第四章缓冲溶液练习题
一、选择题( 共10题)
1. 下列各混合溶液中，具有缓冲作用的是………………………………………………（）
(A) HCl (1 mol·dm-3) + NaAc (2 mol·dm-3)
(B) NaOH (1 mol·dm-3) + NH3 (1 mol·dm-3)
(C) HCl (1 mol·dm-3) + NaCl (1 mol·dm-3)
(D) NaOH (1 mol·dm-3) + NaCl (1 mol·dm-3)
2. 人体中血液的pH值总是维持在7.35 ~ 7.45范围内，这是由于……………………（）
(A) 人体内有大量的水分(水约占体重70 %)
(B) 新陈代谢的CO2部分溶解在血液中
(C) 新陈代谢的酸碱物质等量地溶在血液中
和H2CO3只允许在一定的比例范围中
(D) 血液中的HCO
3
3. 0.36 mol·dm-3 NaAc溶液的pH为(HAc：K a = 1.8 10-5)……………………………（）
(A) 4.85 (B) 5.15 (C) 9.15 (D) 8.85
4. 配制pH = 9.2的缓冲溶液时，应选用的缓冲对是……………………………………（）
(A) HAc-NaAc (K a = 1.8 10-5)
(B) NaH2PO4-Na2HPO4 (K a2= 6.3 10-8)
(C) NH3-NH4Cl (K b = 1.8 10-5)
(D) NaHCO3-Na2CO3 (K a2 = 5.6 10-11)
5. 为测定某一元弱酸的电离常数，将待测弱酸溶于水得50 cm3溶液，把此溶液分成两等份。一份用NaOH中和，然后与另一份未被中和的弱酸混合，测得此溶液pH为4.00，则此弱酸的K a为…………………………………………………………………………………（）
(A) 5.0 10-5(B) 2.0 10-4(C) 1.0 10-4(D) A, B, C均不对
6. 配制pH = 7的缓冲溶液时，选择最合适的缓冲对是…………………………………（）(K a(HAc) = 1.8 10-5，K b(NH3) = 1.8 10-5；
H3PO4：K a1 = 7.52 10-3，K a2 = 6.23 10-8，K a3 = 4.4 10-13；
H2CO3：K a1 = 4.30 10-7，K a2 = 5.61 10-11)
(A) HAc-NaAc (B) NH3-NH4Cl
(C) NaH2PO4-Na2HPO4(D) NaHCO3-Na2CO3
7. 不能配制pH = 7 左右的缓冲溶液的共轭酸碱混合物是…………………………（）
(A) NaHCO3-Na2CO3(B) NaH2PO4-Na2HPO4
? HclO-NaClO (D) H2CO3-NaHCO3
(已知HclO ：K = 3.4 10-8 H2CO3：K1 = 4.2 10-7，K2 = 5.6 10-11H3PO4：K1 = 7.6 10-3，K2 = 6.3 10-8，K3 = 4.4 10-13)
8. 将0.10 mol·dm-3 HAc与0.10 mol·dm-3 NaOH等体积混合，其pH值为
(K a(HAc) = 1.76 10-5)………………………………………………………………………（）
(A) 5.27 (B) 8.73 (C) 6.73 (D) 10.49
9. 用0.20 mol·dm-3 HAc和0.20 mol·dm-3 NaAc溶液直接混合(不加水)，配制1.0
dm 3
pH = 5.00的缓冲溶液，需取0.20 mol ·dm -3 HAc 溶液为…………………………………（ ）
(p K a (HAc) = 4.75)
(A) 6.4 102 cm 3 (B) 6.5 102 cm 3
(C) 3.5 102 cm 3 (D) 3.6 102 cm 3
10. 20 cm 3 0.10 mol ·dm -3的HCl 溶液和20 cm 3 0.10 mol ·dm -3的NaAc 溶液混合，其pH 为 (K a (HAc) = 1.76 10-5)………………………………………………………………… （ ）
(A) 3.97 (B) 3.03 (C) 3.42 (D) 3.38
二、填空题 11.体温为 37℃ 时, 血液的渗透压为 775 kPa, 此时与血液具有相同渗透压的葡萄糖(相对分子质量为 180)静脉注射液的浓度应为 __________________ g ·dm -3。
12.已知K (HAc) = 1.8 10-5，pH 为3.0的下列溶液，用等体积的水稀释后，它们的pH 值为：HAc 溶液_________________；HCl 溶液_________________；HAc-NaAc 溶液________________。13. 4 分 (1) Ag +、Pb 2+、Ba 2+ 混合溶液中，各离子浓度均为0.10 mol ·dm -3，往溶液中滴加K 2CrO 4试剂，各离子开始沉淀的顺序为________________________。
(2) 有Ni 2+、Cd 2+浓度相同的两溶液，分别通入H 2S 至饱和，_____________开始沉淀所需酸度大，而____________开始沉淀所需酸度小。PbCrO 4 K sp = 1.77 10-14 BaCrO 4 K sp = 1.17 10-10 Ag 2CrO 4 K sp = 9.0 10-12 NiS K sp = 3 10-21 CdS K sp = 3.6 10-29
14. 2 分血液中存在 H 2CO 3 -HCO 3- 缓冲溶液，它的作用是除去乳酸(HLac)，其反应方程式为 该反应的平衡常数为 。
(H 2CO 3：K a1 = 4.2 10-7，K a2 = 4.8 10-11，HLac ：K a = 8.4 10-4)。
15.下列物质HCO 3-，NH 4+，Ac 中，属于质子酸的是______________，其共轭碱是
________________。属于质子碱的是________________，其共轭酸是_________________。
16. 2 分同离子效应使难溶电解质的溶解度____________________盐效应使难溶电解质的溶解度________________；后一种效应较前一种效应_____________得多。
三、计算题 ( 共 4题 )17. 10 分 要配制450 cm 3 pH = 9.30的缓冲溶液，需用0.10 mol ·dm -3氨水和0.10 mol ·dm -3盐酸各多少？若在此溶液中含有0.020 mol ·dm -3 MgCl 2，能否产生Mg(OH)2沉淀？( NH 3的p K b = 4.74，K sp (Mg(OH)2) = 1.8 10-11)
