重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶Chongzu Niu Jianxing Chengxianwei Xibao Shengzhangyinzi
Ningjiao
Recombinant Bovine Basic Fibroblast Growth Factor Gel
本品系由高效表达牛碱性成纤维细胞生长因子基因的大肠杆菌，经发酵、分离和高度纯化后，加入凝胶基质制成。含适宜稳定剂、防腐剂，不含抗生素。
1.基本要求
生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合现行版《中国药典》三部“凡例”的有关要求。
2 制造
2.1 工程菌菌种
2.1.1名称及来源
重组牛碱性成纤维细胞生长因子工程菌株系由带有牛碱性成纤维细胞生长因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。
2.1.2 种子批建立
应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。
2.1.3 菌种检定
主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。
2.1.
3.1 划种LB琼脂平板
应呈典型大肠杆菌集落形态，无其他杂菌生长。
2.1.
3.2染色镜检
应为典型的革兰氏阴性杆菌。
2.1.
3.3 对抗生素的抗性
应与原始菌种相符。
2.1.
3.4 电镜检查（工作种子批可免做）
应为典型大肠杆菌形态，无支原体、病毒样颗粒及其他微生物污染。
2.1.
3.5 生化反应
应符合大肠杆菌生物学性状。
2.1.
3.6 牛碱性成纤维细胞生长因子表达量
在摇床中培养，应不低于原始菌种的表达量。
2.1.
3.7 质粒检查
该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒相符。
2.1.
3.8目的基因核苷酸序列检查（工作种子批可免做）
目的基因核苷酸序列应与批准序列相符。
2.2 原液制备
2.2.1 种子液制备
将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养，供发酵罐接种用。
2.2.2 发酵用培养基
采用适宜的不含抗生素的培养基。
2.2.3 种子液接种及发酵培养
在灭菌培养基中接种适量种子液。在适宜温度下进行发酵，应采用经批准的发酵工艺，并确定相应的发酵条件，如温度、PH值、溶氧、补料、发酵时间等。
2.2.4 发酵液处理
用适宜的方法处理菌体。
2.2.5 纯化
采用经批准的纯化工艺进行纯化，使其达到3.1项要求，即为牛碱性成纤维细胞生长因子原液。加入稳定剂，除菌过滤后保存于适宜温度，并规定其有效期。
2.2.6 原液检定
按3.1项进行。
2．3 半成品制备
采用的基质应符合凝胶剂基质要求（附录I M）。
2.3.1配制与除菌
应按经批准的配方进行。
2.3.2凝胶制备
应按经批准的工艺进行。凝胶剂应均匀、细腻，在常温时保持胶状，不干涸或液化。
2.3.3半成品检定
按3.2项进行。
2.4 成品
2.4.1 分批
应符合“生物制品分批规程”规定。
2.4.2 分装
应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。
2.4.3 规格
应为经批准的规格。
2.4.4 包装
应符合“生物制品包装规程”和附录I M的有关规定。
3检定
3.1 原液检定
3.1.1 生物学活性
依法测定（附录X G）。
3.1.2 蛋白质含量
依法测定（附录VI B 第二法）。
3.1.3 比活性
为生物学活性与蛋白质含量之比，每1mg 蛋白质应不低于1.7×105IU。
3.1.4 纯度
3.1.
4.1 电泳法
依法测定（附录IV C）。用非还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，分离胶胶浓度为15.0％，加样量应不低于10μg（考马斯亮蓝R250染色法）或5μg（银染法）。经扫描仪扫描，纯度应不低于95.0％。
3.1.
4.2 高效液相色谱法
依法测定（附录III B）。色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以A相（三氟乙酸-水溶液：取1.0ml三氟乙酸加水至1000ml，充分混匀）、B相（三氟乙酸-乙腈溶液：取1.0ml三氟乙酸加入色谱纯乙腈至1000ml，充分混匀）为流动相，在室温条件下，进行梯度洗脱（0～70%B相）。上样量不低于10 g，于波长280nm处检测，以牛碱性成纤维细胞生长因子色谱峰计算理论塔板数应不低于2000，按面积归一化法计算，牛碱性成纤维细胞生长因子主峰面积应不低于总面积的95.0%。
3.1.5 分子量
依法测定（附录IV C）。用还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，分离胶胶浓度为15.0％，加样量应不低于1.0μg，制品两条蛋白带的分子质量应分别为17.5kD+1.875kD和22.0kD+2.20kD。
3.1.6 外源性DNA残留量
每1支应不高于10ng（附录IX B）。
3.1.7 等电点
主区带应为9.0～10.0,供试品的等电点与对照品的等电点图谱一致（附录IV D）。
3.1.8 紫外光谱扫描
用水或生理氯化钠溶液将供试品稀释至约100μg/ml～500μg/ml，在光路1cm、波长230nm～360nm下进行扫描,最大吸收峰波长应为277±3nm（附录II A）。
3.1.9 肽图（每半年测定一次）
依法测定(附录VIII E),应与对照品图形一致。
3.2 半成品检定
3.2.1 生物学活性
应按经批准的方法预处理供试品，依法测定（附录 X G ），应符合规定。
3.2.2无菌检查
应按经批准的方法预处理供试品，依法检查（附录XII A），应符合规定。
3.3 成品检定
除外观、装量检查外，应按经批准的方法预处理供试品后，进行其余各项检定。
3.3.1 鉴别试验
按免疫印迹法（附录VIII A）或免疫斑点法（附录VIII B）测定，应为阳性。
3.3.2 物理检查
3.3.2.1 外观
应为无色透明凝胶。
3.3.2.2装量
依法检查(附录V F)，应符合规定。
3.3.3 pH值
按经批准的方法对样品进行预处理,应为6.5～7.5（附录V A）。（按1：5的比例用水对凝胶进行稀释）
3.3.4生物学活性
按经批准的方法对样品进行预处理，应为标示量的70%～200%（附录X G）。（用RPMI1640培养基预稀释后测定）
