第一节细菌 一形态 (一) 形状：基本形状 球状----球菌杆状---杆菌螺旋状----螺旋菌 1.球菌 基本形状：圆球形、扁圆球形、椭圆球形 种类(依子细胞的空间排列方式分)： 单球菌一个方向分裂子细胞分散 双球菌一个方向分裂子细胞成对排列 链球菌一个方向分裂子细胞链状排列 四联球菌二个方向分裂，子细胞田字形排列 八叠球菌三个方向分裂，子细胞立方形排列 葡萄球菌多个方向分裂，子细胞葡萄状排列 2.杆菌 基本形状 杆状 圆柱状 同一种杆菌宽度比较稳定，长度易变 种类 与工农业生产关系密切 大多数杆菌菌体分散存在，如鼠疫巴氏杆菌、大肠杆菌、麻风杆菌、痢疾志贺氏菌 有些呈链状排列、栅状排列、八字形排列，如苏云金杆菌。 3.螺旋菌 基本形状 弯曲杆状 包括 o弧菌菌体弯曲呈弧形或逗号形，如霍乱弧菌 o螺旋菌菌体回转如螺旋状，如红螺菌 (二)大小 单位 微米 1mm=1000μm 球菌大小以直径表示:0.5-2.0微米 杆菌宽度与球菌相似，长度:0.2-8.0微米 螺旋菌大小以菌体两端点间距离表示 (三)影响细菌形状和大小的因素
菌龄 环境条件 o环境条件适宜的幼龄菌，表现正常的大小和形态 o环境温度偏高、营养条件失调的老龄菌，菌体萎缩 二、细菌的细胞结构 所有的细菌都有共同的基本结构 细胞壁 o原生质体（细胞膜、细胞质、原核） 某些细菌有特殊结构 o如鞭毛、荚膜、芽孢等 （一）基本结构 1．细胞壁 ·功能 a)维持细胞外形 b)保护原生质体，在渗透压不宜的环境中保持生命力 Gram staining 1884年丹麦医生C.Gram 涂片→结晶紫初染（紫色）→碘液处理→乙醇脱色→复红复染（红色） 除支原体、螺旋体、细菌L型外，所有原核生物均有细胞壁，可区分为Gram阳性或阴性菌，两者在化学组成及细胞壁结构上差异显著 可能原理 结晶紫-碘复合物 o阳性菌壁厚，肽聚糖含量高，结构紧密，含脂量少;酒精脱色，肽聚糖不溶于酒精，紫色不褪，复染不能进行 o阴性菌相反 肽聚糖是原核生物细胞壁特有的化学组成，青霉素等能破坏其结构或抑制其合成 2．细胞膜(细胞质膜) 功能 a)物质转运与营养作用，渗透屏障 b)呼吸作用与生物合成作用中心 化学组成 蛋白质 60-70% 磷脂 20-30% 多糖 2%
第一章绪论 1 什么是微生物？微生物有哪些主要类群？ 微生物是指肉眼难以看清，需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的一切微小生物的总称。 微生物包括：原核类：三菌(蓝细菌、细菌、放线菌)、三体(支原体、衣原体、立克 次氏体)(蓝细菌即蓝藻，所以有时也称一藻、二菌、三体) 真核类：真菌、原生动物、显微藻类 .非细胞生物：病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒) 3.微生物的主要特点是什么？ 形体小，比面积大。 吸收快，转化快。 生长旺，繁殖快。 适应性强，易变异。 分布广，种类多。 第二章原核微生物 1比较G+和G-的细胞壁的结构和化学组成上的异同点，并简述革兰氏染色的原理及操作步骤。 革兰氏阳性菌细胞壁由肽聚糖和磷壁酸组成 革兰氏阴性菌细胞壁由肽聚糖和脂多糖组成 革兰氏染色法：草酸铵结晶紫初染-----碘液媒染-----95%乙醇脱色---番红复染原理：革兰氏阳性菌肽聚糖含量与胶联程度都比较高，肽聚糖层多，所以细胞壁较厚，壁上的间隙较小，媒染后形成的结晶紫-碘复合物就不易被洗脱出细胞壁，加上它基本上不含脂质，乙醇洗脱时细胞非但没有出现缝隙，反而使肽聚糖层网孔因脱水而变得通透性更小，结果蓝紫色的结晶紫-碘复合物就留在细胞内而使细胞呈蓝紫色。而革兰氏阴性菌的肽聚糖含量与胶联程度较低。层次也少，故其细胞壁较薄，壁上的空隙较大，再加上细胞壁的脂质含量高，乙醇洗脱后，细胞壁因脂质被溶解而孔隙更大，所以结晶紫-碘复合物极亦脱出细胞壁，乙醇脱色后的细胞成无色，经过番红复染，结果就呈现红色。 2细菌的菌落特征如何描述？（提示：细菌菌落总的特征以及具有特殊结构时的菌落特征）细菌菌落湿润、粘稠、易挑起，质地均匀及菌落各部位颜色一致。 4 放线菌的菌丝类型有哪些？各有何功能？ 基内菌丝：吸收营养物质和排泄废物 气生菌丝：多核菌丝生成横隔进而分化形成孢子丝 孢子丝： 第三章真核微生物 2 酵母菌和霉菌的繁殖可形成哪几种无性孢子和有性孢子？ 酵母菌：无性孢子包括掷孢子、厚垣孢子、节孢子、分生孢子。 有性孢子有子囊孢子 霉菌：无性孢子有厚垣孢子、节孢子、分生孢子、孢囊孢子、游动孢子。 有性孢子有卵孢子、接合孢子、子囊孢子。
活性污泥中主要微生物类群的特征及作用 活性污泥是活性污泥处理系统中的主体作用物质,在废水生物处理中,不论采用何种方法处理构筑物及何种工艺流程,都是通过处理系统中活性污泥或生物膜微生物的新陈代谢的作用,使活性污泥具有将有机污染物转化为稳定无机物的活力,在有氧的条件下,将废水中的有机物氧化分解为无机物,从而达到废水净化的目的。处理后出水水质的好坏同组成活性污泥的微生物的种类、数量及其活性有关。 活性污泥是由细菌、微型动物为主的微生物与悬浮物质、胶体物质混杂在一起所形成的茶褐色的絮凝体。其中的微生物主要由细菌组成,细菌主要有菌胶团细菌和丝状菌,数量可占污泥中微生物总量的90 %～95 %左右,细菌在有机废水的处理中起着最重要的作用,如在A - B 活性污泥法中,A 段在很高的负荷下运行,停留时间、污泥龄期都相对较短,在这种情况下,较高级的真核微生物无法生存,只有某些短世代的原核细菌才能适应、生存并得以生长繁殖。此外,活性污泥中还有原生动物和后生动物等微型动物< 1 > 。 在处理生活污水的活性污泥中存在大量的原生动物和部分微型后生动物,通过辨别认定其种属,据此可以判别处理水质的优劣,因此将微型动物称为活性污泥系统中的指示生物< 2 > 。 