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血管紧张素转化酶是什么
导语：我们大家都知道酶，酶在我们的生活中十分常见，而且它的作用也很大。现在很多工业或者农业都需要用到一些酶，因为酶有催化作用，能为很多事
我们大家都知道酶，酶在我们的生活中十分常见，而且它的作用也很大。现在很多工业或者农业都需要用到一些酶，因为酶有催化作用，能为很多事物提供方便。那么最近一种酶是血管紧张素转化酶，这种酶是用来干什么的呢？主要功能有以下两个：
催化血管紧张素I转化为血管紧张素II;
使缓激肽失活。
血管紧张素转化酶抑制剂因这两种功能而成为治疗高血压、心力衰竭、糖尿病合并高血压等疾病的理想靶点。血管紧张素转化酶抑制剂能减少血管紧张素II的生成，并增加缓激肽的活性。
作用机制：1.抑制血浆RAS，2.抑制激肽酶2，使激肽酶的降解作用受抑制而延长并增强了缓激肽的舒血管作用。此外，缓激肽还能增加前列腺素的合成，进一步降低周围血管阻力，降低血压，减轻心脏的后负荷。3.抑制局部组织中的ACE活性。
4.减低交感神经兴奋性及去甲肾上腺素的释放，
5.减少醛固酮的释放，减少水钠潴留，减轻前负荷。
6.降低抗利尿素的水平，ACEI降压稳定，安全，大部分病人均可耐受，且适用同时患有心力衰竭、糖尿病、与轻中度肾功能不全的病人，已证明能减少充血性心力衰竭及心肌梗塞后心排血指数降低者的并发症和死亡率。ACEI并可逆转或减轻左室肥厚与血管重构，抑制糖尿病肾病和中度肾功能不全者的病情恶化。不良反应，主要干咳机制可能与缓激肽聚集有关。其他如皮疹、消化道反应、头昏、白细胞减少及血管神经性水肿。禁用于肾动脉狭窄。孕妇以及对之过敏者。
血管紧张素2受体拮抗剂：RAS调节血压通过AT2发挥作用，。而后者则可与组织细胞膜上受体结合，AT2分两型，1型受体分布于血管组织，肾小球为主，2型受体在肾小球囊等组织中占优势，AT2受体拮抗剂能选择性的拮抗AT2与受体结合，从而在受体水平阻断RAS，引起血压降低，AT2的1型受体的拮抗剂有科素亚，和代文。科素亚：具有较强的降压作用，。对特异的AT2结合部位具有高度亲和力与选择性，对缓激肽无影响。对心率和心房压无影响，且可治疗心力衰竭。
由上文可见，血管紧张素转化酶也是一种多功能的酶，它不仅能用于生活中，而且还主要用于医药业，能帮助很多需要被治疗的患者提供方便以及营养，还可以帮助病人摆脱病毒的困扰。所以血管紧张素转化酶是一种很强大的酶。
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血管紧张素转换酶抑制剂 （ACEI） 【适应症】 ⑴各期慢性高血压，尤其是合并冠心病、糖尿病、心功能不全、肾功能不全与蛋白尿的高血压患者。 ⑵慢性充血性心力衰竭、无症状性心功能不全患者可改善症状、缩小心脏、延长生命。 ⑶急性心肌梗死特别是合并心功能不全的患者，可改善心肌重构、预防心肌梗死复发、改善生存率。 ⑷慢性肾病合并蛋白尿者，可延缓肾功能不全进展，减轻蛋白尿。 ⑸主动脉关闭不全的患者可降低心脏后负荷，延缓心力衰竭的发生。 ⑹肺动脉高压的患者，可降低肺动脉压力。 ⑺对确诊冠心病或心脑血管疾病的高危患者，长期使用ACEI可减少各种心脑血管事件的发生率与死亡率。 【禁忌症】 ⑴严重双侧肾动脉狭窄：可使肾血流急剧下降，导致急性肾衰竭。 ⑵严重主动脉狭窄。 ⑶肥厚型或限制型心肌病。 ⑷严重颈动脉狭窄。 ⑸缩窄性心包炎。 ⑹严重肾功能不全，可诱发急性肾功能不全与高钾血症。 ⑺严重贫血。
⑻中性粒细胞减少症，可诱发骨髓抑制。⑼妊娠、哺乳妇女严禁使用。 ⑽高尿酸性肾结石。 【副作用】 ⑴低血压。 ⑵肾功能衰竭。 ⑶高钾血症。 ⑷干咳。 ⑸味觉减退，口腔溃疡。 ⑹血管神经性水肿：罕见，易出现在用药的早期，部分患者可有先兆表现即眼睑水肿或面部单侧或双侧水肿，一旦出现立即停药。 ⑺发疹。 ⑻蛋白尿，多见于大量使用卡托普利后。 ⑼中性粒细胞减少或缺乏症。 ⑽轻度呼吸困难和（或）哮喘。 ⑾其他：偶有头痛、眩晕、疲乏、恶心、脱发、急性胰腺炎、抗核抗体阳性等。 【血管紧张素转换酶抑制剂代表药物】 1.卡托普利（Captopril,开博通） 【药理与机制】 ①能竞争性抑制血管紧张素转换酶，减少血管紧张素Ⅱ的生成，从而抑制血管收缩，并减少醛固酮的分泌、水钠潴留作用减轻。交感神经系统活性受抑制、心血管重构改善
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 血管紧张素转化酶是什么 导语：我们大家都知道酶，酶在我们的生活中十分常见，而且它的作用也很大。现在很多工业或者农业都需要用到一些酶，因为酶有催化作用，能为很多事 我们大家都知道酶，酶在我们的生活中十分常见，而且它的作用也很大。现在很多工业或者农业都需要用到一些酶，因为酶有催化作用，能为很多事物提供方便。那么最近一种酶是血管紧张素转化酶，这种酶是用来干什么的呢？主要功能有以下两个： 催化血管紧张素I转化为血管紧张素II; 使缓激肽失活。 血管紧张素转化酶抑制剂因这两种功能而成为治疗高血压、心力衰竭、糖尿病合并高血压等疾病的理想靶点。血管紧张素转化酶抑制剂能减少血管紧张素II的生成，并增加缓激肽的活性。 作用机制：1.抑制血浆RAS，2.抑制激肽酶2，使激肽酶的降解作用受抑制而延长并增强了缓激肽的舒血管作用。此外，缓激肽还能增加前列腺素的合成，进一步降低周围血管阻力，降低血压，减轻心脏的后负荷。3.抑制局部组织中的ACE活性。 4.减低交感神经兴奋性及去甲肾上腺素的释放， 5.减少醛固酮的释放，减少水钠潴留，减轻前负荷。 6.降低抗利尿素的水平，ACEI降压稳定，安全，大部分病人均可耐受，且适用同时患有心力衰竭、糖尿病、与轻中度肾功能不全的病人，已证明能减少充血性心力衰竭及心肌梗塞后心排血指数降低者的并发症和死亡率。ACEI并可逆转或减轻左室肥厚与血管重构，抑制糖尿病肾病和中度肾功能不全者的病情恶化。不良反应，主要干咳机制可能与缓激肽聚集有关。其他如皮疹、消化道反应、头昏、白细胞减少及血管神经性水肿。禁用于肾动脉狭窄。孕妇以及对之过敏者。 血管紧张素2受体拮抗剂：RAS调节血压通过AT2发挥作用，。而后者则可与组织细胞膜上受体结合，AT2分两型，1型受体分布于血管组织，肾小球为主，2型受体在肾小球囊等组织中占优势，AT2受体拮抗剂能选择性的拮抗AT2与受体结合，从而在受体水平阻断RAS，引起血压降低，AT2的1型受体的拮抗剂有科素亚，和代文。科素亚：具有较强的降压作用，。对特异的AT2结合部位具有高度亲和力与选择性，对缓激肽无影响。对心率和心房压无影响，且可治疗心力衰竭。 由上文可见，血管紧张素转化酶也是一种多功能的酶，它不仅能用于生活中，而且还主要用于医药业，能帮助很多需要被治疗的患者提供方便以及营养，还可以帮助病人摆脱病毒的困扰。所以血管紧张素转化酶是一种很强大的酶。 生活知识分享