3.3.5 无菌检查
依法检查（附录XII A），应符合规定。
4保存、运输及有效期
于2～8
5 使用说明
应符合“生物制品包装规程”的规定和批准的内容。
人肝细胞生长因子(HGF)elisa试剂盒使用说明书 Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置 标准品稀释液：1.5ml×1瓶 酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96） 【人肝细胞生长因子(HGF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用 计算： 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 试剂盒组成： 封板膜:2片（48）/2片（96） 说明书:1份 密封袋:1个 标准品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存 样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存 终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肝细胞生长因子(HGF) 水平。用纯化的人肝细胞生长因子(HGF) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) ，再与HRP标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，
重组人表皮生长因子治疗压疮临床疗效观察 摘要：目的：探讨重组人表皮生长因子治疗压疮的临床效果。方法：将100例压疮患者随机分为观察组（重组人表皮生长因子）50例和对照组（常规换药治疗）50例，观察组在初步清创基础上用重组人表皮生长因子湿敷，再予以敷料包扎；对照组采用5%呋喃西林或1%碘伏纱块湿敷后方纱敷料包扎，比较两组病人的治疗效果。结果：观察组明显缩短压疮创面愈合时间；不同时间创面平均愈合率明显优于对照组，差异均具有统计学意义（P<0.05 ）；结论：使用重组人表皮生长因子创面湿敷治疗，能显著促进创面愈合，缩短愈合时间，且无毒副作用。 关键词：重组人表皮生长因子；压疮；护理 Abstract：objective to Study of recombinant human epidermal growth factor in the treatment of pressure ulcers. methods 100 cases of patients with pressure ulcers were randomly divided into observation group （recombinant human epidermal growth factor）50 cases and control group （conventional dressing therapy）50 cases，observation group on the basis of preliminary debridement with recombinant human epidermal growth factor shi fu，again be dressing
碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）神经再生 1975年Gospodarowicz首先报道运用理化方法从牛的大脑和垂体中分离纯化出碱性成纤维细胞生长因子（Basic Fibroblast Growth Factor，bFGF）。80年代，bFGF的氨基酸序列得到澄清。90年代，国内外相继运用基因工程方法成功获得重组bFGF，有力推动了关于bFGF的研究。系列研究证实，bFGF能刺激和调节血管内皮细胞、上皮细胞、成肌细胞、成骨细胞和神经胶质细胞等多种起源于中胚层、神经外胚层的细胞分化增殖，在胚胎发育、组织愈合中起重要作用。神经方面，关于bFGF的研究集中在中枢神经，发现其神经活性广泛，能保护神经元，促进突起增生，提示在周围神经再生方面的研究意义。现参考近年来bFGF与神经再生的相关文献作一综述。 一、内源性bFGF正常情况下的表达和神经损伤后的变化 (一)中枢神经：正常情况下，内源性bFGF以微量分布于脑、垂体和下丘脑等器官，已证实星形胶质细胞、垂体滤泡及部分神经细胞能分泌bFGF，在海马皮质、中脑、纹状体和小脑颗粒细胞均有其受体。神经损伤后，早期就能观察到内源性bFGF表达增多，是神经损伤后早期反应之一。 叶诸榕用原代培养的大鼠大脑星形胶质细胞作成机械损伤模型，观察发现bFGF在损伤后2小时开始表达，12小时达高峰，2天后开始回落，星形胶质细胞胞体肥大，突起粗大。崔建忠运用Northern杂交、组织学方法动态观察大鼠颅脑弥漫性损伤后bFGF的基因表达和组织学改变，结果发现轻度损伤后12小时，重度损伤后4小时，bFGF基因表达增加，均于第3天达到高峰。Grothe〔1〕研究脊髓神经节bFGF及其Ⅰ型受体（FGFR-1)的表达时发现，正常情况下，bFGF和FGFR-1的mRNA在脊神经节均有表达，原位杂交显示星形胶质细胞产生bFGF，而感觉神经元表达FGFR-1，提示旁分泌作用；坐骨神经损伤后，L4～6感觉神经元bFGF的表达在1天内即上调，7天达高峰，28天后恢复，FGFR-1的变化则不明显。 (二)周围神经：Grothe〔1〕和Meisinger〔2〕1997年报道了bFGF及其受体在周围神经的表达和损伤后变化的研究结果，而此前该领域未见报道。该研究发现，正常情况下，大鼠坐骨神经FGFR-1 mRNA表达高于bFGF mRNA。坐骨神经损伤后，FGFR-1和bFGF的mRNA 在损伤远、近端均于不同的时相点上调，并有时间依赖性；bFGF的表达具有自身正反馈特点，且不影响FGFR-1。这一实验说明，与在中枢神经一致，内源性bFGF表达增多同样是外周神经损伤后的早期反应。 神经损伤后bFGF表达上调的意义是什么?不少学者将bFGF运用于神经细胞培养和神经损伤模型，发现bFGF具有广泛的促神经再生作用，提示bFGF表达增多是神经损伤后的修复反应，且可能具有始动意义。 二、外源性bFGF促进神经再生 (一)中枢神经 (1)离体试验：端礼荣在原代培养的大鼠胚胎中脑神经细胞中加入bFGF，观察发现细胞微团集落形成率明显增加，不同剂量的bFGF表现量效关系，图像分析见神经细胞突起增多，连接丰富呈网状。Miyagawa运用bFGF于原代培养的海马神经元轴突损伤模型，观察发现实验组较对照组轴突增生、突起增多。Himmelseher〔3〕进一步研究了不同浓度的bFGF对如上模型的作用，结果未用bFGF的对照组神经元存活65%，运用不同剂量bFGF的试验组神经元变性均减少，10 mg／L组存活神经元达85%，神经突起亦增多、增长。 由上述试验可见，bFGF能促进培养的神经细胞增生，神经细胞损伤后运用bFGF，变性死亡减少，神经突起增生，说明bFGF在体外具有促进、保护神经细胞的作用。Malgrane 〔4〕研究大鼠背根神经节神经元对神经毒性药物的反应时发现：bFGF不但能刺激轴突再
