成人呼吸道感染病毒病原学检测
摘要: 目的了解哈尔滨医科大学附属第二医院成人呼吸道病毒感染的流行特征。方法采用直接免疫荧光法（DIF），对2007年4月-2008年6月住院的399名16-87岁呼吸道疾病患者痰标本进行七种病毒检测。结果399例患者中病毒检测阳性者54例，病毒总体阳性率13.53％。首位病毒为呼吸道合胞病毒29例（7.27％）和流感病毒A型27例（6.77％），其次为副流感病毒3型17例（4.26％）、副流感病毒1型13例（3.26％）、腺病毒5例（1.25％）、流感病毒B型2例（0.50％）和副流感病毒2型2例（0.50％），混合感染22例（5.51％）。64-87岁年龄组病毒检出率最高（18.12％），32-47岁年龄组病毒检出率最低（6.94％）。肺炎、支气管炎、支气管扩张、哮喘、慢性阻塞性肺疾病（COPD）均有病毒检出，其中以COPD检出率最高（16.67％），其次是哮喘（15.38％）。结论病毒在成人呼吸道感染中占有重要的地位，感染主要集中在48-87岁年龄阶段（15.38％），COPD 和哮喘病毒感染率最高，以呼吸道合胞病毒和流感病毒A型最为常见。
关键词呼吸道病毒感染；成人
Abstract: Objective To understand the epidemiologic feature of respiratory tract viral infection in the adults of Harbin Medical University The Second Affiliated Hospital.Methods From April 2007 to June 2008, a total of 399 hospitalized adults were studied.Sputum were screened for virus by direct immunofluorescent (DIF) assay.Results Virus was identified in 54 patients ( 13.53%) .The most prevalent was respiratory syncytial viruses (RSV) (29, 7.27%) , followed by influenza A (27, 6.77%) , parainfluenza 3(17,4.26%) , parainfluenza 1(13,3.26%) , adenovirus (5, 1.25 %) ，influenza B (2, 0.50 %) , parainfluenza 2 (2, 0.50%) , and mixed viral infection(22, 5.51%).The highest virus detection rate (18.12%) occur in adults between 64 and 87 years, virus detection rate of the lowest (6.94%) exist in 37-47-year-old.Pneumonia, bronchitis, bronchiectasis, asthma, chronic obstructive pulmonary disease (COPD) have detected the virus, with the highest detection rate of COPD (16.67%), followed by asthma (15.38%).Conclusions Viruses still play an important role in respiratory tract infections in adults and was concentrated in the 48-87 age group(15.38%), the infection rate of COPD and asthma was the highest. Respiratory syncytial virus and influenza A virus was the most common types.
Key words Respiratory tract viral infection;Adults
材料和方法
1.研究对象2007年4月-2008年6月随机选择哈尔滨医科大学附属二院呼吸
科住院病人399例。其中年龄16岁-87岁，男性214例，女性185例。
2.设备及试剂荧光显微镜（TS100），离心机（TGL20LM），漩涡混合器（XH-B），
37℃培养箱（SKP-02.500），直接免疫荧光试剂盒（3137，chemicon）。
3.病毒抗原检测
3.1标本收集和处理由专职护士将塑料导管经鼻腔插入7-8cm达到咽部以下诱
导吸取1-2ml分泌物于10ml无菌离心管中[1]，-40℃冻存。实验时取出标本，向离心管中加入4-8ml冷PBS,4℃放置3-4个小时，用漩涡混合器震荡3-5分钟后，标本液转移入1.5mlEP管中，1000-6000r/min离心5-10分钟，弃去上清液，如果有粘液也一并弃去。沉淀物再加入1ml冷PBS震荡3-5分钟，1000-6000r/min离心5-10分钟，再次弃去上清液。沉淀物中加入适量PBS，调节细胞浓度到含纤毛柱状上皮细胞1.0×106/ml。
3.2细胞片制备微量加样器吸取上述纤毛柱状上皮细胞悬液20ul，点于预先用
4℃丙酮浸泡过的载玻片上。室温下空气干燥后4℃丙酮浸泡固定10分钟。
3.3 免疫荧光染色用Chemicon直接免疫荧光试剂盒对所有标本进行直接免疫荧光检测。筛查试剂中含有7种混合单克隆抗体,即腺病毒（ADV）、流感病毒
A(IFVA)、B型(IFVB)、副流感病毒1、2、3型(PIV1、2、3)及呼吸道合胞病毒(RSV)单克隆抗体。当筛查试验为阳性时,再用单一特异性单克隆抗体对标本进行鉴定检测。按试剂盒说明一滴混合单克隆抗体或单一单克隆抗体置于标本上,37 ℃孵育，筛查为15分钟，鉴定为30分钟后,用PBS 洗片3次，每次3-5分钟，风干后封片。封片剂由试剂盒提供。在荧光显微镜下观察。
所有标本均涂两张载玻片，一张上面涂一个样点用于筛查,另一张载玻片上面涂七个样点，如筛查为阳性,则用涂有七个样点的载玻片进行鉴定实验。
3.4 阳性结果判定及对照设定荧光显微镜下读片，放大倍数为200倍。如果样点中含有>=20个细胞,则认为此片是可以评价的。筛查实验阳性：在荧光显微镜200倍视野下有>=2个柱状纤毛细胞呈明亮黄绿色荧光即为筛查实验阳性，否则为阴性。鉴定实验阳性：在荧光显微镜下呼吸道合胞病毒及副流感病毒显示细胞浆染色,流感病毒及腺病毒为核染色或细胞浆内染色，否则为阴性。由试剂盒提供阳性及阴性对照片作对照。
4.数据处理采用SPSS统计软件进行数据处理。
