1目的
规范HIV抗体检测的结果解释、报告、追踪和处理的工作。
2适用范围
HIV抗体筛查、复检、确认检测工作
3 职责
3.1 检测人员负责检测原始记录的记录，检测报告的编制、审核，检测样品的登记等工作。
3.2 质量监督员负责监督，并做好相关的记录。
3.3 授权签字人负责检测报告的签发。
4 工作规程
4.1结果解释:
4.1.1 HIV抗体筛查试验阴性:
报告“HIV抗体阴性”，表示受检者未受HIV病毒感染。但由于HIV感染到能在血液中查到HIV抗体有一个“窗口期”，因此建议3个月后复查以排除感染“窗口期”。
4.1.2“窗口期”:
是指从被感染到身体产生足够多的特定抗体的这段时间，“足够多”是指能被我们当前的测试手段检测出来。人被感染后身体会制造抗体来对抗病毒，当身体产生足够多的抗体后，抗体测试将呈阳性。
4.1.3 HIV抗体筛查试验阳性:
不能出具阳性报告，需进行HIV抗体确证试验。如HIV抗体确证试验为阳性（确证试验结果判定参见《HIV抗体确证检测操作规程》），则报告“HIV 抗体阳性”，表示受检者已受到HIV病毒感染。
4.1.4 HIV抗体确证试验结果不能肯定则报告“HIV抗体不确定”。不确定结果是指在进行HIV抗体检测的确认试验时，试验条带上出现了蛋白带型，但按照《全国艾滋病检测工作规范》的要求，这些带型不足以诊断为HIV抗体阳性。出现不确定结果应随访复检，每3个月随访复检1次，连续2次，共6个月。如果检测时暴露时间已超过3个月，则在3个月后随访1次即可。将前后2份样品同时检测，仍呈不确定或阴性则报告HIV抗体阴性，表明受检者没有感染；如果在随访期间发生带型进展，符合HIV抗体阳性判定标准则报告HIV-1或HIV-2抗体阳性。表明受检者已经感染HIV。
4.1.5产生检测结果不确定的原因大致有：
(1) 感染还处于窗口期：从HIV进入体内到检测这段时间还不够长，因此血清还没有形成典型的抗体反应；
(2) 艾滋病进展到终末期，抗体水平下降；
(3) 存在HIV2型或其他亚型（例如O亚型），而所使用的检测试剂无法检测；
(4) 其他非病毒蛋白抗体的交叉反应：自身免疫性疾病、某些恶性疾病、怀孕、输血或器官移植等情况下，身体可以产生一些抗体，其反应与HIVP24核心蛋白抗体引起的反应很相似；
(5) 以前接种过HIV（试验性）疫苗。
4.2 结果报告
4.2.1门诊的HIV检测阴性报告为检验报告单，检测人员根据检测原始记录将检测结果直接填写在体检单相应项目栏上，在检测人员栏加盖印章，校（审）核人员对检测结果校（审）后在校（审）栏加盖印章。并在HIV筛查检测登记本记录检测结果。体检单送相关门诊科室。
4.3.2复检、确认样品的检测报告的编制、审核、签发执行《检测报告的编制和管理程序》
4.2.3 为保证受检者个人隐私安全不提供电话查询检测结果。
4.3追踪和处理程序
对确证试验阳性的受检者由性艾科对作流行病学个案调查，并会同卫生行政部门作相应的处理。
5相关文件
《全国艾滋病检测技术规范》2009年版
6相关记录
6.1 HIV抗体筛查报告
6.2 HIV抗体复检检测单
6.3 HIV抗体确认检测报告单
1 目的 为规范我省艾滋病检测实验室资质认定评审工作，明确资质认定的范围和形式；保证资质认定工作规范及评审结果客观、公正和准确，提高省艾滋病检测实验室管理工作质量，特制定本规程。 2 范围 本规程适用于湖北省艾滋病检测实验室资质认定工作，可供全省各级验收工作组相关工作人员和评审员使用。也可供各类艾滋病检测实验室在申请资质认定准备工作和日常管理中参考。 3引用文件及技术资料 1)《全国艾滋病检测工作管理办法》 2)《湖北省艾滋病检测工作管理实施办法》 3)《全国艾滋病检测技术规范》（2004年版） 4)《实验室生物安全通用要求（GB 19489－2004）》 5)《实验室资质认定评审准则》 6)《医学实验室质量和能力认可准则（CNAS-CL02:2006/ISO 15189:2007）》 7)《省疾病预防控制中心关于下发<湖北省艾滋病检测实验室相关操 作规程及检测工作记录（试行）>的通知》 4 艾滋病检测实验室的类型：分为艾滋病检测确证实验室和艾滋病检测筛查实验室两类，后者包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点三种。
5 组织管理 5.1湖北省卫生厅是全省艾滋病检测实验室管理资质认定的主管部门，负责全省艾滋病检测实验室的监督管理和发证工作。 5.2各级验收工作组 5.2.1省艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“省验收工作组”）设在省疾病预防控制中心质量技术管理办公室，负责受理全省艾滋病确证实验室、市州级疾病预防控制机构筛查中心实验室的申请、资料审核和安排初审，对已完成初审的初筛实验室安排现场评审。 5.2.2市、州卫生行政部门应成立市级艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“市级验收工作组”）负责受理本辖区艾滋病筛查实验室的申请、资料审核和安排初审，对已完成初审的艾滋病检测点安排现场评审。 5.2.3 县(市、区)卫生行政部门应成立县级艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“县级验收工作组”），负责受理辖区内艾滋病检测点的申请、资料审核和安排初审。 5.3 评审组 5.3.1 评审员管理 5.3.1 评审员的基本条件：从事艾滋病相关管理人员；从事与艾滋病检测相关的技术人员；大专以上学历或中级以上技术职称；热爱艾滋病检测实验室管理工作；卫生行政主管部门审核并经培训考核合格者。 5.3.2 评审员的基本素质要求 5.3.2.1 熟悉《全国艾滋病检测工作管理办法》、《省艾滋病检测工作管理实施办法》、《全国艾滋病检测技术规范》（2004年版）、《实验室生物安
