丙二醛（MDA）含量的测定
(一)、设备及试剂
设备分光光度计、离心机、铝锅、电炉、研钵、剪刀、试管
试剂 10%三氯醋酸(TCA)、0.5%硫代巴比妥酸(TBA以10%三氯醋配制)
(二)、操作方法
1．MDA的提取
取叶片数片剪成0.5cm2左右的小块，称取1g置研钵中。加2ml 10%TCA和少许石英砂，研磨成匀浆，加入8ml 10%TCA继续研磨均匀。匀浆在3000×g下离心10min，上清液即为提取液。
2．显色测定
10ml刻度试管2支，一支加入上清液3ml，另一支加水3ml(空白)，各加0.5%的TBA溶液3ml，摇匀，在沸水浴中煮沸10min(溶液出现小气泡开始计时)，立即在冷水中冷却。如有沉淀，应离心。以空白作参比，在分光光度计450cm、532nm、600nm下测定样品反应液的消费值(用1cm光径的比色杯)
(三)、实验结果
C(μmol · L-1)=6.45(OD532– OD600)–0.56 OD450
MDA的含量(μmol · g-1 FW)= C×V×10-3 / W
OD532 OD600 OD450 ：450nm、532nm、600nm波长下的光密度
C：提取液中MDA的浓度(μmol · L-1) V：提取液的总体积(ml)
W：样品鲜重(g)
丙二醛含量测定
实验六、植物组织丙二醛含量测定 植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由
于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子；(11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) 0.05mol/L pH7.8磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) 0.5％硫代巴比妥酸溶液：称取0.5g硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取0.5g样品，加入2ml预冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移
应用化学实验设计报告 实验名称：从肉桂中提取肉桂醛 学号：姓名：桌号24 2014 年4月22日一、实验目标的名称及理化性质 名称：肉桂醛 理化性质： 肉桂醛（英文：Cinnamaldehyde）是一种醛类有机化合物，为黄色黏稠状液体，大量存在于肉桂等植物体内。自然界中天然存在的肉桂醛均为反式结构，该分子为一个丙烯醛上连接上一个苯基，因此可被认为是一种丙烯醛衍生物。 密度： 1.046-1.052，熔点（℃）：-7.5℃，折光率（20℃）： 1.619-1.623，比重（25/25℃）：1.046-1.050，酸值：≤1.0%，沸点（℃）：253(常压），外观：无色或淡黄色液体，溶解性：难溶于水、甘油和石油醚，易溶于醇、醚中。能随水蒸气挥发。稳定性：在强酸性或者强碱性介质中不稳定，易导致变色，在空气中易氧化。 二、参考文献 1. 李艳,戴芸.2010.综合性化学实验：从肉桂皮中提取肉桂醛的研究.咸宁学院学报，30(6). 2. 李婷婷,马松.2010. 不同溶剂提取肉桂挥发油中肉桂醛的含量比较. 药物研究,19(24). 3. 李京晶,籍保平.2006. 丁香和肉桂挥发油的提取、主要成分测定及其抗菌活性研究.食品科学,27(8). 4. 韦藤幼，赵钟兴等.2006.内部沸腾强化肉桂皮中肉桂醛的提取工艺及机理. 林产化学与工业,26(3). 5. 周峰,籍保平.200 6. 肉桂油有效成分提取纯化及鉴定研究. 食品科学,4(59). 三、文献方法的分析比较和选择 3.1 分析文献 1.综合性化学实验：从肉桂皮中提取肉桂醛的研究.