高等植物中维生素C合成及其相关酶研究进展1 尚增振，马锋旺*，李威 西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌（712100） E-mail：fwm64@https://www.doczj.com/doc/1412409941.html, 摘要：维生素C即抗坏血酸（AsA），是一种重要的抗氧化物质，在植物和动物的代谢方面发挥着重要作用。自1998年拟南芥AsA缺乏突变体VTC1的鉴定和L-半乳糖途径的提出，高等植物中AsA代谢研究发展较快。合成相关新基因的鉴定与克隆，检测到其他的合成途径，表达动物AsA合成基因后，不可预知的生物表型观察等表明植物AsA合成的复杂性。本文根据相关文献对植物中维生素C的合成途径和相关酶基因的研究进行了综述。 关键词：高等植物，维生素C，生物合成途径，合成相关酶 维生素C（Vc）,又称抗坏血酸（ascorbic acid, AsA），是普遍存在于植物组织中的高丰度小分子抗氧化物质。某些动物如人类由于缺乏其合成关键酶L-古洛糖内酯氧化酶不能自身合成维生素C，并且其在人体内不能长久贮存，只能不断从食物中获取AsA，而作为主要Vc 来源的水果和蔬菜其AsA水平差异较大。因此AsA 含量已成为衡量农产品品质的重要指标。此外，植物中的AsA 还在抗氧化和清除自由基、光合作用和光保护、细胞的生长和分裂以及参与某些次生代谢物和乙烯的合成等诸多方面起着非常重要的生理功能。同时有关AsA生物合成和调控的研究也取得重要进展。本文综述了近来年人们在AsA生物合成及其相关酶方面的研究进展。 1．植物AsA合成途径 1.1 与动物合成途径类似的古洛糖途径 Isherwood 等[2]最早提出的类似于动物合成途径的高等植物AsA生物合成途径，该途径认为植物由D-半乳糖经D-半乳糖醛酸和L-半乳糖内酯(L-GalL)等重要中间物质最终形成AsA，其间发生了类似动物的碳链倒位。支持该途径的证据为在植物体内确实存在天然 L-GalL并可通过半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH)氧化生成AsA，同时D-半乳糖醛酸(甲酯)也可作为AsA合成的底物。但随后的同位素放射性示踪证明植物合成AsA的过程并未发生碳链的倒位[3]。虽然有证据显示L-GalL是植物合成AsA的底物，但D-半乳糖醛酸并不是植物合成AsA 的主要物质[10,12]。 1.2 邻酮醛糖途径 为符合同位素放射性示踪实验结果，Loewus等[28]提出的一条非倒位途径即临酮醛糖途径。在该途径中D-葡萄糖首先在C-2位上被氧化生成D-葡萄糖醛酮然后在C-5位经表异构酶催化形成L-山梨糖醛酮，并进一步在山梨糖醛酮脱氢酶作用下被氧化为AsA。此途径虽然没有碳骨架的倒位，但至今还没有明确的实验证据支持这一途径[29]。因为尚未发现催化前两步反应的酶。Conklin 等[30]对拟南芥AsA缺乏的突变体vtc1的研究表明增加D-葡萄糖醛酮和L-山梨糖醛酮并不能导致AsA的积累。L-山梨糖醛酮也未能明显增加拟南芥悬浮细胞内源AsA含量. Saito et al 利用14C标记实验发现，前体培养的24h后，D-(14C)-葡糖醛酮有4.1%的转化成AsA；D-(14C)-葡萄糖有0.6 %转化成AsA，而且没标记的D-葡糖醛酮抑制了D-(14C)- 1本课题得到西北农林科技大学“拔尖人才支持计划”和西北农林科技大学国家生命科学与技术人才培养基地科技创新基金的资助。
血管紧张素转换酶抑制剂治疗高血压分析 本文主要探讨血管紧张素转换酶（ACEI）的药物特征、作用机制、药物的选择、联合用药、不良反应以及存在的问题，为临床治疗高血压提供参考。 标签：高血压；血管紧张素转换酶 高血压患病率极高，还会带有一系列并发症，例如脑卒中、心力衰竭、冠心病以及肾病之类，属于一种全球性的常见病。针对高血压的治疗主要是口服药物，而根据实践证明，血管紧张素转换酶（ACEI）可以有效的抑制高血压，且安全性高，能够使高血压患者的少数病理逆转，更好的降低高血压病患者心脑血管的疾病的发生率以及病死率[1]。ACEI现今已经成为心血管药物中的里程碑[2]，极大地防止了高血压靶器官损害，降低心脑及肾之类的血管并发症。笔者对ACEI 治疗高血压作简单的介绍。 1 药物特征 分析得知，大多数血管紧张素转换酶属于脯氨酸的衍生物，它们均是内含氮环的环戊烷，ACEI的分子中的功能基团能够和ACE分子内的锌相结合，有效地抑制ACE的活性。针对ACEI功能基团的不同，可以将它分成含巯基、磷酰基以及羧基这3类，各种药物的特征见表1。 2 作用机制 2.1 AngⅡ 血管紧张素-醛固酮系统（RASS）在人体内的血压调节系统中意义重大，Ang Ⅱ数量的增加主要就是由ACE这种酶引起的。人体组织内AngⅡ的来源主要可看成以下几种：（1）在循环AngⅡ内摄取；（2）局部组织的自分泌、旁分泌以及胞内分泌作用，在这三种作用内一后者的作用最为重要。通过观察循环RASS被阻滞的现象可以了解ACEI早期的降压作用的体现，当出现持续的降压现象时，局部的RASS必然被阻滞。 AngⅡ能够刺激醛固酮进行分泌，直接收缩血管平滑肌，它能够很好地促进肾脏保纳排钾，升高血压以及增加钠水潴留。最新的研究表明，局部的组织例如血管内皮细胞之类可以和AngⅡ一样合成醛固酮，醛固酮对于高血压的抑制作用无可厚非。除此之外，醛固酮还能导致心肌纤维化和心血管的重构，从而引起并发症。ACEI能够有效地控制醛固酮的含量，更好的治疗高血压。 2.2 激肽 降低激肽酶灭活效果：血压调节系统包括血管的舒缓素-激肽系统以及缓激肽。缓激肽能够促进PGI2以及PCE2，还能促进细胞通过释放NO来扩张血管。
