生物材料检验
第一章绪论
1、生物材料（biological material）：人体体液（如血液）、分泌物（唾液、乳汁、汗液）、排泄物（如呼出气、尿液）、毛发、指甲以及组织（脂肪组织）等的总称。
2、生物材料检验（Analysis of biological materials）：
生物材料中化学物质及其代产物、或由化学物质引起机体产生的生物学效应指标变化的检验方法的科学。
3、生物监测（biological monitoring）
系统收集人体生物材料样品，定期检测其中毒物或其代产物的含量或由它们所引起的效应水平，以评价人体接触化学物质的程度及对健康的影响。
4、环境监测（environmental monitoring）：强调空气、水等外环境中有害物质的含量水平，评价的是毒物的外剂量水平。
5、生物标志物（biomarker）
一般指生物系统接触外源性物质后出现的一种改变，主要是化学物质在生物体形成的代产物，以及可测定的生化、生理、免疫、细胞或分子的变化，主要用于接触评价、健康危害评价以及临床诊断等。
可分为接触性生物标志物、效应性生物标志物和敏感性生物标志物。
生物标志物的分类
①接触性生物标志物: 测定组织、体液或排泄物中吸收的化学物、其代产物或源性物质的反应产物，作为吸收剂量或靶剂量的指标，提供关于接触外源性化学物的信息。
②效应性生物标志物:同健康危害或疾病有关的可测定性的生化、生理、行为以及其它生物学变化。如接触苯出现再生障碍性贫血时各项血液学检查指标，中毒性肝病和肾病患者各项肝肾功能检查指标等。
③敏感性生物标志物: 关于个体对外源性化学物的生物易感性的指标。指机体先天固有或后天获得的对外界有害因素所引起的有害效应的反应能力。敏感性的生物标志物可用于筛检易感人群，保护高危人群。
6、生物接触限值（biological exposure limit, BEL）：
对生物材料中有害物质或其代产物规定的最高容许浓度，或某些效应指标改变所容许的浓度围，相当于健康工人吸入或接触车间空气最高容许浓度的毒物时，生物材料中被测物的含量水平。
美国称生物接触指数(BEI)，德国称生物学耐受量(BAT)。
7、正常参考值（normal reference range）
无明显肝、肾及血液系统疾病和无职业有害因素接触史的“健康正常人”的生物材料样品中某种成分的含量或生化指标值。
8、混合呼出气（mixed expired gas）：尽力吸气后用最大力量呼出气至不能再呼出气为止所呼出的全部气体。
终末呼出气（end expired gas）：先尽力吸气，在平和呼出气后，再尽力呼出气至不能呼出气为止的最后一段呼出气。
9、检验指标选择基本要求
1. 特异性好：如果特异性不好，可考虑选用两个或两个以上指标进行检验。如氯乙烯，检测血、尿、呼出气中的氯
乙烯，也可检测其代产物尿中亚硫基二乙酸。
2.具有良好的剂量-效应关系：剂量与外接触量，剂量与生物学效应。如铅，ZPP、ALAD、ALA与血铅有良好的剂量
关系，血铅与环境中的铅有良好的剂量反应关系。
3.稳定性好：在一定时间可以稳定不变化
4.有准确可靠的检验方法
10、生物材料检验指标的分类
1.化学物质原形：检测方法的特异性分：特异性指标，铅、汞；非特异性指标，苯、甲苯
2.化学物质代产物如BaP、二甲苯（马尿酸）、氯乙烯（硫代二乙酸）
3. 生物效应指标：根据化学物质进入机体后，在体的某些生化、生理行为或其他方面的改变选择适当的效应指标。
如铅、有机磷、致癌物与靶分子的结合产物、降解产物。
11、生物接触限值（BEL):
指职业接触毒物后，未产生有害效应时，机体存在的毒物和毒物代的最高容许含量，或由它们所致的无害性效应指标的最高容许水平。
12、基准剂量（benchmark dose, BMD）：
根据有毒物质的某种接触剂量可引发某种不良健康效应的反应率发生预期变化（增高围通常为1%~10%）而推算出的一种剂量。
13、生物材料检验指标的选择原则：
特异性好；具有良好的剂量-效应关系；稳定性好；有准确可靠的检测方法
3. 生物材料检验指标的分类生物材料检验指标主要有以下三个方面：
(1) 生物材料中化学物质原形的检验： (2) 生物材料中化学物质代产物的检验： (3) 生物效应指标的检验：
1 4.生物样品的选择原则
(1)选用的生物材料中被测物的浓度与环境接触水平或与健康效应有剂量相关关系；
(2)样品和待测成分(指标)足够稳定以便于运输和保存；
(3)采集生物样品对人体无损害，能为受检者所接受。目前用得最多的生物材料是尿液，其次是血液和呼出气。
①尿液：采集方便、无损伤、易被受检者接受，能采集较大量的样品。
②血液：特别是静脉血，是最为理想的生物材料检验样品。
③头发：样品稳定性好，易保存
④呼出气：可连续采样，样品中干扰物质少。
?尿样可分为全日尿（24小时尿）、晨尿、随机尿和定时尿，如班前尿、班中尿、班末尿、班后尿等。
?随机尿样：收取方便，但由于尿中待测物浓度波动较大，分析结果往往不能反映实际情况
? 24小时尿样：能较好地反映及其代产物的排泄量和机体的剂量，所得结果不受某些成分排出无规律的影响，也不受饮水和排汗的影响，但收集24小时尿样较麻烦，在夏天尿样易腐败；
?晨尿：收集受检者早晨起床后的第一次尿样进行分析，对多数测定能反映实际情况，收集方便，应用最多
?晨尿、随机尿和定时尿收集比较容易，但因尿样比重变化而引起测定结果偏差较大，故需用尿比重或尿肌酐法校正被测物的浓度。
?对作业工人进行生物监测时，可根据化学物质的生物半减期、检验要求和生物标志物的特点，选择班前、班中、班后尿或晨尿。
?班前：进入工作岗位前一小时；班中：开始工作后2小时至下班前1小时；班末：下班前1小时之；班后：下班后1小时之。
尿样测定结果的两种校正方法；
校正方法有比重校正法和肌酐校正法两种。
(1)比重校正法：将尿中被测物浓度校正为标准比重(我国规定尿样的标准比重为1.020)下的浓度，校正公式为：C校=C×（1.020-1.000）／（d-1.000）=C×K
式中C校--经校正后尿中待测成分的浓度(mg/L)；C--测得的尿中待测成分的浓(mg/L)；1.020--为我用的尿的标准比重；d--实际测得的尿样比重；K--校正尿比1.020的系数。
(2)肌酐校正法：
在一般情况下饮食、饮水量和利尿剂对肌酐的排出率没有太大影响，健康人一天排尿所排出的肌酐量变化很小，一般在1.8g左右。因此，可用经尿液排出1g肌酐所相应的待测成分的量来表示尿中待测物的浓度,或经尿液排出1.8g肌酐所相应的待测成分的量来代表全天尿中待测成分的含量。校正公式为：
尿中待测成分浓度（mg∕g肌酐）=实测浓度（mg/L）／肌酐浓度(g/L)
尿中待测成分浓度（mg∕d）=实测浓度（mg/L）／肌酐浓度(g/L) ×1.8g/d
例：取混匀尿样25ml经硝酸-高氯酸消化后，用10ml双硫腙三氯甲烷液萃取，测得萃取液中铅浓度为0.30mg/ml，同时测得该尿样的肌酐浓度为1.5g/L，试计算该尿样的铅含量(以mg/g肌酐和mg/d表示)。
?塑料袋：可收集混合气体和末端气。注射器操作简单，但不便保存，且只适合于高含量样品的收集。
?玻璃管：主要采集末端气。
?采集呼出气，应先深吸一口清洁空气，屏气约10秒后呼出，用密闭性良好的采气管收集混合气或末端呼出气。并记录采样点的气温和气压。
基本要求：
①避免待测元素损失及污染；
②尽可能减少化学试剂的用量；
③操作简便、省时；
④待测组分回收率达到分析要求；
⑤操作过程安全性高
1、稀释法. ：（名解）
?有的样品可不经过复杂的预处理过程，可用水、稀酸溶液、含表面活性剂（如TntonX—100）或有机溶剂的水溶液简单稀释后进行。
?例如：血清样品可用6%正丁醇水溶液或1%硝酸水溶液稀释10倍后用火焰原子吸收法测定其中的铜铁锌等；血中的镍等金属也可用0.01%TntonX—100水溶液或稀硝酸溶液稀释后测定。
?如果基体效应对测定影响大，也可用基体改进剂的溶液稀释后测定。
2、酸提取法
?用硝酸、盐酸、三氯乙酸等酸溶液直接从样品中提取待测成分，不需完全破坏有机物，只需将待测成分定量转移到溶液中，故所用实际量少，处理过程简单，处理条件温和，空白值低且造成待测成分损失或污染的可能性小。
