第三方淋巴细胞主动免疫治疗不明原因复发性流产的可行性研究
目的：寻求一种新的不明原因复发性流产的有效治疗方法。方法：以采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴细胞对患复发性流产女方进行主动免疫治疗为实验组，采用丈夫外周血中淋巴细胞进行主动免疫治疗为对照组，用相同的方法获得外周血淋巴细胞，通过对比两组患者的CD4+、CD25+、Tr表达率和妊娠成功率进行比较。结果：发现采用丈夫以外的男性（第三方）外周血（实验组）和采用丈夫外周血（对照组）治疗前后患者的CD4+、CD25+、Tr表达率之间均存在显著差异（P＜0.05），表现为治疗后表达率均高于治疗前。观察组患者妊娠成功率为94.4%，对照组妊娠成功率为93.1%。二者之间无显著差异（P>0.05）。结论：采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴细胞对患复发性流产女方进行主动免疫治疗同样效果显著。
复发性流产（RSA）是指妊娠20周前连续自然流产3次及3次以上者，是临床上常见的妊娠并发症。在育龄妇女中的发病率约为1%～5%[1]。引起复发性流产的因素很多，如遗传因素、子宫病变、内分泌失调、自身免疫性疾病等是较确定的原因[2]。另外，还有占50%左右的复发性流产，目前病因还没有明确，而其中40%～60%原因不明的复发性流产是由免疫方面的因素引起的，其中封闭抗体不足就是导致复发性流产的关键免疫因素。
现今，选择淋巴细胞免疫治疗该疾病已经成为关注的焦点。通常是采用丈夫的外周血淋巴细胞进行主动免疫治疗，可以取得良好的疗效。然而，有时受女方丈夫患有传染性疾病或其他因素影响，丈夫外周血不能用时这一治疗方法就受到了限制。本研究主要是采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴细胞对患复发性流产女方进行主动免疫治疗，与采用丈夫外周血中淋巴细胞进行主动免疫治疗进行对比，观察其治疗效果。以寻求一种新的复发性流产的有效治疗方法。
1 资料与方法
1.1 研究对象
选择在本院生殖中心门诊确诊的RSA患者114例，由于丈夫患有传染性疾病或其他因素影响只能采用丈夫以外的男性（第三方）外周血的56例，作为观察组。采用丈夫外周血的58例作为对照组。女方平均年龄29岁，平均自然流产5（3～8）次，所有患者均符合以下条件：1）早期自然流产史≥2次；2）抗体ASAb、EmAb、ACA等自身抗体均阴性；3）内分泌检查正常，无黄体功能不足；4）封闭抗体（BA）阴性；5）双方行TORCH、衣原体、支原体等检查均为阴性；6）夫妇双方无家族遗传病史；7）男方精液分析正常；8）治疗前3个月未经过任何免疫治疗；9）夫妻双方对淋巴细胞主动免疫疗法有充分的了解，并签署知情同意书，均排除生殖道畸形和形态学异常。
供血者筛查：在进行主动免疫治疗前，对供血者进行常规检查，已排除疾病血行感染的潜在可能。同时对患者进行知情谈话，告知主动免疫治疗存在的风险，
签署知情同意书。
1.2 研究方法
无菌条件下抽取患者丈夫或第三方男性外周血20mL，加入肝素钠10m、生理盐水10mL混匀，静置30min，经淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，然后吸取富含淋巴细胞的白膜层，加入适量生理盐水洗涤2次，将淋巴细胞浓度调整为（20～40）×106mL-1，于患者前臂内侧分4～6点皮内注射，间隔3周注射1次（避开月经期），3次为1个疗程。第1个疗程结束后2周，复查封闭抗体，如果转阳者，鼓励患者尽快受孕，妊娠后再继续免疫治疗12～14周，B超检查提示胎儿正常则停止治疗。同时嘱咐患者妊娠后注意休息，保持情绪稳定。疗程结束后未妊娠者，每3个月加强1次。
1.3 观察指标
对两组患者的CD4+、CD25+、Tr 表达率进行比较，同时将妊娠超过12周者视为妊娠成功，比较两组妊娠成功率。
1.4 统计学方法
应用SPSS11.0统计软件进行统计学处理，计量资料以均数士标准差表示，两样本均数比较采用。针对计数资料和组间对比展开t检验和χ2检验，在P＜0.05时为差异具有统计学意义。
2 实验结果
2.1 治疗前后两组患者的CD4+、CD25+、Tr表达率比较
治疗前后两组患者的CD4+、CD25+、Tr表达率经统计发现，观察组和对照组治疗前后患者的CD4+、CD25+、Tr表达率之间均存在显著差异（P＜0.05），表现为治疗后表达率均高于治疗前。详见表1。
2.2 妊娠成功率
统计发现，观察组患者妊娠成功率为94.4%，对照组妊娠成功率为93.1%。二者之间无显著差异（P>0.05），详见表2。
3 讨论
复发性流产给患者本人以及家庭带来诸多生理以及心理上的问题。现阶段，针对原因不明性复发性流产的流行病学、病因学、生殖免疫学等诸多研究为临床对该病的治疗提供了有利的依据。然而，至今还未有一个相对统一的方案[3]。经现代免疫学研究指出，人类胚胎的形成过程为一个同种半移植的过程，胎儿中来自父亲的那一半基因抗原针对孕妇而言为一种外来异物，所以会受到母体的明
显排斥。在正常妊娠过程中，为了对抗排斥能够保证胚胎的继续生存，一般母体会产生封闭抗体现象，若是封闭抗体缺乏后，胚胎则会受到来自母体血中杀伤细胞的有力攻击，最终引起流产的发生[4]。
主动免疫治疗的主要机制，是应用淋巴细胞诱发患者产生对妊娠起保护作用的阻断性抗体，即封闭抗体。当妻子再次受孕时这些封闭抗体就能识别胚胎来自配偶的抗原并与之结合继而产生封闭作用可使胚胎得到保护并生长发育从而有利于妊娠成功[5][6]。另外，主动免疫治疗还可提高妻子的免疫反应性使妻子体内的封闭抗体形成增多保护胎儿不易受母体免疫系统排斥。主动免疫治疗可提高不明原因复发性流产患者的再次妊娠成功率，其方法简单、有效且有重要的临床应用价值。然而，当受女方丈夫患有传染性疾病或其他因素影响，丈夫外周血不能用时这一治疗方法就受到了限制。本研究主要是采用丈夫以外的男性（第三方）外周血中淋巴细胞对患复发性流产女方进行主动免疫治疗，与采用健康的丈夫外周血中淋巴细胞进行主动免疫治疗相对比，观察其治疗效果。结果发现采用丈夫以外的男性（第三方）外周血（实验组）和采用丈夫外周血（对照组）治疗前后患者的CD4+、CD25+、Tr表达率之间均存在显著差异（P＜0.05），表现为治疗后表达率均高于治疗前。观察组患者妊娠成功率为94.4%，对照组妊娠成功率为93.1%。二者之间无显著差异（P>0.05）。
4 结论
综上所述，主动免疫治疗可提高不明原因复发性流产患者的再次妊娠成功率，其方法简单、有效且有重要的临床应用价值。当受女方丈夫患有传染性疾病或其他因素影响，丈夫外周血不能用时，采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴细胞对患复发性流产女方进行主动免疫治疗同样效果显著。
参考文献：
[1]Kuon RJ，Wallwiener LM，Germeyer A，et al.Establishment of a standardized immunological diagnostic procedure in RM patients[J].J Reprod Immunol，2012，94（1）：55.
