补骨脂提取物
西安金绿生物工程技术有限公司
0 2 9-81 321 49 5
[产品名称-KinGreen]: 补骨脂提取物
[英文名称-KinGreen]: Malaytea Scurfpea Fruit Extract [拉丁名称-KinGreen]: Psoralea bituminosa L.
[原料别名-KinGreen]: 故芷、骨脂，故子，故脂子，故之子，故之，故纸，怀故子，破故脂，破故纸（《药性论》），破故子，破骨子，婆固脂，补骨鸱（《本草图经》），黑故子，黑故纸，胡故子（《中药志》），胡韭子（徐表《南州记》），吉固子（《江西中药》），和兰苋，固子，固脂，川故子，吉故子，破固脂，胡韭子。
[产品来源-KinGreen]:补骨脂提取物来源为为豆科植物补骨脂的果实。
[原料形态-KinGreen]: 果实扁圆状肾形，一端略尖，少有宿萼。怀补骨脂长4-5.5mm，宽2-4mm，厚约1mm；川补骨脂较小。表面黑棕色或棕褐色，具微细网纹，在放大镜下可见点状凹凸纹理。质较硬脆，剖开后可见果皮与外种皮紧密贴生，种子凹侧的上端略下处可见点状种脐，另一端有合点，种脊不明显。外种皮较硬，内种皮膜质，灰白色；子叶2枚，肥厚，淡黄色至淡黄棕色，陈旧者色深，其内外表面常可见白色物质，于放大镜下观察为细小针晶；胚很小。宿萼基部
连合，上端5裂，灰黄色，具毛茸，并密布褐色腺点。气芳香特异、味苦微辛。
[原料分布-KinGreen]: 分布于山西、陕西、安徽、浙江、江西、河南、湖北、广东、四川、贵州、云南。
[ Product—Brand ]: 西安金绿-Xi’an KinGreen
[化学成分-KinGreen]: 含香豆精类、黄酮类、单萜酚类以及挥发油、皂式、多糖、类脂等成分。
[供应厂家-KinGreen]: 西安金绿生物工程技术有限公司[药理作用-KinGreen]: 1.对心血管系统的作用：1．1.增加心肌营养性血流量：以补骨脂、锁阳、黄精、狗脊、续断、赤芍等中药组成复方，做成煎剂，浓缩成3g（生药）/ml。实验取18-22g小鼠30只，雌雄兼用。随机分成对照组、给药Ⅰ、Ⅱ组各10只。给药组按120g/kg体重剂量灌胃。对照组给同体积生理盐水。给药后1.4小时，按0.1ml/kg体重剂量，自小鼠尾静脉注射RbCl溶液（约 6.6-6.9×10?cpm/0.1ml），2分钟内注射完毕，立即计时。30分钟注入饱和KCl溶液0.2-0.3ml。处死动物，取出心脏，以LKBr 计数器测量，计算心肌86Rb摄入率，表示心肌营养血流量，见表6。实验结果表明，复方补骨脂冲剂灌胃1小时，可显著增加小鼠心肌营养性血流量（P<0.01)，但给药时间延长至4小时，小鼠心肌营养性血流量的增加，已无统计学意义。用同样方法测定复方补骨脂冲剂对老年小鼠心肌营养性血
流量的影响，表明复方补骨脂冲剂可显著地增加老年小鼠心肌营养性血流量（P<0.001)，并使老年组与青年组接近（P<0.05)。1．2.对垂体后时素所致小鼠急性心肌缺血的保护作用：取体重18-22g小鼠30只，雌雄兼用，随机分成对照组、垂体后时素组及给药组各10只。对照组和垂体组1g生理盐水，喂药2.5小时后，垂体组和给药组分别自腹腔注射lμ/kg体重剂量垂体后叶素。30分钟后，测定各组小鼠心肌营养性血流量。结果表明复方补骨脂冲剂对垂体后叶素引起的小鼠急性心肌缺血有显著的保护作用。 2.对呼吸系统的作用：实验说明，补骨脂对由组胺引起的气管收缩有明显舒张作用，以加药后15分钟作用最强，但略逊于氨茶碱，两组与空白对照组解痉作用相比，差异非常显著。 3.光敏作用：3．1.补骨脂加黑光疗法对皮肤病损伤常见致病性真菌和细菌的抑制作用：用直径6mm滤纸片分别滴加药液（含补骨脂素1.0mg/2.0ml或异构补骨脂素 2.0mg/2.0ml）1.25、2.5、5.0、10.0、20.0?g。先置37℃干燥箱内1小时备用。应用沙伯氏培养基平碟接种真菌，营养琼脂平碟接种细菌。后将不同浓度药液滤纸片贴于各菌株的平碟上。真菌接种后先置26-28℃温箱内作用l小时，照黑光每天1次10分钟，连续6-14天。细菌接种后置37℃温箱内l小时，取出照光10分钟，再置温箱孵育24小时。另设不含药溶剂照光组，和含药不照光组，观察1-7天。结果表
明补骨脂素类药剂加黑光照射对各菌具不同程度抑菌作用。在最高药剂浓度下有不同的抑菌圈。此外对曲霉菌属抑菌圈为8-15mm，帚形菌为11-12，毛霉菌属为16-18，头孢子菌属为10-16等。另证明加药不照光和不加药照光组均无抑菌作用。3．2.异补骨脂素加黑光照射抗皮肤移植排斥效应：选用1年半龄健康家兔体重1.5-2.0kg，雌雄均有，每一对供、受体性别相同。分为5组：I组（对照组）：皮肤移植后，不服药，照光；Ⅱ组：移植后次日开始服药和照光；Ⅲ组：移植后第4天开始服药和照光；Ⅳ组：移植后次日开始服药，不照光；V组：皮肤移植后次日开始照光，不服药。皮肤移植取1.0cm2皮片两块，分别缝于另一只兔的受皮处，两块距离3.0cm，每组免之间交换移植皮片。药物为异构补骨脂素胶囊，每粒含异构补骨脂素2.0mg。每只兔每晚服1粒。照光用5支排列安装的20W国产黑光灯管，距移植区5.0cm，每只兔服药后2h照光30分钟，每日1次。移植皮肤存活时间见表11，最长观察时间为45天。移植皮肤观察：Ⅰ、Ⅳ、V组肉眼见移植后24-48h皮肤苍白、柔软；得第3天出现红润斑点；4-5天后部分皮片呈暗紫色、变硬；边缘有自身表皮再生；7-9天有3/4皮片色泽变暗、坏死；下面出现自身皮肤，经5-7天取皮片边缘切片，HE染色，显微镜下观察，真皮有明显围管性淋巴细胞浸润，小血管内充血，管腔内膜脱落，血栓形成或坏死。Ⅱ、Ⅲ组第3天则见皮肤
红润、柔软，逐渐增厚，10-20天恢复正常皮肤状态，观察25-30天取移植皮片边缘切片，HE染色，显微镜下观察，除真皮见少量围管性淋巴细胞外，无其他改变。3．3.对酪氨酸酶的激活作用：补骨脂95%乙醇提取物对酪氨酸酶有明显的激活作用，可使黑色素生成的速度和数量增加。补骨脂素和异补骨脂素亦能促进皮肤黑色素的合成，并使之沉积于皮下。 4.对免疫系统的作用：4．1.取体重250-350g雌性Wister纯种大鼠15只，随机分成对照组（8 只）、给药组（7只），给药组按20g/kg体重剂量灌服复方补骨脂冲剂（由补骨脂、锁阳、黄精、狗脊、续断、赤芍等中药组成，做成煎剂，浓缩成3g（生药）/ml）。对照组给等体积的生理盐水。10天后，自大鼠腹主动脉取血1ml，注入无菌肝素抗凝青霉素瓶中，在无菌室内，按改进后的3H-TdR 掺入法，测定各组大鼠细胞免疫功能。同时计数大鼠白细胞总数，并制血片计数白细胞分类百分率，实验证明，复方补骨脂冲剂可显著提高大鼠白细胞百分率（P<0.02)，降低中性白细胞百分率，从而明显增强大鼠细胞免疫功能（P<0.01)。4．2.取昆明小白鼠，体重18-22g，雌雄兼用。共分4组，正常组饲养条件与其它相同，但不用药，其余3组腹腔注射氨基甲酸乙酯1mg/g诱发肺腺癌，其中对照给予致癌剂24h后，腹腔注射生理盐水0.2ml，隔周5次，16周共注射40次。补骨脂提取物组，每次给予补骨脂1mg（0.2ml）/20g；环磷酰
