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第11卷 第3期 2009 年 3 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 11 No. 3 Mar . ，2009
黄芩 黄连 黄柏体外抗金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌对比实验
魏长志
（济宁市中医院，山东 济宁 272137）
收稿日期：2008-09-17基金项目：济宁市科学技术委员会资助项目（济科鉴字[1999]第67号）作者简介：魏长志（1964-），男，山东汶上人，副主任中药师，学士，
主要从事中药药理与临床结合的研究。
黄芩、黄连、黄柏属清热燥湿类中药，都具清热
燥湿、泻火解毒之功， 可用于湿热所致的泻痢及痈肿疮毒[1]。痈肿疮毒多为金葡菌感染引起，痢疾多为痢疾杆菌感染引起。金黄色葡萄球菌广泛地分布于自然界，可引起人体多种感染性疾病；而痢疾的发病率也一直处于高水平，西药毒副作用大，细菌对
其又易产生耐药性[2]
。研究它们对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌的抑制作用对于感染性疾病的防治，中药的开发利用及指导临床用药都具有重要的意义。本文用液体2倍稀释法[3]对它们的抗菌强度进行了综合比较，报道如下。
1 实验材料
1.1 药材及原料 黄连Coptis chinensis Franch. 黄
芩Scutellaria baicalensis Georgi. 黄柏Phellodendron chinense Schneid.以上药材均购自本院中药房，均经济宁市药品检验所鉴定符合《中国药典》2005版一部规定。
1.2 药材粉碎 将黄芩、黄连、黄柏 分别粉碎后过100目筛备用。
1.3 药液制备 取药材细分各5.00g，分别置150mL 烧瓶中加水100mL 摇匀，超声处理10min，放置使分层，取上清液，残渣再加水80mL 超声提取，取上清液与第1次提取的上清液合并，水浴浓缩至10mL，
使成0.50g ?mL -1
。
1.4 培养基 营养琼脂、葡萄糖酚红肉汤培养基
pH（7.2±0.2）[3]
。 1.5 菌种 购自山东省卫生防疫站。金黄色葡萄
球菌（ATCC25923-4）、痢疾志贺菌Ⅰ型（00518-2）、痢疾志贺菌Ⅱ型（00519）、福氏志贺菌Ⅱ型（00540-2）、宋氏志贺菌（00503-3）、鲍氏志贺菌Ⅰ型（00575-2）。
1.6 菌液 首先将原菌种接种于10mL 葡萄糖酚红肉汤培养基中，37℃活化培养24h，然后转种于营养琼脂平板上继续培养24h。从平板上取菌苔一铂金耳，接种于10mL 葡萄糖酚红肉汤培养基中，于37℃培养24h，取出作原菌液，再用无菌生理盐水稀释至10-4
，备用。
2 实验方法
2.1 药液稀释 采用试管两倍稀释法。由于共选
用了6种（型）细菌，所以将所有消毒好的装有2mL 葡萄糖酚红肉汤培养基的试管平均分成6组，每组3排，每排15支。在每组中用无菌刻度吸管分别吸取消毒好的3种供试液2mL 于每排的第一管中，混匀，再取出2mL 到第2管中混匀。如此稀释至第13支试管，混匀后取出2mL 弃去，第14、15两支试管不加药液。
2.2 抑菌实验 在6组试管中分别加入6种菌液，在每组的3排试管中分别加入稀释好的同一种菌液。从第1管到第13管分别加入0.05mL，第15管不加菌液作为阴性对照，第14管加入菌液作为阳性对照，37℃培养24h 观察抑菌结果，继续培养24 h 观察杀
菌实验结果[2]
。
摘 要：目的：观察黄芩、黄连、黄柏3种药物对金黄色葡萄球菌和痢疾杆菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌
浓度(MBC)，比较其抗菌活性。方法：采用液体两倍稀释法。结果：3种药物对金黄色葡萄球菌的抗菌作用都明显优于痢疾杆菌。体外抗菌强弱顺序为：黄连、黄芩、黄柏。结论：从体外抗菌角度来看黄连为治疗痈肿疮毒和痢疾的首选药物，其次为黄芩，黄柏作用最弱。
关键词：黄芩；黄连；黄柏；金黄色葡萄球菌；痢疾杆菌
中图分类号：R246.8 文献标识码：B 文章编号：1673-842X (2009) 03- 0159- 03Scutellaria Coptis Phellodendron in Vtro Anti-Staphylococcus
Aureus and Bacillus Dysenteriae Comparative Experiment
WEI Chang-zhi
（Chinese Medicine Hospital in Jining City, Jining 272137,Shandong, China）
Abstract：
Objective : To observe the three drugs scutellaria, coptis,phellodendronon on staphylococcus aureus and bacillus dysenteriaethe minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC), to compare their antibacterial activity. Methods : To introduce liquid double dilution method. Results : The three drugs against staphylococcus aureus antimicrobial activity are much better than bacillus dysenteriae. In vitro antibacterial order: coptis>scutellaria>phellodendron. Conclusion : From the perspective of coptis vitro for the treatment of carbuncle sore and dysentery drug of first choice, followed by scutellaria, the role of phellodendronthe is the weakest.
Key words：scutellaria; coptis; phellodendron; staphylococcus aureus; bacillus dysenteriae
辽宁中医药大学学报11卷
2.3结果判断 若有细菌生长，细菌会发酵葡萄糖产酸，使酚红指示剂变成黄色，反之若无细菌生长则培养基仍为红色[2]。
3 实验结果
抗菌活性：３种中药对金葡菌抗菌强度见表1，对不同型痢疾杆菌的抗菌强度见表2，为比较每一种药物对不同型痢疾杆菌MIC和MBC的波动情况见表3。
4 讨 论
《神农本草经》对黄芩记载：“主……肠泄痢，……恶疮疽蚀火疡。”对黄连记载“主……肠腹痛下痢”，《珍珠囊》对黄连记载：“诸疮必用”，由此可见古人早就用这两种药物来治疗痢疾和痈肿疮毒。黄柏亦可用于疮疡肿毒[1]，本次实验结果也表明这3种药物都有较强的抗金葡菌的作用。从对金葡菌的抗菌作用来看,黄连的MBC与黄芩相差4个浓度梯度与黄柏相差5个浓度梯度，黄芩比黄柏抗菌作用略强，这也从某种程度上验证了《珍珠囊》对黄连“诸疮必用”的记载，也为这3种药物临床治疗痈肿疮毒提供了一定的实验依据。
从对痢疾杆菌的抗菌作用来看, 抗菌作用最强者为黄连,最弱为黄柏；从黄连与黄芩的比较来看,
表1 黄连 黄芩 黄柏对金黄色葡萄球菌的体外抗菌实验结果（n=3）
各管药液浓度/ g?mL-1 阳性 阴性药物 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 对照 对照 2.5 1.25 6.25 3.13 1.56 7.81 3.91 1.95 9.77 4.88 2.44 1.22 6.10
×10-1 ×10-1 ×10-2 ×10-2 ×10-2 ×10-3 ×10-3 ×10-3 ×10-4 ×10-4 ×10-4 ×10-4 ×10-5
黄连 - - - - - - - - - - - -△ + + -
黄芩 - - - - - - - -△ - + + + + + - 黄柏 - - - - - - -△ - + + + + + + -注：+表示有细菌生长，-表示无细菌生长，△表示最低杀菌浓度。
表2 黄连 黄芩 黄柏对不同型痢疾杆菌的体外抗菌实验结果（n=3）
