验证项目名称：培养基模拟灌装验证
验证项目编号：VP-XX-XX-XX
验证参与部门：QA、生产部门、QC、技术科、设动部门验证开始时间：
验证完成时间：
培养基模拟灌装
xx车间xx线
验证方案批准
编制
验证工艺员签名日期(年/月/日)
审核
制剂车间主任签名日期(年/月/日)
审核
设动科科长签名日期(年/月/日)
审核
QC经理签名日期(年/月/日)
审核
QA经理签名日期(年/月/日)
审核
技术科科长签名日期(年/月/日)
批准
质量受权人签名日期(年/月/日)
目录
1. 验证项目概述 (1)
2. 验证目的 (1)
3. 人员与职责 (1)
4. 参考文件清单 (2)
5. 通用方法 (3)
6. 先决条件 (3)
7. 培养基确认 (4)
1）培养基的配制 (4)
2）培养基微生物营养性确认试验（灵敏度检查） (4)
3）培养基无菌性试验 (4)
8. 模拟分装用无菌粉末确认 (5)
1）无菌性试验 (5)
2）溶解性试验 (5)
3）抑菌性试验 (5)
9. 培养基模拟灌装的工艺流程 (6)
10. 液体灌装机及螺杆分装机的无菌性确认 (7)
11. 西林瓶及胶塞的无菌检查 (7)
12. 无菌环境控制与监测 (7)
12.1 无菌操作间悬浮粒子数的监测 (7)
12.2 无菌操作间微生物的测试 (8)
12.3无菌操作间操作过程中人员的微生物数量测试 (9)
13. 培养基模拟灌装 (11)
14. 偏差处理 (13)
15. 验证结果评价及建议 (13)
16. 审核和批准 (14)
17. 再验证周期 (14)
附：验证数据收集与处理要求 (15)
培养基模拟灌装验证
1. 验证项目概述
培养基模拟灌装验证，是在与培养基模拟灌装生产过程有关的其他验证，如：洁净厂房、公用系统、灭菌设备（包括蒸汽灭菌柜、隧道式干燥灭菌器、热循环烘箱等）、制剂设备（包括分装机及灌装机、洗瓶机、冻干机、轧盖机等）、容器具清洁验证合格后，且操作人员熟练掌握了岗位SOP后进行的。
培养基灌装作为培养基模拟灌装的模拟实验，可以直观、方便、准确地反映出培养基模拟灌装过程的污染情况及问题。培养基模拟灌装验证采用胰酪胨大豆肉汤培养基按无菌生产工艺模拟生产，过程中采用连续3次灌装的方式进行，再通过对培养基模拟灌装样品进行无菌检查，从而对无菌生产工艺中所有影响产品无菌结果的各个环节作出准确评价。
验证项目编号：VP-XX-XX-XX
验证进度：年月日~ 年月日
2. 验证目的
采用与实际生产工艺相同或更有挑战性的条件与操作方法（包括生产环境），向制剂内包装容器内灌装经灭菌的培养基，然后将此模拟灌装产品在适当条件下培养，以评价流水线及无菌生产工艺的非最终灭菌的无菌产品的无菌保证水平，同时符合GMP要求。
3. 人员与职责
技术科的职责包括以下：
负责计划、组织、协调本方案的实施
负责本方案的评估并将其提交各部门批复
负责对验证结果作出正确的评估并出具完整的验证文件
负责提供各项测试内容
生产部（车间）的职责包括以下：
负责安排验证测试时间计划
提供完成验证必须的设备、人员并监控
负责根据测试内容进行测试
质量保证（QA）的职责包括以下：
负责监督测试现场严格按本方案实施
负责相关SOP文件的制定和审核
质量控制（QC）的职责包括以下：
负责完成所有测试内容和出具完整的检验报告
设动科的职责包括以下：
负责完成最初的生产设备安装、校验和确认
负责对所有仪器仪表进行校验
负责对验证仪器进行校验
验证参与人员与职责
姓名部门职务分工
质量管理部总监最终批准验证文件
技术管理部总监审核批准验证文件
厂部技术副厂长组织协调验证工作，审核验证文件。
技术科科长组织协调验证工作，审核验证文件。
技术科验证主管制定验证方案，处理验证测试数据，完成验证报告
技术科验证工艺员收集、处理验证测试数据
QA 经理组织协调验证工作，审核验证文件。
QA 质量主管协调现场验证工作
QC 经理指导验证分析，审核分析报告。
QC 分析员负责验证分析
制剂车间主任指导现场验证操作，确保验证进度。
制剂车间工艺员负责现场验证
制剂车间操作工实施验证工作
设动科主任指导并组织各仪器仪表的校准，确保验证期间设备
正常运转
4.参考文件清单
为了编写本方案，参考了以下文件
描述标题/号码修订/日期药品生产质量管理规范NA 2010 药品生产验证指南NA 2003 《医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》GB/T 16294-2010 2010 《医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法》GB/T 16293-2010 2010 《医药工业洁净室(区)悬浮粒子的测试方法》GB/T 16292-2010 2010
5. 通用方法
●下面说明了一些进行记录测试数据工作的通用标准
●保证每一文件是可追溯的，它应有标题，系统参考，文件中应有设备的系列号
●文件中每个注解、记录等都应该清楚、易读、有日期和签名。不能使用铅笔，而
应使用钢笔或水笔记录数据
●每次测试必须是：
－如果记录的是某一数值时，填写“通过/不通过”是不充分的
－如果在本次测试的格式中并没有描述测试程序，注明参考的规程
－附上在测试过程中所产生的打印出来的图，签名并注明日期
－每次测试应签名和注明日期（需有执行人和审核人的签名）
－如果有些测试没有进行，则应在偏差记录中写明未执行的原因和预计执行的日期
●日期的格式为年/月/日
●在文件中不能使用修正液，修改错误必须使用以下正确的方式:
系统XX 签名
系统YZ 日期
●对于不使用的部分，必须如下面所示的划掉。或者，填写“NA”，表示不适用
NA
●对于在执行本方案的过程中所发生的每个偏差，应填写一份包括以下一些内容
的偏差报告
－偏差号
－偏差描述和发现人签字及日期
－必要纠偏措施
－纠偏措施批准人签字和日期
－偏差解决的日期
－偏差解决后的重新检查结果
6. 先决条件
目的
所有进行本验证的先决条件已经得到满足。
程序
确认验证申请，审核验证方案。
对所有参与验证的相关人员进行相应培训。
设备验证工作已完成。
可接受标准
验证申请已提交，附上验证申请表及相关文件。
验证方案已审核并适用于指导本次验证进行。
所有验证参与人员均经过培训，每位人员都能够胜任其职责，并签字确认。
本次验证所涉及文件已批准生效，所涉及的设备验证已完成。
培养间或培养箱热分布均匀性应符合相关规定。
7.培养基确认
目的
验证用培养基符合验证要求。
程序
1）培养基的配制
用容积为1L的三角烧瓶按标准操作规程配制大豆胰蛋白胨肉汤培养基（TSB），大豆胰蛋白胨肉汤培养基的体积≥X×5ml×5000瓶（X=灌装机或分装机的数量）。
配制完毕后按培养基的灭菌规程在脉动真空灭菌器灭菌后备用。
2）培养基微生物营养性确认试验（灵敏度检查）
将灭菌后的大豆胰蛋白胨肉汤培养基灌装于14支接种管内，将接种管分成7组，每组2支。第一组中接种金黄色葡萄球菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第二组中接种绿铜假单胞菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第三组中接种白色念珠菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第四组中接种黑曲霉，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第五组中接种枯草芽孢杆菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第六组中接种生孢梭菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第七组中接种常见杆菌（依据日常监测结果选择最常见菌种），接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；以上管子接种后盖塞、封口。另取一支作为空白对照，将接种有白色念珠菌和黑曲霉的试管放于23～28℃下培养5天；将接种有常见杆菌、枯草杆菌、生孢梭菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的试管放于30～35℃下培养5天，每天观察接种管内微生物的生长情况。
3）培养基无菌性试验
将已配臵的液体培养基按规定灭菌规程进行灭菌。然后将灭菌后的培养基臵先在23~28℃条件下培养7天，再在30~35℃条件下培养7天。
1）培养基微生物营养性确认试验（灵敏度检查）：培养后空白对照管应无菌生长，加菌的培养基管应有菌且生长良好；
2）培养基无菌性试验：灭菌后的培养基应澄清、无沉淀。经23~28℃和30~35℃条件培养的培养基，应无菌生长。