重组人表皮生长因子凝胶（酵母） Chongzu Ren Biaopi Shengzhangyinzi Ningjiao (Jiaomu) Recombinant Human Epidermal Growth Factor Gel（Yeast） 本品系由高效表达人表皮生长因子基因的酵母，经发酵、分离和高度纯化后,加入凝胶基质制成。含适宜稳定剂，防腐剂，不含抗生素。 1 基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2 制造 2.1 工程菌菌种 2.1.1 名称及来源 重组人表皮生长因子工程菌株，系由带有人工合成的人表皮生长因子基因的DNA片段整合到酵母菌染色体基因组中构建而成。 2.1.2 种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3 菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2.1. 3.1 划种BMG1琼脂平板 应呈典型酵母菌菌落形态，无其他杂菌生长。 2.1. 3.2 染色镜检 在光学显微镜下观察，应形状规则，用次甲兰染色，无死亡细胞。 2.1. 3.3 筛选标志检查 应符合该基因表型特征。 2.1. 3.4 人表皮生长因子表达量 在摇床中培养，应不低于原始菌种的表达量。 2.1. 3.5 人表皮生长因子基因稳定性检查 涂BMG1琼脂平板，挑选至少50个克隆，用PCR检测人表皮生长因子基因，阳性率应不低于95％。 2.2 原液 2.2.1 种子液制备 将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养，供发酵罐接种用。 2.2.2 发酵用培养基 采用适宜的不含任何抗生素的培养基。 2.2.3 种子液接种及发酵培养
重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶-说明书以下内容仅供参考，请以药品包装盒中的说明书为准。 重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶说明书 【说明书修订日期】 2006年12月07日 【警告】 运动员慎用 【特殊标记】 外 【药品名称】 重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶 【英文名称】 RecombinantBovine Basic Fibroblast Growth Factor Gel 【汉语拼音】 Chongzu NiuJianxingchengxianweixibao Shengzhangyinziningjiao 【成份】
本品主要成份为重组牛碱性成纤维细胞生长因子。系由含有高效表达牛碱性成纤维细胞生长因子基因的大肠杆菌，经发酵、分离和高度纯化后制成。 【性状】 应为无色透明凝胶。 【适应症】 促进创面愈合，用于烧伤创面(包括浅Ⅱ度、深Ⅱ度、肉芽创面)、慢性创面(包括体表慢性溃疡等)和新鲜创面(包括外伤、供皮区创面、手术伤等)。 【规格】 21000IU/5g/支 【用法用量】 将凝胶直接涂于清创后的伤患处，覆以适当大小的消毒敷料，适当包扎即可。推荐剂量每次约300IU/cm2，每日一次，或遵医嘱。 【不良反应】 未见不良反应。 【禁忌】
对本品过敏者禁用。 【注意事项】 1.本品为无菌包装，用后请立即盖上喷盖，操作过程中，尽量保持无污染。 2.勿将本品置于高温或冰冻环境中。 3.高浓度碘酒、酒精、双氧水、重金属等蛋白变性剂可能会影响本品活性，建议常规清创后用生理盐水冲洗后再使用本品。 【孕妇及哺乳期妇女用药】 孕妇及哺乳期妇女使用本品的疗效和安全性尚未确立，必须使用时请遵医嘱。 【儿童用药】 17岁以下儿童患者使用本品的疗效和安全性尚未确立，必须使用时请遵医嘱。 【老年用药】 60岁上老年患者使用本品的疗效和安全性尚未确立，必须使用时请遵医嘱。 【药物相互作用】
重组人表皮生长因子对鼻黏膜结构的影响 【摘要】目的：探讨重组人表皮生长因子（rhEGF）对鼻黏膜结构的影响。方法：对21例（42侧）经鼻内窥镜全鼻窦开放术患者进行同体对照实验，一侧直接将人表皮生长因子喷于纱条填于术后窦口鼻道复合体处，另一侧为止血纱条填塞术腔2日后对照，在用药后3天、1周、2周取双侧鼻黏膜进行透视电镜下观察鼻黏膜结构。结果：用药后3天上皮排列不整，细胞间连接松散，表层纤毛紊乱，大量脱落，1周时上皮、表层纤毛明显修复，2周时黏膜基本正常。结论：重组人表皮生长因子对鼻黏膜结构的损坏较小并可促其迅速恢复。 【关键词】重组人表皮生长因子；鼻黏膜；鼻内镜 重组人表皮生长因子（rhEGF）是可调节多类细胞生长的多肽，是极其重要的血管生成因子[1]。其通过控制具有调节上皮化、血管生成和胶原代谢的细胞增生和移行而帮助创面愈合[2]。rhEGF调节障碍将会导致修复延迟，乃至瘢痕的形成[3]。该药物是否会对鼻黏膜产生刺激或损害，以及损害的程度和损害后是否可逆，是该药物在鼻科临床能否应用的关键，本观察则是该药物对鼻黏膜结构的影响情况。 1 资料和方法 1.1 病例选择：选择双侧鼻息肉全鼻窦炎患者21例，男13例，女8例，年龄21~53岁，平均36.28岁，病程1~10年，患者均为初次手术并无明显变态反应病史，每例患者双侧鼻腔病变基本相同，按照鼻息肉慢性鼻窦炎诊疗评定标准（1997，海口）分类：Ⅱ型2期9例，Ⅱ型3期12例。手术前均作副鼻窦CT 扫描。 1.2 药物及使用方法：药品为重组人表皮生长因子（rhEGF），由深圳华生元基因工程发展有限公司提供（批号：19991201）。 21例均采用局麻鼻内窥镜下鼻息肉摘除全鼻窦开放术，术式为Messerklinger 术式，从前至后切除筛窦，再将上颌窦自然口扩大，酌情处理额窦和蝶窦，切除病变组织时尽量保留正常和病变较轻的黏膜，有利于术后功能的恢复，窦口鼻道复合体处经肾上腺素棉片压迫止血后，随机一侧直接将rhEGF喷于纱条填于该处，另一侧为止血纱条填塞术腔2日后对照，12例左侧做对照组，9例右侧做对照组，rhEGF隔日一换，共4~5次后按术后常规清洁处理。 1.3 组织病理学观察：术后用药3天、1周、2周取双侧窦口鼻道复合体处1