HIV初筛实验室工作制度 1、本实验操作人员必要经省艾滋病初检技术培训学习合格后方可持证上岗。 2、严格遵守样本采集、保存制度；样品运送解决制度；遵守实验室操作、检 验成果报告解决和保密、实验室污染物废弃物以及工作人员防护消毒隔离制度。 3、积极参加上级实验室业务培训和技术考核。 4、必要参加省临检中心室间质量评价工作。 5、未尽事宜按科室实验室按科室工作制度和有关管理条例执行。
HIV抗体检测程序及其流程 1、血液标本验收合格后，用初筛试剂进行检测，如呈阴性反映，则作HIV抗体阴性报告； 2、初筛检测成果呈阳性反映标本，须进行重复检测。复检时用两种不同初筛检测试剂复测； 3、如两种试剂复检成果均呈阴性反映，则作HIV抗体阴性报告；如均呈阳性反映，或有一份阳性，该标本需送上级实验室加以进一步证明。送检时应将重新采集该受检者血液标本和原有血液标本一并送检。 4、检测成果鉴定和解决 对HIV抗体阳性者应做好征询、保密和报告工作。对HIV抗体阴性者，如近期有高危行为如性乱史、吸毒史、受血史，或有急性流感样症状等状况，为排除窗口期也许，建议每3个月复查一次，持续2次。对HIV抗体可疑对象要做好征询和随访工作。5、、反馈与报告程序 （一）初筛检测中发现HIV抗体阳性反映标本，应尽快(城区普通规定在48小时内，农村规定在96小时内)将血样连同原始实验资料（涉及厂家批号、试剂种类、有效期，如ELISA实验应附上阴性、阳性对照值，Cut off值及样品OD值）和送检化验单送卫生行政部门指定初筛中心实验室，再转送确认实验室，或直接送至HIV抗体确认实验室。送检化验单必要由初筛实验室一名直接实验操作人员和一名中级技术职称以上负责人员签名。初筛实验室不得向受检者宣布初检阳性反映成果； （二）做好标本收集与检测登记工作，每月5日按统一表格向卫生行政部门指定HIV抗体初筛中心实验室报告检测状况，如无HIV抗体中心实验室，则直接向省级HIV抗体确认中心报告。
临床免疫实验室检验过程中涉及传染或潜在传染性生物因子时，存在实验室生物安全危害风险，事先对检验过程中的生物安全风险进行评估，以做好风险的防范和控制。 一、实验分析前风险评估及风险控制 1、分离标本。 1）离心机的使用 ⑴使用前应保证离心机各零部件无松弛现象，用蒸馏水平管平衡待离心标本，小心放入离心机内，盖上防护板，打开电源，缓慢地将速度提升到所需的离心速度。⑵在离心机未完全停止之前，严禁打开防护板。⑶离心机使用后，将速度旋钮转到零速度档，将标本管取出待分析，并将平衡管取出，放回原位。 2）可能存在的风险及风险控制：离心管（含标本及平衡管） （1）离心机运行时发生离心管破裂时，应及时关闭电源，密闭防护板30min 以上使气溶胶沉降。 （2）戴橡胶手套、一次性口罩及帽子。 （3）使用镊子清理离心管碎片，用镊子夹着的棉花清理外溢液体。碎片及棉花分别按损伤性和感染性废弃物处理。 （4）离心桶、转轴和转子都应放在2000mg/L优氯净消毒液内浸泡30分钟以上，之后用75%乙醇去除有效氯残余，清水洗净，晾干。 （5）离心机腔用2000mg/L优氯净消毒液擦拭，30分钟后再用75%乙醇去除有效氯残余，湿布擦拭，风干。 （6）用可移动紫外灯消毒离心机腔及其它部件30分钟以上，紫外灯管置于被消毒物上方约80cm，灯管与台面平行。
以上情况发生后，应及时向实验室负责人及科室生物安全员报告，并做事故处理登记。 2、标本（真空采血管）开盖： 1）装有标本的真空采血管离心后需静置30分钟，旋转开启密封盖。 2）可能存在的风险及风险控制：开盖过程中产生气溶胶。 离心管开盖前须静置并在生物安全柜内用旋转方法开启密封盖。 二﹑实验分析中风险评估及风险控制 实验操作过程中，应做好工作防护措施并严格按照标准操作规程进行操作。如因操作失误，标本血清、反应试剂均可能污染皮肤粘膜、防护服、操作台面及使用的仪器设备（如安全柜、酶标仪、洗板机、水浴箱等），将对实验者造成严重危害，相关风险控制如下： 1、血清污染操作台面时，应用纸巾盖住污染位置，用金星消毒液由外向中心喷洒作用消毒30分钟后用纸巾擦拭干净： 2、血清及反应试剂污染使用的仪器设备，应立即用纸巾吸收污染的液体，因消毒液具有腐蚀性，改用75％酒精棉球消毒污染部位。 3、血清及反应试剂污染工作服后应及时更换并做好浸泡消毒处理。 4、血清及反应试剂污染皮肤时，应立即用流动水清洗污染皮肤；粘膜或破损皮肤受污染时，应及时采用无菌水冲洗，必要时采用消毒液进行消毒。粘膜或破损皮肤污染血液时，应填写职业暴露报告卡上报，对源头血液及暴露者进行相关检查，并进行追踪观察随访，如源头血液为艾滋病病毒感染时，按艾滋病职业防护程序进行。 所有实验过程中的废弃物及风险控制中的污染物品必须严格按照医疗废弃物分类处理、 三﹑可能遇到的紧急情况的风险评估及风险控制 当发生自然灾害(如地震﹑水灾等)或设施出现故障，如生物安全柜等关键设备出现故障或实验室内压力﹑气流发生逆转等事件时，有可能使血液等感染性材料外溢而对操作者﹑环境和后续的抢救清理人员的健康造成威胁。风险控制按相
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法） 1 试剂信息 试剂厂家：北京万泰生物药业股份有限公司 2 样本要求 2.1 本试剂使用样品为人血清或血浆，含有EDTA、柠檬酸钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本实验。 2.2 不能检测含悬浮纤维蛋白或聚集物，重度溶血的样品。 2.3 样品中应无微生物，可在2-8℃储存1周，长期储存应低温冻存，避免反复冻融。 2.4 使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品实验前需混匀。 3 检测步骤 3.1 配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。 3.2 编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照1型、2型各1孔、空白对照1孔。 3.3 加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100μL。 