8. 模拟分装用无菌粉末确认
目的
模拟灌装用无菌粉末符合验证要求。
程序
1）无菌性试验
将模拟分装用的粉末（乳糖、甘露醇、PEG6000、PEG8000）装于适当容器中，经环氧乙烷或钴-60灭菌后备用，灭菌有效性应经验证。无菌粉末的用量≥X×0.5g/瓶×5000瓶（X=灌装机或分装机的数量）。
将灭菌后的粉末用无菌操作方法取样，在23~28℃及30~35℃条件下培养14天，并按药典方法检验其无菌性。
2）溶解性试验
先用定量液体灌装机装入5ml液体培养基，再将0.5g无菌粉末分装于西林瓶内，轻轻振动，粉末应能完全溶解；如果不能溶解，则用定量液体加液器装入10ml液体培养基，再将0.5g无菌粉末分装于西林瓶内，然后轻轻振动，粉末应能完全溶解。
若仍不能溶解，则应在略低于5.0％的浓度下重新试验。
3）抑菌性试验
先用定量液体灌装机在30只经灭菌的西林瓶中装入5ml液体培养基，分成6组，每组各取一瓶加入0.5g无菌粉末。第一组中接种金黄色葡萄球菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第二组中接种生孢梭菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；
第三组中接种枯草芽孢杆菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU) ；第四组中接种绿铜假单胞菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第五组中接种黑曲霉，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)；第六组中接种白色念珠菌，接种量1ml(含菌量为10~100CFU)。
将接种有白色念珠菌和黑曲霉的试管放于23～28℃下培养7天，将接种有枯草杆菌、生孢梭菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的试管放于30～35℃下培养7天，每天观
1）模拟分装用无菌粉末无菌性试验：在23~28℃及30~35℃条件下培养14天，所有检品均应无菌；
2）模拟分装用无菌粉末溶解性试验：在10%的浓度下，轻轻振摇，样品完全溶解；
3）模拟分装用无菌粉末抑菌性试验：全部样品、对照品试管中均应有明显微生物生长。与未加无菌粉末的培养瓶相比，样品瓶内微生物生长无微弱、缓慢或不长，无菌粉末无抑菌作用。
9. 培养基模拟灌装的工艺流程
10. 液体灌装机及螺杆分装机的无菌性确认
目的
确认灌装前液体灌装机及螺杆分装机无菌。
程序
在分装前，确认液体灌装机及螺杆分装机已按相关SOP操作要求清洗，灭菌。
在培养基模拟灌装验证开始前，每一台液体灌装机分别灌装10瓶经灭菌的大豆胰蛋白胨肉汤培养基，盖塞、轧盖，然后在23~28℃及30~35℃条件下各培养7天（从低温到高温）；
同时，每台螺杆分装机分装10瓶灭菌后的无菌粉末（0.5g），盖塞、轧盖，送交QC，按无菌检查法进行无菌检查。
可接受标准
液体灌装机样品在23~28℃及30~35℃条件下各培养7天后，应无菌生长。
螺杆分装机样品无菌检查，结果应无菌。
11.西林瓶及胶塞的无菌检查
目的
确认西林瓶及胶塞无菌。
程序
在培养基模拟灌装验证过程中，随机抽取清洗灭菌后的瓶子与胶塞各20只，浸于硫乙醇酸盐及改良马丁培养基中，在23~28℃及30~35℃条件下培养14天。
可接受标准
西林瓶及胶塞应无微生物生长。
12. 无菌环境控制与监测
12.1 无菌操作间悬浮粒子数的监测
目的
确认房间洁净度等级。
测试是在动态的环境下进行，即室内满编工作人员，所有设备运转。
程序
1）采样方法：
在培养基模拟灌装过程中，对灌装间和局部层流的悬浮粒子进行动态监控。测试
时尘埃粒子计数器应放在离地约0.7m~1m（监测点位臵应选择平行或低于分装机分装操作区域）处设臵检测点。
2）检测方法：自动粒子计数法
使用自动粒子计数法测试洁净室中的粒子。按悬浮状态连续计数的方法，空气采样量为28.3L/分，每个采样点测试3次，采样过程应覆盖培养基模拟灌装全过程，最少采样点的数目参考GB/T16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子测试方法》制定。
3）检测点分布：根据实际情况参考GB/T16292-2010《医药工业洁净室（区）悬浮粒子测试方法》设臵
可接受标准
《悬浮粒子测试方法》空气洁净度级别A级B级
悬浮粒子数UCL（个〃m-3）≥0.5um ≤3520 ≤352000 ≥5um 20 ≤2900
《药品生产质量管理规范》（2010修订）过渡期间，暂不能达到要求的，可执行《药品生产质量管理规范》98版标准，新建生产线除外。
如动态洁净度超标，则应进行偏差调查，若同房间的静态洁净度没有问题，则应考虑减少室内人员，或者设法减少机器的产尘，来降低室内的尘埃粒子浓度。
12.2 无菌操作间微生物的测试
目的
确认无菌操作间内的微生物数量在可接受的标准内。
程序
1）沉降菌测试
按车间洁净室菌落检查标准操作规程，采用沉降平皿法对灌装间各监测点的菌落数进行测定，放臵位臵包括灌装机下、回风口等。将培养皿按要求放臵后，打开平皿盖，使培养基表面暴露4小时后，盖上平皿盖，然后在30~35℃的条件下，在恒温培养箱中培养48小时后计数。
无菌操作间沉降菌的测试应覆盖整个灌装过程，若灌装操作时间大于4小时，可以采用在同一监测点连续放臵培养皿。
2）浮游菌测试
在采样点，培养皿按要求放臵后，打开平皿盖，浮游菌测试点离地0.8m～1.0m左右
（监测点位臵应选择平行或低于分装机分装操作区域），使用浮游菌采样器进行采样测试。采样点布臵参照GB/T 16293-2010《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》，采样次数不少于3次，采样应覆盖培养基模拟灌装全过程，每个采样皿应注明取样编号。
可接受标准
洁净度级别浮游菌
cfu/m3
沉降菌（φ90mm）
cfu /4小时(2)
表面微生物
接触（φ55mm）
cfu /碟
5指手套
cfu /手套
A级<1 <1 <1 <1
B级10 5 5 5
C级100 50 25 －
D级200 100 50 －
如室内微生物超标，则应进行偏差调查，首先进行菌种鉴别，确认微生物来源，如来自空气净化系统，则考虑检查各级过滤器是否损坏，如来自人员，则应适当减少室内人员。
在《药品生产质量管理规范》（2010修订）过渡期间，微生物状况暂不能达到要求的，可执行《药品生产质量管理规范》98版要求。
12.3无菌操作间操作过程中人员的微生物数量测试
目的
确认无菌操作间操作过程中人员的微生物数量在可接受的标准内。
程序
采用预灌装表面接触平皿（大豆酪蛋白琼脂培养基TSA＋0.25％青霉素酶）对参加模拟灌装装试验的操作者的无菌衣、手部，口罩等部位进行擦拭，然后对接触平皿进行微生物数量培养。其取样方法、取样频率、取样要求、取样点分布见取样计划。监测项目取样方法取样频率取样要求
灌装间操作人员微生物检查手套、前胸、
左右手臂手
肘处、靠桌面
等部位：接触
碟法
模拟试验过程后
分别对操作人员
进行取样监测
验证人员对操作人员进行取样；灌装
过程后取样：被取样人员离开操作平
面，在操作室的一角将双臂平伸，静
止不动，取样人员在最短时间内取样。
灌装间设备表面微生物检查棉签擦
拭法
模拟试验过程前，
对灌装间的进行
根据取样点要求取样，对灌装间的门
把手、电话机按键、电子天平托盘、
胶塞振荡器、灌装针头或螺杆、隧道
空气微生物数量监测
沉降平皿法
灌装过程中对环
境进行动态沉降
菌测试（4个小时）
根据取样点分布图布臵培养皿，在整个生产过程中动态测试。
悬浮粒子监测
粒子计数器 灌装过程全程动态连续测试 监测应由专人按标准操作程序进行。
浮游菌监测 浮游菌测试
仪
灌装过程全程动态连续测试
监测应由专人按标准操作程序进行。
制剂生产过程中操作人员微生物监测点分布图
接触平皿使用图示：
培养基模拟灌装验证微生物测点数一览表
序号采样点取样方式采样要求房间名称1 操作工左手
接触平皿（0.2u 青霉素酶）灌装过程
后
灌装间
2 操作工右手
3 操作工前胸
4 操作工腰部
5 操作工右臂手肘
6 操作工左臂手肘
7 操作工分装机台面
8 验证人员左手
9 验证人员右手1 门把手
棉签擦拭灌装过程
前
2 灌装机胶塞震荡塞
3 灌装针头或螺杆
4 西林瓶灭菌烘干隧道出口转盘
5 电子天平托盘
6 电话机
可接受标准
棉签擦拭检验中手部不得检出菌落，其余部位菌落应≤5个/皿。
13. 培养基模拟灌装
目的
模拟无菌粉针分装过程，确认该过程符合GMP要求。
程序
1）模拟分装