1 微生物类群的分类 1. 1 肉足虫 其细胞质可伸缩变动而形成伪足,作为运动和摄食的胞器,常见的有变形虫和表壳虫。 1. 2 鞭毛虫 具有一根或一根以上的鞭毛,鞭毛是其运动器官,常见的有滴虫、聚屋滴虫、眼虫、豆形虫和粗袋鞭虫等。 1. 3 纤毛虫 动物周身表面或部分表面具有纤毛,作为运动或摄食的工具,具有胞口、口围等吞噬和消化的器官,分固着型和游泳型两种,常见的游泳型有漫游虫、草履虫、管叶虫、斜管虫等;常见的固着型有钟虫、盖虫、独缩虫、聚缩虫、吸管虫、累枝虫等。 1. 4 后生动物 在活性污泥系统中是不经常出现的,在出水水质较好或较稳定时出现,常见的有轮虫、红斑票贝体虫等。根据污水厂两年的镜检记录,红斑票贝体虫平时几乎不见,多在8 ,9 月份出现,这时水温较高,一般为22 ℃左右。 2 代谢捕食方式 1) 通过体表吸收溶解性的有机物,吞噬废水中细小的有机物颗粒,经过新陈代谢作用,然后使之氧化分解为稳定的无机物。 2) 捕食细菌或游离细菌,维持活性污泥系统中生态平衡及改善出水水质。通过捕食细菌,能促进细菌的生长,使细菌的生长能维持在对数生长期,防止种群的衰老,提高细菌的活力;由于游
实验一微生物的形态和结构观察 一、实验目的 1、掌握普通光学显微镜的正确使用方法； 2、掌握革兰氏染色法的原理及操作步骤； 3、在显微镜下观察细菌、酵母菌等的个体形态和结构。 二、基本原理 普通光学显微镜是由一组光学系统和支持及调节光学系统的机械系统组成。 普通光学显微镜是由一组光学系统和支持及调节光学系统的机械系统组成。 机械系统包括镜座、镜臂、镜台、物镜转换器、镜筒及调节器等。镜座是显微镜的基座，使显微镜能平稳地放置在桌子上；镜台又称载物台，是放置标本的地方，镜台上有压片夹用以固定被检标本，标本移动器可使标本前后和左右移动，有的标本移动器带有游标尺，可指明标本所在位置；镜臂用以支持镜筒，也是移动显微镜时手握的部位；镜筒是连接目镜
和物镜的金属筒，镜筒上端插入目镜，下端与物镜转换器相接；物镜转换器安装在镜筒的下端，其上装有3~5个不同放大倍数的物镜，可以通过转动物镜转换器随意选用合适的物镜；调节器安装在镜臂基部，是调节物镜与被检标本距离的装置，通过调节粗、细螺旋便可清晰地观察到标本。 光学系统主要包括目镜、物镜、聚光镜和反光镜等，较好的显微镜有内光源。目镜一般由两块透镜组成，不同的目镜上刻有5×、10×和15×等字符以表示该目镜的放大倍数；物镜是显微镜中很重要的光学部件，由多块透镜组成，根据物镜的放大倍数和使用方法的不同，分为低倍物镜（4×、10×和20×）、高倍物镜（40×和45×）和油镜（90×、95×和100×）等。被检物体经显微镜的目镜和物镜放大后的总放大倍数是物镜的放大倍数和目镜放大倍数的乘积。 形态观察主要包括群体形态和个体形态观察两方面。细菌个体微小，且较透明，必须借助染色法使菌体着色，显示出细菌的一般形态结构及特殊结构，在显微镜下用油镜进行观察。根据细菌个体形态观察的不同要求，可将染色分为简单染色、鉴别染色和特殊染色。本实验主要观察微生物的个体形态，掌握在细菌学中广泛使用的重要鉴别染色法——革兰氏染色法；通过此染色，可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类。 革兰氏染色有着重要的理论与实践意义，其染色原理是利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同。革兰氏阳性菌的细胞壁肽聚糖层厚，交联而成的肽聚糖网状结构致密，经乙醇处理发生脱水作用，使孔径缩小，通透性降低，结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞内而不被脱色，结果使细胞呈紫色。而革兰氏阴性菌肽聚糖层薄，网状结构交联疏松，而且类脂含量较高，经乙醇处理后，类脂被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁，因而细胞被脱色，再经蕃红复染后细胞呈红色。 三、仪器和药品 仪器：显微镜酒精灯接种柄接种环洗瓶载玻片滤纸镜油擦镜纸无菌水烧杯药品：结晶紫95%乙醇草酸铵碘碘化钾蕃红二甲苯降酚细菌（培养18~24小时的斜面菌种）细菌酵母菌等标本片。 草酸铵结晶紫染液：A液结晶紫2.0g，95%乙醇20mL；B液草酸铵0.8g，蒸馏水80mL。将A和B充分溶解后混合静止24小时过滤使用。 革氏染液：碘1g ，碘化钾2g ，蒸馏水300mL。 蕃红染液：2.5%蕃红的乙醇溶液10mL，蒸馏水100mL混合过滤。 脱色液：95%乙醇。
大理大学课程教案 （理论教学） 课程名称：微生物学与人类健康 课程类型：（ 2 ）1、必修；2、选修；3、其它 授课对象：非医学专业（本科）14/15 级 授课时间：2016 至2017 学年 1 学期 计划学时：24 学时（其中：理论24 ，实验：0 ）任课教师：武有聪、张雷 所属学院：基础医学院 课程管理部门（教研室）：医学微生物学及免疫学教研室 大理学院教务处
教材：人民卫生出版社出版（出版社），刘晶星编著，2013年第8版讲授人：武有聪专业技术职务：副教授 学历：研究生学位：博士学位 所属章节：第1-2章计划学时：3h 教学目的和要求： 1.掌握：细菌细胞壁的组成、功能；革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的不同点及 意义；质粒的概念及其作用；核蛋白体的组成及意义；异染颗粒的意义；L-型细菌的概念及其意义；细菌的特殊结构及意义。细菌生长繁殖的条件及方式；根据细菌对氧需要的分类及细菌厌氧生长的原理；细菌合成代谢产物的种类及意义。 2.熟悉：细菌的大小与测量单位；细菌的基本形态；细菌的基本结构及功能；中介体 的概念；常见细菌生化反应的种类；细菌生化反应的概念及其在细菌鉴别上的意义； 细菌群体的生长繁殖规律。 教学重点及难点： 1.细菌的大小与形态 2.细菌的特殊结构（荚膜，鞭毛，菌毛，芽孢） 3.细菌的基本结构（细胞壁，细胞膜，细胞质） 教学方法：讲授为主、列表法、图示法 使用教具：多媒体 思考题： 1.细菌的基本结构有哪些它们各有什么作用 2.细菌的特殊结构有哪些它们各有什么作用 参考资料： 1.《医学微生物学》（第六版）周正任主编人民卫生出版社 2.《医学微生物学与免疫学》沈关心主编人民卫生出版社 3.《医学微生物学》中国协和医科大学、北京医科大学联合出版社
