污染。合成聚丙烯酰胺凝胶得原料就是丙烯酰胺与甲撑双丙烯酰胺。丙烯酰胺称单体,甲撑双丙烯酰胺称交联剂,在水溶液中,单体与交联剂通过自由基引发得聚合反应形成凝胶、
３4、琼脂糖凝胶电泳得优点？(6分):(1)琼脂含液体量大,可达98-9９％,近似自由电泳,但就是样品得扩散度比自由电泳小,对蛋白质得吸附极微、(2)琼脂作为支持体有均匀,区带整齐,分辨率高,重复性好等优点。(3) 电泳速度快。(4)透明而不吸收紫外线,可以直接用紫外检测仪作定量测定。(５) 区带易染色,样品易回收,有利于制止备、然而琼脂中有较多硫酸根,电渗作用大。琼脂糖就是从琼脂中提取出来得,就是由半乳糖与３.６—脱水—L－半乳糖相互结合得链状多糖。含硫酸根比琼脂少,因而分离效果明显提高。琼脂(糖)电泳常用缓冲液得pH在６-９之间,离子强度为0.０２－0。05、离子强度过高时,会有大量电流通过凝胶,因而产生热量,使凝胶得水份量蒸发,析出盐得结晶,甚至可使凝胶断裂,电流中断。常用得缓冲液有硼酸盐缓冲液与巴比妥缓冲液、为了防止电泳时两极缓冲液槽内ｐＨ与离子强度得改变,可在每次电泳后合并两极槽内得缓冲液,混匀后再用、
35、提取某种植物组织中得总DNＡ时,使用得细胞提取液中得主要试剂成分就是什么?各有
什么作用?(７分):
36、如何证明提取到得某种核酸就是DNA还就是RNA?(6分):(1)用定糖法检测。(2)用紫外分光光度计检测。(3)用琼脂糖凝胶电泳检测、等
3７、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时,使用得电泳缓冲液PH=８。３,那么样品应点在哪端?为什么？(６分):样品应点在负极端,因为电泳缓冲液PH=8、３,在这样得环境中,血清蛋白得几种蛋白质电离后都带上负电荷,所以只有点样在负极端,外加电压后,才能向正极移动,彼此才能分开。
38、说明纸层析与离子交换层析分离氨基酸混合物得方法就是根据氨基酸得什么性质?列出纸层析与柱层析得一般操作步骤。(1０分)
纸层析就是分配层析,利用分配系数不同,即氨基酸在两相中得溶解能力不同。离子交换层析利用氨基酸就是两性物质,在一定pH下不同氨基酸带电性质与带电量不同,因此交换能力不同。
纸层析步骤:滤纸准备、样品处理、点样、平衡、展开、显色与定性定量分析。柱层析步骤:固定相准备、装柱、上柱、洗脱与收集、定性定量分析、
3９、试述凝胶层析原理,说明凝胶层析得应用并列出常用凝胶名称(10分)、凝胶层析柱装有多孔凝胶,当含有各组分得混合液流经凝胶层析柱时,各组分在层析柱内同时进行两种不同得运动、一种就是随着溶液流动而进行得垂直向下得移动,另一种就是无定向得分子扩散运动。大分子物质由于分子直径大,不能进入凝胶微孔,只能分布于凝胶颗粒得间歇中以较快速度流过凝胶柱、较小得分子能进入凝胶微孔,不断进出一个个颗粒得微孔内外,因此流动速度较慢,从而使混合溶液中各组分按照相对分子量由大到小顺序先后流出层析柱得到分离。
应用:不同分子量蛋白质分离、蛋白质分子量测定、蛋白质脱盐等、
常用凝胶:葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、
３9、凝胶电泳得一般操作步骤(1１分):制胶,加入电泳缓冲液,加样,电泳,剥胶,染色,脱色。
40、普通离心机得使用操作(示范)(１0分)
41、可见分光光度计得使用操作(示范)(10分)
42、如果要１０５摄氏度干燥某种物质,如何使用干燥箱(示范)? (１0分)
4３、要称取某种药品2。0g,如何使用天平(示范)?(10分)
44、要配制５０0ml 0.０1mol/Ｌ得ＮaOH溶液应如何配制？(10分):准确称量０。2gＮaOＨ用少量蒸馏水溶解,然后转入500ml得容量瓶中,再用蒸馏水少量多次(至少３次)洗涤烧杯,都转入容量瓶中,最后定容至刻度线,盖好容量瓶后混匀即可。
45、配制1L0、０1mｏl/L得HＣl溶液应如何配制(已知浓盐酸比重就是1.1９g／L,重量百分比浓度为３6.5％)？(1１分):
46、分别配制出10µg/mｌ,5µg/ml,2µｇ／ｍl,1µg/ml得DNA标准溶液,应如何配制?(尽可能节约)(1０分)
生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的？（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、?-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用? D、沉淀作用? 10、有关变性的错误描述为（） A、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变 B、蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性改变 C、 加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易沉淀 11、双链DNA热变性后（） A、黏度下降 B、沉降系数下降 C、浮力密度下降 D、紫外吸收下降 12、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（） A、天冬氨酸 B、脯氨酸 C、赖氨酸 D、丝氨酸 13、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？（） A、His的咪唑基 B、Arg的胍基 C、Cys的巯基 D、Trp的吲哚基