克无菌粉末，每台分装机至少分装5000瓶，实际分装应略大于5000瓶（例如：5300瓶），确保有足够的样本用于分析，灌装速度应降为日常生产时正常速度的1/3 ~ 2/3。对全部样品加塞，轧盖，并用黑色记号笔按顺序（以一定数量为一个单位）编号，确保验证结果可追溯。
将所有经加塞、轧盖后的模拟灌装样品倒臵培养，使瓶内的胰酪胨大豆肉汤培养基充分与玻璃瓶瓶壁和胶塞接触，并对所有样品进行培养观察。
模拟分装过程中的干扰试验：
1）模拟分装过程中由于粉末粘性大，导致装量不准确，操作人员需对分装机粉斗进行拆卸，重新安装（一般在分装至2000瓶左右进行）。重新分装过程中，验证人员对分装粉末具塞的样品进行加取，加取量为100瓶，另外标注编号，送QC培养。车间人员对分装机安装进行确认，在现场操作记录的备注中标注。
2）模拟分装过程中由于分装机压塞操作出现故障，车间机修人员进入维修（一般在分装至4000瓶左右）。在维修结束后，验证人员对维修人员进行微生物测试，测试方法及测试点参照操作人员微生物测试方法及测试点。并且对分装样品进行加取，加取量为100瓶，另外标注编号，送QC培养。车间人员在现场操作记录的备注中标注维修记录。
2）微生物培养
（1）阳性对照
用培养基灵敏度试验的样品作阳性对照，阳性对照细菌生长情况应良好。
（2）阴性对照
以模拟分装用无菌粉末抑菌性试验中空白培养基样品作为阴性对照。
（3）试验样品培养
模拟分装的全部样品先在23~28℃培养7天，再在30~35℃培养7天。14天后检查微生物生长情况。对于长菌的样品，应记录其瓶子所属单位编号，对铝盖及胶塞的密封性进行检查。对于微生物污染的样品应对菌落进行鉴别试验。在调查结束后，应对产生污染的原因进行总结、记录。
（4）试验样品营养性再确认试验（灵敏度检查）
若所有试验样品均无菌生长，再抽取样品进行营养性试验。随机抽取取样品70瓶，混合后分成7组，每组10瓶。接种量为每瓶1ml(含菌量为10~100CFU)。具体如下表：
取样时间取样数接种菌种培养温度和时间
所有试验样品均无菌生长后10 枯草芽孢杆菌30~35℃培养箱中培养5天10 生孢梭菌30~35℃培养箱中培养5天10 常见杆菌30~35℃培养箱中培养5天10 白色念珠菌23~28℃培养箱中培养5天10 金黄色葡萄球菌30~35℃培养箱中培养5天10 铜绿假单胞菌30~35℃培养箱中培养5天10 黑曲霉23~28℃培养箱中培养5天
可接受标准
模拟分装：除样品外，其余条件均符合粉针剂生产工艺的要求。
产品培养：
①阴性对照，不得有菌生长；
②阳性对照，微生物生长良好；
③模拟灌装样品100％进行微生物培养，污染概率＜0.1%为合格（可信限为95%）。
④样品营养性再确认试验（灵敏度检查）：培养后加菌的培养基管应有菌，且生长良
好。
14. 偏差处理
目的
记录在整个方案执行过程中所发生的偏差
程序
发生任何微生物污染，则应立即停止生产，调查并记录污染发生的原因，在调查结束并采用相应的措施后应重复进行培养基模拟分装试验。
测试报告
偏差记录样张见附录，填写后附在相关的测试报告后。
15. 验证结果评价及建议
评价培养基模拟灌装试验结果的主要指标之一是微生物污染水平，若试验结果证明其污染水平超过规定的合格限度，则应立即停止生产，调查并记录污染产生的原因。
在调查结束并采用相应的措施后应重复进行培养基模拟灌装试验。
原因调查至少应包括如下项：
（1）生产环境微生物监测数据；
（2）生产环境悬浮粒子监测数据；
（3）人员污染的监测数据；
（5）操作间的空气流向、压差；
（6）操作人员的操作方法、培训情况；
（7）模拟灌装试验过程中的异常情况；
（8）无菌室生产工具及其他用品的储存状况；
（9）鉴别污染微生物的种、属，以寻找污染源的线索；
（10）无菌生产用设备的控制系统和监测系统的校正；
（11）生产前、生产后过滤器的完整性检测结果；（冻干制剂）
（12）相关产品、相关生产过程存在的问题等。
原因调查结束后，应根据调查所确定的或可能发生的原因制定纠正或改进方案并予以实施。当改进方案实施之后应重复培养基模拟灌装试验。
16.审核和批准
应对验证结果进行评价和分析，并根据验证结果确定（首次）合理的纠偏限度和警戒限度，或修正已有的纠偏限度和警戒限度，并将最新纠偏限度和警戒限度写入相关标准操作规程。
当本方案的所有测试项目得到执行，并且所有偏差得到相应的处理后，由验证人员对以上所需无菌分装的验证数据进行收集、分析、评价。然后交由技术科对无菌分装的验证情况进行综合评价，最后报质量总监批准。
17.再验证周期
（1）已投入使用的粉针剂灌装生产线，每半年进行1次培养基模拟灌装试验。
（2）每个在粉针剂灌装生产线上的工作人员，每年至少参加1次成功的培养基模拟灌装试验。
（3）生产用设备、设施，从事粉针剂灌装生产操作的人员结构、工艺方法有重大改动时均必须进行培养基模拟灌装试验，以证明其改动对已经验证了的粉针剂灌
装工艺过程不产生不良影响；
（4）无明确原因超出行动限度，最终产品无菌检测不合格及长时间停产后，需进行再验证；
（5）再验证周期：每班每半年1次。
附：验证数据收集与处理要求
验证结束后，应收集以下验证记录和报告：
1、培养间温度测试报告。
2、使用的液体灌装机及分装机的名称，规格，设备状况。
3、培养基的消毒记录、无菌报告及培养基微生物营养性确认试验（灵敏度检查）报告。
4、模拟分装用无菌粉末的无菌报告及无菌粉末抑菌性报告、溶解性能报告。
5、试验用西林瓶及胶塞的清洗，消毒记录及无菌报告。
6、分装机，灌装机清洗，消毒记录及无菌检查报告。
7、分装试验当天的无菌室环境控制报告。
8、模拟分装试验批生产记录。
9、产品无菌检查的原始记录及报告。
培养基模拟灌装验证涉及标准操作规程确认记录（参考）
序号文件编号文件名称确认要求确认结果备注
1 验证管理规程批准生效□是□否
2 检验方法、检验设备验证规程批准生效□是□否
3 设备及公用工程系统验证规程批准生效□是□否
4 清洁验证规程批准生效□是□否
5 工艺验证规程批准生效□是□否
6 生产车间清场管理规程批准生效□是□否
7 制剂工序定臵管理规程批准生效□是□否
8 检定用菌种管理规程批准生效□是□否
9 人员进出十万级房间标准操作规程批准生效□是□否
10 人员进出一万级房间标准操作规程批准生效□是□否
11 物料进出十万级房间标准操作规程批准生效□是□否
12 物料进出一万级房间标准操作规程批准生效□是□否
13 人员进出一般生产区房间标准操作规程批准生效□是□否
14 十万级房间清洁标准操作规程批准生效□是□否
15 一万级房间清洁标准操作规程批准生效□是□否
16 一般生产区房间清洁标准操作规程批准生效□是□否
17 原料进出无菌室标准操作规程批准生效□是□否
18 洗瓶岗位生产前确认标准操作规程批准生效□是□否
19 洗瓶岗位标准操作规程批准生效□是□否
20 洗瓶机标准操作规程批准生效□是□否
21 洗瓶岗位清场标准操作规程批准生效□是□否
22 洗瓶机维护保养标准操作规程批准生效□是□否
23 洗瓶机清洁标准操作规程批准生效□是□否
24 隧道烘箱标准操作规程批准生效□是□否
25 隧道烘箱设备维护保养标准操作规程批准生效□是□否
26 分装岗位生产前确认标准操作规程批准生效□是□否
27 分装岗位标准操作规程批准生效□是□否
28 分装机标准操作规程批准生效□是□否
29 分装机维护保养标准操作规程批准生效□是□否
30 分装岗位清场标准操作规程批准生效□是□否
31 分装机清洁标准操作规程批准生效□是□否
32 轧盖岗位生产前确认标准操作规程批准生效□是□否
33 轧盖岗位标准操作规程批准生效□是□否
34 轧盖机维护保养标准操作规程批准生效□是□否
35 轧盖机标准操作规程批准生效□是□否
36 轧盖岗位清场标准操作规程批准生效□是□否
37 轧盖机清洁标准操作规程批准生效□是□否
38 目检岗位标准操作规程批准生效□是□否
结果分析与评价：
检查人：日期：
复核人：日期：
培养基模拟灌装验证涉及验证文件确认记录（参考）
序号文件名称文件编号确认要求确认结果备注
1 脉动真空蒸汽灭菌柜验证验证完成□是□否
2 净化热风循环烘箱验证验证完成□是□否
3 超声波洗瓶机验证验证完成□是□否
4 分装机验证验证完成□是□否
5 热风循环隧道烘箱验证验证完成□是□否
6 轧盖机验证验证完成□是□否
7 胶塞清洗机验证验证完成□是□否
8 氮气系统验证验证完成□是□否
检查人：日期：
复核人：日期：
精心整理*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 审批 目录 1.介绍……………………………………………………………………………………………............. ..错误!未指定书签。 2.目的……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 3.范围……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 4.职责……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 4.1.生产部职责 ....................................................................................... 错误!未指定书签。