各管药液浓度/ g.mL-1
药物 痢疾杆菌 1 2 3 4 5 6 7 8
2.5 1.25 6.25
3.13 1.56 7.81 3.91 1.95 阳性 阴性 ×10-1 ×10-1 ×10-2 ×10-2 ×10-2 ×10-3 ×10-3 ×10-3 对照 对照 黄连 福氏志贺氏菌Ⅱ型 — — — — — — —△ — + — 痢疾志贺氏菌Ⅰ型 — — — — — — — —△ + — 痢疾志贺氏菌Ⅱ型 — — — — — —△ — + + — 鲍氏志贺氏菌Ⅰ型 — — — — — — —△ + + — 宋氏志贺氏菌 — — — — —△ — + + + — 黄芩 福氏志贺氏菌Ⅱ — — — — — —△ + + + — 痢疾志贺氏菌Ⅰ — — — — — — —△ + + — 痢疾志贺氏菌Ⅱ — — — — — — —△ + + — 鲍氏志贺氏菌Ⅰ型 — — — — — —△ + + + — 宋氏志贺氏 — — — — —△ + + + + — 黄柏 福氏志贺氏菌Ⅱ型 — — —△ + + + + + + —
痢疾志贺氏菌Ⅰ型 — — —△ — + + + + + —
痢疾志贺氏菌Ⅱ型 — — —△ + + + + + + —
鲍氏志贺氏菌Ⅰ型 — —△ — + + + + + + —
宋氏志贺氏菌 — —△ + + + + + + + —
注：+表示有细菌生长，-表示无细菌生长，△表示最低杀菌浓度。
黄连对福氏志贺氏菌Ⅱ型, 痢疾志贺氏菌Ⅰ型 ,鲍氏志贺氏菌Ⅰ型的杀菌作用都比黄芩强, MBC相差一个浓度梯度。对痢疾志贺氏菌Ⅱ型黄连杀菌作用比黄芩弱，MBC亦相差一个浓度梯度。对宋氏志贺氏菌的MBC相同，抑菌作用黄连比黄芩强，MIC相差一个浓度梯度。所以，除了痢疾志贺氏菌Ⅱ型黄连抗菌作用比黄芩弱外，对其它痢疾杆菌的抗菌作用都比黄芩强。从黄芩与黄柏的比较来看,黄芩对所选痢疾杆菌的抗菌的作用都比黄柏强，黄芩对痢疾志贺氏菌Ⅰ型、痢疾志贺氏菌Ⅱ型杀菌作用最强，MBC都为3.91×10-3g?mL-1与黄柏相比都相差4个浓度梯度。对福氏志贺氏菌Ⅱ型的MBC为7.81×10-3g?mL-1，与黄柏相比相差3个浓度梯度。对鲍氏志贺氏菌Ⅰ型的MBC为7.81×10-3g?mL-1，与黄柏相比相差4个浓度梯度。对宋氏志贺氏菌的MBC 为1.56 ×10-2g?mL-1与黄柏相比相差3个浓度梯度。从黄连、黄芩与黄柏的三者比较来看，黄连比黄芩的抗菌作用略强，但二者比黄柏的抗菌作用明显增强，黄芩对所选痢疾杆菌表现的都是杀菌作用，而黄连和黄柏则既有抑菌又有杀菌。但从每一种药物对不同型痢疾杆菌的MIC、 MBC的波动情况来看，按照黄连、黄芩、黄柏由大到小的排列顺序。尽管如此，黄连和黄芩的抗菌强度是黄柏的许多倍。所以，从体外抗菌的角度印证了《神农本草经》对黄连和黄芩治疗痢疾的论述。
表3 药物对不同型痢疾杆菌MIC和MBC的波动情况
黄连 黄芩 黄柏
MIC 2 2 2
MBC 3 2 1从对金葡菌与痢疾杆菌的比较来看，３种中
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药对金葡菌的抗菌强度都明显优于痢疾杆菌。其中，黄连对金葡菌的最低抑菌浓度（MIC）1.22×10-4 g ?ml -1
与对黄连最不敏感的痢疾杆菌宋氏志贺菌的最低抑菌浓度（MIC）7.81×10-3个?mL -1相差６个浓度梯度；黄连对金葡菌的最低杀菌浓度
（MBC）1.22×10-4
g ?mL -1与对黄连最不敏感的痢疾杆菌宋氏志贺菌的最低杀菌浓度（MBC）1.56×10-2g ?mL -1
相差７个浓度梯度。而黄芩对金葡菌与对黄芩最不敏感的痢疾杆菌宋氏志贺菌的最低抑菌浓度（MIC）相差４个浓度梯度；最低杀菌浓度（MBC）相差３个浓度梯度。黄柏对金葡菌与对黄柏最不敏感的痢疾杆菌宋氏志贺的最低抑菌浓
度（MIC）相差６个浓度梯度；最低杀菌浓度（MBC）相差５个浓度梯度。相差最大者为黄连，最小为黄芩。这主要是因为黄连对金葡菌表现出了高度的敏感性的原因。所以从体外抗菌角度来看黄连为治疗痈肿疮毒和痢疾的首选药物，其次为黄芩，黄柏抗菌作用最弱。◆
参考文献[ 1 ] 凌一揆，颜正华，林乾良，等.中药学[ M ] .上海：上海科学技术 出版社，1984：41-43.[ 2 ] 彭文伟，颜光美，钟南山，等.现代感染性疾病与传染病学[ M ] . 北京：科学出版社出版，2000：965.
[ 3 ] 周邦靖.常用中药的抗菌作用及其测定方法[ M ] . 重庆：科学 技术文献出版社重庆分社，1987：299.
中药能否实现现代化，关系到中医药学在现代社会的持续生存及发展，同时也与国家民族经济的振兴与发展息息相关。
1 中药现代化进程中的障碍
1.1 主要障碍 既要体现中医特色、能被中医临床
辨证使用，又要符合现代制药标准，这就是现代中药的概念，国内学界及业界对此已经逐渐形成了共识。但是，研发出真正的现代中药，尚非常困难。目前研发出来的“中药”新药，临床上无法进行辨证论治，这类新药只能属于西药或植物药。中药现代化进程中遇到的主要障碍，就是无法将传统中医药学理论与现代制药技术及标准进行有机结合。
1.2 扫除障碍之切入点 欲扫除中药现代化进程中之障碍，首先必须澄清现代中药的二大实质内容：（1）现代中药需要体现中医药学的什么特色：如果固守中医药学所有的传统理论、观点、方法，就不需要实现现代化。谈中药的现代化，就是要将传统中医药学中的最主要的科学精华，与现代科学方法进行结合，用现代化的新形式来发扬光大。中医药学的主要科学精华，主要体现在两方面：一是对人体生理实质及病理演变认识的整体观，二是在整体观指导下的临床辨证论治大法。这是中医药学现代化必须牢牢遵循的实质内容。所以，只要中药新药能体现中医整体观及辨证论治这二大特色，就能称为现代中药。
（2）现代中药需要体现的现代特征：现代药物的二项最基本也是最重要的要求，就是安全性及有效性，这也是对现代中药的要求。传统中药由于成分复杂，质量检控困难，无法显示药物的安全性。如果中药实现成分单一，就易于体现药物的安全性。所以，成分单一、质量可控，这就是现代中药的现代特征。
论现代中药之研发
——单一化学成分中药制剂研发方案
赵晶亮
（比利时JINGLIN 公司）
摘 要：将中医药学理论与现代制药技术及标准有机结合，是实现中药现代化的关键。通过从中药药效物质研究的基本思路，到新型研发技术的创建，将中药复杂成分化解为单一成分，并按现代制药标准、使用现代制药技术制成现代制剂，试图推出一个能充分体现中医药学科学精华特色的、现代中药新药研发新模式。
关键词：中药现代化；中药药效物质；新药研究；中医整体状态检测
中图分类号：R2-03 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2009) 03- 0161- 03收稿日期：2008-09-17
作者简介：赵晶亮（1957-），男，江苏南京人，讲师，主要从事中医药新技研发。
Creation of New R&D Mode of Chinese Herbal Medicine
ZHAO Jing-liang
（Belgium JINGLIN Company）
Abstract：
The key to modernize Chinese herbal medicine is to find a way to unite appropriately the essence of Traditional Chinese Medicine (TCM in short) with modern pharmaceutical technologies and standards. This article presents a new R&D model for new herbal medicine with full reflection of the essence of TCM, by reforming new mentality for the research of herbal bioactive compounds, creating a new R&D technology, selecting main single effective compound to present the mixture of chemical compounds from a single herb and to make a modern herbal medicine according to modern pharmaceutical standards.