产品介绍 贝复济主要成分为重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF)。是一种多功能细胞生长因子，具有广泛的生物活性，能促进与创伤修复有关的所有细胞迅速增殖和分化，从而主动促进创面修复，全面提高愈合质量，是一种安全有效的创伤修复治疗新药。 贝复济也是国内唯一，国际上第一个正式批准上市使用bFGF 用于创伤修复的药物。 作用机理 贝复济的主要成分为重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF)，对来源于中胚层和外胚层的组织具有促进修复和再生的作用。它与损伤部位的靶细胞（包括角膜上皮细胞、角膜内皮细胞和基质细胞）表面的特异性结合，激发细胞主动修复功能，促进角膜细胞的分裂增殖、移行和分化，加速角膜损伤愈合及改善角膜
愈合质量。 产品特点源于基因工程技术的国家一类新药加快伤口愈合，缩短创面愈合时间减少及避免瘢痕的形成 增加创面的抗撕裂强度 安全有效、无毒副作用 应用 外伤、刀割切、冻伤、手术伤口及激光创面、医学美容术后创面。 各种原因引起的溃疡、伤口延期不愈，糖尿病溃疡、放射性溃疡、褥疮、瘘窦、宫颈糜烂、口腔溃疡等。 烧烫伤、包括浅Ⅱ度、深Ⅱ度、肉芽创面。 产品介绍 贝复济冻干粉主要成分为外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF)。是一种多功能细胞生长因子，具有广泛的生物活性，能促进与创伤修复有关的所有细胞迅速增殖和分化，从而主动促进创面修复，全面提高愈合质量，是一种安全有效的创伤修复治疗新药。 贝复济冻干粉采用新型专利无菌包装, 滴瓶设计, 使用方便。 产品特点滴瓶设计--使用方便 无菌现配--活性更强 直接作用于修复细胞, 加速创面修复高度安全、无毒副作用 应用普外科
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 肝细胞生长因子是什么 导语：肝细胞可以再生是因为我们的身体里面拥有肝细胞生长因子，如果我们的肝细胞因子受到损伤或者是说肝细胞因子减少了，都会大大地影响我们的肝 肝细胞可以再生是因为我们的身体里面拥有肝细胞生长因子，如果我们的肝细胞因子受到损伤或者是说肝细胞因子减少了，都会大大地影响我们的肝细胞再生的。想要让自己的肝细胞可以再生就要保护好我们的肝细胞再生因子，但是，大家知不知道什么是肝细胞生长因子呢？ 1HGF及其受体的结构 肝细胞生长因子(HGF)[1]最早是1984年由日本的中村敏一教授从大鼠血浆中得到的，其结构实质是含728个氨基酸的肝素结合糖蛋白. 它来自间质细胞，以旁分泌方式作用于邻近细胞，并与细胞表面的受体结合并激活酪氨酸激酶活性，具有较强的促有丝分裂、组织成形、诱导上皮细胞迁移、侵袭以及诱导血管生成等作用[2]. HGF的受体是原癌基因cmet编码的一种跨膜蛋白，称为Met，是由Mr为190000的前体蛋白分裂而得来，由Mr为50000的a链和Mr为145000的3链经二硫键相连而成的杂二聚体. Prat等发现某些癌细胞的Mr为190000 Met 的前体，缺乏裂解过程，不需连接配体就已有活性，因此就失去了HGF的生长控制. 各种瘤细胞和cmet转化后的细胞都过度表达Met，对HGF的反应比正常细胞更敏感强烈. 2HGF及其受体的生物学作用 (1) 启动肝再生实验证明，在众多细胞因子中，HGF是肝再生的启动信号，并在肝细胞增殖过程中起重要作用. (2) 促进细胞分裂作用HGF 在原代肝细胞的无血清培养中可刺激肝细胞DNA合成，1 g/L HGF即可 预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏
鸡胚成纤维细胞培养 1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、 75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。 3、选胚：取9-10日龄鸡胚，（注：鸡胚日龄越小，形成细胞活力越好，但产量较低）用新 洁尔灭消毒蛋壳10分钟后放净化台。用碘酒、酒精消毒蛋壳。用镊子打开气室。 4、用另一套镊子将壳膜打开将鸡胚夹起去头、爪、眼，放灭菌生理盐水中。 5、把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先 置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。 6、剪切：用眼科剪把组织切成1~2毫米大小的块，以便于消化。 7、处理组织：将已剪碎的组织碎片倒入一个带玻璃珠的灭菌三角瓶中，其中加入0.25%的 胰酶，10个胚约7ml，或加组织消化液，一个胚1ml（组织消化液以及胰酶的配置见微生物指导）结扎瓶口或塞以胶塞。 8、消化：将其置入37℃水浴箱中或用恒温水浴，消化中应不停摇动，如用电磁恒温搅拌器 消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。消化10－15分钟。一般约12分钟。视鸡胚日龄大小而定。越小消化时间越短。见组织松软即可。一般不可消化时间太长否则容易导致细胞活力不足。 9、分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织 已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，加入0.5％的含5％犊牛血清双抗的的水解乳蛋白Hank，s液少许。（制法见微生物试验实习指导），用力震摇，或用吸管吹打。 使细胞分散，脱落。然后用纱布过滤或随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清（可以不离心吸掉上清），加入适量含有血清的培养液。 10、计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培 养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。分装在细胞培养瓶中。视细胞多少而定加入培养基。 培养基为0.5％的含5％犊牛血清双抗的的水解乳蛋白Hank，s液. 11、将其置入co2细胞培养箱中，37度。瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易 生霉菌，每次换液时需要换新塞。培养24小时进行观察。一般在24－48小时可形成单层细胞。 传代 1. 倾倒培养瓶内旧培养液。 2. 向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。 3. 置温箱中2~5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。 4. 吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。 5. 用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。 6. 计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。