4.2.质量保证部职责 (4) 4.3质量控制部职责 (4) 4.4.设备部、物资管理部门各职责 ............................................................. 错误!未指定书签。 5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..错误!未指定书签。 5.1.法规................................................................................................. 错误!未指定书签。 5.2.指南................................................................................................. 错误!未指定书签。 6.参考文件………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 7.生产工艺描述…………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 7.12.风险评估 ................................................................................................. 7.13.工艺风险分析 .......................................................................................... 错误!未指定书签。 7.14.模拟项目 ................................................................................................. 错误!未指定书签。 7.14.1模拟灌装过程 .......................................................................................... 错误!未指定书签。 7.14.2灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装 .................................................. 错误!未指定书签。 7.14.3模拟最多进入灌装间的人数..................................................................... 错误!未指定书签。 7.14.4人员干预.................................................................................................. 错误!未指定书签。 7.14.5模拟人员活动 .......................................................................................... 错误!未指定书签。 7.14.6模拟最差条件 .......................................................................................... 错误!未指定书签。
培养基模拟灌装试验验证方案(10ml) 2011年08月 培养基模拟灌装试验验证方案(10ml)验证方案的起草与审批
验证小组成员 方案起草 验证委员会审阅会签 方案批准 目录 1概述 (3) 2.验证目的 (3) 3风险评估 (4) 4验证参考标准 (5)
5.验证范围 (4) 6.验证职责 (5) 7验证前提条件 (5) 8 验证批次和时间 (7) 9 验证步骤 (8) 10培养基的培养和检查 (14) 11试验结果评价 (14) 12试验结果分析 (15) 13风险的评估与接受 (15) 14验证结果评审和结论 (15) 15方案修改记录 (14) 16再验证周期 (14) 17附件 (14) 1概述 本次培养基模拟灌装试验验证是以灭菌的乳糖粉末分装到10ml西林瓶中，整个过程模拟正常的粉针剂品种的分装状态，在盖塞前将胰蛋白胨大豆肉汤培养基灌入瓶内，压塞轧盖后进行培养，确认无菌分装工艺的无菌可靠性。 2.验证目的 在各种干扰和最差条件下，评估灭菌工艺、人员更衣、行为习惯、A/B级气流模式、无菌环境的建立、消毒维持方法和物料的传递控制等整个流程的无菌保证水平。
3风险评估 经验证小组人员共同对培养基模拟灌装试验验证进行风险评估，对存在的质量风险提出了预防和纠正措施建议，具体见下表： 评估人年月日 4.验证参考标准 4.1 药品生产质量管理规范（2010年版） 4.2 药品生产质量管理规范（2010年版）指南 4.3 中国药典2010年版（二部） 4.4 药品生产验证指南（2003年版） 5.验证范围 本方案适用粉针车间生产的全过程。包括：人员更衣、各房间的清洁消毒、物料传递、容器工具的处理、内包材的处理、中控取样、动态下环境监测、无菌分装、轧盖过程，并在分装过程中模拟正常与非正常干扰活动。方案中还规定瓶子、胶塞和铝盖灭菌后存放有效期的验证。
培养基模拟灌装验证 方案参考
验证方案编码：STP-YZ-04702 A A A A药业有限公司 验证方案 项目名称培养基模拟灌装 方案日期
验证方案审批表
验证进度计划 培养基模拟灌装验证方案
目录 验证方案审批表 1. 验证目的 2.适用范围 3.职责 4.有关背景资料 5.验证项目、评价方法及结果 6．漏项与偏差 7．审阅本验证方案，并确认验证结果 8．验证总结 9.SOP的修订 10.再验证时间 11 证明 1.验证目的
培养基模拟灌装试验是用与实际生产工艺相同的条件与操作方法，包括生产环境，向安瓿内灌装经除菌过滤的液体培养基，然后将此模拟制品在适当条件下培养，以确认无菌工艺过程的可靠性。证明在本公司小容量注射剂车间生产线中灌装过程中所采用的各种方法和各种规程，防止微生物污染的水平达到可接受的合格标准的能力，或提供保证所生产产品的无菌性的可信限度达到可接受的合格标准的证据。充分验证无菌生产工艺的可靠性。同时评价生产操作人员的行为规范性。 我公司小容量注射剂车间于2011年3月5-6日进行过三批培养基无菌灌装验证，验证结果符合要求。由于小容量注射剂车间的纯化水系统、注射用水系统、空调净化系统于2011年8-10进行了改造和验证，关键生产设备如超声波洗瓶机、隧道干燥杀菌机、安瓿拉丝灌封机也于2011年9月进行了改造和验证，为充分验证无菌生产工艺的可靠性，故拟再次进行三批培养基模拟灌装验证。 2.验证范围 本验证方案适用于本公司小容量注射剂车间培养基模拟灌装生产验证，当上述条件改变时，应重新验证。 3.职责 3.1验证领导小组 3.1.1负责验证方案会审 3.1.2负责验证方案的批准 3.1.3负责对验证方案修改稿的批准 3.1.4负责验证报告审核、批准 3.2 验证小组 3.2.1 负责验证方案的起草和审核。 3.2.2负责按验证方案对有关人员进行培训。 3.2.3负责组织、协调本验证方案的实施。 3.2.4负责收集、整理和审核验证数据，起草验证报告（如方案执行有偏差，要完成OOS调查报告）。 3.3 小容量注射剂车间 3.3.1 负责验证方案的实施。 3.3.2 负责组织培训岗位操作人员。 3.4生产部 3.4.1协助验证方案的实施，提供必要的技术支持。