胺组，每次给环磷酰胺5μg（0.2ml）/20g。给药次数、时间和途径均与对照组相同，均于16周后测定巨噬细胞吞噬试验和E玫瑰花结试验。说明补骨脂有显著增强机体免疫功能的作用。5．抗肿瘤作用：体外试验，补骨脂素（250μg/ml）对小鼠肉瘤细胞有高效杀灭作用，其机制在于补骨脂素在暗处与肉瘤细胞DNA形成络合物和分子交链，从而抑制DNA合成。补骨脂素作用于人粘液表皮样癌MEC-1细胞后，其细胞中的大多数线粒体变性、空泡化、游离核糖体减少，游离核糖体减少，可见核溶解现象。6．抗生育和雌激素样作用：给雌小鼠宫内注射10mg异补骨脂素或0.00125-0.005ml补骨脂酚，均有较明显的抗早孕作用，但补骨脂酚的毒性反应较强。补骨脂粉有雌激素样作用，能增加阴道角化，增强子宫重量。7．抗衰老作用：补骨脂能不同程度的显著延长家蚕幼虫期和家蚕寿命。8．升高白细胞作用：动物实验表明，补骨脂对粒细胞的生长有促进作用，并能保护动物在注射环磷酰胺后引起的白细胞下降。9．其它作用：补骨脂水煎液对囊尾蚴有杀伤作用，40%浓度作用24小时，能杀死囊尾蚴88.O%；4%浓度时能杀死47.5%。40%的补骨脂水煎液对阴道毛滴虫亦有较强的杀灭作用，体外作用30分钟即可使虫体消失，效果强于大黄。此外，补骨脂素对多种出血症（如子宫、牙龈、鼻出血）均有止血作用
[名家论述-KinGreen]:《药性论》：主男子腰疼，膝冷囊湿，逐诸冷痹顽，止小便利，腹中冷。《日华子本草》：治冷劳，明耳目。《开宝本草》：主五劳七伤，风虚冷，骨髓伤败，肾冷精流及妇人血气堕胎。品汇精要》：固精气。《本草纲目》：治肾泄，通命门，暖丹田，敛精神。《玉楸药解》：温暖水土，消化饮食，升达脾胃，收敛滑泄、遗精、带下、溺多、便滑诸证。《医林纂要》：治虚寒喘嗽。
[产品配伍-KinGreen]: 肾虚阳痿、腰膝冷痛。补骨脂苦辛温燥，善壮肾阳暖水脏，常与菟丝子、胡桃肉、沉香等同用，治肾虚阳痿，如补骨脂丸（《和剂局方》）；与杜仲、胡桃肉同用，治肾虚阳衰，风冷侵袭之腰膝冷痛等，如青娥丸。
肾虚遗精、遗尿、尿频。补骨脂兼有涩性，善补肾助阳，固精缩尿，单用有效，亦可随证配伍它药。如治滑精，以补骨脂、青盐等分同炒为末服（《三因方》）；单用补骨脂炒，为末服，治小儿遗尿，如破故纸散（《补要袖珍小儿方论》）；与小茴香等分为丸，治肾气虚冷，小便无度，如破故纸丸（《魏氏家藏方》）。
脾肾阳虚五更泄泻。补骨脂能壮肾阳、暖脾阳、收涩以止泻，与肉豆蔻、生姜、大枣为丸，如二神丸（《普济本事方》）；或上方加吴茱萸、五味子，均治五更泄如四神丸（《证治准绳》）。
肾不纳气，虚寒喘咳。补骨脂补肾助阳，纳气平喘，多配伍胡桃肉、蜂蜜等，可治虚寒性喘咳，如治喘方（《医方论》）；或配人参、木香等治疗虚喘痨嗽（《是斋医方》）。
[保存方法-KinGreen]: 通风干燥，阴凉，避强光。
[产品包装-KinGreen]: 1KG/灭菌铝箔袋；25KG/纸板桶；西安金绿生物工程技术有限公司可根据客户要求对产品具体包装。
[有效期限-KinGreen]: 24个月
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识 一．目的要求 1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。 2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。 3．掌握香豆素类化合物的检识方法。 二．实验原理 补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。 1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。 无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。 2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。无色针状结 晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。 O O O O O O 补骨脂素 异补骨脂 三．实验内容 1.提取 称取补骨脂粗粉200g ，放入1000ml 烧瓶中，加入50％乙醇500ml ，热回流1h, 过滤，回收乙醇至无醇味，放置过夜，倾去上清液，得棕黑色粘稠物。将棕黑色粘稠物加80ml 甲醇溶解，加少许活性炭，回流l0min ，趁热抽滤，滤液回收甲醇至小体积，放置析晶 2.精制 将上述粗品加适量甲醇(3：100的比例)溶解，加少许活性炭，回流l0min ，
趁热抽滤，滤液放冷析晶，滤取结晶，少量甲醇淋洗，80oC以下干燥即得补骨脂素精品③。 3.补骨脂素和异补骨脂素的分离 取色谱用中性氧化铝40g，装于直径1.6cm*30cm的色谱柱中。取补骨脂素精品甲醇液约1-2ml，加样，以石油醚-乙酸乙酯（1：2）作洗脱剂，洗脱，每20ml 为一溜份，各溜份回收溶剂后，用薄层板检查，和标准品对比，于紫外光灯下观察荧光与颜色。 4.鉴定 1．呈色反应 (1)异羟肟酸铁反应取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入7％盐酸羟胺甲醇溶液2滴～3滴，再加10％氢氧化钾甲醇溶液2滴～3滴，于水浴上加热数分钟，冷却，用盐酸调至pH3～4，加1％三氯化铁试液1滴～2滴，观察溶液颜色。 (2)开环闭环试验取样品少许加稀氢氧化钠溶液1m1—2m1，加热，观察现象；再加稀盐酸试液几滴，观察所产生现象。 (3)荧光取样品少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，于紫外光灯下观察荧光与颜色。 2．薄层色谱鉴定 薄层板：硅胶G—CMC-Na板。 点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇液、补骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。 展开剂：石油醚一乙酸乙酯(2：3)。 展开方式：上行展开。 显色：在紫外光灯(365nm)下观察荧光斑点。 四．实验说明及注意事项 1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成分含量较高。 2．采用75%乙醇提取的产率较高，但因补骨脂中大量脂溶性物质被溶解，使提取液浓缩后过于粘稠，过滤较困难，增加实验难度，杂质多而沉淀外观差。采用50%乙醇提取，产率略低，但其它二方面较佳，特别是实验难度低，在生产上有较大优势，因此采用50%乙醇提取优于用75%乙醇。 3.补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构，具有内酯类成分的通性，可用碱提酸沉取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化反应和形成胶状物，致使难以滤过，降低收得率，故选用50％乙醇提取而不用碱溶酸沉法提取。 参考文献： 1张红莲,王雅楠,王建华.补骨脂的化学成分及药理活性研究概况[A]. 天然产 物研究与开发，2010，22：909-913, 918 2.罗志冬,郭晏华.补骨脂有效成分提取工艺的考察[A].中国新药杂志，2007，16(9)：705-708 3.陈业高,于丽丽,黄荣.补骨脂化学成分的分离与鉴定[A].云南化工，2005， 32(2)：3-5.