3.4 温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。 3.5 洗板：小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干。 3.6 加酶：每孔加入酶标试剂100μL，空白孔除外。 3.7 温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。 3.8 洗板：操作同步骤5。 3.9 显色：每孔加入显色剂A、B液各50μL，轻轻震荡混匀，37±1℃避光显色30±1分钟。 3.10 测定：每孔加入终止液50μL，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。 4 参考值 临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照A均值+0.12. 5 检验结果的解释 5.1 阴性对照孔A值≦0.10，阳性对照A值≧0.80，否则试验无效。 5.2 若有1孔阴性对照A值大于0.1应舍弃，若两孔或两孔以上阴性对照A值大于0.1，应重复试验。
5.3 阴性判定：样品A值<临界值（CUTOFF）者为HIV抗体阴性。 5.4 阳性判定：样品A值≧临界值（CUTOFF）者为HIV抗体阳性。（注意：初试阳性应重新取样双孔复试。复试阳性者应按《全国艾滋病检测技术规范》送HIV确证实验室进行确证实验。）
艾滋病检测筛查实验室基本标准
艾滋病检测筛查实验室基本标准 （一）艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。 1、人员条件 至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。 2、建筑条件：实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。 3、仪器设备条件 配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。 （二）艾滋病检测点。 1、人员条件：至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。 2、建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。 3、设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。
艾滋病检测筛查实验室职能 包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。艾滋病筛查中心实验室设在市（地）级疾病预防控制中心；艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。 1、艾滋病筛查中心实验室职能。 （1）负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病检测确证实验室。配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。 （4）负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导；协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作，给予技术支持和指导。 2、艾滋病筛查实验室职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （4）对自愿咨询检测工作提供技术支持。 3、艾滋病检测点职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （4）开展艾滋病自愿咨询检测工作。
HＩV抗体初筛实验室SOP文件 适用部门：检验科 目录 第一部分工作制度.............................................................................................................. - 1— 实验室工作制度 (1) HIＶ标本采集与接收登记制度１－?— 艾滋病实验室保密制度................................................................................................ — 2 －艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度２—?— 差错事故处理制度........................................................................................................ － 3 —报告单签发审核制度................................................................................................... － 3 －设备管理制度................................................................................................................ - 4－试剂管理制度................................................................................................................ — 4- 艾滋病筛查实验室安全防护制度5-?— 艾滋病病毒职业暴露预防处理方案5 －?