?例如：用1%的盐酸浸提粪便中的锌；三氯乙酸溶液不仅可以沉淀血清蛋白还可以从中提取铁等多种金属元素。
? 1）.硝酸提取，测定血铅.6mol/L 硝酸离心取上清液。标准物质被测成分的含量是已知的2，盐酸提取3，三氯乙酸（固体）。铁（有效）提取+2价铁
3、消解法（名解）
绝大多数生物材料检验样品都是以有机物为基体的，元素存在于有机物质部，不仅不能对元素进行测定，有机物还可能对测定产生干扰，最有效的方法就是将有机物彻底分解破坏，将生物材料样品转化为无机物，即消解法。可分为干灰化和湿消化两类。
?干灰化：是在供给能量的前提下，直接利用氧以氧化分解样品中有机物的方法。高温炉干灰化法最常用，一般步骤：干燥、碳化、灰化和溶解灰分。（名解）
?干灰化法操作简便，加入试剂少，空白值低，特别适用于大批样品的处理。但干灰化法使用的温度高，待测成分易挥发损失，同时待测成分被坩埚材料吸留，难于溶出，使回收率降低。为了帮助灰化，降低待测成分的挥发和吸留损失，可加入适当的助灰化剂，如硝酸、硫酸、硝酸镁和氧化镁、氢氧化钾等。
?湿法消化又称湿消解法，是利用氧化性酸和氧化剂对有机物进行分解破坏的一种方法。常用的氧化性酸和氧化剂有H2SO4、HNO3、HClO4、H2O2。（名解）
4、微波消解法
利用微波作为加热源进行消解。仍属于湿法消化。
5、酶分解法
利用酶分解蛋白质而进行样品处理的方法称为酶分解法。
（一）顶空法：是用于气象色谱分析的样品预处理技术，有静态和动态顶空之分，但静态顶空法使用最多。即将样品置于一密闭系统中，在一定温度下恒温一定时间后，抽取样品上层气相进样进行气相色谱分析。
动态顶空法：将少量样品置于一个密闭的容器中，适当加热后并向液体连续吹入氮气，将易挥发的成分吹入另一个浓缩富集管中，然后热解吸后进样色谱分析。
（二）水蒸气蒸馏法：适用于分离纯化挥发性化合物
（三）溶剂萃取法
是利用待测组分与样品的干扰杂志在互不相溶的两种溶剂中的分配系数不同而达到分离。
（四）固相萃取法
将样品溶液导入预先经活化过的固相萃取柱，待测组分通过吸附、分配或离子交换等呗固相萃取柱保留，而其他杂质组分不被保留，残存在柱上的杂质组分用适宜溶剂冲洗掉。
（五）固相微萃取法
（六）液相微萃取法
（七）其他提取方法
铅
?理化性质：铅（Pb）灰蓝色或银灰色的软金属，四乙基铅曾作为汽油防爆剂，是大气铅污染的主要来源之一。
?代和生物监测指标
1)铅及其化合物可通过呼吸道、消化道吸收，少数化合物可通过皮肤吸收。
2)吸收的铅很快进入血液并分布到各个软组织，以肝、肾、肺的浓度最高，以后又重新分布，主要进入矿化组织，如
骨骼和牙齿。血铅浓度常代表近期的环境暴露水平，进入血液的铅约96%存在于红细胞。
3)铅主要通过粪、尿排出另外也可通过乳汁、唾液、汗液排出。
4)血铅和尿铅为铅接触和铅负荷的主要生物监测指标。血铅浓度常被用于衡量铅的暴露水平。尿铅浓度是测定体铅负
荷的最好指标。
1、吸收1）呼吸道：铅尘烟蒸汽2)消化道：铅尘3）皮肤，无机物不吸收有机铅化合物可被吸收（四乙基铅）
2、分析：起始分布在血中有95%与红细胞结合最终主要以磷酸盐沉积于血管中，其次是肝肾脑等
3、生物效应：抑制血红蛋白的合成
1）抑制5—氨基乙酰丙酸脱水酶，导致血尿中δ-ALA增加2）抑制粪川啉元氧化酶3）抑制亚铁螯合酶
4、排除：吸收的铅主要经尿排出，尿铅生物半减期较长。
铅接触的生物监测指标
1、血铅：直接反映近期接触铅的情况
2、尿铅：反应机体中铅的负荷量，是铅中毒的辅助诊断指标
3、生物效应指标：1）尿中σ—ALA 2）血中铅原卟啉
?样品采集及保存
1、尿样收集一次尿样，测量比重，如不能立即分析，按1%的比例加入硝酸，在4℃冰箱可保存2周。
2、血样采末梢血常取于手指或耳垂，在皮肤上迅速针刺一定深度，让血自然流出，不宜用力挤压，以免组织液稀释血液影响结果。
?尿铅和血铅的测定
1、二硫腙比色法是测定尿铅和血铅的经典分析方法，只需一台可见光分光光度计便可。但是接触氰化钾和三氯甲烷等有害物质。
2、萃取-火焰原子吸收光谱法
《微生物检验技术》期末考试试题(A 卷) 一、名词解释(每小题3分，共15分) 1、菌落 2、正常菌群 3、消毒 4、噬菌体 5、最小抑菌浓度（MIC ） 二、填空题（每空1分，共25分） 1．细菌的特殊结构 有 、 、 、 。 2.细菌生长繁殖的条件是 、 、 和气体。 3．病原菌的致病作用与 、 及 有密切关系。 4.诊断血清是用 免疫家兔等动物后取其 而制成的。一般置于 保存，使用时应避免 ， 降低效价。
5．K—B法中抑菌圈直径的大小与药物的最低抑菌浓度呈关系，即抑菌圈愈大，MIC值、细菌对药物的敏感程度。 6．、和可作为甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌的鉴别试验。 7．淋病奈瑟菌主要以方式传播，引起。 8.细菌对待测药物的敏感程度可分为、、 三级。 三、选择题(每小题1.5分，共30分)： 1、属于非细胞型微生物的是（） A、真菌 B、细菌 C、放线菌 D、病毒 E、螺旋体 2、革兰染色所用染液的顺序是（） A、稀释复红—碘液—95％乙醇—结晶紫 B、稀释复红—95％乙醇—碘液—结晶紫 C、结晶紫—碘液—95％乙醇—稀释复红 D、结晶紫—95％乙醇—碘液—稀释复红 E、稀释复红—结晶紫—碘液—95％乙醇 3、靛基质试验又称（） A、甲基红试验 B、尿素分解试验 C、硫化氢生成试验 D、吲哚试验 E、糖发酵试验 4、对人体无害的细菌代谢物是（）
A、热原质 B维生素 C、外毒素 D、内毒素 E、侵袭性酶 5、正常人体不存在细菌的部位是（） A、体表 B、口腔 C、大肠 D、尿道口 E、血液 6、实验室对接种针（环）、试管口的灭菌方法是（） A干烤法 B、流通蒸汽法 C、烧灼 D、焚烧 E、煮沸法 7、卡介苗是由何种变异而产生的（） A、形态变异 B、结构变异 C、毒力变异 D、耐药变异 E、酶活性变异 8、病原菌侵入血流并在其中大量繁殖，产生毒性代谢产物，引起严 重的全身症状，称为（） A、毒血症 B、菌血症 C、败血症 D、脓毒血症 E、 病毒血症 9、哪种动物不是微生物学检验中常用的实验动物（） A、小白鼠 B、豚鼠 C、裸鼠 D、家兔 E、马 10、下列哪项不是金黄色葡萄球菌的特点（） A、凝固酶试验阳性 B、产生溶血素 C、分解 甘露醇 D、产生耐热核酸酶 E、胆汁溶菌试验阳性 11、在普通琼脂平板上生长的化脓性细菌是（） A、金黄色葡萄球菌 B、乙型链球菌 C、肺炎
绪论 1.微生物：一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。 2.列文虎克（显微镜，微生物的先驱）巴斯德（微生物学）科赫（细菌学） 3.什么是微生物？习惯上它包括那几大类群？ 答：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。它是一些个体微小结构简单的低等生物。包括①原核类的细菌（真细菌和古细菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体；②真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生动物和显微藻类；③属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和朊病毒）。 4.为什么说微生物的“体积小、面积大”是决定其他四个共性的关键？ 答：“体积小、面积大”是最基本的，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4个共性。 第一章原核生物的形态、构造和功能 1.细菌：是一类细胞极短（直径约0.5微米，长度约0.5-5微米），结构简单，胞壁坚韧，多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。 2.试图示肽聚糖单体的模式构造，并指出G+细菌与G-细菌在肽聚糖成分和结构上的差别？ 答：主要区别为；①四肽尾的第3个氨基酸不是L-lys，而是被一种只有在原核微生物细胞壁上的特殊氨基酸——内消旋二氨基庚二酸（m-DAP）所代替；②没有特殊的肽桥，其前后两个单体间的连接仅通过甲四肽尾的第4个氨基酸（D-Ala）的羧基与乙四肽尾的第3个氨基酸（m-DAP）的氨基直接相连，因而只形成较为疏稀、机械强度较差的肽聚糖网套。 3.试述革兰氏染色的机制。 答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色