血管紧素转换酶抑制剂 和血管紧素受体阻断剂如何选用友祥秀凤阜宁县中医院阜宁 224400 肾素-血管紧素-醛固酮系统（RAS）是机体最为复杂的循环和局部神经-分泌-体液调节系统。RAS功能的正常发挥不仅在心血管疾病的发生、发展和转归中起着重要作用，在肿瘤、炎症、免疫、代、发育、衰老等体绝大多数生理功能和疾病发病机制方面均发挥着重要作用。 1.RAS组成： 肾素由肾小球旁细胞分泌，主要作用是将由肝脏合成的血管紧素原水解成血管紧素I（Ang I），Ang I在肺、肾脏等组织中经血管紧素转换酶（ACE）作用后生成血管紧素II（Ang II），Ang II作用于血管平滑肌的血管紧素受体，可使全身的微动脉收缩，血压升高。此Ang II是体最强的缩血管物质之一，在整个系统功能的发挥中起到头等重要的作用。Ang II还作用于交感神经末梢的血管紧素受体，使交感神经末梢释放去甲肾上腺素增多，进一步升高动脉血压。Ang II还可以强烈刺激肾上腺皮质球状带细胞合成和释放醛固酮，后者可促进肾小管对钠重吸收，并使细胞外液量增加，升高血压。 有专家将Ang II描述成RAS中最为关键的效应分子，因为在这一系统中，从血管紧素原到Ang II的分子变迁过程是一个多级、连续的反应链。这其中有生物活性的除了Ang II外，还包括Ang Ⅲ、Ang Ⅳ、Ang （1-7）、Ang （1-9）等，而Ang II无疑是其中最活跃、作用强度最大的分子。ACE不仅催化Ang I 生成Ang II，还同时使Ang （1-7）及缓激肽降解，目前的研究发现Ang （1-7）及缓激肽具有心血管保护作用。有生物活性的血管紧素与功能各异的不同受体结
转化酶研究进展 摘要转化酶是生物体内糖代谢的关键酶,综述了转化酶多态性及其活性表达调控、转化酶基因等方面的研究;用分子生物学手段研究了转化酶基因对植物糖分积累的直接作用;研究了逆境下转化酶多态性表达及生理调节、调控。 关键词转化酶;多态性;糖代谢;基因;活性 ResearchAdvanceonPlantInvertase GAO Yun (Pingliang Medical College,Pingliang Gansu 744000) AbstractInvertase plays an important role during the sugar metabolism in higher plant. The varieties,distribution,invertase expression,gene expression of the invertase in higher plant were introduced in this paper. The research on the direct function about invertase gene to plant sugar accumulation by molecule biology means and the research on invertase expression,physiological regulation under adversity stress were summarized. Key wordsinvertase;polymorphism;sugar metabolism;gene;activity 转化酶(invertase),又称蔗糖酶或β-D-呋喃果糖苷酶,是生物体内糖代谢的关键酶,在蔗糖代谢中催化如下反应:蔗糖+H2O→果糖+葡萄糖。由于糖代谢是生物体内物质代谢的中心,蔗糖是高等植物光合作用的主要产物,是碳运输、“库代谢”、糖积累、果实品质形成中的重要因子,还是细胞代谢的调节因子,可能通过影响基因表达发挥作用。因此,与蔗糖代谢和积累密切相关的转化酶是近年来生理生化、生理生态及分子生物学研究的热点之一。 1转化酶的多态性及在蔗糖代谢中的作用 转化酶是高度多态的,包括酸性转化酶(Acid Invertase,AI)、中性转化酶(Neutral Invertase,NI)和碱性转化酶。许多报道将中性转化酶和碱性转化酶看作同一种转化酶。酸性转化酶主要存在于液泡或束缚于细胞壁上,其最适pH值在3.0~5.0;中性和碱性酶位于细胞质中,最适pH值在7.0左右。报道的转化酶的分子量大小为50~80 kD,为单体或二聚体。生殖器官中均有液泡转化酶表达。栽培番茄、野生番茄及转基因番茄研究表明,在果实成熟后期,液泡转化酶的表达与否决定着果实可溶性糖的组分[1]。原位杂交研究表明,胞壁转化酶可能存在于维管束
? 血管紧张素转化酶及其活性检测研究进展 林琳1，周存山2，杨虎清2，王允祥2 （1.江苏大学食品与生物工程学院，江苏镇江 212013；2.浙江林学院农业与食品科学学院，浙江临安 311300） 摘要：血管紧张素转化酶（ACE）是一种哺乳动物组织中普遍存在的，含锌离子的膜结合外肽酶（羧基端二肽），催化血管紧张素Ⅰ水解生成具有血管收缩作用的血管紧张素Ⅱ或水解具有血管收缩功能的缓激肽生成苯丙-精二肽，是高血压、心肌梗死、心力衰竭等治疗药物筛选中的关键酶。本文对ACE的来源分布、化学结构、酶学特性及其检测应用进行综述。