微生物类群介绍 微生物（Microorganism/Microbe） 是指一群个体微小、结构简单、低等生物的统称。它不是一个分类学上的专门名词，而是指所有肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。虽然对于微生物的认识晚于植物和动物，但是人们和微生物打交道已有8000多 年的历史了，当时人们是不自觉地利用微生物，如大家熟知的发面和酿酒。在生活中，人们与微生物的关系非常密切，如用谷物、大豆可以做出面包、酒精和酱油；通过发酵可以大量生产抗生素、味精和酶制剂；农业上利用豆科植物轮作可以提高肥力；衣服发
霉、食品腐败；人类和其他动植物传染病的流行等，所有这些都是微生物作用的结果。 说到微生物的类群，首先要知道生物的界级划分研究简史。生物的分界是随着科学发展的水平在不断地改变及深化的。在林奈的时代，对生物的观察仅限于肉眼所能看到的特征及区别，那时生物仅分为植物界（Plantae）与动物界（Animalia）两大界。到19世纪中叶，霍洛（Hogg，1860）等提出了生物的三界系统，即原生生物界（Protista）、植物界与动物界，其中原生生物界包括单细胞动物、藻类及真菌，他们的三界系统
反映了单细胞生物与多细胞生物的 区别。1959年魏塔克（Whittaker）提出了四界系统，即原生生物界、真菌界（Fungi）、植物界与动物界。其中将原生生物界的真菌独立成为 了一界。1974年李代尔（Leedale）又提出了原核界（Monera），其中包含细菌及蓝细菌，仍为四界系统，即原核界、植物界、真菌界及动物界。直到1969年，魏塔克将分类系统进行了完善，提出了五界系统：真菌界、原核生物界、原生生物界、植物界、动物界。按照从高到低的顺序，依次有界、门、纲、目、科、属、种7个单元。
第一章：微生物类群与形态结构 非细胞型：病毒 细胞型：原核微生物：细菌、放线菌等，（无明显核，也无核膜、核仁。） 真核微生物：酵母菌、霉菌，（有明显核，有核膜、核仁。） 第1节：细菌Bacteria 是微生物一大类群，主要研究对象。 细菌是单细胞的，大小在1um左右，1000倍以上显微镜才能看到其形状。 一、细菌的形态和大小 （一）基本形态 1、球菌Coccus：球形或近球形，根据空间排列方式不同又分为单、双、链、四联、八叠、葡萄球菌。不同的排列方式是由于细胞分裂方向及分裂后情况不同造成的。 2、杆菌Bacillus (Bacterium)：杆状或圆柱形，径长比不同，短粗或细长。是细菌中种类最多的。 3、螺旋菌（Spirillum）：是细胞呈弯曲杆状细菌统称，一般分散存在。根据其长度、螺旋数目和螺距等差别，分为弧菌Vibrio （菌体只有一个弯曲，形似C字）和螺旋菌（螺旋状，超过1圈）。 与螺旋体Spirochaeta 区别：螺旋体无鞭毛。 细菌形态不是一成不变的，受环境条件影响（如温度、培养基浓度及组成、菌龄等） 异常形态一般，幼龄，生长条件适宜，形状正常、整齐。老龄，不正常，异常形态。 畸形：由于理化因素刺激，阻碍细胞发育引起。 衰颓形：由于培养时间长，细胞衰老，营养缺乏，或排泄物积累过多引起。 （二）细菌大小如何测量：显微测微尺 球菌直径0.5-1um，杆菌直径0.5-1um ，长为直径1-几倍；螺旋菌直径03-1um，长1-50um；细菌大小也不是一成不变的。 细胞重量10-13-10-12g ，每g细菌含1-10万亿个细菌。 二、细菌细胞结构 研究细菌细胞结构是分子生物学重要内容之一，有了电子显微镜才有可能。其结构分为基本结构和特殊结构。 基本结构是细胞不变部分，每个细胞都有，如细胞壁、膜、核。 特殊结构是细胞可变部分，不是每个都有，如鞭毛、荚膜、芽孢。 （一）基本结构 1、细胞壁cell wall：位于细胞表面，较坚硬，略具弹性结构。 功能：1）维持细胞外形；2）保护细胞免受机械损伤和渗透压危害；3）鞭毛运动支点；4）正常细胞分裂必需；5）一定的屏障作用；6）噬菌体受体位点所在。另外与细菌的抗原性、致病性有关。 革兰氏染色Cristein Gram，1884发明（Koch实验室） 凡是不能被乙醇脱色，呈蓝紫色，称为革兰氏阳性菌G+ 凡是经乙醇脱色，呈复染剂颜色，称为革兰氏阴性菌G- 革兰氏染色结果不同主要是细胞壁组成及结构差异造成的。 （1）革兰氏阳性菌Gram positive 以金黄色葡萄球菌为例，Staphylococcus aureus 细胞壁构成：一连续层，厚20-80nm 两部分：网状骨架：微纤丝组成基质：骨架埋于基质中 化学组成：主要是肽聚糖和磷壁酸肽聚糖peptidoglycan (粘肽、胞壁质）大分子复合体，许多亚单位交联而成。 亚单位1）双糖单位：N-乙酰胞壁酸（NAM）和N-乙酰葡萄糖胺（NAG）通过â-1，4糖苷键相连而成。 2）短肽：L-Ala-D-Glu-L-Lys-D-Ala 3) 肽桥：短肽之间连接。 短肽全部或部分连至NAM上，短肽之间也有连接，组成一网状结构。 肽聚糖是细菌细胞壁特有成分，也是原核微生物特有成分（古生菌没有） 磷壁酸teichoic acid (垣酸）G+特有成分。 多元醇与磷酸复合物，通过磷酸二酯键与NAM相连。根据多元醇不同，有甘油型、核糖醇型等5种类型。 主要功能：使壁形成负电荷环境，吸附二价金属离子，维持壁硬度和一些酶活性。还可提供噬菌体位点。 （2）革兰氏阴性菌Gram negative 以大肠杆菌为例： 内壁层：厚2-3 nm，单（双）分子层，由肽聚糖构成。与G+区别：交联低；DAP取代L-Lys；肽桥。 外壁层：内层：脂蛋白层，以脂类部分与肽聚糖相连。中层：磷脂层。外层：脂多糖层，外壁重要成分，8-10 nm。 脂多糖lipopolysaccharide LPS G-特有成分。 结构：类脂A + 核心多糖+ O-侧链 功能：1）内毒素物质基础；2）吸附镁、钙离子；3）决定G-表面抗原；4）噬菌体受体位点。 钙离子是维持LPS稳定性所必需的。 革兰氏染色机制在细胞壁与细胞膜之间，有周质空间（隙），含水解酶、载体蛋白等。