检验技术资格考试考点精要——微生物学检验（中级） 1. 生物学按界门纲目科属种分类，种是最小单位。病毒分类：目、科、亚科、属、种。属名--VRir us 结尾的单词,亚科名--VRir inae结尾的单词,科名--VRir idae结尾的单词。目名—VRir ales。2004年ICTV 公布病毒分为：73个科、11个亚种、289个属。 2. 结核菌可利用甘油为碳源，梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源，流感嗜血杆菌要Ⅴ，Ⅹ因子才能生长。 3. 药物敏感试验：纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。常用单片纸碟法、试管稀释法（以抗菌药物的最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点，该管含药浓度为最低抑菌浓度MIC或最低杀菌浓度MBC），两值越低则表示越敏感。MIC与抑菌圈呈负相关，即抑菌环直径越大，MIC越小。 各药敏纸片间距不少于24mm，距平板内缘不小于15mm。 药物敏感实验判定标准：抑菌圈直径（毫米）：20以上极敏、15~20高敏、10~14中敏、10以下低敏。不同的菌株、不同的抗生素纸片需参照NCCLs的标准或者CLSI标准。 多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6—9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。 4.常用的免疫技术：酶免疫技术（EIA）、协同凝集试验、免疫荧光技术（IF）、对流免疫电泳（CIE）、免疫印迹技术。 5.病原菌核酸的检测：核酸杂交、PCR技术、基因芯片技术。 PCR技术—是选择DNA或RNA体外扩增技术，用标本提取DNA为扩增模板，选用一对特异寡核苷酸为引物，PCR一般要经历三十多次循环，经不同温度变性93-94℃（作用1min氢键断裂形成单链DNA）、退火40-60℃（迅速冷却30-60s引物与DNA模板结合，形成局部双链）、延伸70-75℃（在TaqDNA聚合酶作用下，以A、T、G、C四种脱氧核苷酸为原料，从引物5’→3’端延伸，合成与模板互补的DNA链。），扩增产物用溴乙啶染色的凝胶电泳。其具有特异、快速、灵敏、特异性强、操作简便、能够定量。引物是PCR特异性的决定因素，PCR反应中TaqDNA聚合酶、引物加量过多，可引起非靶序列扩增。 变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变： 1）溶液粘度降低。2）溶液旋光性发生改变。3）增色效应。热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为" 退火"，Tm低25℃左右的温度是复性的最佳条件。核酸实验中经常以迅速冷却至4℃以下方式保持DNA的变性(单链)状态。 基因芯片技术（DNA芯片、DNA微阵列）—主要过程：DNA微阵列的制备、样品的制备、靶分子和探针之间的杂交、杂交信号的检测与分析。具有快速、敏感、高通量检测平台。 核酸杂交（基因探针杂交技术）--是指单链RNA和DNA或DNA和DNA或RNA和RNA，根据碱基配对原则，借氢键相连而形成杂交分子的过程。杂交百分率＞70%（≥69%）为高度同源性，同源性在60%以上是一个种，同源性在60%--70%是同一种内不同亚种，同源性在20%--60%同一属内不同菌种，同源性
微生物检验技术基础知识模拟题12 一、最佳选择题 1. SS琼脂培养基属于 A.厌氧培养基 B.营养培养基 C.鉴别培养基 D.选择培养基 E.特殊培养基 答案：D SS琼脂含有抑制剂胆盐、煌绿、硫代硫酸钠，对大肠埃希菌有较强的抑制作用，而对肠道致病菌则无明显抑制作用，是沙门菌属及志贺菌属的强选择培养基。 2. 从脑脊液中分离培养，能在血平板上生长的细菌最可能是 A.脑膜炎奈瑟菌 B.军团菌 C.变形杆菌 D.伤寒沙门菌 E.金黄色葡萄球菌 答案：A 脑膜炎奈瑟菌为流行性脑脊髓膜炎(流脑)的病原菌，引起化脓性脑脊髓膜炎，可从脑脊液中分离培养，而且培养条件要求较高，普通培养基上不生长，在含有血清或血液的培养基上方能生长。 3. 病毒长期保存最好的方法是 A.-20℃冰箱 B.-80℃冰箱 C.-70℃冰箱
答案：D 冷冻干燥法是保存病毒最好的方法，用此方法病毒可长期保存。 4. 痰标本涂片抗酸染色，如镜检找到抗酸杆菌，报告时符号“++”代表 A.多数视野能发现1～9个以上的抗酸杆菌 B.多数视野发现10个或10个以上的抗酸杆菌 C.全片发现1～2个抗酸杆菌 D.全片发现1～9个抗酸杆菌 E.全片未发现抗酸杆菌 答案：A 痰标本检查结核分枝杆菌，行涂片与抗酸染色，如镜检时多数视野能发现1～9个以上的抗酸杆菌，可报告“++”。 5. SPA是指 A.肺炎克雷伯杆菌A蛋白 B.金黄色葡萄球菌A蛋白 C.链球菌A蛋白 D.表皮葡萄球菌A蛋白 E.大肠埃希菌A蛋白 答案：B SPA是金黄色葡萄球菌细胞壁成分中的A蛋白，能与人及多种哺乳动物血清中的IgG类抗体的Fc段非特异结合，常用作协同凝集试验。 6. 结核分枝杆菌在液体培养基中培养时出现的现象是 A.混浊生长 B.沉淀生长
食品微生物检验技术复 习题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
名词解释 样品（sample）是指从某一总体中抽出的一部分。 食品采样（sampling）是指从较大批量食品中抽取能较好地代表其总体样品的方法。 接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 菌落总数：指一定数量或面积的食品样品，在一定条件下进行细菌培养，使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落，然后进行菌落计数所得的菌落数量。 V-P试验：某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。 生理生化试验：微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 硫化氢（H2S）试验：有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，而产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。 增殖培养基: 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。 外源性污染：食品在生产加工、运输、贮藏、销售食品过程中不遵守操作规程或不按卫生要求使食品发生污染称为外源性污染，也称为第二次污染． 环状沉淀反应：是一种定性试验方法，可用已知抗体检测未知抗原。将已知抗体注入特制小试管中，然后沿管壁徐徐加入等量抗原，如抗原与抗体对应，则在两液界面出现白色的沉淀圆环。 微生物性食物中毒：食用被微生物或微生物毒素污染的食品而引起的中毒称为微生物性食物中毒。 无菌接种操作：培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上，这过程叫做无菌接种操作。 菌落：指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。 细菌总数：指一定数量或面积的食品样品．