肠出血性大肠杆菌（EHEC）PCR检测试剂盒
PCR快速检测试剂盒 --快速微生物检测试剂盒
目前，国内食品卫生微生物检验的方法主要采用国家标准（GB/T）和行业标准（SN/T），该类标准是由传统的分离培养、镜检观察、生化鉴定等实验组成，一般的检测周期在6～8 天，要求检测步骤较多而且精度低，存在着检验周期偏长、工作量大等缺点。临床上对致病菌检测也需要快速得到检测结果，以免延误病情。
针对目前微生物检测的现状，天津生物芯片结合目前微生物研究领域的先进技术，成功开发了基于PCR技术的微生物PCR快速检测试剂盒。样品经过12-24小时增菌后即可进行检测。PCR检测试剂盒中包含DNA提取试剂和检测所需的全部试剂，客户仅需准备好样品即可完成检测。增菌后从收集细菌到检测完成不超过3.5小时，大大缩短客户的检测周期。每种细菌检测试剂盒均有实时荧光定量PCR和普通PCR两种，客户可以根据实验室配置进行选用。检测敏感度可达1-10cfu/ml。
试剂盒组成：
核酸提取液1ml/支 2支
PCR反应液500μl /支 1支
Taq酶 12μl /支 1支
阳性对照品 100μl /支1支
阴性对照品100μl /支1支
【产品名称】
通用名称：肠出血性大肠杆菌（EHEC）核酸扩增（PCR）检测试剂盒-aap
英文名称：Nucleic acid amplification (PCR) diagnostic kit for EHEC aap
【包装规格】
20次/盒
【预期用途】
用于食品、水样、临床样品以及环境样品中的肠出血性大肠杆菌（EHEC）aap的检测。
【检验原理】
试剂盒使用肠出血性大肠杆菌（EHEC）的aap特异引物，可与样本中的肠出血性大肠杆菌（EHEC）基因组的aap基因相应靶位点特异性结合，利用PCR反应达到对肠出血性大肠杆菌（EHEC）aap基因快速检测的目的。试剂盒具有特异性强的特点，可以将肠出血性大肠杆菌（EHEC）aap特异地区分出来。
【主要组成部分】
肠出血性大肠杆菌组份规格数量贮存温度
（EHEC ）核酸扩增（PCR ）检测试剂盒
-aap
核酸提取液
1ml/支 2支 -20℃
大肠杆菌EHEC PCR 反应液-aap 450μl /支 1支 Taq 酶
12μl /支 1支 大肠杆菌EHEC 阳性对照品-aap 15μl /支 1支 阴性对照品
100μl /支
1支
【储藏条件及有效期】
-20℃保存，避免反复冻融，有效期一年。 【样品处理】
（1）取培养后的菌液约1.5ml ，12000rpm 离心2min ，弃上清。
（2）加入200μl 无菌水，充分混匀，12000rpm 离心2min ，弃上清。
（3）加入80μl 裂解液，用移液器吹吸混匀，50℃水浴1小时，100 ℃水浴15分钟，冰上放置
10分钟后12000rpm 离心3min 。 （4）取上清液用于PCR 检测。 【使用方法】
1. 试剂配制（试剂准备区）
从试剂盒中取出PCR 反应液在室温融化，将PCR 反应液充分震荡混匀，所有试剂在使用前2000rpm 离心10s 。设所需要的管数n （n=样本数+1管阴性对照品），每个测试反应体系试剂配置如下表。计算所需要的n 管反应的各试剂的使用量，加入至适当体积的无菌离心管中，充分混合均匀，分装至无菌PCR 反应管中，每管19μl 。
PCR 反应液 Taq 酶 每个反应体系试剂用量
18.8μl
0.2μl
2. PCR 扩增（扩增和产物分析区）
将样本、阴性对照品使用前恢复至室温，2000rpm 离心10s 。向每个PCR 反应管中分别加入样本、阴性对照品各1μl ，震荡混匀，于2000rpm 离心10s 。将PCR 管放入PCR 仪中，使用以下程序进行扩增反应，整个扩增反应约需2小时‘
3. 结果判断（扩增和产物分析区）
从PCR 管中取出2μl PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。在紫外灯下，阴性对照品没有任何条带。大肠杆菌EHEC 阳性对照品-aap 具有大小为356bp 的条带。当被检样品经电泳检测出现356bp 大小的条带时则属于肠出血性大肠杆菌（EHEC ）-aap 阳性；当未出现条带或所出现的条带大小与阳性对照品的条带大小不一致时均视为阴性结果。 【注意事项】
1. 本试剂盒不做临床诊断。
2. 实验室管理应严格按照PCR 基因扩增实验室的管理规范，试验人员必须进行专业培
训，实验过程中严格分区进行（试剂准备区、样本制备区、扩增和产物分析区），实验操作的每个阶段使用专用的仪器和设备，各区用品不能交叉使用。
3. 样本准备和试剂准备阶段应使用生物安全柜，实验过程中穿工作服，带一次性手套，
使用自卸管移液器。
4. 对每次实验进行质量控制。
5. 试剂使用前要完全解冻，并混合均匀，但应避免反复冻融。
6. 样本制备区所用过的吸头请打入盛有消毒剂的容器，并与废弃物一起灭菌后方可丢
弃。
7. 实验完毕用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器。 8. 所有检测样品应视为具有传染性物质，操作和处理均需符合相关法规要求：卫生部《微
生物生物医学实验室生物安全通用准则》和《医疗废物管理条例》。