— 第二部分标准操作规程...................................................................................................... — 8 － 第二章样品采集与处理........................................................................................... —８－第二章标准操作程序8 —?－ 一、北京金豪...................................................................................................... —8 — 二、上海科华生物................................................................................................. — 9 — 三、英科新创...................................................................................................... — 10- 第三章结果报告与注意事项.................................................................................... - 1２—第三部分设备ＳOP文件1３—?－ 一、多功能自动酶标仪RＴ—２100C................................................................... －1３- 二、KHB ST－36W洗板机1６-?— 三、电热恒温水箱18 —?- 第四部分流程图........................................................................................................... －２0- 一、HIV抗体筛查流程图２０－?- 二、暴露级别得评估.................................................................................................. — 21 －附件：血清加样表２2－?- 第一部分工作制度 实验室工作制度 1.室内应经常保持整洁，各种仪器设备要安装适当，器皿试剂摆放整齐,标志清
危害评估 一、HIV（人类免疫缺陷病毒） 人类逆转录病毒中已经造成最大的社会和医学影响的是HIV（人类免疫缺陷病毒）,该病毒在1984年被认定是造成严重免疫缺陷广泛流行的原因,这种疾病被称为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)，它是HIV相关条件范围内最严重的表现。未经治疗的感染者在感染后的最初几年中发展成AIDS的危险性估计每年1%~2%,此后为每年5%左右，最初10年的累计危险性为50%，几乎所有未经治疗的HIV感染者最终都会发展为AIDS。 HIV的传染需与含有感染细胞或血浆的体液接触。HIV可存在于含血浆或淋巴细胞的液体或渗出液中,尤其是血液,精液,阴道分泌液,母乳,唾液或伤口渗出液中。通过咳嗽或喷嚏产生的唾液或飞沫的传播极其罕见,这只是一种理论上的可能性。在工作场所,学校或家里的偶然或密切的非性接触不会传播HIV。大多数情况下是通过共用注射器或性关系，以及怀孕、分娩和母乳喂养等体液的直接交流而传播的。 HIV主要感染T淋巴细胞中的一个主要亚群——T辅助/诱导细胞（TH细胞）。HIV也可感染非淋巴细胞,如巨噬细胞,小神经胶质细胞,各种内皮和上皮细胞。HIV可粘附在淋巴结中的树突状细胞表面但不能侵入细胞。感染的结果是造成T细胞,B细胞,自然杀伤细胞,单核细胞,巨噬细胞的数量和功能均受到影响。但不论除CD4+淋巴
细胞以外的其他细胞功能是否异常,AIDS中的许多免疫功能异常似乎均可用CD4+淋巴细胞的辅助功能丧失而得到解释,也就是细胞介导免疫功能出现了危机。 二．乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒（HBV）简称乙肝病毒。是一种DNA病毒，属于嗜肝DNA病毒科，完整的乙肝病毒成颗粒状，也会被称为丹娜颗粒（Dane）。 我国根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将实验室生物安全防护水平分为四级。乙肝病毒（HBV）属于二级水平，是指能够安全操作，对实验室工作人员和动物致病性低的，对环境有轻微危害的病原微生物的生物安全水平。 乙型肝炎病毒（HBV）属嗜肝DNA病毒科。病毒的外衣壳，相当于一般病毒的包膜，HBV的表面抗原（HBsAg）即镶嵌于包膜的脂质双层中，内部了为一电子密度较大的核心结构，其表面即为病毒的内衣壳，内衣壳蛋白也具有抗原性，为HBV的核心抗原（HbcAg）（1）病毒致机体免疫应答低下（2）病毒发生变异HBV的PreC基因变异使不能翻译出HbeAg，病毒可逃逸机体原已形成的HBsAg的抗体与细胞免疫。（3）细胞介导的免疫病理损害（4）免疫复合物引起的病理损伤（5）自身免疫反应所引起的病理损害。特异性抗体：受乙肝病毒感染后，机体可产生三种抗体，抗HBs、抗HBc及抗HBe。抗HBs一般在感染HBV后4周出现，对乙肝有保护作用。 （1）乙肝病毒感染时可出现隐性感染或亚临床感染；