经过适当的处理后，在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。 大肠菌群：系指一群在37度能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽胞杆菌。 淀粉水解试验：某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。 糖酵解试验：不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。甲基红（Methyl Red）试验：肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至以下，使甲基红指示剂变红。 靛基质（Imdole）试验：某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。尿素酶（Urease）试验：有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。氧化酶（Oxidase）试验：氧化酶亦即细胞色素氧化酶，为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶，氧化酶先使细胞色素C氧化，然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。硫化氢-靛基质-动力（SIM）琼脂试验：试验方法：以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度，置36±1℃培养18~24h，观察结果。培养物呈现黑色为硫化氢阳性，混浊或沿穿刺线向外生长为有动力，然后加Kovacs氏试剂数滴于培养表面，静置10min，若试剂呈红色为靛基质阳性。培养基未接种的下部，可作为对照。选择培养基:在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。鉴别培养基: 在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。 无菌技术:指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。 粪大肠菌群：系一群需氧及兼性厌氧，在℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。玻片凝集法：是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。试管凝集法：是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其含量。常用于协助诊断某些传染病及进行流行病学调查。 沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合，在有适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应（Precipitation）。絮状沉淀反应：将已知抗原与抗体在试管（如凹玻片）内混匀，如抗原抗体对应，而又二者比例适当时，会出现肉眼可见的絮状沉淀，此为阳性反应。琼脂扩散试验：利用可溶性抗原抗体在半固体琼脂内扩散，若抗原抗体对应，且二者比例合适，在其扩散的某一部分就会出现白色的沉淀线。每对抗原抗体可形成一条沉淀线。有几对抗原抗体，就可分别形成几条沉淀线。大肠菌群MPN：大肠菌群MPN是采用一定的方法，应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值。 大肠菌群值：大肠菌群值是指在食品中检出一个大肠菌群细菌时所需要的最少样品量。内源性污染：凡由动物体在生活过程中，由于本身带染的微生物而造成食品的污染者，称为内源性污染，也称第一次污染．食品腐败变质：是指食品受到各种内外因素的影响，造成其原有化学性质或物理性质发生变化，降低或失去其营养价值和商品价值的过程．
【微生物学检验】知识点整理（第一部分） 简述致病菌引起全身感染后，常见的几种类型？ 答：①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症 试述构成细菌侵袭力的物质基础。 答：①荚膜②黏附素③侵袭性物质 简述病原菌感染机体后，机体如何发挥抗菌免疫功能？ 答：首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构，血脑屏障，胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。7-10 天后， 机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌 简述细菌耐药性产生的主要机制。 答：①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗 菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力，在这种压力的作用下，原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来，并不断扩大。 举例说明细菌命名的原则。 答：细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。一个细菌种的学名由两个拉丁字组成，属名在前，用名词，首字母大写；种名在后，用形容词，首字母小写；两者均用斜体字。中文译名种名在前，属名在后。如 Mycobaterium tuberculosis （结核分枝杆菌）。
属名亦可不将全文写出，只用第一个大写字母代表，如 M. tuberculosis 如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌？并确定其有无致病性。 答：①直接镜检，经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌，可初步报 告疑为葡萄球菌，需进一步分离培养鉴定。②分离培养：血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定，若无细菌生长，需连续观察 7 天，并以血平板确定有无细菌的生长。脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37 C过夜，可形成直径约 2-3mm、产生不同色 素的菌落。金葡菌菌落周围有透明溶血环。③试验鉴定：血浆凝固酶试验，甘露醇发酵试验，耐热核酸酶试验，肠毒素测定， SPA 检测。致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环，血浆凝固酶试验阳性，甘露醇发酵试验阳性，耐热核酸酶试验阳性，SPA 检测有 A 蛋白的存在。 什么是不耐热肠毒素（LT）?它的物理性质、基本结构、致病机理及与霍乱毒素（ CT）的关系如何。 答： LT 是肠产毒型大肠杆菌产生的致病物质，因对热不稳定，故称为不耐热肠毒素。 其65 C 30min 可被破坏。LT分为LT- I和LT- n, LT- H与人类疾病无关，LT- I是引起人 来胃肠炎的致病物质。其结构包括1个A亚单位和5个B亚单位，其中A亚单位是毒素的 活性部分。 B 亚单位与肠粘膜上皮细胞表面的 GM1 神经节苷脂结合后，使 A 亚单位穿越细胞膜与腺苷环化酶作用，令胞内 ATP 转变为 cAMP 。胞质内 cAMP 水平增高后，导致肠粘膜细胞内的水、 氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔，同时钠的吸收减少，导致可持续几天的腹泻。LT- I与霍乱肠毒素两者间的氨基酸的同源性达75%，他们的抗原高度交叉。 什么是 O157 ： H7 大肠杆菌?其致病物质和所致疾病是什么?