关键词：血管紧张素转化酶；化学结构；酶学特性；活性检测 中图分类号：R284, Q939 文献标识码：A 文章编号： Research progress angiotensin-converting enzyme and its activity detection LIN Lin1, ZHOU Cun-shan2, YANG Hu-qing2, WANG Yun-xiang2 (1. School of Food and Bioengineering; Jiangsu University，Zhenjiang 212013, China; 2. School of Agriculture and Food Science, Zhejiang Forestry University, Lin’an 311300, China) Abstract: Angiotensin converting enzyme is zinc dependent, membrane bond, universal existence in mammal tissues, it can catalyze the conversion of the decapeptide angiotensin Ⅰto the potent vasopressor ocatapeptide angiotensin Ⅱ, with cleaving two C-terminal amino acids, and it can hydrolyze Bradykinin with vasoconstrictive activity to Phe-Arg. It’s the key enzyme in identification and therapeutic drug selection of hypertension, myocardial infarction, heart failure. The origin, distribution and current status in study on chemical structure, enzymatic characteristics and its activity detection were reviewed here. Key words: angiotensin-converting enzyme, chemical structure, enzymatic characteristics, activity detection 血管紧张素转化酶（Angiotensin-Converting Enzyme, ACE, EC 3.4.15.1，系统命名为肽酰二肽水解酶，是一种哺乳动物组织中普遍存在的，含锌离子的膜结合外肽酶（羧基端二肽），催化血管紧张素Ⅰ水解生成具有血管收缩作用的血管紧张素Ⅱ或水解具有血管收缩功能的缓激肽生成苯丙-精二肽，在食品和药品行业广泛使用[1]。自1898年发现肾素以来，有关肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system, RAS或renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS，见图1）和激肽释放酶-激肽系统（Kallikrein-Kinin System, KKS，见图1）的研究已 ?收稿日期： 基金项目：浙江省科技厅资助项目（2007F70044，2008C32028）；浙江林学院人才启动基金（2351000762）作者简介：林琳（1978-），男，江苏扬州人，博士，讲师，主要从事食品生物技术研究。Email：lin780530@https://www.doczj.com/doc/1412409941.html, 通讯作者：周存山（1979-），男，江苏兴化人，博士，副教授。Email：zhoucs@https://www.doczj.com/doc/1412409941.html,
血管紧张素转化酶测定试剂盒(FAPGG底物法) 适用范围：用于体外定量测定人血清中血管紧张素转化酶的活性。 1.1规格 试剂盒是由试剂组成的液体单试剂,校准品质控品均为冻干粉。规格及装量见表1。 表1 规格及装 量 1.2主要组成成分 试剂主要组分： 校准品主要组分：
质控品主要组分： 2.1 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂为无色或淡黄色透明溶液。校准品为白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体；质控品为白色至浅黄色冻干粉，复溶后为无色至浅黄色透明液体。外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在340nm处测定试剂空白吸光度，应≤1.8。 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.8。 2.4 分析灵敏度 测试30U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0015。 2.5 准确度 参照EP9-A2的方法，用比对试剂盒同时测试40例线性区间内的不同浓度的血清样本，其相关系数（r）不小于0.990；每个浓度点在[1，18）U/L区间内绝对偏差不超过±2.16U/L；[18，150]U/L区间内相对偏差不超过±12%。
2.6 重复性 批内变异系数（CV）应不超过10％。 2.7 线性 2.7.1在[1，150]U/L区间内，线性相关系数r应不低于0.990； 2.7.2 [1，18）U/L区间内绝对偏差不超过±2.16U/L；[18，150]U/L区间内相对偏差不超过±12%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定，相对极差不大于12％。 2.9校准品批内瓶间差 变异系数（CV）应≤10%。 2.10质控品批内瓶间差 变异系数（CV）应≤10%。 2.11溯源性 根据GB/T 21415-2008的规定，本试剂盒内校准品溯源至企业工作校准品，与已上市公司试剂盒进行比对赋值。 2.12质控品赋值有效性 质控品测值应在靶值范围内。 2.13 稳定性 2.1 3.1效期稳定性 原包装试剂盒在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.12之规定。 2.1 3.2复溶稳定性