大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 一、选择题 1、以下实验仪器中,常用来取用块状固体药品的仪器是〔〕. A.药匙 B.试管夹 C.镊子 D. 土甘埚钳 2、托盘天平调零后,在左盘衬纸上置氧化铜粉末,右盘衬纸上置1个5g祛码,游码标尺示数如下,此时天平平衡.那么被称量的氧化铜质量为〔〕. A. 8.3 g B. 7.7 g C. 3.3 g D. 2.7 g 3、用减量法从称量瓶中准确称取0.4000g分析纯的NaOH固体,溶解后稀释至打00.0 mL,所得NaOH溶液的浓度为〔〕. A.小于0.1000 mol/L B.等于0.1000 mol/L C.大于0.1000 mol/L D.三种情况都有可能 4、邻苯二甲酸氢钾〔KHC8H4O4〕的摩尔质量为204.2 g/mol,用作为基准物质标定0.1 mol/LNaOH溶液时,如果要消^aOH溶液为25 mL左右,每份应称取邻苯二甲酸氢钾〔〕g左右. A. 0.1 B. 0.2 C. 0.25 D. 0.5 5、NaHCO3纯度的技术指标为＞99.0%以下测定结果哪个不符合标准要求？〔〕. A. 99.05% B. 99.01% C. 98.94% D. 98.95% 6、精密称取马来酸氯苯那敏对照品12 mg,应选取〔〕的天平. A.千分之一B.万分之一C.十万分之一D.百万分之一 7、实验室标定KMnO4溶液,常用的基准物质是〔〕. A. Na2cO3 B. Na2S2O3 C. Na2C2O4 D. K2Cr2O7 8、标定氢氧化钠常用的基准物质是〔〕. A. EDTA B. K2Cr2O7 C.草酸 D.邻苯二甲酸氢钾 9、以下物质可以作为基准物质的是〔〕.
生物化学实验的答案 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
生物化学实验的答案 一、理论考试部分 1.醋酸纤维薄膜电泳时，点样的一端应靠近电极的哪一端为什么 2. 答：负极。因为血清中各种蛋白质在PH为的环境中均带负电，根据同性相吸，异性相斥原理，点 样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 3.用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的意义是什么？ 答：空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度，但是 作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光 度的影响。 4.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳的原理？ 答：血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动，而各种蛋 白质等电点不同，且在PH为时所带电荷不同，分子大小不等，形状各有差异，所以在同一电泳下 永动速度不同从而实现分离。 5.何谓R f值？影响R f值的主要因素是什么？ 答：Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构，性质，溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关， 6.什么是盐析盐析会引起蛋白质变性吗一般我们用什么试剂做盐析的实验 答：盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程 度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性。一般用饱和硫酸铵溶液进 行盐析。 7.简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？ 答：还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度。 8.依据我们所做的实验，说明影响蛋白质沉淀的因素是什么影响蛋白质变性的因素是什么沉淀和 变性有何联系 答：水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶体颗粒，在一 定的理化因素影响下蛋白质颗粒因失去电荷和脱水而沉淀。这些因素包括溶液的酸碱 度、盐溶液的浓度、温度、重金属离子以及有机溶剂等。变性蛋白质不一定沉淀，沉淀的蛋 白质不一定变性。 8. 什么是碘值脂肪的不饱和程度越大，碘值越大吗在测定碘值的实验中，氯仿的作用是什么答：每100g脂肪所吸收的碘的克数，即脂肪的碘值。脂肪的不饱和度越大，碘值就越大。氯仿作为溶剂，去溶解脂肪。 9.简述薄层层析法分离糖类的原理？