补骨脂素的提取分离与鉴定 三．实验内容 1．称取补骨脂粗粉50g，放入500ml烧瓶中，加入50％乙醇200ml，热回流1h, 过滤，回收乙醇至无醇味，抽滤，得棕黑色粘稠物。将棕黑色粘稠物加80ml甲醇溶解，加少许活性炭，回流 l0min，趁热抽滤，滤液回收甲醇，浓缩至小体积，放置析晶，抽滤，80oC干燥即得补骨脂素粗品，称重，计算提取率。 2精制 将上述粗品加适量甲醇(3：100的比例)溶解，加少许活性炭，回流l0min，趁热抽滤，滤液放冷析晶，滤取结晶，少量甲醇淋洗，80oC以下干燥即得补骨脂素精品③。 3补骨脂素和异补骨脂素的分离 4鉴定 (1)异羟肟酸铁反应取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入7％盐酸羟胺甲醇溶 液2滴～3滴，再加10％氢氧化钾甲醇溶液2滴～3滴，于水浴上加热数 分钟，冷却，用盐酸调至pH3～4，加1％三氯化铁试液1滴～2滴，观察 溶液颜色。（现象为30s 后出现红色（阳性反应））
(2)开环闭环试验取试样少许加稀氢氧化钠溶液1～2ml，加热，观察现象，再加 稀盐酸试剂数滴，观察所产生现象。 (3)荧光取试样少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，晾干后在紫外灯下观察 荧光。 (4)薄层色谱鉴定 薄层板：硅胶G—CMC-Na板。 点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇 液、补骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。 展开剂：石油醚一乙酸乙酯(6：1)。 展开方式：上行展开。 显色：在紫外光灯(365nm)下观察荧光斑点。 观察记录：记录图谱，计算Rf值。 附注：①原料最好用未炮制过的补骨脂种子，其中补骨脂素和异补骨脂素含量较高。 ②补骨脂含大量油脂，据文献报道，用50％乙醇或40％丙酮提取，方法简便,得率高，亲脂性杂质少，乙醇又较丙酮便宜，故选用50％乙醇提取。利用香豆素内酯类的特点，用碱提酸沉法，由于补骨脂中含大量油脂和糖类成分，易发生皂化反应和形成胶状物，难以过滤，得率低。 ③从补骨脂中提取得到的白色针状物，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物。
实验九补骨脂素、异补骨脂素的提取、分离和鉴定 补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea coryli folia L.的干燥成熟果实。具有补肾助阳、温中止泻之功。主治肾虚阳痿、遗精遗尿及腰膝冷痛，小便频数；外用治白癫风。补骨脂中含有数种香豆素和黄酮类成分，主要有补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂双氢黄酮(补骨脂甲素)、异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)、补骨脂次素等。药理研究证明，补骨脂甲素有明显扩冠作用，补骨脂素及异补骨脂素是具吸收紫外线性质的光敏性物质，因此是抗白癫风的有效成分，制剂有祛白素，补骨脂注射液、复方补骨脂酊等。 一、补骨脂中主要成分的物理性质 1．补骨脂素(psoralen) : C11H603, 无色针状结晶(乙醇)，mp189oC, ~ 190oC。溶于乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。UVλmax m( lgε ): 242sh (4.38), 247 (4.40), 291 (4.03), 330 (3.80)。IRνmax cm-1 : 1710, 1630, 1575,1259。 2．异补骨脂素(isopsoralen): C11 H603, 无色针状结晶，mp137oC, ~ 138oC。溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿；微溶于水、乙醚，难溶于石油醚。UVλmax m( lgε ): 245 (4.38), 297 (3.96)。IRνmax cm-1 : 1724, 1709, 1613, 1513, 1370, 1330, 1266, 1250, 1055, 999, 833, 747。 3．补骨脂双氢黄酮(补骨脂甲素)(bavachin, corylifolin): C20H2004, 无色结晶，mp191oC, ~ 192oC,[α]D为-29.1o（乙醇）。 4. 异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)(isobavachalcone, corylifolinin): C20H20O4,黄色针状结晶，mp154oC, ~ 156oC。 5.补骨脂次素（psoralidin）: mp292oC。 二、目的要求 1. 掌握用溶剂法提取呋喃香豆素类化合物的操作技术。 2. 通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱法的操作技术。 3. 掌握香豆素类化合物的鉴定方法。 三、基本原理 根据内酯类化合物在乙醇中溶解度大，水中溶解度小的性质，利用乙醇，从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素，并用活性炭进行脱色，最后利用两者的极性差异，用氧化铝干柱层析予以分离。 四、操作 (一)提取分离流程 (二)提取 1．超声波振荡提取
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离及鉴定 1结构及性质 补骨脂素和异补骨脂素属香豆素类化合物。 补骨脂素：（补骨脂内酯），C 11H 6O 3,无色针状结晶（乙醇），有挥发性，溶 于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于水，乙醚和石油醚。 异补骨脂素：C 11H 6O 3，无色针状结晶（乙醇），有挥发性，溶于甲醇，乙醇， 苯，氯仿，丙酮；微溶于水，乙醚；难溶于冷石油醚。 2提取方法的选择 用50%的乙醇浸提：称取补骨脂粗粉50g,用500ml 的乙醇冷浸提取，过滤， 水浴加热，回收乙醇，得浸膏。取浸膏置于烧瓶中，加甲醇 50ml 和适量活性炭， 回流15min ，趁热抽滤。浓缩滤液至小体积，放置沉淀，用甲醇淋洗沉淀。 3.补骨脂素和异补骨脂素的分离 取色谱用中性氧化铝40g ，装于直径1.6cm*30cm 的色谱柱中。取补骨脂精 品甲醇液约1-2ml ，加样，以石油醚-乙酸乙酯（1： 2）作洗脱剂，洗脱，每20ml 为一溜份，各溜份回收溶剂后，用薄层板检查，和标准品对比，于紫外光灯下观 察荧光与颜色。 4鉴定 a 呈色反应 （1）异羟肟酸铁反应：取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入 7%盐酸羟胺甲醇 溶液2?3滴，再加10%氢氧化钾甲醇溶液2?3滴，于水浴上加热数分钟，冷 却，用盐酸调至pH3?4,加1 %三氯化铁试液1?2滴，观察溶液颜色。 7 异补骨脂素 补骨脂素