肠出血性大肠杆菌（EHEC）PCR检测试剂盒 PCR快速检测试剂盒 --快速微生物检测试剂盒 目前，国内食品卫生微生物检验的方法主要采用国家标准（GB/T）和行业标准（SN/T），该类标准是由传统的分离培养、镜检观察、生化鉴定等实验组成，一般的检测周期在6～8 天，要求检测步骤较多而且精度低，存在着检验周期偏长、工作量大等缺点。临床上对致病菌检测也需要快速得到检测结果，以免延误病情。 针对目前微生物检测的现状，天津生物芯片结合目前微生物研究领域的先进技术，成功开发了基于PCR技术的微生物PCR快速检测试剂盒。样品经过12-24小时增菌后即可进行检测。PCR检测试剂盒中包含DNA提取试剂和检测所需的全部试剂，客户仅需准备好样品即可完成检测。增菌后从收集细菌到检测完成不超过3.5小时，大大缩短客户的检测周期。每种细菌检测试剂盒均有实时荧光定量PCR和普通PCR两种，客户可以根据实验室配置进行选用。检测敏感度可达1-10cfu/ml。 试剂盒组成： 核酸提取液1ml/支 2支 PCR反应液500μl /支 1支 Taq酶 12μl /支 1支 阳性对照品 100μl /支1支 阴性对照品100μl /支1支 【产品名称】 通用名称：肠出血性大肠杆菌（EHEC）核酸扩增（PCR）检测试剂盒-aap 英文名称：Nucleic acid amplification (PCR) diagnostic kit for EHEC aap 【包装规格】 20次/盒 【预期用途】 用于食品、水样、临床样品以及环境样品中的肠出血性大肠杆菌（EHEC）aap的检测。 【检验原理】 试剂盒使用肠出血性大肠杆菌（EHEC）的aap特异引物，可与样本中的肠出血性大肠杆菌（EHEC）基因组的aap基因相应靶位点特异性结合，利用PCR反应达到对肠出血性大肠杆菌（EHEC）aap基因快速检测的目的。试剂盒具有特异性强的特点，可以将肠出血性大肠杆菌（EHEC）aap特异地区分出来。 【主要组成部分】 肠出血性大肠杆菌组份规格数量贮存温度
质粒抽提 一、溶液及培养基配制： 1、LB液体培养基 （1）配方: 酵母提取物（Yeast extract）5g/L 胰蛋白胨（Tryptone）10g/L （2）配制： A、称量：称取培养基各成分所需量，置于烧杯中。 B、溶化：加入所需水量2/3的蒸馏水于锥形瓶中，搅拌使药品全部溶化。 C、定容。 D、加塞、包扎。 F、高压灭菌121 C, 30min ,灭菌后室温保存备用。若要分装需要在超净台内。 G、培养基完全溶解，降至室温后，加氨苄霉素（AMP ）。先将AMP用三蒸水配制为 100mg/ml母液，而后每1ml母液加至1000ml培养基。（可以多配制一些，分装为1ml/管）2、LB固体培养基 （1）配方: 酵母提取物(Yeast extract)5g/L 氯化钠（NaCl）5g/L 胰蛋白胨（Tryptone）10g/L 氨苄青霉素溶液100^g/ml （终浓度）（即100mg溶于1ml超纯水或生理 盐水或PBS，再加入1000ml培养基） 琼脂粉15g/L （2）配制： A、称量：称取培养基各成分所需量，置于烧杯中。 B、溶化：加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中，搅拌使药品全部溶化。 C、5mol/L NaOH 溶液调pH 到7.4。 D、定容。 E、分装、加塞、包扎。 F、高压灭菌121 C, 30min。 G、火菌后，将融化的LB固体培养基置与55 C的水浴中（或室温），待培养基温度降到55 C时（手可触摸）加入抗生素，（免温度过高导致抗生素失效），并充分摇匀。 （3）倒板： 一般20ml倒1块板，培养基倒入培养皿后，打开盖子，水分晾干后盖上盖子并用封口膜封口，4 C保存备用，使用前提前拿出，防止水蒸气滴入板中。 首要检查是否有足够的固体和液体LB培养基，基本上每个质粒需要一块固体培养基，小摇 的2ml和大摇的250ml LB培养基。小摇的可以在一个50ml离心管中预备着，每次直接取 用。转化所需L形玻璃棒需确认已灭菌摇菌器申请，张评浒老师，王雪师姐； 注意：考虑到多种东西需要灭菌，可以在转化之前或者小摇大摇那天一起灭菌。所有需要提前灭菌的东西有：足量液体LB培养基灭菌后加入AMP蓝黄白枪头至少个一盒，备用； 1.5ml doff 管；Beckman离心机专用离心管；锡箔纸；250ml锥形瓶，500或者1000ml锥形瓶；电动移液器所用移液管（可以考虑用5ml移液枪，则先灭菌5ml枪头）；超纯水和TE
一、大肠菌群是指：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。 二、大肠杆菌是大肠菌群众多细菌的一个种类而已。大肠杆菌（E. coli）为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。 三、致泻大肠埃希氏菌生物学特性 大肠埃希氏菌更习惯称为大肠杆菌，分类于肠杆菌科，归属于埃希氏菌属，统称为致泻性大肠杆菌，一般包括五种：即肠毒素性大肠杆菌（ETEC）、致病性大肠杆菌（EPEC）、出血性大肠杆菌（EHEC）、侵袭性大肠杆菌（EIEC）和粘附性大肠杆菌（EAEC）。 大肠埃希氏菌为两端钝圆的短小杆菌，一般大小约0.5μ-0.8μm*1.0μm-3.0μm,因生长条件不同，个别菌体可呈近似球状或长丝状。此菌多单独存在或成双，但不呈长链状排列。约有50%左右的菌株具有周生鞭毛而能运动，但多数菌体只有1-4根，一般不超过10根，故菌体动力弱；多数菌株生长有比鞭毛细、短、直且数量多的菌毛，有的菌株具有荚膜或微荚膜；不形成芽胞，对普通碱性染料着色良好，革兰氏染色阴性。 此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能生长，生长温度范围为15-46℃。在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态：光滑型、粗糙型、粘液型。大肠埃希氏菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生长pH为6.8-8.0，所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低于6.0或高于8.0则生长缓慢。 