临床生物化学检验技术试题及答案 第七章骨代谢紊乱及相关元素的生物化学检验 一、A型题 1. 骨矿化的最主要原料是下列哪一种 ( ) A. 胶原蛋白 B. 羟磷灰石 C. 羟脯氨酸 D. 碳酸钙 E. 柠檬酸钙 2. 骨有机质中含量最多的是下列哪种成分 ( ) A. Ⅰ型胶原蛋白 B. 非胶原蛋白 C. 脂类 D. 羟磷灰石 E. 甘氨酸 3. 下列哪种物质是成熟破骨细胞的主要标志 ( ) A. 骨钙素 B. 骨碱性磷酸酶 C. 抗酒石酸酸性磷酸酶 D. 降钙素 E. Ⅰ型前胶原前肽 4. 骨骼中含量最多的最主要的一种非胶原蛋白质是 ( ) A. 降钙素 B. 骨钙素 C. 骨碱性磷酸酶 D. 抗酒石酸酸性磷酸酶 E. 基质金属蛋白酶
5. 下列哪一种不是骨形成标志物 ( ) A. 抗酒石酸酸性磷酸酶 B. Ⅰ型前胶原羧基端前肽 C. 骨碱性磷酸酶 D. 骨钙素 E. Ⅰ型前胶原氨基端前肽 6. 下列哪一种不是骨吸收标志物 ( ) A. 胶原交联 B. 尿羟脯氨酸 C. 抗酒石酸酸性磷酸酶 D. 尿半乳糖羟赖氨酸 E. 骨钙素 7. 以下是骨形成标志物的是 ( ) A. 脱氧吡啶酚 B. 骨碱性磷酸酶 C. 尿半乳糖羟赖氨酸 D. A、B、C都是 E. A、B、C都不是 8. 骨钙素由什么细胞合成 ( ) A. 成骨细胞 B. 破骨细胞 C. 成骨细胞前体细胞 D. 破骨细胞前体细胞 E. 骨细胞 9. 循环中的骨钙素半寿期为 ( ) A. 5分钟 B. 5小时 C. 5天
D. 5周 E. 5个月 10. 骨碱性磷酸酶在血清中的半寿期为 ( ) A. 1小时～2小时 B. 1天～2天 C. 1周～2周 D. 1月～2月 E. 1分钟～2分钟 11. C-端前肽、C-端肽、N-端前肽和N-端肽四个指标中，反映骨吸收的标志物 是 ( ) A．C-端前肽和C-端肽 B．N-端前肽和N-端肽 C．C-端前肽和N-端前肽 D．C-端肽和N-端肽 E．以上均不是 12．在脱氧吡啶酚表现出更高骨吸收特异性和灵敏度的原因中，下列哪一条叙述不正确（） A．由胶原自然形成，非生物合成 B．排出前不被代谢 C．软骨是主要来源 D．不受饮食影响 E．骨是脱氧吡啶酚主要来源 13．抗酒石酸酸性磷酸酶由什么细胞合成、分泌（） A．成骨细胞 B．破骨细胞 C．成骨细胞前体细胞 D．破骨细胞前体细胞 E．骨细胞
生物化学实验_北京师范大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年 1.纯化蛋白时不一定是越多的纯化步骤效果就越好。 参考答案: 正确 2.如果有一个蛋白A，其分子量为40 KD。它在Native PAGE上产生两条条 带，下面哪种说法有可能具有合理性 参考答案: 两条条带分别为单体和某个降解产物_两条条带分别为单体和二聚体_两条条带分别为二聚体和四聚体_两条条带分别为单体和四聚体 3.在超声破碎时，可以连续超声5分钟，这样可以快速完成细胞破碎。 参考答案: 错误 4.设计纯化实验时，尽量不要利用相似原理的纯化步骤进行多步纯化。 参考答案: 正确 5.如果蛋白可以利用亲和层析分离纯化，那么通常会首先考虑亲和层析。 参考答案: 正确
6.纯化流出曲线上，上样过程中出现的流出峰又称为 参考答案: 穿过峰 7.蛋白哪种性质可以用来设计层析实验对其进行纯化 参考答案: 分子大小_与特定抗体结合_等电点 8.蛋白的哪种特性可以用来粗纯化 参考答案: 等电点_热稳定性 9.在pH 7.0的缓冲条件下，下面哪种等电点的蛋白可以用阴离子交换树脂分 离纯化 参考答案: 4.0_ 5.0 10.下面哪种方法是常用浓缩蛋白的方法 参考答案: 蒸发浓缩_超滤_盐析_真空冷冻干燥 11.离子交换层析介质常常按如下方式进行保存 参考答案: 20%乙醇中4℃保存
12.小规模纯化过程中上样量是A mg。如果计划在大规模纯化过程中上样量扩 大n倍，那么，层析柱的内径、高度以及层析流速该做如何调整？ 参考答案: 高度不变_内径扩大n倍_流速扩大n倍 13.纯化过程中，收集流出样品的方式有哪些种？ 参考答案: 按固定体积进行收集_按流出峰斜率变化进行收集_按流出峰紫外吸收值变化进行收集_按流出峰参数变化进行收集 14.待纯化样品无需过滤，离心后可以直接上样。 参考答案: 错误 15.一般来说，离子交换层析适合粗纯化阶段，适合大体积上样。 参考答案: 正确 16.在蛋白质纯化过程中，速度越快，分辨率越高。 参考答案: 错误 17.离子交换层析结束后，可以用0.5 mol/L 的NaOH进行层析介质再生。