(2)开环闭环试验：取样品少许加稀氢氧化钠溶液1?2m1,加热，观察现象；再加稀盐酸试液几滴，观察所产生现象。 (3)荧光：取样品少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，于紫外光灯下观察荧光与颜色。 b薄层色谱鉴定 薄层板：硅胶G-CMC-Na板。 点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇液、补骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。展开剂：石油醚一乙酸乙酯(2 : 3)。展开方式：上行展开。 显色：在紫外光灯(365nm)下观察荧光斑点。 (专业文档是经验性极强的领域，无法思考和涵盖全面，素材和资料部分来自网络，供参考。可复制、编制，期待你的好评与关注)
XXXXXXXXX有限公司成品质量标准及检验操作规程 1 品名： 1.1 中文名：补骨脂盐补骨脂 1.2 汉语拼音：Buguzhi Yanbuguzhi 2 代码：补骨脂盐补骨脂 3 取样文件编号： 4 检验方法文件编号： 5 依据：《中国药典》（2015年版一部）。 6 质量标准：
7 检验操作规程： 7.1 试药与试剂：乙酸乙酯、补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品、正己烷、氢氧化钾、甲醇、盐酸、硝酸、硝酸银、氨试液、二氧化锰、硫酸、碘化钾淀粉试纸、氢氧化钠滴定液、。 7.2 仪器与用具：电子天平、烘箱、水浴锅、马弗炉、硅胶G板、超声波清洗器、三用紫外分析仪、高效液相色谱仪、中药二氧化硫测定仪。 7.3 性状：取成品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。 7.4 鉴别： 7.4.1取本品制片置10×10显微镜下做显微观察。 7.4.2取本品粉末0.5g，加乙酸乙酯20ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品，加乙酸乙酯制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述两种溶液各2～4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的两个荧光斑点。 7.5 检查： 7.5.1水分
补骨脂不得过9.0%（附录15第二法）。 盐补骨脂不得过7.5%（附录15 第二法）。 7.5.1.2总灰分 补骨脂不得过8.0%（附录17）。 盐补骨脂不得过8.5%（附录17）。 7.5.1.3酸不溶性灰分 补骨脂不得过2.0%（附录17）。 7.5.1.4二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。 7.6 含量测定：照高效液相色谱法（附录8）测定。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（55：45）为流动相；检测波长为246nm。理论板数按补骨脂素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml各含20μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取2小时，放冷，转移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含补骨脂素（C11H6O3）和异补骨脂素（C11H6O3）的总量不得少于0.70%。
补骨脂素和异补骨脂素的提取分离和结构鉴定 摘要：补骨脂为中医治疗脾肾阳虚的传统补虚药物，其新型的生物活性已逐渐受到重视并被开发使用，同时对补骨脂所含活性成分的研究也逐步深入，为临床治疗提供新药物提供可靠依据。本文就有关补骨脂的研究作一综述。 关键词：补骨脂异补骨脂结构提取分离结构鉴定 中药补骨脂始载于<开宝本草>，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实，别名破故纸、黑故子、胡故子等，其性温，味辛，具补肾助阳之功效。在传统的中医临床上主治肾虚冷泻，阳萎，小便频数，腰膝冷痛，虚寒喘咳等病症。据现代研究表明，补骨脂还具有抗肿瘤，抗菌，抗骨质疏松，雌激素作用以及治疗白癜风等多重药理活性。补骨脂所具有的这些药理活性与其所含的活性成分有着密切联系。因此，近年来；国内外学者对补骨脂化学成分的提取分离及相关药理作用进行了多方面的研究，并取得一些新成果，为进一步开发利用补骨脂奠定了基础。 补骨脂的植物来源、品种、科属及分布 补骨脂来源为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的果实。属于补骨脂属，蝶形花科，约130种，分布于热带和亚热带地区，我国有补骨脂P.corylifoliaFranch.1种，产西南部，种子入药。分布于山西、陕西、安徽、浙江、江西、河南、湖北、广东、四川、贵州、云南。 临床应用和药理活性研究概况 1药理作用研究进展 1.1皮肤药理研究补骨脂素(PSO)口服后,增加皮肤对紫外线的敏感性,经UVA 照射,可与表皮角质层细胞的DNA形成光加合物,抑制DNA合成,减低表皮细胞的过速增生,其用于银屑病治疗的疗效已为临床所肯定。 PSO为一光敏感物质,PSO和8MOP均能促进皮肤黑色素的合成,并使之沉积于皮下。95%乙醇的补骨脂提取物对酪氨酸酶有明显的激活作用,而酪氨酸酶是人体内黑素合成的关键酶,因此认为补骨脂系通过提高酪氨酸酶的活性使黑色素的生成速度和数量增加 。 1.2抗癌活性研究有研究表明补骨脂具有抗癌活性,实验表明补骨脂素对KB细胞、Hela细胞、小鼠肉瘤、艾氏腹水癌等有抑制作用。该类物质能促进非特异性细胞进入分化,干扰细胞核有丝分裂,抑制DNA的合成,并与DNA形成交联,打开DNA双螺旋结构的氢键。 。 1.3对骨质的影响和性激素样作用补骨脂提取物能促进骨再生和重建。临床应用及现代药理研究结果都表明补骨脂确有强筋骨,防治骨质疏松的作用。采用体外成骨细胞试验法,将补骨脂的系统溶剂提取物作用于新生大鼠颅骨成骨细胞,通过检测成骨细胞的增殖率及碱性磷酸酶(ALP)的含量,筛选出补骨脂乙酸乙酯
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/a81496740.html, 简单香豆素的提取及生产工艺 作者：李莎莎拉生成 来源：《科学之友》2015年第07期 摘要：本文对香豆素的来源、总香豆素的提取方法和总香豆素的分离方法等进行了综 述，简单介绍了香豆素的各种提取方法和各种分离方法，最后对香豆素的应用做了简单介绍。 关键词：香豆素；提取分离方法；应用 中图分类号：S609 文献标识码：A 香豆素又称香豆精，是顺式邻羟基桂皮酸的内酯，具有芳香甜味。它的衍生物广泛分布于植物界。它们约有1000种，是重要的天然化合物之一。其中一部分是以苷类的形式而存在的，如香豆素、补骨脂素在植物体内是以邻羟基桂皮酸苷的形式存在的；又如香草木犀和樱桃叶中含有的香草木犀苷就是邻羟基桂皮酸的β-D-葡萄糖苷，它在酶的作用下，水解并环合成 内酯，因而徐徐地散发着香气。香豆素大多数来自高等植物，在豆科、兰科、芸香科、伞形花科、木犀科、茄科和菊科植物中比较多。少数来自低等植物、动物和微生物。香豆素是植物药材的一种有效成分，常见于伞形花科的许多药材中，如白芷、前胡、蛇床子、茴香等，还存在于补骨脂、佛手、秦皮、续随子、枳实等许多植物药材中。 一、总香豆素的提取方法 1 简单香豆素的水蒸气蒸馏法 对于挥发性较强的香豆素类，可用水蒸气蒸馏法或压榨法从药材中提取挥发油；然后再以水蒸气蒸馏除去挥发油，再以有机溶剂结晶和重结晶，可得总香豆素。 2 总香豆素的浸出方法 浸出总香豆素要根据药材中的成分，香豆素的结构和物理化学性质，选择浸出溶剂。在香豆素的提取生产中，可选用的溶剂有轻汽油、乙醚、苯、氯仿、乙醇、碱性水溶液。 （1）轻汽油浸出法。对药材中的非香豆素性脂溶性物质含量较少的，而且香豆素的极性较小的，可用轻汽油加热浸出法。例如，从白花前胡、白芷、蛇床子和独活中浸出呋喃香豆素，可用轻汽油浸出。如果药材中含有较多的脂肪油，可先以冷氢汽油浸出脂肪油，再以热轻汽油进行逆流浸出香豆素。 （2）乙醚浸出法。药材粉碎后用乙醚浸出，所得乙醚浸出液，如溶液太黏，加适当量乙醚稀释。然后将乙醚浸出液置冷冻室中放置，观察有无结晶析出，如果有结晶量较多，加温并