成纤维细胞生长因子及其与受体作用机制 的研究进展1 姜媛媛，任桂萍，王文飞，郝建权，李德山 东北农业大学生命科学学院生物制药教研室，哈尔滨（150030） E-mail：deshanli@https://www.doczj.com/doc/e28752822.html, 摘要：成纤维细胞生长因子(FGF)是一类多肽类物质，其中大多数成员可与肝素结合发挥作用。目前已知FGF至少包括23个因子，即FGF1～23。部分FGF家族成员N末端有大约3O个氨基酸残基组成的典型信号肽序列，可以分泌到细胞外。FGF家族成员是一类生理功能较广泛的生长因子，功能包括促进细胞有丝分裂、趋化与血管生成、促进中胚层和神经外胚层细胞的存活与生长等。本文根据最近的研究成果对 FGF因子及其受体研究进展做一综述，并主要对FGF因子特征及其研究趋势进行了探讨。 关键词：FGF，FGF受体，肝素 中图分类号:Q74 引言： 成纤维细胞生长因子最早是从脑和垂体的提取液中发现的，该物质是一种能促进成纤维细胞生长的多肽类活性物质，可以通过与细胞膜特异性受体结合对细胞生长进行调节。从70年代中期到目前已进行了大量广泛的研究，目前已知FGF至少包括23个因子，它们在一级氨基酸序列上有一定的同源性，并有类似的生物学功能，且广泛存在于体内多种组织中。FGF对中胚层和神经外胚层来源的细胞具有十分明显的促细胞分裂增殖作用，并且在机体内的胚胎发育、细胞生长分化、创伤组织愈合及肿瘤发生发展中起着十分重要的作用。 1. 成纤维细胞生长因子（FGF）家族 成纤维生长因子（Fibroblast growth factor, FGF）又被称为肝素亲和生长因子(Heparin binding growth factor, HBGF)，是一类通过与细胞膜特异性受体结合发挥作用的多肽分子。现已知FGF家族至少包括23个成员，即FGF1～FGF23。FGF家族成员之间的氨基酸序列同源性约为25%～50%，其每个成员都有140个氨基酸的中轴，该中轴在不同的成员中有高度的同源性。结构分析表明，此中轴折叠成12条逆向平行的β链，它们又进一步形成圆柱状的结构。部分FGF家族成员N末端有大约3O个氨基酸残基组成的典型信号肽序列，使得它们可通过内质网一高尔基复合体的经典(即自分泌和旁分泌)途径被分泌到细胞外，但其中也有部分FGF则因本身缺乏信号肽结构，不能向外分泌，只能在细胞受损时释放[1]。多数FGF（如FGF3～8、10、15、17～19、21～23）的N末端具有典型的信号肽序列。而FGF16和FGF20虽然没有明确的信号肽序列却也能高效地分泌到细胞外[12]。FGF1 和FGF2也缺乏信号肽序列和正常的分泌途径，却也能出现在胞外基质，推测两者可能来自受伤的细胞，或者通过与内质网-高尔基体通路不同的细胞脱颗粒机制释放至胞外的。此外，FGF 11～14没有典型的信号肽序列，因此认为这些FGF是在胞内发挥作用[13]。由于FGF家族成员之间的氨基酸序列有25％～50％的同源性，分子结构有一定的共性，故FGF不同分子之间的生物学效应既有相似性，又有各自的特点[1-3]。 FGF1(aFGF)和FGF2(bFGF)是最先被发现，也是迄今为止研究最充分的两个成员，因其1本课题得到黑龙江省科技厅重点攻关项目（编号：2006G0461-00）的资助。
外用重组人表皮生长因子 Waiyong Chongzu Ren Biaopi Shengzhangyinzi Recombinant Human Epidermal Growth Factor for External Use 本品系由高效表达人表皮生长因子基因的大肠杆菌，经发酵、分离和高度纯化后冻干制成。含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。 1基本要求 生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 2制造 2.1工程菌菌种 2.1.1名称及来源 重组人表皮生长因子工程菌株系由带有人工合成人表皮生长因子基因的重组质粒转化的大肠杆菌菌株。 2.1.2种子批的建立 应符合“生物制品生产检定用菌毒种管理规程”的规定。 2.1.3菌种检定 主种子批和工作种子批的菌种应进行以下各项全面检定。 2.1. 3.1划种LB琼脂平板 应呈典型大肠杆菌集落形态，无其他杂菌生长。 2.1. 3.2染色镜检 应为典型的革兰阴性杆菌。 2.1. 3.3对抗生素的抗性 应与原始菌种相符。 2.1. 3.4电镜检查（工作种子批可免做） 应为典型大肠杆菌形态，无支原体、病毒样颗粒及其他微生物污染。 2.1. 3.5生化反应 应符合大肠杆菌生物学性状。 2.1. 3.6人表皮生长因子表达量 在摇床中培养，应不低于原始菌种的表达量。 2.1. 3.7质粒检查 该质粒的酶切图谱应与原始重组质粒相符。 2.1. 3.8 目的基因核苷酸序列检查（工作种子批可免做） 目的基因核苷酸序列应与批准序列相符。 2.2原液 2.2.1种子液制备 将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养，供发酵罐接种用。 2.2.2发酵用培养基 1