18.现有pH 为3.00，5.00，10.00的强酸或强碱溶液：
(1) 将pH = 3.00和pH = 5.00的溶液等体积混合，混合溶液的pH = ？
(2) 将pH = 5.00和pH = 10.00 的溶液等体积混合，混合溶液的pH = ？
19. 在血液中，H 2CO 3-NaHCO 3缓冲对的功能之一是从细胞组织中迅速地除去运动产生的乳酸(HLac ：K (HLac) = 8.4 10-4)。(1) 已知K 1(H 2CO 3)= 4.3 10-7，求HLac
+HCO 3-H 2CO 3 + Lac -的平衡常数K ；(2) 在正常血液中，[H 2CO 3] = 1.4 10-3
mol ·dm -3，[HCO 3-] = 2.7 10-2mol ·dm -3 求pH 值； (3) 若1.0 dm 3血液中加入
5.0 10-3 mol HLac 后，pH 为多少？
20. 5 分 用0.0200 mol 丙酸和0.0150 mol 丙酸钠溶解在纯水中配成1.00 dm 3缓冲溶液，精确计算以下各溶液pH （小数点后两位）：(1) 该缓冲溶液pH 是多少？
(2) 向10.0 cm 3该缓冲溶液加入 1.0010-5 mol NaOH ，溶液pH 是多少？
(3) 取10.0 cm 3该缓冲溶液稀释至1000 cm 3，溶液pH 是多少？丙酸 K a = 1.34
10-5
第四章 缓冲溶液练习题（参考答案）
一、选择题1. (A) 2. (D) 3. (C) 4. (C) 5. (C) 6. (C) 7. (A) 8. (B) 9. (D)
10. (B)
二、填空题 ( 共 6题 15分)11. 54.2 12. HAc 溶液：3.1 HCl 溶液：3.3 NaAc-HAc 溶液：3.0
13. (1) Pb 2+，Ag +，Ba 2+ (2) CdS ，NiS 14. HLac +Zn(NH )34
2+H 2CO 3 + Lac ，
2.0103
15. HCO 3-,NH 4+,CO 32
-,NH 3,HCO 3-，Ac ,H 2CO 3，Hac 16. 减小，增大，小 三、计算题 ( 共 4题 )17. 10 分 9.30 = 14.00 - p K b + lg [NH ][NH ]34+ =14.00-4.74 + lg (.().()/.()/010010450010450
?-??V V V NH HCl HCl 3---(1) V (NH 3) + V (HCl) = 450 --------------------------------------------------- (2)
(1) (2)联立解V (NH 3) = 300 cm 3 V (HCl) = 150 cm 3
溶液pH = 9.30，即pOH = 4.70,[OH ] 2.0 10-5 mol ·dm -3，
当 [Mg 2+] = 0.020 mol ·dm -3时
[Mg 2+][OH ]2 = 0.020 (2.0 10-5)2 = 8 10-12 < K sp (Mg(OH)2 故不能产生 Mg(OH)2沉淀。
18. (1) [H +] = (1.0 10-3 + 1.0 10-5) / 2 = 5.0 10-4 (mol ·dm -3) pH = -lg [H +]=
3.30
(2) [OH ] = (1.0 10-4 - 1.0 10-5) / 2 = 4.5 10-5 (mol ·dm -3) pH = 14 + lg
[OH ] = 9.65
19. 10 分 (1) K =]HLac][HCO []][Lac CO H [332--[H CO ][Lac [HLac][HCO ][H ][H ]HLac) H CO 23-3-12](()..?==??++--K K 34784104310
= 2.0 103 (2) pH = p K 1 - lg c c a s = 6.37 - lg ..14102710
32??--= 6.37 - (-1.28) = 7.65 (3) pH = p K 1- lg c c a s = 6.37 - lg (..)(..)14501027051032
+?-?--= 6.37 - (-0.54) = 6.91 20.5 分 pH = p K a +lg 0.01500.0200
= 4.87 - 0.12 = 4.75 (1)pH = 4.87
+lg 0.0150+0.00100.0200+(-0.0010)
= 4.80 (1) CH 3CH 2COOH + H 2O CH 3CH 2COO - + H 3O + 平衡浓度/ mol ·dm -3
0.000200 - x 0.000150 - x x x
x x -+000200.0)000150.0(= 1.34
10-5 pH = 4.82
不同缓冲液的缓冲范围 pH缓冲液 六十一秒的常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理（2007年6月16日更新）（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 甘氨酸分子量＝75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 （二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 ①使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。 （六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L） NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。冰乙酸11.8 mL稀释至1 L（需标定）。 （七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
（八）磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L） Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。 （九）巴比妥纳-盐酸缓冲液 巴比妥钠分子量＝206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。 （十）Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L） 50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100