显微镜观察结果描述 化药1105刘佳兴110150139 摘要：微生物分为原核微生物和真核微生物，主要有细菌、真菌和病毒，本文主要介绍放线菌、蓝细菌支原体、立克次氏体、衣原体、酵母菌、病毒和霉菌。 关键词：形态，结构，功能 1、微生物的分类系统 这里仅简述原核微生物和真核微生物的分纲体系。 1.1原核生物界（Procaryotae） （1）光能营养原核生物门 Ⅰ蓝绿光合细菌纲（蓝细菌类）；Ⅱ红色光合细菌纲；Ⅲ绿色光合细菌纲 （2）化能营养原核生物门 Ⅰ细菌纲；Ⅱ立克次氏体纲；Ⅲ柔膜体纲；Ⅳ古细菌纲 1.2真核微生物（Eucaryotic microbes） 真菌可分以下四纲： Ⅰ藻状菌纲菌丝体无分隔，含多个核。有性繁殖形成卵孢子或接合孢子；Ⅱ子囊菌纲菌丝体有分隔，有性阶段形成子囊孢子；Ⅲ担子菌纲菌丝体有分隔，有性阶段形成担孢子； Ⅳ半知菌纲包括一切只发现无性世代未发现有性阶段的真菌。 粘菌也可分为四纲，即 Ⅰ网粘菌纲自细胞两端各自伸出长的粘丝并接连形成粘质的网络——假原质团；Ⅱ集胞粘菌纲分泌集胞粘菌素，形成假原质团；Ⅲ粘菌纲形成原质团，腐生性自由生活；Ⅳ根 2.1形态结构 DNA、核糖体、鞭毛、纤毛、荚膜、细胞壁、质膜
2.2基本形态 （1）球菌：按其排列方式又可分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌，葡萄球菌和链球菌。 （2）杆菌：细胞形态较复杂，有短杆状、棒杆状、梭状、月亮状、分枝状。 （3）螺旋状：可分为弧菌（螺旋不满一环）和螺菌（螺旋满2~6环，小的坚硬的螺旋状细菌）。此外，人们还发现星状和方形细菌。 3、古细菌 古细菌（archaeobacteria）（又可叫做古生菌或者古菌）是一类很特殊的细菌，多生活在极端的生态环境中。具有原核生物的某些特征，如无核膜及内膜系统；也有真核生物的特征，如以甲硫氨酸起始蛋白质的合成、核糖体对氯霉素不敏感、RNA聚合酶和真核细胞的相似、DNA具有内含子并结合组蛋白；此外还具有既不同于原核细胞也不同于真核细胞的特征，如：细胞膜中的脂类是不可皂化的；细胞壁不含肽聚糖，有的以蛋白质为主，有的含杂多糖，有的类似于肽聚糖，但都不含胞壁酸、D型氨基酸和二氨基庚二酸。 3.1与真细菌主要区别 1．形态学上，古细菌有扁平直角几何形状的细胞，而在真细菌中从未见过。 2．中间代谢上，古细菌有独特的辅酶。如产甲烷菌含有F420，F430和COM及B因数。3．有无内含子(introns)上，许多古细菌有内含子。 4．膜结构和成分上，古细菌膜含醚而不是酯，其中甘油以醚键连接长链碳氢化合物异戊二烯，而不是以酯键同脂肪酸相连。 5．呼吸类型上，严格厌氧是古细菌的主要呼吸类型。 6．代谢多样性上，古细菌单纯，不似真细菌那样多样性。 7．在分子可塑性(molecular plasticity)上，古细菌比真细菌有较多的变化。 8．在进化速率上，古细菌比真细菌缓慢，保留了较原始的特性。 4、放线菌 放线菌（Actinomycete）是原核生物的一个类群。因在固体培养基上呈辐射状生长而得名。 4.1形态 大多数有发达的分枝菌丝。菌丝纤细，宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。可分为：营养菌丝，又称基质菌丝，主要功能是吸收营养物质，有的可产生不同的色素，是菌种鉴定的重要依据；气生菌丝，叠生于营养菌丝上，又称二级菌丝。
第一节微生物的类群 基础再现： 一、细菌 1、结构：①细胞壁：主要成分是：_________________ （注意与其它细胞的区别） （共有）②细胞膜：与其它生物的相同 ③细胞质：a、细胞器有：___________ 无___________________________________ ； b、质粒：控制着细菌的__________ 、____________ 、____________ 等性状 ④拟核：由一个大型的环状_______ 反复折叠缠绕而成，控制着细菌的_________________ 特殊结构：有的细菌还具有_________ 、、________ 等结构 2、细菌的繁殖：____________ 方式 3、菌落：单个或少数细菌在________ 培养基上大量繁殖时，所形成的肉眼可见的具有一定形态 结构的_____________ 群体。 二、放线菌 1、形态：①基内菌丝：吸收_________ ；②气生菌丝：一定时间后分化成___________ ，产生_____ 2、结构：单细胞___________ 生物；与细菌的不同有：______________________________________ 1、结构（核衣壳）：①核酸：___________ ;②衣壳由电镜下能见到的最小形态单位一__________ （由 多肽分子）构成，它的作用为：保护____________ ，决定____________ 等功能； 特殊结构（囊膜）由 _______________ 、 ______________ 和脂类构成，上有_________ 。 2、增殖的过程： 疑难突破： 1、微生物类群的比较: 细菌的运动：有 _________ 的可运动 第二节微生物的营养代谢和生长 、微生物的营养： 1、微生物的营养需求和功能