肝细胞生长因子及其受体c(一) 【关键词】肝细胞生长因子；受体；c 【摘要】肝细胞生长因子（HGF)是一种多肽生长因子，具有促进包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、造血细胞等多种类型细胞的生长、迁移和形态发生的作用.它还参与多种细胞的增殖、迁移,对各类肿瘤的侵袭转移有着重要的诱导作用.本文通过对近年来国外有关文献的回顾，希望能够为进一步探讨HGF及其受体在卵巢癌治疗中的具体意义提供新的思路. 【关键词】肝细胞生长因子；受体；cmet；卵巢肿瘤 1HGF及其受体的结构 肝细胞生长因子(HGF)〔1〕最早是1984年由日本的中村敏一教授从大鼠血浆中得到的，其结构实质是含728个氨基酸的肝素结合糖蛋白.它来自间质细胞，以旁分泌方式作用于邻近细胞，并与细胞表面的受体结合并激活酪氨酸激酶活性，具有较强的促有丝分裂、组织成形、诱导上皮细胞迁移、侵袭以及诱导血管生成等作用〔2〕.HGF的受体是原癌基因cmet编码的一种跨膜蛋白，称为Met，是由Mr为190000的前体蛋白分裂而得来，由Mr为50000的a链和Mr为145000的3链经二硫键相连而成的杂二聚体.Prat等发现某些癌细胞的Mr为190000Met的前体，缺乏裂解过程，不需连接配体就已有活性，因此就失去了HGF的生长控制.各种瘤细胞和cmet转化后的细胞都过度表达Met，对HGF的反应比正常细胞更敏感强烈. 2HGF及其受体的生物学作用 (1)启动肝再生实验证明，在众多细胞因子中，HGF是肝再生的启动信号，并在肝细胞增殖过程中起重要作用.(2)促进细胞分裂作用HGF在原代肝细胞的无血清培养中可刺激肝细胞DNA合成，1g/LHGF即可观察到生物活性，最大活性浓度5~10g/L.另有报道HGF对其他许多细胞也有刺激作用，例如能够刺激肾小管细胞、角化细胞、黑色素瘤等细胞的DNA合成.(3)细胞运动作用HGF具有类似散射因子的功能，在一些上皮细胞和内皮细胞培养体系中加入不同浓度，均可促进细胞扩散和迁移HGF具有促进包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、造血细胞等多种类型细胞的生长、迁移和形态发生的作用，还参与多种细胞的增殖、迁移和形态发生.(4)肿瘤坏死作用高浓度的HGF对某些癌及肉瘤细胞系有抑制作用和肿瘤坏死用，该作用机制尚不完全清楚.（5）cmet原癌基因的RNA表达存在于人类的某些上皮组织:如肝脏、肾脏、胎盘、消化道上皮等〔3〕.共聚焦激光扫描显微镜下证实，cmet基因蛋白表达位于腺样结构细胞的边缘.cmet编码的蛋白属于酪氨酸激酶生长因子的受体家族，在体外细胞恶性转化的过程中可以出现基因扩增、重排和过度表达.对于依赖外生的受体调节生长刺激的，进入细胞周期和分裂进程的正常细胞来说，这就意味着存在着一个调节细胞增生的平衡机制〔4〕.相比较而言，肿瘤细胞通过产生生长因子与受体获得一定水平的自主生长信号（自主分泌）.近年来，已有相关研究表明，与癌形成和发展有关的不同细胞类型之间出现异型信号(非自主分泌)，但目前的体内实验方法不足以说明这种复杂的关系〔4〕.在研究与cMet 蛋白的相关信号通过非自分泌机制促进转移中报告，利用转基因鼠移植模型将过度表达HGF 及受体cmet的肿瘤细胞移植后，直接评估异型信号对转移部位的作用〔5〕.在体内，非自主分泌信号与自主分泌进行的是条件不均衡的竞争.恶性肿瘤细胞的非内部生长因子对体内转移产生重大影响，提供了异型信号对肿瘤进展发挥作用的实验依据. 3HGF及其受体对癌细胞侵袭的影响机制 肿瘤的浸润和转移是一个非常复杂的病理过程，也是患者死亡的主要原因.大量的临床和实验研究表明，HGF和cMet在肿瘤的发生发展中具有重要作用.正常细胞有能力通过减少cmet 的表达控制其对HGF的反应；而在大部分肿瘤细胞中cmet为过表达的状态，并呈现高水平的自体磷酸化.一般来说，cmet的过表达是由于基因的扩增所致.在结，直肠癌、肝癌和脑胶质瘤中，cmet的表达与肿瘤的发生发展有着密切联系.Ivan和Webb等用激活的ras和ret基
细胞生物学实验报告 细胞原代培养 姓名： 学号： 班级： 专业： 同组成员： 一、实验原理
细胞培养是生物学和医学研究中最常用的手段之一，可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。同时也为以后传代培养创造条件。 原代培养的方法： 1、组织块法在平皿中用弯头剪把组织尽量剪碎，每个组织块小于1mm3大小。用Hanks 液洗涤2—3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。将组织块贴于培养瓶进行培养。 2、酶消化法将1mm3大小的组织块放入1个三角瓶内加入10—30ml的%的胰蛋白酶。370C磁棒搅拌消化20－30分钟。然后终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，离心800rpm 5—10分钟收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶培养。 取材注意事项： 取材要注意新鲜和保鲜。取材应严格无菌。取材和原代细胞制作时，要用锋利的器械，如手术刀或剃须刀片切碎组织，尽可能减少对细胞的机械损伤。要仔细去除所取材料上的血液（血块）、脂肪、坏死组织及结缔组织，切碎组织时应避免组织干燥，可在含少量培养液的器皿中进行。取材应注意组织类型、分化程度、年龄等，一般来讲，胚胎组织较成熟个体组织容易培养，分化低的较分化高的组织容易生长，肿瘤组织较正常组织容易培养。 二、实验目的 1、理解细胞原代培养原理 2、熟悉细胞原代培养方法与过程 3、了解细胞原代培养的应用 4、独立进行细胞原代培养操作 三、实验材料 手术小直剪刀、眼科直镊子、眼科弯镊子、玻璃平皿、培养瓶、试管、移液管、巴斯德吸管、废液缸、75%酒精棉球、酒精灯。 动物：9-12日龄的鸡胚蛋 四、实验步骤
易孚(重组人表皮生长因子凝胶) 【药品名称】 商品名称：易孚 通用名称：重组人表皮生长因子凝胶 英文名称：Recombinant Human Epidermal Growth Factor Gel 【成份】 重组人表皮生长因子。 【适应症】 本品适用于皮肤烧烫伤创面(浅Π度至深Ⅱ度烧烫伤创面)、残余创面、供皮区创面及慢性溃疡创面的治疗。 【用法用量】 常规清创后，用生理氯化钠溶液清洗创面，取本品适量，均匀涂于患处。需要包扎者，同时将本品均匀涂于适当大小的内层消毒纱布，覆盖于创面，常规包扎，一日一次或遵医嘱。推荐剂量为每lOOcm2创面使用本品10g(以凝胶重量计)。 【不良反应】 未见严重不良反应。 【禁忌】 对本品过敏者 【注意事项】 本品为无菌包装，用后请即旋紧管口，以防污染。本品无抗菌作用，但不会增加创面感染机会。对感染创面，在进行创面清创的前提下，可考虑联合使用抗菌药物控制感染。对于各种慢性创面，如溃疡、褥疮等，在应用本品前，应先行彻底清创去除坏死组织，有利于本品与