生物化学实验考核试题库 一、理论考核题 1盐析和盐溶（3分）2电泳（3分）3层析（色谱）（3分）4酶的活力单位（3分）5比活力（3分）6分子筛效应（3分）7电泳的原理（4分） 8离子交换层析的原理（4分）9亲和层析的原理（4分） 10凝胶过滤层析的原理（4分） 11吸附层析的原理（4分） 12透析技术的基本原理及其应用（4分） 13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途（6分） 14按层析过程的机理，层析法分哪四类按操作形式不同又分哪三类（7分） 15普通离心机的使用注意事项（6分） 16可见分光光度计的使用注意事项（6分） 17蛋白质含量测定的常用方法有那些（6分） 18粗脂肪的提取和含量测定的基本原理（6分） 19索氏提取器是由哪几部分组成的（6分） 20粗脂肪的提取和含量测定的简要操作步骤（6分） 21粗脂肪的提取实验中如何减少误差（6分） 22凯氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分） 23凯氏定氮实验中用到的主要器材有哪些（6分） 24核酸的含量测定常用的方法有哪些（6分） 25双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分） 26双倒数法测定米氏常数的实验中，决定实验成败的因素有哪些关键因素是什么（7分）27生物细胞的破碎的常用方法有哪些（6分） 28酶的制备及提取过程中常注意哪些事项（6分） 29蛋白质的分离常用的方法有哪些（6分） 30甲醛滴定法测定氨基酸的基本原理（6分） 31为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量（6分） 32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同（6分） 33聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点（6分） 34琼脂糖凝胶电泳的优点（6分） 35提取某种植物组织中的总DNA时，使用的细胞提取液中的主要试剂成分是什么各有什么作用（7分） 36如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA（6分） 37聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时，使用的电泳缓冲液PH＝，那么样品应点在哪端为什么（6分） 二、技能或实验操作考核题 38说明纸层析和离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质列出纸层析和柱层析的一般操作步骤。（10分） 39凝胶电泳的一般操作步骤（11分） 40普通离心机的使用操作（示范）（10分） 41可见分光光度计的使用操作（示范）（10分） 42如果要105摄氏度干燥某种物质，如何使用干燥箱（示范）（10分） 43要称取某种药品，如何使用天平（示范）（10分）
临床生物化学检验测试题（含答案） 一、单选题（共100题，每题1分，共100分） 1、人体含ALT最丰富的组织是 ( ) 。 A、肝细胞 B、心肌 C、骨骼肌 D、白细胞 E、肾脏 正确答案：A 2、检测葡萄糖的特异性最高的方法是 ( ) 。 A、4种方法特异性没有区别 B、硫酸铜还原法 C、己糖激酶法 D、葡萄糖氧化酶法 E、邻甲苯胺法 正确答案：C 3、标本存放于冰箱一天后测定可造成 ( ) 。 A、血Na＋升高 B、血Cl－升高 C、血K＋升高 D、血Cl－升高 E、血K＋不变 正确答案：C 4、导致嘌呤分解增加的疾病不包括 ( ) 。 A、髓外浆细胞瘤 B、多发性骨髓瘤 C、白血病 D、红细胞增多症 E、甲减腺功能减退症 正确答案：E 5、不参与血液pH平衡调节的是 ( ) 。 A、神经系统的调节 B、血液的缓冲系统调节 C、肺对CO2排出的调节
D、每日饮水量、尿的调节 E、肾脏对酸碱物质排出的调节 正确答案：D 6、所谓选择性蛋白尿是 ( ) 。 A、肾小球有选择性地保留了尿中的蛋白 B、分子量<70 000的蛋白可通过肾小球滤过及出现在尿中 C、肾小管有选择性地重吸收了尿中的蛋白 D、尿蛋白定性阴性 E、分子量>70 000的蛋白可通过肾小球滤过及出现在尿中 正确答案：B 7、胆固醇可衍生成 ( ) 。 A、TSH B、ACTH C、肾上腺髓质激素 D、肾上腺皮质激素 E、前列腺素 正确答案：D 8、利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是 ( ) 。 A、吸附层析法 B、离子交换层析法 C、凝胶层析法 D、分配层析法 E、亲和层析法 正确答案：B 9、进行总钙和离子钙测定时，不能采用的标本为 ( ) 。 A、晨尿 B、肝素抗凝血浆 C、血清 D、脑脊液 E、EDTA抗凝血浆 正确答案：E 10、细胞间液与血浆组成成分的主要差别是 ( ) 。 A、阳离子种类