大肠埃希氏菌发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气，分解蔗糖因菌株而异，录素酶试验阴性，IMVi试验++--，有些菌株如碱性异型菌群，微产碱，不产气，无动力，易与志贺菌混淆。大肠埃希氏菌的抗原构造主要由菌体抗原(O)，鞭毛抗原(H)和荚膜抗原(K)三部分组成。现巳知有171个O抗原、99个K抗原和56个H抗原。 此菌对理化因素的抵抗力，在无芽胞菌中是最强的一种，在室温可存活数周，在土壤、水中存活数月，耐寒力强，但是在30分钟内快速冷冻，将37℃降至4℃的过程，可杀死此菌。加热60℃，30分钟，此菌可灭活。此菌对青霉素有中等抵抗力，对一般消毒剂都比较敏感对漂白粉，酚、甲醛等较敏感，水中1ppb氯可杀死此菌。此菌耐胆盐，在一定程度上能抵抗煌绿等染料的抑菌作用 三、肠致泻性大肠埃希菌： 大肠杆菌是人和动物肠道中的正常菌群，一般对人无害。本菌为革兰阴性的短杆菌，其抗原结构有3种，即菌体抗原(O抗原)、包膜抗原(K抗原)和鞭毛抗原(H抗原)。O抗原是血清分型的基础，目前已发现有170多种，其中一些特殊的血清型具有病原性，能引起人类腹泻，故称为致泻性大肠杆菌，而由其引起之肠炎称致泻性大肠杆菌肠炎。世界各地广泛存在本菌感染，婴儿腹泻中检出率较高，在成人中亦可呈散在或暴发流行。临床表现为旅游者腹泻或食物中毒。新生儿病房及托儿机构可引起交叉感染而发生流行。 大肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌，一般认为是非致病菌。但一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症，它是一种普通的原核生物，根据不同的生物学特性、发病机制、临床特征、流行病学特征、O 抗原血清型及细菌的毒力测定可将致泻性大肠杆菌分为5类：致病性大肠杆菌(EPEC)、产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)、侵袭性大肠杆菌(EIEC)、出血性大肠杆菌(EHEC)和肠集聚粘附性大
肠出血性大肠杆菌的简介与预防 本文编者中山健民医院 肠出血性大肠杆菌（EHEC）是大肠杆菌的一个变种，引起的疾病腹部绞痛和腹泻，一些病例可能发展为血性腹泻，还可能出现发烧和呕吐，潜伏期3至8天，平均为3至4天，大多数病人10天内康复，但是有少数病人的染病可能发展为溶血尿毒综合症威胁患者生命。它主要通过食用被污染的食物传染给人类，这些食物如生的或烹调不彻底的绞碎肉制品和原料奶。它作为一个公共卫生问题的重要性得到承认是在1982年继美利坚合众国的一次该病暴发之后。 一、生长环境 1、肠出血性大肠杆菌产生的毒素称为志贺样毒素或类志贺毒素，这是因为它们与志贺氏痢疾杆菌产生的毒素相似。肠出血性大肠杆菌可在7℃-50℃的温度中生长，其最佳生长温度为37℃。 2、一些出血性大肠杆菌可在pH值达到4.4和最低水活度（Aw）为0.95的食物中生长。通过烹调食物，使食物的所有部分至少达到70℃以上时可杀灭该菌。 3、O157:H7大肠杆菌是与公共卫生有关的最重要的出血性大肠杆菌的血清类型；然而在散在病例和暴发中也经常涉及其它血清类型。 二、引起疾病 肠出血性大肠杆菌引起的疾病症状包括腹部绞痛和腹泻，一些病例可能发展为血性腹泻（出血性大肠炎）。还可能出现发烧和呕吐。2、潜伏期3至8天，平均为3至4天。大多数病人10天内康复，但是有少数病人（特别是幼儿和老年人）的染病可能发展为威胁生命的疾病，例如溶血尿毒综合症（HUS）。溶血尿毒综合症的特点是急性肾衰竭、溶血性贫血和血小板减少。3、据估计10%的肠出血性大肠杆菌感染者可发展为溶血尿毒综合症，病例死亡率为3%至5%。总体来说溶血尿毒综合症是幼儿急性肾衰竭的最通常原因。25%的溶血尿毒综合症病人可发生神经并发症（例如癫痫发作、中风和昏迷）在大约50%的幸存者中发生通常是轻型的慢性肾病。4、不同年龄组的肠出血性大肠杆菌感染的发病不尽相同，所报病例的最高发病率发生在15岁以下的儿童中（美利坚合众国每10万病例中占0.7），63%至85%的病例是由于通过食物感染病菌。肠出血性大肠杆菌发展为溶血尿毒综合症的百分比在散在病例（3%-7%）和与暴发相关的病例（20%或更多）之间有所不同。5、从流行病学的角度来看，偶然暴发一般存在有散在病例的背景。一些暴发涉及大量病例，例如1996年日本发生的情况，该次暴发与学校午餐中食用污染的萝卜缨有关，造成9451人发病。有关发展中国家这一情况的数据有限，因为没有对这种病菌进行常规监测。 三、感染源头 大多数现有信息均关系到O157:H7血清型，因为从生物化学方面它容易与其它大肠杆菌菌株相区别，这一病菌的贮主看来主要是家畜和其它反刍动物，例如骆驼。它主要通过食用污染的食物，例如未经烹调或烹煮不透的绞碎肉制品和原料奶向人类传播。2、受粪便污染的水和其它食物以及食物制备期间的交叉污染（与牛肉和其它肉制品、受污染的板面和厨房用具）也将导致感染。涉及O157:H7大肠杆菌暴发的食物包括未煎透的汉堡包、风干肠、未经高温消毒的新鲜苹果酒、酸奶、奶酪和牛奶。3、越来越多的暴发与食用水果和蔬菜（芽苗菜、生菜、凉拌卷心菜、色拉）有关，污染可能是由于种植或处理期间的某一阶段接触到家畜或野生动物的粪便。也从水源（池塘、溪水）、井和水槽中分离出肠出血性大肠杆菌，