植物体内转化酶活性的测定 转化酶又称蔗糖酶(β—D—呋喃型果糖苷一果糖水解酶)，是一种水解酶。植物体的库组织中，一般含有较高活性的转化酶。它能将植物体内的主要同化产物——蔗糖不可逆地水解为葡萄糖和果糖，为细胞的可溶性糖类贮库提供可利用六碳糖，以用于细胞壁、贮藏多糖及果聚糖的生物合成，并通过与呼吸作用偶联的氧化磷酸化产生能量。所以，转化酶与植物组织的生长有密切关系，是衡量同化产物的转化和利用，植物细胞代谢及生长强度的指标。 【原理】 转化酶可将非还原性糖的蔗糖水解为葡萄糖和果糖。将从植物组织中提取的酶液与蔗糖溶液保温作用一定时间后，测定产生的还原糖的量来表示转化酶活性的大小。 在碱性条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质)，还原糖则被氧化成糖酸及其它产物。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度量呈一定的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的消光值，查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量。 通常，在测定过程中，溶液的pH对酶活性影响很大。不同的酶及不同材料中同一种酶都有其最适的pH值。转化酶有两个影响水解蔗糖能力的解离基团，一个PKa约为7，另一个PKa约为3。不同植物材料的转化酶中这两个基团的含量不同，它们的最适pH也不同(最适pH在7.0左右的为中性转化酶，最适pH 在7.0以下的为酸性转化酶)。所以，在测定材料中转化酶的活性之前，首先要选择适宜的PH值。 【材料、仪器与试剂】 1．材料：植物组织 2．试剂： （1）提取缓冲液：100 mmol/L Tris-HCl (PH7.0) 缓冲液，内含5 mmol/L MgCl 2 , 2 mmol/L EDTA-Na 2 ,2% 乙二醇，0.2%牛血清蛋白（BSA），2%PVP，5 mmol/LDTT 。 （2）透析缓冲液：25 mmol/L Tris-HCl (PH7.0) 缓冲液，内含2.5 mmol/L MgCl 2 , 1 mmol/L EDTA-Na 2 ,1% 乙二醇，1 mmol/L DTT。 （3）酶反应液：80 mmol/L乙酸-K 3PO 4 (pH4.7和pH7.0)缓冲液，内含50 mmol/L 蔗糖。 （4）葡萄糖标准液：1 mg/mL。 （5）3，5-二硝基水杨酸试剂：精确秤取1g 3，5-二硝基水杨酸，溶于20 ml 2 mol/L NaOH溶液中，加入50 ml蒸馏水，再加入30 g酒石酸钠，待溶解后用蒸馏水定容至100 ml。盖紧瓶塞，勿让CO 2 进入。若有浑浊可过滤后使用。 材料：小麦叶片、籽粒。 3．设备 冷冻离心机，恒温水浴，分光光度计，研钵一套，磁力搅拌器，天平（感量0.01mg），1 mL 移液管5支，5 mL带塞试管10支。 【方法与步骤】 1．酶的提取：称取1g植物叶片，置于预冷的研钵中，分批加入5ml 提取缓冲液，冰浴研磨提取，2度下10000转离心20分钟，上清液3ml 装入透析袋中，透析袋置于透析缓冲
血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)通过抑制血管紧张素n生成、阻断肾素一血管紧张素·醛固酮系统作用，及抑制缓激肤降解、增强缓激肚效应，而广泛应用于肾脏病治疗。为了更合理、安全地应用这类药物，全国部分肾病专家于2004年4月24日在北京进行了专题研讨，对《血管紧张素转换酶抑制剂在肾脏病中正确应用的专家建议》进行了第2次修订，经充分讨论，会议达成如下共识。 一、适应证 1.降低系统高血压:持续性高血压促进肾损害进展，引起严重心、脑血管并发症。对肾脏病患者合并的高血压(包括原发性高血压及肾实质性高血压)应积极治疗，并力争达标。尿蛋白<1 g/d时，血压应降达130/80 mmHg(平均动脉压97 mmHg );尿蛋白>1 g/d时，血压应降达125/75 mmHg(平均动脉压92 mmHg )，其中收缩压治疗达标尤其重要。此时，ACEI(或血管紧张素11受体拮抗剂，ARB)应为首选降压药。 2.减少尿蛋白排泄:蛋白尿、尤其大量蛋白尿有不少危害，并能促进肾损害进展，应积极治疗。ACEI能通过多种机制如改善肾小球内高压、高灌注及高滤过，及改善肾小球滤过膜选择通透性而减少尿蛋白排泄。蛋白尿较重时ACEI降尿蛋白效果往往更显著，应尽量将尿蛋白减少至正常或最低水平。 3.延缓肾损害进展:ACEI除能通过上述作用保护肾脏外，还能通过减少肾脏细胞外基质蓄积(减少产生，促进降解)，拮抗肾小球硬化及肾间质纤维化而延缓肾损害进展。 ACEI针对上述第2,3适应症发挥的疗效，部分为非血压依赖性效应，因此，这两个适应症对无高血压的肾脏病患者也适用。 糖尿病患者(包括1型及2型)应从尿白蛋白排泄率增高开始即应用ACEI 上述各适应症疗效已被许多临床循证医学试验验证。 二、使用方法 ACEI类药均需从低剂量开始应用，然后逐渐加量至起效，老年人尤应如此，避免降血压过度。 1.降低高血压:若非血压极高需迅速降压，一般宜首选长效ACEI治疗。 为了有效降压，ACEI常需与其它降压药物配伍应用，一般常需3种或更多种降压药联合应用才能有效控制血压。联合用药常首选用小剂量利尿剂(肌醉清除率>25ml/min时可用唆嗦类利尿药，<25 ml/min时用拌利尿剂，排钠利尿可提高AC降压疗效，但必须小量使用，勿导致脱水)。若降压效果不满意，可再加钙通道阻滞剂(包括双氢毗陡及非双氢毗r}类)、p受体阻断剂或a及p受体阻断剂(心率慢者不用)，以及其它种类降压药。血管紧张素n受体拮抗剂也可与ACEI联合应用。 用ACEI降血压时，需限制食盐人量。 2.减少尿蛋白及延缓肾损害进展:为有效减少尿蛋白排泄及延缓肾损害进展，ACEI常需较大剂量(比降血压 所需用量大)，或联合应用血管紧张素11受体拮抗剂，且 用药时间要久(常需数年)，同时应限制饮食中蛋白质及 盐摄人量。 三、副作用 1.咳嗽:此可能与激肤酶被抑制相关，血中缓激肚、前列腺素及P物质浓度增高引发咳嗽。严重者应停ACEI，改用血管紧张素11受体拮抗剂。 2.血清肌醉增高:用药头两个月血清肌醉( Scr)可轻度上升(升幅<30% )，为正常反应，勿停药;但是，如果用药过程中Sc:上升过高(升幅>30%.-50% )，则为异常反应，提示肾缺血。出现后一情况时应停用ACEI，并努力寻找肾缺血病因设法解除，假若肾缺血能被纠正且Scr恢复正常，则可再用ACEI，否则，不宜再用。
