生物电镜技术在生物医学领域中的应用
摘要: 随着现代医学细胞超微结构及分子生物学等学科的迅速发展，电子显微镜技术并未像某些人预测的那样随着免疫组化技术的发展而进入了末日。相反,电子显微镜技术也正向超,高分辨率、生物分子及原子水平发展。口述（近年来越来越多的事实证明电镜在人体各种疾病的诊断中仍然发挥着重要的作用。）生物电镜技术在生物和临床医学疾病诊断中作出了巨大的贡献, 并不断开辟着生物医学研究的新领域, 主要从细胞、亚细胞的形态结构上阐明疾病的发生、发展及转归规律, 丰富了传统病理学的知识。口述比如：1.通过对亚细胞结构和病原体的观察, 在生物医学领域利用高性能的电子显微镜观察细胞中各种细胞器正常的和病理的超微结构, 诸如内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体、细胞骨架系统等, 对探明病因和治疗疾病有很大帮助。2.通过研究细胞结构和功能的关系, 也可以研究细胞的通讯与运输、分裂与分化、增殖与调控等生命活动的规律, 电子显微镜也可结合各种制样技术观察病毒、细菌、支原体、生物大分子等的超微结构, 是现代生物医学研究不可替代的工具。口述（随着电镜技术的不断改进以及与多种研究手段相结合, 电子显微镜将在生物医学领域应用会更加广泛。）
口述：引言：首先，我们需要知道的是生物电镜技术是医学生物学工作者深入研究机体的超微结构及其功能的有利手段之一。所谓超微结构，一般指光学显微镜所不能分辨的组织、细胞的细微形态结构（亚显微结构）以及生物大分子的结构。在形态学科，如解剖学、组织学、胚胎学、细胞学、病理学、微生物学、寄生虫学等等之中，电子显微镜技术已成为研究结构的常规方法。在某些机能学科，如生理、生物化学、病理生理、药理等。此外，在临床医学、环境保护科学以及中草药的研究等，电镜技术也做出了重要的贡献，并不断开辟着生物医学研究的新领域，主要从细胞，亚细胞的形态结构上阐明疾病的发生，发展及其病理转归规律。而随着电镜技术的不断改进以及与多种研究手段相结合，电镜技术在生物医学的应用将更加广泛。下面，我们小组将对生物电镜技术在生物医学领域中的应用稍作讲解。分为两个部分。
正文：
一．生物电镜技术在生物和医学中的研究历史
电子显微镜诞生于二十世纪30年代，德国的 Bruche和 Johannson根据电子光学原理，以电子束为介质用电子柬和电子透镜代替传统的光束和光学透镜，
制造出了第一宋菲君型传头式电子显微镜。
但直到60年代以前,电子显微镜在生物医学中的应用主要限于细胞生物学、微生物、实验病理学等研究领域，60年代初期人们开始将电子显微镜应用于人体病理标本,通过对这些人体病理标本的超微结构分析,人们进一步了解了疾病的病理变化及其发生机制,也同时认识到电镜做为一个新的诊断工具可直接为临床服务,为某些疾病的诊断提供重要的形态依据。
60年代、70年代是国际上诊断电镜发展的黄金时代,越来越多的疾病通过电镜检查而得到确诊,越来越多的病理学家认识到了电镜诊断的价值,电镜逐渐成为病理诊断的一个基本工具,欧美国家中几乎所有大的医疗中心及医院都将电子显微镜用于疾病的研究和诊断。
(世界上第一台电子显微镜)
随着科学技术的发展,相继出现的能直接观察样品表面立体结构的扫描电子显微镜（SEM），能进行活体观察的超高压电镜（HVEM），能在观察样品形态结构的同时进行微区化学成份及结构分析，灵敏度达到10-20g的分析电镜（AEM）和兼有扫描电镜。透射电镜以及探针显微分析仪的多功能的扫描透射电子显微镜（STEM）等各种类型的电子显微镜。电子显微镜技术的发展不仅表现在仪器本身性能的高度完善和种类的明显增多上，还突出地反映在与其相应的各种样品制备和应用技术上。人们从常规的超薄切片技术开始，研究出了各种各样的技术方法，例如能增加样品反差的金属投影技术，能用透射电镜观察样品表面结构的复型技术，便于观察微小颗粒材料的负染色技术。能暴露出样品内部结构的冷冻断裂和冷冻复型技术，能进行生物合成、转移定位研究的电镜放射自显影技术，利用抗原抗体相互作用特异性结合为基础的免疫电镜技术，利用特异的化学反应产生细胞化学产物（不溶性电子致密沉淀物）来识别和定位的电镜细胞化学技术。用来
分析各种不同组织细胞中存在的元素的微区成份分析技术。
而现在，随着电镜技术的放大倍数已从第一台的十几倍提高到现在的百万倍, 因此在生物医学领域利用高性能的电子显微镜观察细胞中各种细胞器正常的和病理的超微结构, 诸如内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体、细胞骨架系统等, 对探明病因和治疗疾病有很大帮助。通过研究细胞结构和功能的关系, 也可以研究细胞的通讯与运输、分裂与分化、增殖与调控等生命活动的规律, 电子显微镜也可结合各种制样技术观察病毒、细菌、支原体、生物大分子等的超微结构, 是现代生物医学研究不可替代的工具。
二．生物电镜在生物和医学领域中的当前应用状况
参考相关文献对电子显微镜技术在肿瘤诊断、病毒和病毒性疾病、系统性疾病等研究领域的应用做简要概述, 说明其是现代临床研究和疾病诊断当前应用状况。
1.电镜在病毒性疾病的诊断应用
揭示病毒的结构或新病毒的发现与鉴别都是电镜的经典应用, 因为病毒是最小的生命形态, 只有应用电镜才可以对它进行直接观察, 在整个生物医学界, 利用电镜研究受益最多的是病毒学领域。病毒性疾病的诊断离不开电镜,电子显微术是确定各种病毒形态结构最有用的工具。传统的超薄切片可供观察感染细胞内病毒的大小、形态、排列及其复制组装、成熟的过程以及某些有包膜病毒的芽生成熟的部位和病毒包涵体的形态特征。电镜负染技术是一种快速简便的操作程序,也是病毒性致病因子电镜诊断常用的方法之一,在新病毒的发现中作出了重要贡献。免疫电镜技术的应用更提高了病毒快速诊断的敏感性和特异性。
依据电镜下病毒形态结构特征,包括衣壳的对称性、壳微粒数和排列方式、核衣壳在细胞内复制组装的部位、病毒体的形态和大小以及螺旋对称核衣壳的直径等,再结合病毒的核酸和蛋白分子生物学特性,可以对致病病毒进行鉴定和分类。
鉴别诊断病毒主要有两种方法：目前,电镜技术不仅成为病毒快速诊断的常规技术手段, 而且在肿瘤病毒基因等重要研究领域中也起着不可替代的作用。
1.一般组织内的病毒, 可以利用超薄切片技术进行。
通过取材、固定、脱水、浸透、包埋、聚合、修块、超薄切片及染色后用透射电镜观察病毒大小、形态、排列及其复制组装、成熟的过程及病毒包涵体的形态特征。通过形态特征再结合病毒的核酸和蛋白分子生物学特性, 可以对致病病毒进行鉴定和分类。
2.鉴别诊断病毒的另外一种方就是负染技术。
电镜负染技术是一种快速简便的操作程序, 是病毒性致病因子电镜诊断常用的方法, 在新病毒的发现中作出了重要贡献。一般是将病毒分离提纯出来, 分离提纯主要是将病毒从细胞中裂解出来, 然后进行离心沉淀30min 除去细胞碎片, 取上清液制片, 然后进行染色。
如果病毒含量太少, 则需制成悬浮液制片。制片后用磷钨酸染液染色约
1min 左右后晾干,然后上电镜观察病毒的形态、结构等特征以鉴别诊断病毒属性。负染色的特点是反差强, 分辨力高, 操作简便, 节省时间, 可以看到病毒的亚单位结构。
免疫电镜技术能使抗原和抗体在超微结构水平上得到精细检测和定位, 陈德蕙等报道免疫电镜技术的应用更提高了病毒快速诊断的敏感性和特异性。
常国权等应用固相免疫电镜技术成功地对鸡贫血病病毒( CAV ) 进行了检测;