附件1： 艾滋病初筛实验室标准 一、必备条件?（一）人员条件?有3名以上得医技人员，其中中级卫生技术职称人员１名以上(采供血机构得HIV抗体检测人员须具有技师以上卫生技术职称）,从事病毒血清学检测技术工作2年以上，接受过国家或省级HIＶ抗体确认中心举办得HIＶ抗体检测学习班培训，并获得合格证书. （二)设备条件 有独立得实验室用房（或至少有专用得检测台）,污染区与清洁区要分开。从我国HIV抗体检测工作发展要求，要以酶联免疫法测定考虑所需得检测器材,包括酶标读数仪与洗板机、精确得移液器、专用得普通冰箱、低温冰箱、离心机以及各种消毒与污物处理设施、安全防护用品与恒温设施。 二、HIV抗体检测程序?(一)检测试剂?初筛用得HIＶ抗体检测试剂，必须就是HIV－１/２混合型,经卫生部批准或注册，经过批检检定合格，并在有效期内.常用得检测方法有固相酶联免疫吸附试验(Ｅnzyme Ｌinked Iｍmuｎo-ＳorbeｎｔAsｓay,ＥLＩSA）等。 （二）HIV抗体检测程序及其流程图? 1、血液标本验收合格后，用初筛试剂进行检测,如呈阴性反应,则作HIＶ抗体阴性报告;? 2、初筛检测结果呈阳性反应得标本，须进行重复检测。复检时用两种不同得初筛检测试剂复测; ３、如两种试剂复检结果均呈阴性反应，则作ＨＩV抗体阴性报告；如均呈阳性反应,或有一份阳性，该标本需送上级实验室加以进一步证实。送检时应将重新采集得该受检者血液标本与原有血液标本一并送检。 4、初筛检测得流程图?三、检测结果得判定与处理?对ＨIV抗体阳性者应做好咨询、保密与报告工作。对HIV抗体阴性者,如近期有高危行为如性乱史、吸毒史、受血史，或有急性流感样症状等情况，为排除窗口期得可能，建议每3个月复查一次,连续２次。对HIV抗体可疑得对象要做好咨询与随访工作.?四、反馈与报告程序 (一）初筛检测中发现ＨIV抗体阳性反应得标本，应尽快(城区一般要求在48小时内,农村要求在96小时内）将血样连同原始实验资料（包括厂家批号、试剂种类、有效期,如ELISＡ实验应附上阴性、阳性对照值，Cu ｔoff值及样品ＯD值）与送检化验单送卫生行政部门指定得初筛中心实验室，再转送确认实验室，或直接送至HIＶ抗体确认实验室。送检化验单必须由初筛实验室一名直接实验操作人员与一名中级技术职称以上得负责人员签名.初筛实验室不得向受检者宣布初检阳性反应结果;?（二)做好标本收集与检测登记工作，每月5日按统一表格向卫生行政部门指定得HIV抗体初筛中心实验室报告检测情况，如无ＨIV抗体中心实验室，则直接向省级HIＶ抗体确认中心报告. 附件2： 艾滋病初筛实验室安全措施?一、实验室要求?(一）有专用实验室(或至少有专用得检测台)，应划分清洁区与污染区(有条件得可设半污染区），并有明显标记，有充足得操作空间;?（二）实验室墙面、地面、台
一、艾滋病病毒的传播与致病 人类逆转录病毒中已经造成最大的社会和医学影响的是HIV（人类免疫缺陷病毒）,该病毒在1984年被认定是造成严重免疫缺陷广泛流行的原因,这种疾病被称为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)，它是HIV相关条件范围内最严重的表现。未经治疗的感染者在感染后的最初几年中发展成AIDS的危险性估计每年1%~2%,此后为每年5%左右，最初10年的累计危险性为50%，几乎所有未经治疗的HIV感染者最终都会发展为AIDS。 HIV的传染需与含有感染细胞或血浆的体液接触。HIV可存在于含血浆或淋巴细胞的液体或渗出液中,尤其是血液,精液,阴道分泌液,母乳,唾液或伤口渗出液中。通过咳嗽或喷嚏产生的唾液或飞沫的传播极其罕见,这只是一种理论上的可能性。在工作场所,学校或家里的偶然或密切的非性接触不会传播HIV。大多数情况下是通过共用注射器或性关系，以及怀孕、分娩和母乳喂养等体液的直接交流而传播的。 HIV主要感染T淋巴细胞中的一个主要亚群——T辅助/诱导细胞（TH细胞）。HIV也可感染非淋巴细胞,如巨噬细胞,小神经胶质细胞,各种内皮和上皮细胞。HIV可粘附在淋巴结中的树突状细胞表面但不能侵入细胞。感染的结果是造成T细胞,B细胞,自然杀伤细胞,单核细胞,巨噬细胞的数量和功能均受到影响。但不论除CD4+ 淋巴细胞以外的其他细胞功能是否异常,AIDS中的许多免疫功能异常似乎均可用CD4+ 淋巴细胞的辅助功能丧失而得到解释,也就是细胞介导免疫功能出现了危机。 从感染艾滋病病毒到发病有一个完整的自然过程，临床上将这个过程分为四期：急性感染期、潜伏期、艾滋病前期、典型艾滋病期。不是每个感染者都会完整的出现四期表现，但每个疾病阶段的患者在临床上都可以见到。四个时期不同的临床表现是一个渐进的和连贯的病程发展过程。 1、急性感染期窗口期也在这个时间。HIV侵袭人体后对机体的刺激所引起的反应。病人发热、皮疹、淋巴结肿大、还会发生乏力、出汗、恶心、呕吐、腹泻、咽炎等。有的还出现急性无菌性脑膜炎，表现为头痛、神经性症状和脑膜刺激症。末梢血检查，白细胞总数正常，或淋巴细胞减少，单核细胞增加。急性感染期时，症状常较轻微，容易被忽略。在被感染2-6周后，血清HIV抗体可呈现阳性反应。此后，临床上出现一个长短不等的、相对健
艾滋病检测实验室的安全防护措施和要求(一) 艾滋病检测实验室人员安全防护工作对预防及减少意外事故的发生，提供意外事故发生时的处理方法，明确制定“艾滋病实验室安全防护和要求”是十分必要的。 1艾滋病检测实验室的安全操作和防护措施除做好对临床实验室10条要求外，还应做到以下8点： 1.1具有高度的实验室全安防护意识： 1.1.1实验室审评专家验收考核时，应对设备和实验室安全时行评估，对提出的意见和指出的隐患要及时改进。 1.1.2建立本实验室的安全－标准操作程序，这些程序适用于现有实验条件，并与其他规则和操作过程相一致。 1.1.3无论是否有意外发生和新的危险出现，每年均要对安全－标准操作程序及实施情况进行检查。 1.2接受严格的培训和复训：所有工作人员都必须经过培训，并要接受实验管理人员的监督， 所有工作人员均有责任保证自己和他人的工作安全。 1.3注意个人保健： 1.3.1注意个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险性。很小的伤口和擦伤都应以防水的敷料覆盖。 1.3.2进实验室前要摘除首饰，修剪长的、带刺的手指甲，以免刺破手套。 1.3.3进入实验室应穿隔离衣、戴手套，必要时戴两层手套和防护眼镜。 1.3.4切忌用嘴吸液，避免用锐利的器材和玻璃器皿，以减少刺伤机会。 