血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI） 【适应症】 ⑴各期慢性高血压，尤其是合并冠心病、糖尿病、心功能不全、肾功能不全与蛋白尿的高血压患者。 ⑵慢性充血性心力衰竭、无症状性心功能不全患者可改善症状、缩小心脏、延长生命。 ⑶急性心肌梗死特别是合并心功能不全的患者，可改善心肌重构、预防心肌梗死复发、改善生存率。 ⑷慢性肾病合并蛋白尿者，可延缓肾功能不全进展，减轻蛋白尿。 ⑸主动脉关闭不全的患者可降低心脏后负荷，延缓心力衰竭的发生。 ⑹肺动脉高压的患者，可降低肺动脉压力。 ⑺对确诊冠心病或心脑血管疾病的高危患者，长期使用ACEI可减少各种心脑血管事件的发生率与死亡率。 【禁忌症】 ⑴严重双侧肾动脉狭窄：可使肾血流急剧下降，导致急性肾衰竭。 ⑵严重主动脉狭窄。 ⑶肥厚型或限制型心肌病。 ⑷严重颈动脉狭窄。 ⑸缩窄性心包炎。 ⑹严重肾功能不全，可诱发急性肾功能不全与高钾血症。 ⑺严重贫血。 ⑻中性粒细胞减少症，可诱发骨髓抑制。
⑼妊娠、哺乳妇女严禁使用。 ⑽高尿酸性肾结石。 【副作用】 ⑴低血压。 ⑵肾功能衰竭。 ⑶高钾血症。 ⑷干咳。 ⑸味觉减退，口腔溃疡。 ⑹血管神经性水肿：罕见，易出现在用药的早期，部分患者可有先兆表现即眼睑水肿或面部单侧或双侧水肿，一旦出现立即停药。 ⑺发疹。 ⑻蛋白尿，多见于大量使用卡托普利后。 ⑼中性粒细胞减少或缺乏症。 ⑽轻度呼吸困难和（或）哮喘。 ⑾其他：偶有头痛、眩晕、疲乏、恶心、脱发、急性胰腺炎、抗核抗体阳性等。 【血管紧张素转换酶抑制剂代表药物】 1.卡托普利（Captopril,开博通） 【药理与机制】 ①能竞争性抑制血管紧张素转换酶，减少血管紧张素Ⅱ的生成，从 而抑制血管收缩，并减少醛固酮的分泌、水钠潴留作用减轻。交
血管紧张素转换酶2与高血压 天津大港油田总医院芳华社区服务站张芳300280 摘要:肾素血管紧张素系统（RAS）是人体经典的循环调节系统，通过对心脏、血管、肾脏的调节维持机体水、电解质及血压的平衡，是人类生理功能的一个重要调节机制。它的过度激活是高血压和其他心血管疾病发展的重要决定因素，血管紧张素转换酶2与血管紧张素转换酶一样参与肾素2血管紧张素系统中血管紧张素的代谢。它通过将血管紧张素Ⅱ水解成血管紧张素127对抗血管紧张素转换酶2血管紧张素Ⅱ代谢轴,是平衡肾素2血管紧张素系统内部调节的另一血管紧张素代谢通路。这种系统的内部调节在调节心血管系统活动中起重要作用,其平衡的破坏与高血压等相关疾病的发生发展密切相关,通过调节血管紧张素2来治疗高血压及并发症可能是本世纪高血压治疗学上的新靶点。本世纪初发现的血管紧张素转换酶2( angiotensin2 converting enzyme 2,ACE2)就是RAS研究史的一个新事件。这个发现使人们对RAS有了更多、更深入的认识。ACE2已成为一个新的疾病标志物和药物治疗的新靶点,本文将ACE2与高血压的关系综述如下。 关键词: 血管紧张素转换酶2,血管紧张素,高血压, 1. ACE2的生物学特性 1.1ACE2的发现及其生物学功能生理状态下,RAS通过与其它系统网络间的相互作用对水、电解质以及血管收缩等作用维持机体正常的心血管功能。病理状态下,各种原因导致的RAS过分激活,尤其是血管紧张素转化酶(ACE)水解血管紧张素I( angiotensinⅠ,AngⅠ)生成血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)增多,是造成许多心血管疾病的重要原因,血管紧张素转化酶抑制( angiotensin2convertingenzymin2hibitor,ACE I)和血管紧张素Ⅱ受体I型拮抗剂在临床上的有效应用正说明了这一点,由于此两类药物的诸多优点,因此认为它们是本世纪治疗心血管疾病的一大进展。但人们对RAS的研究并没有停止不前, 2000年，DONOGHUE等[1]和TIPNIS等[2]分别从人淋巴瘤和扩张性心脏病心力衰竭病人左心室组织的cDNA文库中克隆出ACE的同源物，分别命名为ACE2和ACEH,现统称为ACE2。ACE2 是单羧基肽酶与ACE二肽酶不同,水解底物时只将肽链C端的一个氨基酸残基切下, AngⅠ和AngⅡ是其作用底物。ACE2裂解Ang Ⅰ羧基端的亮氨酸残基,生成血管紧张素129(Ang129) ,再由ACE裂解生成血管紧张素127 (Ang127) ,由于Ang129可与AngⅠ竞争ACE使AngⅡ生成减少,推测Ang129是内源性或竞争性的ACE I[3,4] ;另外,AngⅠ可以在中性肽链内切酶或脯氨酰氨基酸内切酶作用下,直接生Ang127。ACE2 还可以裂解AngⅡ羧基端的苯丙氨酸残基,直接生成Ang127。ACE2 水解Ang Ⅱ生Ang127的效率是水解AngⅠ生成Ang129的400多倍[5] 。这提示ACE2的主要生物学功能是水解AngⅡ生成Ang127。Ang127 通过其特异性受体(为Mas原癌基因编码的G蛋白耦联受体) [6]发挥生物学作用。Ang127具有舒张血管、利钠利尿、降血压、抑制细胞增殖、抗炎、抗凝、改善心脏功能、保护血管内皮、促细胞凋亡、促进伤口愈合等作用。这些研究提示ACE22Ang127轴是RAS内部ACE2AngⅡ轴的一个负性调节轴。这两个轴的相互制约、相互调节对心血管功能起重要作用,这说明机体各系统内存在自我调节功能. 1.2 ACE2分布与ACE相比，ACE2的分布具有组织特异性，ACE2 mRN主要在心脏、肾脏、睾丸表达，像ACE一样，ACE2 mRNA在内皮细胞和少量的血管平滑肌细胞中表达；在肾脏，ACE2 mRNA主要分布在肾小管内皮附近[1]。TIPNIS等[2]对15种人体组织研究发现，ACE2除了在上述组织中高表达外，在结肠、小肠和卵巢中度表达。HARMER等[7]用全定量逆转录