农产品质量检测专业及绿色食品生产与经营专业2015级《食品微生物检测技术》课程期末考试卷 （A卷） 一、名词解释（总分10分，每题2分） 1．菌落 2．菌落总数 3．培养基 4．乳酸菌 5．大肠菌群 二、填空题（总分20分，每空1分） 1．与食品工业密切相关的乳酸菌主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和链球菌属中的等。采用法，检测酸奶中的各种乳酸菌可以获得满意结果。 2．我国卫生部颁布的食品微生物指标主要有、和三项。 3．在菌体形态观察中，需进行制片后才能进行显微镜下观察，观察细菌时采用的制片方法是，观察真菌采取的制片方法是。 4．微生物生长需要的营养要素有、、、、生长因子和能源。 5．根据细菌的生长曲线，可将细菌的生长分为、、、 四个时期，作为研究材料应取的细菌最合适。 6．一般培养基的制备主要程序可分为：称量、、调节pH、过滤、、加塞包扎、 和无菌检查等步骤。 7．无菌室的熏蒸消毒，主要采用熏蒸消毒法，测定无菌室无菌程度一般采用法。 三、单项选择题（总分20分，每题1分，将答案写在下面） 1——5：6——10： 11——15：16——20： 1.紫外线的杀菌机理可能是（） A.紫外线的高热作用 B.紫外线的辐射作用 C.紫外线凝固细菌蛋白质 D.紫外线干扰细菌DNA复制与转录
2.革兰氏染色的关键操作步骤是（） A.结晶紫染色 B.碘液固定 C.酒精脱色 D.复染 3.热力灭菌法分干热和湿热灭菌两类，并在同一温度下湿热灭菌效力较干热要强这是因为（） A.可迅速提高温度 B.湿热有一定潜热、穿透力大，促进菌体蛋白凝固 C.迅速破坏细菌的酶系统 D.促进糖类分解 4.关于金黄色葡萄球菌的描述不正确的是（）。 A.球状菌 B.G+ C.在血平板上形成的菌落为黑色D能产生凝固酶 5.GB/T4789.2-2010菌落总数检验方法是（）。 A.平板涂抹法 B.显微镜检查法 C.平板菌落计数法 D.菌落计数器法 6.检测金黄色葡萄球菌所用的增菌液是（） A.7.5%氯化钠肉汤 B.普通肉汤 C.蛋白胨水 D.TTB 7.在测定菌落总数时，首先将食品样品作成（）倍递增稀释液。 A.1：5 B.1：10 C.1：15 D.1：20 8.奶粉检验取样前，操作人员应（） A.用95％的酒精棉球擦手 B.用75％的酒精棉球擦手和容器口周圈 C.用65％的酒精棉球擦容器口周围 D.用酒精灯烤容器口周围 9.某微生物在有氧和无氧时均可以生长并可以利用氧，它属于（）。 A.微好氧菌 B.好氧菌 C.厌氧菌 D.兼性厌氧菌 10.一般培养基高压蒸汽灭菌的条件是：（） A.121℃/15-30min B.115℃/15-30min C.130℃/15-30min D.65℃/15-30min 11.采用湿热高压蒸汽灭菌，（）是影响灭菌质量的关键。
第一章：绪论微生物的概念：它是一大群形体微小、结构简单、一般肉眼看不见或看不清楚的微小低等生物的总称。微生物的特点：1、分布广泛。2、种类繁多，数量大。3、繁殖速度快，代谢能力强。4.易培养、易变异。 微生物的主要类群:1原核细胞型微生物。2、真核细胞型微生物。3、非细胞型微生物。 第二章：微生物发展历程巴斯德和科赫对微生物学发展的奠基作用：巴斯德：近代微生物学的奠基人。1、彻底否定了“自然发生说”，建立疾病病源学说。2、提出了以微生物带些活动为基础的发酵本质新理论，即每一种发酵作用都是由一种微生物引起的。3、发明了“巴氏消毒法”(在60℃~65℃作短时间加热处理，杀死有害微生物)，解决了家蚕软化问题。4、发现引起传染病的微生物在特殊的培养之下可以减轻毒力，制成防病的疫苗。科赫：细菌学奠基人。1、创立微生物学基本操作技术。2、首创显微摄影。3、发现和证实了结核病等传染病的病原体。 第三章：原核微生物细菌大小相差大，常用微米(μm)度量。细菌有杆状、球状和螺旋状三种基本形态。细菌的细胞结构：一般结构指共有的结构、如细胞壁细胞膜细胞质和核区等。特殊结构指某一些细菌才有的结构、如芽孢鞭毛荚膜菌毛和性菌毛等。细胞壁是位于细胞表面最外层的坚韧，略具弹性的结构，主要由肽聚糖等成分组成。革兰氏染色：草酸铵结晶紫初染，碘液媒染，95%乙醇脱色，沙黄等红色染料复染。凡是不能被乙醇脱色，呈蓝紫色的细菌称为革兰氏阳性菌（G+）,凡是经乙醇脱色，呈复染剂颜色称革兰氏阴性菌（G—）。共同成分：——肽聚糖。细胞膜的功能：①控制细胞内外物质运输②维持细胞内正常渗透压屏障③是合成细胞壁各种组分的场所④是进行氧化磷酸化和光合磷酸化的产能基地⑤鞭毛的着生点，并供能。质粒：除细菌染色体DNA 外，在细胞质中核区以外还存在着一种能自由复制的遗传成分。通常是由一共价闭合环状DNA分子组成。芽孢：某些细菌（多为杆菌）在生长后期或一定条件下，细胞质包裹细胞核经高度浓缩脱水形成的一种抗逆性很强的球形椭圆形圆柱形的休眠体。细菌的繁殖：最简单的分裂生殖，即不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接横裂为两个子体的方式。细菌菌落共同特性：湿润、比较光滑、比较透明、比较黏稠、容易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央颜色一致等。放线菌：多核、丝状生成的革兰氏细菌。蓝细菌：形态差异大，有球状、杆状、丝状。固氮作用：蓝细菌的营养最简单，不需要维生素，以硝酸盐或者氨作为氮源，普遍能进行固氮作用。 第四章：真核微生物酵母菌细胞结构：细胞壁：三层、化学成分(葡萄糖30%~34%、甘露聚糖30%、脂类8.5%~13.5%、蛋白质6%~8%等。酵母菌的繁殖：只进行无性繁殖的酵母菌称为假酵母，具有有性繁殖的称为真酵母。无性繁殖：芽殖—芽裂—裂殖。霉菌:是一些丝状真菌（大型真菌除外）的统称。霉菌的形态结构：霉菌菌体均有分支或者不分支的菌丝构成。霉菌的菌丝有两类：无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。霉菌的繁殖：1：无性孢子繁殖：⑴厚垣孢子⑵节孢子⑶分生孢子⑷孢囊孢子。2有性孢子繁殖：⑴卵孢子⑵接合孢子⑶子囊孢子。 第五章：病毒病毒与其他生物的区别：形体极其微小、化学组成简单，主要有核酸和蛋白质、遗传物质为核酸、无细胞结构、没有个体生长和二分裂现象、几乎可以感染所有细胞。烈性噬菌体：由一步生长曲线计算噬菌体裂解量=平稳期平均噬菌斑数/潜伏期平均噬菌斑数。温和噬菌体与溶源性：溶源细菌的特点①可稳定遗传②可自发裂解③溶源转变④具有免疫性。亚病毒：①类病毒②拟病毒③朊病毒 第六章：微生物的营养和培养基微生物获取营养的方式⑴单纯扩散⑵促进扩散⑶主动运输⑷基团转位。培养基的选用和设计原则：原则:目的明确,营养协调,经济节约物理化学条件适宜。步骤:称量,熔化,调PH,过滤,分装,加塞,包扎,灭菌,冷却,无菌检查。培养基种类: 一,按成分的不同分：天然培养基,合成培养基,半合成培养基。二,按培养基的物理状态分：固体培养基,液体培养基,半固体培养基。三,按培养基用途：基础培养基,选择培养基，加富培养基,鉴别培养基。天然培养基（牛肉膏蛋白胨）牛肉膏5.0g 蛋白胨10.0g NaCl 5.0g H2O1000ml pH 7.2~7.4。 