常见缓冲溶液的配制 缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。PH缓冲系统对维持生物的正常pH 值，正常生理环境起重要作用。多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们时蛋白质、重碳酸盐缓冲体系。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。 在生化研究工作中，常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH 值的变化往往直接影响到我们工作的成效。如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大，会使酶活性下降甚至完全失活。所以我们要学会配制缓冲溶液。 由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。 柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。 磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。 三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris一缓冲液，在4℃时是8.4，在37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下，缓冲能力很差。 缓冲液的pH值由哪些因素决定？ 设缓冲系统的弱酸的电离常数为K（平衡常数），平衡时弱酸的浓度为[酸]，弱酸盐的浓度为[盐]，则由弱酸的电离平衡式可得下式： 根据此式可得出下列几点结论： （1）缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关。弱酸一定，但酸和盐的比例不同时，可以得到不同的pH值。当酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PK值相同。 （2）酸和盐浓度等比例也增减时，溶液的pH值不便。 （3）酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为最高，比例相差越大，缓冲效率越低，一般地说缓冲液有效缓冲范围为PK±1pH。 从上述可知，只要知道缓冲对的PK值，和要配制的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度）时，可按公式计算出[盐]和[酸]的量。这样算涉及到对数的换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，经计算已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系列出了表格。讲义附录部分节录有磷酸缓冲液的配制表。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算处所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。 经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。 所以500ml 0.1M磷酸缓冲液需要Na2HPO4量为: 需Na2HPO4量为 : 计算好后，按计算结果称好药品，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入50ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，便得所需的缓冲液。 各种缓冲溶液的配制，均按下表按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确的浓度才能进行，如醋酸、NaOH等 常用体系 1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M） X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200ml pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml 2.2 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0
实验一 缓冲溶液的配制和性质、溶液pH 值测定 【实验目的】 1. 学习缓冲溶液及常用等渗磷酸盐缓冲溶液的配制方法。 2. 加深对缓冲溶液性质的理解。 3. 强化吸量管的使用方法。 4. 学习使用pHS-2C 型酸度计。 5. 培养环境保护意识。 【预习作业】 1. 一般性溶液与缓冲溶液有什么不同？ 2. 缓冲溶液的性质有哪些？ 3. 如何衡量缓冲溶液的缓冲能力大小？缓冲溶液的缓冲能力与什么因素有关？ 4. 实验是如何设计以验证缓冲溶液所具有的性质及缓冲容量的影响因素的，设计时有哪些注意事项？ 5. 该如何检测缓冲溶液的pH 值是否发生改变？是否均需要用pH 计？ 6. 本实验属定量测定还是定性测定或半定量测定？ 【实验原理】 普通溶液不具备抗酸、抗碱、抗稀释作用。 缓冲溶液通常是由足够浓度的弱酸及其共轭碱、弱碱及其共轭酸或多元酸的酸式盐及其次级盐组成的，具有抵抗外加的少量强酸或强碱、或适当稀释而保持溶液pH 值基本不变的作用。 本实验通过将普通溶液和配制成的缓冲溶液对加入酸、碱或适当稀释前后pH 数值的变化来探讨缓冲溶液的性质。 根据缓冲溶液中共轭酸碱对所存在的质子转移平衡： HB ? B － +H 3O + 缓冲溶液pH 值的计算公式为： 缓冲比lg a p ] 共轭酸[] 共轭碱[lg a p [HB]][B lg p pH －+=+=+=K K K a 式中p K a 为共轭酸解离常数的负对数。此式表明：缓冲溶液的pH 值主要取决于弱酸的p K a 值，其次决定于其缓冲比。 需注意的是，由上述公式算得的pH 值是近似的，准确的计算应该用活度而不应该用浓度。要配制准确pH 值的缓冲溶液，可参考有关手册和参考书上的配方，它们的pH 值是由精确的实验方法确定的。 缓冲容量（β）是衡量缓冲能力大小的尺度。缓冲容量（β）的大小与缓冲溶液总浓度、