结果
1.呼吸道病毒种类分布399例入选病人中病毒检测阳性者54例，男27例，女27例，病毒感染率13.53％。其中腺病毒感染5例（1.25％），呼吸道合胞病毒感染29例（7.27％），流感病毒A型感染27例（6.77％），流感病毒B型感染2例（0.50％），副流感病毒1型感染13例（3.26％），副流感病毒2型感染2例（0.50％），副流感病毒3型感染17例（4.26％），混合感染22例（5.51％）。
2.病毒检出率与年龄的关系
表1 呼吸道病毒检出率与年龄的关系
年龄组例数检出数检出率（％） ADV RSV IFVA IFVB PIV1 PIV2 PIV3 混合感染16-23 22 3 13.64 1 2 2 0 0 0 0 1
24-31 19 2 10.53 0 2 1 0 1 0 1 2
32-39 27 2 7.41 0 2 0 0 1 0 0 1
40-47 45 3 6.67 0 1 1 0 0 0 2 1
48-55 52 7 13.46 1 4 5 0 1 0 1 3
56-63 96 12 12.50 2 5 7 0 3 0 2 4
64-71 70 16 22.86 1 8 8 0 5 0 7 7
71-79 48 4 8.33 0 2 0 0 0 1 1 0
80-87 20 5 25.00 0 3 3 2 2 1 3 3
3.呼吸道病毒种类的季节分布
表2 呼吸道病毒的年份、季节分布
季节例数检出数检出率（％） ADV RSV IFVA IFVB PIV1 PIV2 PIV3 混合感染07春季 33 2 6.06 0 2 1 0 0 0 0 1
07夏季 91 20 21.98 0 10 11 0 5 0 2 7
07秋季 99 11 11.11 2 6 4 0 3 1 3 3
07冬季 73 8 10.96 1 5 5 0 2 0 4 5
08春季 93 13 13.98 2 6 6 2 3 1 8 6
08夏季 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
4.不同疾病的病毒检出情况
表3 几种常见疾病的病毒检出情况
常见疾病例数检出数检出率（％） ADV RSV IFVA IFVB PIV1 PIV2 PIV3 混合上呼吸道感染 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0肺炎 117 12 10.26 1 7 7 1 4 0 5 5支气管炎 38 5 13.16 0 5 1 0 2 0 1 2支气管扩张 35 3 8.57 1 1 2 0 0 0 1 1哮喘 13 2 15.38 1 0 2 0 0 0 1 1 COPD 60 10 16.67 1 4 4 1 0 2 2 2 5.混合感染检出情况
表4 七种病毒的混合感染情况
例数 ADV RSV IFVA IFVB PIV1 PIV2 PIV3
单独感染 1 14 9 0 2 1 5
混合感染 4 15 18 2 11 1 12
总数 5 29 27 2 13 2 17
讨论
直接免疫荧光技术检测病毒的抗原快速而准确，与间接免疫荧光相比，减少了非特异性反应而提高了特异性。Chemicon呼吸道病毒的诊断方法经过WHO3个参考中心审评，结果可靠。
本文采用直接免疫荧光法检测痰标本中的病毒抗原，399例病人中，病毒检出率为13.53％，已有报道RSVIgM抗体的测定结果多在8.1％-46.2％，虽然方法不同，但本次结果与该报道接近，且本次研究检测痰标本，易被患者接受。在所检测的呼吸道病毒中，首位病毒为呼吸道合胞病毒和流感病毒A型，分别占总阳性例数的53.70％和50％，其次为副流感病毒3型、副流感病毒1型、腺病毒、流感病毒B型和副流感病毒2型。
根据结果数据，病毒感染主要集中在48-87岁年龄阶段。将年龄进一步划分
为四个组（岁）：16-31、32-47、48-63、64-87，各组病毒检出率分别为12.20％、6.94％、12.84％、18.12％，可见，64-87岁年龄组相对于其他年龄组更易受病毒感染，而32-47岁相对不易受病毒感染，可能与相应年龄阶段的免疫功能状态等因素有关。呼吸道合胞病毒，流感病毒A型感染在各个年龄组检出率中均位于前列，是成人呼吸道感染的主要病毒病原。呼吸道病毒感染有一定的季节性，文献报道以冬春季为最多见。本研究显示各个季节均有病毒检出，病毒检出率冬春季低于夏秋季，主要原因是研究组没有收集到2007年3月、2008年2月的痰标本，结果统计时缺少这两个月份的数据，于是最后结果与文献报道结果相反。
从表3可以了解到除了上呼吸道感染没有检出病毒外，其余常见疾病均有病毒检出，其中以COPD检出率最高，为16.67％，其次是哮喘，为15.38％。呼吸道合胞病毒、流感病毒A型、副流感病毒3型是肺炎、COPD的重要病原，在肺炎中，副流感病毒1型也不容忽视，而在COPD中，副流感病毒2型也很重要。支气管炎中主要检出了呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型。哮喘中未检出呼吸道合胞病毒，流感病毒A型起了重要作用。另外，流感病毒A型在支气管扩张中检出率也列在首位。腺病毒在肺炎、支气管扩张、哮喘、COPD中均有检出。
本次检测到混合感染22例，占总阳性例数的40.74％，提示混合感染率高是呼吸道病毒感染的一个特点，临床工作者应予以高度重视。混合感染中以流感病毒A型和呼吸道合胞病毒最常见，副流感病毒3型、1型仅次之，其中两种病毒感染有10例，三种以上病毒感染12例，多重混合感染占较大比重。从单个病毒来分析，流感病毒B型混合感染与总数比为2/2，副流感病毒1型为11/13，腺病毒为4/5，副流感病毒3型为12/17，流感病毒A型为18/27，呼吸道合胞病毒为15/29，副流感病毒2型为1/2，这七种病毒参与混合感染的比重都很大。
成人呼吸道病毒感染的检测近年来越来越受到人们的重视，APAAP碱性磷酸酶标记、免疫荧光、PCR、IgM-ELISA等检测方法的出现，使呼吸道病毒的准确、快速检测成为了可能。呼吸道病毒的检测对于呼吸道疾病的诊断和治疗有非常重要的指导意义，同时可了解病原谱的变迁，掌握其变化规律，为预防疾病，控制疾病的流行提供依据。在一定程度上，也为合理使用抗生素提供了客观的病原学依据。
参考文献
[ 1 ] 叶利芬，袁彩娣. 婴幼儿急性下呼吸道感染的病原学研究[J ] . 浙江预防医学
,2004 ,16（8）: 5～6.
[ 2 ] 陆敏,陈培丽,张慧燕,等. 1995～1998 年上海地区小儿病毒性肺炎流行特点[J ] . 实用儿科临床杂志,2000 ,15 :3282329.
[ 1 ] 叶利芬，袁彩娣. 婴幼儿急性下呼吸道感染的病原学研究[J ] . 浙江预防医学
,2004 ,16（8）: 5～6.
.