第七章：微生物的代谢生物氧化的过程：物质在生物体内经过一系列连续的氧化还原反应，逐步分解并释放能量的过程。生物氧化的类型：有氧呼吸、无氧呼吸和发酵。微生物的代谢：生物体内葡萄糖被降解成丙酮酸的途径：EMP（糖酵解途径）HMP（磷酸戊糖途径）ED（2-酮-3-脱氧-6-磷酸-葡萄糖酸（KDPG）裂解途径） 第八章：微生物的生长细菌生长繁殖曲线：1.延迟期、2.对数生长期、3.稳定期、4.衰亡期。 第九章：微生物控制与菌种保藏 1.灭菌：指杀死或清除杂菌和生产菌、病原菌和非病原菌在内的所有微生物方法，其结果是无菌2.消毒：仅杀死物体表面或内部对生物体有害的病原菌，而对被消毒对象无害的措施 3.防腐或抑菌：能够防止或抑制微生物生长，但不能杀死微生物群体的方法。常用的消毒方法：1.煮沸消毒法。2.巴斯德消毒法。3.利用消毒剂处理。常用灭菌方法：1.加热灭菌。2.过滤灭菌。3.辐射灭菌。菌种保存和原理方法：1.斜面低温保藏法。2.液体石蜡保藏法。3.蒸馏水保藏法。4.载体保藏法。5.寄主保藏法。6.冷冻干燥保藏法。液氮超低温保藏法。 第十章：微生物遗传与变异所谓遗传，是指亲代生物将自身的一整套遗传信息传递给子代从而使亲代生物特性从子代中得以延续。1. 遗传型：指某一生物个体所携带的遗传信息总和。2.表型：指某一生物的一切外部特性和内部特性的总和。3.遗传性变异：指生物体的基因结构发生改变，如基因突变或基因转移与重组等。4.表型改变：又称饰变，指生物体受环境因素的影响产生的性状改变现象，但其基因结构不改变。 十二章：微生物的生态微生物生态学是研究微生物及其生存环境间相互作用规律的科学。微生物与其他生物的相互关系：互生、共生、拮抗、寄生。微生物在碳素循环中的作用：固氮作用、氨化作用、硝化作用、反硝化作用。 第一章：绪论微生物的概念：它是一大群形体微小、结构简单、一般肉眼看不见或看不清楚的微小低等生物的总称。微生物的特点：1、分布广泛。2、种类繁多，数量大。3、繁殖速度快，代谢能力强。4.易培养、易变异。 微生物的主要类群:1原核细胞型微生物。2、真核细胞型微生物。3、非细胞型微生物。 第二章：微生物发展历程巴斯德和科赫对微生物学发展的奠基作用：巴斯德：近代微生物学的奠基人。1、彻底否定了“自然发生说”，建立疾病病源学说。2、提出了以微生物带些活动为基础的发酵本质新理论，即每一种发酵作用都是由一种微生物引起的。3、发明了“巴氏消毒法”(在60℃~65℃作短时间加热处理，杀死有害微生物)，解决了家蚕软化问题。4、发现引起传染病的微生物在特殊的培养之下可以减轻毒力，制成防病的疫苗。科赫：细菌学奠基人。1、创立微生物学基本操作技术。2、首创显微摄影。3、发现和证实了结核病等传染病的病原体。 第三章：原核微生物细菌大小相差大，常用微米(μm)度量。细菌有杆状、球状和螺旋状三种基本形态。细菌的细胞结构：一般结构指共有的结构、如细胞壁细胞膜细胞质和核区等。特殊结构指某一些细菌才有的结构、如芽孢鞭毛荚膜菌毛和性菌毛等。细胞壁是位于细胞表面最外层的坚韧，略具弹性的结构，主要由肽聚糖等成分组成。革兰氏染色：草酸铵结晶紫初染，碘液媒染，95%乙醇脱色，沙黄等红色染料复染。凡是不能被乙醇脱色，呈蓝紫色的细菌称为革兰氏阳性菌（G+）,凡是经乙醇脱色，呈复染剂颜色称革兰氏阴性菌（G—）。共同成分：——肽聚糖。细胞膜的功能：①控制细胞内外物质运输②维持细胞内正常渗透压屏障③是合成细胞壁各种组分的场所④是进行氧化磷酸化和光合磷酸化的产能基地⑤鞭毛的着生点，并供能。质粒：除细菌染色体DNA 外，在细胞质中核区以外还存在着一种能自由复制的遗传成分。通常是由一共价闭合环状DNA分子组成。芽孢：某些细菌（多为杆菌）在生长后期或一定条件下，细胞质包裹细胞核经高度浓缩脱水形成的一种抗逆性很强的球形椭圆形圆柱形的休眠体。细菌的繁殖：最简单的分裂生殖，即不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接横裂为两个子体的方式。细菌菌落共同特性：湿润、比较光滑、比较透明、比较黏稠、容易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央颜色一致等。放线菌：多核、丝状生成的革兰氏细菌。蓝细菌：形态差异大，有球状、杆状、丝状。固氮作用：蓝细菌的营养最简单，不需要维生素，以硝酸盐或者氨作为氮源，普遍能进行固氮作用。 第四章：真核微生物酵母菌细胞结构：细胞壁：三层、化学成分(葡萄糖30%~34%、甘露聚糖30%、脂类8.5%~13.5%、蛋白质6%~8%等。酵母菌的繁殖：只进行无性繁殖的酵母菌称为假酵母，具有有性繁殖的称为真酵母。无性繁殖：芽殖—芽裂—裂殖。霉菌:是一些丝状真菌（大型真菌除外）的统称。霉菌的形态结构：霉菌菌体均有分支或者不分支的菌丝构成。霉菌的菌丝有两类：无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。霉菌的繁殖：1：无性孢子繁殖：⑴厚垣孢子⑵节孢子⑶分生孢子⑷孢囊孢子。2有性孢子繁殖：⑴卵孢子⑵接合孢子⑶子囊孢子。 第五章：病毒病毒与其他生物的区别：形体极其微小、化学组成简单，主要有核酸和蛋白质、遗传物质为核酸、无细胞结构、没有个体生长和二分裂现象、几乎可以感染所有细胞。烈性噬菌体：由一步生长曲线计算噬菌体裂解量=平稳期平均噬菌斑数/潜伏期平均噬菌斑数。温和噬菌体与溶源性：溶源细菌的特点①可稳定遗传②可自发裂解③溶源转变④具有免疫性。亚病毒：①类病毒②拟病毒③朊病毒 第六章：微生物的营养和培养基微生物获取营养的方式⑴单纯扩散⑵促进扩散⑶主动运输⑷基团转位。培养基的选用和设计原则：原则:目的明确,营养协调,经济节约物理化学条件适宜。步骤:称量,熔化,调PH,过滤,分装,加塞,包扎,灭菌,冷却,无菌检查。培养基种类: 一,按成分的不同分：天然培养基,合成培养基,半合成培养基。二,按培养基的物理状态分：固体培养基,液体培养基,半固体培养基。三,按培养基用途：基础培养基,选择培养基，加富培养基,鉴别培养基。天然培养基（牛肉膏蛋白胨）牛肉膏5.0g 蛋白胨10.0g NaCl 5.0g H2O1000ml pH 7.2~7.4。 第七章：微生物的代谢生物氧化的过程：物质在生物体内经过一系列连续的氧化还原反应，逐步分解并释放能量的过程。生物氧化的类型：有氧呼吸、无氧呼吸和发酵。微生物的代谢：生物体内葡萄糖被降解成丙酮酸的途径：EMP（糖酵解途径）HMP（磷酸戊糖途径）ED（2-酮-3-脱氧-6-磷酸-葡萄糖酸（KDPG）裂解途径） 第八章：微生物的生长细菌生长繁殖曲线：1.延迟期、2.对数生长期、3.稳定期、4.衰亡期。 第九章：微生物控制与菌种保藏 1.灭菌：指杀死或清除杂菌和生产菌、病原菌和非病原菌在内的所有微生物方法，其结果是无菌2.消毒：仅杀死物体表面或内部对生物体有害的病原菌，而对被消毒对象无害的措施 3.防腐或抑菌：能够防止或抑制微生物生长，但不能杀死微生物群体的方法。常用的消毒方法：1.煮沸消毒法。2.巴斯德消毒法。3.利用消毒剂处理。常用灭菌方法：1.加热灭菌。2.过滤灭菌。3.辐射灭菌。菌种保存和原理方法：1.斜面低温保藏法。2.液体石蜡保藏法。3.蒸馏水保藏法。4.载体保藏法。5.寄主保藏法。6.冷冻干燥保藏法。液氮超低温保藏法。 第十章：微生物遗传与变异所谓遗传，是指亲代生物将自身的一整套遗传信息传递给子代从而使亲代生物特性从子代中得以延续。1. 遗传型：指某一生物个体所携带的遗传信息总和。2.表型：指某一生物的一切外部特性和内部特性的总和。3.遗传性变异：指生物体的基因结构发生改变，如基因突变或基因转移与重组等。4.表型改变：又称饰变，指生物体受环境因素的影响产生的性状改变现象，但其基因结构不改变。 十二章：微生物的生态微生物生态学是研究微生物及其生存环境间相互作用规律的科学。微生物与其他生物的相互关系：互生、共生、拮抗、寄生。微生物在碳素循环中的作用：固氮作用、氨化作用、硝化作用、反硝化作用。