Key words：
Modernization of Chinese herbal medicine;Bioactive fundamentals;R&D of new medicine;Whole condition measurement
金黄色葡萄球菌检测方 法 Revised as of 23 November 2020
金黄色葡萄球菌检测方法 1.纸片法 目前广泛应用的一种方法，用纸片、膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过观察微生物在测试片上面的生长、显色来测定食品中微生物。采用快速测试片检测具有显着的优点：可测定少量检品，不需要配制试剂，不需要大量的玻璃器皿，操作简便迅速；易于消毒保存，便于运输携带方便，价格低廉；除纸片外无其他任何废液废物，大大减少了工作量；可以在取样时同时接种，结果更能反映当时样本中真实细菌数，防止延长接种时间时细菌繁殖造成的污染。 技术优点：操作简单使用方便，避免了繁琐的操作。 技术缺点：用时间比较长，无法准确定性及计数。 此方法现在应用于快速检测领域，美国3M公司Petrifilm为载体的测试片应用最为广泛。但其也存在一些问题：Petrifilm测试片上覆盖了一层薄膜，当样品粘液过多时会出现菌落的扩散和融合，影响计数；Petrifilm测试片面积较小，当菌量大于250cfu时，准确计数较困难；待测样品中含有的某些有机物可能使显色减缓。使目视效果下降，导致计数偏低。 2.免疫学方法 各种免疫学方法的基本原理都是抗原抗体反应。抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。金黄色葡萄球菌特异的抗原能激发机体产生相应的特异性抗体。在免疫检测中，可利用单克隆抗体检测金黄色葡萄球菌的特异抗原，也可利用金黄色葡萄球菌抗原检测体内产生的特异抗体，两种方法均能判断机体的感染状况。目前对于金黄色葡萄球菌的测定主要进行了肠毒素的测定，方法以酶联免疫吸附实验为主，有胶体金方法，也有用亲和素一生物素乳胶凝集实验和免疫荧光实验，但都有一定的局限性。 免疫学方法包括下面两个部分： （1）抗原抗体技术分析：抗原抗体技术是免疫技术中的核心部分，对于金黄色葡萄球菌检测全菌免疫筛选抗体是很困难的事情，现在目前市场有的大多都是对金黄色葡萄球菌毒素类进行免疫得到的抗体，金黄色葡萄球菌毒素有12种，军事医学科学院生产的金黄色葡萄球菌毒素A、B、C的抗体。毒素抗体优势在于敏感度高，易于检查，缺点毒素种类多，检测其中几种不具有普遍性。毒素分离工艺复杂，要得到纯毒素成本比较高。 （2）免疫学方法技术分析：上述免疫学技术应用最多的是酶联免疫技术和胶体金侧向层析技术。酶联免疫技术广泛应用于实验室检测，由于一次可以检测多个样本，此技术多用于体外诊断，目前也广泛用于食品安全。胶体金技术由于操作简单，检测适度快等优势，在食品安全领域广泛用于现场快速检测。 基于免疫学方法的技术主要分为：酶联免疫技术、胶体金侧向层析技术、免疫荧光技术、免疫沉淀技术、乳胶凝集技术、免疫磁珠技术。 3.分子生物学方法 金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：肠毒素、血浆凝固酶、溶血素、杀白细胞素、表皮溶解毒素、毒性体克综合重量毒素I 等。而这些致病因子基因的鉴定(包括耐药性相关基因、毒素基因、酶基因及多
金黄色葡萄球菌的测定 1 卫生学意义 金黄色葡萄球菌定性检验（增菌培养法）：适用于检查含有受损伤的金黄色葡萄球菌的加工食品。 2 检验方法 2.1 术语与定义 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为一种革兰氏染色阳性球形细菌。显微镜下排列成葡萄串状，金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜。是常见的引起食物中毒的致病菌。常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。 2.2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： （1）恒温培养箱：36℃±1℃。 （2）冰箱：2℃～5℃。 （3）恒温水浴箱：37℃～65℃。 （4）天平：感量0.1g。 （5）无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。 （6）无菌锥形瓶：容量100mL、500mL。 （7）无菌培养皿：直径90mm。 （8）pH计或pH比色管或精密pH试纸。 2.3 培养基和试剂 （1）7.5%氯化钠肉汤 1）成分：蛋白胨：10.0g；牛肉膏：5.0g；氯化钠：75g；蒸馏水：1000mL；pH：7.4； 2）制法：将上述成分加热溶解，调节pH，分装，每瓶225mL，121℃高压灭菌15min。 （2）B－P琼脂平板 1）成分：胰蛋白胨：10.0g；牛肉膏：5.0 g；酵母膏：1.0g；丙酮酸钠：10.0g；甘氨酸：12.0g；氯化锂（LiCl·6H2O）：5.0g；琼脂：20.0g；蒸馏水：950mL；pH：7.0±0.2 2）增菌剂的配法：30%卵黄盐水50mL与经过除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL 混合，保存于冰箱内。 3）制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，调节pH。分装每
黄连栀子黄芩黄柏4味药解决从头到脚一切炎症， 比消炎药疗效好、见效快，4味药解决从头到脚一切炎症，太管用了！ 中医说：“阴阳不衡，病则生。”人的病无非阳病、阴病。这个方子专门治疗阳亢之病。 就是不管什么样的上火，在它面前都能很快平息。所以古人讲它是热病的常用方。 如果掌握好这个方子，治病基本上半边天都可以拿下来，因为它的作用实在太大了。 这个方子叫黄连解毒汤，黄连解毒汤不是张仲景的方，但是也是一张古方，是唐方，出自《外台秘要》，方中黄连、黄芩的组合，还有黄柏、栀子的组合，都是张仲景的经典配伍，把这两张组合起来就叫做黄连解毒汤。 火热之邪盛极即为毒，黄连解毒汤4味药，黄连、黄芩、黄柏、栀子，这几味药，清热泻火解毒功效都比较强，常用于治疗发热、身体各个系统感染的急性炎症，属于热毒火毒症状的，都适合使用这个药方，清热解毒的功效很强大，直泄火毒。好比一锅水开得很旺的时候，你给它泼点冷水，相当于用点清热、降火法。《成方便读》载：“治一切火邪，表里俱盛，狂躁烦心，口燥咽干，大热干呕，错语不眠，吐血，衄血，热盛发斑等证。”可以说朝吃夕效，夕吃朝效，就是早上吃，下午就见效，下午吃，第二天早上就好。 在治疗身体各系统的症状，身体伴有一些火热毒的症状，适合选择性的加入这个药方里面的一些药材，当使用的时候必须注意掌握用量，一般6到10克为宜，也要注意使用时间，毕竟苦寒之品长期使用，损阳伤脾耗气。 黄连解毒汤：黄连、栀子各9克，黄芩、黄柏各6克。 黄连味苦，治疗中焦实火，善清心、胃之火。 黄芩苦寒，如果说黄连降的是心火，黄芩更偏重于降肺火。黄芩还有一个比较奇妙之处，熄胆火，小柴胡汤，用它来熄胆火，胆火重的表现是什么？口苦咽干，严重的目眩。 黄柏苦寒，治疗下焦实火，善泻肾火炽盛。 栀子性寒，栀子就太厉害了，它可以治疗三焦实火，擅长于使热邪从小便排出。从三焦来讲，擅长清三焦的热毒，上中下都可配它。但实际上这个三焦概念也包含三焦是水道，它既能既清热，又能够利水。所以能引三焦之热从小便出。 都是苦寒药，所以虚冷的人，要注意，不要轻易吃，以防雪上加霜。 火曰炎上，炎上的火，我们用清凉的药。热火牙痛，牙齿里头长了痈疮，牙龈肉都爆起来的， 黄连解毒汤，简直就是它的克星。一般逢年过节，肯定煎炸烧烤，大鱼大肉，一吃下去肠胃一堵，牙齿上火就肿。黄连解毒汤，喝一两包下去大便一通，火就下去了。所以《内经》说，膏粱厚味，足生大疔。膏粱厚味能够积热毒，毒热久了它就会成疮。所以清淡饮食很重要。心开窍于舌。舌头像火苗一样，心主火。所以口腔溃疡，舌尖红红的，或者急性咽喉炎，吞咽不利的，咽喉肿肿说话声音都沙哑了的，黄连解毒汤4味药泡茶以后，啜饮，含在嘴巴里头再吞下去，让它作用在那里，效果好。 肝火目赤，凡是熬夜看手机、电脑，看到眼睛发红发痛发胀，黄连解毒汤清热明眸。 再看火是什么颜色的？赤色的，红红黄黄的。黄赤为热，清稀为寒。一个人得了尿道炎、膀胱炎，他的尿是什么颜色的？黄赤黄赤的。尿道炎、膀胱炎，急性的，短、赤、涩、难忍，有些吃消炎药都拿不下。用什么？黄连解毒汤。 上火烦躁失眠的，一个人很郁闷，又烦躁，翻来覆去睡不着。每天晚上临睡前要喝凉水才能