九项呼吸道病毒检查 一、呼吸道九联检主要检测病原体的IgM抗体,包括嗜肺军团菌(LP)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IFA)、乙型流感病毒(IFB)和副流感病毒1、2和3型(PIVS)。 二、采用间接免疫荧光法，主要针对九项病原体的IgM 检测。由于机体受到抗原刺激后最早产生的抗体是IgM，但是IgM的半衰期短（约5天）若血清中特异性IgM类抗体含量增高，表明有近期感染，这有助于感染性疾病的早期诊断。以下是关于九项病原体名称及其潜伏期和产生IgM的时间。 九项病原体IgM抗体产生时间
三、临床意义 嗜肺军团菌 是社区获得性肺炎的重要致病菌。在欧洲和北美军团军肺炎占社区获得性肺炎前3,4位，ICU重症社区获得性肺炎的第三位，而医院获得性肺炎的1～5 %也由嗜肺军团菌所致。对人致病的嗜肺军团菌有16个血清型，80%军团菌肺炎有嗜肺军团菌血清Ⅰ型引起。然而军团菌细菌培养检出率低, 只有50%左右, 目前临床上血清特异性抗体检查是常用的诊断军团菌感染的主要手段。
肺炎支原体 是目前儿童呼吸道感染的重要病原体之一，占儿童肺炎感染病原体的15%左右，由于肺炎支原体传统培养难度大，单纯凭借患儿的临床症状不易确诊是否感染，支原体抗体于感染后7～9d出现，3～4周达高峰，可持续4～6月，采用血清特异性抗体检查是常用的诊断肺炎支原体感染的主要手段。 Q热立克次体 可引起Q热等全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎等。血清学诊断中，IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。 肺炎衣原体 广泛存在于世界范围内，人类是其唯一的宿主，仅1个血清型。实验室检测方法有分离培养、血清学检测、核酸扩增技术等，目前临床主要使用血清学检测方法。肺炎衣原体是呼吸道感染主要病原之一，人与人之间的传
上海复星医学科技发展有限公司 呼吸道病毒7项检测 试剂 2011-1-10
呼吸道病毒7项检测试剂 目录 1．概述 (2) 2．D3Ultra DFA试剂 (3) 2.1 D3Ultra DFA试剂规格 (3) 2.2 D3Ultra DFA试剂用途 (3) 2.3 D3Ultra DFA试剂特点和优势 (3) 2.4 D3Ultra DFA试剂实验操作步骤 (4) 2.5 D3Ultra DFA试剂实验结果判读 (5) 3．D3Ultra DFA试剂竞争优势 (6) 3.1 检验的特异性和灵敏度 (6) 3.2 市场竞争 (6) 附录1 七种病毒检测的临床意义 (8) 附录2 实验室所需设备清单（试剂盒中不含） (9) 附录3 进口荧光显微镜参数 (10)
1．概述 日常生活中，几种常见的呼吸道病毒往往给人们的工作和生活带来极大的不便，有些甚至威胁到人们的健康和生命。在医院和急诊室中，这些呼吸道病毒也常常是诊断和治疗的难题。 常见的呼吸道病毒包括：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，副流感病毒1型，副流感病毒2型和副流感病毒3型。在病毒检测方法中，抗原检测有其无法比拟的优势：1. 可以用于病毒的早期诊断，这对治疗非常重要；2. 快速、简便的诊断方法，短时间内得出结果，节省实验室的劳动力和成本。DHI公司的D3Ultra DFA试剂属于抗原检测中的直接免疫荧光法。该试剂可以同时筛查和鉴定出常见的7种呼吸道病毒。 D3Ultra DFA试剂主要的测试对象为婴幼儿和儿童，所以目标客户群体为：儿童医院、妇幼保健院和有儿科的三甲医院。
呼吸道病毒题库1-2- 10
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]麻疹最有效的预防途径是（） A.大量注射抗生素 B.接种麻疹减毒活疫苗 C.注射患儿恢复期血清 D.注射干扰素 E.注射丙种球蛋白 麻疹病毒减毒活疫苗是麻疹最有效的预防途径。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]腮腺炎病毒除侵犯腮腺外，还可侵犯（） A.睾丸 B.肾脏 C.骨骼 D.结肠 E.胃 腮腺炎病毒除侵犯腮腺外，还可侵犯睾丸。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]可能导致严重急性呼吸综合征的变种病毒是（） A.流感病毒 B.流行性腮腺炎病毒 C.麻疹病毒 D.冠状病毒 E.呼吸道合胞病毒 本题考查呼吸道病毒所致疾病。严重急性呼吸综合征是一种新的急性呼吸道传染病，亦称非典型性肺炎。其病原体SARS病毒为一种新型变异冠状病毒。 (辽宁11选5 https://www.doczj.com/doc/ae8889901.html,)
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]人是唯一宿主，且患者主要为学龄儿童的病毒是（） A.流感病毒 B.呼吸道合胞病毒 C.风疹病毒 D.腮腺炎病毒 E.麻疹病毒 本题主要考查呼吸道病毒的感染特点。人是腮腺炎病毒的唯一宿主，患者主要是学龄儿童，通过飞沫传播。
问题： [单选,A2型题,A1A2型题]下列均可导致胎儿先天性畸形的病毒为（） A.风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒2型 B.风疹病毒、流感病毒、腮腺炎病毒 C.巨细胞病毒、麻疹病毒、乙型脑炎病毒 D.腺病毒、乙肝病毒、巨细胞病毒 E.巨细胞病毒、鼻病毒、腮腺炎病毒 本题考查可导致胎儿先天性畸形的病毒。风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒2型均可通过胎盘垂直传播感染胎儿，可致先天性畸形。
人体的呼吸 1、人体呼吸道能对吸入的气体进行处理，使到达肺部的气体（） ①温暖②湿润③清洁④干燥． A、①②③ B、①②④ C、②③④ D、①③④ 考点：呼吸道的组成和功能． 解：呼吸系统包括呼吸道和肺两部分．呼吸道的组成由上到下依次是鼻腔、咽、喉、气管和支气管，鼻腔有鼻毛，可以阻挡灰尘，清洁空气，呼吸道都有骨或软骨做支架，使空气顺畅通过，其表面覆盖着黏膜，黏膜上的黏液能湿润空气，黏膜还分布有丰富的毛细血管，能温暖空气．这些特点既保证了气体的畅通，又对吸入的空气具有清洁、温暖和湿润的作用． 故选A． 2、卫视热播节目“中国最强音”很受青少年喜欢。下列器官不会直接影响歌手发声的是（） A、鼻 B、喉 C、肺 D、食道 考点：呼吸道的组成和功能． 解答：解：呼吸系统包括呼吸道和肺．呼吸道包括鼻腔、咽、喉、气管、支气管，是呼吸的通道．喉不但是气体进入的通道，也是发生的器官．食道属于消化系统，与发声没有关系． 故选D 点评：关键点：喉既是呼吸通道又是发声器官． 3、肺泡的气体进入血液，需要经过几层细胞。（） A、一层 B、二层 C、三层 D、四层 考点：肺泡的气体交换． 解：肺泡外缠绕着毛细血管，肺泡壁、毛细血管壁都只有一层上皮细胞；血液中的氧气浓度比肺泡的二氧化碳浓度低，根据气体扩散作用的原理，氧气会穿过毛细血管壁、肺泡壁进入肺泡．因此，肺泡的氧气进入血液要穿过两层细胞． 故选：B． 点评：本题的解题关键是知道肺泡壁与毛细血管壁都是一层细胞构成的． 4、人在呼气时，膈肌舒，膈的顶部（） A、下降，胸廓的上下径缩小 B、下降，胸廓的左右径缩小 C、回升，胸廓的上下径缩小 D、回升，胸廓的左右径缩小 考点：呼气和吸气． 解：呼吸运动是指人体胸廓有节律的扩大和缩小的运动，包括吸气过程和呼气过程，吸气时，肋间肌收缩时，肋骨向上向外运动，使胸廓的前后径和左右径都增大，同时膈肌收缩，膈顶部下降，使胸廓的上下径都增大这样胸廓的容积就增大，肺也随着扩，肺的气压低于外界大气压，外界空气通过呼吸道进入肺，完成吸气的过成． 呼气时：肋间肌舒时，肋骨向下向运动，使胸廓的前后径和左右径都缩小，同时膈肌舒，膈顶部上升，使胸廓的上下径都缩小这样胸廓的容积就缩小，肺也随着回缩，肺的气压大于外界大气压，肺通过呼吸道排出体外，完成呼气的过成．故选项C正确． 故选：C 点评：理解呼吸运动是呼吸肌的收缩和舒引起胸廓扩大和缩小来完成的． 5、当肋间肌和隔肌收缩时，下列各项正确的是（）