焦仁杰用生物素标记腺病毒的基因探针与整装抽提的细胞进行电镜原位杂交技术, 成功地证明了腺病毒DNA 与核骨架的紧密结合关系和胶体金颗粒族
状与串珠状结合在核骨架上;
程安春等采用胶体金标记羊抗兔的免疫电镜技术检测了鸭肝炎病毒( DVHV ) QL7。
目前, 国外研究人员已利用该项技术成功地检测出了猪传染性胃肠炎冠状病毒( T GEV ) 、犬细小病毒( CPV) 、SV40病毒、轮状病毒、Sabin 毒株及西方型马脑炎病毒(WEEV) 。
因此, 病毒性疾病的诊断离不开电镜, 电子显微技术是确定各种病毒形态结构最有用的工具。
另外,电镜技术对研究某些病毒感染的发病机理也很有帮助。例如Geisbert等研究人报道了马尔堡出血热病人的电镜观察结果是先前无人报道过的。他们发现在胰岛中有病毒感染,巨噬细胞是最早受病毒攻击的靶细胞，肝细胞、肾上腺皮质和髓质细胞以及纤维母细胞也是病毒复制的重要部位。
2.电镜技术在肿瘤鉴别诊断中的应用
电子显微镜技术的应用是建立在光学显微镜的基础之上的, 光学显微镜的分辨率为0. 2Lm, 透射电子显微镜的分辨率为0. 2nm, 也就是说透射电子显微镜在光学显微镜的基础上放大了1000 倍。因此,透射电子显微镜突破了光学显微镜分辨率低的限制, 成为了诊断疑难肿瘤的一种新的工具，辅以免疫组织化学等技。
（可口述？）一般讲,使用这些技术,绝大部分肿瘤都得以明确诊断。但有些肿瘤的诊断及鉴别诊断,电镜所起的作用很大, 有研究报道电子显微镜技术通过超微结构观察可以区分如无色素性黑色素瘤、肥大细胞肿瘤、嗜酸细胞瘤、肌源性肿瘤、软组织腺泡状肉瘤及神经内分泌肿瘤癌、黑色素瘤和肉瘤以及腺癌和间皮瘤; 可区别胸腺瘤、胸腺类癌、恶性淋巴瘤和生殖细胞瘤; 可区别神经母细胞瘤、胚胎性横纹肌瘤、Ew ing 氏肉瘤、恶性淋巴瘤和小细胞癌; 可区别纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、平滑肌肉瘤和恶性神经鞘瘤以及区别梭形细胞癌和癌肉瘤等对于这些肿瘤,光镜有时难以明确诊断。
如以神经内分泌肿瘤的诊断即为佐证。神经内分泌肿瘤都含有神经内分泌颗粒,不论其分化程度如何,是原发的还是转移的,在电镜下都很易识别。另外,通过对此类瘤细胞分泌颗粒及其他超微结构特点的识别,还可以对一些内分泌肿瘤作进一步的功能分类。以上这些都是光镜难以做到的。有研究报道, 无色素性肿瘤、嗜酸细胞瘤、肌原性肿瘤、软组织腺泡状肉瘤及神经内分泌肿瘤这些在光镜很难明确诊断的肿瘤, 利用电镜可以明确诊断。电镜主要是通过对超微结构的精细观察, 寻找组织细胞的分化标记, 确诊和鉴别相应的肿瘤类型。细胞凋亡与肿瘤有着密切的关系, 电镜对细胞凋亡的研究起着重要的作用, 因此利用电镜观察细胞的超微结构病理变化和细胞凋亡情况, 将为肿瘤的诊断和治疗提供科学依
据。
3.电镜对非肿瘤性疾病的诊断应用
3.1电镜在肾活检病理诊断中应用
电镜对其它各器官系统疾病的病理诊断,在许多单位受到重视,但用得最多的是肾脏活检和某些皮肤疾病的诊断。肾穿活检对了解疾病发生、发展及选择治疗方法是十分重要的, 可以提高诊断的准确性。对肾脏病的诊断,通常将光镜、免疫荧光光镜和电镜观察三者结合。临床上,有时仅靠光镜难以对疾病明确诊断,而电镜具有高分辨性能,可以获得许多不为光镜捕捉到的信息,往往就是这些信息,为疾病的正确诊断提供了宝贵的资料,甚至修正光镜的诊断结论。有研究者对200例病例进行了光镜诊断和电镜诊断的结果比较,发现有15%的病例靠电镜提供新的信息得以诊断。目前采用的方法有免疫组化和电子显微镜检查, 电子显微镜检查可以弥补光学显微镜分辨率不高的缺陷, 可观察到光镜所看不到的成分的超微结构病理变化, 特别是上皮细胞、系膜、肌膜细胞和间质的改变, 确定有无电子致密物沉着及其沉着部位。Siegel 等曾报道, 经对213 例肾病活检资料分析, 发现有11% 的病例需要用电镜作出正确诊断, 有36%病例肾的超微结构改变对光镜诊断提供确诊或亚分类, 如遗传性肾炎, 此病肾小球的组织学无特殊改变,唯电镜检查才能作出准确诊断。如下电镜观察图:
3.2代谢性疾病诊断中的应用
随着科学技术的进步, 电镜的应用越来越广泛,已有研究报道, 电镜在肝脏代谢性疾病、软组织系统疾病诊断中的作用值得肯定。Mierau 等( 1997) 认为电镜对影响儿童神经系统代谢储积性疾病的诊断起着决定作用, 而且对此类
疾病诊断特别是对那些需要明确界定的溶酶体储积病的诊断起着不可替代的作用。在肝脏代谢性疾病诊断中, 如w il son 病是一种先天的代谢性疾病, 线粒体在早期的病理变化对病理诊断是非常有价值的。在软组织系统疾病诊中,Kyriacou 等认为电镜对 3 种主要类型肌病的诊断很有用: 1空泡性肌病; o代谢性肌病; ?先天性肌病。这些疾病中大约15%～20% 的肌肉活检需要进一步应用电镜检查资料作为最终诊断的前提。
3.3电镜技术在其它非肿瘤性病理诊断中的应用
同时, 对于许多非肿瘤性疾病, 由于常常无特异的抗原表达, 因此其诊断仍依赖于特异的光镜及电镜形态表现。如肾活检, 除了组织学特点外, 电镜观察还能揭示免疫复合物沉积的确切部位及形态, 基底膜及各种细胞的变化等特点, 这些仍然是重要的诊断依据, 因此肾活检标本目前都常规地进行电镜检查。通过检测各种细胞器、肌丝的变化及特殊的超微结构, 电镜对许多代谢性疾病、细胞内外异常物质沉积性疾病(如淀粉性变性)、肌病的诊断也还起着关键的作用而这些疾病目前尚无法采用免疫组化的方法来诊断。
对于许多感染性疾病, 目前国内外虽然已建立了免疫学或PCR 等诊断技术, 但在不知道具体病原体的情况下, 电镜检查仍然是最快捷、可靠的诊断手段。此外, 由于不少病原体(如病毒, 弓形虫等) 在电镜下具有明确可靠的形态特点, 易于辨认, 而免疫学及PCR 检测可出现程度不等的假阴性或假阳性, 因此电镜检查目前仍公认为最可靠的诊断技术。
结论：
综上所述, 回眸过去多年以来人类对疾病的认识有了非常深刻的变化, 疾病诊断的技术手段也有了巨大的进步, 这其中无疑包含了电子显微镜所作的伟大贡献。人们一直致力于提高显微镜的分辨能力和成像衬度。随着计算机技术和
r=具的不断进步，光学设计的理论和方法也在不断改进，学科的交叉和联系越来越紧密，显微成像技术大大提高。近年来随着近场穿透式电子显微镜、扫描式电子显微镜以及激光共焦显微镜的发展和广泛应用．为人类获得新型材料以及促进现代医学的发展创造了条件．应用广泛的纳米材料就是在电子礁微镜的基础上发展起来的，它为2l世纪科学技术的发展奠定-r基础．在材料，生物、医学等领域得到广泛的应用。有人指出:“没有电子显微镜增添新的认识和知识, 就不可能有对疾病或病理过程的了解。”
时至今日, 电子显微镜技术并未像某些人预测的那样随着免疫组化技术的发展而进入了末日。相反, 近年来越来越多的事实证明电镜在人体各种疾病的诊断中仍然发挥着重要的作用。人们应用电子显微镜技术全面地观察了各种细胞器的形态，立体感强，深入地研究了他们的功能。在病毒学、细胞生物学、组织学病理学、分子生物学及分子病理学都有发挥其应用并做出了巨大的贡献。作为观
察微观世界的“科学之眼”——电子显微镜所具有的高分辨直观性的特点，是任何其他科学仪器无法代替的。电子显微镜已成为生物医学技术中不可缺少的工具。相信随着电镜技术的不断改进以及与多种研究手段相结合，电镜技术在生物医学的应用将更加广泛。