缓冲溶液的配制和性质 实验目的 1．掌握缓冲溶液的配制方法，加深对其性质的理解。 2．掌握刻度吸管、滴管的使用方法。 3．了解pH 计测定溶液pH 的原理，学会使用pH 计。 实验原理 缓冲溶液是由弱酸及其盐或弱碱及其盐组成。对于由弱酸及其盐组成的缓冲体系，其pH 值可用下式表示： ][] [1p pH 酸盐g K a += 因此，缓冲溶液的pH 值除主要决定于p K a 外，还随盐和酸的浓度比而变。只要按不同的浓度比配制溶液，就可得到不同pH 的缓冲溶液。必须指出，由上述公式算得的pH 是近似值，精确的计算应用活度而不应用浓度。 缓冲溶液中具有抗酸及抗碱成分，所以加入少量酸或碱其pH 变化不大。当稀释缓冲溶液时，酸和盐的浓度比不变，故适当稀释对pH 影响不大。缓冲容量是衡量缓冲能力大小的尺度。它的大小与缓冲剂浓度、缓冲组分比值有关。缓冲剂浓度越大，缓冲容量越大；缓冲组分比值为1∶1时，缓冲容量最大。 pH 计测定溶液的pH 值是一种比较精确而又快速的方法(电位法)。pH 计的指示电极(常用玻璃电级)和参比电极(常用甘汞电极)与待测溶液组成一原电池： 玻璃电极∣待测溶液(pH x )‖甘汞电极 甘汞电极的电极电势稳定不变，而玻璃电极的电极电势与待测液的pH 有关，因此通过测定电池的电动势便可求得待测液的pH 。 E x = ?甘 -( ?玻? - 0.059pH x ) 因?玻?不确定，故先用已知pH 的标准液代替待测液测定电池电动势以求算?玻?，这称为定位或校正。 E s = ?甘 -( ?玻? - 0.059pH s ) 两式相减便可求得pH x 。 0.059由2.303F RT 换算所得，该数值随温度而变。在pH 计上可通过温度补偿器加以校准。 器材和药品 1．器材 pH 计、刻度吸管、50mL 烧杯、试管。 2．药品 HAc （0.1mol ·L -1）， NaAc （0.1mol ·L -1）， NH 3·H 2O （0.1mol ·L -1），pH=10的NaOH ， NaOH （0.1mol ·L -1），NH 4Cl （0.1mol ·L -1），HCl （0.1mol ·L -1 ），pH=5的HCl ，pH 广泛 试纸，邻苯二甲酸氢钾(0.05mol ·L -1 ，pH=4.01)，硼酸 (0.01mol ·L -1，pH=9.18)。 实验方法 一、配制缓冲溶液 通过计算，把配制下列四种缓冲溶液所需各组分的体积填入下表(总体积为30mL)。 按表中用量分别配制四种缓冲溶液，然后分别用pH 试纸和pH 计测定它们的pH 值，
附录：常用试剂配制及应用 一、常用缓冲液、试剂的配制 碳酸盐缓冲液(Carbonate-Bicarbonate Buffer) 由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常用于pH>9的缓冲液配制（附表1）。 附表1. 0.2 mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.2～10.7） 磷酸缓冲液(Phosphate Buffers，PB) 磷酸盐是使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值， PO4：pKa1＝2.12，pKa2＝7.21；所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽。NaH 2 HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32。 Na 2 另外，磷酸盐还有钾盐分子形式，一般来说，低温时钠盐难溶，钾盐易溶，因此，配制细胞培养用试剂时常常添加钾盐试剂，但若配制十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用钠盐而不能用钾盐，因为SDS会与磷酸钾生成难溶的十二烷基硫酸钾。 磷酸缓冲液的优点为：①可配制成不同离子强度的缓冲液；②适用pH缓冲范围较宽；③受温度影响缓冲液pH值变化较小；④离子强度对缓冲液pH影响较小，如0.1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化小于0.1。 磷酸缓冲液的缺点是：①磷酸盐易与钙离子（Ca2+）、镁离子（Mg2+）及重金属离子结合生成不溶的沉淀物；②可能干扰某些化学反应过程，如对某些酶的催
化活性具有一定程度的抑制作用。 NaH 2PO 4 的pH值偏酸性，可用作pH<4的缓冲液。 Na 2HPO 4 的pH值偏碱性，可用作pH>10的缓冲液。 而pH＝6～8的中性缓冲液是更常用的缓冲液，需要NaH 2PO 4 与Na 2 HPO 4 两种磷 酸盐混合配制（附表2）。 附表2. 0.2 mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.2） 磷酸盐缓冲溶液（Phosphate-buffered saline, PBS) 磷酸盐缓冲液是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液的渗透压，因此，PBS适用于做细胞缓冲液，常用PBS配制如下。 NaCl 8g KCl 0.2g Na 2HPO 4 1.44g KH 2PO 4 0.24g
缓冲溶液习题Newly compiled on November 23, 2020
第四章 缓冲溶液 难题解析 例4-1 计算pH=，总浓度为 mol·L -1的C 2H 5COOH(丙酸,用HPr 表示)- C 2H 5COONa 缓冲溶液中，C 2H 5COOH 和C 2H 5COONa 的物质的量浓度。若向1 L 该缓冲溶液中加入 mol HCl ，溶液的pH 等于多少 分析 ⑴ 用Henderson —Hasselbalch 方程式直接计算丙酸和丙酸钠的浓度。 ⑵ 加入HCl 后，C 2H 5COOH 浓度增加, C 2H 5COONa 浓度减小。 解 ⑴ 查表4-1，C 2H 5COOH 的p K a = ，设c (HPr) = x mol·L -1。则c (NaPr) =（）mol·L -1 pH ＝p K a +lg Pr) (H ) Pr (-c c =+lg 1-1L m ol L m ol )20.0(??--x x = 解得 x = 即c (HPr) = mol·L -1 c (NaPr) = - mol·L -1 = mol·L -1 ⑵ 加入 mol HCl 后： pH ＝p K a +lg )HPr ()Pr (-n n =+lg 0.010)m ol (0.0850.010)m ol (0.12+-= 例4-2 柠檬酸（缩写H 3Cit ）常用于配制供培养细菌的缓冲溶液。现有500 mL 的 mol·L -1柠檬酸溶液，要配制pH 为的缓冲溶液，需加入 mol·L -1的NaOH 溶液多少毫升 分析 配制pH 为的缓冲溶液，应选NaH 2Cit-Na 2HCit 缓冲系， NaOH 先与H 3Cit 完全反应生成NaH 2Cit ，再与NaH 2Cit 部分反应生成Na 2HCit 。 解 查表4-1,柠檬酸的p Ka 2= ，设H 3Cit 全部转化为NaH 2Cit 需NaOH 溶液V 1 mL