1、盐析和盐溶；盐析：在蛋白质溶液中加入一定量的高浓度中性盐(如硫酸氨),使蛋白质溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析。盐溶：加入少量中性盐可增加蛋白质的溶解度,即盐溶现象。 2、电泳：带电粒子在直流电场中向着所带电性相反的电极移动的现象。 3、层析（色谱）：用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，使混合物各组分以不同速度移动，从而达到分离的一种物理方法。 4、酶的活力单位：是指在特定条件下(25℃、最适的pH值和底物浓度),每分钟可催化1微摩尔(10-6摩尔)底物转化所需要的酶量。 5、比活力：代表酶制剂的纯度。根据国际酶学委员会规定比活力用每毫克蛋白所含的酶活力单位数表示。 6、分子筛效应：凝胶本身具有三维网状结构,大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小。分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时,按照分子量大小“排队,凝胶表现分子筛效应。 7、电泳的原理：电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。 8、离子交换层析的原理：离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。 9、亲和层析的原理：亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理,将配基通过共价键
生物化学实验 一、名词解释： 分配层析法电泳同工酶酶活性分光光度法层析技术比活力 二、填空题： 1. 测定蛋白质含量的方法有，，和。 2. CA T能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以来表示，当CA T与H2O2反应结束，再用测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备_____________胶，其自由基的引发剂是，催化剂是______________；光聚合法适于制备大孔径的_________________胶，催化剂是______________。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：_______________，_______________，_______________，_______________和________________。 5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管__________且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S的亲合力愈，Km愈大，表示E对S 的亲合力愈。 7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必须_________（打开、合上）样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的密切相关。 9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成的，在具有自由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：和。11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：_______________，_______________，_______________和________________。 三、问答题： 1、简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。 2、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中的三个不连续及三种物理效应。 3、试分析影响电泳的主要因素有哪些？ 参考答案： 生物化学实验 一、名词解释： 1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实
生物化学实验习题及参考答案 生物化学实验习题及解答一、名词解释 1、pi； 2、层析； 3、透析； 4、sds-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、tm值；8、同工酶；9、km值；10、dna变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（）a、双缩脲反应b、凯氏定氮c、紫外吸收d、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的？（） a、葡萄糖――molish反应 b、胆固醇――libermann-burchard反应 c、色氨酸―― 坂口（sakaguchi）反应d、氨基酸――茚三酮反应3、sanger试剂就是（） a、苯异硫氰酸 b、2，4-二硝基氟苯 c、丹磺酰氯 d、?-巯基乙醇4、肽键在下列哪个 波长具有最大光吸收？