《食品微生物学》授课教案 第二章微生物主要类群的形态、结构和功能 教学目的： 1、掌握原核生物和真核生物的主要区别。 2、掌握细菌细胞的形态结构、化学组成和生理功能以及细菌的繁殖特点和菌落特征。 3、掌握酵母菌细胞的形态结构、菌落特征的繁殖方式。 4、掌握霉菌细胞的形态结构、繁殖特点、菌落特征和生活史类型。 5、掌握噬菌体的形态结构以及烈性噬菌体和温和性噬菌体的繁殖特点。 6、掌握噬菌体与工业发酵的关系。 教学重点： 1、掌握细菌细胞的形态结构、化学组成和生理功能以及细菌的繁殖特点和菌落特征。 2、革兰氏染色的步骤与机理 3、掌握噬菌体的形态结构以及烈性噬菌体和温和性噬菌体的繁殖特点。 教学难点： 1、革兰氏染色的步骤与机理 2、掌握噬菌体的形态结构以及烈性噬菌体和温和性噬菌体的繁殖特点。 教学课时：8学时 教学方法：多媒体教学 教学内容：
原核微生物与真核微生物的区别归纳起来概括以下几方面，即细胞核、细胞膜、核糖体、繁殖等。 非细胞型：病毒 细胞型：原核微生物：细菌、放线菌等，无明显核，也无核膜、核仁。真核微生物：酵母菌、霉菌，有明显核，有核膜、核仁。 一、细菌 （一）细菌的形态和大小 1、基本形态： 球菌 杆菌：是细菌中种类最多的。 螺旋菌 2、细菌大小： 显微测微尺 （二）细菌细胞结构 分为基本结构和特殊结构。基本结构是细胞不变部分，每个细胞都有，如细胞壁、膜、核。特殊结构是细胞可变部分，不是每个都有，如鞭毛、荚膜、芽孢。 1、基本结构 1）细胞壁：位于细胞表面，较坚硬，略具弹性结构。 功能：维持细胞外形；保护细胞免受机械损伤和渗透压危害；鞭毛运动支点；正常细胞分裂必需；一定的屏障作用；噬菌体受体位点所在。 另外与细菌的抗原性、致病性有关。 革兰氏染色：
动物界 植物界 真菌界酵母菌、霉菌、担子菌微生物原生生物界单细胞藻类、原生动物 原核生物界细菌、放线菌、蓝细菌、 立克次体、支原体、衣原体 病毒界病毒 微生物的分类和鉴定的相关概念： 微生物的分类和鉴定离不开以下三步： ⑴获得该微生物的纯培养物 ⑵测定一系列鉴定指标 ⑶查找权威性鉴定手册 现代微生物分类方法的依据主要有： ⑴核酸分析 ⑵DNA杂交试验 ⑶细胞壁成分分析 ⑷红外光谱 微生物的分类单位依次为：界、门、纲、目、科、属、种。在科与属之间可加“族”。上述分类单位中以“种”概念的界定最为关键。
种的概念： 种是一个分类的基本单位。它是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其接近、与同属内其它种有着明显差异的菌株的总称。在微生物分类学中，一个种只能用该种内的一个典型菌株来作为具体标本，这个典型菌株就是该种的模式种。 变种是对种的进一步细分的单元。从自然界分离到某一微生物的纯种，必须与已知的典型种所记载的特征完全符合，才能鉴别为同一个种。有时分离到的纯种却有某一特征与典型菌种不相同，其余特征都相同，而且这一特征又是稳定的，我们称这一纯种为典型种的变种。 亚种与变种是近义词，两者经常混用。有时我们将实验室获得的变异型称为亚种或小种。 菌株表示任何一个独立分离的单细胞（或病毒粒子）繁殖而成的纯种群体及其一切后代，即同种微生物的每个不同来源的纯培养物。同一菌种的不同菌株间，作为分类鉴别的主要性状是相同的，但是非鉴别用的“小”性状可以有很大的差异，尤其是生化性状，如代谢产物的产量性状等。菌株实际上是某一微生物达到“遗传性纯”的标志。一旦某菌株发生自发突变或经诱变、杂交或其它方式发生遗传重组后，均应确定新的菌株名称。
微生物学课后习题及答案 第一章 一.微生物有哪些主要类群？有哪些特点？ 答：类群：1.真核细胞型；2.原核细胞型：细菌，放线菌，衣原体，支原体，立克次式体； 3.非细胞型：病毒。 特点：1.体小，面积大 2.吸收多，转化快 3.生长旺，繁殖快4.分布广，种类多 5.适应强，易变异二.你认为现代微生物学的发展有哪些趋势？ 答：研究领域有制药、治理环境污染等，微生物的基因科学，微生物病毒学，现代微生物学已发展出很多的分支学科，如病毒学，微生物基因组学，应用微生物（生物农药，浸矿微生物等），病源微生物（主要指细菌），海洋微生物，古细菌等，现代微生物学的研究主要集中在菌种的遗传背景，市场化应用等，食品微生物快速检测技术、食用菌的生产、功能性成分的提取等。三.简述微生物与制药工程的关系。 答：1.人类除机械损伤外的疾病都是由微生物造成的 2.微生物又是人用来防治疾病的常用方法 3.微生物在自然环境中分布广泛来源很多 4.微生物的代谢产物相当多样，可用于生物制药 5.微生物和人之间的关系，涉及人、微生物、植物的协同进化 6.遗传学与生态学名词对照：
古菌域：Archaea 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，古菌域为其中一大类别。 （不确定） 细菌域：bacteria 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，细菌域为其中一大类别。 （不确定） 真核生物域：Eukarya 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，真核生物域为其中一大类别。 （不确定） 微生物：microorganism 是所有形态体积微小的单细胞或者个体结构简单的多细胞以及没有细胞结构的低等生物的通称。 第二章 一.比较下列各队名词 ①.原核微生物与真核微生物：原核微生物没有明显的细胞核，无核膜，核仁，无染色体，其细胞核为拟核，细胞内么有恒定的内膜系统，核糖体为70S型，大多为单细胞微生物。真核微生物有明显细胞核，有各种细胞器，核糖体为80S型。 ②.真细菌与古菌：相同点：以甲硫氨酸起始蛋白质的合成，核糖体对氯霉素不敏感，RNA聚合酶和真核细胞的相似，DNA具有内含子并结合组蛋白。 不同点：细胞膜中的脂质是不可皂化的，细胞壁不含肽聚糖等。