补骨脂素的提取分离与鉴定 三.实验内容 1.称取补骨脂粗粉50g，放入500ml烧瓶中，加入50 %乙醇200ml，热回流1h,过滤，回收乙醇至无醇味，抽滤，得棕黑色粘稠物。将棕黑色粘稠物加80ml甲醇溶解，加少许活性炭，回流l0min，趁热抽滤，滤液回收甲醇，浓缩至小体积，放置析晶，抽滤，80 oC干燥即得补骨脂素粗品，称重，计算提取率。 2精制 将上述粗品加适量甲醇（3 : 100的比例）溶解，加少许活性炭，回流l0min，趁热抽滤，滤液放冷析晶，滤取结晶，少量甲醇淋洗，80oC以下干燥即得补骨脂素精品③。 3补骨脂素和异补骨脂素的分离 工分离 取色谱用中性紈化铝口屮装于班泾l.UcmX28crn的干朴用色谱朴中.将补骨质索糟制品0.戛溶于少量甲职加入0据氧化锯拌匀.609烘干?加样. 以睪?石油K <4： I）并毎乳ml加入沾滴丙酮为恍脱制.展层至柱底.置紫外灯下观察.用刀片切取两段蓝色炎光色带*分别用甲酹回流握取,池过，澹液回收溶剂至小体积，静置析晶，抽滤，分别得到补咛脂索和特补忖脂蒸结品. 4鉴定 （1）异羟肟酸铁反应取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入7%盐酸羟胺甲醇溶液2滴?3滴，再加10 %氢氧化钾甲醇溶液2滴?3滴，于水浴上加热数分钟， 冷却，用盐酸调至pH3?4，加1 %三氯化铁试液1滴?2滴，观察溶液颜色。 （现象为30s后出现红色（阳性反应））
(2)开环闭环试验取试样少许加稀氢氧化钠溶液1?2ml，加热，观察现象，再加 稀盐酸试剂数滴，观察所产生现象。 (3)荧光取试样少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，晾干后在紫外灯下观察 荧光。 (4)薄层色谱鉴定 薄层板：硅胶G—CMC-Na 板。 点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇液、补 骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。 展开剂：石油醚一乙酸乙酯(6 ：1) 。 展开方式：上行展开。 显色：在紫外光灯(365nm) 下观察荧光斑点。 观察记录：记录图谱，计算Rf 值。 附注：①原料最好用未炮制过的补骨脂种子，其中补骨脂素和异补骨脂素含量较 高。 ②补骨脂含大量油脂，据文献报道，用50 %乙醇或40 %丙酮提取，方法简便,得率高，亲脂性杂质少，乙醇又较丙酮便宜，故选用50％乙醇提取。利用香豆素内酯类的特点，用碱提酸沉法，由于补骨脂中含大量油脂和糖类成分，易发生皂化反应和形成胶状物，难以过滤，得率低。 ③从补骨脂中提取得到的白色针状物，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物。
heinigo草药药理数据0230补骨脂素衍化物 heinigo草药药理数据0230补骨脂素衍化物 补骨脂素衍化物： 1、欧芹(欧芹酚甲醚/欧芹属素乙):野黄皮，软毛独活，蛇床子，山水芹菜，茵芋，白云花根，北细辛？独活，九里香，臭山羊，长春七，臭草，枸橘核，拐芹，热痱草（欧芹脑），草胡椒（欧芹脑），倒插花（欧芹脑），羌活（欧芹脑），药茴香（欧芹酸），茵陈蒿（欧芹脑）， 2、花椒毒素（xanthotoxin/xan-thotoxin）：云防风，防风，软毛独活，大活，大巢菜，东当归，长春七，臭草，臭山羊叶，朝鲜当归，补骨脂，白鲜皮（地上部分），白芷，白独活，白云花根，北细辛，杏叶沙参根，山麻黄，旱芹，牛尾独活，小茴香， 3、佛手柑内酯/佛手柑油烯：软毛独活，莳萝子，牛尾独活，香橼叶（油烯）？鹤虱，麻花（乌麻花：油烯），花椒（香椒子），旱芹，岩椒草，白芷，独活，臭草，臭山羊（叶），枸橘核（少量）， 声明： 本数据来自于我对自己搜集的上万种草药的现代医学药理数据的搜索查询。数据来源自《中国药典》《全国中草药汇编》《中药大辞典》《中华本草》四部现代医学药理著作。 本数据只供个人研究提供参考。提示研究者，应用有技能风险，你非要用，出现问题，笔者不承担任何责任。 本数据查询出的草药名字皆为现代医学药理数据中的中草药的学名。不要望文生义，也不要轻信使用。且本数据的查询是以单一“关键字”查询的，并非囊括所有的对症草药数据。若采用务必查询具体草药的专业现代医学药理数据进行验证。 说明1： 欧芹属素乙与佛手柑内酯同为呋喃香豆精类，皆属"光活性"物质，毒性较佛手柑内酯为大，而较花椒毒素为小。 1、花椒毒素是一个具有强光敏性的呋喃香豆素类天然化合物, 又名8-甲氧基补骨脂素。国外临床上主要用于补骨脂素类化合物加紫外光疗法(PUVA)治疗白癜风、牛皮癣等皮肤顽疾。近些年来发现花椒毒素对血液中多种DNA病毒和RNA病毒等有很好的灭活作用,另外,还可以诱导肿瘤细胞凋亡。 一种有效的CYP抑制剂。8MOP是一种有效的三环呋喃香豆素自杀抑制剂CYP（细胞色素P-450）。8-甲氧基补骨脂素作为5-OP、5-OH-P、DH-8MOP和补骨脂素对CYP2B1（细胞色素P-450 2B1）的抑制作用更强。已证实，甲氧沙林能完全抑制尼古丁（SC-21237）的代谢。该化合物具有抑制茶碱、咖啡因、己巴比妥和苯妥英钠代谢的作用。（提示：本段是机器翻译）2、欧芹属素乙，即欧前胡素。抗疟作用:欧前胡素对恶性疟原虫的IC50为2.4μg/mL，IC90为9.3μg/mL。
补骨脂提取物 西安金绿生物工程技术有限公司 0 2 9-81 321 49 5 [产品名称-KinGreen]: 补骨脂提取物 [英文名称-KinGreen]: Malaytea Scurfpea Fruit Extract [拉丁名称-KinGreen]: Psoralea bituminosa L. [原料别名-KinGreen]: 故芷、骨脂，故子，故脂子，故之子，故之，故纸，怀故子，破故脂，破故纸（《药性论》），破故子，破骨子，婆固脂，补骨鸱（《本草图经》），黑故子，黑故纸，胡故子（《中药志》），胡韭子（徐表《南州记》），吉固子（《江西中药》），和兰苋，固子，固脂，川故子，吉故子，破固脂，胡韭子。 [产品来源-KinGreen]:补骨脂提取物来源为为豆科植物补骨脂的果实。 [原料形态-KinGreen]: 果实扁圆状肾形，一端略尖，少有宿萼。怀补骨脂长4-5.5mm，宽2-4mm，厚约1mm；川补骨脂较小。表面黑棕色或棕褐色，具微细网纹，在放大镜下可见点状凹凸纹理。质较硬脆，剖开后可见果皮与外种皮紧密贴生，种子凹侧的上端略下处可见点状种脐，另一端有合点，种脊不明显。外种皮较硬，内种皮膜质，灰白色；子叶2枚，肥厚，淡黄色至淡黄棕色，陈旧者色深，其内外表面常可见白色物质，于放大镜下观察为细小针晶；胚很小。宿萼基部