肉桂皮一乙醇萃取一浸取液一普通蒸馏一回收乙醇一水蒸气蒸馏萃取一肉桂醛。 肉桂醛的提取步骤： (1) 生物材料的处理 采集100g左右的肉桂皮，用固体粉碎机碾成粉末，分装于大烧杯中备用。 (2) 索氏提取器萃取产品 称取肉桂皮粉末100g，装入滤纸筒，上口用小滤纸盖好，然后用玻璃棒顶住滤纸筒慢慢放人索氏提取器，取95％乙醇250ml，其中100ml加入索氏提取器的圆底烧瓶，150ml装入有滤纸筒的提取器中，在圆底烧瓶中加入几粒沸石，用电热套加热，温度控制在90℃(乙醇沸点78.5)，使圆底烧瓶中的乙醇沸腾，乙醇蒸汽通过上升管进入冷凝管，蒸汽被冷凝为液体进入提取器，对肉桂皮进行浸泡，液体颜色慢慢变成棕色。当提取器中液面超过吸管最高处时发生虹吸现象，溶液流回烧瓶，经过多次浸泡虹吸，肉桂醛富集于烧瓶中，烧瓶中乙醇颜色渐渐变为深棕色，回流4h后，提取器内溶液的颜色变得很淡，几乎为无色，待提取器内回流液刚虹吸下去时，立即停止加热，提取器中液体很快经过虹吸管流到圆底烧瓶，此时圆底烧瓶内的乙醇溶液为深棕色。 (3) 蒸馏 在蒸馏装置中加入沸石数粒，蒸馏回收提取液中的乙醇，电热套温度控制在90℃左右，蒸馏约2h后，温度计读数突然下降时，停止蒸馏，说明乙醇几乎蒸尽。然后改用水蒸气蒸馏装置，进行水蒸汽蒸馏，有淡黄色油滴经冷凝流入锥形瓶，至无油滴出现，停止水蒸气蒸馏。 (4) 分离 在馏出液中加NaCl，使其饱和，降低肉桂醛在水中的溶解度，然后用120ml 乙醚分3次萃取，使肉桂醛充分溶于乙醚，分离出乙醚萃取液。合并3次乙醚萃取液于250ml锥形瓶中，在锥形瓶中加入适量无水氯化钙干燥剂干燥30分钟后，去掉干燥剂，将乙醚萃取液转入250ml圆底烧瓶中，改用蒸馏装置，把烧瓶放入水浴锅中，温度调至60℃，蒸出乙醚(沸点38℃)回收，回收后，称其溶液质量。然后改用减压蒸馏，收集150—151℃(100mmHg)的馏分。 优点：肉桂醛难溶于水，能随水蒸气挥发，高沸点，在空气中易氧化等特点
白酒中总醛的测定 一、实验目的 采用分光光度法测定白酒中总醛的测定。 二、实验原理 在碱性条件下, 醛与2, 4 二硝基苯肼反应生成2, 4 二硝基苯腙橙红色化合物,在445nm波长处进行吸光度测定, 根据外标法求出醛的含量。 三、仪器与试剂 U1800紫外可见分光光度计、恒温水浴器。 无醛乙醇( 制备): 取1500mL 乙醇置于2000mL 蒸馏烧瓶中, 加入15g 2, 4 二硝基苯肼、0. 75mL 浓盐酸及几粒沸石, 回流4h 并放置4h,再将冷凝器改换为精馏柱, 缓缓精馏. 弃去初始流出液100mL 左右及剩余液约200mL黄色溶液,收集中间馏分,蒸馏液应清澈透明。 浓盐酸: 12mol/L。 2, 4 二硝基苯肼无醛乙醇饱和溶液,现用现配。 氢氧化钾-乙醇溶液: ( 100g/ L) 10. 0g 氢氧化钾溶于20. 0mL 水中, 转移至100mL容量瓶中,用无醛乙醇稀释至刻度,混匀。 甲醛标准溶液: 2.8ml含量36%-38%的甲醛。用水稀释成1L的工作溶液。此溶液1ml相当于1mg甲醛。具体须用碘量法滴定。用时稀释成10mg/ L 的工作溶液。 试剂均为分析纯, 水为蒸馏水。 四、实验操作
1、具体步骤 准确吸取10mg/L甲醛标准溶液2.0mL,移入25mL刻度试管中, 依 次加入5. 0mL 无醛乙醇、1.0mL2,4 二硝基苯肼溶液和0.05mL盐酸, 盖上瓶塞。在50度水浴中加热30min后取出,冷却至室温,加入5.0mL 氢氧化钾-乙醇溶液,放置5min,用水稀释至刻度,混匀。然后用比色皿在445nm波长处测定显色液的吸光度, 以试剂空白为参比。 2、工作曲线的绘制 移取一系列甲醛标准溶液0. 0mL, 2.0mL,4.0mL, 6.0mL, 8.0mL, 10.0mL(相当于甲醛含量0.0mg, 0.02mg, 0.04mg, 0.06mg , 0.08mg,0.10mg) , 按实验方法测定各溶液的吸光度, 以总醛( 以甲醛计) 含量( mg) 为横坐标, 吸光度为纵坐标。绘制标准曲线。 3、样品测定 选择白酒3种编号为1号、2号、3号, 准确移取试样各2.0mL按实验方法测定试样显色液的吸光度, 从标准曲线查出醛的含量。 五、数据处理分析 六、思考题 1.在本实验中影响白酒中甲醛测定准确的因素有哪些？