概念结构设计和逻辑结构设计 一.系统概述 本系统通过调查从事医药产品的零售，批发等工作的企业，根据其具体情况设计医药销售管理系统。医药管理系统的设计和制作需要建立在调查的数据基础上，系统完成后预期希望实现药品基本信息的处理，辅助个部门工作人员工作并记录一些信息，一便于药品的销售和管理。通过此系统的功能，从事药品零售和批发等部门可以实现一些功能，如：基础信息管理，进货管理，库房管理，销售管理，财务统计，系统维护等。 二．概念结构设计 1.员工属性 2.药品属性 3.客户属性 4.供应商属性 5.医药销售管理系统E--R 图 三．逻辑结构设计 该设计概念以概念结构设计中的E--R 图为主要依据，设计出相关的整体逻辑结构，具体关系模型如下：（加下划线的表示为主码） 药品信息（药品编号，药品名称，药品类别，规格，售价，进价，有效期，生产日期，产地，备注） 供应商信息（供应商编号，供应商名称，负责人，） 员工 姓名 家庭地址 E-maill 电话 员工 编号 年龄 帐号
四．系统各功能模块如何现（数据流实图）；1.基本信息管理子系统 基本信息管理子系统 药品信息员工信息客户信息供应商信息2.库存管理子系统 库存管理子系 统 库存查询库存信息出入库登记库存报表3.销售管理子系统 销售管理 销售登记销售退货销售查询 4.信息预警子系统 信息预警 报废预警库存预警 5.财务统计子系统 财务统计 统计销售额打印报表 6.系统管理子系统
系统管理 权限管理修改密码系统帮助 五．数据库设计（E-R图，数据库表结构） 1.药品基本信息表 列名字段数据类型可否为空说明药品编号 药品名称 药品类别 规格 进价 有效期 生产日期 售价 产地 备注 2.员工基本信息表 列名字段数据类型可否为空说明员工编号 性别 身份证号 员工年龄
综述骨膜的组织学特征和超微结构 宋守礼 朱盛修 骨膜通常指骨外膜Κ是覆盖在骨外表面的致密结缔组织膜Λ除骨的关节面、股骨颈、距骨的关节囊下区和某些籽骨表面外Κ骨的外表面都有骨膜Λ目前认为Κ骨膜不仅是一层:限制膜ΦΚ而且具有成骨作用Κ对骨的营养、生长或修复及感受痛觉都很重要Λ临床上Κ利用骨膜移植后能保留骨膜固有的成骨和成软骨的特性Κ已成功地治疗骨折延迟愈合或不愈合、骨和软骨缺损、气管软骨缺损、先天性腭裂和股骨头缺血性坏死等疾病Κ且骨膜移植有血运重建快、成骨量大和对供区创伤小等优点Κ引起了人们对骨膜的兴趣Κ加速了对骨膜组织的结构和成骨机制的研究Λ 一、骨膜的组织学特征 虽然骨膜的组织结构因解剖部位和年龄不同而有差别Κ传统上常将骨膜分为浅表的纤维层;fibrous layerΓ和深面的生发层;cam bium layerΓΚ二层并无截然分界Λ纤维层较厚Κ细胞成分少Κ主要为粗大的胶原纤维束Κ彼此交织成网Κ有些纤维穿入骨质Κ称sharpey 纤维或穿通纤维;perfo rating fiberΓΚ起固定骨膜和韧带的作用Λ生发层紧邻骨外表面Κ其纤维成分少Κ排列疏松Κ血管和细胞丰富Κ有成骨能力Κ故又称成骨层;o s2 teogenic layerΓΚ其细胞成分有骨祖细胞、成骨细胞、破骨细胞和血管内皮细胞Λ生发层的组织成分随年龄和机能活动而变化Λ在胚胎期和出生后的成长期内Κ生发层由数层细胞组成Κ其外层为成纤维细胞样骨祖细胞Κ内层为成骨细胞Κ二者皆有增殖能力Κ与骨膜成骨有关Λ成年后Κ骨处于改建缓慢的相对静止阶段Κ生发层变薄Κ骨祖细胞相对较少Κ不再排列成层Κ而是分散附着于骨的表面Κ继续参与终身缓慢进行的骨改建活动及骨折时的修复活动[1Κ2]Λ骨膜的纤维层剥离后Κ成骨细胞和破骨细胞仍能牢固地附着在骨面上[3]Λ 近年来Κ有作者根据骨膜的功能和解剖学基础提出骨膜分三层的观点Κ即浅表的纤维层、中间的血管性未分化区和深面的生发层[4Κ5]Λ中层组织疏松Κ主要的细胞成分是未分化细胞Κ它能为生发层和纤维层提供祖细胞Λ该层内还有少量单核细胞Κ在骨重建的局部调节中发挥作用Λ细胞外基质中胶原排列有序Κ适于发挥 作者单位Π100853 北京Κ解放军总医院骨科支持作用Κ并且和基质中非胶原成分共同发挥粘弹性作用Κ缓冲生发层内生理范围内的应力变化Λ中层疏松的特性亦有利于生发层在活跃的生长期中有效地转运营养物质和代谢产物Λ因此Κ中层除具有营养作用和供给祖细胞外Κ还是调节骨和周围软组织间相互作用的缓冲带[4]Λ骨膜受到应力作用后Κ通过中层的调节Κ其纤维弹性组织成分;fibroelastic componentΓ离开或靠近生发层Κ结果张力刺激骨膜成骨Κ压力诱导骨吸收Λ成长期的骨膜中层较厚Κ具有理想的结构Κ能迅速而敏感地对应力变化做出反应Κ启动骨表面的适应性重建活动[5]Λ 骨膜的三层结构随年龄发生明显变化Λ出生后Κ生发层的成骨细胞外形细长Μ中层较厚Κ分化差Κ血管极少Λ在快速成长期Κ生发层的成骨细胞呈立方形Μ中层的血管、未分化细胞和单核吞噬细胞发育达高峰Κ血管清晰可见Λ成年后Κ生发层细胞呈扁平的静息状态Μ中层结构开始退化Κ逐渐消失Κ骨膜对应力反应的敏感性随之下降[4]Κ骨膜附着于骨较牢固Κ一般不易剥离ΛSquier等[6]根据骨膜内细胞、纤维和基质的比例Κ提出另一种:三层分法ΦΛ第一层由紧邻骨表面的成骨细胞和其浅面的成纤维细胞样细胞组成的成骨细胞上层;sup ra-o steoblast layerΓ构成Κ后者可能是骨祖细胞Λ第二层为相对透明区Κ毛细血管丰富Κ可能代表传统的生发层Κ骨膜的大多数血管成分位于该层内Λ第三层由胶原纤维和大量成纤维细胞构成Κ相当于传统的纤维层Λ 骨膜除含有丰富的胶原纤维外是否含有弹性纤维Κ目前仍有争论ΛM urakam i和Em ery[7]认为骨膜中有弹性纤维Κ这些纤维由深层的骨祖细胞合成Λ弹性纤维沿骨纵轴平行排列Κ形成5～6层Κ其内侧部分包括在生发层内Κ外侧部分融入纤维层中Λ位于弹性纤维最内侧部分的细胞可能系未分化细胞Κ能分化为成骨细胞或成弹性纤维细胞ΛTonna[8]的电镜观察亦证明骨膜的两层均有弹性纤维Λ但Chong等[9]认为骨膜没有弹性纤维Κ其他作者发现的弹性纤维可能是网状纤维Λ 二、骨膜的超微结构 在光学显微镜下Κ骨膜的纤维层和生发层无明确的分界Μ在超微结构水平Κ两层间有清晰的界线[8]Λ在未 593 中华骨科杂志1996年6月第16卷第6期
内质网病变的超微结构观察 徐娇等 摘要：电镜技术的应用使人们对细胞的超微结构有了更深入的了解。各种细胞器的结构以及其病理状况时发生的改变为人们判断疾病的发生提供了直观科学的依据。本文主要概述了投射电镜观察下内质网的各种超微病理变化。 关键词：电镜；内质网；病理变化 20世纪30年代，德国的RUSKA第一次发现了电子显微镜，随后利用刚刚形成的电子显微镜技术第一次看到了烟草花叶病毒[1]。随着电子显微镜技术的不断完善和发展，电镜的应用使人们对细胞的研究逐步深入到亚细胞结构，各种细胞器的结构也不断被人们认知。同时，在医学科研和诊断疾病中做出了重要贡献。例如，Gyorkey[2]等在2000例肿瘤诊断中8%要靠电镜帮助诊断。Kuzela[3]等对49例肿瘤的诊断结果分析，11例电镜可进一步提供明确的诊断，占22%，纠正6%的错误诊断，确诊率28%。国内周晓军[4]报道223例肿瘤电镜诊断，电镜确诊135例，占60%，纠正原病例诊断11例，占5%。有诊断价值者占65%。有由此可见，电镜技术在诊断疾病中的应用价值。 电镜分为扫描电镜和投射电镜。由于其分辨率高，放大倍数大，而且使用较为方便，电镜已经成为研究细胞微观结构最有效的方法之一[5]。本文所的总结的内质网超微结构变化主要通过投射电镜来观察。 1 内质网的超微结构及生理功能 内质网（endoplasmic reticulum），ERKR. Porter、A. Claude 和EF. Fullam等人于1945年发现，是细胞质内由膜组成的一系列片状的囊腔和管状的腔，彼此相通形成一个隔离于细胞基质的管道系统，为细胞中的重要细胞器。