1.3.5在脱去隔离衣，离开实验室前必须洗手。 1.4人员： 1.4.1实验室工作人员只限于被批准的、按艾滋病检测工作规范培训合格的人员。实验室工 作人员要有安全防护意识，熟悉生物安全知识和消毒技术。 1.4.2在安排工作人员的实验室区域时，要根据其工作的各类和所涉及的生物试剂，对实验室环境做好安全检查。 1.4.3严格执行实验室工作人员年度采血检测HIV抗体和备案制度。 1.5血清及其他体液样品：所有的样品均应严格按要求妥善保存，HIV抗体阳性样品应做好标记单独保存。 1.6带入及带出实验室的物品： 1.6.1所有带入实验室的包裹都应经过检查。 1.6.2装有样品、细菌或病毒株及有毒物的包裹应在安全柜或其他适当的消毒装置内打开。 1.6.3在将HIV/AIDS样品转到其他实验室时，实验室负责人和指定人员应确定样品送达哪个实验室。 1.6.4向实验室运送样品时，应防止对工作人员、患者或环境造成污染。 1.6.5应将样品放入可靠、安全防漏的容器中运输。所有样品应装入密封塑料管内，样品管外面套上塑料袋，一并装入有缓冲垫的冷藏瓶内，做好标记。 1.6.6护送者应了解接受者，并保证这些材料被转入安全位置，得到安全的处理。
HIV抗体检测标准操作规程（SOP文件） 1、目的： 为了规本卫生院艾滋病检测点的正常运行，保证艾滋病抗体检测的准确，确保实验室生物安全，特制定本操作规程。 2、适用围： 适用于本卫生院艾滋病抗体检测从标本的采集、处理、检测到报告的全过程。 3、职责： 各检测工作人员按标准操作规程进行艾滋病抗体检测，本院艾滋病检测工作领导小组负责对检测活动全过程及各项生物安全措施执行情况进行监督。 4、标准操作程序： 4.1样品的采集和处理 4.1.1样品的采集： 4.1.1.1血清样品采集：用真空采血管抽取5mL静脉血，室温下自然放置1-2小时，待血清凝固和血块收缩后在用4000rmp离心15min，吸出血清备用。 4.1.1.2抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。 4.1.1.3采样注意事项： 4.1.1.3.1采集样品应按临床采血技术规及试剂盒说明书要求进行。 4.1.1.3.2采集标本时应注意安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。 4.1.2样品的保存： 用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20℃以下，短期（1周）进行检测的样品可存放于2-8℃。 4.1.3样品的运送： 4.1.3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。样品应置于带盖的试管，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者、种类、采样时间。
4.1.3.2将试管放入专用带盖的容器，容器的材料要易于消毒。在试管的周围垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 4.1.4样品的接收： 4.1.4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。 4.1.4.2核对标本与送检单，检查样品管有无破损及遗漏。如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。 4.2检验方法和步骤 4.2.2快速检测法（胶体金法） 4.2.2.1原理 采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定血清样本中的HIV1+2抗体。 4.2.2.2操作步骤 4.2.2.2.1将标本平衡至室温。 4.2.2.2.2将所需数量的测试卡从包装盒中拿出平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上并编号（与样本编号相对应）。 4.2.2.2.3用微量加样器取试剂说明书规定的样本血清或血浆，加到测试卡的加样处。 4.2.2.2.4在试剂说明书规定的时间观察结果。 4.2.2.3结果判定： 4.2.2.3.1阳性：在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带。如果检测区的条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他厂家的试剂确认。 4.2.2.3.2阴性：只在对照区出现一条紫红色条带。 4.2.2.3.3无效：对照区未出现紫红色条带。 4.2.2.3.4注意：在规定的时间不论测试区的色带颜色深浅与否均应判为阳性。 4.3仪器的使用和维护 4.3.1设立常用仪器的维护制度，以保证正常运转；根据使用情况更换必要的部件： 4.3.2冰箱 定期检查温度并作好记录，必须每天检查和记录冷冻和冷藏室的温度。 4.3.3定期检查其他仪器设备。 4.4 HIV抗体筛查结果的记录、解释与报告 4.4.1筛查试验呈阴性反应出具HIV抗体阴性报告。 4.4.2筛查试验呈阳性反应，可出具“HIV抗体待复检”报告，不能出阳性报告。同时应尽快进行以下处理： 4.4.2.1填写HIV抗体筛查报告，经检测者、复核者和签发者审核签字。 4.4.2.2尽可能重新采集受检者的血样。