植物组织或器官中丙二醛含量的测定 一、实验目的 二、实验原理： 三、实验仪器：紫外可见分光光度计离心机 四、实验步骤： ●1 MDA的提取称2g叶片，加入10％三氯乙酸(TCA)2ml及少量石英砂，研磨；进一步加入8mlTCA充分研磨，接着把匀浆液以4000r／min离心10min，其上清液即为MDA提取液。 ●2 MDA显色反应及测定取2ml MDA提取液（对照组取2ml 蒸馏水），在加2ml 0.6％TBA混匀，在试管上加棉塞，置沸水中加热15min，迅速拿出水浴锅冷却，以4000r／min离心15min ，于波长532nm和450nm下测定OD值。 五、结果计算 ●以测得的OD532减去OD600的非特异吸收值，分别计算衰老和对照组的值。 MDA浓度(μmol/L)=6.45OD532-0.56OD450 D450、D532分别代表450nm、532nm波长下的光密度值。 六、注意事项： ●0.1-0.5％的三氯乙酸对MDA—TBA反应较合适，若高于此浓度，其反应液的非专一性吸收偏高； ●MDA-TBA显色反应的加热时间，最好控制沸水浴10-15min之间。时间太短或太长均会引起532nm下的光吸收值下降； ●如待测液浑浊，可适当增加离心力及时间。 ●低浓度的铁离子能增强MDA与TBA的显色反应，当植物组织中铁离子浓度过低时应补充Fe3+（最终浓度为0.5 nmol·L-1） ●可溶性糖与TBA显色反应的产物在532 nm也有吸收（最大吸收在450 nm），当植物处于干旱、高温、低温等逆境时可溶性糖含量会增高，必要时要排除可溶性糖的干扰。 丙二醛(MDA)含量的测定 ①测定步骤 称取剪碎的试材1g，加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10分钟，上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。 ②计算(3-6)式中：C—MDA的浓度；A450，A532 和A600—分别代表450、532和600nm 波长下的吸光度值。 丙二醛(MDA)含量的测定 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。 关键词：丙二醛含量测定氧化作用MDA膜脂过氧化硫代巴比妥酸TBATBA显色反应 植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。MDA从膜上产生的位置释放出后，可以与蛋白质、核酸反应，从而丧失功能，还可使纤维素分子间的桥键松驰，或抑制蛋白质的合成。因此，MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。 [原理]丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁
硫代巴比妥酸法（丙二醛含量测定） 一：原理 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0．5umol·L-1。 二：试剂 1：质量分数为10％三氯乙酸(TCA)； 2：质量分数0.6％硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠(1mol·L-1)溶解，再用10％的三氯乙酸定容； 三：方法 1：MDA的提取称取剪碎的试材1g，加入2mll0％TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA研磨，匀浆在4000r·min-1离心10min，上清液为样品提取液。
2：显色反应和测定吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml 0．6％TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。 四：结果 C1＝11.71D450 C2＝{6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1 C1——可溶性糖的浓度(mmol·L-1) C2——MDA的浓度（·umol·L-1） D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。 N:提取液总体积（ml） W:植物组织鲜重
肉桂醛 业内人士普遍认为，劲酒的天下就是肉桂醛支撑起来 的!劲酒是以小曲白酒为基酒，精选传统材质，具有抗疲劳、 免疫调节的保健功能，也就是民间俗称的能“补肾壮阳”。 在劲酒的几味具壮阳功效的药材中，肉桂醛是主要药材，其 本身具有良好的抗张血管、促进血液循环、令人兴奋的功效， 相比西力士壮阳成分西地那非（俗称“伟哥”），肉桂醛效果 更加温和，并且对于人体没有任何的毒副作用，被称为中国 的植物性“伟哥”劲酒的成功还在于肉桂醛能让人产生无害的精神依赖性，一旦饮用，终身不弃，从而拥有大批的忠诚的市场，已经没落的中国名酒董酒，其重新崛起策略也将选择劲酒的成功路线，采用肉桂醛作为主要药材。 肉桂醛的防腐功效，在槟榔加工品中也已得到有力的证实。在湖南省湘潭地区大街小巷，槟榔在无任何包装的情况下即可露天售卖，长久不变质，其重要原因，就在于槟榔经过了肉桂醛溶液的侵泡。