它实际上是一个连续的膜囊和膜管网，可分为粗面内质网（RER，Rough Endoplasmic Reticulum）和滑面内质网（SER，Smooth Endoplasmic Reticulum）两大部分。粗面内质网上附着有大量核糖体，合成膜蛋白和分泌蛋白；滑面内质网上无核糖体。 内质网是哺乳细胞中一种重要的亚细胞器。膜分泌性蛋白、氨基多糖、磷脂、胆固醇及钙信号等的代谢均与内质网功能直接相关，例如分泌性蛋白的合成与空间折叠、蛋白质糖基化修饰、蛋白质分泌等均在内质网内发生。目前研究认为，胰腺细胞、心肌细胞、神经元细胞等内质网功能障碍可能分别是糖尿病、心脑组织缺血梗塞、退行性神经疾病等发生的重要原因[6-8]。 真核细胞的内质网具有四个主要的生理功能：合成膜蛋白和分泌蛋白；折叠形成蛋白质正确的三维空间构象；储存Ca2+；参与脂质和胆固醇的生物合成[9]。 2 内质网的病理性变化形态观察 2.1内质网增多内质网的多少可以反应细胞病变状况。例如在蛋白质合成及分泌活性高的细胞（如浆细胞、胰腺腺泡细胞、肝细胞等）以及细胞再生和病毒感染时，粗面内质网有增多现象。 李颖智[10]等研究了脊髓损伤后继发骨质疏松的骨组织超微结构，发现进行手术后第11w，胫骨成骨骨细胞核空化，粗面内质网增多。熊娟[11]等观察了锯缘青蟹病毒感染的超微病理变化，发现其胃细胞中粗面内质网肿胀增多。 2.2内质网减少和水祥[12]等用秋水仙素灌大鼠慢性肝损伤大鼠，用电镜观察细胞，发现胞浆内内质网减少。谢学军[13]等研究了糖尿病大鼠视觉系统三级神经元的病理变化，发现糖尿病大鼠视皮质，神经细胞胞浆中，粗面内质网减少且变形。山羊冰川棘豆中毒[14]，缺血[15，16]等也可导致细胞内粗面内质网减少。
病理学笔记 绪论 病理学（pathology）是一门研究疾病发生发展规律的医学基础学科，揭示疾病的病因、发病机制、病理改变和转归。 一、病理学的内容和任务 病理学教学内容分为总论和各论两部分。总论主要是研究和阐明存在于各种疾病的共同的病 因、发病机制、病理变化及转归等发生、发展规律，属普通病理学（general pathology）,包 括组织的损伤和修复、局部血液循环障碍、炎症和肿瘤等章节。各论是研究和阐明各系统（器官）的每种疾病病因、发病机制及病变发生、发展的特殊规律,属系统病理学（systemic pathology），包括心血管系统疾病、呼吸系统疾病、消化系统疾病、淋巴造血系统疾病、泌尿系统疾病、生殖系统和乳腺疾病及传染病等。 二、病理学在医学中的地位病理学需以基础医学中的解剖学、组织胚胎学、生理学、生物化学、细胞生物学、分子生物学、微生物学、寄生虫学和免疫学等为学习的基础，同时又为临床医学提供学习疾病的必要理论。因此，病理学在基础医学和临床医学之间起着十分重要的桥梁作用。 三、病理学的研究方法 （一）人体病理学研究方法 1、尸体剖验（autopsy）:简称尸检，即对死亡者的遗体进行病理剖验，是病理学的基本研究方法之一。 2、活体组织检查（biopsy）：简称活检,即用局部切取、钳取、细针吸取、搔刮和摘取等手术方法, 从患者活体获取病变组织进行病理检查。活检是目前研究和诊断疾病广为采用的方法,特别是对肿瘤良、恶性的诊断上具有十分重要的意义。 3、细胞学检查（cytology）：是通过采集病变处脱落的细胞,涂片染色后进行观察。 （二）实验病理学研究方法 1 、动物实验：运用动物实验的方法,可以在适宜动物身上复制出某些人类疾病的模型,并通过疾病复制过程可以研究疾病的病因学、发病学、病理改变及疾病的转归。 2、组织培养和细胞培养：将某种组织或单细胞用适宜的培养基在体外培养,可以研究在各种病因作用下细胞、组织病变的发生和发展。 四、病理学观察方法和新技术的应用 1 、大体观察：运用肉眼或辅以放大镜、量尺、和磅秤等工具对大体标本及其病变性状（外形、大小、重量、色泽、质地、表面及切面形态、病变特征等）进行细致的观察和检测。 2、组织和细胞学观察：将病变组织制成切片,经不同的方法染色后用显微镜观察,通过分析和综合病变特点,可作出疾病的病理诊断。 3、组织化学和细胞化学观察：通过应用某些能与组织细胞化学成分特异性结合的染色试剂, 显示病变组织细胞的化学成分的改变，从而加深对形态结构改变的认识和代谢改变的了解，特别是对一些代谢性
《超微病理学》课程主要内容 超微结构病理学( Ultrastructural pathology),简称超微病理学，它是在超微水平或分子水平上观察研究病理状态下细胞的超微变化,在超微水平和分子水平上揭示疾病的发生机理及疾病的发生、发展和转化的规律。 随着现代化电镜和分子生物学技术的迅猛发展，医学基础理论取得了许多重要进展，利用细胞超微病变方法来认识、观察某些器官和组织的超微结构和超微病变,并根据需要将细胞病理学的理论和方法应用于科学研究之中。电镜技术是打开微观世界大门的一把钥匙,它是当今分子病理学不可缺少的研究手段,因此人们把它喻为超微观世界(或分子世界)的眼睛。超微病理学等新学科的出现,标志着病理学已不仅从细胞和亚细胞水平、而且深入到从分子水平、以及人类遗传基因突变和染色体畸变去认识疾病,发现疾病的起因。超微病理学就是从细胞超微结构水平以至分子水平研究疾病的病因、发病机理、病理变化和探索疾病防治的重要基础课程。 开设此课程的目的，就是使学生通过学习了解掌握人体基本组织和病变，进而了解掌握细胞和重要器官常见病超微病理的基本知识、方法和理论，拓宽学生视野，提高分析问题和解决问题的能力，为今后独立科研推进中医药现代化打好基础。 本课程中的基本教学内容包括：电子显微镜原理、细胞的超微结构及其基本病变、肝脏超微病理学、心血管系统常见疾病的超微病理学、肾脏超微病理学、神经肌肉系统常见疾病的超微病理学、呼吸系统常见疾病的超微病理学、电镜生物样本制作等8个主要的学习内容。 电子显微镜原理是介绍了超微病理学的发展史、电子显微镜与光学显微镜的区别、电子显微镜的常见类型、透射和扫描电子显微镜的成像原理。 细胞的超微结构及其基本病变是讲述细胞膜、细胞核、各种细胞器的基本超微结构和功能及常见的超微病理变化。 心血管系统常见疾病的超微病理学是讲述正常心肌细胞的超微结构、心绞痛、心肌梗死、动脉粥样硬化等疾病的超微结构变化特点。 肝脏超微病理学是介绍肝细胞、肝窦状隙和窦周隙的基本结构及其基本病变；
纳米纤维素超微结构的表征与分析 唐丽荣,黄彪＊,李玉华,欧文,陈学榕 【摘要】摘要:采用场发射环境扫描电镜(FEGE-SEM)、场发射透射电镜(FETEM)和原子力显微镜(AFM)等仪器对硫酸水解法制备的纳米纤维素(NCC)进行超微结构的表征与分析。结果表明:NCC在水分散体系中可形成非常稳定的胶状溶液。由FEGE-SEM观察到微晶纤维素(MCC)呈不规则形状,直径约为15μm。通过硫酸水解制得形状较规整的短棒状NCC,直径范围在 2～50 nm之间。FETEM观察结果与AFM成像基本一致,FETEM观察大多数NCC直径约2～24 nm,长度为50～450 nm。AFM观察样品尺寸与FETEM观察相比所测得的样品尺寸偏大,这与其质地较软有关。X射线衍射(XRD)图谱表明 NCC属于纤维素Ⅰ型,与MCC相比,结晶度由 72.25%增大到 77.29%。 【期刊名称】生物质化学工程 【年(卷),期】2010(044)002 【总页数】4 【关键词】关键词:纳米纤维素;超微结构;分析 【文献来源】https://https://www.doczj.com/doc/4d16799639.html,/academic-journal-cn_biomass-chemical-engineering_thesis/0201248154894.html 纤维素是自然界中最丰富的天然高分子材料,开发可再生的纤维素资源在当前的形势下具有重要的战略意义。作为一种天然高分子化合物,纤维素在性能上存在强度有限等不足,限制了其应用范围,如果将其制备成纳米材料,就可以在一定程度上优化它的性能。天然纤维素里分布着纳米级的晶体纤维素和无定形的纤维素,它们依靠分子内和分子间的氢键以及范德华力维持着纤维素大分子的聚集态