模块二微生物的主要类群 本章学习目标： 1.掌握细菌、酵母菌和霉菌的形态结构及菌落特征。 2.理解并掌握革兰氏染色的要点及作用机理。 3.了解放线菌、古细菌、蓝细菌、衣原体、支原体等原核微生物的生物学特征。 4.掌握酵母菌和霉菌的无性孢子和有性孢子的形成及其特征。 5.了解病毒和亚病毒的概念、形态结构、病毒的复制过程和分类。 6.掌握噬菌体的检测方法。 7.了解噬菌体的危害和防治措施。 微生物种类繁多，现代生物学将微生物分为细胞型微生物和非细胞型微生物。凡是没有细胞形态的微生物称为非常细胞型微生物，如病毒、亚病毒等。有细胞形态的微生物称为细胞型微生物，细胞型微生物又根据细胞结构的明显差异分为原核微生物和真核微生物。原核微生物中常见的类群有细菌、放线菌、蓝细菌、古细菌、支原体、衣原体、立克氏体等，真核微生物中常见的类群有酵母菌、霉菌、覃菌和真核原生生物。本章主要介绍与食品工业关系密切的一些微生物类群的形态结构、生理特性、功能、培养特性及繁殖方式。 第一节原核微生物 原核微生物是指一大类没有核膜，无细胞核，仅含一个由裸露的DNA分子构成的原始核区的单细胞生物。原核微生物细胞核的分化程度低，没有明显的细胞器，仅细胞膜大量内陷折皱到细胞质中，形成管状、层状结构，称为中间体，具有代替细胞器部分功能的作用，是许多代谢作用的场所，细胞质中无细胞器。细胞繁殖仅以无性的二分裂方式，少数种类偶尔通过原始的接合作用产生接合子。原核微生物主要包括细菌、放线菌、古细菌、蓝细菌、立克次氏体、衣原体、支原体和螺旋体等类群。本节以细菌为代表介绍原核微生物细胞的各部分构造和功能。 一、细菌（bacteria） 细菌是一类个体微小、形态结构简单的单细胞原核微生物。在自然界中，细菌分布最广、数量最多，细菌几乎可以在地球上的各种环境下生存，一般每克土壤中含有的细菌数可达数
微生物形态结构和培养特性观察 １、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构（包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等）及染色特性进行观察，直观地了解细菌在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。 ２、细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落（colony）。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的细菌在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。以此可以对不同微生物加以区别鉴定。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。 １）细菌的培养特征包括以下内容：在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。（下图）
图细菌的培养特征 1.点状 2.圆形 3.丝状 4.不规则形 5.假根状 6.纺锤状 7.扁平 8.隆起
9.凸起10.垫状11.脐状12.边缘整齐13.波状14.裂片状15.啮蚀状16.丝状17.卷发状18.丝线状19.刺毛状20.串珠状21.疏展状22.树根状23.假根状24.丝状25.串珠状26.乳头状27.绒毛状28.树根状29.量杯状30.萝卜状31.漏斗状32.囊状33.层状34.絮状35.环 状36.蹼状37.膜状 ２）霉菌酵母菌的培养特征：大多数酵母菌没有丝状体，在固体培养基上形成的菌落和细菌的很相似，只是比细菌菌落大且厚。液体培养也和细菌相似，有均匀生长、沉淀或在液面形成菌膜。霉菌有分支的丝状体，菌丝粗长，在条件适宜的培养基里，菌丝无限伸长沿培养基表面蔓延。霉菌的基内菌丝、气生菌丝和孢子丝都常带有不同颜色，因而菌落边缘和中心，正面和背面颜色常常不同，如青霉菌：孢子青绿色，气生菌丝无色，基内菌丝褐色。霉菌在固体培养表面形成絮状、 绒毛状和蜘蛛网状菌落。
第一章原核微生物的形态结构与功能 第一节细菌 细菌（Bacteria）是一类个体微小、具有细胞壁的单细胞原核微生物 一、细菌的个体形态 1、球菌（Coccus） 细胞个体呈球形或椭圆形，不同种的球菌在细胞分裂时会形成不同的空间排列方式，常被作为分类依据。 （1）单球菌如尿素微球菌（Micrococcus ureae）。 （2）双球菌如肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae）。 （3）链球菌如乳链球菌（Streptococcus lactis）。 （4）四链球菌如四链微球菌（Micrococcus tetragehus）。 （5）八叠球菌如尿素八叠球菌（Sarcina ureae）。 （6）葡萄球菌如金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。 2、杆菌（Bacillus） 细胞呈杆状或圆柱形，一般其粗细（直径）比较稳定，而长度则常因培养时间、培养条件不同而有较大变化。 3、螺旋菌（Spirilla） 包括：弧菌、螺菌、螺旋体。 4、细菌的特殊形态 柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细菌、贝日阿托氏菌(丝状)、具有子实体的粘细菌、三角形、方形等特殊形态的细菌。 二、细菌的个体大小 细菌大小的测定： （1）测量：测微尺 （2）长度单位：微米( m) （3）表示： 球菌：直径 杆菌：宽×长 螺菌：宽、长、螺距 细菌大小测量结果的影响因素： 个体差异； 干燥、固定后的菌体会一般由于脱水而比活菌体缩短1/3-1/4； 染色方法的影响，一般用负染色法观察的菌体较大； 幼龄细菌一般比成熟的或老龄的细菌大； 环境条件，如培养基中渗透压的改变也会导致细胞大小的变化。 细菌细胞的重量约为1×10 －9～1×10－10mg， 即每克细菌约含1～10万亿个菌体细胞