[2]Rai R，Regan L.Recurrent miscarriage[J].Lancet，2006，368 （9535）：601-611.
[3] 林其德.复发性流产免疫学诊断和治疗共识[J].生殖医学.2008，2（17）：1.
[4] 徐岚，张新能等.细胞免疫功能的变化与原因不明习惯性流产的关系[J].中国实用妇科与产科杂志，2010，22（5）：349-351.
[5]秦卫兵，杨宁，王一峰等.不同来源的淋巴细胞主动免疫治疗原因不明复发性流产[J].广东医学，2010，31（2）：64.
[6]黄会霞.复发性流产的淋巴细胞主动免疫治疗效果观察[J].医药论坛杂志，2009，30（14）：3-4.
第三方淋巴细胞主动免疫治疗不明原因复发性流产的可行性研究 目的：寻求一种新的不明原因复发性流产的有效治疗方法。方法：以采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴细胞对患复发性流产女方进行主动免疫治疗为实验组，采用丈夫外周血中淋巴细胞进行主动免疫治疗为对照组，用相同的方法获得外周血淋巴细胞，通过对比两组患者的CD4+、CD25+、Tr表达率和妊娠成功率进行比较。结果：发现采用丈夫以外的男性（第三方）外周血（实验组）和采用丈夫外周血（对照组）治疗前后患者的CD4+、CD25+、Tr表达率之间均存在显著差异（P＜0.05），表现为治疗后表达率均高于治疗前。观察组患者妊娠成功率为94.4%，对照组妊娠成功率为93.1%。二者之间无显著差异（P>0.05）。结论：采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴细胞对患复发性流产女方进行主动免疫治疗同样效果显著。 复发性流产（RSA）是指妊娠20周前连续自然流产3次及3次以上者，是临床上常见的妊娠并发症。在育龄妇女中的发病率约为1%～5%[1]。引起复发性流产的因素很多，如遗传因素、子宫病变、内分泌失调、自身免疫性疾病等是较确定的原因[2]。另外，还有占50%左右的复发性流产，目前病因还没有明确，而其中40%～60%原因不明的复发性流产是由免疫方面的因素引起的，其中封闭抗体不足就是导致复发性流产的关键免疫因素。 现今，选择淋巴细胞免疫治疗该疾病已经成为关注的焦点。通常是采用丈夫的外周血淋巴细胞进行主动免疫治疗，可以取得良好的疗效。然而，有时受女方丈夫患有传染性疾病或其他因素影响，丈夫外周血不能用时这一治疗方法就受到了限制。本研究主要是采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴细胞对患复发性流产女方进行主动免疫治疗，与采用丈夫外周血中淋巴细胞进行主动免疫治疗进行对比，观察其治疗效果。以寻求一种新的复发性流产的有效治疗方法。 1 资料与方法 1.1 研究对象 选择在本院生殖中心门诊确诊的RSA患者114例，由于丈夫患有传染性疾病或其他因素影响只能采用丈夫以外的男性（第三方）外周血的56例，作为观察组。采用丈夫外周血的58例作为对照组。女方平均年龄29岁，平均自然流产5（3～8）次，所有患者均符合以下条件：1）早期自然流产史≥2次；2）抗体ASAb、EmAb、ACA等自身抗体均阴性；3）内分泌检查正常，无黄体功能不足；4）封闭抗体（BA）阴性；5）双方行TORCH、衣原体、支原体等检查均为阴性；6）夫妇双方无家族遗传病史；7）男方精液分析正常；8）治疗前3个月未经过任何免疫治疗；9）夫妻双方对淋巴细胞主动免疫疗法有充分的了解，并签署知情同意书，均排除生殖道畸形和形态学异常。 供血者筛查：在进行主动免疫治疗前，对供血者进行常规检查，已排除疾病血行感染的潜在可能。同时对患者进行知情谈话，告知主动免疫治疗存在的风险，
淋巴细胞免疫治疗与复发性流产研究 目的：探讨淋巴细胞免疫治疗复发性流产的方法与效果。方法：将2011年7月-2012年7月在笔者所在医院就诊的复发性流产患者86例随机分为观察组43例（淋巴细胞免疫治疗）和对照组43例（传统保胎治疗），对两组的妊娠情况进行对比。结果：观察组与对照组的妊娠成功率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。封闭抗体阳性与阴性的妊娠成功率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：淋巴细胞免疫治疗复发性流产可以提高妊娠成功率，减少流产率，值得临床推广运用。 标签：淋巴细胞；免疫治疗；复发性流产 连续自然流产达到2次或2次以上，就可以诊断复发性流产（RSA），RSA 属于妇产科中发病率较高的并发症。其病因异常复杂，主要有生殖系统结构异常、染色体异常、免疫功能异常、生殖道炎症以及内分泌失衡[1]。还有占50%左右的复发性流产目前病因还没有明确，而其中40%～60%病因不清的复发性流产离不开免疫方面的原因，其中封闭抗体不足就是导致复发性流产的关键免疫因素。现今，选择淋巴细胞免疫治疗该疾病已经成为关注的焦点。现对2011年7月-2012年7月在笔者所在医院就诊的复发性流产患者应用淋巴细胞免疫治疗取得的良好效果报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 本组资料共计86例，均为2011年7月-2012年7月在笔者所在医院就诊的复发性流产患者，年龄22～37岁，平均（27.23±3.50）岁。流产次数：2次54例，3次19例，4次以上13例。排除子宫畸形、宫颈松弛等患者。经筛查后确诊为封闭抗体阴性的RSA。随机分为观察组43例（淋巴细胞免疫治疗）和对照组43例（传统保胎治疗），两组患者年龄及流产次数等方面比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。 1.2 纳入标准 全部患者在开始研究前都订立了知情同意书，全部RSA患者满足下面这些条件：（1）早期自然流产至少达到2次；（2）夫妇二人染色体核型均处于正常状态，没有家族遗传；（3）通过一般的妇科检查以及B超检查，结果显示生殖道未出现异常；（4）通过白带检验宫颈衣原体以及支原体，结果显示生殖道未出现感染；（5）通过对LH、PRL、P、FSH、T以及E2等生殖内分泌激素进行检验，结果显示内分泌以及空腹血糖均未出现异常；（6）不管是抗精子抗体，还是抗心磷脂抗体以及抗子宫内膜抗体，均显示（-）；（7）封闭抗体也显示（-）；（8）治疗开始前的3个月没有接受过免疫治疗或者是接种，也没有服用改善免疫功能的相关药物；（9）男方精液没有异常现象[2]。
淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产40例临床分析目的：探讨采用淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产（RSA）的临床疗效。 方法：将临床筛查确诊为封闭抗体缺乏所致的复发性流产患者80例随机分为治疗组和对照组各40例，治疗组采用其配偶外周血淋巴细胞进行主动免疫治疗（LIT），对照组采用传统保胎治疗（黄体酮加hCG），比较两组的妊娠结局。结果：治疗组妊娠成功32例，成功率为80%，其中足月分娩16例（50%），妊娠中晚期16例，8例流产；对照组妊娠成功16例，成功率为40%，其中足月分娩6例（37.5%），妊娠中晚期10例，24例流产，两组比较差异有统计学意义（P ＜0.01）。两组患者免疫治疗的结果为，封闭抗体转为阳性患者34例，其中妊娠成功率为85.3%（29例）；封闭抗体为阴性者6例，妊娠成功率为33.3%（2例），两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产安全、有效，具有可靠的临床应用价值。 标签：封闭抗体；复发性流产；淋巴细胞；免疫治疗 【Abstract】Objective：To investigate the clinical efficacy of recurrent spontaneous abortion （RSA）using lymphocytes active immunotherapy.Method：80 cases of patients with RSA which were diagnosed by blocking antibody screening were randomly divided into the treatment group（40 patients）and the control group （40 patients）.The patients in the treatment group were treated by LIT with peripheral blood lymphocytes，the patients in the control group with traditional miscarriage treatment（progesterone plus hCG），then the pregnancy outcomes were compared.Result：In the treatment group，32 cases of pregnancy were treated successfully，and the success rate was 80%，including 16 patients with full-term delivery （50%），16 cases with late pregnancy，8 cases of abortion.In the control group，there were 16 cases with successful pregnancy，the success rate was 40%，including six cases with term birth（37.5%），10 cases with late pregnancy，24 cases of abortion.By comparison，there was significant difference in the two groups（P＜0.01）.After immunotherapy，34 patients became positive blocking antibodies，including 29 cases of pregnancy success，a success rate of 85.3%；six cases of blocking antibodies were still negative，two cases with pregnancy success，the success rate was 33.3%，respectively，the difference there was statistically significant （P＜0.05）.Conclusion：Lymphocyte active immunotherapy which is used to treat RSA is safe，effective，and reliable clinical value. 【Key words】Blocking antibodies；Recurrent spontaneous abortion；Lymphocytes；Immunotherapy 复发性流产（Recurrent Spontaneous Abortion，RSA）患者往往经历了多次妊娠后的自然流产（连续或不连续流产次数≥2次）[1]。是一种常见的妊娠期并发症，发生率占育龄妇女的1%～5%。RSA可有单一病因或多病因引发，其病因复杂性较高，已知引起复发性流产的常见原因有：染色体异常、生殖系统机能紊
关于复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的定义，美国生殖医学学会的标准是2次或2 次以上妊娠失败;英国皇家妇产科医师协会(Royal College of Obstetricians and Gynaecologists,RCOG)则定义为与 同一性伴侣连续发生3次或3次以上并于妊娠24周前的胎儿丢失;而我国通常将3次或3次以上在妊娠28周之前的胎儿丢失称为复发性流产，但大多数专家认为，连续发生2次流产即应重视并予评估，因其再次出现流产的风险与3次者相近。宜昌市第二人民医院妇科梅泉 RSA病因复杂多样且缺乏特异性临床表现，在病因诊断过程中需要针对性进行一系列的筛查，为满足临床工作的需要，中华医学会妇产科学分会产科学组特别制定RSA诊治的专家共识。本专家共识以美国生殖医学学会及RCOG发布的“RSA诊治指南”为基础，同时结合我国临床工作中的经验及实际情况进行组织撰写，旨在为RSA的临床诊治提供参考。 