实验七食品中金黄色葡萄球菌的检验 一、实验目的要求 1、了解食品的质量与金黄色葡萄球菌检验的意义。 2、掌握金黄色葡萄球菌的生物学特性。 3、掌握金黄色葡萄球菌检验的生化试验的操作方法和结果的判断。 4、掌握食品中金黄色葡萄球菌检验的方法和技术。 二、原理 葡萄球菌在自然界分布极广，空气、土壤、水、饲料、食品(剩饭、糕点、牛奶、肉品等)以及人和动物的体表粘膜等处均有存在，大部分是不致病，也有一些致病的球菌。金黄色葡萄球菌是葡萄球菌属一个种。可引起皮肤组织炎症，还能产生肠毒素。如果在食品中大量生长繁殖，产生毒素，人误食了含有毒素的食品，就会发生食物中毒，故食品中存在金黄色葡萄球菌对人的健康是一种潜在危险，检查食品中金黄色葡萄球菌及数量具有实际意义。 金黄色葡萄球菌能产生凝固酶，使血浆凝固，多数致病菌株能产生溶血毒素，使血琼脂平板菌落周围出现溶血环，在试管中出现溶血反应。这些是鉴定致病性金黄色葡萄球菌的重要指标。 三、试剂和仪器 （一）最先准备的器材 规格名称数量用途 1、500ml广口瓶1个稀释样品 2、500ml三角瓶1个制生理盐水 3、250ml三角瓶3个制培养基等 4、10×100mm试管6支血浆凝固酶试验 5、1ml移液管2支 6、10ml移液管 2 支 7、直径为90 mm平皿12套制血平板B-P平板 8、250ml量筒1支 （二）应灭菌的其它器材 剪刀1把不锈钢汤匙1把称量纸适量 （三）应制备的培养基 培养基总量所用容器 1.无菌水50ml/瓶1瓶250ml三角瓶（全班共用） 2.0.85%生理盐水70ml/瓶1瓶250ml三角瓶（全班共用） 3.0.85%生理盐225ml/瓶1瓶500ml三角瓶 4.7.5%NaCl肉汤50ml/瓶1瓶250ml三角瓶
黄连黄芩黄柏三位中药的区别及作用 黄芩善于治疗肺热咳嗽、高热惊风、吐血鼻衄、头痛鼻渊等症、如配知母、桑白皮、荷叶、银花、连翘、桔梗、桔仁等治疗肺热咳嗽痰多等症。配生石膏、山栀子、大黄、生地等治疗鼻衄、血热斑疹等症，配苍耳子、知母、木笔花、桑白皮、赤芍等治疗鼻窦炎等。与夏枯草、双钩藤、菊花等配伍，可以治疗肝炎上炎引起的眼花、目赤肿痛、心烦头晕等症。? 黄连在临床上常用对湿热泄泻、高热神昏、吐血、衄血、心下痞满、胃火炽盛、牙龈肿痛、口舌生疮等病症的治疗。如治疗胃肠实热、胃火炽盛引起的胃内嘈杂、牙龈肿痛、胃脘作痛、口舌生疮时，常与连翘、厚朴、枳实、栀子配伍。治疗肝火旺所至的肋胁胀痛、口苦泛酸时常与吴茱萸配伍。治疗心火亢盛引起的胸闷、心痛、夜不能寝时，又常常与瓜蒌、半夏等药物配伍。现代医学研究证明，黄连中含有黄连碱、掌叶防己碱、甲基黄连碱、木兰碱等物质，对葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、痢疾球菌、霍乱弧菌等都有较强的抗菌作用。因此，黄连还是一种很好的抗菌消炎药。? 黄柏是黄柏树的内皮，临床上主要用于对湿热下注、淋病、痢疾、尿浊带下、骨蒸劳热梦遗等病的病症的治疗，如治疗痢疾时常与木香、黄连，马齿苋、白头翁、秦皮等配伍、治疗湿热下注时所至的
泌尿感染。常与栀子、大黄、龙胆草、木通、瞿麦、当归等配伍。治疗血尿时又常与小蓟、地榆、白茅根等配伍。治疗妇女带下、常与车前子、芡实、苍术等配伍。? 黄芩、黄连和黄柏虽然都属清热降火药，但黄芩偏于清上焦火，黄连偏于清中焦火，而黄柏则偏于清下焦火。根据其各自的特点，临床上遇有心炎、肺火时常先黄芩，遇有胃炎时常选黄连，遇有大肠及膀胱湿热火盛时可选黄柏治疗。? 摘自----------《中药基础学》
我们以SN标准中的最近似值(MPN)测定法来进行讲解： 这种方法适用于检测认为带有大量竞争菌的食品及其原料和未经处理的食品中的少量金黄色葡萄球菌。 1、样品制备： 固体或半固体食品: 以无菌操作称取25g样品,放入装有225mL灭菌生理盐水的灭菌均质杯内,于8000r/min均质1～2min,制成1:10样品匀液。 液体食品: 用灭菌吸管吸取25mL样品,放入装有225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内 (瓶内预置适当数量的玻璃珠),经充分振摇制成1:10样品匀液。 供计数检验时,可按十进位递增稀释法将样品匀液再进行适当稀释。 2、选三个连续稀释度，从每个稀释度分别取1 mL稀释样品液，接种3管含10％氯化钠why?还记得么？金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。因此，这事实上是一种选择性的增菌。胰蛋白胨大豆肉汤。样品的最高稀释度必须达到能获得阴性终点,置36±1℃培养48 h。 3、用3 mm接种环,从有细菌生长的各管中移取1 环,划线接种于表面干燥的Baird- Parker琼脂平板,置36±1℃培养45～48h。 4、从有细菌生长的每一平板上至少挑取1个可疑金黄色葡萄球菌菌落,移种到肉汤培养基中,置36±1℃培养20～24 h。 5、取肉汤培养物0.3mL同0.5mL凝固酶试验兔血浆于8mm×100mm试管内充分混合,置36±1℃培养,定时观察是否有凝块形成,至少观察6 h,以内容物完全凝固,使试管倒置或倾斜时不流动者为阳性。试验中需同时做巳知阳性和阴性对照。对可疑结果,应进行革兰氏染色、镜检和其他辅助试验{如耐热核酸酶试验等} 加以证实。 6、报告结果：根据凝固酶试验结果查最近似值(MPN)表,报告金黄色葡萄球菌的MPN/g (mL)。 附：怎样在平板上进行细菌的划线分离。 1.斜线法 2.曲线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法
实验5 金黄色葡萄球菌的检验 1 目的和要求 （1）掌握金黄色葡萄球菌的检验方法 （2）了解金黄色葡萄球菌各检验步骤的依据及原理 2 基本原理 金黄色葡萄球菌进入人体内，可引起局部的痈疾和蜂窝组织炎，还可以引起肺炎、心肌炎、骨骼炎、肾盂肾炎等系统化脓性感染，甚至可发展成败血症。此外，食品中生长金黄色葡萄球菌是食品卫生中的一种潜在危险，因为金黄色葡萄球菌在是中会产生肠毒素，食用后将引起食物中毒，这在我国细菌性食物中毒事件中，仅次于沙门氏菌和副溶血弧菌。因此，检验食品中金黄色葡萄球菌是实际意义。绝大多数金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上产生金黄色色素，菌落周围有透明的溶血圈，在厌氧条件下能分解甘露醇产酸，产生血浆凝固酶和耐热的DNA酶。 3 实验材料 3.1 检样乳与乳制品（如奶粉、消毒乳）、肉制品、饮料 3.2 菌种金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌斜面培养物。 3.3 培养基7.5%氯化钠肉汤、肉浸液肉汤、血琼脂平板、Baird-Parker氏培养基 3.4 试剂与染色剂无菌生理盐水、兔血浆、革兰氏染色液等。 3.5 仪器与其他用具无菌吸管（1mL、5、10）、无菌试管、载玻片、接种环、酒精灯、显微镜、均质器、恒温箱等。 4 检样程序 5 操作步骤 5.1 5.1.1样品的处理