大肠杆菌内毒素酶联免疫分析试剂盒使用方法 检测范围：96T 0.03Eu/L – 0.8Eu/L 使用目的： 本试剂盒用于测定大肠杆菌样本中内毒素含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌内毒素水平。用纯化的大肠杆菌内毒素抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内毒素，再与HRP标记的内毒素抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内毒素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大肠杆菌内毒素浓度。 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。
肠出血性大肠杆菌 肠出血性大肠杆菌（enterohemorrhage E．Coli，EHEC）是大肠杆菌的一个亚型，EHEC分为157、26、111血清型，主要致病菌株为O157∶H7，可引起感染性腹泻，因能引起人类的出血性肠炎而得名。在1982年一次出血性结肠炎流行中被分离出。 一、生物学特性 大肠杆菌是人和动物肠道中的正常菌群，一般对人无害。它有三种抗原结构，即菌体抗原（又叫O抗原）、包膜抗原（又叫K抗原）和鞭毛抗原（又叫H抗原）。 O抗原是对大肠杆菌进行分型的基础，目前已发现有170多种。其中一些特殊的血清型具有致病性，可引起人类感染性腹泻。引起人类感染性腹泻的大肠杆菌又可被分为5类，即肠致病性大肠杆菌、肠产毒性大肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌、肠聚集性大肠杆菌和肠出血性大肠杆菌。肠出血性大肠杆菌因能引起人类的出血性肠炎而得名。EHEC包括几种血清型，分为157、26、111。分离出的主要致病菌株为O157∶H7。还包括O26H11、O111及无动力的O157菌株O157NM等。目前不断发现其他型菌株与出血性肠炎的关系。 EHEC-O157H7为格兰氏染色阴性的、有动力、两端钝圆的短杆菌。没有芽孢、有周鞭毛，大多数菌株有荚膜。它对热敏感，最适生长温度为37℃，30-42℃时在肉汤中也生长良好，55℃经60分钟可有部分存活，在75℃水中1分钟可被杀死。迟缓发酵山梨醇-麦康凯(SMAC)培养基可作为对O157∶H7之筛选培养基。在SMAC培养基上，O157∶H7菌落无色，而发酵菌株呈粉红色，但有半数EPEC菌株有类似O157∶H7之特性，应注意EPEC与EHEC 之鉴别。大肠埃希杆菌O157∶H7抵抗力较强，耐酸耐低温。在自然界的水中可存活几周甚至几个月，在冰箱内则可长期生存。在酸性果汁（PH为2）中甚至可存活几十天。对氯敏感，在余氯为1mg/l的水中可被杀死。O157∶H7具有含60MD质粒的纤毛，此纤毛能与Henle407细胞粘附。EHEC能产生大量类志贺样毒素(Shiga-Like toxin，简称SLT)。SLT有抗原性，可被志
大肠埃希菌 1.概况：大肠埃希菌是肠道中重要的正常菌群，婴儿出生数小时后就进入肠道中并终生伴随，能为宿主提供一些营养作用的合成代谢产物，宿主免疫能力下降或细菌侵入肠道外组织或器官，即可成为条件致病菌，引起肠外感染，以化脓性感染和泌尿道感染最为常见，某些血清型大肠埃希菌具有致病性，能导致人类腹泻。 2.形态：中等大小的革兰阴性杆菌无芽孢，多数菌株有周身鞭毛，能运动；有菌毛包括普通菌毛和性菌毛 3.体内分布：大肠杆菌在人和动物的肠道内，大多数于正常条件下是不致病的共栖菌，在特定条件下（如侵入肠外组织或器官）可致病。但少数大肠杆菌与人和动物的大肠杆菌病密切相关，它们是病原性大肠杆菌，正常情况下极少存在于健康机体。 4.培养：兼性厌氧菌，营养要求不高，在普通的琼脂平板37℃培养24小时后，埃希菌形成圆形凸起灰白色S型菌落。在液体培养基中均匀浑浊的生长。 5.生化反应：能发酵葡萄糖等多种糖类，产酸并产气，绝大多数菌株能发酵乳糖，可与沙门菌，志贺菌等区别。吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC试验）为++--，IMViC试验为此结果，可判断为典型的大肠埃希菌，表明被检物已被粪便污染，有传播肠道传染病的危险 6.抗原构造：大肠杆菌抗原主要有O、K和H三种，已确定的大肠杆菌菌体（O）抗原有173种，表面（K）抗原有80种，鞭毛（H）抗原有56种。O抗原凝聚相对较慢，呈颗粒状。H抗原刺激机体主要产生IgG类抗体，H抗原的凝集出现
较快，呈絮状。K抗原位于O抗原外层，为多糖，与细菌侵袭力有关。 7.生物学特性：本属细菌对干燥、腐败、日光等因素具有一定的抵抗力，在外界条件下可以生存数周或数月。对化学消毒剂的抵抗力不强，一般常用消毒剂和消毒方法均能达到消毒目的。通常情况下，对多种抗菌药物敏感。但由于长期滥用抗生素，对常用抗生素耐药现象普遍，不仅影响该病防制效果，而且亦成为公共卫生关注的问题。 8.致病物质 定植因子：又称黏附素（adhesin），可与黏膜表面细胞的特异性受体相结合而定植于黏膜，这是大肠杆菌引起的大多数疾病的先决条件。 外毒素：大肠杆菌可产生外毒素，最为人所知的是ETEC产生的由质粒编码的不耐热肠毒素（LT）和耐热肠毒素（ST）。LT有抗原性，分子量大，65℃经30min 即被灭活，可激活肠毛细血管上皮细胞的腺苷环化酶，增加环腺苷酸（cAMP）产生，使肠黏膜细胞分泌亢进，发生腹泻和脱水；ST无抗原性，分子量小，100℃加热30min而不失活，可激活回肠上皮细胞刷状缘绒毛上的颗粒性的鸟苷环化酶，增加环鸟苷酸（cGMP）产生，同样引起分泌性腹泻。 K抗原：具有吞噬作用 9.肠道外感染： 败血症：由大肠埃希菌尿道和肠道感染引起的。 新生儿脑膜炎：大肠埃希菌和B组链球菌是婴儿中枢神经系统感染的主要致病菌，约75%大肠埃希菌新生儿脑膜炎分离株具有K1荚膜抗原