病因及筛查 RSA的病因十分复杂，主要包括遗传因素、解剖因素、内分泌因素、感染因素、免疫功能异常、血栓前状态、孕妇的全身性疾病及环境因素等。妊娠不同时期的RSA，其病因有所不同，妊娠12周以前的早期流产多由遗传因素、内分泌异常、生殖免疫功能紊乱及血栓前状态等所致;妊娠12周至28周之间的晚期流产且出现胚胎停止发育者，多见于血栓前状态、感染、妊娠附属物异常(包括羊水、胎盘异常等)、严重的先天性异常(如巴氏水肿胎、致死性畸形等);晚期流产但胚胎组织新鲜，甚至娩出胎儿仍有生机者，多数是由于子宫解剖结构异常所致，根据具体情况又可分为两种:一是宫口开大之前或胎膜破裂之前没有明显宫缩，其病因主要为子宫颈机能不全;二是先有宫缩，其后出现宫口开大或胎膜破裂，其病因多为生殖道感染、胎盘后血肿或胎盘剥离等。 (一)流行病学因素 临床上自然流产的发生率为15%~25%，而其中的80%以上为发生在妊娠12周前的早期流产。发生2次或2次以上流产的患者约占生育期妇女的5%，而3次或3次以上者约占1%。RSA的复发风险随着流产次数的增加而上升，研究表明，既往自然流产史是导致后续妊娠失败的独立危险因素，曾有3次以上连续自然流产史的患者再次妊娠后胚胎丢失率接近40%。此外，孕妇的年龄及肥胖也是导致自然流产的高危因素。 [专家观点或推荐] 应详细询问夫妇双方的病史，包括年龄、月经婚育史、既往史、家族史。并依照时间顺序描述既往流产情况，包括发生流产时的孕周、有无诱因及特殊伴随症状、流产胚胎有无畸形及是否进行过染色体核型分析等并计算其体质指数(BMI)。 (二)解剖结构因素 子宫解剖结构异常包括各种子宫先天性畸形、子宫颈机能不全、宫腔粘连、子宫肌瘤、子宫腺肌病等。有研究数据显示，RSA患者中子宫异常
2023提高复发性流产成功率的建议(全文) 复发性流产的病因及发病机制是十分复杂多样的，在目前已有的研究证据上，如何合理有效地进行RSA 的病因筛查具有重要的意义。 目前我国复发性流产的综合诊治活产率达90%以上，剩余的10%张建平 教授认为有以下几点有待提高、改进： 1、失败病例中，除了可能是未知的遗传突变外，张建平教授认为母体的 因素还有进一步探索的必要； 2、由于很多探索性的治疗目前还没有获得共识，所以在用药方案上确实 存在不少混乱及争议； 3、更多前沿诊治方案需要考虑和探索性尝试； 4、盲目用药的安全性及浪费资源的问题也值得重视。 针对以上目前国内诊治的情况,张建平教授对”如何提高复发性流产活产率”提出了10点个人体会。希望这10点能帮助更多复发性流产的患者提高成 功率! 一、寻找病因、针对治疗
观点：全面筛查 体会：找出与流产有关的所有不利因素，分析众多因素中哪个或哪些是引起流产的原因，给予针对性治疗。 观点：流产原因可以是单因素，也可能是多因素 体会：多因素引起的，有时能够明确主要因素和次要因素，但有时很难明确，所以治疗上就必须分清哪些是主要治疗手段，哪些是次要的。 观点：确实无法弄清主次者 体会：可以采取综合治疗，但尽量排除不重要的原因，以免同时使用太多药。 切忌毫无依据的盲目用药。 二、重视非标准产科磷脂抗体综合征 复发性流产发生血栓性APS 少见，多为产科APS, 甚至为非标准APS; 标准诊断的APL 多为低滴度、或间歇阳性，更容易表现为非标准的APL;
非标准APS, 如果没有充分治疗，活产率不会提高； 治疗上可以参考血栓性APS, 但产后不一定需要抗凝治疗； 根据风险高低，考虑是否联合使用免疫抑制剂。 三、生殖免疫紊乱如何诊断? 观点：什么叫生殖免疫紊乱? 体会：致导生殖障碍的免疫因素，我们叫生殖免疫紊乱。 观点：风湿免疫异常不等于生殖免疫有异常 体会：有些风湿免疫异常合并有生殖障碍，有些并没有。 观点：生殖免疫紊乱可以没有风湿免疫异常 体会：有些免疫指标异常的生殖障碍，但没有风湿免疫疾病。 观点：免疫性流产分为自身免疫和同种免疫是否合适? 体会：它们最终的生殖障碍是一样的，或某些免疫指标异常是相同的。
复发性流产病因学研究现状分析 复发性流产是指同一对夫妇在连续两次以上妊娠过程中发生自然流产的情况，是一种 常见的妊娠并发症。在临床上，复发性流产的患者人数逐年增多，给患者的身心健康带来 了严重影响。为了有效预防和治疗复发性流产，目前对其病因学进行了深入的研究。本文 将对复发性流产病因学的研究现状进行分析，并探讨未来可能的研究方向。 一、遗传因素的研究现状 遗传因素一直被认为是导致复发性流产的重要原因之一。研究表明，许多患有复发性 流产的女性存在基因突变或染色体异常。近年来，通过对患有复发性流产的患者及其家族 进行基因检测，发现了一些与复发性流产相关的遗传变异。某些基因的突变会导致孕激素 受体的异常，从而影响子宫内膜的生长和维持，进而导致妊娠失败。一些染色体异常如染 色体非整倍体也与复发性流产有关。这些研究为深入理解复发性流产的遗传机制提供了重 要线索。 免疫因素在复发性流产的病因学中也扮演着重要角色。研究表明，患有复发性流产的 女性往往存在免疫系统的异常。免疫细胞和免疫因子的不正常水平可能会导致胎盘发育不 良和孕期炎症反应，从而引发自然流产。近年来，一些学者在复发性流产的病因研究中关 注免疫调节蛋白的异常。一些研究发现，IL-10和TGF-β等免疫调节蛋白的异常表达可能与复发性流产的发生有关。免疫因子在自然流产过程中的作用机制也成为研究的热点之一。免疫因素的研究为预防和治疗复发性流产提供了新的思路。 内分泌失调是复发性流产的常见原因之一。孕激素和甲状腺激素在维持孕育过程中起 着重要作用，而它们的异常水平可能会导致胎盘功能障碍和妊娠失败。近年来，一些研究 关注孕激素和甲状腺激素水平异常对复发性流产的影响。一些研究发现，孕激素受体和甲 状腺激素受体的突变会导致激素信号通路的紊乱，从而影响胎盘发育和维持。一些研究还 发现，妊娠期糖尿病和甲状腺疾病等内分泌疾病与复发性流产有一定的关联。内分泌因素 的研究为深入理解复发性流产的发病机制提供了重要线索。 环境因素在复发性流产的病因学中也起着重要作用。近年来，随着环境污染和不良生 活习惯的加重，复发性流产的发病率呈逐年上升的趋势。环境因素包括化学物质、放射线、噪声和压力等，它们可能通过影响卵子和精子的质量，进而影响胚胎的发育和存活，导致 自然流产的发生。一些研究还发现，孕期暴露于环境毒素如苯、甲醛等会影响胚胎的发育，增加复发性流产的风险。环境因素的研究为预防复发性流产提供了新的视角。 复发性流产的病因学研究涉及遗传、免疫、内分泌和环境等多个方面。目前，针对复 发性流产的病因学已经取得了一些重要进展，但仍存在许多问题有待进一步研究。未来， 可以通过基因组学、蛋白组学和代谢组学等高通量技术，对复发性流产的病因进行系统研究，以揭示其发病机制。还可以结合临床研究和流行病学调查，探讨复发性流产的相关危