称取25 g 样品至盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质 1 min～2 min，或放入盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min。若样品为液态，吸取25 mL 样品至盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤或10 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌锥形瓶(瓶内可预臵适当数量的无菌玻璃珠)中，振荡混匀。 5.1.2 增菌和分离培养 5.1.2.1 将上述样品匀液于36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长，污染严重时在10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤内呈混浊生长。 5.1.2.2 将上述培养物，分别划线接种到Baird-Parker 平板和血平板，血平板36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。Baird-Parker 平板36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h 或45 h～48 h。 5.1.2.3 金黄色葡萄球菌在Baird-Parker 平板上，菌落直径为2 mm～3 mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿润、金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶血圈。挑取上述菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。 5.1.3 鉴定 5.1.3.1 染色镜检：金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽胞，无荚膜，直径约为0.5 μm～1 μm。 5.1.3.2 血浆凝固酶试验：挑取、Baird-Parker平板或血平板上可疑菌落1个或以上，分别接种到5 mL BHI和营养琼脂小斜面，36 ℃±1℃培养18 h～24 h。 取新鲜配臵兔血浆0.5 mL，放入小试管中，再加入BHI 培养物0.2 mL～0.3 mL，振荡摇匀，臵36℃±1℃温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察 6 h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒臵时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。也可用商品化的试剂，按说明书操作，进行血浆凝固酶试验。 结果如可疑，挑取营养琼脂小斜面的菌落到 5 mL BHI，36 ℃±1℃培养18 h～48 h，重复试验。 病原性葡萄球菌多数产生血浆凝固酶，非病原性的一般不产生。因此，该法是判定葡萄球菌有无致病性的重要指标。 5.2 金黄色葡萄球菌Baird-Parker平板计数 5.2.1 样品的稀释 5.2.1.1固体和半固体样品：称取25 g样品臵盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000 r/min均质1 min～2 min，或臵盛有225 mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2 min，制成1:10的样品匀液。 5.2.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取25 mL样品臵盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预臵适当数量的无菌玻璃珠)中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。 5.2.1.3 用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用 1 支1 mL 无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。 5.2.1.4 按5.2.1.3 操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。 5.2.2 样品的接种
精心整理1．概述 葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。 2.标本类型 血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。 3.鉴定 3.1形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。 3.2培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的 溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌 O/F试 ”为3.5.1涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。 3.5.2触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。 3.5.3凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》。 3.5.4鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4.药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件。 5.质量控制 参见《质量管理程序》。 6.检验结果解释与分析 6.1由于葡萄球菌分布广泛，从临床标本中分离到金黄色葡萄球菌时，将其定为致病菌时应慎重。
精心整理 应根据凝固酶试验进一步确认。对可疑菌株的鉴定，最好利用商品化的鉴定系统根据生化图谱进行确定。表皮葡萄球菌分离自导管相关血流感染时，通常视为致病菌。溶血性葡萄球菌从泌尿感染病人分离得到时，尤其是细菌量较大或作为优势菌时，通常被视为致病菌。 6.2甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种广谱强效抗菌药物呈多重耐药性。如果检测出耐甲氧西林的葡萄球菌菌株则报告耐所有青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类和?-内酰胺药/?-内酰胺酶抑制剂类抗生素，对氨基糖苷类和大环内酯类抗生素常协同耐药。若葡萄球菌属对四环素敏感，则对多西环素和米诺环素敏感。某些菌对四环素中介或耐药，而对多西环素和米诺环素敏感。临床感染葡萄球菌的病人用喹诺酮类治疗3-4日后，原来敏感的葡萄球菌易产生耐药。所以对这类葡萄球菌需多次反复进行药敏试验。大环内酯类耐药葡萄球菌包括固有耐药和诱导耐药。所以临床试验室须进行“D”试验以检测克林霉素诱导性耐药，根据“D”试验结果来报告克林霉素的耐药性。 7.临床意义 金黄等， 等。 MRSA 物。 8. [1] [2] [3]