连合，上端5裂，灰黄色，具毛茸，并密布褐色腺点。气芳香特异、味苦微辛。 [原料分布-KinGreen]: 分布于山西、陕西、安徽、浙江、江西、河南、湖北、广东、四川、贵州、云南。 [ Product—Brand ]: 西安金绿-Xi’an KinGreen [化学成分-KinGreen]: 含香豆精类、黄酮类、单萜酚类以及挥发油、皂式、多糖、类脂等成分。 [供应厂家-KinGreen]: 西安金绿生物工程技术有限公司[药理作用-KinGreen]: 1.对心血管系统的作用：1．1.增加心肌营养性血流量：以补骨脂、锁阳、黄精、狗脊、续断、赤芍等中药组成复方，做成煎剂，浓缩成3g（生药）/ml。实验取18-22g小鼠30只，雌雄兼用。随机分成对照组、给药Ⅰ、Ⅱ组各10只。给药组按120g/kg体重剂量灌胃。对照组给同体积生理盐水。给药后1.4小时，按0.1ml/kg体重剂量，自小鼠尾静脉注射RbCl溶液（约 6.6-6.9×10?cpm/0.1ml），2分钟内注射完毕，立即计时。30分钟注入饱和KCl溶液0.2-0.3ml。处死动物，取出心脏，以LKBr 计数器测量，计算心肌86Rb摄入率，表示心肌营养血流量，见表6。实验结果表明，复方补骨脂冲剂灌胃1小时，可显著增加小鼠心肌营养性血流量（P<0.01)，但给药时间延长至4小时，小鼠心肌营养性血流量的增加，已无统计学意义。用同样方法测定复方补骨脂冲剂对老年小鼠心肌营养性血
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取、分离和检识一、实验目的： 在补骨脂药材中提取、分离并检识补骨脂素和异补骨脂素 背景：中药补骨脂始载于<开宝本草>，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实，其性温，味辛，具补肾助阳之功效。在传统的中医临床上主治肾虚冷泻，阳萎，小便频数，腰膝冷痛，虚寒喘咳等病症。据现代研究表明，补骨脂还具有抗肿瘤，抗菌，抗骨质疏松，雌激素作用以及治疗白癜风等多重药理活性。补骨脂所具有的这些药理活性与其所含的活性成分脂素和有着密切联系。其活性成分中香豆素类化合物主要有呋喃香豆素类和拟雌内酯类两种，前者主要含补骨脂素、异补骨脂素等。 二、补骨脂素和异补骨脂素的化学结构与性质： 1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。 2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
三、实验原理 本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。 四、实验内容
检识鉴定 1）.外观：两种方法得到的晶体都呈白色针晶，且在uV灯下显蓝色荧光。 2）.异羟肟酸铁反应：分别取上述晶体各少许，加乙醇1ml溶解．加6d盐酸羟胺的饱和乙醇液混匀后加人6dKoH的饱和乙醇液，水浴加热10rain，冷却，用5HC1使呈酸 性(pH6左右)沿壁滴10FeCl3溶液30s后出现紫红色(反应阳性)。 3）mp：50%晶I：136．6～138．6℃50%晶II：162．8～163．8℃75%晶I：136．9～138．8℃75%晶II：l62．8～l64．0℃ 4）薄层色谱检识： 薄层板：硅胶G-CMC-Na 板试样：补骨脂素乙醇液 异补骨脂素乙醇液 对照品：补骨脂素对照品乙醇液 异补骨脂素对照品乙醇液 展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1） 晾干，置254nmUV灯下观察，相同位置的斑点显相同颜色的荧光。 五、参考文献： 【1】曹金一，刘京晶，黄文华，郭宝林. 补骨脂药理作用与临床应用研究进展. 中药药理与临床,2008,24(6) 【2】张红莲, 王雅楠, 王建华. 补骨脂的化学成分及药理活性研究概况。天然产物研究与开发, 2010,（22） 【3】刘志林,张相年,赵树进,周日笑. 补骨脂中补骨脂素的提取及纯化。第一军医大学学
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分 离及鉴定 令狐文艳 1结构及性质 补骨脂素和异补骨脂素属香豆素类化合物。 补骨脂素：（补骨脂内酯），C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥发性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于水，乙醚和石油醚。 异补骨脂素：C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥发性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于水，乙醚；难溶于冷石油醚。 2 提取方法的选择 用50%的乙醇浸提：称取补骨脂粗粉50g，用500ml的乙醇冷浸提取，过滤，水浴加热，回收乙醇，得浸膏。取浸膏置于烧瓶中，加甲醇50ml和适量活性炭，回流15min，趁热抽滤。浓缩滤液至小体积，放置沉淀，用甲醇淋洗沉淀。 3.补骨脂素和异补骨脂素的分离 取色谱用中性氧化铝40g，装于直径1.6cm*30cm的色谱柱中。取补骨脂精品甲醇液约1-2ml，加样，以石油醚-乙酸乙酯（1：2）作洗脱剂，洗脱，每20ml为一溜份，各
溜份回收溶剂后，用薄层板检查，和标准品对比，于紫外光灯下观察荧光与颜色。 4.鉴定 a呈色反应 (1)异羟肟酸铁反应：取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入7％盐酸羟胺甲醇溶液2～3滴，再加10％氢氧化钾甲醇溶液2～3滴，于水浴上加热数分钟，冷却，用盐酸调至pH3～4，加1％三氯化铁试液1～2滴，观察溶液颜色。(2)开环闭环试验：取样品少许加稀氢氧化钠溶液1～2m1，加热，观察现象；再加稀盐酸试液几滴，观察所产生现象。 (3)荧光：取样品少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，于紫外光灯下观察荧光与颜色。 b薄层色谱鉴定 薄层板：硅胶G-CMC-Na板。 点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇液、补骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。展开剂：石油醚一乙酸乙酯(2：3)。展开方式：上行展开。 显色：在紫外光灯(365nm)下观察荧光斑点。