常见缓冲溶液配制方法 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：?取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：?取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。 乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过。 巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：?取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。 枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)：取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2。 枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0)：甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。?取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml混合，摇匀。 氨－氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0。 氨－氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml。 硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0)：取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml。 硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀。 硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0)：取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L氢氧化钠溶液210ml。 醋酸盐缓冲液(pH3.5)：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示)，用水稀释至100ml，即得。 醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0)：取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0，再加水稀释至1000ml。
常见缓冲溶液配制方法公司内部编号：（GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-
常见缓冲溶液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：?取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：?取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH 值至9.0。 乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用 2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过。 巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成 2000ml。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用 2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH 值至3.25～3.30。
常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理 （一）甘氨酸-盐酸缓冲液（mol/L） X毫升mol/L甘氨酸＋Y毫升mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。 甘氨酸分子量＝。 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 （二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（mol/L） X毫升mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。 邻苯二甲酸氢钾分子量＝。mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含g/L。 （三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
Na2HPO4分子量＝；mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量＝；mol/L溶液为35.61 g/L。Na2HPO4·12H2O分子量＝；mol/L溶液为71.64 g/L。C6H8O7·H2O分子量＝；mol/L溶液为21.01 g/L。（四）柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液
① 使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 （五）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（mol/L） 柠檬酸：C6H8O7·H2O分子量＝；mol/L溶液为g/L。 柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝；mol/L溶液为g/L。 （六）醋酸-醋酸钠缓冲液（mol/L）