超微结构病理（亚细胞病理） virchous在19世纪中期奠定了细胞病理学说。随着科学信息的进步发展，建立了亚细胞病理，通过对疾病发生发展中超微结构的认识，扩大和加深了对疾病的理解。 一细胞膜 细胞膜是包于细胞表面，将细胞与周围环境隔开的弹性薄膜，厚约7.5~9.0mm，液态镶嵌模型（双分子脂质和蛋白质构） (一）细胞之间连接方式的变化成 1、肿瘤细胞的变化 癌细胞之间的各种连接在数量上比正常细胞间的少，而且细胞之间的间隙扩大。 鳞癌——桥粒数目减少 疣细胞之间、角化棘皮瘤——桥粒增多、丰富 基底细胞癌——癌细胞之间保存着密切的相互黏着。 连接结构的变化对区别未分化癌和肉瘤有所帮助。 有桥粒存在——癌的可能性较大 间胚叶肿瘤——不典型桥粒，类似中间结构。 2、损伤和炎症的变化 正常人的滑膜之间没有中间连接，但在损伤和风湿性关节炎以及绒毛结节性滑膜炎增生时，可出现桥粒或类桥粒。 胞浆中出现桥粒 多核巨细胞中出现——巨噬细胞融合 角化棘皮瘤进行分裂的角化不良细胞中亦可出现。
微绒毛见于正常的肾曲管和肠黏膜上皮。在病理情况下发生数量上的多或少，形态上的气球样变和融合。 肝细胞、胆管上皮细胞微绒毛的变化 微绒毛增加：小鼠肝炎、兔注射抗原抗体之后。 微绒毛消失：肝癌失分化的细胞。 小鼠部分肝切除，胆小管微绒毛消失或减少 微绒毛形态变化：CCl4，30分钟后，微绒毛气球样变。 肠绒毛变化：（中轴含有微丝） 脂肪泻——变短、变宽和融合，排列也不规则。（其它吸收不良时，变化不显著）。 给氨甲喋呤后——扩张和形成水泡。 霍乱弧菌——球状绒毛，毒素及水分通过微绒毛逸出。 毛细胞性白血病，毛细胞有许多突起，甚至在红细胞表面也有分支或不分支的细胞突起。（还出现于特发性血小板减少性紫癜、恶性贫血、何杰金氏病）这种细胞吞饮作用增高。 环境中缺少某些因子或存在某种刺激因子。 （三）纤毛的变化 细胞表面游离面伸出的能摆动的细胞突起，比微绒毛粗而长。 1、复合绒毛表现为纤毛中有许多轴微管存在于共同的基质和一个膜的包绕中。这种变化出现在第三脑室胶样囊肿的衬里上皮、卵巢恶性多囊性畸胎瘤、卵巢癌、鼻乳头状瘤、重度吸烟、支气管癌上皮、过敏状态的上颌窦黏膜、聋子的中耳黏膜 2.、纤毛肿胀，微管脱失和膜的空泡变 纤毛脱落后不再生 二.线粒体Mitochondria
概念结构理论 刘壮虎 北京大学哲学系，liuzhh@https://www.doczj.com/doc/4d16799639.html, 摘要 本文不从概念的外延和内涵出发，而是将概念作为初始出发点，按照概念结构整体论的观点，在思想—概念—语言三者统一的基础上，建立概念结构的形式理论，讨论其基本性质及其意义，并在此基础上研究若干相关的问题。 实际中使用的推理，比我们通常说的逻辑推理要更广泛，本文建立依赖于语言的相对于主体的推理，并根据这种相对的推理建立相对的一致的概念。通过这种一致的概念，讨论不一致信念集的特征。这种推理也可以部分地用于概念的分类上，本文通过两个简单的实例来说明这种方法的应用。 词项的同义是语言学中的重要问题，按整体论的观点，比同义更一般的不可分辨性更为重要，本文给出了概念的不可分辨性的定义，并讨论其在语言中的表现。不同语言间的翻译也是语言学中的重要问题，本文在概念结构的形式理论基础上的对不同语言间的翻译进行了一些初步的讨论。 本文只是在对最简单的语言进行讨论，通过这样的讨论体现概念结构形式理论的思想、方法和研究框架。 §1前言 一、外延和内涵 概念有外延和内涵，是概念研究中的一个教条。我认为，这个教条是错误的，至少是不准确的。 概念有不同类型的，如亚里士多德就提出了十大范畴，而在三段论中使用的只是实体范畴和性质范畴。在讨论概念的外延和内涵时，也往往集中在个体、类和性质的范围内（与实体范畴和性质范畴相当），就算有所推广，也不是所有的概念。就是在个体、类和性质的范围内，概念有外延和内涵也是存在质疑的，如不可数名词的外延、性质化归为类等问题。 对外延和内涵的形式化的研究中，大多数说的是语句的外延和内涵，如各种内涵逻辑，它们与概念的外延和内涵是完全不同。 将内涵看作可能世界到外延的函数（或者在此基础上的修改），对于处理语句的内涵确实是一种比较好的方法，但将这种方法用于处理概念的内涵和外延，却带
生物电镜技术在生物医学领域中的应用 摘要: 随着现代医学细胞超微结构及分子生物学等学科的迅速发展，电子显微镜技术并未像某些人预测的那样随着免疫组化技术的发展而进入了末日。相反,电子显微镜技术也正向超,高分辨率、生物分子及原子水平发展。口述（近年来越来越多的事实证明电镜在人体各种疾病的诊断中仍然发挥着重要的作用。）生物电镜技术在生物和临床医学疾病诊断中作出了巨大的贡献, 并不断开辟着生物医学研究的新领域, 主要从细胞、亚细胞的形态结构上阐明疾病的发生、发展及转归规律, 丰富了传统病理学的知识。口述比如：1.通过对亚细胞结构和病原体的观察, 在生物医学领域利用高性能的电子显微镜观察细胞中各种细胞器正常的和病理的超微结构, 诸如内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体、细胞骨架系统等, 对探明病因和治疗疾病有很大帮助。2.通过研究细胞结构和功能的关系, 也可以研究细胞的通讯与运输、分裂与分化、增殖与调控等生命活动的规律, 电子显微镜也可结合各种制样技术观察病毒、细菌、支原体、生物大分子等的超微结构, 是现代生物医学研究不可替代的工具。口述（随着电镜技术的不断改进以及与多种研究手段相结合, 电子显微镜将在生物医学领域应用会更加广泛。） 口述：引言：首先，我们需要知道的是生物电镜技术是医学生物学工作者深入研究机体的超微结构及其功能的有利手段之一。所谓超微结构，一般指光学显微镜所不能分辨的组织、细胞的细微形态结构（亚显微结构）以及生物大分子的结构。在形态学科，如解剖学、组织学、胚胎学、细胞学、病理学、微生物学、寄生虫学等等之中，电子显微镜技术已成为研究结构的常规方法。在某些机能学科，如生理、生物化学、病理生理、药理等。此外，在临床医学、环境保护科学以及中草药的研究等，电镜技术也做出了重要的贡献，并不断开辟着生物医学研究的新领域，主要从细胞，亚细胞的形态结构上阐明疾病的发生，发展及其病理转归规律。而随着电镜技术的不断改进以及与多种研究手段相结合，电镜技术在生物医学的应用将更加广泛。下面，我们小组将对生物电镜技术在生物医学领域中的应用稍作讲解。分为两个部分。 正文： 一．生物电镜技术在生物和医学中的研究历史 电子显微镜诞生于二十世纪30年代，德国的 Bruche和 Johannson根据电子光学原理，以电子束为介质用电子柬和电子透镜代替传统的光束和光学透镜，