补骨脂 Buguzhi 【药名】补骨脂 【拉丁名】Fructus Psoraleae 【别名】骨脂、故子、胡韭子、婆固脂、破故纸、补骨鸱、黑故子、胡故子、吉固子、黑故子。 【历史】本品始载于《雷公炮炙论》。《开宝本草》云：“生广南诸州及波斯国。”补骨脂，乃梵语“Vakuci”的音译名，其它亦为近音字异之译名。《药性论》曰：“主男子腰疼、膝冷、囊湿。”《日华子草本》谓：“兴阳事，治冷劳，明耳目。”《本草品汇精要》载：“固精气。”就其药性，《雷公炮炙论》云：“性本大燥，毒。”之后历代本草均言无毒。现代本草亦不标记毒性。 【基原】豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L. 的干燥成熟果实。 【分布】分布于山西、陕西、安徽、浙江、江西、河南、湖北、广东、四川、贵州、云南等地。 【采收加工】秋季果实成熟时，随熟随采，割取果穗，晒干，打出种子。 【炮制】净制：簸净杂质，洗净，晒干；盐制：盐补骨脂，取净补骨脂，用盐水拌匀，稍润，炒至略鼓起，晾干（每100斤加盐2斤半用开水化开）。 【性味归经】辛、苦，温。归肾、脾经。 【配伍】暂无 【功能主治】温肾助阳，纳气平喘，温脾止泻；外用消风祛斑。用于肾阳不足，阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝冷痛，肾虚作喘，五更泄泻；外用于白癜风；斑秃。 【用法用量】6~10g。外用20%~30%酊剂涂于患处。 【使用注意】 1.阴虚火旺者忌服。 2.《本草经疏》：凡病阴虚火动，梦遗，尿血，小便短涩及目亦口苦舌干，大便燥结，内热作渴，火升目赤，易饥嘈杂，湿热成痿，以致骨乏无力者，皆不宜服。 3.《得配本草》：阴虚下陷，内热烦渴，眩晕气虚，怀孕心胞热，二便结者
补骨脂素、异补骨脂素的提取、分离和鉴定 一、目的要求 1. 掌握用溶剂法提取呋喃香豆素类化合物的操作技术。 2. 通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱法的操作技术。 3. 掌握香豆素类化合物的鉴定方法。 二、补骨脂中所含主要化学成分的结构及性质 补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea coryli folia L.的干燥成熟果实。具有补肾助阳、温中止泻之功。主治肾虚阳痿、遗精遗尿及腰膝冷痛，小便频数；外用治白癫风。补骨脂中含有数种香豆素和黄酮类成分，主要有补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂双氢黄酮(补骨脂甲素)、异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)、补骨脂次素等。药理研究证明，补骨脂甲素有明显扩冠作用，补骨脂素及异补骨脂素是具吸收紫外线性质的光敏性物质，因此是抗白癫风的有效成分，制剂有祛白素，补骨脂注射液、复方补骨脂酊等。 1．补骨脂素(psoralen) : C11H603, 无色针状结晶(乙醇)，mp189oC, ~ 190oC。溶于乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。 2．异补骨脂素(isopsoralen): C11 H603, 无色针状结晶，mp137oC, ~ 138oC。溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿；微溶于水、乙醚，难溶于石油醚。 3．补骨脂双氢黄酮(补骨脂甲素)(bavachin, corylifolin): C20H2004, 无色结晶，mp191oC, ~ 192oC,[α]D为-29.1o（乙醇）。 4. 异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)(isobavachalcone, corylifolinin): C20H20O4,黄色针状结晶，mp154oC, ~ 156oC。 5.补骨脂次素（psoralidin）: mp292oC。 三、实验原理 根据内酯类化合物在乙醇中溶解度大，水中溶解度小的性质，利用乙醇，从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素，并用活性炭进行脱色，最后利用两者的极性差异，用氧化铝干柱层析予以分离。 四、实验内容 (一)提取 称取补骨脂粗粉200g，放入1000ml烧瓶中，加入50%乙醇500ml，热回流1h, 过滤，回收乙醇至无醇味，放置过夜，倾去上清液，得棕黑色粘稠物。将棕黑色粘稠物加80ml甲醇溶解，加少许活性炭，回流l0min，趁热抽滤，滤液回收甲醇至小体积，放置析晶。 (二)精制 将上述粗品加适量甲醇(3：100的比例)溶解，加少许活性炭，回流l0min，趁热抽滤，滤液放冷析晶，滤取结晶，少量甲醇淋洗，80oC以下干燥即得补骨脂素精品。 (三)补骨脂素和异补骨脂素的分离 取色谱用中性氧化铝40g，装于直径1.6cm*30cm的色谱柱中。取补骨脂素精品甲醇液约1-2ml，加样，以石油醚-乙酸乙酯（1：2）作洗脱剂，洗脱，每20ml为一馏分，各馏份回收溶剂后，用薄层板检查，和标准品对比，于紫外光灯下观察荧光与颜色。 (四)鉴定 1．呈色反应 (1)异羟肟酸铁反应取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入7％盐酸羟胺甲醇溶液2滴～3滴，再加10％氢氧化钾甲醇溶液2滴～3滴，于水浴上加热数分钟，冷却，用盐酸调至pH3～4，加1％三氯化铁试液1滴～2滴，观察溶液颜色。 (2)开环闭环试验取样品少许加稀氢氧化钠溶液1m1—2m1，加热，观察现象；再加稀盐
实验二 补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识 （一）目的要求 学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求： 1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。 2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。 3．掌握香豆素类化合物的检识方法。 （二）主要化学成分的结构及性质 补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。 1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。 2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。 O O O O O O 补骨脂素 异补骨脂素 3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。分子式C 20H 20O 4，分子量32 4.36。黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。 4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。无色针状结晶，mp.191～192℃。 CH 3 H 3C HO OH O OH O O OH HO CH 3H 3C 补骨脂乙素 补骨脂甲素