肉桂醛作为防腐剂不但可以大大延长保质期，进入人体也会在肠道降解为人体所需的营养成份，对人体无害有益。肉桂醛既能增强槟榔的药用功效，，使槟榔更为纯粹，其特有的肉桂香味，又能提升槟榔的口感口味。 【中文名称】肉桂醛 【分子式】C9H8O 【CAS编号】104-55-2 【沸点】248o C 【性状】无色或淡黄色油状液体 【物理性质】 露置空气中易氧化成肉桂酸。有强烈的肉桂味，能随水蒸汽挥发。能与乙醇、乙醚、三氯甲烷等油类溶剂相混溶，微溶于水、甘油 【产品用途】 肉桂醛也是重要的医药原料之一，常用于外用药、合成药中、具有促进血液循环，使皮肤回温，紧实皮肤组织作用；对皮肤的疤痕、纤维瘤的软化与清除皆具效果；有抗凝血酶效果，具有镇静、镇痛、解热、抗惊厥等作用。还能有效抗溃疡，促进胃，肠道运动；还可抑制肿瘤的发生，并具有抗诱变作用和抗辐射作用的抗癌功能。其本身的扩张血管及降压特效，对肾上腺皮质性高血压的降压效果显著。 在工业中，可以做显色剂、实验试剂、杀虫剂、驱蚊剂、冰箱除味剂、保鲜剂等；还可应用于石油开采中的灭菌杀澡剂，酸化腐蚀剂，可显著增加石油产量，降低开采成本。 有良好的持香作用，在调香中作配香原料使用，使主香料香气更清香。特性稳定常用作定香剂，用于皂用香精，调制栀子，素馨，铃兰，玫瑰等香精，在食品香料中可用于苹果，樱桃，水果香精。 肉桂醛不受PH值的影响，对于酸性或碱性的物质，都具较强的杀菌消毒功能，常用保鲜防腐防霉剂，同时也是很好的调味油，改善口感风味。对大肠杆菌、葡萄菌、痢疾杆菌、伤寒和肺炎球菌、肠炎沙门氏菌等20多种真菌具有抑
肉桂醛：良好的植物源农药溶剂 目前，农药制剂加工中使用的溶剂以含苯、甲苯、二甲苯或C10以上重芳烃等芳烃类溶剂为主，这类溶剂不但对人体有毒害作用，而且污染环境，随着农药的使用，每年都有数十万吨对环境有危害的有机溶剂施向田间，直接污染环境，据统计，仅在以往的30年中，由于使用农药乳油，已累计被1000T有机溶所污染。由于农药往往是均匀喷施，被乳化的有机溶剂危害程度已远远超过了同等数量工业废液的排放。在沿海和水网地区，流入了江河湖海，对饮用水和水生生物造成污染和危害。在缺水的中西部，不少地区的地下水已遭污染，且农田中有机物质也随之流失下沉，表土板结，生态遭到严重破坏。 针对现有农药溶剂的困境和发展绿色农药的需求，深圳诺普信农化股份有限公司的研发部门提供一种植物源农药溶剂，其主要成分是肉桂醛和肉桂油，另外还含有蒎烯、D-苧烯、莰烯和长叶烯，根据不同植物、蔬菜的需要，还可添加其它组分植物精油和/或自提物。其中肉桂油的主要成分为肉桂醛，具有防腐抗菌的效果，而肉桂醛则是无毒无害的天然绿色有机化学组分，容易挥发且对环境无害，与现有技术相比，其植物源农药溶剂可降解，环保，对环境无污染。 其制备方法为，将肉桂油、肉桂醛、蒎烯、D-苧烯、崁烯、长叶烯、棕榈油分别加入混合釜中混合均匀即可制得植物源农药溶剂。所述农药溶剂中，肉桂油的主要成分为肉桂醛，其具有防腐抗菌效果，在农业、食品领域应用广泛。并且其具有毒性低、使用安全、环境友好、可再生等优点，还有助于改善农药制剂中有效成分的稳定和药效。而其他如D-苧烯、蒎烯等一方面可作为良好的有机溶剂，另一方面其本身也具有良好的防腐杀菌效果，经试验测定表明，所述农药溶剂在室内对小菜蛾、二化螟等都有良好的杀菌效果。 由于二甲苯已经被列为对人体有害有毒品，不再批准登记，含苯、甲苯、二甲苯的农药制剂，其闪点和沸点都比较低，导致在农药制剂产品的配制、生产和使用过程中潜伏着易挥发、易燃的安全隐患，为保证生产、运输、贮存的安全，需要在工艺、设备、储运工具、产品包装和人工上加大投入，因而增加了成本，增添了许多不安全因素。在这一领域，植物源农药溶剂具有无可比拟的优势，完全取代芳烃类溶剂只是时间问题。
植物组织中丙二醛含量测定 方法一： 一、目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。 二、原理 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。 三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。 四、实验步骤 1. 丙二醛的提取 称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定 取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15 min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。