细胞结构又分为显微结构和亚显微结构。 超微结构又称为亚显微结构。指在普通光学显微镜下观察不能分辨清楚的细胞内各种微细结构，在电子显微镜下显示组织和细胞的微细结构，以及不同功能状态与分化发育中的变化称超微结构。 显微结构，是指在光学显微镜下看到的细胞结构。观察、分析则是细胞研究的基本方法，在普通光学显微镜中能够观察到的细胞结构。 《不同海拔火绒草叶绿体超微结构的比较》总结： 用青藏高原东北部3个不同海拔地区的火绒草为材料，通过实验观察并比较了其叶肉细胞中叶绿体的超微结构变化,电镜观察表明,生长于不同海拔地区的火绒草,叶绿体结构差异明显。生长于海拔2 300m处的火绒草,叶绿体基粒片层排列整齐、致密,结构清晰,片层可达32层。生长于海拔2 700m处的火绒草,基粒片层排列不规则,片层下降到十几层,类囊体出现轻微膨大。生长于海拔3 800m处的火绒草,基粒片层则严重扭曲,片层只有几层,类囊体膨大严重,类囊体膨大最宽处可达0.14μm,出现脂质小球。此外,随着海拔的升高,叶绿体的形状有向圆形转变的趋势。火绒草叶绿体基粒叠垛程度随海拔的升高而下降。 《汞胁迫对植物细胞结构与功能的影响》总结: 汞离子会破坏植物细胞的结构，,轻则使植物体内代谢过程发生紊乱,生长发育受阻,重则可造成植物枯萎,甚至衰老死亡。汞离子能毒害叶绿体的类囊体系统，能引起类囊体的解体,使叶绿体发生破坏,因此汞能抑制植物的光合作用,造成光合产物短缺,导致植物生长受阻,甚至衰老或死亡。汞对线粒体和细胞核的毒害也十分明显。汞离子能抑制细胞分裂,汞离子还能使细胞膜出现渗漏，抑制细胞对水分和微量元素的吸收。
《水分胁迫对六种禾草叶绿体和线绿体及光合作用的影响》总结 水分胁迫后,6种牧草的叶绿体均膨大变圆并向细胞中央移动;叶绿体内分布有一定数量的嗜锇颗粒和少量淀粉粒,受伤害严重的叶绿体中的基粒和被膜破损;叶绿体片层系统排列方向发生改变,产生扭曲,类囊体膨胀,质间片层空间变小。线粒体数目均增加,且对水分胁迫的耐受性强于叶绿体，嵴变大且排列紊乱,部分线粒体内的嵴出现一定程度的断裂,变得模糊.线粒体上还出现了少量的嗜锇颗粒。 水分胁迫会导致叶绿体光合机构的破坏,影响叶绿素的生物合成,引起光合CO2同化效率的降低,使叶片光合速率降低。 《盐胁迫对芦苇细胞超微结构的影响》总结 当盐度介于0%~4.0%时，芦苇细胞受损的膜结构发生局部内陷或萎缩变形。细胞器表面变得凹凸不平。当盐度为4.0%时，芦苇细胞叶绿体，线粒体，细胞核等具有膜结构细胞器及细胞壁遭到破坏，造成芦苇细胞膜系统的不可逆损伤，使细胞正常的物质代谢与能量转换和信息传递无法完成，导致芦苇细胞新陈代谢过程的中断。芦苇细胞生命活动趋于停止。在8.0%浓度盐胁迫下，芦苇细胞膜系统结构完全消失解体，导致芦苇细胞直接死亡。 《植物细胞超微结构的研究进展》总结 植物细胞超微结构的研究,着重于结构与功能的关系,重视细胞的整体机能,着重以细胞壁、细胞核及质膜来阐述植物细胞超微结构的研究进展。 细胞壁，早期的研究认为它与物质排出原生质体之外或与壁的代谢有关。细胞核凹入形成假包被的机制和功能目前尚不清楚,对核液泡发生和功能的认识也十分初步。植物细胞普遍存在与质膜相关联的膜囊结构,对这类膜结构的形成和动向大致有两种不同解释。
第四章皮肤的超微结构（重点3个考点） 表皮细胞间的联系1/3 表皮细胞间通过角蛋白丝、跨膜细丝相联系，如： （1）桥粒：是角质形成细胞间连接的主要结构，由相邻细胞的细胞膜发生卵圆形致密增厚而共同构成。 电镜下桥粒呈盘状，直径约为0.2～0.5μm，厚约30～60nm，其中央有20～30nm宽的电子透明间隙，内含低密度张力细丝；间隙中央电子密度较高的致密层称中央层，其粘合物质是糖蛋白；中央层的中间还可见一条更深染的间线，为高度嗜锇层。构成桥粒的相邻细胞膜内侧各有一增厚的盘状附着板，长约0.2～0.3μm，厚约30nm，许多直径约为10nm的张力细丝呈袢状附着于附着板上，其游离端向胞质内返折（胞内细丝），附着板上固有的张力细丝可从内侧钩住张力细丝袢，这些固有张力细丝还可穿过细胞间隙并与中央层纵向张力细丝相连，称为跨膜细丝。 桥粒由两类蛋白构成： 一类是桥粒跨膜蛋白，主要由桥粒芯糖蛋白Dsg和桥粒胶蛋白Dsc构成，它们形成桥粒的电子透明细胞间隙和细胞间接触层。人的桥粒跨膜蛋白在表皮的表达表现为分化特异性。Dsg1和Dsc1主要在棘层上部及颗粒层表达；Dsg2和Dsg3分别分别在基底层及棘层下部表达；Dsc3在基底层及棘层下部均有表达。 另一类为桥粒胞浆蛋白，是盘状附着板的组成部分，主要包括桥粒斑蛋白DP和桥粒斑珠蛋白PG,在表皮全层均有表达。桥粒斑蛋白DP仅存于桥粒斑块，因此是桥粒的特征标志。（2）半桥粒：是基底层细胞与下方基底膜带之间的主要连接结构，系由角质形成细胞真皮侧胞膜的不规则突起与基底膜带相互嵌合而成，其结构类似于半个桥粒。电镜下半桥粒内侧部分为高密度附着斑，基底层细胞的角蛋白张力细丝附着于其上， 致密斑，两侧致密斑与中央胞膜构成夹心饼样结构。致密斑中含 （integrin）等蛋白。（大疱性类天疱疮） 非角质形成细胞2/3 非角质形成细胞 1.表皮黑素单位：1个黑素细胞可通过其树枝状突起向周围约10～36个角质形成细胞提供黑素，形成1个表皮黑素单元。 黑素细胞起源于外胚层的神经嵴，数量约占基底层细胞总数的10％，其数量与部位、年龄有关而与肤色、人种、性别等无关。几乎所有组织内均有黑素细胞，但以表皮、毛囊、黏膜、视网膜色素上皮等处为多。 黑素细胞无桥粒。 HE染色切片中黑素细胞位于基底层，细胞胞质透明，胞核较小，银染色及多巴染色显示细胞有较多树枝状突起。电镜下可见黑素细胞胞质内含有特征性黑素小体，后者为含酪氨酸酶的细胞器，是合成黑素的场所。黑素分为真黑素和褐黑素，原料是酪氨酸。酪氨酸在酪氨酸酶的作用下形成黑素。黑素能遮挡和反射紫外线，保护真皮及深部组织免受辐射损伤。 https://www.doczj.com/doc/4d16799639.html,ngerhans细胞：是由起源于骨髓的单核－巨噬细胞通过一定循环通路进入表皮中形成的免疫活性细胞。多分布于基底层以上的表皮和毛囊上皮中，数量约占表皮细胞总数的3％～5％，密度因部位、年龄和性别而异，一般面颈部较多而掌跖部较少。 Langerhans细胞HE染色及多巴染色阴性（多巴染色染黑素细胞），氯化金染色及ATP 酶染色阳性。光镜下细胞呈多角形，胞质透明，胞核较小并呈分叶状，线粒体、高尔基复合
复习试题 一、名词解释 1. 组织； 2. 内分泌腺； 3. 对称； 4. 闰盘； 5. 自动节律性； 6. 反射弧； 7. 突触； 8. 细胞间质； 9. 器官；10. 系统；11. 无对称；12. 球形对称；13 辐射对称；14. 两辐射对称；15. 两侧对称； 16. 次生性辐射对称；17. 多态现象；18. 螺旋卵裂；19. 辐射卵裂；20. 化石；21. 同律分节； 22. 异律分节；23. 原口动物；24 后口动物；25 哈佛氏系统。 二、填空题 1. 生物体结构与机能的基本功能单位是。 2. 细胞一般比较小，需要显微镜才能看见，通常以为单位计算其大小。 3. 细胞的心态结构与机能是多种多样的，游离的细胞多为；紧密连接的细胞有、和等；具有搜索机能的肌细胞多为或；具有传导机能的神经细胞则为。 4. 动物细胞中具有24种生命所必需的化学元素，其中对生命起着特别重要作用的有6种，分别是、、、、和；另有12种微量元素也是生命不可缺少的。 5. 细胞中的化合物可分为无机物和两大类，前者主要是和；后者主要是、和等。 6. 动物的组织通常可分为、、和四大类。 7. 上皮组织具有、、、、和等。 8. 根据机能的不同，上皮组织可分为、和等。 9. 根据细胞层数和形状的不同，被覆上皮又可分为、、和 等多种类型。 10. 根据结构和功能的差异，结缔组织又可分为、、、 、和等多种。 11. 根据肌细胞的形态结构可将肌肉组织分为、、和 等多种。 12. 神经组织由和组成。 13. 和是神经细胞的主要功能。 14. 一个典型的神经细胞由和组成。 15. 按其功能可将神经元分为、和。 16. 结缔组织是由和组成。 17. 在细胞中与蛋白质合成有关的细胞器是，贮存、加工、转运蛋白质的细胞器是，对细 胞内和进入细胞内的物质起消化作用的细胞器是。 18. 动物细胞不同于植物细胞的特点是、、和。 三、判断与改错题（对的填“T”，错的填“F”并改正）