反复体外受精-胚胎移植失败的患者T辅助细胞免疫 应答方式的研究 摘要：目的：研究不明原因反复体外受精―胚胎移植(试管婴儿，IVF-ET)失败的患者机体T辅助细胞1（Th1）及T辅助细胞2(Th2)免疫应答方式，为治疗不明原因反复体外受精-胚胎移植失败提供理论依据。方法：将不明原因的三次及三次以上IVF-ET失败的患者作为研究对 摘要：目的：研究不明原因反复体外受精―胚胎移植(试管婴儿，IVF-ET)失败的患者机体T辅助细胞1（Th1）及T辅助细胞2(Th2)免疫应答方式，为治疗不明原因反复体外受精-胚胎移植失败提供理论依据。方法：将不明原因的三次及三次以上IVF-ET失败的患者作为研究对象，一个周期 IVF-ET成功妊娠的患者作为对照组，抽取非治疗周期静脉血分离单个核细胞并于37℃，5%CO2培养箱中培养72h，分离上清，ELISA法测定上清液中INF- γ/IL10含量，计算INF-γ/IL10的比值，从而反映机体Th1、Th2细胞的免疫应答方式。结果：反复IVF-ET失败的患者9例中有7例TH1细胞因子（INF-γ）浓度是Th2细胞因子（IL10）的3倍，有显著性差异；反复IVF-ET失败的患者9例中有4例机体Th1细胞因子（INF-γ）是Th2细胞因子（IL10）的9倍，呈Th1强势反应，而对照组9例中仅1例且发生早期流产，有统计学意义。结论：部分反复体外受精-胚胎移植失败的患者机体Th1 Th2免疫应答失衡，呈Th1优势反应，提示细胞免疫过强。关键词：反复体外受精-胚胎移植失败；T辅助细胞；优势反应Study on T Helper Cell Immune Response Type in Women with Unexplained Recurrent IVF-ET Failure Abstract： Objective：To study the Th1 and Th2 response type in women with unexplained recurrent IVF-ET failure, and to provide theoretic evidence on dealing with recurrent IVF-ET failure. Method： Blood sample was taken from 9 women received 3 unexplained failure IVF-ET cycles (study group), while 9 women with successful IVF-ET cycle being controlled. The lymphocyte was separated, and then was cultured at 37℃，5%CO2 for 72 hours, concentration of INF- γ,IL10 was measured by ELISA，the INF-γ/IL10 rate was calculated. Result： 7 from 9 in study group had INF-γ/IL10 rate more than 3, while only 2 from 9 in control group and 4 from 9 in study group had INF-γ/IL10 rate more than 9, while only 1 from 9 in control group and the patient got early abortion. Conclusion： Large partial women with unexplained recurrent IVF-ET failure had T helper cell immune respond imbalance. Th1 cytokines was strong response in large partial women with unexplained recurrent IVF-ET failure, and it was obvious in some patients. Key words：Reccurent unexplained IVF-ET failure；T helper cell；Strong response 体外受精-胚胎移植是一种有效的使输卵管阻塞、男方少弱精及各类难治性不孕症夫妇喜得后代的技术，其一个治疗周期的妊娠率达40%左右，累计妊娠率高达80%，已知的反复植入失败的原因有：年龄过大卵子老化、卵巢反应不良可供选择的优质胚胎少、子宫内膜严重受损、输卵管积水等，但也有一些患者虽然植入优质胚胎、
淋巴细胞免疫治疗原因不明复发性流产的护理分析目的探讨淋巴细胞免疫治疗原因不明复发性流产的护理方法。方法将全 部156例患者随机分为观察组和对照组（各78例），两组均给予淋巴细胞免疫治疗，对照组在治疗的基础上给予一般的常规护理，观察组则给予精心的综合护理。结果观察组68例妊娠孕妇有61例妊娠成功，妊娠成功率为89.7%，对照组65例妊娠孕妇有45例妊娠成功，妊娠成功率为69.2%，观察组妊娠成功率明显优于对照组，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论对不明原因复发性流产患者采用免疫疗法进行治疗并给予精心的综合护理能够取得较好的疗效和较高妊娠成功率。 标签：复发性流产；淋巴细胞；免疫治疗 复发性流产是指连续2次或2次以上的自然流产的现象，发病率为妊娠总数的1%～5%[1]，该病病因十分复杂，主要有内分泌异常、生殖解剖异常、染色体异常、环境因素、自身免疫和感染等，但是仍有40%～80%的复发性流产患者原因不明，常称为不明原因性复发性流产[2]。有文献表明，由免疫因素造成的不明原因性复发性流产约占80%[3]。目前，对于不明原因性复发性流产主要采用免疫疗法进行治疗，而免疫治疗的成功与否和护理干预具有十分密切关系。