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910160836.0 (22)申请日 2019.03.04 (71)申请人 浙江大学 地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘 路866号 申请人 山东泰乐康健生物科技有限责任公 司 (72)发明人 陈瑜 王楠 郑书发 楼滨 (74)专利代理机构 山东众成清泰律师事务所 37257 代理人 丁修亭 (51)Int.Cl. G01N 33/68(2006.01) G01N 33/531(2006.01) (54)发明名称 呼吸道病原体检测方法 (57)摘要 本发明公开了一种呼吸道病原体检测方法， 包括以下步骤：1）对给定的呼吸道病原样本进行 蛋白提取；2）以步骤1）提取到的蛋白为蛋白样本 形成RPPA；3）对步骤2）获得的RPPA通过PWG进行 微生物或病毒检测；其中，RPPA为Reverse Phase Protein Array，即反相蛋白阵列；PWG为Planar Wave Guide，即平面光导。依据本发明呼吸道病 原体检测方法在样本中所含蛋白量相对较少时 不容易产生漏检。权利要求书2页 说明书9页 附图10页CN 109932513 A 2019.06.25 C N 109932513 A
1.一种呼吸道病原体检测方法，其特征在于，包括以下步骤： 1）对给定的呼吸道病原样本进行蛋白提取； 2）以步骤1）提取到的蛋白为蛋白样本形成RPPA； 3）对步骤2）获得的RPPA通过PWG进行微生物或病毒检测； 其中，RPPA为Reverse Phase Protein Array ，即反相蛋白阵列； PWG为Planar Wave Guide，即平面光导。 2.根据权利要求1所述的呼吸道病原体检测方法，其特征在于，蛋白提取的方法为： 针对痰液： t1）将痰液样本震荡混匀； t2）在痰液样本中加入裂解液，然后混合均匀，获得混合液； t3）对步骤t2）获得的混合液进行温育； t4）对温育后的混合液进行离心分离，取上清，即获得蛋白样本； 针对咽拭子，第一提取方法： y11）取下咽拭子头，置于EP管内； y12）加入裂解液，裂解液完全淹没咽拭子头部； y13）对浸入裂解液的咽拭子头进行温育，促咽拭子头上的起始样本裂解； y14）将温育后的EP管置于离心机进行离心分离，取出咽拭子头，保留上清液，即获得蛋白样本； 针对咽拭子，第二提取方法： y21）取下咽拭子头，将咽拭子头浸入病毒培养液中，混匀； y22）取新咽拭子，蘸取步骤y21）中的病毒培养液，新咽拭子头吸收饱和后取下，置于EP 管内； y33）向EP管内加入裂解液直至淹没新咽拭子头，温育裂解； y44）将温育后的EP管置于离心机进行离心分离，取出咽拭子头，保留上清液，即获得蛋白样本。 3.根据权利要求2所述的呼吸道病原体检测方法，其特征在于，所述裂解液为AG4； 针对痰液样本，裂解液与痰液的体积比为1:1。 4.根据权利要求2所述的呼吸道病原体检测方法，其特征在于，还包括对抗体芯片的验证，对抗体芯片验证的方法为： k1）对温育裂解后所获得的液体进行稀释； k2）将稀释后的液体制备到第一多孔板中； k3）将第一多孔板中的液体进一步制备到第二多孔板中，使第一多孔板中每一第一微孔适配于第二多孔板中的多个第二微孔，而在相应的多个第二微孔中制备出适配于第一微孔内液体的梯度稀释液体； k4）将梯度稀释液体制备到PWG芯片上，然后进行芯片封闭； k5）对芯片封闭后的PWG芯片进行温育； k6）对温育后的PWG芯片进行洗涤，然后进行信号读取。 5.根据权利要求4所述的呼吸道病原体检测方法，其特征在于，步骤k1）中稀释所获得 的液体的浓度为0.1 ~0.2微克/微升。 权 利 要 求 书1/2页 2 CN 109932513 A
呼吸道病毒抗原检测进院可行性报告 美国DIAGNOSTIC HYBRIDS公司睿信?呼吸道病毒抗原检测系统 在儿童群体中，呼吸道感染是一种极为常见的疾病之一。相关数据显示，90%的呼吸道感染均由病毒引起。呼吸道感染的发病率极高，该疾病的临床表现主要为呕吐、头痛、腹泻、流涕、低热、咳嗽轻喘、呼吸困难等，严重者还会产生肺感染、肺炎、中耳炎、支气管炎、鼻窦炎等并发症，从而使患儿的身心健康遭到严重危害。 呼吸道感染分为上呼吸道感染和下呼吸道感染，而上呼吸道感染基本上都是病毒感染，细菌性感染非常少。上呼吸道病毒感染发生比较频繁，儿童每年大约被感染6- -9次，青少年和成年人每年大约2-4次。目前，多数诊疗机构对呼吸道的感染未进行病毒检测，而直接使用抗生素进行治疗，而抗生素无法治疗病毒引起的呼吸道感染，造成抗生素滥用，同时造成相关细菌的抗药性增强。虽然下呼吸道感染发生的频率较少，但是这些感染对人体危害更加严重。患有下呼吸道病毒感染的1.8%学龄儿童和13%的学前儿童需要住院治疗，11%患有下呼吸道病毒感染的成年人需要住院，而且1.2%的感染者会导致死亡。同时，值得注意的是:RSV，细菌，腺病毒，和流感病毒是最大可能导致医生接触传染的病原体。因此，呼吸道病毒检测是非常必要和重要的。本产品采用免疫荧光法，直接检测病毒抗原，具有更好的临床意义。 公司介绍
DIAGNOSTIC HYBRIDS公司总部位于美国俄亥俄州，分支机构和合作伙伴遍布全球30多个国家。公司主要致力于研发,生产应用于检测呼吸道疾病,衣原体和疱疹感染,肠道病毒的细胞和分子诊断试剂。目前呼吸道病毒抗原荧光检测试剂占有美国55%到65%的市场，在全球28个国家得到广泛使用，比如澳大利亚(澳洲)，秘鲁(南美)，英国(欧洲)，加拿大(北美)，韩国(亚洲)等等。现已被美国Quidel 公司收购。Quidel China Ltd.是其在中国的全资子公司，营业地点设在中国（上海）自由贸易试验区盛荣路88弄1号3层315室。 DIAGNOSTIC HYBRIDS公司一贯秉承为客户提供优质产品和卓越服务的理念。在产品生产和服务中严格执行IS013485标准。每种产品生产都经过严格的质量验证，从抗体原材料、荧光标记抗体到最终成品都遵循质量第一的目标。自从上市以来，没有任何一次退货事件，没有任何一次回收或不良事件报告。 上海贝西生物科技有限公司是其中国区总代理，上海高新技术企业，公司具有专业且庞大技术团队，负责相关产品在中国的销售以及技术支持等工作。目前已开发医院客户超过80家，是国内最早做呼吸道病毒抗原检测产品的公司，与睿信产品生产企业美国DH公司保持长期有效合作。上海贝西生物科技有限公司对客户承诺承诺1小时之内情况响应，24小时赶到现场。 贝西生物与美国Quidel公司达成协议，任何未经过其中国子公司Quidel China Ltd公司授权的公司以及医院均无权销售以及使用睿信系列产品。任何未
呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法） 说明书 【产品名称】 通用名称：呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法） 英文名称：PNEUMOSLIDE IgM 商品名称：PNEUMOSLIDE IgM 【包装规格】 10人份/盒 【预期用途】 采用间接免疫荧光法（IFA），同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM 抗体，可检的病原体包括：嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。 已报道的非典型性肺炎的病原体有很多，其中最常见的有： 嗜肺军团菌 人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型，非典型性肺炎常伴随有全身症状。10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。 肺炎支原体 肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，由于很难将其固定在载玻片上，因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。 Q热立克次体 Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。血清学诊断中，IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。 肺炎衣原体 肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染，特别是支气管炎和肺炎。在老年人中发病率较高，它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。微量免疫荧光法（MIF）是最灵敏和最特异的诊断方法。
腺病毒 腺病毒是一种重要的呼吸道病原体，能引起上呼吸道疾病，伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。 呼吸道合胞病毒 呼吸道合胞病毒（RSV）是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体，在冬季爆发流行。 流感病毒 它是流感的病原体，在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。由于它易于与其它呼吸道疾病混淆，所以在流行期临床诊断很困难。因此，实验室诊断就显得非常重要。 副流感病毒 副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎（哮吼）。3型具有流行性，1和2型具有地域性。 【检测原理】 间接免疫荧光法（IFA）是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。样本中存在的特异性抗体和抗原反应，未与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去。在下一步骤中，抗原-抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白反应。用免疫荧光显微镜观察结果。 【主要组成成份】 除PBS外，所有试剂均可直接使用。为了易于识别，所有试剂均有一个给定的编号。在操作骤中，写明了每一步所使用试剂的编号。 1载玻片：10片（10孔/片），含有下列抗原：
第26章呼吸道病毒测试题 填空 1.呼吸道病毒包括流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒、风疹病毒、腺病毒、鼻病毒、呼肠病毒等。 2.流感病毒根据流感病毒核糖核蛋白和M抗原（NP和MP）抗原的不同,可分为甲、乙、丙三型。 3.决定流感病毒亚型的特异性抗原是 HA（血凝素）和 NA（神经氨酸酶） . 4.流感病毒的核酸类型是单股负链RNA , 其显著特点是分7～8个节段且容易发生基因重组 . 5.流感病毒的核心由RNA,核蛋白和RNA聚合酶组成. 6.流感病毒的结构由核心,内膜和外膜组成. 其吸附细胞的结构是HA , 成熟病毒自细胞膜上的释放依赖 NA 的水解作用. 7.流感病毒的包膜镶嵌着2种糖蛋白刺突,即呈柱状的 HA 和呈蘑菇状的 NA . 8.麻疹病毒感染除引起麻疹外,少数患者尚可并发严重中枢神经系统疾病,即麻疹迟发性脑炎和 SSPE亚急性硬化性全脑炎 . 9.腮腺炎病毒除引起患者双侧或单侧腮腺肿大炎症外,20%男性患者并发睾丸炎 ,5%女性患者并发卵巢炎. 10.孕妇在妊娠5个月内感染风疹病毒后临床表现多为轻微 ,而其胎儿或新生儿易患先天性风疹综合征. 11.腺病毒为双链线状DNA,无包膜病毒,其蛋白衣壳由240个六邻体壳粒和12个五邻体壳粒共同构成20面立体对称球状体,并在20面体每一顶角壳粒各伸出一纤维隆起. 12.少年儿童和成人普通感冒及上呼吸道感染大多由鼻病毒或冠状病毒感染引起. 三. 单选题 １.流行性感冒的病原体是 A.流行性感冒杆菌 B.流感病毒 C.副流感病毒 D.呼吸道合胞病毒 E.鼻病毒 ２.普通感冒的最常见病原是 A.流感病毒 B.副流感病毒 C.腺病毒 D.风疹病毒 E.鼻病毒和冠状病毒
上海复星医学科技发展有限公司 呼吸道病毒 7 项检测 试剂 2011-1-10
呼吸道病毒 7 项检测试剂 目录 1．概述 (1) 2．D3 Ultra DFA试剂 (2) 2.1D 3 Ultra DFA试剂规格 (2) 2.2 3 Ultra DFA试剂用途 (2) D 2.3D 3 Ultra DFA试剂特点和优势 (2) 2.4D 3 Ultra DFA试剂实验操作步骤 (3) 2.5 3 Ultra DFA试剂实验结果判读 (4) D 3．D3 Ultra DFA试剂竞争优 势 (5) 3.1检验的特异性和灵敏度 (5) 3.2市场竞争 (5) 附录 1七种病毒检测的临床意义 (7) 附录 2实验室所需设备清单（试剂盒中不含） (8) 附录 3进口荧光显微镜参数 (9)
1．概述 日常生活中，几种常见的呼吸道病毒往往给人们的工作和生活带来极大的不 便，有些甚至威胁到人们的健康和生命。 在医院和急诊室中， 这些呼吸道病毒也 常常是诊断和治疗的难题。 常见的呼吸道病毒包括： A 型（甲型）流感病毒， B 型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（ RSV ），腺病毒，副流感病毒 1 型，副流感病毒 2 型和副流感病毒 3 型。在病毒检测方法中， 抗原检测 有其无法比拟的优势： 1. 可以用于病 毒的早期诊断，这对治疗非常重要； 2. 快速、简便的诊断方法，短时间内得出结果，节省实验室的劳动力和成本。 DHI 公司的 D 3 Ultra DFA 试剂属于抗原检测 中的直接免疫荧光法 。该试剂可以同时筛查和鉴定出常见的 7 种呼吸道病毒。 D 3 Ultra DFA 试剂主要的测试对象为婴幼儿和儿童，所以目标客户群体为： 儿童医院、妇幼保健院和有儿科的三甲医院。
流行性感冒防治知识培训测试试题 姓名：分数： 一、多选题（每小题3分，共15分） 1.关于流感的叙述下列正确的是（ABCDE） A.患者、隐性感染者为主要传染源 B.病初2~3天传染性最强 C.某一时期的流行多由单一血清型引起 D.少数重症病例病情进展快，可因急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和/或多 脏器衰竭而死亡 E.咳嗽明显，食欲减退，可有鼻塞、流涕、胸骨后不适等 2.下列哪些是典型流感的主要临床表现（ABCD） A.突起畏寒、寒战和高热 B.全身酸痛明显，尤以背部和腿部最为明显 C.部分以呕吐、腹痛、腹泻为特点，常见于感染乙型流感的儿童 D.可有咽喉刺痛、胸骨下烧灼感、干咳 E.头疼及中毒症状明显 3.关于流感患者的肺炎，下列描述正确的是（ABCE） A.流感病毒本身可引起病毒性肺炎 B.病程中若持续或反复发热，呼吸道症状加重，提示可能并发细菌性肺 炎 C.并存慢性心、肺疾病和免疫功能低下者，容易迅速致死 D.都必须尽早应用抗生素 E.护理上应密切观察患者的体征