培养基模拟灌装实验方案考试卷 一、填空题（5分/题，共50分） 1. 本次培养基模拟灌装实验为新改建的洁净厂房内实施，为培养基模拟试验的首次验证，因此通过连续三批模拟灌装实验及结果有限性的评价，确认结果的重现性。 2. 对无菌灌装区的设备台面及可能接触到的表面进行无菌程度的检查，其合格标准为：灌装机设备台面微生物数量＜3个，设备输送带＜5个。 3. 培养基模拟灌装过程中对操作人员的无菌服、五指手套、口罩等部位微生物数量进行检测, 其合格标准为：五指手套微生物数量＜3个，一个操作人员双臂、前胸微生物总数＜5个，口罩微生物数量＜3个。 4. 粉针剂无菌分装间应控制合适的温度及相对湿度，其合格标准为：房间温度：20-22 ℃，相对湿度：45-50%。 5. 模拟分装过程：采用先灌装乳糖、再注入液体培养基的方式，其阳性对照样品为枯草芽孢杆菌和白色念珠菌。 6. 微生物培养条件：将全部样品在适宜的温度下培养14天，先在较低的温度（23-28℃）培养7天，然后在较高的温度下(30-35℃)培养7天，在第三天和第七天之间至少观察培养基样品的微生物的生长情况，通过最后一天的观察，确认有无微生物生长。 7. 对于培养基/乳糖样品的培养结果，若发现污染应明确记录瓶号、瓶数，同时应检查胶塞、铝盖的密封情况；若有破损应记录并检查其破损原因。对于被污染的样品进行鉴别试验，至少包括菌落数、细胞形态学记革兰染色特性等。 8. 试验结果与评价：评价无菌模拟灌装实验结果的主要指标就是污染水平，不管实验的数量有多少，其结果污染瓶均要为零，如果连续三批实验结果均出现1瓶，应进行再次实验，培养结果如出现2瓶以上，应停止生产，进行污染调查。 9. 对于已投入使用的粉针剂生产线，每年至少进行2次培养基模拟灌装实验，其生产线的每一位员工至少每年参加一次成功的培养基模拟灌装实验。 10. 当生产设备、设施、操作人员的结构、操作方法发生变动时，必须进行培养基模拟灌装实验，已确认其变动没有对该生产线的无菌保证产生影响。 二、问答题（50分） 1.简述培养基模拟灌装实验方案验证内容（15分）。 答：①培养基制备及无菌性检查，②培养基促生长实验，③无菌原料的制备、无菌性及抑菌性检验，④模拟灌装最差条件选择，⑤模拟分装过程，⑥灌装产品的培养，⑦根据培养，⑧结果确定本次模拟灌装实验的有效性，⑨模拟灌装过程记录。
分发部门： 培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺验证小组
一、概述 厂区无菌操作生产线，按2010版GMP 及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最终灭菌产品生产使用。 某某产品因无法进行F 0≥8分钟湿热灭菌，以达到SAL ≤10-6 ，但处方可以通过微生物滞留过滤器过滤，故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。 无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，确保产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施为：①人员的培训 ②无菌工艺验证。 按SFDA 化学药品注射剂基本技术要求：培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验证，是判断无菌保证水平的关键手段。故在正式生产前必须按某某产品生产工艺进行培养基模拟灌装验证。 1 本次验证关键生产工艺流程图 2 验证原理 将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。 3验证次数 按2010版GMP 附录1要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次验证，故需进行
二、验证目的 1通过该工艺验证活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求； 2通过该工艺验证活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险； 3通过该工艺验证活动确保生产符合现行GMP法规要求。 三、验证范围和实施时间 1本验证方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装验证活动； 2计划验证实施时间为2013年3月~4月连续三个批次。 四、验证小组和职责 1 验证小组 根据验证的内容和验证管理文件要求，成立验证小组，验证小组成员见下表，小组人员应在最终验证报告中签名确认。在验证实施前，方案起草人应对所有相关参与人员进行验证方案的培训，做好培训记录，并将记录附于验证报告后。
页眉 培养基模拟灌装试验验证方案(10ml) 2011年08月 (10ml)培养基模拟灌装试验验证方案验证方案的起草与审批页脚
页眉验证小组成员 方案起草 方案批准
录目.......................................................................................................................................... 3 . 1概述.. (4) 验证目的2.页脚 页眉 3风险评估 (4) 4验证参考标准 (5) 5.验证范围 (5) 6.验证职责 (5) 7验证前提条件 (6) 8 验证批次和时间 (7) 9 验证步骤 (8) 10培养基的培养和检查............................................................................................................. 14 11试验结果评价........................................................................................................................ 14 12试验结果分析........................................................................................................................ 15 13风险的评估与接受................................................................................................................. 15 14验证结果评审和结论............................................................................................................. 15 15方案修改记录........................................................................................................................ 15 16再验证周期............................................................................................................................ 15 17附件....................................................................................................................................... 15
审批 部门姓名签名日期起草人品质管理部 起草人生产技术部 起草人针剂车间 审核人针剂车间 审核人生产技术部 审核人质检中心 审核人品质管理部 批准人质量负责人 分发部门： 培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺验证小组 一、概述 厂区无菌操作生产线，按2010 版 GMP及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最终灭菌产品 生产使用。 某某产品因无法进行F0≥8 分钟湿热灭菌，以达到SAL≤ 10-6，但处方可以通过微生物滞留过滤器过滤，