一．肉桂醛在医药方面的应用 1.杀菌消毒防腐，特别是对真菌有显著疗效。对大肠杆菌、枯草杆菌及金黄色葡萄菌、白色葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌、伤寒和副伤寒甲杆菌、肺炎球菌、产气杆菌、变形杆菌、炭疽杆菌、肠炎沙门氏菌，霍乱弧菌等有抑制作用。且对革兰氏阳性菌(大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌)杀菌效果显著，可用于治疗多种因细菌感染引起的疾病。最小抑制浓度（MIC）为0.02—0.07ul/ml，对深部致病真菌，MIC为0.1— 0.3ul/ml。最近日本医学专家研究发现，肉桂醛对真菌有显著疗效，对22种条件致病性真菌进行肉桂醛抗真菌作用研究表明：肉桂醛是抗真菌的活性物质，主要是通过破坏真菌细胞壁，使药物渗入真菌细胞内，破坏细胞器而起到杀菌作用。 2.抗溃疡(消化性溃疡指胃肠黏膜被胃消化液自身消化而造成的超过粘膜肌层的组织损伤，可发生于消化道的任何部位消化性溃 疡指胃肠黏膜被胃消化液自身消化而造成的超过粘膜肌层的组织损伤，可发生于消化道的任何部位消化性溃疡指胃肠黏膜被胃消化液自身消化而造成的超过粘膜肌层的组织损伤，可发生于消化道的任何部位消化性溃疡指胃肠黏膜被胃消化液自身消化而造成的超过粘膜肌层的组织损伤，可发生于消化道的任何部位)(胃腔内，胃酸和胃蛋白酶是胃液中重要的消化物质。胃酸为强酸性物质，具有较强的侵蚀性；胃蛋白酶具有水解蛋白质的作用，可破坏胃壁上的蛋白质，然而，在这些侵蚀因素的存在下，胃肠道仍能抵抗而维持黏膜的完整性及自身的功能，其主要是因为胃、十二指肠黏膜还具有一系列防御和修复机制。我们将胃酸及胃蛋白酶的有害侵蚀性称之为损伤机制，而将胃肠道自身具有的防御和修复机制称之为保护机制。目前认为，正常人的胃十二指肠黏膜的保护机制，足以抵抗胃酸及胃蛋白酶的侵蚀。但是，当某些因素损害了保护机制中的某个环节就可能发生胃酸及蛋白酶侵蚀自身黏膜而导致溃疡的形成。当过度胃酸分泌远远超过黏膜的防御和修复作用也可能导致溃疡发生。)、加强胃、肠道运动。其作用机制是由于溃疡活性因素（胃液与胃蛋白酶）的抑制与防御因素（胃粘膜血流速率）的加强，以及抑制胃粘膜电位降低(正常情况下胃腔内H+ 浓度比胃粘膜内H+ 浓度高出10 0～30 0万倍)和对粘膜保护作用所致。除此之外，肉桂醛能降
植物组织MDA 含量测定 一、目的要求 1．掌握植物组织MDA 含量测定的原理及具体测量步骤； 2．深化理解MDA 与逆境和衰老的关系，理解植物组织MDA 含量测定的意义； 3．了解膜脂过氧化、氧自由基和MDA 形成的关系； 4．能够根据待测材料的具体情况设计实验步骤测定MDA 含量； 5．学习分光光度计，低温离心机等仪器的使用方法。 二、实验原理 植物遭受逆境胁迫或衰老时，体内会发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低，活性氧平衡失调及内源激素平衡失调等。活性氧代谢失调直接导致植物体内活性氧的大量积累，从而引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。 膜脂过氧化的产物有二烯轭合物、脂类过氧化物、丙二醛、乙烷等。其中丙二醛（Malondialdehyde ，MDA ）是膜脂过氧化最重要的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此在植物衰老生理和抗性生理研究中，MDA 含量是一个常用指标，可通过测定MDA 了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。 MDA 在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸（TBA ）反应，产生红棕色的产物3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（Trimet —nine ），又名三甲川，该物质在532nm 处有最大光吸收，在600nm 处有最小光吸收。由于TBA 也可与其它物质反应，并在532nm 处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，同时测定600nm 下的吸光度，利用532nm 与600nm 下的吸光度的差值计算MDA 的浓度。 即：A 532－A 600＝ε·C ·L 式中，A 532和A 600分别表示532nm 和600nm 处的吸光度值，C 是MDA 浓度，L 为比色杯厚度，ε=155L·mmol -1·cm -1。 + 100 C O H N S N H O O O H H H N H S N H O O H O OH N N H S 2O TB A MDA 3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮 需要指出的是，植物组织中糖类物质可能对MDA-TBA 反应有干扰作用。可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。