（）a、215nmb、260nmc、280nmd、340nm 5、以下蛋白质组分中，哪一种在280nm具备最小的光吸收？（） a、色氨酸的吲哚基 b、酪氨酸的酚环 c、苯丙氨酸的苯环 d、半胱氨酸的硫原子6、sds凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）a、在一定ph值条件下所带 的净电荷的不同b、分子大小不同c、分子极性不同d、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵结晶后，可以采用透析法除去硫酸铵。硫酸铵与否从透析袋中除净，你采用以下哪一种试剂检查？（） a、茚三酮试剂 b、奈氏试剂 c、双缩脲试剂 d、folin-酚试剂8、蛋白质变性是由于（） a、一级结构发生改变 b、亚基裂解 c、空间构象毁坏 d、辅基开裂9、大枣牛奶或生 蛋清营救重金属盐中毒就是依据蛋白质具备（）a、胶体性b、粘性c、变性促进作用d、 结晶促进作用10、有关变性的错误叙述为（） a、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变 b、蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性 发生改变c、冷却、紫外线照射、超声波等可以引发蛋白质变性d、变性蛋白质粘度 减少，极易被酶水解，极易结晶 11、双链dna热变性后（） a、黏度上升 b、沉降系数上升 c、浮力密度上升 d、紫外稀释上升
第一章测试 1.用50ml离心管离心样品时，错误操作是（）。 A:离心前样品配平 B:离心前若离心机内壁悬挂水珠，需擦拭干净 C:当分离效果达不到预期时可适当提高离心力。 D:离心管中样品尽量装满 答案:D 2.可见分光光度计错误操作是（） A:测试前比色皿用擦镜纸擦净外壁 B:使用前调0%T C:用空白溶液调100%T D:使用石英比色皿 答案:D 3.有关移液器操作正确的是（）。 A:吸头内有液体时不可平放或倒置移液器 B:吸液完成后需要在液面下方稍停留1~2秒，防止吸入气泡 C:吸取普通溶液时（正向移液），按压操作按钮至第2深停点 D:吸取普通溶液时（正向移液），按压操作按钮至第1浅停点答案:ABD 4.有关缓冲体系，下面说法正确的是（） A:稳定的pH值有利于维持蛋白质和酶的立体结构 B:缓冲液浓度越高越好 C:可以稳定氢离子浓度 D:缓冲液浓度越低越好 答案:AC 5.适用于酶标仪的只有透明塑料微孔板（） A:对 B:错 答案:B 第二章测试 1.【 2.1】亲和层析根据蛋白质的什么性质进行分离（）。 A:电荷 B:亲和性 C:分子量大小 D:分子形状 答案:B 2.【2.1】阴离子交换剂本身（） A:不带电 B:是两性离子
C:带负电荷 D:带正电荷 答案:D 3.【2.1】按照分子大小进行蛋白质分离的技术有：（） A:超滤 B:亲和色谱 C:离子交换色谱 D:凝胶排阻色谱 答案:AD 4.【2.1】下列哪种色谱技术对蛋白质样品具有浓缩作用。（） A:离子交换色谱 B:反相色谱 C:亲和色谱 D:分子筛色谱 答案:ABC 5.【2.1】离子交换层析和分子筛层析流速越大，分辨率越高。（） A:对 B:错 答案:B 6.【2.2】SDS-PAGE测定的是（） A:蛋白质糖基化 B:寡聚蛋白分子量 C:亚基分子量 D:蛋白质等电点 答案:C 7.【2.2】westernblot 是（） A:通过一抗/二抗复合物对膜上的目标蛋白进行特异性检测的方法 B:蛋白质等电点检测方法 C:对蛋白质活性进行检测的方法 D:对蛋白质进行分离的方法 答案:A 8.【2.2】蛋白质凝胶染色方法有 ( ) A:金属离子负染 B:有机试剂染色 C:银染 D:荧光染料染色 答案:ABCD 9.【2.2】琼脂糖凝胶的浓度越高，孔径越小，DNA条带的分辨率越低。（） A:错
生物化学实验习题及参考答案
生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI：指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值，用符号pI表示。 2、层析：按照在移动相和固定相（可以是气体或液体）之间的分配比例将混合成分分开的技术。 3、透析：通过小分子经过半透膜扩散到水（或缓冲 液）的原理，将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳：在去污剂十二烷基硫 酸钠存在下的聚丙烯酰氨凝胶电泳。SDS-PAGE 只是按照分子的大小，而不是根据分子所带的电荷大小分离的。 5、蛋白质变性：生物大分子的天然构象遭到破坏导 致其生物活性丧失的现象。蛋白质在受到光照，热，有机溶济以及一些变性济的作用时，次级键受到破坏，导致天然构象的破坏，使蛋白质的生物活性丧失。 6、复性：在一定的条件下，变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构象的现象。