血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）的作用机制、分类及其临床应用 血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）通过减少血管紧张素II和缓激肽的降解，扩张血管，减少肾流量，成为重要的抗高血压药物。ACEI按照化学结构可分为含疏基的ACEI，含二羧基的ACEI，含磷酰基的ACEI。临床可用于治疗高血压、心肌梗死、慢性心力衰竭、糖尿病肾病等疾病。 关键字：血管紧张素转化酶抑制剂ACEI 作用机制分类 临床应用自1981年第一个口服有效的血管紧张素转移酶抑制剂（ACEI）卡托普利经批准临床应用以来，一系列ACEI不断问世，ACEI临床应用范围不断扩大，成为治疗高血压、CHF、急性心肌梗死以及糖尿病性肾病等疾病的主要药物。ACEI具有经济、实用、有效等特点，临床意义重大。 1 ACEI的作用机制 1.1 ACEI能有效地阻断血管紧张素I向血管紧张素II转化，减轻肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）的作用。血管紧张素转化酶（Angiotensin Converting Enzyme,ACE）是一种锌蛋白酶，是RAAS的主要部分之一。RAAS是一种复杂的、调节血流量、电解质平衡以及动脉血压所必须的高效系统，其中肾素使在肝脏产生的血管紧张素原转化成血管紧张素I（一种非活性十肽），然后，ACE催化血管紧张素I生成八肽的血管紧张素II(AII)，最后转化为能促进醛固酮分泌的血管紧张素III并灭活[1]。血管紧张素II是一种作用极强的肽类血管收缩剂并能促进去甲肾上腺素从神经末梢释放，在高血压中产生重要的作用。 1.2 ACEI能减少缓激肽的降解，使肾血流量增加。缓激肽缓激肽能引起局部血管扩张、产生疼痛、增加血管渗透性以及刺激前列腺素的合成。ACE能使缓激肽降解成非活性肽，因此ACE也称为激肽酶II。因此，血管紧张素转化酶不仅可产生有效血管收缩作用，而且还可以使血管舒张物质失活。 1.3 ACEI还有抗动脉粥样硬化作用，能使动脉斑块显著减少，抑制肌内膜增生，减少动脉表面粥样斑块的覆盖率，机制为抑制低密度脂蛋白的氧化和平滑肌细胞肥大、增生及迁移。 2 ACEI的分类按照化学组成将此类药物分为三类：含疏基的ACEI，含二羧基的ACEI和含磷酰基的ACEI。 2.1含疏基的ACEI：卡托普利为第一个上市的ACE竞争性抑制剂，是ACEI的代表药物。卡托普利的巯基使其易被氧化，并具有优良的抑制ACE活性，但同时还与两个副作用有关，即会引起皮肤发疹和味觉障碍。当卡托普利剂量减少或停药后，这些副作用通常可以消除。青霉胺也有相似的副作用，再次证实了这些副作用与巯基的存在有关。 2.2 含二羧基的ACEI：此类药物的结构特征是以羧基和锌离子螯合，虽然羧基的螯合作用不及巯基，但可克服巯基所带来的副作用。依那普利拉的活性比卡托普利强十倍，研究表明依那普利拉与锌离子螯合的能力低于卡托普利，但其结构体系有助于药物和酶的相互作用。因此是一种长效的ACEI,但其口服生物利用度低。将依那普利拉酯化后，生成依那普利，依那普利具有良好的口服生物利用度。研究表明依那普利为依那普利拉的前药。口服无效，仅供静脉注射用。能扩张高血压患者周围血管、降低血压。 2.3 含磷酰基的ACEI：非疏基的ACEI抑制剂研究也促进了含磷ACEI抑制剂的发展。福辛普利为含磷酰结构的ACEI，以磷酰基与ACE酶的锌离子结合，福辛普利在体内能经肝或肾所谓双通道代谢而排泄。对肝功能不佳者，在肾代谢，如肾功能损伤，则在肝代谢，无蓄积毒性。适用肝或肾功能不良病人适用[2]。 3 ACEI的临床应用ACEI可用于高血压、CHF、急性心肌梗死以及糖尿病性肾病等疾病，它不仅对高肾素型高血压有效，而且对各型原发性和继发性高血压也都有较好降压作用。ACEI特别特别实用适用于患有CHF、LVD或糖尿病的高血压病人。ACEI能引起动脉和静
土壤中氮素转化过程及植物吸收方式 我国耕地土壤全氮含量为 0.04～0.35％之间，且土壤有机质含量呈正相关。其氮 素来源包括：生物固氮、降水、农业灌溉和施肥等，而目前肥料是农田土壤氮肥 的主要来源。下面就从土壤中氮素的主要表现形态和转化过程等进行详细的介绍： 一) 土壤中氮素的主要形态 注明：其中无机氮包括：铵态氮(NH 4+ — N)、硝态氮(NO 3- — N)、亚硝态氮(NO 2- — N)三种主要形态。 一般情况下，土壤中存在的主要是有机态氮，占土壤总氮的 90~98%。 水溶性 速效氮源 < 全氮的 5% 包括游离氨基酸、胺盐及酰胺类化合物等 有机氮 水解性 缓效氮源 占 50～70% 包括蛋白质及肽类、核蛋白类、氨基糖类 (>98%) 非水解性 难利用 占 30～ 50% 包括杂环态氮、缩胺类 土壤溶液中 土壤胶体吸附 (1～2％) 固定态 2：1 型粘土矿物固定 离子态 无机氮 吸附态
二）土壤中氮素的转化过程 1.有机态氮的转化 土壤中的有机态氮是较复杂的有机化合物，必须要经过各种矿化过程，变为易溶的形态，才能发挥作物营养的功能。它的矿化量和矿化速率就成为决定土壤供氮能力的极其重要的因素。土壤有机氮的矿化过程是包括许多过程在内的复杂过程。 ①水解过程蛋白质在微生物分泌的蛋白质水解酶的作用下，逐步分解为各种氨基酸。 ②氨化过程氨基酸在多种微生物作用下分解成氨的过程称为氨化过程。如：