29微生物检验技术基 础知识
一、以下每一道考题下面有A、B、C 、D、 E 五个备选答案。请从中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属的方框涂黑。 1机体抵抗病原微生物的屏障结构包括 A皮肤与黏膜 B血脑脊液屏障 C胎盘屏障 D免疫系统 E B和C 2有关内毒素的描述哪一项是错误的 A均由革兰阴性菌产生 B其化学成分为脂多糖 C160℃，2～4小时才被破坏 D毒害效应具有组织器官选择性 E毒性作用较弱 3下列描述哪一项是错误的 A病原菌致病力的强弱程度称为毒力 B毒力主要由侵袭力和毒素所决定 C破伤风毒素属于内毒素 D侵袭力是指病原菌突破宿主机体的防御功能，并能在体内定居、繁殖和扩散的能力E以上均不是 4下列哪种成分不属于外毒素 A 脂多糖 B 痉挛毒素 C 肉毒毒素 D 表皮剥脱毒素 E霍乱肠毒素 5下列哪种成分不属于外毒素 A 金黄色葡萄球菌肠毒素 B产毒性大肠杆菌肠毒素 C 白喉毒素 D 表皮剥脱毒素 E 类脂A 6内毒素的毒性作用包括 A发热反应 B白细胞反应 C内毒素血症与内毒素休克 D以上都是 E A和C 7慢性志贺菌感染的病程一般在多少以上A2周 B1个月 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢2
C 2个月 D6周 E 7周 8志贺菌随饮食进入体内，导致人体发病，其潜伏期一般为 A1天之内 B1～3天 C5～7天 D7～8天 E 8天以后 9下列关于结核分枝杆菌描述正确的是A类脂质为胞壁中含量最多的成分 B产生外毒素 C产生内毒素 D耐药性低 E 一般采用革兰染色 10我国的卫生标准中，每升饮用水中不得超过多少个大肠杆菌 A1个 B 3个 C 5个 D7个E8个 11大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖并具有下列何种特征者为阳性 A产酸 B产酸产气 C产酸不产气 D产气不产酸 E以上都不产生 12下列何种细菌为革兰阴性菌 A脑膜炎奈瑟菌 B结核分枝杆菌 C铜绿假单细胞 D枯草芽胞杆菌 E白喉棒状杆菌 13下列何种细菌为革兰阳性杆菌 A大肠杆菌 B铜绿假单细胞 C产气肠杆菌 D结核分枝杆菌 E肺炎克雷伯杆菌 14下列何种细菌为革兰阴性球菌 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢3
(完整word版)微生物学期末考试试题 亲爱的读者： 本文内容由我和我的同事精心收集整理后编辑发布到文库，发布之前我们对文中内容进行详细的校对，但难免会有错误的地方，如果有错误的地方请您评论区留言，我们予以纠正，如果本文档对您有帮助，请您下载收藏以便随时调用。下面是本文详细内容。 最后最您生活愉快 ~O(∩_∩)O ~ 试题A总22页第1页
微生物学教程试卷A 一、名词解释（每小题4分，共5小题20分） 1.无菌技术在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，自身也不污染操作环境的技术称为无菌技术。 2.菌落固体培养基中，单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团是菌落 3.平板是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式，是冷却凝固后固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面称作平板。 4.发酵发酵是指在无氧条件下，底物脱氢后产生的还原力[H]不经过呼吸链传递而直接交给某一内源氧化性中间代谢产物的一类低效产能反应。 5.培养基人工配制的、适合微生物生长、繁殖和产生代谢产物用的混合营养基质。 二、填空题（每空0.5分，共6小题12分） 旋形 试题A总22页第2页
4.根据营养物质在机体中生理功能的不同，可以将它们分 无机盐，生长因子，水 三、选择题（每小题1分，共10小题10分） 1. 产生假根是（）的形态特征。 A.根霉 B.酵母菌 C.青霉 D.曲 霉 2.革兰氏阳性菌细胞壁特有成分是（）。 A.蛋白质 B.肽聚糖 C.脂多糖 D.磷壁酸 3.微生物从糖酵解途径获得（）ATP分子。 总22页第3页
食品微生物检验的内容及检测技术 食品安全检验过程的主要内容 食品微生物的检验。食物在生产过程中以及放置过程中会受到环境中微生物的损坏或影响，在部分研究中，将食品中细菌数量对食品的损坏程度作为食品安全检测的首 要内容。在食品微生物的检验过程中，我们主要对人体有害微生物进行检验，其中在食品安全检验过程中，因为食品中有多种微生物共存现象，所以在检验前，微生物检验员要把不同的菌体进行分离，这样才能更加清楚的了解各种微生物的数量及菌体的分布情况，包括生产型食品微生物，如醋酸杆菌，酵母菌等和使食物变质的微生物，如霉菌、细菌等和食源性病原微生物如溶血性大肠杆菌，肉毒杆菌等。对食品原辅料微生物的控制和产成品微生物的检验是保证食品安 全的重要途径。 针对食品致病菌的相关检验。不同的致病菌会对人们的身体健康有不同程度的危害，像我们在生活中经常吃到的大米，有些不法商家将发霉的大米加工后再次放入市场进行二次销售，虽然经加工后，在外表上和普通大米没啥两样，但这种大米中含有黄曲霉这一致病菌，据可靠信息表明，黄曲霉的危害性十分巨大，如果人们长时间吃这样的大米，出
现癌症的风险要比常人高出很多倍，由此可见，食品中致病菌的检验是保证我们能吃到放心食品十分关键的微生物检 测技术，所以我们在致病菌的检验上对不同种类的致病菌进行定量严格检验。如乳制品和肉制品的致病菌主要是黄曲霉菌和大肠杆菌，而蛋制品中则容易出现染沙门菌、大肠菌群、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，罐头食品容易出现肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌。 食品微生物检验中的主要特点 对食品检测要求相对较高。在食品微生物的一系列检验中，由于食品中涉及的微生物种类较多，因此加大了食品微生物检验的难度。国家标准或行业标准对不同食品中微生物的含量特别是致病菌的含量有明确的要求。在食品的运输过程中，食品致病菌以及其他微生物对相应的食品有一定的污染，随着微生物种类的增多，检测人员需要对食品受致病菌影响的程度、食品保质期以及其他相关的标准进行测量，难度会随着微生物种类的增多而复杂。所以在微生物检验上我们对每一阶段的食品安全检测都要重视，在各个微生物的测量上，相关的检测技术要求就有所提高。 食品微生物检验效率。随着食品市场的商品流通提高，人们对食品需求不断增加，而食品安全问题却在日益严重，为了保障人们在能够及时满足食品种类和数量要求的同时，进一步促进食品安全的保障措施落实，必须加强食品安