7、Tm 值：核酸分子变性过程中，紫外吸收达到最大增量一半时的溶解温度。 8、同工酶：能催发相同的反应类型但其理化性质及免疫学性质不同的酶。 9、Km值：反应速度为最大反应速度一半时的底物 浓度。是酶的特征物理学常数之一。近似表示酶与底物的亲和力。 10、DNA变性：DNA双链解链，分离成两条单链的现象。 11、退火：既DNA由单链复性、变成双链结构的过 程。来源相同的DNA单链经退火后完全恢复双 链结构的过程，同源DNA之间`DNA和RNA之 间，退火后形成杂交分子。 12、增色效应：当双螺旋DNA熔解（解链）时，260nm 处紫外吸收增加的现象。 二、基础理论单项选择题 1、A； 2、C； 3、B； 4、A； 5、A； 6、B； 7、B； 8、C； 9、D；10、A；11、A；12、D；13、A； 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（）
生物化学实验试题与答案 生物化学实验考核试题库 一、理论考核题 1盐析和盐溶（3分后）2电泳（3分后）3层析（色谱）（3分后）4酶的活力单位 （3分后）5比活力（3分后）6分子筛效应（3分后）7电泳的原理（4分后）8色谱法层 析的原理（4分后）9亲和层析的原理（4分后）10凝胶过滤器层析的原理（4分后） 11吸附层析的原理（4分） 12输血技术的基本原理及其应用领域（4分后） 13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途（6分） 14按层析过程的机理，层析法分哪四类？按操作方式形式相同又分哪三类？（7分后）15普通离心机的采用注意事项？（6分后）16可知分光光度计的采用注意事项？（6分后）17蛋白质含量测量的常用方法存有那些？（6分后）18粗脂肪的抽取和含量测量的基本原理（6分后）19索氏抽取器就是由哪几部分共同组成的？（6分后）20粗脂肪的抽取和含 量测量的详细操作步骤（6分后）21粗脂肪的抽取实验中如何增加误差？（6分后）22凯 氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分后）23凯氏定氮实验中使用的主要器材存有哪些？（6分后）24核酸的含量测量常用的方法存有哪些？（6分后） 25双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分） 26双倒数法测定米氏常数的实验中，同意实验胜败的因素存有哪些？关键因素就是什么？（7分后） 27生物细胞的破碎的常用方法有哪些？（6分）28酶的制备及提取过程中常注意哪些事项？（6分）29蛋白质的分离常用的方法有哪些？（6分） 30甲醛滴定法测量氨基酸的基本原理（6分后） 31为什么sds－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？（6分）32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同？（6分）33聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点？（6分）34琼脂糖凝胶电泳的优点？（6分） 35抽取某种植物非政府中的总dna时，采用的细胞提取液中的主要试剂成分就是什么？各存有什么促进作用？（7分后） 36如何证明提取到的某种核酸是dna还是rna？（6分） 37共聚丙烯酰胺凝胶电泳拆分血清蛋白时，采用的电泳缓冲液ph＝8.3，那么样品应 当点在哪端的？为什么？（6分后）
生物化学检验测试题（附答案） 1、患者男，17岁，近半年来腹部不适，多次剧烈腹痛。空腹12h抽血分 离血浆，呈奶样乳白色，但经15000r/min离心30min后，发现血浆下层较透明，而表面为奶油层，该患者血浆中下列哪项脂蛋白可能升高 A、HDL B、CM C、VLDL D、LDL E、IDL 答案：B 2、极低密度脂蛋白中含量最多的成分是 A、载脂蛋白 B、磷脂 C、胆固醇酯 D、甘油三酯 E、胆固醇 答案：D 3、判断甲状腺功能最基本的筛选试验是 A、TT3 B、FT4 C、TSH D、TT4 E、FT3 答案：D 4、用于确诊实验的分析方法，必须有较高的 A、实验的总有效率 B、阳性结果的预示值 C、阴性结果的预示值 D、诊断特异性 E、诊断灵敏度 答案：D 5、常用于检测卵巢癌相关的肿瘤标记物是 A、CA19-9 B、AFP C、PSA
D、CEA E、CA125 答案：E 6、无酸碱平衡紊乱时 A、PaCO2减少 B、PaCO2增高 C、pH正常 D、HCO3-]增高 E、HCO3-]减少 答案：C 7、患者女，30岁。厌油无食欲，突发高热3天，肝区疼痛，巩脱黄染.疑诊为急性病毒性肝炎。急性病毐性肝炎时，明显升高的酶应该是 A、GGT B、LDH C、ALT D、CK E、ALP 答案：C 8、合成肌钙蛋白Ⅰ的细胞是 A、骨骼肌细胞 B、肝实质细胞 C、肝间质细胞 D、浆细胞 E、心肌细胞 答案：E 9、高钾血症见于 A、呼吸性碱中毒 B、大量补充氨基酸 C、细胞大量坏死 D、代谢性碱中毒 E、大量补充葡萄糖 答案：C 10、组织间液和血浆所含溶质的主要差别是 A、Cl- B、HCO3-