创面肉牙组织的充分接触，提高疗效。当本品的外观、性状发生改变，如出现霉变、变质等现象时，应禁止使用。 【特殊人群用药】 儿童注意事项： 无禁忌。 妊娠与哺乳期注意事项： 尚不明确。 老人注意事项： 无禁忌。 【药物相互作用】 本品遇酒精、碘酒等，可能会使EGF变性，而使活性降低。因此使用酒精、碘酒等消毒后，应再用生理氯化钠溶液清洗创面，然后使用本品。 【药理作用】 1.药理作用：本品为外用重组人表皮生长因子(rhEGF)。可促进动物皮肤创面组织修复过程中的DNA、RNA和羟脯氨酸的合成，加速创面肉芽组织的生成和上皮细胞的增殖，从而缩短创面的愈合时间。 2.毒理研究：(1)重复给药毒性：家兔背部破损皮肤涂抹本品(6g凝胶/次，每日1次，浓度200μg/g，相当于临床用药浓度的20倍)，连续36天，给药局部皮肤及各脏器均未见明显毒性反应。本品较长时间局部应用对愈合后创面的远期影响不清楚。 (2)遗传毒性和生殖毒性：尚无动物研究资料。(3)致癌性：研究文献提示，EGF有促进某些肿瘤细胞生长的作用，但也有一些动物和体外研究文献提示，EGF作为一种具有多种功能的细胞因子，可以抑制某些肿瘤细胞的生长。对于烧伤患者(尤其是较大面积烧伤时)局部较长时间使用本品的影响尚不清楚。临床药代动力学研究结果提示患者烧伤面积达5～10％时，
本版药典（三部）新增品种名单 预防类 ?23价肺炎球菌多糖疫苗 ?无细胞百白破b型流感嗜血杆菌联合疫苗 ?黄热减毒活疫苗 ?冻干人用狂犬病疫苗（人二倍体细胞） ?S a b i n株脊髓灰质炎灭活疫苗（V e r o细胞） ?口服I型I I I型脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞)治疗类 ?马破伤风免疫球蛋白F(a b')2 ?人凝血酶 ?人干扰素α2b阴道泡腾片 ?外用人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶 ?康柏西普眼用注射液 ?精蛋白人胰岛素混合注射液（30R) ?精蛋白人胰岛素混合注射液（50R) ?甘精胰岛素 ?甘精胰岛素注射液 ?赖脯胰岛素 ?赖脯胰岛素注射液
?治疗用卡介苗 体外诊断类 ?人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒（酶联免疫法） ?乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒1型核酸检测试剂盒 二部转三部品种 ?人胰岛素 ?人胰岛素注射液 ?精蛋白人胰岛素注射液 ?注射用人生长激素 本版药典（三部）采用生物制品通用名称与原通用名称对照
本版药典（三部）新增的生物制品通则/总论/通则和指导原则名单 一、新增的生物制品通则 ?生物制品通用名称命名原则 二、新增的总论 ?人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品总论 ?人用基因治疗制品总论 ?生物制品病毒安全性控制 ?螨变应原制品总论人用马免疫血清制品总论 三、新增的通则和指导原则 ?3128抗毒素/抗血清制品分子大小分布测定法
?3129单抗电荷变异体测定法 ?3130单抗N糖谱测定法 ?3208人血白蛋白铝残留量测定法（第二法） ?3303鼠源性病毒检査法（第二法） ?3307黄热减毒活疫苗猴体试验 ?3308禽源性病毒荧光定量P C R(Q-P C R)检查法 ?3407外源性D N A残留量测定法（第三法） ?3428人免疫球蛋白类制品I g A残留量测定法 ?3429免疫化学法 ?3503人用狂犬病疫苗效价测定法（第二法） ?3534S a b i n株脊髓灰质炎灭活疫苗效力试验 ?3535康柏西普生物学活性测定法 ?3601生物制品生产及检定用实验动物质量控制 ?3603重组胰蛋白酶 ?3650氢氧化铝佐剂 ?9401生物制品生物活性/效价测定方法验证指导原则?9402生物制品稳定性试验指导原则生物制品术语 本版药典（三部）未收载2015年版药典(三部）及增补本中的品种名单 治疗类 ?注射用重组链激酶
一、鸡胚成纤维细胞的体外培养 鸡胚成纤维细胞在病毒学研究中十分常用。孵化8－12d的鸡胚可用作培养的材料来源。 （一）实验材料 1. 鸡胚：孵化10d的受精蛋数个。孵化方法是将受精蛋放到38.5℃孵卵箱或恒温箱中，静置。每日翻动1—2次，以防止鸡胚粘连到蛋壳上影响发育。箱内湿度(40～70％)可通过在箱底放一盛水盘来维持。鸡胚的孵化期为2ld。孵化前，如遇蛋壳表面污物较多，可用刀片等器具刮除，不要用湿布擦拭，更不能用酒精棉球消毒或者用水洗蛋。孵育前可将受精蛋保存在10℃左右，保存期一般不超过10d。也有人将受精蛋保存在4℃冰箱中。 2. 消化液：含0.25％胰蛋白酶、青霉素100 1U／ml、链霉素100 μg/ml混合消化液。用Hanks 液或HEPES液配制。 3. 培养液：DMEM培养液，添加10％－20％的胎牛血清（FCS）、青霉素100 IU/ml、链霉素100 μg/mL。 4. 其它培养用品：手术器械、平皿、三角瓶或15ml血清瓶、离心管、100目不锈钢筛网、培养瓶或培养板、振荡水浴箱、离心机等。 （二）操作步骤 1)取孵化10d的鸡胚，分别用碘酒与酒精棉球擦拭消毒，晾干。用一已消毒金属器具将受 精蛋大头端击破，用镊子小心夹去破碎蛋壳，然后撕去气室外面的膜，暴露出尿囊绒膜及附着的血管。开口大小以受精蛋内容物不溢出为宜，但不宜太小。用镊子轻轻夹住鸡胚的颈部，小心取出鸡胚，放于无菌培养皿中，除去头部、四肢、内脏和皮肤。 2)胚体用Hanks液或生理盐水清洗3次，切成1－2 mm3的小块，然后转移到容积适中的 三角瓶或15ml血清瓶内。 3)加入适量消化液，一般每10个鸡胚加20 m1消化液，用胶塞密封瓶口。 4)在振荡水浴箱上37℃慢速搅拌5－10 min。加入少量血清钝化胰蛋白酶。然后通过100 目不锈钢筛网，制备细胞悬液，将细胞悬液转移到离心管中。 5)离心（800 rpm，10 min），弃上清液，将细胞沉淀用培养液洗2次。 6)加入培养液，用吸管吹打制成细胞悬液。用血球计数板计数细胞。 7)以0.2～1X06个细胞/ml的密度接种细胞。于37℃、5％CO2培养箱中培养。每2－3d换 液1次。待细胞汇合成片后，可行传代培养。 （三）结果 在倒置显微镜下观察，用8～12d龄鸡胚培养的细胞主要为具有长突起的梭形、星形或三角形的成纤维细胞。用I型和Ⅲ型胶原的抗体作免疫细胞化学分析，培养物以呈阳性反应的成纤维细胞为主。 （四）讨论 鸡胚成纤维细胞在普通培养液中具有生长优势，一般不需特殊处理，经几次传代后就可逐渐排除其它细胞，得到较纯的成纤维细胞。体外培养的胚胎细胞的形态与所取鸡胚的胚龄有关。若用体节前期的胚胎，培养的细胞不是典型的长的或星形的成纤维细胞，而为宽扁的细胞，这可能与胚胎细胞的分化状态有关。