【产品名称】 通用名称：大肠杆菌O157:H7 PCR 检测试剂盒 英文名称：PCRdiagnostic kit for E. coli O157:H7 DNA 【使用方向】 大肠杆菌O157:H7 PCR 检测试剂盒是快速准确的定性检测水中肠杆菌O157:H7数量的试剂盒，天津生物芯片基于PCR 联合酶联免疫检测扩增后样品的原理，开发了检验灵敏度高的产品，样品中细菌浓度达103cfu/ml 就可是实现直接检验。PCR 过程中，一段特殊的DNA 片段被扩增然后通过和标记生物素的探针杂交来检测。通过底物酶的培养后，样品的结果可以通过肉眼判别或者酶标仪来读取。本试剂盒使用大肠杆菌O157:H7的特异引物，可与样本中的大肠杆菌O157:H7基因组的相应靶位点特异性结合，利用PCR 反应达到对大肠杆菌O157:H7快速检测的目的。试剂盒具有特异性强的特点，可以将大肠杆菌O157:H7从其它细菌中特异地区分出来。 试剂盒使用大肠杆菌O157:H7的O 抗原特异引物和H 抗原特异引物，可与样本中的大肠杆菌O157:H7基因组的相应靶位点特异性结合，利用PCR 反应达到对大肠杆菌O157:H7快速检测的目的。试剂盒具有特异性强的特点，可以将大肠杆菌O157:H7从其它大肠杆菌O 血清型中区分出来。stx1和stx2是O157:H7的毒力基因，是判断菌株致病力强度的重要因素，试剂盒使用了stx1及stx2基因的特异引物检测被测菌是否具有产生毒素的能力。 大肠杆菌O157:H7 PCR 检测试剂盒用于食品、饮用水、临床样品以及环境样品中的大肠杆菌O157:H7的检测。试剂盒可以同时检测大肠杆菌O157:H7的O 抗原、H 抗原，以及毒素基因stx1和stx2，共计4个靶基因。 【食品中致病菌实时PCR 检测所用引用和探针序列】 【储藏条件及有效期】 -20℃保存，避免反复冻融，有效期一年。 【样品处理】
疾病名：肠侵袭性大肠埃希杆菌感染 英文名：enteroinvasive escherichia coli infection 缩写： 别名：enteroinvasive escherichia coli enteritis；肠侵袭性埃希大肠杆菌感染；肠侵袭性埃希氏大肠杆菌感染；侵袭性大肠杆菌肠炎 ICD号：A48.8 分类：感染内科 概述：肠侵袭性大肠埃希杆菌(enteroinvasive E.coli，EIEC)首先于1967年日本报告自患痢疾样腹泻的大儿童和成人中发现，常误为菌痢。 流行病学：主要在大儿童及成人中致病。新生儿对此菌易感性差。至今未有在小婴儿中暴发的报道。曾有在学校、部队、社团及医院内流行的情况，但较多为散发病例。 病因：由EIEC引起的肠道传染病。EIEC是1967年从“痢疾”病人大便中分离获得的一组致腹泻大肠埃希杆菌。EIEC与志贺菌有类似的生化特性，无动力，对乳糖不发酵或发酵缓慢，有共同抗原，均为侵袭性致病菌，也称痢疾样大肠埃希杆菌，可侵入上皮细胞，并在其中生长繁殖，引起炎性反应。要注意对两者进行鉴别，鉴别培养基有枸橼酸盐培养基、醋酸钠培养基。常见之O血清型有：O28、O29、O32、O112、O124、 O136、O143、O144、O152、O164、O167等。EIEC不产生肠毒素，主要侵犯结肠，形成肠壁溃疡。致病毒力强，只要10～100个细菌即可发病。污染水和食物可引起暴发流行，也可因接触传播，形成散发病例。成人、儿童均可发病。 发病机制：EIEC侵袭肠黏膜上皮细胞，细菌死亡后释放出内毒素，破坏细胞形成炎症和溃疡，引起腹泻。临床较少见，主要侵犯较年长儿童和成人。临床表现类似菌痢。
肠出血性大肠杆菌（EHEC）是近年来新发现的危害严重的肠道致病菌。自1982年美国首次发现因该致病菌引起的食物中毒以来，肠出血性大肠杆菌O157:H7疫情开始逐渐扩散和蔓延，相继在英国、加拿大、日本等多个国家引起腹泻暴发和流行。我国自1997年在一定范围内开展监测工作以来，已陆续有十余个省份从市售食品、进口食品、家畜家禽、腹泻病患者等分离出肠出血性大肠杆菌O157:H7，特别是1999年我国部分地区发生了肠出血性大肠杆菌O157:H7感染性腹泻的暴发，表明肠出血性大肠杆菌O157:H7感染性腹泻已成为威胁人群健康的重要公共卫生问题。为确保早期发现、及时报告疫情，以迅速有效控制疫情，制定此监测方案。 一、监测目的 1．早期发现疫情； 2．动态观察O157:H7大肠杆菌的分布特征及疾病流行趋势； 3．评价各项干预措施的实施效果，为制定有效的防治对策提供依据。 二、监测内容与方法 （一）病例定义 1.疑似病例 具有以下表现之一者即为疑似病例： 1.1鲜血便或鲜血样便（血便相混）的腹泻病例； 1.2腹泻若干天后继发以少尿或无尿为先驱症状的急性肾功能衰竭（附件4）的病例。 2.确诊病例 疑似病例或其他腹泻病例，具有以下条件之一者即为确诊病例： 2.1用免疫磁珠法从粪便标本中检测出产志贺毒素的肠出血性大肠杆菌O157:H7（附件2）；或恢复期血清O157 脂多糖（LPS）IgG抗体呈4倍升高；或经蛋白印记试验证实血清标本有与O157 LPS、或肠出血性大肠杆菌溶血素、或志贺毒素分子量一致的特异性抗体（附件3）； 2.2在流行区内，经省级专家组确认，与确诊病例流行病学密切相关，并排除其它疾病的疑似病例，为临床符合病例； 2.3腹泻病例的粪便中分离出不产志贺毒素1或志贺毒素2及其变种的肠出血性大肠杆菌O157:H7，亦为确诊病例（不产毒）。 3暴发疫情 3.1在1个县（区）或相毗邻的县（区）境内，2周内发现不少于10例的具有显著的流行病学联系，且无其它原因可解释的疑似病例； 3.2在1个县（区）或相毗邻的县（区）境内，2周内发现不少于3例的确诊病例。 （二）监测内容与方法 1.监测内容 各省、自治区、直辖市根据具体情况，针对疫情的流行特征开展以病例监测为主、疑似病例搜索为重点的病例监测工作，必要时开展对外环境、动物宿主（家畜、家禽）及食品的专题调查。在确认发生暴发或流行的疫区，或疫情可能波及的地区除重点开展病例监测外，可有针对性地开展对外环境、传染源及传播途径等的综合性监测。 2.监测范围与监测点的确定