生物化学实验习题与解答 一、名词解释 1、pI：指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值,用符号pI表示. 2、层析：按照在移动相和固定相〔可以是气体或液体〕之间的分配比例将混合成分分开的技术. 3、透析：通过小分子经过半透膜扩散到水〔或缓冲液〕的原理,将小分子与生物大分子分开的一种 分离纯化技术. 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳：在去污剂十二烷基硫酸钠存在下的聚丙烯酰氨凝胶电泳.SDS-PAGE只 是按照分子的大小,而不是根据分子所带的电荷大小分离的. 5、蛋白质变性：生物大分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象.蛋白质在受到光照, 热,有机溶济以与一些变性济的作用时,次级键受到破坏,导致天然构象的破坏,使蛋白质的生物活性丧失. 6、复性：在一定的条件下,变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构象的现象. 7、Tm 值：核酸分子变性过程中,紫外吸收达到最大增量一半时的溶解温度. 8、同工酶：能催发相同的反应类型但其理化性质与免疫学性质不同的酶. 9、Km值：反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度.是酶的特征物理学常数之一.近似表示酶与 底物的亲和力. 10、DNA变性：DNA双链解链,分离成两条单链的现象. 11、退火：既DNA由单链复性、变成双链结构的过程.来源相同的DNA单链经退火后完全恢复双链 结构的过程,同源DNA之间`DNA和RNA之间,退火后形成杂交分子. 12、增色效应：当双螺旋DNA熔解〔解链〕时,260nm处紫外吸收增加的现象. 二、基础理论单项选择题 1、A； 2、C； 3、B； 4、A； 5、A； 6、B； 7、B； 8、C； 9、D；10、A；11、A；12、D；13、A； 1、用下列方法测定蛋白质含量,哪一种方法需要完整的肽键？〔〕 A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的？〔〕 A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口〔Sakaguchi〕反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是〔〕 A、苯异硫氰酸 B、2,4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、 -巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？〔〕 A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中,哪一种在280nm具有最大的光吸收？〔〕
生物化学检验题库含参考答案 1、下列哪种脂蛋白蛋白含量最高 A、HDL B、LDL C、CM D、VLDL E、IDL 答案：A 2、肾脏的基本结构和功能单位是（） A、肾髓质 B、肾皮质 C、肾小球 D、肾小体 E、肾单位 答案：E 3、常见抗凝剂中，抑制凝血酶原、酶和活酶作用的是 A、肝素钠 B、草酸 NA 盐 C、EDTA-NA2 D、氟化钠 E、柠檬酸钠 答案：A 4、肝细胞对胆红素生物转化的实质是（） A、增强毛细胆管膜上载体转运系统有利于胆红素排泄 B、使胆红素与 Y 蛋白结合 C、使胆红素的极性变小 D、使胆红素与 Z 蛋白结合 E、破坏胆红素分子内的氢键并进行结合，极性增加，利于排泄答案：E 5、下列哪一组属于急性时相反应蛋白 A、α1-酸性糖蛋白，结合珠蛋白，铜蓝蛋白，C 反应蛋白 B、转铁蛋白，血红素结合蛋白，甲胎蛋白，结合珠蛋白 C、甲胎蛋白，铜蓝蛋白，C 反应蛋白 D、铜蓝蛋白，结合珠蛋白，转铁蛋白，血红素蛋白 E、以上都不是
6、用双缩脲法测定总蛋白时以下哪些说法是错误 A、蛋白质肽键与试剂反应进行双缩脲复合物 B、双缩脲法是首选的常规方法 C、其中的酒中酸钾钠可以稳定铜离子 D、反应是在酸性溶液中进行的 E、反应中产生紫红色络合物 答案：D 7、钠测定的参考方法是 A、高锰酸钾滴定法 B、原子吸收分光光度法 C、火焰光度法 D、邻甲酚肽络合铜法 E、ISE 答案：C 8、关于等渗性脱水正确的是 A、水分由细胞内向细胞外转移 B、血浆渗透压降低 C、血浆渗透压升高 D、水分由细胞外向细胞内转移 E、血浆渗透压不变 答案：E 9、反映肝细胞合成能力最佳指标是（） A、MAO、β-PH B、ALT、γ-GT C、ALT、AST D、CH E、PA E、ALP、5′-NT 答案：D 10、在肝脏，胆固醇主要： A、合成低密度脂蛋白 B、转变成维生素 C、转变成胆汁酸 D、转变成类固醇 E、合成胆红素