4.流感需与下列疾病鉴别（ABCDE） A.伤寒、麻疹 B.肺炎支原体肺炎 C.钩端螺旋体病 D.急性细菌性扁桃体炎 E.肺炎球菌性肺炎和流脑的早期 5.出现以下情况之一者为危重病例（ABCDE） A.呼吸衰竭； B.急性坏死性脑病； C.脓毒性休克； D.多脏器功能不全； E.出现其他需进行监护治疗的严重临床情况 二、单选题（每小题2分，共20分） 1.关于流行性感冒下列哪项是错误的( D ) A甲型流感易发生变异 B由流行性感冒病毒引起 C临床表现以上呼吸道症状较重 D全身中毒症状较重 2.关于流行性感冒病毒下列哪项是正确的( B ) A流行性感冒病毒属副粘液病毒 B甲、乙、丙、丁四型 C甲型不变异
关于开展呼吸道病原体九联检的通知 为满足临床要求，给临床和病患提供更好的检验服务，检验科开展了呼吸道九项病原体的检测，在免疫项目中开呼吸道九联检（收费375元）即可，医保项目，抽血当日即可出报告。抽血：血清2-3ml（红盖试管）。 呼吸道九项病原体的临床意义 采用西班牙VIRCELL公司生产的间接免疫荧光法检测试剂，同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM抗体，可检测的病原体包含：1、嗜肺军团菌 2、肺炎支原体 3、Q热立克次体 4、肺炎衣原体 5、腺病毒 6、呼吸道合包病毒 7、甲型流感病毒 8、乙型流感病毒 9、副流感病毒1、2、3型。 1、嗜肺军团菌 人最易感染的是嗜肺军团菌血清I型，非典型性肺炎常伴随有全身症状，10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清I型引起的。在血清学诊断中，间接免疫荧光法是唯一的标准技术。临床上军团菌感染主要有两种表现形：肺炎型和庞蒂亚克热型。前驱症状：乏力、头痛、全身肌肉酸痛，于1～2日内突然发热，可达40℃以上，多呈稽留热。病程早期即可出现多系统受累症状，为本病的突出特点。绝大多数患者有咳嗽，起初为干咳，半数患者转成非脓性粘稠痰或略带脓性痰，痰中常含少量血丝，个别可咯血。少数患者有胸痛，呼吸困难较为多见。肺部可闻及细湿罗音。继之可出现明显肺实变体征。约25%有恶心、呕吐及腹泻等消化道症状，有的腹泻为唯一首发症状。神经症状多见于极期，有时非常突出，包括不同程度意识障碍、肌张力增强或阵颤、步态不稳等，可有暂时性肢体软瘫; 个别可有腹泻、清水样便。或者失眠、眩晕、记忆力减退、意识朦胧、项强、震颤等神经系统表现. 2、肺炎支原体 肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，肺炎支原体可在呼吸道黏膜上皮潜伏，部分患者无明显症状；但大部分患者为显性感染。3岁以下儿童以上呼吸道感染多见，成人以肺炎表现为主。发病初期有咽痛、头痛、发热、乏力、肌肉酸痛、食欲减退、恶心、呕吐等症状。发热一般为中等热度，2~3天后出现明显的呼吸道症状，突出表现为阵发性刺激性咳嗽，以夜间为重，咳少量黏痰或黏液脓性痰，有时痰中带血，也可有呼吸困难、胸痛。发热可持续2~3周，体温正常后仍可遗有咳嗽。支原体肺炎突出表现为阵发性刺激性咳嗽，支原体肺炎可伴发多系统、多器官损害。皮肤损害可表现为斑丘疹、结节性红斑、水疱疹等。胃肠道系统可见呕吐、腹泻和肝功损害。血液系统损害较常见溶血性贫血。中枢神经系统损害可见多发性神经根炎、脑膜脑炎及小脑损伤等。心血管系统病变偶有心肌炎及心包炎。 3、Q热立克次体
某复星医学科技发展某 呼吸道病毒7项检测试 剂 2011-1-10 呼吸道病毒7项检测试剂 目录 1．概述1 2．D3Ultra DFA试剂1 2.1 D3Ultra DFA试剂规格1 2.2 D3Ultra DFA试剂用途2 2.3 D3Ultra DFA试剂特点和优势2 2.4 D3Ultra DFA试剂实验操作步骤3 2.5 D3Ultra DFA试剂实验结果判读4 3．D3Ultra DFA试剂竞争优势5
3.1 检验的特异性和灵敏度5 3.2 市场竞争5 附录1 七种病毒检测的临床意义6 附录2 实验室所需设备清单（试剂盒中不含）7 附录3 进口荧光显微镜参数8 1．概述 日常生活中，几种常见的呼吸道病毒往往给人们的工作和生活带来极大的不便，有些甚至威胁到人们的健康和生命。在医院和急诊室中，这些呼吸道病毒也常常是诊断和治疗的难题。 常见的呼吸道病毒包括：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，副流感病毒1型，副流感病毒2型和副流感病毒3型。在病毒检测方法中，抗原检测有其无法比拟的优势：1. 可以用于病毒的早期诊断，这对治疗非常重要；2. 快速、简便的诊断方法，短时间内得出结果，节省实验室的劳动力和成本。DHI公司的D3Ultra DFA试剂属于抗原检测中的直接免疫荧光法。该试剂可以同时筛查和鉴定出常见的7种呼吸道病毒。 D3Ultra DFA试剂主要的测试对象为婴幼儿和儿童，所以目标客户群体为：儿童医院、妇幼保健院和有儿科的三甲医院。 2．D3Ultra DFA试剂 2.1 D3Ultra DFA试剂规格 D3Ultra DFA试剂分为7项呼吸道病毒筛查试剂和7项呼吸道病毒鉴定试剂。检测病毒种类：A型（甲型）流感病毒，B型（乙型）流感病毒，呼吸道合胞病毒（RSV），腺病毒，1、2、3型副流感病毒。具体规格如下：
9项呼吸道病原体检测在呼吸道感染病因分析中的应用 发表时间：2018-04-12T16:00:41.377Z 来源：《航空军医》2018年3期作者：宋明健[导读] 分析在呼吸道感染病因分析中应用9项呼吸道病原体检测的临床价值。 （溆浦县人民医院检验科湖南溆浦 419300）摘要：目的分析在呼吸道感染病因分析中应用9项呼吸道病原体检测的临床价值。方法择取2015年1月至2017年12月我院收治的4112例呼吸道感染患者，所选患者均在空腹状态下采集静脉血，通过间接免疫荧光法联合检测9项呼吸道病原体：LP1（呼吸道嗜肺军团菌1型）、COX（Q热立克次体）、ADV（腺病毒）、IFA（甲型流感病毒）、PIV（副流感病毒）、MP（肺炎支原体）、CP（肺炎衣原体）、RSV（呼吸道合胞病毒）、IFB（乙型流感病毒）。结果4112例患者血清IgM（免疫球蛋白M）总阳性率为35.02%（1440/4112），IFB阳性率最高，MP阳性率次之。484例患者为病原体合并感染，阳性率为11.77%（483/4112）。结论在呼吸道感染病因分析中应用9项呼吸道病原体检测具有显著临床价值，病毒与MP是呼吸道感染的主要病原体，应在检测中重点关注。关键词：呼吸道病原体；呼吸道感染；病因分析【Abstract】 Objective：To analyze the clinical value of detecting 9 respiratory pathogens in the etiological analysis of respiratory tract infection. Methods：From January 2015 to December 2017，4112 patients with respiratory tract infection admitted to our hospital were enrolled. All patients were selected to receive venous blood under fasting condition. Nine respiratory pathogens were detected by indirect immunofluorescence：LP1 Legionella pneumophila type 1），COX（fever zoster virus），ADV（adenovirus），IFA（influenza A virus），PIV（parainfluenza virus），MP（Mycoplasma pneumoniae），CP（Chlamydia pneumoniae），RSV（respiratory syncytial virus），IFB（influenza B virus）. Results：The total positive rate of serum IgM（immunoglobulin M）in 4112 patients was 35.02%（1440/4112）. The positive rate of IFB was highest and the positive rate of MP was second. 