【黄柏的功效与作用】黄柏的神奇功效黄柏的功效： 黄柏为芸香科植物黄檗或黄皮树的树皮，黄柏别名檗木、檗皮、黄檗，黄柏的功效是清热解毒、清热燥湿，黄柏的作用是治湿热痢疾、泄泻、黄疸、梦遗、淋浊、带下等，黄柏苦寒伤胃，脾胃虚寒者，如脾虚泄泻，胃弱食少者忌服黄柏。 药名：黄柏 别名：檗木、檗皮、黄檗。 黄柏的功效与作用 性味：苦；寒。 归经：肾经；膀胱；大肠经。 功效：清热解毒、清热燥湿。 主治：湿热痢疾、泄泻、黄疸；梦遗、淋浊、带下；骨蒸劳热，盗汗；以及口舌生疮；目赤肿痛；痈疽疮毒；皮肤湿疹
用法用量：煎汤，3-12g；或入丸、散。外用：适量，研末调敷，或煎水浸洗。 ：黄柏为芸香科植物黄檗或黄皮树的树皮。 黄柏炮制： 1、黄柏：拣去杂质，用水洗净，捞出，润透，切片或切丝，晒干。 2、黄柏炭：取黄相片，用武火炒至表面焦黑色(但须存性)，喷淋清水，取出放凉，晒干。 3、酒黄柏：取黄柏片，用黄酒喷洒拌炒如盐黄柏法(每黄柏片10O 斤用黄酒10斤)。 4、盐黄柏：取黄相片，用盐水喷洒，拌匀，置锅内用文火微炒，取出放凉，晾干(每黄柏片100斤用食盐2斤半，加适量开水溶化澄清)。 黄柏的作用：
黄柏清热燥湿，泻火解毒，除骨蒸清虚热。黄柏用于湿热泻痢，黄疸，带下，热淋，脚气，痿辟，骨蒸劳热，盗汗，遗精，疮疡肿毒，湿疹瘙痒。盐黄柏滋阴降火。黄柏用于阴虚火旺，盗汗骨蒸。 1、黄柏治小儿热痢下血：黄檗半两，赤芍药四钱。上同为细末，饭和丸，麻子大。每服一、二十丸，食前米饮下，大者加丸数。 (《阎氏小儿方论》) 2、黄柏治小儿脓疮，遍身不干：黄檗末，入桔矾少许掺之。(《简便单方》) 3、黄柏治痢疾：黄柏300克，翻白草450克，秦皮300克。将翻白草、秦皮全部及黄柏200克，共水煎两次，合并煎液，用文火浓缩成膏状，将剩余100克黄柏研细粉加入膏中，搅匀，低温烘干，研细粉。每服一、二克，日三次。(辽宁《中草药新医疗法选编》) 4、黄柏治小儿脐疮不合：黄檗末涂之。 (《子母秘录》) 5、黄柏治妊娠及产后寒热下痢：黄檗一斤，黄连一升，栀子二十枚。上三味，细切，以水五升，渍一宿，煮三沸，服一升，一日一夜令尽。呕者加橘皮一把，生姜二两。 (《千金翼方》)
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1.范围 本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌的检测方法。 本标准第一法适用于金黄色葡萄球菌的定性检测；第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数。第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数。 2.设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 2.1恒温培养箱：36℃±1℃。 2.2冰箱：2℃～5℃。 2.3恒温水浴箱：37℃～65℃。 2.4天平：感量0.1g。 2.5均质器。 2.6振荡器。 2.7无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器。 2.8无菌锥形瓶：容量100mL、500mL。 2.9无菌培养皿：直径90mm。 2.10注射器：0.5mL。 2.11 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 2.12全自动微生物生化鉴定系统。（BD Crystal或Phoenix）。 2.13比浊仪。（BD Phoenix比浊仪，货号440910）。 2.14比浊仪定标盒。（BD Phoenix定标盒，货号440911）。 3.培养基和试剂 3.110 %氯化钠胰酪胨大豆肉汤。
3.27.5 %氯化钠肉汤。 3.3血琼脂平板。（BD 货号脑心浸液琼脂241830胰蛋白大豆琼脂236950作为基 础加兔血浆） 3.4Baird-Parker 琼脂平板。（BD 货号 276840） 3.5脑心浸出液肉汤(BHI)。（BD 货号 237400） 3.6稀释液：磷酸盐缓冲液。(BD 货号211544) 3.7营养琼脂小斜面。（BD 货号212000） 3.8革兰氏染色液。（BD 货号212539） 3.9无菌生理盐水。 第一法金黄色葡萄球菌的定性检验 4.检验程序 金黄色葡萄球菌定性检验程序见图1： 图1 金黄色葡萄球菌检验程序 5.操作步骤 5.1样品的处理 称取25g样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/e37040120.html, 黄连·黄芩·黄柏的区别 作者：韩德承 来源：《现代养生·上半月》2020年第03期 “三黄”即黄连、黄芩、黄柏三味药的简称，都是清热燥湿，泻火解毒的中药材，但功效有异同。 黄连：为毛茛科植物黄连的干燥根茎，性寒，味苦，无毒，入心、脾、胃、肝、胆、大肠经。关于黄连之苦，有很多歇后语：“半夜吃黄连——暗中叫苦”“冰糖煮黄连——同甘共苦”等等，说的是黄连味道苦。可它虽苦，但是一味常用的良药。俗话说“良药苦口利于病”，它具有清热燥湿、泻火解毒的功效，用于治疗湿热痞满、呕吐吞酸、泻痢、黄疸、高热神昏、心火亢盛、心烦不寐、血热吐衄、目赤、牙痛、消渴、痈肿疔疮等症;外用治疗湿疹、湿疮、耳道流脓等症。《名医别录》载：黄连“主五脏冷热，久下泄便脓血，止消渴，大惊，除水利骨，调胃厚肠，益胆，疗口疮”。《日华子本草》亦载其：“治五劳七伤，益气，止心腹痛。惊悸烦躁，润心肺，长肉，止血;并疮疥，盗汗，天行热疾;猪肚蒸为丸，治小儿疳气。” 现代药理研究表明，黄连所含的小檗碱对溶血性链球菌、脑膜炎球菌、肺炎双球菌等致病菌皆有较强的抑菌作用;能兴奋心脏，增加冠状动脉血流量，降低血压;能增强乙酰胆碱的作用，有显著的抗箭毒样作用及抗肾上腺素样作用;能松弛血管平滑肌，对子宫有显著的兴奋作用，有利胆作用;与秋水仙协同有抗癌作用。 黄连不同的炮制方法各有专攻。泻心火，生用;火在上，酒炒，用于目赤、口疮等;火在下，童便炒;火在中，姜汁炒，可清胃和胃止呕，用于寒热互结，湿热中阻，痞满呕吐;伏火，盐水炒;火在气分而痛，吴茱萸拌炒，可舒肝和胃止呕，用于肝胃不和，呕吐吞酸;食积成火，黄土炒;止泻，壁土炒;肝胆火，醋炒或胆汁炒;热结于下，朴硝拌炒;血中伏火，干漆拌炒等等。 黄连在辨证施治中，与多味中药配伍。治湿热内蕴、血热妄行，配黄芩、大黄等;治湿热留恋肠胃，常配半夏、竹茹;治泻痢、热滞，配木香、黄芩、葛根等;治温病高热、心火亢盛，配栀子、连翘等;治热毒疮疡，可配赤芍、丹皮等;治胃火炽盛的中消证，配天花粉、知母、生地等。注意：黄连属大苦大寒药，过服久服易伤脾胃，脾胃虚寒者忌用;苦燥伤津，阴虚津伤者慎用。
金黄色葡萄球菌检测 1 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 1.1 恒温培养箱：36℃±1℃。 1.2 冰箱：2℃～5℃。 1.3 恒温水浴箱：37℃～65℃。 1.4 天平：感量0.1g。 1.5 均质器。 1.6 振荡器。 1.7 无菌吸管：1ml（具0.01ml刻度）、10ml（具0.1ml刻度）或微量移液器及吸头。 1.8 无菌锥形瓶：容量100ml、500ml。 1.9 无菌培养皿：直径90mm。 1.10 注射器：0.5ml。 1.11 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 2 培养基和试剂 2.1 Baird-Parker 琼脂平板：见附录中1。 2.2 脑心浸出液肉汤(BHI) ：见附录中2。 2.3 兔血浆：见附录中3。 2.4 营养琼脂小斜面：见附录中4。 2.5 无菌生理盐水：见附录中5。 3 操作步骤 3.1 样品的稀释