1、肉桂的功效： （1）、对血液和心血管系统的作用：活血通经。分别用肉桂油、肉桂醛、肉桂酸处理由ADP诱导的血小板凝聚的血液，结果证明:肉桂油!肉桂醛对ADP诱导的血小板凝聚具有显著的抑制作用,这与肉桂活血通经的传统功效一致,抑制率分别为76.6%和82.5%,而肉桂酸对血小板凝聚的抑制作用较弱,这说明了肉桂醛是肉桂油抑制血小板凝聚的主要活性成分。但肉桂醛在血中很不稳定,口服或静脉给药进入血液后会迅速氧化为肉桂酸,并为不可逆转化"当转化为肉桂酸后对血小板聚集抑制作用非常弱而无抗凝血和抗血栓作用"黄敬群等用p一环糊精包和肉桂油,从而减缓肉桂油在体内的氧化速度,使肉桂油的在体内释放,其抗血栓时间得以延长"。 （2）、对消化系统的作用：肉桂油能促进唾液及胃液分泌,增强消化功能。（3）、对机体免疫功能的作用：肉桂油中的肉桂酸有升高白血球作用，提高动物免疫力。 （4）、抗菌作用：肉桂油对常见细菌(大肠杆菌、苏云金杆菌等)、霉菌(青霉等)均有较强的抑制作用 （5）、降血糖作用： （6）、抗肿瘤作用： 2、纳米乳的研究进展： 纳米乳是由英国化学家Hoar和Sehulan在上个世纪四十年代提出的。目前对纳米乳的最佳定义是：纳米乳是一个由水、油和双亲性物质组成的,光学上各相同性,热力学上稳定的溶液体系。纳米乳属于胶体分散系统,其乳滴多为球形,大小均匀,分布均匀,纳米乳的粒径一般在10一100nm范围内,外观透明或者近似透明,属于胶体分散体系,加热或者离心后也不会发生分层现象。 3、纳米乳形成机制： 形成机制有很多种，但都不能完整解释纳米乳的形成机制。举例：界面张力理论：该理论认为界面张力在微乳形成过程中起着重要作用。水相和油相分别分布在表面活性剂的两侧,形成两个界面:水膜和油膜,又称作为双层膜"当界面张力yt<0时,微乳可以自发形成,当yt逐渐上升到yt=O时,微乳形成"因此微乳是一种热力学稳定体系"界面膜最初为平板状,当两侧膜压不同时,界面膜向膜压较高的一侧弯曲形成水包油(O/W)型或油包水(W/O)型微乳,当两侧膜压相等时,则形成层状液晶。 4、纳米乳的类型：水包油(O/W)型或油包水(W/O)型。油溶性染料苏丹Ⅲ和水溶 性染料亚甲基蓝在纳米乳中的扩散速度来判断，即水溶性染料亚甲基蓝扩散快于 油溶性染料苏丹Ⅲ，则为O/W型，反之则为W/O型。 5、纳米乳在药物制剂中的应用：微乳可以提高水难溶性药物的溶解度,促进大分 子药物在体内的吸收,从而提高生物利用度,改善不稳定药物的稳定性;微乳粒径 小,在体系中分布均匀,使被包裹的药物分散度提高,促进药物的头皮吸收"微乳 作为药物载体可用于口服液体制剂!眼用制剂!经皮给药制剂和注射制剂中"主要 有以下优点:（1）呈各相同性的透明液体,热力学稳定,可以过滤,易于制备和保 存（2）药物分散度高,促进吸收,提高药物的生物利用度（3）可同时增溶不同脂
肉桂醛 ——优良的防腐杀菌新品、中国的“伟哥” 业内人士普遍认为，劲酒的天下就是肉桂醛支撑起来的！劲酒是以小曲白酒为基酒，精选地道药材制成，具有抗疲劳、免疫调节的保健功能，也就是民间俗称的能“补肾壮阳”。在劲酒的几味具壮阳功效药材中，肉桂醛是主要药材。其本身具有良好的扩张血管、促进血液循环、令人兴奋的功效，相比西方壮阳成分西地那非（俗称“伟哥”），肉桂醛效果更加温和，并且对于人体没有任何毒副作用，被称为中国的植物性“伟哥”。劲酒的成功还在于肉桂醛能让人产生无害精神依赖性，一旦饮用，终身不弃，从而拥有大批忠诚的市场。已经没落的中国名酒董酒，其重新崛起策略也将选择劲酒的成功路线，采用肉桂醛作为主要药材。 肉桂醛的防腐功效，在槟榔加工品中也已得到有力的证实。在湖南省湘潭地区大街小巷，槟榔在无任何包装的情况下即可露天售卖，长久不变质，其重要原因，就在于槟榔经过了肉桂醛溶液的浸泡。肉桂醛作为防腐剂不但可以大大延长保质期，进入人体后也会在肠道降解为人体所需的营养成份，对人体无害有益。肉桂醛既能增强槟榔的药用功效，使槟榔更为纯粹，其特有的肉桂香味，又能提升槟榔的口感口味。 【中文名称】肉桂醛 【分子式】 C9H8O 【产品含量】98% 【CA S编号】104-55-2 【熔点】?9-?4 °C 【性状】无色或淡黄色液体。 【物理性质】溶于乙醇、乙醚、氯仿和油脂，溶于丙二醇，难溶于水和甘油。在空 气中易被氧化成桂酸，能随水蒸汽挥发。 【产品用途】 肉桂醛也是重要的医药原料之一，常用于外用药、合成药中，具有促进血液循环，使皮肤回温，紧实皮肤组织作用；对皮肤的疤痕、纤维瘤的软化与清除皆具效果；有抗凝血酶效果，具有镇静、镇痛、解热、抗惊厥等作用。还能有效抗溃疡，促进胃，肠道运动；还可抑制肿瘤的发生，并具抗诱变作用和抗辐射作用的抗癌功能。其本身的扩张血管及降压特效，对肾上腺皮质性高血压的降压效果显著。 