读图术语：嗜锇性板层小体、酶原颗粒、腺腔、毛细血管、粗面内质网、肾小囊腔、基底膜、足细胞胞体、毛细血管、肾小囊壁层 1、脱水：固定后的组织块含有游离水，不能与包埋剂混合，必须用中间介质（脱水剂）驱除水分，以利于包埋剂浸透渗入。常用脱水剂为酒精或丙酮。市售无水酒精和丙酮往往含有少量水分而纯度不够，可事先加入无水硫酸钠或硫酸铜等干燥剂吸去水分。脱水的时间可根据样品的不同而适当延长或缩短。 2、基膜：上皮细胞基底面与深部编译组织之间的细胞间质形成的薄膜，包括透明层、基板、网版。功能：支持、连接、固定。 3、质膜：亦称为细胞膜。它是细胞与周围环境、细胞与细胞间进行物质交换和信息传递的重要通道。细胞膜的厚度约为7-10nm ，在低倍tem 下观察质膜时，它呈一条致密的细线。在高倍TEM 下，质膜呈现出“两暗一明”的三夹板式结构，称为单位膜。 4、景深：景深不是一种固定的数值，而是与放大倍数和分辨率有关的，用以表达纵深方向层次细节程度的度量。扫描电镜景深大，图像立体感强。扫描电镜的景深比光学显微镜大几百倍，比投射电镜大10 倍左右。 ★线粒体：线粒体的形状多种多样，一般呈线状、粒状或短杆状。光镜下，线粒体直径为0.5-1.0um ，长短不一。电子显微镜下，线粒体由内外两层膜组成。内、外膜之间的腔隙称线粒体外室，内膜围成的腔称线粒体内室。线粒体内膜向内折叠形成[ 山脊] 膜之间的间隙称“[ 山脊] 间隙”，与外室想通。 ★主要功能：是进行氧化磷酸化，合成ATP ，为细胞生命活动提供能量。 ★病理：线粒体对有害因素敏感，易出现超微结构上的异常改变，且在一定范围内又是可逆的，故线粒体是电镜下观察细胞受损的重要形态指标，有人称之为“细胞病变指示器”，是分子细胞病理学检查的重要依据。1. 肿胀，有室内肿胀和室外肿胀；2. 肥大及增生；3. 巨大线粒体及环形、杯形线粒体；4. 线粒体间疝形成；5. 包含物；6 线粒体固缩；7. 急支颗粒增多、增大。 ★高尔基体：在电镜下，不同细胞中高尔基复合体的形态、大小和分布均有很大差异。但其最基本的成分主要包括扁平囊泡、小囊泡和大囊泡三个基本部分组成。扁平囊泡是高尔基复合体的主体部分，一般由3-8 层堆成，表面光滑，囊腔宽约15-20nm ，囊间距约为15-30nm 。小囊泡直径约为40-80nm ，界膜厚约为6nm （和ER 膜接近）。数量较多，与一般吞饮小泡类似，散布于扁平囊泡周围，常见于形成面附近。大囊泡直径为0.1~0.5um ，其界膜约8nm ，其厚度和质膜相近，在一般切面上多见于扁平囊泡扩大的末端，有时可见与之项链，或见于分泌面，所以也称之为分泌泡或浓缩泡。 ★主要功能：1.形成和包装分泌物；2.蛋白质和脂类的糖基化；3.蛋白质的加工改造；4.膜的转化。 ★病理：1. 高尔基复合体肥大；2 猥琐、破坏、消失；3高尔基复合体扩张；4. 内容物的改变。 电镜的类型：超高压电、高压电经、高分辨电镜、普及型电镜、简易型电镜。 样品制备：# 取材、# 固定、脱水（固定后的组织块含有游离水，不能与包埋剂混合，必须用中间介质（脱水剂）驱除水分，以包埋剂浸透渗入。常用脱水剂为酒精或丙酮）、浸透和包埋（一般是石蜡包埋后再用普通的石蜡切片机切片，或是不经石蜡包埋，直接将组织作冷冻切片）、超薄切片术（是应用超薄切片机制备出供投射电镜观察的超薄切片的专门技术。要切除可供透射电镜观察的超薄切片是很不容易的。它取决于浸透包埋的成功与否、切片机的质量和玻璃刀的正确选用，以及操作者的经验等多种因素。 取材： 取材正确与否直接关系到制备出的标本能不能符合观察的要求，取材的要点是：
中北大学 数据库课程设计 概念结构和逻辑结构设计 2012 年 6月 3 日
一、概念结构设计 建立系统数据模型的主要工具是实体-联系图，即E-R图。E-R图的图形符号约定如表1-1所示： 表 1-1 E—R图的图形符号 系统的E-R图，如图1-1所示，每个实体及属性如下： 家庭成员：姓名、称呼、密码、出生日期 收入记录：收入项目编号、收入项目名称、收入人员、收入金额、收入日期 支出记录：支出项目编号、支出项目名称、支出人员、支出金额、支出日期 银行信息：银行账号、银行名称、开户人、存款金额、开户日期 1.家庭成员关系E-R图 2.收入记录E-R图
3.支出记录E-R图 4.银行信息E-R图 5.系统E-R图
二、逻辑结构设计 1.概述 数据库逻辑设计将概念结构转换为某个DBMS所支持的数据模型对其进行优化。 在对该家庭理财管理系统的实体关系图进行了分析之后，分别对其实体、联系作了属性的分析，得出这些实体与联系的主键与码值，为以后对该家庭理财管理系统的数据库的物理设计提供了方便与基础。 2.数据模型 2.1基本的数据模型有: 家庭成员（姓名、称呼、密码、出生日期）； 收入记录（收入项目编号、收入项目名称、收入人员、收入金额、收入日期）; 支出记录(支出项目编号、支出项目名称、支出人员、支出金额、支出日期); 银行信息(银行账号、银行名称、开户人、存款金额、开户日期) ; 2.2经过优化后的数据模型有： 家庭成员（ID，姓名、称呼、密码、出生日期）； 银行信息（银行账号、银行名称、开户人、存款金额、开户日期）； 使用者（ID，帐号，密码）； 收入记录（ID，名称，收入人员，金额，日期）； 支出记录（ID，名称，支出人员，金额，日期）； 管理收入（家庭成员ID，收入记录ID）； 管理支出（家庭成员ID，支出记录ID）； 查看收入（家庭成员ID，收入记录ID）； 查看支出（家庭成员ID，支出记录ID）；
试述肌节的超微结构? 肌节是横纹肌纤维结构和收缩功能的基本单位，是指两条相邻Z线间的一段肌原纤维(或肌丝束)。一个肌节是由1／2I带+A带+1／2I带所组成，中轴为M线，紧邻M线两侧是A带的中央部分H 带，A带外侧分别为1／2I带。粗肌丝位于A带内，中央借M线固定；细肌丝一端固定在Z线，平行于I带内，另一端插入A带的粗肌丝之间，止于H带外侧。肌纤维收缩时，细肌丝向粗肌丝之间滑入，故I带变窄，A带长度不变，而H带也变窄甚至消失，每个肌节变短，肌纤维缩短。 比较大、中、小、微动脉的结构特点及其功能。 ①大、中、小、微动脉的管壁都分3层，从内向外称为内膜、中膜和外膜，以中动脉的3层结构最明显；内膜又分内皮、内皮下层和内弹性膜；中膜含平滑肌或弹性膜；外膜为结缔组织，有营养血管。②大动脉内膜较厚，内弹性膜多层；中膜主要为40～70层弹性膜，弹性膜之间有弹性纤维、环行平滑肌和少量胶原纤维；其功能是维持血液流动的连续性。③中动脉内膜的内皮下层较薄，内弹性膜明显；中膜较厚，由10～40层环形平滑肌组成；外弹性膜较明显；其功能是调节器官的血流量。④小动脉中膜由数层平滑肌纤维构成；较大的小动脉也可见内弹性膜；主要功能是调节器官与组织的血流量，并形成外周阻力，参与正常血压的维持。