3.1.1 固体和半固体样品 称取25g样品置盛有225ml生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min均质1min～2min，或置盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1：10的样品匀液。 3.1.2 液体样品 以无菌吸管吸取25ml样品置盛有225ml生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中，充分混匀，制成1：10的样品匀液。 3.1.3 用1ml无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液1ml，沿管壁缓慢注于盛有9ml稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支1ml无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1：100的样品匀液。 3.1.4 按3.1.3操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用一次1ml无菌吸管或吸头。 3.2 样品的接种 根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1ml样品匀液以0.3ml、0.3ml、0.4ml接种量分别加入三块Baird-Parker平板，然后用无菌L棒涂布整个平板，注意不要触及平板边缘。使用前，如Baird-Parker平板表面有水珠，可放在25℃～50℃的培养箱里干燥，直到平板表面的水珠消失。 3.3 培养 在通常情况下，涂布后，将平板静置10min，如样液不易吸收，可将平板放在培养箱36℃±1℃培养1h；等样品匀液吸收后翻转平皿，倒置于培养箱，36℃±1℃培养，45h～48h。
89 干姜黄芩黄连人参汤 干姜黄芩黄连人参汤 （方组、临证参考用量）干姜9g 黄芩9g 黄连9g 人参 9g 4 味，以水1200mi ，煮取400ml ，去滓，分2 次温 （功效］清上温下，辛开苦降。 （主治） 主证：呕吐频作，或食入即吐，下利。 副证：或胸膈痞闷，舌质淡，苔薄黄，脉虚数。 （临证加减） 1。本方之剂量：原方四味为各等份。但在临 证应用时， 病情之寒热虚实而异。如病急，不下利但呕，脉证热重寒轻，重用黄芩、黄连；如为慢性，又脾虚者，脉证热轻寒重，则重用人参、干姜。方中黄连不应小于3g ，急性胃肠炎者用10~15g ． 2．患本方证，若汤水不得人口：去干姜，加生姜汁少 许，许许呷之，此少变古法，屡验。
3．干姜黄苓人参汤治疗消化性溃疡临床观察： 药用干姜、 黄连各9g ，黄苓12g ，党参30g ，砂仁6g ，广木香、炙甘 草各 lOg 。热重于寒干姜减量；寒重于热黄苓、黄连减量。每 工剂， 文火煎 3 次，取汁 400ml ，分 3 次服。 ［四川中医， 1974 ， cls ，： zs] 中张仲景对呕吐的治疗进行了较全面的阐述，创造了一些现 在仍 然行之有效的方剂。胃主受纳和腐熟水谷，其气主降，以下 行为 顺，若胃失和降，气逆于上则发生呕吐，张仲景对呕吐辨证 以寒 热为纲，其中关于胃寒呕吐的尤多。张仲景对呕吐的辨证论 治可 归纳如下。 ( 1 )胃寒饮停：呕吐多为清水痰涎， 脘闷不食， 头晕目眩， 心悸，苔白腻，脉滑。治宜温化寒饮，和胃降逆。方用小半 夏汤 El 4．浅谈《伤寒杂病论》 中关于呕吐的治疗： 《伤寒杂病论》 或五苓散。 (2) 肝胃虚寒：食谷欲呕或干呕，吐涎沫，
金黄色葡萄球菌检测方法 一．材料与方法 1、材料 ①培养基：7.5%NaCl肉汤培养基，血琼脂平板培养基（按常规方法制作） ②试剂：7.5%NaCl肉汤培养基，革兰氏染色，血琼脂平板，Baird-Parker琼脂平板，生理盐水，兔血浆（1：4）， ③器材：温箱，显微镜，天平，均质器，载玻片，L型涂片棒，三角瓶，刻度吸管，平皿，试管及试管架，研磨，1ml注射器， ④实验动物：健康的小白鼠 2、方法 待检样品25g+225ml灭菌生理盐水 │ ┌─────┴─────┐ 直接计数法增菌培养方法 ↓↓ Baird-Parker琼脂平板7.5%NaCl肉汤培养基 ↓↓ 血平板血平板 └─────┰─────┘ ↓ ┌─────┰─────┰──────┐ ↓↓↓↓ 涂片染色镜溶血观察动物接种试验血浆凝固试验 └─────┴──┯──┴──────┘ ↓ 报告 1、样品的采集 称取25g火腿肠，切碎搅匀（用灭菌研钵研磨），置于250ml锥形瓶中，加入225ml灭菌生理盐水，制成1：10样品混悬液，混匀后作用20分钟，随机取10ml离心。 2、增菌及分离培养 ①增菌培养方法：吸取5ml上清液，接种于7.5%NaCl肉汤培养基内，置于（37±1℃）恒温箱中培养24h，划线接种入血平板，（37±1℃）恒温箱中培养24h。 ②直接计数方法：吸取上述悬液，进行10倍递增稀释，根据样品污染情况，选择不同浓度的
稀释液各1ml，分别加入3个Baird-Parker琼脂平板，每个平板的接种量分别为0.3ml、0.3ml、0.4ml。用灭菌L型涂布棒涂布整个平板，置于（37±1℃）恒温箱中培养24h。之后分别对3个平板上生长的周围有浑浊带的黑色菌落进行计数。转接入血平板，（37±1℃）恒温箱中培养24h。 3、涂片、染色与镜检 将纯培养的未知菌涂片，革兰氏染色，显微镜观察。 4、生化实验 ①触酶试验 在载玻片上滴1滴3%的过氧化氢，调取纯化的细菌放在过氧化氢中观察变化。30s内产生大量气泡者为阳性，不产生气泡者为阴性。 ②血浆凝固酶试验 吸取1：4新鲜兔血浆0.5ml，放入小试管中，再加入培养24h的2①中的肉汤培养液0.5ml，摇荡均匀，放入（37±1℃）恒温箱中培养，每0.5h观察一次，观察6h，检查是否出现凝固。将试管倾斜或倒置时，呈现凝块状，可判定为阳性，同时以已知阳性葡糖球菌和阴性肉汤作为对照。 5、动物感染实验 用无菌生理盐水将2①中血琼脂板上纯化的菌落洗下后，以0.5ml/只腹腔注射入小白鼠体内，同时用灭菌生理盐水注射入另外的小白鼠体内，以做对照，分别在相同条件饲养，观察其症状。对感染试验出现症状或死亡的小白鼠进行剖检，并采集病料，进行分离。 二．结果与分析 1、培养特性及形态特征 ①培养特性 在37℃条件下，需氧与厌氧培养的血液营养琼脂平板均长出光滑、湿润、隆起，约1mm大小的金黄色菌落，并且有β溶血现象。 ②镜检结果 显微镜下观察该菌为革兰氏阳性球菌，排列成葡萄串状，也有个别2个或3个球菌相连。根据菌落形态、镜检结果怀疑该菌为葡萄球菌。 2、菌落计数报告 将直接计数法试验中的3个平板中疑似黑色葡萄球菌的金黄色菌落数相加，乘以血浆凝固酶试验阳性数，除以5，在乘以稀释倍数，即为每克样品中金黄色葡萄球菌数量。 3、动物感染试验 只注生理盐水的小白鼠没有任何变化：接种分离菌的小白鼠在9h内死亡。将死亡的小白鼠剖检采集病料，进行细菌分离和生化试验，得到与原分离菌。