484 patients with pathogen infection，the positive rate was 11.77%（483/4112）. Conclusion：The detection of 9 respiratory pathogens has significant clinical value in the etiological analysis of respiratory tract infection. Virus and MP are the main pathogens of respiratory tract infection and should be focused on the detection. 【Key words】 Respiratory pathogens；Respiratory tract infections；Etiology analysis 呼吸道感染属于临床常见疾病之一，通常是因细菌、病毒、衣原体、支原体等导致感染。呼吸道感染患者无典型性临床表现，很容易出现漏诊和误诊现象，因此应做好临床检测工作，分析病因，以便于为临床诊疗提供可靠依据[1]。基于此，本文择取2015年1月至2017年12月我院收治的4112例呼吸道感染患者，分析应用9项呼吸道病原体检测的临床价值，报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料 择取2015年1月至2017年12月我院收治的4112例呼吸道感染患者，疾病类型包括急性支气管炎、急性上呼吸道感染、肺炎等，其中2358例为男性，1754例女性，年龄最大为75岁，最小为1个月，年龄均值为（33.9±10.8）岁。 1.2方法 选用荧光显微镜作为主要仪器，选用Pneumoslide作为呼吸道联合检测试剂，1卡同时对血清呼吸道感染9项病原体IgM抗体进行检测，包括LP1、COX、ADV、IFA、PIV、MP、CP、RSV、IFB。 所选患者均在空腹状态下采集静脉血，采血量为1-2ml，并对其进行离心处理，离心速度为每分钟3500r，当天标本需要在8小时之内送检，若送检时间超过8小时，则需要将标本储存在冰箱中，设置2-8℃，如果标本无法在7天之内送检，则需要储存在-20℃冰箱中，将溶血或脂血血清剔除。 通过间接免疫荧光法联合检测9项呼吸道病原体，严格按照说明书进行检测，每次试验需要设置阴性对照组和阳性对照组，确保检测结果的有效性以及准确性。间接免疫荧光法是以吸附于载玻片上的抗原、待测样本中抗体为基础发生反应，样本中的抗原反应、特异性抗体，并未结合抗原的免疫球蛋白，可在洗涤过程中去除。在下一步骤中，荧光素标记的抗人球蛋白反应、抗原-抗体复合物，可通过免疫荧光显微镜对检测结果进行观察。 1.3统计学方法 采用SPSS22.0软件对数据进行处理、分析，P<0.05，差异明显，具有统计学意义。 2结果 2.1呼吸道病原体检测阳性率分析
检验医学资讯(201403) “呼吸道病原体抗原七项”检测的临床意义 一、呼吸道病毒简介 呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。据统计，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。常见的呼吸道病毒包括：A型流感病毒（甲型流感病毒）、B型流感病毒（乙型流感病毒）、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型,各种病毒在电镜下的形态见图1。 流感病毒呼吸道合胞病毒腺病毒副流感病毒 图1 各种病毒在电子显微镜下的形态 二、呼吸道病毒临床诊断 现有的主要方法：1、抗原检测；2、抗体检测；3、病毒分离培养；4、分子生物学方法等。现将上述检测方法的优劣小结于表1。目前临床上使用较多的是抗原检测和抗体检测。 表1 四种呼吸道病毒检测方法的比较 检测方法优点缺点 病毒分离培养特异性高，金标准培养条件要求高、灵敏度低，标本中病原体量少时，易致假阴性。 抗原检测 酶联免疫吸附法较快速有非特异性反应 间接免疫荧光法简便、快速 有非特异性反应需要使用荧光显微镜 直接免疫荧光法简便、快速、灵敏度和特异性均较高 且可用于疾病的早期诊断 需要使用荧光显微镜 抗体检测灵敏度、特异性较高对疾病早期诊断没有太大帮助分子生物学方法灵敏度和特异性均很高操作繁琐，价格昂贵三、呼吸道病原体抗原的优越性
1、从理论上讲，只要有病毒感染，通过抗原检测都能鉴定出，而抗体检测却要在人体产生免疫应答以后才能进行鉴定。 2、机体产生IgM一般需要一周左右的时间，而有免疫缺陷或免疫系统不健全的个体如儿童，特别是3岁以下的小孩，其产生抗体往往需要更久，且抗体产生的水平也较低。若检测的是IgG，则不能很好地区分既往感染和急性感染。 因此，抗原检测的方法对婴幼儿和儿童的呼吸道感染的病因诊断、鉴别诊断和临床用药指导比抗体法更有优势（详见表2）。 表2 呼吸道病毒抗体检测和抗原检测的比较 病原体抗体IgM检测病原体抗原检测 检测最佳时间一般在感染一周左右病毒感染出现症状后即可检测出 临床意义 回顾性诊断，适用于疾病后期的诊断， 多用于循证医学可用于疾病早期诊断 对患者的治疗有重要指导意义 检测灵敏度不能很好地检测变异的病毒 将多种抗体进行组合，能更好地应对变异 的病毒 检测方法 一般使用酶联免疫（ELISA）或者间接免疫 荧光法，有非特异性荧光一般使用直接免疫荧光法，几乎没有非特异性反应 四、为什么要早期全面检测？ 1、病毒治疗针对性强 2、病毒治疗有时效性 3、避免抗生素的滥用 五、项目开展的价值和社会效益分析 本项目可用于呼吸道病原学的研究；提高医院对呼吸道病毒的诊疗水平；还可用于呼吸道传染病流行的监控等。 六、呼吸道病原体检测 我们检验中心/遗传所于3月20日正式开展了“呼吸道病原体抗原7项”。该检验组合包含了甲型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型7种抗原的检测。收费标准：326.0元/次，不接受单项申请。 临床意义：主要用于呼吸道感染病原体的早期诊断和鉴定诊断。 标本采集和报告时间：鼻咽拭子或下呼吸道分泌物。暂定于每周五4:30pm发出检验报告。 欢迎各临床保健科室踊跃开单，我们将竭诚地为临床服务。咨询电话：临床免疫学检验室，2313065（外线）；3065（内线）。