⑤微动脉无内弹性膜，中膜仅由1～2层平滑肌组成，外膜较薄；是控制微循环的总闸门，调节各组织血流量 试述胃黏膜上皮的结构及其功能意义。 ①胃的黏膜上皮是单层柱状上皮，除少量内分泌细胞外，主要由表面黏液细胞组成。②表面黏液细胞呈 柱状，细胞核卵圆形，位于基部；顶部胞质染色浅淡，PAS反应阳性；电镜下细胞顶部含大量黏原颗粒；相邻细胞间有紧密连接。③上皮下陷形成许多胃小凹，胃小凹底部含干细胞。④表面黏液细胞分泌不溶性黏液，含高浓度HCO3－，覆盖于上皮表面，可将上皮与胃液隔离，并可中和盐酸，抑制胃蛋白酶活性，保护上皮。⑤胃小凹的干细胞分裂分化，补充脱落的表面黏液细胞，使上皮不断更新。这些构成了胃黏膜的自我保护机制 试述精子发生的主要阶段及形态变化？ 从青春期开始后，在腺垂体分泌的促性腺激素的作用下，精子发生开始即从精原细胞到形成精子的过程，它包括三个时期。(1)精原细胞增殖期。①A型精原细胞是最幼稚的生殖细胞，青春期开始后，其不断分裂增殖，一部分子细胞成为干细胞。②另一部分子细胞经历B型精原细胞增殖，分化为初级精母细胞。 (2)精母细胞成熟分裂期。①初级精母细胞经过DNA复制后(4n DNA)，进行第一次减数分裂，形成两个次级精母细胞。②次级精母细胞不进行DNA复制，迅速进入第二次减数分裂，产生两个精子细胞，核型为23，X或23，Y(1nDNA)。减数分裂又称成熟分裂，仅见于生殖细胞的发育过程。经过两次减数分裂，染色体数目减少一半。 (3)精子形成时期。精子细胞由圆形逐渐分化转变成为蝌蚪形精子的过程，称精子形成。①此过程主要变化是核变得极度浓缩，形成精子头部；高尔
棉纤维细胞壁超微结构的原子力显微镜分析1 王禄山1,2，高培基1，时东霞2, 张玉忠1 1山东大学微生物技术国家重点实验室，济南，(250100) 2中国科学院物理研究所纳米物理与器件实验室，北京，(100080) E-mail: Lswang@https://www.doczj.com/doc/4d16799639.html,, Zhangyz@https://www.doczj.com/doc/4d16799639.html, 摘 要：纤维素类生物质的超分子结构具有异质性的特点，其复杂性的结构是生物质转化利用研究的主要障碍。利用原子力显微镜观察棉纤维细胞壁的切面与表面超微结构，发现其基本结构单元——微纤丝排列存在两种方式：一种是交织排列，符合“缨状”微纤结构模型；另一种呈笔直平行有序排列。不同排列方式的微纤丝对纤维素酶的敏感程度不同，交织排列的微纤丝易于完全降解，而平行排列的微纤丝为分段降解。微纤丝结构的不均一性和不同集聚方式是棉纤维三维结构产生异质性的主要原因，而其特征及变化可以利用表面粗糙度参数进行表征；纤维素结构在纳米层次上的定性定量表征将对其酶解转化过程的相关研究产生重要影响。 关键词：微纤丝，超微结构，异质性，原子力显微镜 1.引言 纤维素是自然界中最丰富的有机质，自然界每年光合作用产物的量约为1011吨，是重要的可再生能源物质[1]。纤维素是由葡萄糖分子通过β-1，4糖苷键连接而成的线性高分子，化学组成相对简单，但由于葡萄糖分子链间及链内存在大量氢键，使其聚集形成微纤丝、纤丝及纤维等多层次、聚集态结构，即纤维素超分子结构。纤维素的物理、化学性质不仅取决于其化学组成，更取决于其超分子结构，多层次复杂的超分子结构导致了化学反应可及性的不均一和酶解反应的复杂性，这是导致酶解效率低、难于制备精细化工产品的重要原因[2]。 纤维素结构的研究：一是整体水平，一是超微结构水平[1]。整体水平的分析主要是进行晶体学和光谱学的测定及分析。在天然纤维素中存在的晶体为纤维素I，它含有两种晶态，占优势的三斜晶胞Iα和少量的单斜晶胞Iβ [3, 4]。进一步研究表明Iα是亚稳态的，在退火时向着Iβ转变 [5]；不同的纤维素样品中，两晶态的含量不同，并且同一微纤丝中两种晶态含量也是变化的[4]。在很长的一段时间内，纤维素晶体二态性的存在对其结构的解析造成了很大困难。纯Iα与Iβ的发现为结晶纤维素原子级分辨率的解析奠定了基础[6,7]，13C固态NMR谱测定表明Iα与Iβ都存在两种构象不同的吡喃葡萄糖残基[8]。应用同步加速器及中子衍射技术测定单一晶态的纤维素微晶结构表明，纤维素Iα与Iβ两晶胞结构都由两条平行链组成，链之间都有轻微不同的构象，链间的分子间氢键也不完全相同[9.10]。超微结构水平的测定主要应用显微技术，应用透射电镜（TEM）发现纤维素的结构单元是微 1本课题得到国家自然科学基金（批准号：30270022）、教育部博士点基金（批准号：20020422054）及山东省自然科学基金（批准号：Z2002D03）资助项目的课题资助。 - 1 -
电子显微镜技术与肾脏及其超微结构病变 特点 【摘要】：电子显微镜在临床研究和疾病诊断中作出了巨大的贡献, 并不断开辟着生物医学研究的新领域, 主要从细胞、亚细胞的形态结构上阐明疾病的发生、发展及转归规律, 丰富了传统病理学的知识。本文归纳了电子显微镜技术与肾脏超微结构病变研究中的关键问题，指出了肾脏病变及其超微结构研究的主要进展，讨论了肾脏超微结构病变的类型、影响因素、过程机理等问题。在此基础上，对肾脏超微结构病变规律的研究前景进行了展望。 【关键词】：电子显微镜技术肾脏病变超微结构病变特点 电子显微镜包括扫描电子显微镜和透射电子显微镜两种类型, 利用透射电子显微镜可以观察样品内部超微结构, 利用扫描电子显微镜可以观察样品表面形貌, 立体感强, 在生物医学领域应用较多的是透射电子显微镜。透射电子显微镜的发明为人类在医学科学研究领域做出了巨大的贡献, 早在20 世纪40 年代电子显微镜就在医学上开始发挥其作用, 在病毒学、细胞生物学、组织学、病理学、分子生物学及分子病理学都有应用。电子显微镜技术在肿瘤诊断、病毒和病毒性疾病、系统性疾病等研究领域的应用, 说明其是现代临床研究和疾病诊断中不可缺少的重要工具之一。 电子显微镜技术在医学领域应用特点 随着科学技术的发展, 电子显微镜放大倍数已从第一台电镜的
十几倍提高到现在的百万倍, 因此在生物医学领域利用高性能的电子显微镜观察细胞中各种细胞器正常的和病理的超微结构, 诸如内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体、细胞骨架系统等, 对探明病因和治疗疾病有很大帮助。通过研究细胞结构和功能的关系, 也可以研究细胞的通讯与运输、分裂与分化、增殖与调控等生命活动的规律, 电子显微镜也可结合各种制样技术观察病毒、细菌、支原体、生物大分子等的超微结构, 是现代生物医学研究不可替代的工具。 随着显微医学的发展, 电镜技术将会与免疫学、分子生物学和摄影技术、计算机等技术相结合, 更好的为医学研究提供平台, 还会利用计算机建立三维立体图象, 确切定位细胞位臵及状态, 总之, 电镜技术与其他实验技术的结合最终会推动整个生物医学科学研究。（选自1:《电子显微镜技术在生物医学领域的应用》） 下面具体就肾脏超微结构以及肾脏病变超微结构展开讨论，肾脏病变有很多种，每种病变都有其不同的超微结构病变特点，本文就以下几种病变进行分析，并讨论其特点，来更深入的了解肾脏的病变。 一、硬化性肾炎 硬化性肾小球肾炎（sclerosing glomerulonephritis）不是一个独立的肾小球肾炎病理类型，而是许多类型肾小球肾炎的终末阶段。病变特点是大量肾小球硬化，肾小管萎缩、消失，间质纤维化。起始病变的类型多不能辩认。