2010年1月～2011年5月期间，我院对78例不明原因复发性流产患者采用淋巴细胞免疫疗法进行治疗，并给予精心的综合护理，取得了较好疗效，现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2010年1月～2011年5月期间我院收治的不明原因复发性流产患者156例，纳入标准：（1）夫妇双方染色体核型分析正常；（2）女方无生殖道畸形及器质性病变；（3）内分泌（如生殖、甲状腺、胰岛素等）激素指标正常；（4）无IgA 缺陷史和过敏史；（5）无TORCH感染及支原体、衣原体等生殖道感染；（6）血清中封闭抗体阴性，抗精子抗体、抗心磷脂抗体、抗子宫内膜抗体和其他免疫抗体无异常；（7）男方精液常规检查正常。在免疫治疗前对供血者进行肝肾功能、肝炎、梅毒、艾滋病系列等检查，不合格者选取无感染性疾病的男性无关第三方作为供血者；另外，医护人员均与患者夫妇双方进行知情谈话，均签署知情同意书同意接受免疫治疗及参加本研究。将全部156例患者随机分为观察组和对照组，各78例。观察组中，年龄20～42岁，平均（28.6±3.2）岁；连续自然流产次数为2～7次，流产时孕周为5～12周，平均（8.3±1.2）周。对照组中，年龄21～41岁，平均（27.9±3.3）岁；连续自然流产次数为2～8次，流产时孕周为6～12周，平均（8.5±1.1）周。两组患者的一般资料比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。 1.2 治疗和护理方法
异体淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产护理观察 目的探讨复发性流产患者采用冻存淋巴细胞技术进行主动免疫治疗的护理体会。方法入组77例复发性流产患者，通过无偿献血方式获得异体外周血白细胞，分离淋巴细胞，经自体血浆冻存，深低温保存，分次复苏后皮下多点注射，观察妊娠成功率，随访妊娠结局。结果经冻存淋巴细胞主动免疫治疗后，患者再次妊娠成功率为85.70%。结论采用淋巴细胞主动免疫治疗是复发性流产安全有效的方法，通过严格无菌操作等护理质量控制、心理护理以及治疗后及时随访等连惯性的护理服务，有效保障了治疗成功率。 Abstract：Objective To explore the experience of nursing for the frozen active immunotherapy storage technology using lymphocytes of patients with recurrent spontaneous abortion.Methods 77 cases of patients with recurrent spontaneous abortion，lymphocytes were separated by way of blood donation for allogeneic peripheral blood leukocytes，autologous plasma cryopreservation，cryopreservation，resuscitation time after subcutaneous multi-point injection，the success rate of pregnancy，pregnancy outcomes were followed up.Results The frozen lymphocyte active immune therapy，patients with re-pregnancy success rate was 85.70%.Conclusion The lymphocyte active immune therapy is a safe and effective method for recurrent spontaneous abortion，controlled by strict aseptic operation，the quality of nursing，psychological nursing and timely follow-up after treatment，even the inertia of the nursing service，the effective protection of the success rate of treatment. Key words：Recurrent miscarriage；Lymphocytes；Immunotherapy 复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）与人类白细胞抗原（Human Leukocyte Antigen，HLA）免疫应答有关，临床表现为抗丈夫淋巴细胞抗体（antipaternal lymphocyte antibody，APLA）阳性率低[1]。淋巴细胞主动免疫治疗（Lymphocyte Active Immunotherapy，LIT）可显著提高复发性流产患者再次妊娠成功率，并且母儿安全性良好[2]。本单位与南京红十字血液中心合作，供血方以无偿献血的方式一次性献全血400 ml，分离获得淋巴细胞，经自体血浆冻存，深低温保存，分次复苏后供给患者免疫治疗，其它血液成分仍可用于临床。本研究通过观察患者再次妊娠成功率，评价冻存淋巴细胞用于治疗复发性流产的效果。 1 资料与方法 1.1一般资料 回顾性分析2014年11月～2016年1月南京医科大学附属妇产医院门诊确诊的RSA患者77例，年龄22～47岁，平均年龄（29.8±4.6）岁；流产次数2～6次，平均流产次数（3.5±0.8）次。所有患者夫妇双方染色体核型正常，内分泌