故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。 无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，确保产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施为：①人员的培训②无菌工艺验证。 按 SFDA化学药品注射剂基本技术要求：培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验证， 是判断无菌保证水平的关键手段。故在正式生产前必须按某某产品生产工艺进行培养基模拟灌装验证。 1 本次验证关键生产工艺流程图 安瓿的清洗称量配料工器具清洗和灭菌 除菌过滤 干热灭菌 灌封 灯检 D级背景 C 级背景 A 级背景一般区 2验证原理 将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。 3验证次数 按 2010 版 GMP附录 1 要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次验证，故需进行 连续三个批次的验证活动。 二、验证目的 1通过该工艺验证活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求； 2通过该工艺验证活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险； 3通过该工艺验证活动确保生产符合现行GMP法规要求。 三、验证范围和实施时间 1 本验证方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装验证活动；
1 主题内容与适用范围 本文件规定了培养基模拟灌装试验的程序和要求。 本文件适用于培养基模拟灌装试验的管理。 2 引用标准 《药品生产质量管理规范》2010年修订 3 术语 培养基模拟灌装试验（以下简称试验）：英文名称MFT——Media Fill Test的英文缩写，是用一种模拟替代物质来模拟整个无菌生产过程，在所得的模拟产品中加注培养基，再对所得的全部培养基样品进行无菌培养。培养基模拟试验是无菌生产工艺的验证手段，是任何非最终无菌药品生产必须进行的一项验证。 最差条件：导致工艺及产品失败的概率高于正常工艺的条件或状态，即标准操作规程范围以内工艺的上限和下限。但这类最差条件不一定必然导致产品或工艺的不合格。 4 职责 4.1 生产部门负责试验方案的制定、组织实施、试验报告的撰写、偏差的报告等。 4.2 质监中心负责试验培养基的促生长试验、灌装物的培养等。 4.3 质量保证部负责试验过程的监督管理。 5 管理规定 5.1 试验目的：规范公司培养基模拟灌装试验，评估无菌原料药和无菌制剂的生产工艺，为所生产产品无菌性的可信限度达到可接受的合格标准提供证据，证明其具有生产无菌原料药和无菌制剂的能力并具有可重现性，符合现行GMP要求和相关技术指南要求。 5.2 试验要求 5.2.1 试验频次 培养基模拟灌装试验的首次验证，每班次应当连续进行3次合格试验。培养基模拟灌装试验按照生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。单一规格品种再验证周期为半年，正常生产的多规格品种每一规格再验证周期为一年。每位无菌操作人员每年至少参加一次成功的培养基模拟灌装试验。空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装试验。 5.2.2 试验批量及容器的数量、装量 培养基灌装批量及容器的数量、装量应当足以保证评价的有效性。批量较小的产品，培
******药业有限公司验证方案 ****生产线培养基灌装
小组主要成员及职责 根据《确认与验证管理规程》规定，组织成立***培养基灌装验证小组，验证小组成员及职责如下表：
方案会签及审批
目录 一、概述 (6) 1.验证原因 (6) 2.验证原理 (6) 二、验证目的 (7) 三、参考文件 (7) 1.参考标准 (7) 2.公司规程 (7) 四、风险评估 (8) 五、验证范围 (15) 六、验证计划 (16) 七、方案培训 (16) 八、验证可接受标准 (16) 九、验证内容 (17) 1.配制 (17) 2.冷藏、除菌过滤 (18) 3.洗瓶 (18) 4.灌封 (20) 5.环境及人员卫生监测（动态） (21) 6.培养 (22) 7.培养基灌装后清洁确认 (23) 十、漏项与偏差处理 (24)
十一、再验证周期 (24) 十二、确立文件 (24) 十三、附件 (25) 附件1： (26)
一、概述 1.验证原因 公司****按照2010版GMP 附录1《无菌药品》的要求进行设计，洁净区级别分为A 级、B 级、C 、级、D 级，该线用于小容量注射剂非最终灭菌产品（****）生产使用。 现按2010版GMP 附录1要求对**生产线进行产品培养基灌装验证，以考察该线的无菌保证水平。本次为第四次培养基模拟灌装（上次验证报告编号R.4-001/2015），故只进行一个批次的验证活动。 验证关键生产工艺流程图如下： 2.验证原理 将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。 3.验证的先决条件 ? 参与培养基验证的人员经过培训。 ? 涉及培养基灌装试验使用的配液系统、冷藏系统、除菌过滤系统、灌封系统、洗瓶机、杀菌干燥
文件编号MFVP-**** **********有限公司 页码 1 of 96 ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 ml灌装线培养基模拟灌装验证方案
目录 1. 介绍.............................................................................. ..4 2. 目的 (4) 3. 范围 (4) 4. 职责 (4) 4.1. 生产部职责............................................................ 错误！未定义书签。 4.2. 质量保证部职责 (4) 4.3质量控制部职责 (4) 4.4.设备部、物资管理部门各职责............................................ 错误！未定义书签。 5. 法规和指南........................................................................ ..4 5.1. 法规 (5) 5.2. 指南 (5) 6. 参考文件 (6) 7. 生产工艺描述 (8) 7.1. 工艺流程图 (8) 7.2. 模拟灌装验证流程图 (9) 7.2.1模拟灌装过程流程图 (10) 7.3. 生产工艺过程描 (10) 7.3.1 产品生产规模 (10) 7.3.2 生产制度 (10) 7.3.3 生产前检查 ......................................................................... 1 1 7.3.4 操作前检查 ......................................................................... 1 1 7.3.5 生产操作 ........................................................................... 1 1 7.3.6 车L盖............................................................................. 1 1 7.4. 基本原理............................................................................... 1 1 7.5. 工艺：................................................................................. 1 1 7.6. 人员： (12) 7.7. 设备和器具： (12) 7.8. 运行频次和周期 (12) 7.9. 运行数量 (12)