艾滋病毒危害评估报告 1．危害程度分类 1.1分类等级 根据《中华人民共和国传染病防治法》，艾滋病毒（HIV）属于乙类传染病。在卫生部2006年公布的《人间传染的病原微生物名录》中将艾滋病毒(Ⅰ型和Ⅱ型)列为危害程度第二类病原微生物。运输包装仅病毒培养物为A类，UN编号为UN2814。 1.2不同实验室操作生物安全实验室级别要求 根据《人间传染的病原微生物名录》要求：艾滋病血清学检测属于未经培养的感染材料的操作，应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。 2．背景资料 2.1一般生物学特性 HIV属逆转录病毒科慢病毒属，病毒颗粒呈球形，直径90 nm～130nm。病毒的核心呈中空锥形，由两条相同的单链RNA链、逆转录酶和蛋白质组成其RNA中含有gag、env 和pol基因以及6种调控基因〔tat， vif， vpr， vpx (vpu)， nef， rev〕。gag基因编码病毒的核心蛋白；pol基因编码病毒复制所需要的酶类(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)；env基因所编码的病毒包膜蛋白，是HIV免疫学诊断的主要检测抗原。调控基因编码的辅助蛋白，是调节病毒蛋白合成和复制; 核心之外为病毒衣壳，呈20 面体立体对称，含有核衣壳蛋白质。最外层为包膜，包膜上的糖蛋白有刺突状结构，是HIV与宿主细胞受体结合位点和主要的中和位点。 HIV是一种嗜T细胞和嗜神经细胞的病毒，侵入人体后选择性攻击T辅助细胞、脑组织细胞、脊髓细胞和周围神经细胞。当HIV在TH内大量生长繁殖，是TH大量破坏时，则发生细胞免疫缺陷，自身稳定和免疫监测功能丧失，不仅可发生一系列原虫、蠕虫、细菌、真菌和病毒等条件病原体感染，还可发生少见的恶性肿瘤，最终导致死亡。 现有两型HIV：HIV-1和HIV-2，它们主要区别在于包膜糖蛋白上。HIV是一种变异性很强的病毒，不同的毒株之间差异很大，甚至同一毒株在同一感染者体内仅数月就可以改变，使抗原中和抗体失去中和效能，这给HIV疫苗的研制造成很大困难。目前在全球流行的HIV-1毒株已出现三个组，即M、O和N 组，其中M组又可分为 A到J 10个亚型，而且亚型间的重组体已有发现。HIV-2现有A～F 6个亚型。目前也有学者根据病毒的生物学特性对HIV-1进行分群，如根据病毒与宿主细胞结合所利用的辅助受体的不同(CCR5、CXCR4)，分为R5和X4毒株；或根据宿主范围及复制特性不同，分为非合胞体诱导株(NSI)和合胞体诱导株(SI)；有毒力株和无毒力株；快/高型和低/慢型等。 2.2对外界环境的稳定性 HIV对外界抵抗力较弱，远较乙型肝炎病毒(HBV)对外界的抵抗力低得多，病毒离开人体后，常温下可存活数小时至数天，对热、乾燥敏感，不耐酸。60℃以上就可被灭活。因此，注射器具、医疗用具通过高温消毒、煮沸或蒸汽消毒完全可以达到消毒目的。HIV对化学品也十分敏感，常用的消毒剂如70%酒精、10%漂白粉、2%戊二醛、4%福尔马林等均能灭活病毒。 2.3致病性 HIV 具有嗜细胞特性，主要感染T 辅助细胞和单核巨噬细胞，它所引起的疾病临床表现十分复杂，以CD4＋T淋巴细胞进行性减少和免疫缺陷为特征，常伴有实质器官（脑、淋巴结和肺等）的炎性疾病、神经障碍和恶性肿瘤。感染HIV后的2－4周为急性期，突发病毒血症，30%－70%的感染者可能伴有流感样或单核细胞增生样症状。此后由于特异性细胞免疫的作用，病毒血症和临床症状基本消失，进入平均8－10年的无症期（或称潜伏期），此时病毒仍在复制，并不断减少和免疫功能逐渐下降。免疫系统
艾滋病检测筛查实验室基本标准 （一）艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。 1、人员条件 至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。 2、建筑条件：实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。 3、仪器设备条件 配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。 （二）艾滋病检测点。 1、人员条件：至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。 2、建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。 3、设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。
艾滋病检测筛查实验室职能 包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。艾滋病筛查中心实验室设在市（地）级疾病预防控制中心；艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。 1、艾滋病筛查中心实验室职能。 （1）负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病检测确证实验室。配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。 （4）负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导；协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作，给予技术支持和指导。 2、艾滋病筛查实验室职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （4）对自愿咨询检测工作提供技术支持。 3、艾滋病检测点职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （4）开展艾滋病自愿咨询检测工作。
艾滋病初筛实验室年终工 作总结 The latest revision on November 22, 2020