RCH2OH＋ NH3＋ CO2＋能量—水解—→ RCHNH2COOH＋ H2O RCHOHCOOH＋NH3＋能量—氧化—→ RCHNH2COOH＋ O2 RCOOH＋ NH3 ＋ CO2＋能量——还原—→RCHNH2COOH＋H2 由此可见，氨化作用可在多种多样条件下进行。无论水田、旱田，只要微生物活动旺盛，氨化作用都可以进行。 氨化作用产生的铵态氮能被植物和微生物吸收利用，是农作物的优良氮素营养。未被作物吸收利用的铵，可被土壤胶体吸收保存。但在旱地通气良好的条件下，铵态氮可进一步为微生物转化。 ③硝化过程指氨或铵盐在微生物作用下转化成硝酸态氮化合物的过程。它是由两组微生物分两步完成的。第一步铵先转化成亚硝酸盐，紧接着亚硝酸盐又转化成硝酸盐，消化过程是一个氧化需氧过程，只有在通气良好的情况下才能进行。所以水稻田在淹水期间主要为铵态氮，硝态氮很少，旱地土壤一般硝化作用速率快于氨化作用，土壤中主要为硝态氮。硝态氮也是为植物吸收利用的优良氮源，所以可以利用土壤硝化作用强度来了解旱地土壤的供氮性能。 ④反硝化作用指土壤中硝态氮被还原为氧化氮和氮气，扩散至空气中损失的过程。反硝化作用主要由反硝化细菌引起。在通气不良的条件下，反硝化细菌可夺取硝态氮及其某些还原产物中的化合氧，使硝态氮变为氮气损失。 2.无机态氮的转化过程 无机态氮包括硫酸铵、硝酸铵、碳酸铵、碳酸氢铵、氢氧化铵等。由于这些都属于不稳定的化合物，易氨化释放出氨，同时也遵循硝化过程和反硝化作用；但应指出，施用时需在保护地的密闭环境中施用，除应注意土壤适当湿度和通透性外，还应掌握少施、勤施和深施。如施用不当，极易熏坏叶片，甚至造成全株死亡。 尿素虽属有机氮肥，但因结构简单，其转化过程与无机氮肥基本相同，以尿素为例
血管紧张素转换酶抑制剂在肾脏病中正确应用的专家共识 血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)通过抑制血管紧张素n生成、阻断肾素一血管紧张素·醛固酮系统作用，及抑制缓激肤降解、增强缓激肚效应，而广泛应用于肾脏病治疗。为了更合理、安全地应用这类药物，全国部分肾病专家于2004年4月24日在北侬进衬了专题研讨，对り血管紧张素转换酶抑制剂在肾脋病中正确应用的专箶建议进行 了第2次修订，经充分讨论，伞?达成如?共识。 ?一、适应证 1.降低系统高血压:持续瀧高血压促进肾损害进展，引起严重心、脑血篡并发症。对肾脏病患者合并的高血压(包括原发性高血厉及芾实质?鋘血压)应积极?疗，?力争达标。?蛋白,1 g/d时，?压庄降辮130/?0 mmHg(平均动脉宋?7 míHg );尿蛋瘽>5 g/d时，血压应降达125/75 mmHg(廳均动脉压92 mmHg )，其中收缩厃?疗达标尤其重要。此时，QCEI(或血管紧张甠1?受体拮抗剂，ARB)应为首选靍?药? 2
减少尿蛋白排泄:蛋白尿、崄其大量蛋發尿有不少印害，并能促进肾损妳进展，应积极治疗。ACEI能邚过多种机制如改善肾小球内高压、高灌棨及高滤过，及改善肾小球滤过膜选择通透性而减少尿蛋白排?。蛋白尿较重时AKE?降尿蛋白效果往往更显鑗，五尽量将尿蛋繽减堑至正常或昀低水繳。 3.延眓肾獟害进展:ACEI除能通过上述作用保护肾脏外，还能通过冏少肾脯细胞嬖基褨蓄积(减少产生，促进降解)，拮抗肺小球塬化及?间质纤维化而延缓肾损害进屓? QCEI针对上?第2,?适应症发挥的疗效，鋨分为非血压依赖性 ?适用。 ?糖尿病患者(包括1型及2型)帔从尿癿蛋白排泄率增髸张始即应琨ACEI上述各适应症疗效已被许多伴床嶪译医学讕验验证。?二め使用方法 ?ACEI类药坏需从低剂量开始应用，然后逐渐加量至起效，老年人尤?如此，避免降血压过庶。 1.降低高血压:若非豀压极高需诅速降压，一般妜首选长效ACEI 治疗。 伺亦有效降压，A?EI常需与其它降压药物酌伍应用，一般常需3种或更多种靍压药联合应用才臽有效控制血压。联合用药常首鈉用尯剂量利尿剂(肌醉清除率?:5ml/min时可用唆嗦类利尿药， 转化酶的测定 转化酶又称蔗糖酶，是一种水解酶，植物体的库组织中，一般含有较高活性的转化酶，它能将植物体内的主要同化产物——蔗糖不可逆的水解为葡萄糖和果糖，为细胞的可溶性糖贮库提供可利用六碳糖，以用于细胞壁、贮藏多糖及果聚糖的生物合成，并通过与呼吸作用偶联的氧化磷酸化产生能量，所以，转化酶与植物组织的生长有密切关系，是衡量同化产物的转化和利用、植物细胞代谢及生长强度的指标。 试剂：1、10%蔗糖溶液 2、葡萄糖标准液（500μg/ml） 3、0.05mol/l的磷酸缓冲液 4、（DNS）3，5二硝基水杨酸：将6.3g二硝基水杨酸和262 ml 2mol/l NaOH溶液，加到500ml含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000ml，贮于棕色瓶中备用。 方法：1、酶的提取：1g样品剪碎后，用预冷的蒸馏水在冰浴中研磨成匀浆，定容至100ml，在冰箱中浸提3小时，4000转离心15分钟，上清液即为酶的粗提液。 2、酶活性的测定：吸酶液2ml，放入试管中，再加入pH6.0的缓冲液5ml及10%蔗糖溶液1ml，在37度水浴中保温30分钟，取出后立即按3，5二硝基水杨酸法测定还原糖的含量。以煮沸酶液10分钟钝化酶的试管作对照。 3、还原糖标准曲线的制作及还原糖含量的测定 ①标准曲线：取6支20ml刻度试管，编号，按下表配置不同浓度的葡萄糖标准液： 管号 1 2 3 4 5 6 葡萄糖原液量（ml）0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 加蒸馏水量（ml） 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 0 葡萄糖浓度（μg/ml）0 100 200 300 400 500 在上述各管中分别加入1.5ml 3，5二硝基水杨酸试剂，在沸水浴中加热5分钟，取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，加蒸馏水定容至20ml，混匀，以1号管为空白，测540nm 波长下的OD值。以OD值为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线。 ②酶反应液中还原糖的含量的测定：吸取2ml反应液，加入1.5ml 3，5二硝基水杨酸试剂，沸水浴中煮沸5分钟，冷却定容至20ml ，测定540nm波长下的OD值，查标准曲线得酶反应液中还原糖的浓度。 4、结果计算： A=(N-N’)*V/(T*W*1000) A：转化酶的活性(mg/gfw/h) N：酶反应液中还原糖的浓度(μg/ml) N’：钝化酶反应液中还原糖的浓度(μg/ml) V：酶反应液的总体积 T：反应时间W：材料鲜重转化酶的测定
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