.药事. Phorrnoceuticol Administration China Pharmaceuticals 2018年9月20日第27卷第18期Vol. 27, No. 18, September 20, 2018 ?监管实践? d o i: 10. 3969/j.issn. 1006 -4931. 2018. 18. 026培养基模拟灌装试验相关缺陷分析与改进建议 毛红 (重庆市药品技术审评认证中心，重庆401120) 摘要：目的帮助生产企业和药品生产质量管理规范（GM P)检查员了解培养基模拟灌装试验中的关键点，改进缺陷以符合法规要求。方法分析无菌药品生产企业G M P认证现场检查发现的缺陷中涉及培养基模拟灌装试验的问题，及其产生原因。结果与结论共发现与培养基模拟灌装相关的缺陷项378条，出现频次较高的缺陷分为人员与培训、方案设计、培养基及培养条件、记录缺失、最差条件、干扰设计、偏差调查7个方面。分析其表现及对策，有助于形成培养基模拟灌装试验的关注要点与重点。 关键词：无菌药品；培养基模拟灌装试验;缺陷分析；改进措施 中图分类号：R951 文献标识码：A 文章编号= 1006 -4931牗018) 18 -0080-03 Defect Analysis and Improvement Suggestion of Simulation Test of Culture Media Fill Mao Hong i Chongqing Center fo r Drug Evaluation and Certification，Chongqing，China A b s tra c t： O bjective To help the manufacturing enterprises and GMP inspectors understand the key points in simulated test of culture media fill and improve the defects to meet the requirements of regulations. M ethods The problems and causes of defects involved in simulated test of culture media fill were found and analyzed in the GMP certification on - site inspection of aseptic drug manufacturers. R esults an d C onclusion Totally 378 defects related to simulated test of culture media fill were found. Higher frequency of defects were divided into seven aspects：personnel and t raining，program design,culture media and condition of culture,record m issing,worst con-dition ,interference design, deviation survey. The analysis of its performance and countermeasures will help to form the key points of sim-ulated test of culture media fill. Key w o rd s： sterile drug products; simulated test of culture media fill;defect analysis;improvement measure 《药品生产质量管理规范（2010年修订）》犤](以下简称GMP)及《无菌药品附录》[2]要求，非最终灭菌药品 的无菌工艺验证应进行培养基模拟灌装试验。该试验是 指采用微生物培养基替代产品(无菌粉末分装的培养基 模拟灌装试验是将产品替代品溶于培养基中)对无菌工 艺进行评估的验证技术，它解决了无菌检查不能复检的 问题，灌装批量即为无菌检查取样量，更能体现污染率 问题犤_4]。该试验是非最终灭菌药品GMP管理中一项 重要的验证工作。2014年至2015年，国家食品药品监 督管理总局食品药品审核查验中心在组织的无菌药品 生产企业的GMP认证检查缺陷中，共发现与培养基模 拟灌装相关的缺陷项378条。本研究中对这些缺陷项进 行了分类汇总和梳理,现报道如下。 1 缺陷项目分类及分析 选取近年来收集的与培养基模拟灌装试验相关的 378条认证检查缺陷，出现频次较高的缺陷分为人员与 培训、方案设计、培养基及培养条件、记录缺失、最差条 件、干扰设计、偏差调查7个方面。 人员与培训:无菌药品生产中，人是最大的污染源,操作人员应始终按无菌技术操作,并在日常操作中努力 降低风险犤_6]。检查中人员与培训缺陷主要为试验中未 包括所有日常生产人员；模拟灌装前未对人员无菌更衣效果进行确认，人员更衣不规范;无菌更衣培训记录过 于简单,无视频资料;未对进人灌装区域的维修人员、环 境监测人员进行表面微生物监测;模拟灌装后培养基的 培养结果由灌装车间灯检岗位人员执行,但未对该岗位 人员进行微生物学知识和检查技能的培训。人员方面的 缺陷对无菌药品最终质量的影响最大。 方案设计:培养基模拟灌装试验要求尽可能模拟整 个工艺过程，但也要考虑到培养基的生长条件,避免某 些工艺抑制微生物的生长。检查中方案设计缺陷主要 为，试验时按照正常生产工艺充氮气保护，未考虑氮气 可能对需氧菌的抑菌效果;冻干时真空度过低造成培养 基中的水分减少;培养基在冻干箱中温度降低导致微生 物生长抑制，未同步进行促生长试验；试验中模拟了开 门、停电、停风等会带来污染风险的操作。试验应当经过 详细的计划和良好的组织，以保证真实反映工艺中的污 染风险犤]。 培养基和培养条件:培养基和培养条件的选择对于 培养基模拟灌装试验的成败至关重要。检查中此类缺陷 主要为，未对试验用培养基进行灵敏度试验;培养结束 后，未进行培养基促生长能力试验;培养条件未严格按 照微生物的繁殖规律,先低温、后高温进行培养,如验证 方案规定“灌装后的培养基一半置23 ~ 28 °C的温度条 第一作者：毛红（196/ -),女，大学本科，高级工程师，研究方向为药品G M P检查，（电话）023 -60353850(电子信箱）120715625@ qq. com。 80
*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 审批 目录 1. 介绍…………………………………………………………………………………………… ..3 2.目的 (4) 3.范围 (4) 4.职责 (4)
4.1. 生产部职责................................................................................................... 错误!未定义书签。 4.2. 质量保证部职责 (4) 4.3 质量控制部职责 (4) 4.4. 设备部、物资管理部门各职责...................................................................... 错误!未定义书签。 5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..4 5.1. 法规 (5) 5.2. 指南 (5) 6.参考文件 (5) 7.生产工艺描述 (7) 7.1. 工艺流程图 (7) 7.2. 模拟灌装验证流程图 (8) 7.2.1模拟灌装过程流程图 (9) 7.3. 生产工艺过程描 (9) 7.3.1 产品生产规模 (9) 7.3.2 生产制度 (9) 7.3.3 生产前检查 (10) 7.3.4 操作前检查 (10) 7.3.5 生产操作 (10) 7.3.6 轧盖 (10) 7.4. 基本原理 (10) 7.5. 工艺： (10) 7.6. 人员： (10) 7.7. 设备和器具： (11) 7.8. 运行频次和周期 (11) 7.9. 运行数量 (11) 7.10. 模拟物料和培养基 (11) 7.11. 密闭和开放系统 (12) 7.12. 风险评估 (13) 7.13. 工艺风险分析 (14) 7.14. 模拟项目 (16) 7.14.1 模拟灌装过程 (16) 7.14.2 灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装 (16) 7.14.3 模拟最多进入灌装间的人数 (16)