大肠杆菌内毒素试剂盒使用说明书 检测范围：96T 0.03Eu/L – 0.8Eu/L 使用目的： 本试剂盒用于测定大肠杆菌样本中内毒素(endotoxin)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌内毒素(endotoxin)水平。用纯化的大肠杆菌内毒素(endotoxin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内毒素(endotoxin)，再与HRP标记的内毒素(endotoxin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内毒素(endotoxin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大肠杆菌内毒素(endotoxin)浓度。 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
全国肠出血性大肠杆菌O157:H7感染性腹泻应急处理预案 （试行）2005-8-15 一、前言肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7感染性腹泻是近年来新发现的危害严重的肠道传染病。该病可引起腹泻、出血性肠炎，继发溶血性尿毒综合症(HUS)、血栓性血小板减少性紫癜(TTP)等。HUS 和TTP的病情凶险，病死率高。自1982年美国首次发现该病以来，在世界上许多国家相继发生了暴发和流行，其流行已成为全球性的公共卫生问题之一。近几年，我国已陆续有十多个省份在食品、家禽、家畜、昆虫、腹泻病患者中检出该致病菌，存在着疫情暴发、流行的潜在威胁。为了有效控制肠出血性大肠杆菌O157:H7感染性腹泻的突发疫情，保障广大人民群众的生命与健康，维护社会稳定和经济发展，特制定本预案。 二、目的 确保一旦发生疫情，及时采取有效措施，迅速控制和扑灭疫情。 三、预案启动条件 凡发生肠出血性大肠杆菌O157:H7感染性腹泻暴发疫情，即启动本预案。对于既往无疫情的地区发生首例肠出血性大肠杆菌O157:H7确诊病例时，可按照本预案执行。 有关暴发疫情判定和病人诊断标准，参照《全国肠出血性大肠杆菌O157:H7感染性腹泻监测方案（试行）》执行，即： 1．疑似病例标准 （1）有鲜血便、低烧或不发烧、痉挛性腹痛的腹泻病例； （2）腹泻若干天后继发少尿或无尿等表现的急性肾功能衰竭病例；（3）腹泻病人粪便标本O157抗原免疫胶体金方法检测阳性者。符合以上条件之一者，即为疑似病例，其中（3）为新增标准。 2．确诊病例标准 疑似病例或其他腹泻病患者，具有以下条件之一者即为确诊病例：（1）从粪便标本中检出产生志贺毒素的肠出血性大肠杆菌O157：H7；或恢复期血清O157脂多糖（LPS）IgG抗体呈4倍升高；或经蛋白印记试验证实血清标本有与O157 LPS、或肠出血性大肠杆菌溶血素、或志贺毒素分子量一致的特异性抗体； （2）在流行区内，经省级专家组确认，与确诊病例流行病学密切
五种致泻性大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒 研发背景 大部分的大肠杆菌是人或动物倡导的共生菌，但其中也有部分菌株可引起腹泻等疾病。致泻大肠杆菌不但可引起传染性疾病而且可引起食源性疾病的暴发。根据发病机制、临床特征、流行病学特征、O抗原血清及细菌的毒力测定，可将致泻大肠杆菌分为5类：致病性大肠杆菌（EPEC）、产毒性大肠杆菌（ETEC）、侵袭性大肠杆菌（EIEC）、粘附性大肠杆菌（EAEC）、出血性大肠杆菌（EHEC）。目前针对致泻大肠杆菌的常规实验室检测方法仍然较为薄弱，需要研究快速、简便、准确的分子生物学方法。 【检验原理】 五种致泻性大肠杆菌（EPEC、EHEC、EAEC、EIEC、ETEC）共含有11种毒力基因，针对这11种毒力基因，天津生物芯片试剂盒使用11对特异引物，与样本中基因组的相应靶位点特异性结合，PCR反应后，不同类型的样本产生不同的扩增片段，从而达到对五种致泻性大肠杆菌快速分型检测的目的。 【使用方法】 1.试剂配制（试剂准备区） 从试剂盒中取出PCR反应液在室温融化，将PCR反应液充分震荡混匀，所有试剂在使用前2000rpm离心10s。设所需要的管数n（n=样本数+1管阴性对照品），每个测试反应体系试剂配置如下表。计算所需要的n管反应的各试剂的使用量，加入至适当体积的无菌离心管中，充分混合均匀，分装至无菌PCR反应管中，每管24μl。 2.PCR扩增（扩增和产物分析区）
将样本、阴性对照品使用前恢复至室温，2000rpm离心10s。向每个PCR反应管中分别加入样本、阴性对照品各1μl，震荡混匀，于2000rpm离心10s。将PCR管放入PCR仪中，使用以下程序进行扩增反应，整个扩增反应约需2小时： Step 1 94℃ 5min Step 2 94℃ 30s Step 3 63℃ 30s 30 个循环 Step 4 72℃ 90s Step 5 72℃ 5min 3.结果判断（扩增和产物分析区） 从PCR管中取出2μl PCR产物与9μl阳性对照品一起进行浓度为2%的琼脂糖凝胶电泳检测，在紫外灯下阳性对照品从上至下应有11条带，分别为1487bp、1111bp、910bp、766bp、655bp、544bp、400bp、324bp、244bp、171bp和102bp。 样品观察到1487bp、910bp、544bp条带即为毒力基因uidA、bfpB和escV阳性，即为典型EPEC菌株。 观察到1487bp、544bp、324bp、244bp条带即为毒力基因uidA、escV、stx2A和stx1A 阳性，即为典型的EHEC菌株。 观察到1487bp、655bp和171bp条带即为毒力基因uidA、elt和estlb阳性，即为典型的ETEC菌株。 观察到1487bp和766bp条带即为毒力基因uidA和invE阳性，即为典型的EIEC菌株。 观察到1487bp、1111bp、400bp和102bp条带即为毒力基因uidA、pic、aggR和astA 阳性，即为典型的EAEC菌株。 阴性对照品结果应为阴性。 产品特点