习题集 绪论 1．什么是微生物？它包括哪些类群？在生物界的分类地位如何？ 2．微生物的特点是什么？试举例说明。 3．举例说明微生物与人类的关系。 4．什么是微生物学？其主要内容和任务是什么？ 5．我国古代劳动人民在微生物应用上的主要成就有哪些？ 6．试述微生物学发展的几个主要时期及主要标志、重要人物。 7．简述微生物学在生命科学发展中的作用。 8．你认为微生物学将会在哪些方面对生命科学进一步作出贡献？ 第一章原核微生物 1．细菌细胞有哪些主要结构？它们的功能是什么？ 2．试图示革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌细胞壁的结构，并简要说明其特点及成分。 3．试述革兰氏染色机理及其重要意义。 4．肽聚糖的化学结构是怎样的？革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌的肽聚糖结构有何不同？ 5．试就作用物质、作用机制、作用结果和作用对象比较溶菌酶与青霉素对细菌细胞壁的作用。 6．什么是伴孢晶体？它在何种细菌中产生？有何实践意义？ 7．什么叫放线菌？什么叫基内菌丝、气生菌丝和孢子丝？它们之间有何关系？
8．什么是原核微生物？主要有哪些种类？各有何特点？ 9．解释： 菌落、菌苔、肽聚糖、磷壁酸、溶菌酶、异形细胞。 10．试从细胞的形态结构分析细菌与放线菌的菌落特征。 11．为什么蓝细菌是光合原核微生物？ 12．比较各类原核微生物的异同。 第二章真核微生物 1．真菌有哪些主要特征? 2．试述酵母菌的细胞结构及功能。 3．酵母菌是如何进行繁殖的? 4．试述霉菌的形态结构及其功能。 5．霉菌的繁殖方式有哪几种?各类孢子是怎样形成的? 6．毛霉与根霉、曲霉与青霉有哪些异同点? 7.比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落特征。 8.举例说明酵母菌和霉菌在工农业中的应用。 9.什么是粘菌?粘菌原生质团阶段有哪几种形态? 10．试述原核微生物与真核微生物的主要区别。 第三章病毒 1、什么是病毒？病毒与其他微生物有何区别？ 2、试述病毒的主要化学组成与结构。病毒核酸有何特点？病毒蛋白质有何功能？
微生物学 绪论 1什么是微生物，它包括哪些类群？ 微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。 微生物所包括的种类： 原核类：细菌（真细菌，古生菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体 真核类：真菌（酵母菌、霉菌、蕈菌），原生动物、显微藻类 非细胞类：病毒，亚病毒（类病毒、拟病毒，朊病毒） 2简述微生物的生物学特征，并举例说明。 微生物的主要特点： （一）比表面积大；如果把人的比表面积值定为1，则大肠杆菌（E.coli）的比表面积可高达30万！ （二）代谢能力强，代谢类型多；大肠杆菌每小时可分解自重1000～10000倍的乳糖； 产朊假丝酵母(Candida utilis)合成蛋白质的能力是大豆的100倍，是肉用公牛的10万倍。微生物的代谢产物极多，仅抗生素已发现9000多种。 （三）生长繁殖快，容易培养；大肠杆菌的细胞在合适的生长条件下，每分裂1次的时间是12～20分钟，如按每20分钟分裂1次计，则每小时可分裂3次，每昼夜可分裂72次，后代数为：4 722 366 500万亿个（重约4722t） （四）适应能力强，易发生变异；海洋深处的某些硫细菌可在10O℃以上的高温下正常生长，一些嗜盐细菌能在32％的盐水中正常活动。青霉素生产菌产黄青霉1943年每毫升发酵液只含约20单位的青霉素。经过多年的变异积累，该菌目前每毫升发酵液青霉素含量已接近10万单位。 （五）分布广泛，种类繁多; 微生物在自然界分布极为广泛。土壤、空气、河流、盐湖、高山、冰川、油井、地层下以及动物体内外等各处都有大量的微生物在活动。迄今为止，我们所知道的动物约有150万种，植物约有50万种，微生物约有15万种。 微生物的种类多主要表现在以下方面：（1）物种的多样性（2）微生物的生理代谢类型多（3）代谢产物种类多（4）遗传基因的多样性（5）生态类型的多样性 3为什么说巴斯德是微生物学的真正奠基人？ 巴斯德的贡献： （1）用“胚种学说”否定了“自然发生说”； （2）证实发酵是由微生物引起的； （3）证实了免疫学说，为人类防病、治病作出重大贡献； （4）发明了“巴斯德消毒法”。 4科赫在微生物学研究方法和病因论方面有何贡献？ 科赫的贡献： （1）创立了一套微生物分离培养技术，如配制培养基技术和用固体培养基分离纯化微生物的技术； （2）具体证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌和肺结核病的病原菌； （3）提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——柯赫法则。 柯赫规则： （1）在患某一特殊病的动物体内发现某种微生物，而在健康个体中并不存在； （2）自病体分离出微生物并在动物体外纯培养成功； （3）将此微生物的纯培养接种到敏感的动物体后，应当出现原来这一特殊病害的疾病症状；（4）从再接种的病体可重新分离出这个微生物。