无菌培养基模拟灌装实验的研究 以培养基替代产品进行无菌培养基模拟灌装实验，探讨无菌生产过程的验证方法，设计较合理的验证方案，证实无菌培养基模拟灌装实验是评价无菌保证水平的重要依据。 标签：无菌培养基；无菌灌装；验证；GMP 注射剂车间无菌灌装生产线或生产工艺的重大变更，按照2010版GMP指南规定[1]，必须进行生产工艺验证。我公司冻干粉针车间采用无菌培养基模拟灌装试验作为无菌生产工艺在线验证的重要手段，作为对无菌操作人员卫生水平及无菌操作水平的检定，对无菌灌装生产线的每一位操作人员每年至少参加一次无菌培养基模拟灌装试验。结果车间经过多年的生产运行未出现微生物污染的现象，证明采用无菌培养基模拟灌装试验作为评价与验证无菌灌装生产线的方法是可行的。下面针对培养基模拟灌装试验方案的设计中应考虑的因素、试验实施的过程以及试验结果的分析展开研究。 1无菌培养基模拟灌装实验 无菌培养基模拟灌装试验是采用微生物培养基替代产品对无菌工艺进行评估的验证技术，也称为培养基灌装试验。无菌培养基模拟灌装是用于证明所生产的非最终灭菌的无菌产品可以在确定的环境、工艺和规范操作下，能够最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染，能够对无菌工艺的无菌保证水平进行综合评估，用来证实设备、人员、操作、灭菌过程、环境等各个要素能够有效的共同运作的能力。 2培养基模拟灌装试验方案的设计 2.1无菌培养基模拟灌装试验的前提应完成厂房设施设备的确认和清洁、灭菌工艺的验证影响产品质量的公用工程系统（如空调系统、水系统、蒸汽、压缩空气、加热、制冷等）均需经过确认。公用工程是生产得以正常实施的保证之一，由于产品暴露是发生污染导致无菌工艺验证失败的主要原因之一，其中空调系统的验证应提供足够的试验数据支持，证明在其生产过程中无论是产品还是其他材料所暴露的区域都是A级洁净区，而且A级的洁净区域连续覆盖全部分装生产线并覆盖关键生产设备，对整个生产过程进行动态监控。试验实施前，所有相关设备、容器、工器具的清洗验证、无菌室消毒效果的验证以及灭菌工艺的验证（如湿热、干热灭菌工艺、在线灭菌工艺、除菌过滤工艺等）均应完成，应保证清洗彻底和灭菌成功。如果清洗和灭菌不彻底，残存的药物或者微生物会使无菌培养基受到污染而使试验失败。 2.2最差条件设计在培养基灌装设计中，工艺条件的选择应选取合理的”最差条件”，用最差条件来对工艺流程、设备和整个体系进行挑战。最差条件是指在工艺允许范围内正常生产时可能遇到的最差情况，并不包括由于偏差引起的超
培养基模拟灌装方案-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 审批 目录 1. 介绍…………………………………………………………………………………………… .............错误!未定义书签。 2.目的……………………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。 3.范围……………………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。 4.职责……………………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。
. 质量保证部职责 (4) 质量控制部职责 (4) . 设备部、物资管理部门各职责 ............................................................. 错误!未定义书签。 5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..错误!未定义书签。 . 法规 (9) . 指南 ................................................................................................. 错误!未定义书签。 6.参考文件………………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。 7.生产工艺描述…………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。 . 工艺流程图 ....................................................................................... 错误!未定义书签。 . 模拟灌装验证流程图 .................................................................................... 错误!未定义书签。 模拟灌装过程流程图........................................................................................... 错误!未定义书签。 . 生产工艺过程描................................................................................. 错误!未定义书签。 产品生产规模 ......................................................................................... 错误!未定义书签。 生产制度 ................................................................................................ 错误!未定义书签。 生产前检查 (9) 操作前检查............................................................................................. 错误!未定义书签。 生产操作 ................................................................................................ 错误!未定义书签。 轧盖........................................................................................................ 错误!未定义书签。 . 基本原理 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 工艺： .......................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 人员： .......................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 设备和器具： ............................................................................................... 错误!未定义书签。 . 运行频次和周期 ........................................................................................... 错误!未定义书签。 . 运行数量 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 模拟物料和培养基 (9) . 密闭和开放系统 ........................................................................................... 错误!未定义书签。 . 风险评估 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 工艺风险分析 ............................................................................................... 错误!未定义书签。 . 模拟项目 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 模拟灌装过程 .................................................................................................... 错误!未定义书签。 灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装............................................................. 错误!未定义书签。 模拟最多进入灌装间的人数............................................................................... 错误!未定义书签。 人员干预 ............................................................................................................ 错误!未定义书签。