德国肠出血性大肠杆菌O104 肠出血性大肠杆菌O104是一种罕见血清型细菌，因其能产生志贺样毒素而具有较强的致病性。感染到发病的潜伏期为3-8天，平均为3-4天。临床表现主要有：腹部绞痛和腹泻，常为血便样腹泻，呕吐。多数病人5-7天内好转，病例中有25%-30%出现如以急性肾功能衰竭、溶血性贫血和血小板减少为特点的溶血性尿毒综合征并发症，发展到这一严重综合征的平均时间是出现腹泻症状后一周左右。 患者其中有三分之一的重症患者已丧失肾功能，必须接受透析治疗。重症患者中还有超过一半的人表现出神经系统紊乱症状，焦躁不安，有语言障碍或出现癫痫病般的抽搐。 根据世界卫生组织的分析，这次疫情不同寻常之处是发展非常迅速，而且受感染的成年人比例特别高（18岁或18岁以上的人占89%），尤其是妇女患者（68%的溶血性尿毒症患者、感染产志贺毒素大肠杆菌患者58.8%为女性），而不是幼童和老人等通常的高危人群。 目前研究结果表明：导致最近德国肠出血性大肠杆菌疫情的致病菌是包含两种不同菌种基因的新型病菌,是由两种不同大肠杆菌基因结合的突变体，以前从未被发现过. 6月2日,两个研究小组分别公开了对欧洲近期肠出血性大肠杆菌流行病原的基因组测序初步分析的结果，确认这种大肠杆菌聚合了至少两种大肠杆菌的致病特性。 中德科学家联合对本次流行的病菌进行了全基因组测序，初步分析结果显示，这种O104血清型的大肠杆菌与2002年从中非艾滋病患者腹泻标本中分离的肠聚集性大肠杆菌55989菌株的同源性超过93%，同时它还通过基因水平转移获得了肠出血性大肠杆菌的毒力基因和毒力相关质粒，这可能与该菌株强毒性和重症感染有关。 造成本次疫情的菌株是O104：H4血清型的大肠杆菌的一个变种。该种“杂种克隆”聚合了肠聚集性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌和肠外致病性大肠杆菌的致病特性。研究人员进一步调查此次暴发的大肠杆菌是否含有已被发现的大肠杆菌的毒力基因。初步分析结果只确定了Stx2基因的存在，而其他典型志贺毒素基因如Stx1，eae，ehx缺失。暂未发现有其他毒力基因。Stx2基因编码志贺毒素是出血性大肠杆菌的主要毒力因子，并可能与出血性肠炎及溶血性尿毒症的致病性有关。 此前研究人员已经发现该菌株携带氨基糖甙类、大环内酯类及磺胺类抗生素的耐药基因，目前又新发现5个抗生素抗性基因，包括头孢菌素、单酰胺菌素、青霉素和链霉素、萘啶酮酸类抗生素，使得该菌株对至少8种抗生素可能产生耐性。该菌株对carbapenems（卡巴配能类）ciprofloxacin（环丙沙星）敏感。 5.8日德国爆发，曲线图如
大肠杆菌内毒素(endotoxin)试剂盒使用方法 检测范围：96T 0.03Eu/L – 0.8Eu/L 使用目的： 本试剂盒用于测定大肠杆菌样本中内毒素(endotoxin)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌内毒素(endotoxin)水平。用纯化的大肠杆菌内毒素(endotoxin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内毒素(endotoxin)，再与HRP标记的内毒素(endotoxin)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内毒素(endotoxin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大肠杆菌内毒素(endotoxin)浓度。 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
全国肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染性腹泻应急处理预案 (试行) 一、前言 肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157：H7感染性腹泻是近年来新发现的危害严重的肠道传染病。该病可引起腹泻、出血性肠炎，继发溶血性尿毒综合症(HUS)、血栓性血小板减少性紫癜(TTP)等。HUS和TTP 的病情凶险，病死率高。自1982年美国首次发现该病以来，在世界上许多国家相继发生了暴发和流行，其流行已成为全球性的公共卫生问题之一。近几年，我国已陆续有十多个省份在食品、家禽、家畜、昆虫、腹泻病患者中检出该致病菌，存在着疫情暴发、流行的潜在威胁。为了有效控制肠出血性大肠杆菌O157：H7感染性腹泻的突发疫情，保障广大人民群众的生命与健康，维护社会稳定和经济发展，特制定本预案。 二、目的 确保一旦发生疫情，及时采取有效措施，迅速控制和扑灭疫情。 三、预案启动条件 凡发生肠出血性大肠杆菌O157：H7感染性腹泻暴发疫情，即启动本预案。对于既往无疫情的地区发生首例肠出血性大肠杆菌O157：H7确诊病例时，可按照本预案执行。 有关暴发疫情判定和病人诊断标准，参照《全国肠出血性大肠杆菌O157：H7感染性腹泻监测方案(试行)》执行，即：