封闭抗体阴性反复性流产患者采用主动免疫治疗的临床效果高薇炜 【摘要】目的:探讨对封闭抗体阴性反复自然流产患者采用淋巴细胞主动免疫治疗 的临床效果.方法:选取2012年1月～2014年6月本院确诊的封闭抗体阴性并接 受主动免疫治疗的149例反复自然流产患者为观察对象,取其丈夫外周静脉血作为 靶向抗原,进行淋巴细胞主动免疫治疗;以同期反复自然流产未接受主动免疫治疗的 患者作为对照组,检测两组患者淋巴细胞因子的表达并随访其妊娠结局.结果:观察组与对照组成功妊娠率分别为42.1％、21.6％,再次自然流产率分别为25.0％、 58.3％;主动免疫治疗后淋巴细胞因子(IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6)的表达及CD4+、CD8+封闭效率均高于对照组(P均＜0.05).观察组主动免疫治疗后封闭抗体阳性者 的淋巴细胞因子(IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-6)的表达水平高于封闭抗体阴性者(P＜ 0.05),封闭抗体阳性患者的CD4+、CD8+值明显更高(P＜0.05).结论:主动免疫治 疗可以提高反复自然流产者妊娠率、减少流产风险,对于封闭抗体阳性的反复性流 产患者效果显著,具有可靠的临床治疗效果及应用价值. 【期刊名称】《中国计划生育学杂志》 【年(卷),期】2015(023)011 【总页数】4页(P755-758) 【关键词】反复流产;主动免疫治疗;淋巴细胞;效果研究 【作者】高薇炜 【作者单位】陕西省安康市中医医院妇科 725000
【正文语种】中文 复发性流产（RSA）又称为反复自然流产，根据其诱因及发病机制可分为免疫性和非免疫性两类，其中免疫因素又包括同种免疫型和自身免疫异常型两种。同种免疫型又称不明原因型，成为了复发性流产重要病因，是目前妇幼健康研究的难点和热点［1］。有研究发现妊娠健康妇女的自身淋巴细胞的减少，导致胚胎遭受免疫系统攻击，母体对胚胎的免疫耐受力降低，免疫防护能力低下，导致流产发生［2］。因而淋巴细胞免疫疗法在封闭抗体阴性复发性流产患者治疗中开始得到广泛应用［3-4］。为此，本研究通过对不明原因的疑难复发性流产患者给予主动免疫治疗，观察其临床效果，为复发性流产的针对性及预防性治疗提供参考。 1 资料与方法 1.1 研究对象 选取2012年1月～2014年12月在本院生殖中心就诊、满足条件并接受主动免 疫治疗的复发性流产患者210例，其中放弃治疗及随访失败31例和20例，最终有效样本为149例（观察组）。年龄35.2±9.5岁；自然流产次数6次21人、5 次25人、4次31人、3次72人。以同期单纯黄体酮治疗的120例患者作为对照组。年龄36.1±9.0岁；自然流产次数6次17人，5次16人，4次25人，3次62人。两组患者在年龄和流产次数方面差异无统计学意义（P＞0.05）。 1.2 纳入标准 ①自然流产≥3次，封闭抗体为阴性（缺乏）。②患者本次妊娠＜2月；③夫妻双 方身体健康，染色体正常；④女性月经周期及排卵正常，无子宫畸形、宫腔粘连、输卵管堵塞等；⑤排除男方生殖功能异常或患有梅毒螺旋体、肝炎、艾滋病病毒等疾病；⑥人乳头瘤病毒、支原体、衣原体检查，巨细胞病毒、弓形虫病原体检测均未见生殖道感染；⑦抗心磷脂抗体、抗子宫内膜抗体、抗核抗体等自身抗体均为阴
复发性流产免疫学病因及诊治进展 摘要：复发性流产对于女性的身体健康带来严重危害，同时也对他们的认识解 决带来一些严重的困扰。随着医学研究工作的推进，复发性流产免疫学的病得到 了明确，同时也能够找到有效的诊断和治疗方式。为了能够进一步的对复发性流 产疾病进行治疗，促进妊娠良好结局的有效实现，本文主要对复发性流产免疫学 病例和诊治进展进行梳理，通过本文的梳理，期待能够为临床医学工作的开展提 供理论参考。 关键词：复发性流产；免疫学；病因；诊治进展 复发性流产是比较重要的生殖健康问题，通常情况下指的是出现两次或者两次以 上的妊娠，24周之前的妊娠失败，这种疾病的病因是比较复杂的，除了有遗传性的因素以及内分泌方面的因素之外，感染、解剖性的因素和免疫的因素都是比较 重要的病因[1]。随着生殖免疫学研究的不断深入和发展，人们对妊娠免疫以及免 疫性不孕、复发性流产等疑难问题也有了自己新的认识，并且慢慢的确定了免疫 因素在生殖过程当中的整体重要性[2]。60%以上的复发性流产患者，由于免疫系 统紊乱方面形成了这种疾病，大约有80%左右的原因，情况是不明确的。根据医 学研究者的研究，这些不明确的流产原因，大多数和免疫因素有着一定的关联性 [3]。 一、复发性流产的免疫因素理论依据 妊娠是半同种异体移植的一个过程，胎儿会带有1/2异于母体的父系抗原， 对于成功的妊娠情况来说，他主要是依赖于母体本身的免疫系统对胚胎所产生的 一种免疫耐受，这也是传播免疫理论唯一的例外[4]。对于这种成功的同种异体移 植在一定程度上体现了母体对于胚胎抗原所产生的免疫反应，能够在一系列复杂 精细的每一条控制下达到一种平衡的状态[5]。事实上在临床当中，母亲和胎儿之 间在血型和组织配型上能够达到完全一致的状况是比较少的，很多不明因素的复 发性流产都有可能和母体以免疫因素异常有着一定的关联性。在妊娠的过程当中，子宫内膜和胚外的组织部分是母体和胎儿之间进行交流和对话的重要界面和载体[6]。胚胎和母体之间正是在这种复杂免疫机制的作用之下，使得人体当中的母体 免疫细胞能够对人体的胚胎产生一定程度上的免疫排斥反应。如果人体当中的母 体和胚胎之间的见面所处的内环境出现了改变或者免疫平衡，受到了一些因素破 坏的时候，那么母体就不能够对胚胎产生保护的作用，从而出现免疫攻击，最终 导致胚胎没有办法存活，形成了流产的现象。随着医学研究工作的不断推进，针 对同种免疫紊乱所开展的主动免疫治疗，以及针对自身所出现的免疫治疗，已经 能够把一些免疫因素所引发的复发性流产进行有效的治愈，治愈率也得到了明显 的提高[7]。 二、复发性流产免疫学病因的分类 免疫因素是导致自然流产比较重要的一种因素之一，由于不同因素所导致的 流产免疫病理的变化是不一样的，目前在相关的分类方法方面也有不同的分类方 式[8]。目前在临床当中比较有效的治疗方案选择分类方法就是划分为自身免疫型 和同种免疫型。自身免疫型与母体本身的抗体有着一定的关联性，简而言之，抗 原主要是来源于母体本身在复发性流产的免疫因素当中，这种疾病原因所引发的 复发性流产大约在30%左右的比例[9]。对于同种的免疫型来说，主要受到母体免