中国组织工程研究 第20卷 第15期 2016–04–08出版 Chinese Journal of Tissue Engineering Research April 8, 2016 Vol.20, No.15 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 2255 ·综述· www. CRTER .org 苏钰涵，女，1986年生，内蒙古自治区人，汉族，医师，内蒙古医科大学在读硕士。 通讯作者：翁立新，硕士，教授，研究生导师，内蒙古医科大学病理教研室，内蒙古自治区呼和浩特市 010059；内蒙古医科大学附属医院病理科，内蒙古自治区呼和浩特市 010050 中图分类号:R318 文献标识码:A 文章编号:2095-4344 (2016)15-02255-10 稿件接受：2016-02-09 https://www.doczj.com/doc/e28752822.html, 成纤维细胞生长因子的信号通路 苏钰涵1 ，杜 华2 ，牛广明3 ，王 静4 ，翁立新1，2(1 内蒙古医科大学病理教研室，内蒙古自治区呼和浩特市 010059；内蒙古医 科大学附属医院，2病理科，3影像科，内蒙古自治区呼和浩特市 010050；4 内蒙古包头市第四医院ICU ，内蒙古自治区包头市 014030) 引用本文：苏钰涵，杜华，牛广明，王静，翁立新. 成纤维细胞生长因子的信号通路[J].中国组织工程研究，2016，20(15):2255-2264. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.15.018 ORCID: 0000-0002-2684-4178(翁立新) 文章快速阅读： 文题释义： 成纤维细胞生长因子：成纤维细胞生长因子可以由内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞分泌。它的作用是促进内皮细胞的游走和平滑肌细胞的增殖，不能使平滑肌细胞游走。能够促进新血管形成，修复损害的内皮细胞。成纤维细胞生长因子被认为是病灶形成促进因子，但从修复角度看它也有有利的一面。 成纤维细胞生长因子亚科：分泌的信号成纤维细胞生长因子基于生化功能、序列相似性和进化关系可以分为一些亚科：旁分泌的成纤维细胞生长因子的5亚科，内分泌的成纤维细胞生长因子的一个亚科，和细胞内成纤维细胞生长因子的一个亚科。 摘要 背景：在最早的胚胎发育阶段和器官形成期间，成纤维细胞生长因子家族成员的功能是维持祖细胞并介导祖细胞的生长、分化、存活和形态。成纤维细胞生长因子常在成熟的组织通过重新激活信号通路介导代谢功能、组织修复和再生。 目的：总结并讨论成纤维细胞生长因子信号通路对组织和器官的作用。 方法：由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI ：2010至2016年)和Medline 数据库(2000至2016年)，检索词分别为“成纤维细胞生长因子，信号通路”和“Fibroblast growth factor ，signaling pathway ”语言分别设定为中文和英文。全面阐述成纤维细胞生长因子的信号通路的研究进展。 结果与结论：①共纳入47篇文献；②哺乳动物成纤维细胞生长因子家族的信号是由18个分泌蛋白组成，这18个分泌蛋白与4个信号酪氨酸激酶成纤维细胞生长因子受体相互作用；③成纤维细胞生长因子配体与受体的相互作用是由蛋白质或辅助因子蛋白多糖和胞外结合蛋白来调节的；④活化的成纤维细胞生长因子受体使特定的酪氨酸残基磷酸化，调节与细胞质接头蛋白、RAS-MAPK 、PI3K-AKT 、磷脂酶C γ和STAT 细胞内信号通路的相互作用，4个结构相关的细胞内非信号的成纤维细胞生长因子相互作用来调节电压门控钠离子通道；⑤结果说明，成纤维细胞生长因子存在所有的组织和器官中，成纤维细胞生长因子信号通路异常与发育缺陷、损害对损伤的反应、导致代谢紊乱和癌症发病相关联。 关键词： 组织构建；组织工程；成纤维细胞生长因子；成纤维细胞生长因子受体；信号通路；Klotho 细胞；硫酸乙酰肝素蛋白多糖；成纤维细胞生长因子结合蛋白1；细胞外调节蛋白激酶；微小RNA ；肺动脉高压；原发性乳腺肿瘤；内蒙古自治区自然科学基金 主题词： 组织工程；成纤维细胞生长因子；肿瘤 基金资助： 内蒙古自治区自然科学基金(NJZY12151)
重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶和玻璃酸钠滴眼液对睑板腺异常相关干眼的效果对比分析 【摘要】目的：将重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶和玻璃酸钠滴眼液对睑板腺异常相关干眼的治疗效果进行对比分析，从而得出治疗的最佳方案。方法：本文采取的方法是将2013年4月至2014年9月期间来医院进行治疗的睑板腺异常相关干眼患者75例（75只眼）进行随机分组，第一组为采用重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶进行治疗的组（即观察组），第二组为采用玻璃酸钠滴眼液进行治疗的组（即对照组）。在患者治疗过程中将两组患者的治疗前后（治疗后采取20和40天）效果进行临床症状评分，此外，将泪膜破裂的时间、泪液分泌试验、角膜荧光染色进行评分，还有将睑板腺进行评分，然后将这些评分进行比较分析，最终统计治疗总的效果。结果：两组患者在治疗后40天的临床症状评分、泪膜破裂的时间以及角膜荧光染色的评分都明显高于治疗前和治疗后20天的评分（P=0.067）；且观察组的临床症状评分、泪膜破裂的时间以及角膜荧光染色的评分都高于对照组（P=0.045）。结论：采用重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶和玻璃酸钠滴眼液进行治疗都可以改善患者的临床症状，延长泪膜破裂的时间，修复角膜的损伤，但采用重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶的治疗效果明显优于采用玻璃酸钠滴眼液的治疗效果。总体而言，两者对睑板腺功能障碍的治疗效果都不太明显，需要配合其他药物进行治疗。 【关键词】重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶；玻璃酸钠滴眼液；睑板腺异常；干眼 干眼症是指任何原因造成的泪液质或量异常或动力学异常，导致泪膜稳定性下降，并伴有眼部不适和（或）眼表组织病变特征的多种疾病的总称。又称角结膜干燥症。常见之症状包括眼睛干涩、容易疲倦、眼痒、有异物感、痛灼热感、分泌物黏稠、怕风、畏光、对外界刺激很敏感；有时眼睛太干，基本泪液不足，反而刺激反射性泪液分泌，而造成常常流泪；较严重者眼睛会红肿、充血、角质化、角膜上皮破皮而有丝状物黏附，这种损伤日久则可造成角结膜病变，并会影响视力。临床上可以分为两种类型，即蒸发过强型和泪液分泌不足型[1]。睑板腺功能障碍（meibomain gland dysfunction，MGD），在油性皮肤及年老者中十