在工业中，可以做显色剂、实验试剂、杀虫剂、驱蚊剂、冰箱除味剂、保鲜剂等；还可应用于石油开采中的灭菌杀澡剂、酸化腐蚀剂，可显著增加石油产量，降低开采成本。 有良好的持香作用，在调香中作配香原料使用，使主香料香气更清香。特性稳定常用作定香剂，用于皂用香精，调制栀子，素馨，铃兰，玫瑰等香精，在食品香料中可用于苹果，樱桃、水果香精。 肉桂醛不受PH值的影响，对于酸性或碱性的物质，都具较强的杀菌消毒功能，常用保鲜防腐防霉剂，同时也是很好的调味油，改善口感风味。对大肠杆菌、葡萄菌、痢疾杆菌、伤寒和肺炎球菌、肠炎沙门氏菌等20多种真菌具有抑制作用。 【实际应用】 美国芝加哥伊利诺伊大学牙科学院专家一项研究发现，肉桂醛能够杀死口腔中的细菌，并由此减少口臭的产生。微生物分析发现，肉桂醛使唾液中的厌氧菌浓度减少了50%，甚至舌后的厌氧菌也被清除了43%。美国箭牌糖类有限公司依此生产的箭牌系列口香糖均具此功效，也有牙膏、口腔清洁生产厂商将向此发展。 肉桂醛在动物养殖市场中也潜藏巨大的市场。我国饲料总量2010年突破1.5亿吨大关，肉桂醛作为非营养性功能饲料添加剂，具有防止饲料霉变、促进动物进食、提高饲料转化率和产肉率、缩短出栏时间等优点，以最低添加量千分之一计，全年约需肉桂醛15万吨，市场空间巨大。法国的PHYTOSYNTHESE公司、韩国最大的饲料生产商semi-feed公司、奥地利百奥明饲料添加剂公司，以及中国广东、四川、江苏、山东、河北等饲料生产、养殖企业已大量使用肉桂醛作为非营养性功能饲料添加剂。
实验六、植物组织丙二醛含量测定 植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反
应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm 与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子； (11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) L 磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) ％硫代巴比妥酸溶液：称取硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取样品，加入2ml预冷的L 的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移入离心管中，最后用缓冲液定容至5ml。在4500转/min离心10min。上清液即为丙二醛提取液。 2．丙二醛含量测定：吸取2 ml的提取液于刻度试管中，加入％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml，于沸水浴上加热10min，迅速冷却。于4500
肉桂醛（英文：Cinnamaldehyde）是一种醛类有机化合物，为黄色黏稠状液体，大量存在于肉桂等植物体内。自然界中天然存在的肉桂醛均为反式结构，该分子为一个丙烯醛上连接上一个苯基，因此可被认为是一种丙烯醛衍生物。肉桂醛颜色是因为π→π*跃迁而产生的，而共轭结构的存在使得肉桂醛的吸收光谱进入可见光波段。在几乎所有的中国家庭里，肉桂都是炖肉、炒菜主要的调味品，在西方，人们更是用肉桂打成粉末加入咖啡、奶味中调味。由于含有特殊芳香的植物，肉桂还可以制作比较特殊的香料。此前，科学家已发现，肉桂醛是一种赋予肉桂独特风味的有机化合物，能够保护小鼠免受肥胖和高血糖的困扰，但这种背后的机制尚不完全清楚。 想进一步弄清楚肉桂醛的作用，并确定它对人类是否也有保护作用。研究人员注意到，当用肉桂醛处理细胞后，几种增强脂质代谢的基因和酶的表达增加。他们还发现细胞的Ucp1和Fgf21（参与产热的重要代
谢调节蛋白）的增加。研究指出，肉桂醛直接作用于脂肪细胞，促进机体燃烧脂肪，产生热量，从而可以改善代谢健康。研究结果发表在最新一期的《新陈代谢》杂志上。 脂肪细胞通常以脂质的形式储存能量。这种长期储存对我们祖先是有益的，因为他们很少能接触到高脂肪的食物，因此更需要存储脂肪。在缺乏食物的时候，这些脂肪可以将存储的能量转化为热量。然而，随着现代肥胖症的日益增多，能量过剩已成为一个问题。“肉桂已经成为我们几千年饮食的一部分，如果它能有助于预防肥胖，那么说服病人坚持以肉桂为基础的治疗，而不是传统的药物治疗方案可能会更容易。” 当然也提醒道，还需要进一步的研究来确定，如何最好地利用肉桂醛的代谢益处，避免不必要的副作用。
桂皮中肉桂醛的提取分离 一．实验目的 1．了解从天然产物中提取有效成分的方法 2．熟练水蒸汽蒸馏的操作技术 二．实验试剂及其物理常数 三．实验装置 四．实验原理及实验步骤 许多植物具有独特的令人愉快的气味,植物的这种香气是由其所含的香精油所