第三章微生物的分类及其分类方法 本章的核心内容是微生物的分类单元、微生物的命名法则；目前国内外最权威的原核微生物分类系统；用于分离菌株分类鉴定的方法和技术；微生物菌种的保藏。 微生物的分类单元有界、门、纲、目、科、属、种；微生物的命名依林奈氏双名法法则进行；《伯杰氏细菌学鉴定手册》，《伯杰氏系统细菌学手册》是当今进行细菌鉴定的最权威的手册；微生物分离菌株的分类鉴定有经典分类鉴定法、数值分类鉴定法、化学分类鉴定法、遗传学分类鉴定法， DNA中GC mol%分析、DNA-DNA杂交、DNA-rRNA杂交、16Sr RNA(16S rDNA)寡核苷酸的序列分析，微生物系统发育地位分析等不同层次的技术方法。微生物菌种的保藏对于研究和发酵生产都具有不可忽视的意义。保藏方法可依不同条件选择不同方法。 第一节微生物的分类单元和命名 分类是人类认识微生物，进而利用和改造微生物的一种手段，微生物工作者只有在掌握了分类学知识的基础上，才能对纷繁的微生物类群有一清晰的轮廊，了解其亲缘关系与演化关系，为人类开发利用微生物资源提供依据。 微生物分类学 (microbial taxonomy) 是一门按微生物的亲缘关系把它们安排成条理清楚的各种分类单元或分类群 (taxon) 的科学，它的具体任务有三，即分类(classification) 、命名 (nomenclature) 和鉴定 (identification) 。分类指的是根据相似性或亲缘关系，将一个有机体放在一个单元中。命名是按照国际命名法规给有机体一个科学名称。鉴定则是确定一个新的分离物是否归属于已经命名的分类单元的过程。因此，概括来说，微生物分类学是对各个微生物进行鉴定，按分类学准则排列成分类系统，并对已确定的分类单元进行科学命名的科学。 一、微生物的分类单元 微生物的主要分类单位，依次为界 (kingdom) 、门（ phylum 或 division ）、纲(class) 、目 (order) 、科 (fami1y) 、属 (genus) 、种 (species) 。其中种是最基本的分类单位。具有完全或极多相同特点的有机体构成同种。性质相似、相互有关的各种组成属。相近似的届合并为科。近似的科合并为目。近似的目归纳为纲。综合各纲成为门。由此构成一个完整的分类系统。以下以柠檬浮霉状菌为例加以说明。
实验一微生物得形态与结构观察 一、实验目得 1、掌握普通光学显微镜得正确使用方法； 2、掌握革兰氏染色法得原理及操作步骤; 3、在显微镜下观察细菌、酵母菌等得个体形态与结构. 二、基本原理 普通光学显微镜就是由一组光学系统与支持及调节光学系统得机械系统组成。 普通光学显微镜就是由一组光学系统与支持及调节光学系统得机械系统组成. 机械系统包括镜座、镜臂、镜台、物镜转换器、镜筒及调节器等。镜座就是显微镜得基座，使显微镜能平稳地放置在桌子上；镜台又称载物台,就是放置标本得地方，镜台上有压片夹用以固定被检标本,标本移动器可使标本前后与左右移动，有得标本移动器带有游标尺,可指明标本所在位置；镜臂用以支持镜筒，也就是移动显微镜时手握得部位；镜筒就是连接目镜与物镜得金属筒,镜筒上端插入目镜,下端与物镜转换器相接;物镜转换器安装在镜筒得下端，其上装有3～5个不同放大倍数得物镜，可以通过转动物镜转换器随意选用合适得物镜;调节器安装在镜臂基部，就是调节物镜与被检标本距离得装置，通过调节粗、细螺
旋便可清晰地观察到标本。 光学系统主要包括目镜、物镜、聚光镜与反光镜等，较好得显微镜有内光源。目镜一般由两块透镜组成，不同得目镜上刻有5×、１0×与15×等字符以表示该目镜得放大倍数；物镜就是显微镜中很重要得光学部件，由多块透镜组成,根据物镜得放大倍数与使用方法得不同，分为低倍物镜（４×、10×与２0×）、高倍物镜（4０×与45×)与油镜（９0×、９5×与100×)等。被检物体经显微镜得目镜与物镜放大后得总放大倍数就是物镜得放大倍数与目镜放大倍数得乘积。 形态观察主要包括群体形态与个体形态观察两方面。细菌个体微小，且较透明，必须借助染色法使菌体着色,显示出细菌得一般形态结构及特殊结构，在显微镜下用油镜进行观察。根据细菌个体形态观察得不同要求,可将染色分为简单染色、鉴别染色与特殊染色。本实验主要观察微生物得个体形态，掌握在细菌学中广泛使用得重要鉴别染色法—-革兰氏染色法；通过此染色，可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌(G＋)与革兰氏阴性菌（Ｇ—）两大类。 革兰氏染色有着重要得理论与实践意义，其染色原理就是利用细菌得细胞壁组成成分与结构得不同。革兰氏阳性菌得细胞壁肽聚糖层厚，交联而成得肽聚糖网状结构致密,经乙醇处理发生脱水作用，使孔径缩小，通透性降低，结晶紫与碘形成得大分子复合物保留在细胞内而不被脱色，结果使细胞呈紫色。而革兰氏阴性菌肽聚糖层薄，网状结构交联疏松，而且类脂含量较高，经乙醇处理后，类脂被溶解,细胞壁孔径变大,通透性增加,结晶紫与碘得复合物被溶出细胞壁，因而细胞被脱色，再经蕃红复染后细胞呈红色。 三、仪器与药品 仪器:显微镜酒精灯接种柄接种环洗瓶载玻片滤纸镜油擦镜纸无菌水烧杯 药品:结晶紫95%乙醇草酸铵碘碘化钾蕃红二甲苯降酚细菌(培养18～２４小时得斜面菌种)细菌酵母菌等标本片。 草酸铵结晶紫染液：A液结晶紫２。０ｇ，９5%乙醇２0mL；B液草酸铵0．8g，蒸馏水8０ｍL。将A与Ｂ充分溶解后混合静止２４小时过滤使用。 革氏染液：碘1g ，碘化钾２g ,蒸馏水300mL。 蕃红染液：２、5%蕃红得乙醇溶液１0mＬ，蒸馏水１00mL混合过滤。 脱色液:95％乙醇。 四、实验步骤 (一）、显微镜得使用