1．疑似病例标准 (1)有鲜血便、低烧或不发烧、痉挛性腹痛的腹泻病例； (2)腹泻若干天后继发少尿或无尿等表现的急性肾功能衰竭病例； (3)腹泻病人粪便标本O157抗原免疫胶体金方法检测阳性者。 符合以上条件之一者，即为疑似病例，其中(3)为新增标准。 2．确诊病例标准 疑似病例或其他腹泻病患者，具有以下条件之一者即为确诊病例： (1)从粪便标本中检出产生志贺毒素的肠出血性大肠杆菌O157：H7；或恢复期血清O157脂多糖(LPS)IgG抗体呈4倍升高；或经蛋白印记试验证实血清标本有与O157LPS、或肠出血性大肠杆菌溶血素、或志贺毒素分子量一致的特异性抗体； (2)在流行区内，经省级专家组确认，与确诊病例流行病学密切相关，并排除其它疾病的疑似病例，为临床符合病例； (3)腹泻病例的粪便中分离出不产生志贺毒素1或志贺毒素2及其变种的肠出血性大肠杆菌O157：H7，亦为确诊病例(不产毒)。 3．暴发疫情标准 (1)在1个县(区)或相毗邻的县(区)境内，2周内发现不少于10例的具有显著的流行病学联系，且无其它原因可解释的疑似病例； (2)在1个县(区)或相毗邻的县(区)境内，2周内发现不少于3例的确诊病例。
第11章肠道感染细菌 测试题 一、选择题 A型题； 1．肠道杆菌所没有的一种抗原是 A. M抗原 B. H抗原 C. O抗原 D. K抗原 E. Vi抗原 2. 关于肠杆菌科的论述，不正确的是 A. 所有肠道杆菌都不形成芽胞 B. 肠道杆菌均为G—杆菌 C. 肠道杆菌中致病菌一般可分解乳糖 D. 肠道杆菌中非致病菌一般可分解乳糖 E. 肠道杆菌中少数致病菌可迟缓分解乳糖 3. 鉴别肠道致病菌与非致病菌主要依据 A. 是否发酵葡萄糖 B. 是否分解乳糖 C. 是否具有鞭毛 D. 是否具有菌毛 E. 是否具有芽胞 4. 大肠杆菌IMViC试验结果应是； A. +、—、+、— B. —、+、—、+ C. +、+、—、— D.—、—、+、+ E.+、—、—、— 5. 能产生外毒素的志贺菌是 A. 痢疾志贺菌 B. 福氏志贺菌 C. 鲍氏志贺菌 D. 宋氏志贺菌 E. 以上都不是 6. 伤寒杆菌Vi抗原变异属于 A．毒力变异 B．耐药性变异 C．菌落变异 D．形态变异 E．对外界抵抗力变异 7. 与立克次体有共同抗原的肠道杆菌是A．沙门菌的某些菌株
B．志贺菌的某些菌株 C．埃希菌的某些菌株 D．变形杆菌的某些菌株 E．克雷伯菌的某些菌株 8．分解葡萄糖产酸产气、不分解乳糖、产生H2S+++，动力试验+、尿素酶试验－，可能是下列肠道菌中的 A．大肠埃希菌 B．伤寒沙门菌 C．志贺菌 D．变形杆菌 E．肖氏沙门菌（乙型副伤寒杆菌） 9. 主要流行的肠出血性大肠杆菌的O血清型是 A. O6 B. O25 C. O157 D. O111 E. O158 10. 关于伤寒与副伤寒沙门菌致病特点的说法，正确的是 A. 潜伏期，可在肠系膜淋巴结繁殖 B. 不引起菌血症 C. 发病2周内没有第二次菌血症 D. 不侵犯肝、脾、肾等器官 E. 患病后机体获得的免疫力不强 11. 志贺菌属常引起: A. 阿米巴痢疾 B. 细菌性痢疾 C. 慢性肠炎 D. 假膜性肠炎 E. 肠热症 12. 机体抗伤寒的免疫主要依赖于 A. 体液免疫 B. 补体的作用 C. 中性粒细胞的吞噬作用 D. 抗生素的使用 E. 细胞免疫 13. 肠热症病人发病1周内，检出伤寒沙门菌阳性率最高的方法是 A. 尿培养 B. 血培养 C. 粪便培养 D. 痰培养 E. 胆汁培养 14. 疑为肠热症的病人常需抽血做细菌学检查,什么时期采血样最好 A. 发病第1周 B. 发病第2周 C. 发病第3周 D. 发病第4周 E. 疾病恢复期 15. 肠热症并发症之一是肠穿孔,其原因是 A. 细菌的直接作用 B. 肠梗阻所致 C. 肠壁淋巴组织发生超敏反应
卫生部全国肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染性腹泻应急处理 预案(试行) 【法规类别】传染病防治 【发布部门】卫生部(已撤销) 【发布日期】2002.04.24 【实施日期】2002.04.24 【时效性】现行有效 【效力级别】XE0303 卫生部全国肠出血性大肠杆菌O157∶H7 感染性腹泻应急处理预案(试行) （2002年4月24日） 一、前言 肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157：H7感染性腹泻是近年来新发现的危害严重的肠道传染病。该病可引起腹泻、出血性肠炎，继发溶血性尿毒综合症(HUS)、血栓性血小板减少性紫癜(TTP)等。HUS和TTP的病情凶险，病死率高。自1982年美国首次发现该病以来，在世界上许多国家相继发生了暴发和流行，其流行已成为全球性的公共卫生问题之一。近几年，我国已陆续有十多个省份在食品、家禽、家畜、昆虫、腹泻病患者中检出该致病菌，存在着疫情暴发、流行的潜在威胁。为了有效控制肠出血性大肠杆菌O157：H7感染性腹泻的突发疫情，保障广大人民群众的生命与健康，维护社会稳定和经济发展，特制
定本预案。 二、目的 确保一旦发生疫情，及时采取有效措施，迅速控制和扑灭疫情。 三、预案启动条件 凡发生肠出血性大肠杆菌O157：H7感染性腹泻暴发疫情，即启动本预案。对于既往无疫情的地区发生首例肠出血性大肠杆菌O157：H7确诊病例时，可按照本预案执行。 有关暴发疫情判定和病人诊断标准，参照《全国肠出血性大肠杆菌O157：H7感染性腹泻监测方案(试行)》执行，即： 1．疑似病例标准 (1)有鲜血便、低烧或不发烧、痉挛性腹痛的腹泻病例； (2)腹泻若干天后继发少尿或无尿等表现的急性肾功能衰竭病例； (3)腹泻病人粪便标本O157抗原免疫胶体金方法检测阳性者。 符合以上条件之一者，即为疑似病例，其中(3)为新增标准。 2．确诊病例标准 疑似病例或其他腹泻病患者，具有以下条件之一者即为确诊病例： (1)从粪便标本中检出产生志贺毒素的肠出血性大肠杆菌O157：H7；或恢复期血清O157脂多糖(LPS)IgG抗体呈4