艾滋病初筛实验室年终工作总结在过去的一年里，我科艾滋病初筛实验室在上级卫生主管部门和疾控部门的领导下，在医院和科室主任的支持下，我们工作人员严格按照实验室的规范化管理要求进行各项工作，从提高实验室的检测技术水平，操作人员的业务水平入手，规范细致的做好检测的每一项工作。现将一年来的工作进行认真的分析总结，从中吸取经验和教训，从而在今后的工作中能逐步提高和改进。 一、认真学习HIV筛查实验室的各种规章制度，严格按照并执行各种规章制度。 二、开展HIV筛查试验的情况，全年共接收HIV筛查标本562份，无一例阳性标本，受血前检测占85%，孕产前检查占14%，其他就诊检测占1%。 三、开展HIV实验室规范化管理，积极改进检测工作 1、对照HIV筛查实验室管理办法，加强规章制度的健全和落实，健全了各种工作记录，使HIV筛查实验室工作走向规范化、法制化、程序化。 2、对工作人员加强医疗安全教育，特别是工作时的防护，结果的解释，质量控制、待复检标本上报的程序等。 3、对有放试剂、样品血清的冰箱应上锁，专人管理。 4、制作了标本转运盒，确保标本转运的安全。 5、开展实验室全面质量控制确保检验质量：进行了仪器校准，加样器校准，制作了HIV 临界质控血清，通过室内质量控制活动检验工作质量，并从中发现问题、解决问题。 6、废弃物处理 从HIV实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的样品，培养物和其他物品，均应视为感染性废弃物，处理应符合《实验室生物安全通用要求》.我科采用高压蒸汽消毒，121°C，保持15—20min. 7、实验室工作人员年度体检,采血检测HIV抗体,乙肝,甲肝,梅毒抗体,丙肝抗体等,并备案. 8、11月3日我科派出二人参加市级HIV初筛实验室培训班。
艾滋病毒危害性评估报告 1 危害程度分类 1.1分类等级 根据《中华人民共和国传染病防治法》，艾滋病毒（HIV）属于乙类传染病。在卫生部2006年公布的《人间传染的病原微生物名录》中将艾滋病毒(Ⅰ型和Ⅱ型)列为危害程度第二类病原微生物。运输包装仅病毒培养物为A类，UN编号为UN2814。 1.2不同实验室操作生物安全实验室级别要求 根据《人间传染的病原微生物名录》要求：艾滋病血清学检测属于未经培养的感染材料的操作，应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。 2 背景资料 2.1一般生物学特性 HIV属逆转录病毒科慢病毒属，病毒颗粒呈球形，直径90 nm～130nm。病毒的核心呈中空锥形，由两条相同的单链RNA链、逆转录酶和蛋白质组成其RNA中含有gag、env 和pol 基因以及6种调控基因〔tat， vif， vpr， vpx (vpu)， nef， rev〕。gag基因编码病毒的核心蛋白；pol基因编码病毒复制所需要的酶类(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)；env基因所编码的病毒包膜蛋白，是HIV免疫学诊断的主要检测抗原。调控基因编码的辅助蛋白，是调节病毒蛋白合成和复制; 核心之外为病毒衣壳，呈20面体立体对称，含有核衣壳蛋白质。最外层为包膜，包膜上的糖蛋白有刺突状结构，是HIV与宿主细胞受体结合位点和主要的中和位点。 HIV是一种嗜T细胞和嗜神经细胞的病毒，侵入人体后选择性攻击T辅助细胞、脑组织细胞、脊髓细胞和周围神经细胞。当HIV在TH内大量生长繁殖，是TH大量破坏时，则发生细胞免疫缺陷，自身稳定和免疫监测功能丧失，不仅可发生一系列原虫、蠕虫、细菌、真菌和病毒等条件病原体感染，还可发生少见的恶性肿瘤，最终导致死亡。 现有两型HIV：HIV-1和HIV-2，它们主要区别在于包膜糖蛋白上。HIV是一种变异性很强的病毒，不同的毒株之间差异很大，甚至同一毒株在同一感染者体内仅数月就可以改变，使抗原中和抗体失去中和效能，这给HIV疫苗的研制造成
HIV抗体初筛实验室SOP文件 适用部门：检验科 目录 第一部分工作制度- 1 - 实验室工作制度- 1 - HIV标本采集与接收登记制度- 1 - 艾滋病实验室保密制度- 2 - 艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度- 2 - 差错事故处理制度- 3 - 报告单签发审核制度- 3 - 设备管理制度- 4 - 试剂管理制度- 4 - 艾滋病筛查实验室安全防护制度- 5 - 艾滋病病毒职业暴露预防处理方案- 6 - 第二部分标准操作规程- 8 - 第二章样品采集与处理- 8 - 第二章标准操作程序- 9 - 一、北京金豪- 9 - 二、上海科华生物- 10 - 三、英科新创- 11 - 第三章结果报告与注意事项- 12 - 第三部分设备SOP文件- 14 - 一、多功能自动酶标仪RT-2100C- 14 - 二、KHB ST－36W洗板机- 16 - 三、电热恒温水箱- 18 - 第四部分流程图- 20 - 一、HIV抗体筛查流程图- 20 - 二、暴露级别的评估- 21 - 附件：血清加样表- 22 -
第一部分工作制度 实验室工作制度 1.室内应经常保持整洁，各种仪器设备要安装适当，器皿试剂摆放整齐，标志 清晰，有良好的通风设备。 2.实验室工作人员工作时一律穿制服，保持衣帽整洁，试验过程中应专心致志、 认真负责，坚守工作岗位，不得随意串岗、闲谈，保持实验室安静，下班离开实验室前要检查并关好水、电、门、窗等，注意实验室安全。 3.认真开展实验室质量控制工作，仪器设备应定期保养，有温度记录，检测标 本的保存要求符合规范要求。 4.实验室不得放置与测试无关的物品，水、温、湿度、光照、防震、防尘、防 噪声等，环境必须符合实验室的工作要求。 5.实验和楼道内必须配置足够的安全防火措施，并定期检查保养。 6.对不同属性、品种和含量水平的试样，应有足够的试验区域，予以分离检验， 尤其是已知具有生物危害的试样必须分离检验。防止损害工作人员健康和污染环境。 7.与检验无关人员不得进入实验室，外单位人员联系工作，一律在办公室接待。 8.实验结束后，应及时清理实验现场和用品，对染菌带毒的器具废弃物应严格 进行消毒无菌处理。 9.实验室内禁止吸烟、用餐和进食。 HIV标本采集与接收登记制度 1、采样前和接收标本时应核对病人身份，严格执行查对制度。 2、采血时应戴好手套、帽子、口罩。 3、HIV标本采集应建立详细的记录本，记录内容包括：送检单位、病人姓名、 门诊号、数量、种类（血清）、送样者、接收者或采集者。 4、采集后，应将HIV样本单独分装，勿与其它项目共用。