江苏省卫生高级专业技术资格专业实践能力考核-微生物检验技术(技)应试总结 考了两年成绩分别是57和58，换专业了。 网上买的题根本没用 2013年副高考试总结（大方向） 《预防医学微生物学及检验技术》附录中有常用培养基 流行病学看什么书？ 流行病学考了一些不是非常难的题，能回忆出来5题，多选占3题。流行病学定义，免疫接种的流行病学效果评价指标，灾区信息来源，不良习惯，二级预防。还有病死率是否考过不能确定了。 流行病学是预防医学的带头学科，所以根据大纲，只看流行病学就可以了。流行病学人卫版的7版目前看还可以。 统计学 回忆出来两题。参考范围，抽样（离散，样本采样与整体） 免疫学 关于B细胞的说法正确的是 微生物学实验室管理 安全分级，PCR实验室空间划分 真菌学一点也没考 2013副高考试试题回忆 单选题 1.第一题是血培养正确的是 做厌氧培养，同时做需氧和厌氧，用***肉汤和***肉汤做需氧培养 2.流行病学的（研究对象？） 疾病，病人，人群，选了一个较长的选项，记不清内容了 3.统计学的参考范围是几个SD，选了2SD 4.霍乱的强选择培养基：4号琼脂 5.哪个型的大肠杆菌可志贺毒素，溶血性**，选了EHTC 6.B细胞的说法：负责细胞免疫，PWM刺激等 7.免疫接种的流行病学效果评价指标，抗体产生？疾病发生率? 多选题 1.灾区还是疫区信息来源 常设机构、灾区救助者、媒体、空中 2.能致泻的是 一堆E*TC，都选了。 3.衣原体与病毒不同点 二分裂，磷壁酸，严格细胞内寄生 4.医院污水不合格判定指标
粪大肠杆菌数？、大肠杆菌群数，大肠杆菌群值，蛔虫卵，余氯 5.关于BSL分级哪项正确 不感染人的用1级，埃博拉可不可以用3级，***需要三级以上，沙门不能用二级 6.志贺菌的致病因素有哪些 鞭毛，膜蛋白，侵袭力，分泌志贺毒素 7.亚病毒包括 DNA病毒，RNA病毒，类病毒，朊病毒，选了类病毒和朊病毒 病毒分为真病毒（Euvirus，简称病毒）和亚病毒（Subvirus，包括类病毒、拟病毒、朊病毒）真病毒：至少含有核酸和蛋白质两种组分。 8.病毒潜伏期 不能检测到病毒核酸，不能分离培养到病毒，无临床症状，能检测到SIgA，不能检测到抗体 9.影响健康的不良习惯 嗜酒，嗜赌，抽烟，不遵医，还有一个选项记不得了 10.属于二级预防的是 筛查，孕前检查，体检（？），康复治疗 11.统计学关于抽样还是离散，离散越大越小各代表什么，还有一个 12.PCR污染的消除（可能是案例分析中的多选） 光消除，AT含量大于300bp，UNG法 13.PCR实验室布局（不确定是否案例分析） 标本接收区，污染区，半污染区，扩增区，产物分析区， 案例分析 1、咳嗽，无痰，X片有树状阴影？轻微上感，肺炎待定。呼吸道病原有哪些？最后判定军 团，需要做哪些检验：马尿酸，靛基质，硫化氢等5678项。老年患者高血压，糖尿病史，可能是这一题。 2、II型猪链球菌，猪死了，杀的人得病，此题没敢选 3、关于森林脑炎的，蜱咬伤史，同种病毒？检测项目，处理方法，抗毒素？ 4、怀疑甲肝，检验项目，查血，尿，肝功能，B超，是否嗜肝，粪口传播，检验 5、SARS检验方法，4天检验项目，14天检验什么，取什么样品做检验，分型方法选项扩 增VP3，扩增非编码区，扩增编码区 6、手足口，病原有哪些？采样？咽拭子、粪便、血清，检验方法选项：RT-PCR，RT荧光 定量，抗体 7、破伤风，检测方法，治疗手段护理 8、婴儿腹泻，诺如病毒，属于杯状病毒， 9、一种出疹，留疤痕，黏膜斑（Koplik斑）是麻疹 记不清不能归类 军团菌**样品接种于？ 隔离治疗携带者？ 呼吸道合胞病毒 案例分析中：白细胞正常范围要知道，区别细菌与病毒感染 腺病毒可能有题，记不清了 有一题是检出甲型链球菌（α溶血），分类为几种具体的链球菌，选项是关于支持还是不支持链球菌是病原，选了“不支持，因为链球菌是正常的菌群”，还有不支持选项是“采样部位非无菌”，“没有优势菌”，支持的选项：“都是链球菌”等
习题七 一、填空 1．我国卫生部颁布的食品微生物指标有、和三项。 2．凡乳糖发酵管产气，革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌，即报告为大肠杆菌性；凡乳糖发酵管不产气或革兰氏染色为阳性，则报告为大肠杆菌为性。 二、选择 1.乳糖初发酵试验通常在（）检测中用到。 A 乳酸菌 B. 酵母菌 C. 细菌总数 D. 大肠杆菌 2.大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A产酸 B 产酸产气 C 产酸不产气D产气不产酸 E 以上都不产生 3.在饮用水中检出（），不能推定为粪便污染 A 埃希氏大肠杆菌 B 沙门氏菌C志贺菌D产气肠杆菌E弧菌属 4.在检验肠道细菌时应将培养物置（）培养。 A 28 ℃ B 25℃ C 36±1℃ D 45℃ 5.微生物的检验中，大肠菌群的测定单位用（）表示。 A g/ml (g) B g/100ml (g) C MPN/100ml (g) D cfu/ml (g) 6.大肠菌群的生物学特性是() A发酵乳糖、产酸、不产气 B不发酵乳糖、产酸、产气 C发酵乳糖、产酸、产气 D发酵乳糖、不产酸、不产气 7.大肠菌群的生物学特征是（） A革兰氏阳性、需氧和兼性厌氧 B革兰氏阴性、需氧和兼性厌氧 C革兰氏阳性、厌氧 D革兰氏阳性、需氧 8.大肠菌群在EMB平板上的菌落特征是（） A白色针尖状 B金黄色葡萄球菌 C黑色 D红色 9.MPN是指（） A 100g样品中大肠菌群确切数 B 1g样品中大肠菌群确切数 C 1g样品中大肠菌群近似数 D 100g样品中大肠菌群近似数 10.测定大肠菌群时，经EMB平板分离后要确定是否为大肠菌群，还要经过（） A 三糖铁试验 B V-P试验 C复发酵和革兰氏染色 D硫化氢试验 12.大肠菌群测定的一般步骤是（） A初发酵-分离-染色-复发酵 B初发酵-分离-复发酵-染色 C初发酵-复发酵-分离 D初发酵-复发酵 13.大肠菌群初发酵的培养条件是（） A 36℃，24h B 25℃，一周 C 36℃，48h D 36℃，4h 14.大肠菌群复发酵的培养条件是（） A 36℃，24h B 36℃，4h C 36℃，48h D 36℃，12h 15.下列有关大肠杆菌的描述中，错误的是( ) A革兰氏反应呈阴性 B菌体形态是短杆菌 C菌体排列为一个或二个 D会形成孢子 16.检测大肠菌群时，待检样品接种乳糖胆盐发酵管，经培养如不产气，则大肠菌群( )。A阳性 B阴性 C需进一步试验 D需接种伊红美兰平板 17.我国的卫生标准中，每升饮用水中不得超过（）个大肠杆菌 A1 B3 C5 D 7 E 8 18.大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A产酸B产酸产气C产酸不产气D产气不产酸E以上都不产生