黄芩在皮肤病临床应用(一) 【关键词】黄芩皮肤病临床应用 黄芩为唇形科黄芩属植物黄芩的根。别名：腐肠、黄文、妒妇、虹胜、经芩、印头、内虚、空肠、子芩、宿芩、条芩、元芩、土金茶根、山茶根、黄金条根。枯老中空者称枯芩（片芩）；细条者称条芩；条细中实而坚者称子芩。黄芩味苦性寒，入肺经；心经；肝经；胆经；大肠经。 功能：清热泻火，燥湿解毒，炭可止血，长于清肺热，泻上焦之火。一般用量10克。皮肤科临床取其清肺泻火之功，常用于湿热引起的皮肤病，如湿疹、皮炎、红斑类疾患。 主治：用于湿温、黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，暑温胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，痈肿疮毒，胎动不安。热病高热神昏；肝火头痛；目赤肿痛；湿热黄疸；泻痢；热淋；吐衄血；崩漏；胎热不安；痈肿疔疮。 用法用量：内服，煎汤，3-9g；或入丸、散；外用，适量，煎水洗；或研末调敷。 1功用 1.1清肺胃火之功能： 本品专清肺胃上焦之火，可治疗痤疮、酒渣鼻等；同时对积热上熏之疾，如唇炎、唇部血管神经性水肿亦有治疗作用。 1.2燥湿清热之功能： 本品能泻大肠下焦之火，又治湿热疮疡之疾，如带状疱疹、湿疹等。 2药理作用 2.1抗菌作用 黄芩煎剂100%浓度，平板法试验，对痢疾杆菌、伤寒杆菌， 霍乱弧菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、溶血性琏球菌（a，B）、肺炎双球菌、白喉杆菌等有抑制作用。平皿法试验对大肠杆菌、桔草杆菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用。 2.2抗真菌作用 黄芩煎液，试管斜面法试验4%浓度抑制狗小牙胞菌及堇色 毛癣菌，8%浓度抑制许兰氏黄癣菌，10%浓度抑制许兰氏黄癣菌蒙古变种，15%浓度抑制共心性毛癣菌及铁锈色毛癣菌。黄芩水浸剂1：3浓度在试管内对堇色毛癣菌、同心性毛癣菌，许兰氏黄癣菌、奥杜盎氏小芽胞癣菌、羊毛样小芽胞癣菌、红色表皮癣菌、K、W、氏表皮癣菌、星形奴卡氏菌等有不同程度抑菌作用。 2.3抗病毒作用 黄芩可抑制HIV-Ⅰ病毒逆转录酶（RT）和细胞病变（CPE），抑制病毒荧光抗原（FA）、P24抗原和成人TCC白血病毒，抑制HIV-Ⅰ在H9细胞中生长。 2.4抗过敏作用 黄芩甙、黄芩素及其他黄酮类化合物对多型变态反应有不同程度的抑制作用，尤其对Ⅰ型变态反应为强。此外对佐剂性关节炎的继发性损害也有明显抑制作用，并能显著抑制佐剂所致骨退化和破坏的增强 2.5免疫调节作用 黄芩能明显促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，显著提高血清中溶菌酶的含量，增强红细胞C3B受体酵母花环百分率。黄芩甙可以提高小鼠血清溶血素和脾脏B细胞分泌溶血素的含量，可提高IGM的水平增加IgG的含量，体内用药还可增强整体的免疫功能，因此黄芩有望成为新的免疫调节剂。 3临床作用 3.1痤疮、酒渣鼻
【关键词】黄柏；,,药理作用 摘要：归纳总结了黄柏的药理作用，认为其在降血糖作用、对肠管的影响、降血压作用、抗菌、抗炎、解热作用、抗癌作用、对免疫系统作用、抗溃疡作用、抗氧化作用、抗痛风作用、前列腺渗透作用、抗病毒作用等多方面具有良好的功效，有着良好的开发前景。 关键词：黄柏；药理作用 黄柏为芸香科植物黄檗或黄皮树的干燥树皮，可分为关黄柏和川黄柏两大类，生于深山、河边、溪旁及树林中，主要分布于东北三省及河北、内蒙古、四川、云南、贵州、湖北、广西等地，山东、甘肃、浙江也有生产。黄柏味苦、性寒，归肾、膀胱经。能清热燥湿，泻火解毒，消肿祛腐。临床上用于治疗湿热泻痢、黄疸、带下、热淋、痔漏、盗汗、遗精、骨蒸劳热、风疹瘙痒及疮疡后，伤口感染属阳证者［1］。随着近年来对黄柏研究的深入，又发现了黄柏在其他方面的作用。现就黄柏近年来的药理作用研究作一综述。 1 降血糖作用 黄柏皮中含小檗碱，有明显的降血糖作用。kim sungjin 等［2］研究了黄柏提取物（p55a）对erk2及pi3激活性及对糖原合成的影响，结果：（p55a）的丁醇提取物可是细胞irs1及pi3激酶活性及对糖原合成的影响，结果：（p55a）的丁醇提取物对细胞核及细胞质中的erk2活性皆有刺激作用，而水提物则无上述作用，且hepg2细胞经与（p55a）的丁醇提取物（10 μg/ml）培养1 h后，可使糖原的含量比对照组增加1.8倍。说明（p55a）的丁醇提取物通过激活erk2及pi3-激酶，促进肝糖原合成，调节血糖浓度。 2 对肠管的影响［1］ 对家兔的肠管作离体后实验发现肠管张力及振幅均增强、松弛、收缩增强，这分别为黄柏的化学成分黄柏酮、柠檬苦素、小檗碱作用的结果。 3 对血压的影响 王德全等［3］报道，黄柏胶囊中的小檗碱用于犬的静脉注射后，血压显著降低，且不产生快速耐受现象，降压作用可持续2 h以上。黄柏的水浸出液有降低麻醉动物血压的作用［1］。 4 抗菌、抗炎、解热作用 赵鲁青等［4］取50%复方黄柏冷敷剂水溶液用葡萄糖肉汤培养基稀释成4种浓度后，接种金色葡萄球菌、白色葡萄球菌等多种菌液，确定最低抑菌浓度为0.031 g/ml。小鼠耳肿胀实验结果为6%和12%的复方黄柏和冷敷剂由二甲苯所致的鼠肿胀有明显的抗炎作用。大鼠皮内色素渗出实验结果声明：6%和12%的复方黄柏冷敷剂水溶液外敷在白鼠皮肤，有明显渗出作用。取健康豚鼠做化腐生肌发现，复方黄柏冷敷剂对金色葡萄球菌感染的破损皮肤，有明显的抗菌、抗炎作用，并经兔眼结膜实验和小鼠肌肉注射实验，未发现局部刺激作用。南云生等［5］对黄柏及其6种不同温度、辅料炒制品的水煎液，对黄柏各种样品水煎液对金黄色葡萄球菌、甲链型球菌等5种细菌的抑菌作用比较，得出结果：对不同菌种，最低抑菌浓度不同，各样品的抑菌强度对不同菌种无规律性变化。考察巴豆油所致小鼠耳壳肿胀影响及醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高影响进行急性抗炎实验，发现生品的抗炎作用最强。对于酵母所致的大鼠体温升高的作用可看出黄柏及其炮制品的清热作用较弱且缓慢。李仲兴等［6］应用 muellerhinton琼脂稀释法进行黄柏对112株金葡菌及112株表皮葡萄球菌的体外抗菌活性检测，结果表明改进的方法可以提高黄柏对葡萄球菌的抗菌效果，黄柏对金葡萄用的mic90和mic50分别为7.8(1∶20)和0.244 mg/ml（1∶640），对表皮葡萄球菌的mic90和mic50分别为7.8(1∶20)和0.122 mg/ml（1∶1280）。郭志坚等［7］的抑菌实验表明，黄柏叶的3种黄酮苷化合物黄柏甙a、b和山奈酚3oad甘露糖对金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌及枯草杆菌有抑菌作用，尤其对枯草杆菌的抑菌作用最强，最低抑菌质量浓度为0.12 mg/l，无抑菌作用。产美英等［8］选用16种抗感染中草药，对阴道加德纳菌以管碟法进行体外抑菌实验，结果表明阴道加德纳菌对黄柏中度敏感。桧垣修一等［9］应用气相色谱
黄连黄芩黄柏三位中药的 区别及作用 The document was prepared on January 2, 2021
黄连黄芩黄柏三位中药的区别及作用 黄芩善于治疗肺热咳嗽、高热惊风、吐血鼻衄、头痛鼻渊等症、如配知母、桑白皮、荷叶、银花、连翘、桔梗、桔仁等治疗肺热咳嗽痰多等症。配生石膏、山栀子、大黄、生地等治疗鼻衄、血热斑疹等症，配苍耳子、知母、木笔花、桑白皮、赤芍等治疗鼻窦炎等。与夏枯草、双钩藤、菊花等配伍，可以治疗肝炎上炎引起的眼花、目赤肿痛、心烦头晕等症。 黄连在临床上常用对湿热泄泻、高热神昏、吐血、衄血、心下痞满、胃火炽盛、牙龈肿痛、口舌生疮等病症的治疗。如治疗胃肠实热、胃火炽盛引起的胃内嘈杂、牙龈肿痛、胃脘作痛、口舌生疮时，常与连翘、厚朴、枳实、栀子配伍。治疗肝火旺所至的肋胁胀痛、口苦泛酸时常与吴茱萸配伍。治疗心火亢盛引起的胸闷、心痛、夜不能寝时，又常常与瓜蒌、半夏等药物配伍。现代医学研究证明，黄连中含有黄连碱、掌叶防己碱、甲基黄连碱、木兰碱等物质，对葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、痢疾球菌、霍乱弧菌等都有较强的抗菌作用。因此，黄连还是一种很好的抗菌消炎药。 黄柏是黄柏树的内皮，临床上主要用于对湿热下注、淋病、痢疾、尿浊带下、骨蒸劳热梦遗等病的病症的治疗，如治疗痢疾时常与木香、黄连，马齿苋、白头翁、秦皮等配伍、治疗湿热下注时所至的泌尿感染。常与栀子、大黄、龙胆草、木通、瞿麦、当归等配伍。治疗血尿时又常与小蓟、地榆、白茅根等配伍。治疗妇女带下、常与车前子、芡实、苍术等配伍。 黄芩、黄连和黄柏虽然都属清热降火药，但黄芩偏于清上焦火，黄连偏于清中焦火，而黄柏则偏于清下焦火。根据其各自的特点，临床上遇有心炎、肺火时常先黄芩，遇有胃炎时常选黄连，遇有大肠及膀胱湿热火盛时可选黄柏治疗。 摘自----------《中药基础学》