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离及鉴定 1结构及性质 补骨脂素和异补骨脂素属香豆素类化合物。 补骨脂素：（补骨脂内酯），C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥发性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于水，乙醚和石油醚。 异补骨脂素：C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥发性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于水，乙醚；难溶于冷石油醚。 O O O 补骨脂素 O O 异补骨脂素 O 2 提取方法的选择 用50%的乙醇浸提：称取补骨脂粗粉50g，用500ml的乙醇冷浸提取，过滤，水浴加热，回收乙醇，得浸膏。取浸膏置于烧瓶中，加甲醇50ml和适量活性炭，回流15min，趁热抽滤。浓缩滤液至小体积，放置沉淀，用甲醇淋洗沉淀。 3.补骨脂素和异补骨脂素的分离 取色谱用中性氧化铝40g，装于直径1.6cm*30cm的色谱柱中。取补骨脂精品甲醇液约1-2ml，加样，以石油醚-乙酸乙酯（1：2）作洗脱剂，洗脱，每20ml 为一溜份，各溜份回收溶剂后，用薄层板检查，和标准品对比，于紫外光灯下观察荧光与颜色。 4.鉴定 a呈色反应 (1)异羟肟酸铁反应：取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入7％盐酸羟胺甲醇溶液2～3滴，再加10％氢氧化钾甲醇溶液2～3滴，于水浴上加热数分钟，冷却，用盐酸调至pH3～4，加1％三氯化铁试液1～2滴，观察溶液颜色。
(2)开环闭环试验：取样品少许加稀氢氧化钠溶液1～2m1，加热，观察现象；再加稀盐酸试液几滴，观察所产生现象。 (3)荧光：取样品少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，于紫外光灯下观察荧光与颜色。 b薄层色谱鉴定 薄层板：硅胶G-CMC-Na板。 点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇液、补骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。展开剂：石油醚一乙酸乙酯(2：3)。展开方式：上行展开。 显色：在紫外光灯(365nm)下观察荧光斑点。
补骨脂 Buguzhi 【异名】 婆固脂、破故纸（《药性论》），胡韭子（《南州记》），婆固脂、破故纸（《药性论》），补骨鸱（《本草图经》），黑故子、胡故子（《中药志》），吉固子（《江西中药》），和兰苋（《全国中草药汇编》），夭豆、反古纸、破故芷、破胡纸、婆故纸（《和汉药考》）。 【来源】 为豆科（Leguminosae sp.）植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的成熟果实。 【产地】 栽培或野生。分布河南、安徽、广东、陕西、山西、江西、四川、云南、贵州等地。主产四川、河南、陕西、安徽等地。 【采收加工】 秋季果实成熟时采收果序，晒干，搓出果实，除去杂质。 【炮制】 补骨脂：簸净杂质，洗净，晒干。 盐补骨脂：取净补骨脂用盐水拌匀，微润，置锅内用文火炒至微鼓起，取出，晾干。（每补骨脂100斤。用盐2斤8两，加适量开水化开澄清）【形状特征】 一年生草本，高60～150厘米。全株被黄白色毛及黑褐色腺点。茎直立，枝坚硬，具纵棱。叶互生，枝端常侧生小叶1片；叶阔卵形或三角状卵形，长5～9厘米，宽3～6厘米，先端圆形或钝，基部心形、斜心形或圆形，边缘有粗阔齿，叶两面均有显着的黑色腺点；叶柄长2～4厘米，小叶柄长2～3毫米，被白色绒毛；托叶成对，三角状披针形，长约1厘米，膜质。花多数，密集成穗状的总状花序；花轴腋生，长约6～10厘米；萼钟状，基部连合成管状，先端5齿，被黑色腺点；花冠蝶形，淡紫色或黄色，旗瓣倒阔卵形，翼瓣阔线形，龙骨瓣长圆形，先端钝，稍内弯；雄蕊10,1束，花药小；雌蕊1，子房上位，倒卵形或线形，花柱丝状。荚果椭圆形，有宿存花萼，果皮黑色，与种子粘贴；种子1，气香而腥。花期7～8月。果期9～10月。
附件2 临床基因扩增（PCR）诊断实验室工作规范（试行） 为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务，特制定本规范。 1．临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备 临床PCR实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应有专用的仪器设备。即1）试剂贮存和准备区；2）标本制备区；3）扩增反应混合物配制和扩增区和的扩增产物分析区。如使用扩增和产物检测同时完成的荧光定量PCR方法或全自动分析仪如Cobas－T （Anplicor）等，则3）和4）两个区可合并。 与上述特定实验区有关的各个房间必须有明确的标记，以避免不同工作区内的设备物品如加样器、试剂等的移出或不同的工作区间发生混淆。进入各个工作区必须遵循一严格的）顺序，只能按单一方向进行，即从试剂贮存和准备区～标本制备区～扩增反应混合物配制和扩增区～扩增产物分析区。不同的工作区必须使用不同的工作服，可以不同的颜色来区别。此外，当工作人员离开各工作区时，不得将各区特定的工作服带出。 1．l．试剂贮存和准备区 本区用于贮存溶液的制条、溶液的分装和主反应混合液的制各。本区仪器设备配置：（l）4 冰箱和一20 冰柜；（2）混匀器；（3）微量加样器若干支（覆盖1～1000pl）；（5）专用工作服和工作鞋；（6）专用办公用品；（7）消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离。心管和加样器吸头（带滤心）；（8）可移动紫外灯（近工作台面）。 1．2．标本制备区 标本贮存、核酸提取及贮存均在本区内进行。RNA测定时的单键。cDNA合成也在本区进行。本区仪器设备自己置：（l）4冰箱、－20 或-70 冰柜三（2）高达台式冷冻离心机；（3）混匀器；（4）水浴箱或加热模块；（5）微量如排器若干支（覆盖l～1000μl）；（6）专用工作服和工作鞋；（7）专用办公用品；（8）消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的部心管和加样器吸头（带滤心）；（9）可移动紫外灯（近工作台面）；（10）超净工作台；（11）超声波水浴（处理大分子DNA适用）。 1．3．扩增反应混合物配制和扩增区 模板材料（来自标本制备区）和主反应混合液（来自试剂贮存和准备区）的加入以及扩增反应等专门在本二．作区内近行。本区仪器设备自己置：（l）核酸扩增仅三（2）微量加样器（覆盖1～1000 μl）；（3）专用工作服和工作鞋；（4）专用办公用品；（5）消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、高压处理的部心管和加样器吸头（带滤心）；（6）可移动紫外灯（近工作台面）。 1．4. 扩增产物分析区 本区面积应为6～8m 。扩增严物的分析在本区进行。本区仪器设备配置：视检测方法不同而定，如为PCR�ELISA，则需（l）微量加样器若干支（覆盖l～2s（2）酶标权、洗报机和恒温箱;（3）专用工作服和工作鞋；（4）专用办么，用品；（5）消耗品：～次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头（带滤心）；（6）可移动紫外灯（近工作台面）。