致。香精油是植物组织经水蒸汽蒸馏得到的挥发性成分的总称。本实验桂皮中香精油的主要成分是肉桂醛。 C H C H CH O 取50g桂皮，掰碎，放入250ml三颈烧瓶中，加水150ml，装上球形冷凝管，加热回流10min，使桂皮充分润湿（防止焦化）。然后进行水蒸汽蒸馏，收集馏出液至基本澄清。用3×30ml石油醚进行萃取，无水硫酸钠干燥。蒸去石油醚，称重，计算提取率。测折光率。 五．产率计算和实验讨论 产物质量为46.47-46.01=0.46g 产率为0.92% n26D=1.5228 本实验的两个注意点是回流桂皮时防止焦化和水蒸汽蒸馏的控制。 为了防止在加热回流时桂皮焦化，可以适当多加一点水，但太多的在水蒸汽蒸馏时容易使桂皮粉末冲入冷凝管（可以使用缓冲管），并且在回流时可以不时用玻璃棒搅拌。只要桂皮在反应瓶中翻滚，就完全可以避免焦化。 水蒸汽蒸馏时，先使反应瓶中的水稍沸，然后通入水蒸汽，使进入水蒸汽的的速率和蒸馏的速率达到一致就可以防止反应体系中水太多。水蒸汽蒸馏是分离和纯化有机物的常用方法，尤其是在反应产物中有大量树脂状杂质的情况下，因此，水蒸汽蒸馏在天然产物的提取中是非常有用的。 六．旋光度测定与计算 葡萄糖的[α]=+52.5°，测定α=+4.886°, 根据[α]= α/cl 得到葡萄糖的浓度为0.04653g/ml 果糖的[α]=-92°，测定α=-12.410°, 根据[α]= α/cl 得到果糖的浓度为0.06744g/ml
毕业论文文献综述 高分子材料与工程 肉桂醛合成及优化 一．肉桂醛在医药方面的应用 1.杀菌消毒防腐，特别是对真菌有显著疗效。对大肠杆菌、枯草杆菌及金黄色葡萄菌、白色葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌、伤寒和副伤寒甲杆菌、肺炎球菌、产气杆菌、变形杆菌、炭疽杆菌、肠炎沙门氏菌，霍乱弧菌等有抑制作用。且对革兰氏阳性菌杀菌效果显著，可用于治疗多种因细菌感染引起的疾病。最小抑制浓度（MIC）为0.02—0.07ul/ml，对深部致病真菌，MIC为0.1—0.3ul/ml。最近日本医学专家研究发现，肉桂醛对真菌有显著疗效，对22种条件致病性真菌进行肉桂醛抗真菌作用研究表明：肉桂醛是抗真菌的活性物质，主要是通过破坏真菌细胞壁，使药物渗入真菌细胞内，破坏细胞器而起到杀菌作用。 2.抗溃疡、加强胃、肠道运动。其作用机制是由于溃疡活性因素（胃液与胃蛋白酶）的抑制与防御因素（胃粘膜血流速率）的加强，以及抑制胃粘膜电位降低和对粘膜保护作用所致。除此之外，肉桂醛能降低胰酶活性。肉桂醛系芳香性健胃驱风剂，对肠胃有缓和的刺激作用，可促进唾液及胃液分泌，增强消化功能，解除胃肠平滑肌痉挛，缓解肠道痉挛性疼痛。用于治疗胃痛、胃肠胀气绞痛，有显著的健胃、驱风效果。 3.脂肪分解作用。肉桂醛具有抑制肾上腺素及ACTH对脂肪酸的游离，促进葡萄糖的脂肪合成作用，肉桂酸也有这类作用，但肉桂醛作用远大于肉桂酸。因而，可以用于血糖控制药中，加强胰岛素替换葡萄糖的性能，防治糖尿病。 4.抗病毒作用。对流感病毒，SV10病毒引起的肿瘤抑制作用强大。 5.抗癌作用。可抑制肿瘤的发生，并具抗诱变作用和抗辐射作用。 6.扩张血管及降压作用。对肾上腺皮质性高血压有降压作用。 7.壮阳作用。美国芝加哥治疗研究中心的一份研究表明，肉桂醛对男性壮阳有一定的功效。
植物体内丙二醛含量的测定 一、目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。 二、原理 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。 三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。 四、实验步骤 1. 丙二醛的提取 称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定 取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。 五、丙二醛含量计算： 由于蔗糖－TBA反应产物的最大吸收波长为450nm，毫摩尔吸收系数为85.4×10－3，MDA －TBA反应产物在532nm的毫摩尔吸收系数分别是7.4×10－3和155×10－3。532nm非特异性吸光值可以600nm波长处的吸光值代表。 按双组分分光光度法原理，建立方程组，解此方程组即可求出MDA及可溶性糖浓度。方程组： A450=（85.4×10－3）·C糖 （A532－A600）=（155×10－3）·C MDA+（7.4×10－3）·C糖 解得： A450 C糖= —————— = 11.71A450（mmol·L－1） 85.4×10－3