LIT联合IVIG被动治疗封闭抗体阴性RSA的封闭抗体转阳情况及妊娠率效果【摘要】目的：探讨LIT（淋巴细胞主动脉免疫治疗）与IVIG（静脉注射免疫球蛋白）被动治联用对封闭抗体阴性RAS（复发性流产）患者的治疗效果。方法：选取我院收治的150例封闭抗体阴性的RAS患者作为研究对象，使用随机数字法分为联合组与对照组（n=75），对照组单纯行LIT治疗，联合组联合采用LIT和IVIG进行治疗，对比两组患者的封闭抗体转阳率、妊娠成功率及免疫细胞水平变化。结果：联合组治疗后的CD56+CD16+水平为（12.10±5.25）%，显著低于对照组，联合组治疗后的CD4+CD5+水平为（14.08±3.82）%，显著高于对照组，P<0.05。联合组的封闭抗体转阳率、妊娠成功率分比为86.67%、93.33%，均显著高于对照组，P<0.05；联合组中，治疗后封闭抗体仍呈阴性的10例患者中，妊娠成功9例（90.00%），对照组治疗后封闭抗体阴性的23例患者中，妊娠成功11例（47.83%），联合组封闭抗体阴性患者的妊娠成功率显著高于对照组，P<0.05。联合组早产5例（7.14%），足月产65例，无死产。对照组早产4例（6.67%），足月产56例，无死产。两组患者的妊娠结局良好，早产率比较无显著性差异（P<0.05）。结论：对于封闭抗体阴性RAS患者联合采用LIT 和IVIG被动治疗，能够有效调节机体免疫功能，促进封闭抗体转阳，提高患者的妊娠成功率。 【关键词】封闭性抗体；复发性流产；LIT；IVIG 复发性流产（Recurrent Spontaneous Abortion,，RSA）指的是女性与同一性伴侣连续发生2次或多次的自然流产，据统计资料显示我国女性的RSA发病率在10~15%之间，并且近几年来随着人们性观念的不断开放，RSA的临床患病率也呈现出了显著的上升趋势[1]。内分泌失调、生殖系统解剖异常、免疫紊乱、感染、基因变异等均可导致RSA发生，其中免疫紊乱被认为是RSA发病的主要因素。免疫紊乱最常见的一种表现形式就是封闭抗体阴性。有研究显示[2]，孕妇体内封闭抗体检测结果呈阴性者的流产率显著高于封闭抗体阳性者，提示封闭抗体阴性会使流产的风险显著升高。现阶段，临床治疗封闭抗体阴性RSA主要采用淋巴细胞主动免疫疗法，或免疫球蛋白被动免疫疗法，实践应用也得到了一定的成效。但临床较少将主动免疫疗法和被动免疫疗法联合用于RSA治疗。我院对封闭抗体阴性的RSA患者联合采用LIT和IVIG进行治疗取得了较为满意的效果，报道如下。 1 一般资料与方法 1.1 一般资料 1.1.1 纳入标准 连续发生2次或多次自然流产；无死产、死胎史；封闭抗体检测结果呈阴性；夫妻双方均未发现异常染色体；生殖道解剖正常；自身免疫抗体（如抗HCG抗体、抗卵巢抗体、抗精子抗体、抗核抗体、抗心磷脂抗体等）呈阴性；甲状腺、内分泌激素检查结果正常。 1.1.2 排除标准 支原体、衣原体、病毒等感染者；凝血功能异常者；男方或女方有家族性遗传病或染色体异常；合并生殖系统疾病或生殖道畸形者；男方或女方伴有性传播疾病。 1.1.3 研究对象 选取我院在2015年5月~2016年5月收治的150例封闭抗体阴性RAS患者作为研究对象。使用随机数字表法分为两组（n=75）：联合组年龄20~41岁，平均（28.52±1.57）岁，流产2~7次，平均（3.02±2.11）次；对照组年龄22~39岁，平均（29.02±1.62）岁，流产2~9次，平均（3.10±2.09）次。两组的年龄、流产次数相当，无显著差异（P>0.05），可进行比较。 1.2 方法 1.2.1 仪器与试剂 BD FACS Calibur型流式细胞仪；免疫球蛋白；胎牛血清；RPMI-1640细胞培养液；红细
淋巴细胞免疫疗法治疗习惯性流产的疗效及机制研究 张业霞;李睿;高华;张佳伦;房震亚 【摘要】ObJective:To investigate the relationship and effect of blocking antibody and lymphocytes immunotherapy in recurrent spontaneous abortion. Methods:Of one hundred blocking antibody-negative patients with unexplained recurrent spontaneous abortion(URSA),60 patients(trial group)were chosen and treated with immunotherapy,and the changes of subtypes of lymphocytes and IgG,IgM were observed after immunotherapy,40 patients(control group)were treated with routine tocolysis,and the results were compared between the two groups. Results:The pregnancy success rate of trial group was 81. 7% ,but the control group was 37. 5% ,and there was a significant difference between the two groups(P < 0. 01). The pregnancy success rate of blocking antibody - positive in the trial group was 90. 3% ,and that of blocking antibody-neg-ative was 33. 3% ,and there also was a significant difference between them(P < 0. 01). In the trial group,after immunother-apy the amount of CD4 + T cells was significantly lower;the amount of CD8 + T cells was significantly higher;the ratio of CD4 + T/ CD8 + T was significantly lower than that before immunotherapy;the levels of IgG and IgM were significantly low-er. There was significant difference in all indexes before and after the treatment(P < 0. 05,all). Conclusion:Blocking anti-body can influence the result of pregnancy. Lymphocytes immunotherapy is safe,convenient and effective for patients with blocking