“呼吸道病原体抗原七项”检测的临床意义 一、呼吸道病毒简介 呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。据统计，90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。常见的呼吸道病毒包括：A型流感病毒（甲型流感病毒）、B型流感病毒（乙型流感病毒）、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型,各种病毒在电镜下的形态见图1。 流感病毒呼吸道合胞病毒腺病毒副流感病毒 图1 各种病毒在电子显微镜下的形态 二、呼吸道病毒临床诊断 现有的主要方法：1、抗原检测；2、抗体检测；3、病毒分离培养；4、分子生物学方法等。现将上述检测方法的优劣小结于表1。目前临床上使用较多的是抗原检测和抗体检测。 表1 四种呼吸道病毒检测方法的比较 检测方法优点缺点 病毒分离培养特异性高，金标准培养条件要求高、灵敏度低，标本中病原体量少时，易致假阴性。 抗原检测 酶联免疫吸附法较快速有非特异性反应 间接免疫荧光法简便、快速 有非特异性反应需要使用荧光显微镜 直接免疫荧光法简便、快速、灵敏度和特异性均较高 且可用于疾病的早期诊断 需要使用荧光显微镜 抗体检测灵敏度、特异性较高对疾病早期诊断没有太大帮助 分子生物学方法灵敏度和特异性均很高操作繁琐，价格昂贵 三、呼吸道病原体抗原的优越性 1、从理论上讲，只要有病毒感染，通过抗原检测都能鉴定出，而抗体检测却要在人体产
生免疫应答以后才能进行鉴定。 2、机体产生IgM一般需要一周左右的时间，而有免疫缺陷或免疫系统不健全的个体如儿童，特别是3岁以下的小孩，其产生抗体往往需要更久，且抗体产生的水平也较低。若检测的是IgG，则不能很好地区分既往感染和急性感染。 因此，抗原检测的方法对婴幼儿和儿童的呼吸道感染的病因诊断、鉴别诊断和临床用药指导比抗体法更有优势（详见表2）。 表2 呼吸道病毒抗体检测和抗原检测的比较 病原体抗体IgM检测病原体抗原检测 检测最佳时间一般在感染一周左右病毒感染出现症状后即可检测出 临床意义 回顾性诊断，适用于疾病后期的诊断， 多用于循证医学可用于疾病早期诊断 对患者的治疗有重要指导意义 检测灵敏度不能很好地检测变异的病毒 将多种抗体进行组合，能更好地应对变异 的病毒 检测方法 一般使用酶联免疫（ELISA）或者间接免疫 荧光法，有非特异性荧光一般使用直接免疫荧光法，几乎没有非特异性反应 四、为什么要早期全面检测？ 1、病毒治疗针对性强 2、病毒治疗有时效性 3、避免抗生素的滥用 五、项目开展的价值和社会效益分析 本项目可用于呼吸道病原学的研究；提高医院对呼吸道病毒的诊疗水平；还可用于呼吸道传染病流行的监控等。 六、呼吸道病原体检测 我们检验中心/遗传所于3月20日正式开展了“呼吸道病原体抗原7项”。该检验组合包含了甲型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型7种抗原的检测。收费标准：326.0元/次，不接受单项申请。 临床意义：主要用于呼吸道感染病原体的早期诊断和鉴定诊断。 标本采集和报告时间：鼻咽拭子或下呼吸道分泌物。暂定于每周五4:30pm发出检验报告。 欢迎各临床保健科室踊跃开单，我们将竭诚地为临床服务。咨询电话：临床免疫学检验室，2313065（外线）；3065（内线）。 撰稿：罗桂香，编辑：周玉球
株洲市中心医院 流感防治知识培训考试试题 科室：姓名：得分： 一、判断题（每题1分，共10分） 1.血凝素是流感病毒的主要表面抗原，诱导机体产生中和抗体。（√） 2.流感病毒不断引起流感流行，主要是其血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的抗原性容易发生 变异所致，HA变异更快（√） 3.乙型流感病毒常以流行形式出现，能引起世界性流感大流行。（×） 4.流感患者气管深部咳痰或气管吸出物检测阳性率明显高于上呼吸道标本。（×） 5.人感染流感病毒时血常规化验，白细胞总数一般不高或降低，重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞减少，并有血小板降低。（√） 6.甲型流感血生化检查可伴有酶学的改变及C反应蛋白升高，肌红蛋白升高。（√） 7.血凝素能水解细胞膜上各种多糖受体末端的唾液酸，促使流感病毒的释放（×） 8.目前感染人的主要是甲型流感病毒中的H1N1、H3N2亚型及乙型流感病毒中的 Yamagata系。（√） 9.流感病毒可以说是世界上变异最快的病毒，而乙型流感病毒是变异最为频繁的一个类型（×） 10.甲型流感抗病毒治疗有效，抗病毒药物应尽量在发病48小时内使用。（√） 二、单选题（每题3分，共30分） 1、容易感染人类的流感病毒亚型是（） A、H7N9 B、H1N1 C、H5N1 D、H5N6 2、属于高致病性禽流感病毒的亚型是（） A、H7N9 B、H10N8 C、H5N1 D、H1N1
3、流感病毒侵入人体后，主要与（）结合进入细胞 A、上呼吸道的唾液酸α2-6受体 B、下呼吸道的唾液酸α2-6受体 C、上呼吸道的唾液酸α2-3受体 D、下呼吸道的唾液酸α2-3受体 4、对于甲型流感传染性，描述正确的是（） A、容易感染人类，容易在人际间传播 B、不容易感染人类，有限的人传人 C、容易感染人类，有限的人传人 D、不容易感染人类，但容易在人际间传播 5、流感病毒的主要传播途径（） A、呼吸道传播 B、消化道传播 C、血液传播 D、垂直传播 6、对疑似或确诊禽流感患者进行气管插管操作时，医务人员应戴（）、护目镜及穿隔离衣。 A、外科口罩 B、一次性医用口罩 C、医用防护口罩 D、脱脂棉纱布口罩 7、.对疑似或确诊人感染H7N9禽流感患者应采取的措施不适宜的是（） A、及时进行隔离，并按照指定路线由专人引导进入病区 B、病情允许时，患者应戴一次性口罩 C、指导患者注意呼吸道卫生和手卫生 D、患者出院后，需进行终末消毒 8、流感病毒感染后发病几天内应用奥司他韦疗效最佳( ) A、2天内 B、6天内 C、4天内 D、3天内 9、1、不明原因肺炎病例的定义描述不正确的是：（） A发热(腋下体温≥38℃)； B.具有肺炎的影像学特征； C.发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少； D.经抗生素规范治疗3~5天,病情无明显改善。
七项呼吸道病毒检测试剂盒（鉴定）使用说明书 【产品名称】 通用名称：七项呼吸道病毒检测试剂盒 英文名称：D3 Ultra DFA Respiratory Virus Screen & ID Kit 【包装规格】 鉴定试剂：80人份/盒 【预期用途】 用于临床定性检测7种呼吸道病毒：甲型（A型）流感病毒，乙型（B型）流感病毒，呼吸道合胞病毒，腺病毒，副流感病毒1、2和3型。 【检验原理】 荧光素（FITC）标记的单克隆抗体与病毒抗原结合，形成稳定的抗原-抗体复合物，在荧光显微镜下观察，呈现特异性绿色荧光。 【主要组成成份】 组份名称规格主要成分 1 DFA染色试剂鉴定试剂流感A试剂： 2 mL 每试剂瓶为一项与病毒 抗原相对应的荧光单克 隆抗体 流感B试剂：2 mL 腺病毒试剂：2 mL 呼吸道合胞病毒试剂：2 mL 副流感1试剂：2 mL 副流感2试剂：2 mL 副流感3试剂：2 mL 2 40X浓缩洗液25 mL PBS 3 固定液15 mL 甘油 4 阳性质控板5块包被病毒抗原 【储存条件及有效期】 2oC-8oC避光保存18个月。 【适用仪器】 荧光显微镜，激发波长490 nm，发射波长520 nm。 【样本要求】 鼻咽部取样后保存于生理盐水中，应在24小时内送检。 【检验方法】 1、取样：用鼻咽拭子从病人的鼻咽部取样或者使用鼻腔灌洗液，将鼻咽拭子放入储存管中（含有生理盐水）。 2、样本准备步骤： ①将样本充分震荡混匀约10-15秒。 ②在400-600xg转速下离心5-10分钟。 ③弃上清。 ④在沉淀中加2-3 mL PBS缓冲液（不能使用试剂盒中的浓缩洗液），充分震荡混匀约10-15秒。 ⑤在400-600xg转速下离心5-10分钟。 ⑥吸走上清和黏液层，小心不要吸到沉淀。 ⑦重复步骤4到6，直至黏液层被完全去除。 ⑧在沉淀中加0.5-1 mL的PBS缓冲液。 ⑨用移液器反复吹吸来重悬细胞沉淀，形成一个略混浊的悬液。 3、直接样本测试步骤： ①在8孔板上的孔内滴加25 μL的细胞悬浊液，每样本需滴加七孔。 ②样本完全风干。