NaAc·3H2O分子量＝；mol/L溶液为27.22 g/L。冰乙酸mL稀释至1 L（需标定）。（七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（mol/L） X 毫升mol/L KH2PO4+Y毫升mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。 （八）磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（mol/L）
常用缓冲溶液的配制方法 磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 24Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含35.01克/ 升。 C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。 pH 4.0 20mL ：Na2HPO4 0.219g + C4H2O7·H2O 0.258g 柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ） 6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。 pH 4.0 20mL ： C4H2O7·H2O 0.275g + Na3 C6H5O7·2H2O 0.203g
乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ） Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。 pH 4.0 20mL ：NaAc 0.098g + HAc 0.282mL 甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ） 甘氨酸分子量=75.07; 0.2M 溶液含15.01克/升。 pH 10.0 20mL ：甘氨酸0.075g + NaOH 0.013g 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+ 无水Na 2CO 2分子量=105.99;0.1M 溶液为10.60克/升。 Na 2CO 2·10H 2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为28.62克/升。 Na 2HCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。 pH 10.0 20mL ：无水碳酸钠 0.127g +碳酸氢钠0.067g
常用缓冲溶液的配制方法 1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 24 Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。 C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 ① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶 液或浓盐酸调节，冰箱保存。 5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ） 6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。 6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ） Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。 7．磷酸盐缓冲液
242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为 71.64克/升。 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。 （2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L ） 242KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ） 9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）
TBST是TBS+Tween的缩写,TBS是Tris-HCl缓冲盐溶液,为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液 用1N HC1调pH至7.4,Tween为一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力. 如果配置1000ml的TBST： 先称量NaCl 40g ，倒入烧杯中，加DDW蒸馏水400ml,再称量NaCl 47.6g，倒入刚才的那个烧杯中,：由于NaCl的量太多，一次称量不方便，所以分两次称量，且易于溶解）。往烧杯中加入Tris—HCl缓冲液100ml，最后加吐温20， 5ml,转入1000ml 容量瓶中，在定容，转移即可。 TBST缓冲液是以进口粉剂为原材料配制，品质稳定。 ?·主要用于免疫组化和原位杂交，酶联免疫等实验中，清洗免疫印 ?迹膜； ?·无色液体，0.22 μm膜过滤纯化； ?·室温储存，效期为18个月； ?使用说明 ?·1×TBST缓冲液配制：900 ml去离子水与100 ml 10×TBST缓冲液充分混匀； ?友情提示 ?·室温条件下保存，如果低温保存溶液，可能会产生沉淀，可摇晃 ?或加热溶解；为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作； 用来洗细胞的TBS/PBS最好加KCl，这样比较接近体液的电解质比例 其他用途如WB等可以忽略，只要电导和离子浓度符合要求就可以了。个别去垢剂如SDS 遇到钾会沉淀，所以更不能加KCl pH和盐浓度看自己需要而定，不用拘泥于书本，当然一般来说是等渗的150mM NaCl
保存条件： 1：室温保存，12个月 2：如果低温保存溶液，可能会有晶体沉淀产生，可通过摇晃或加热溶解即可使用。注意事项： 1：说明：TBST缓冲液，PH 7.2-7.5； 2：颜色为无色透明液体； 3：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴防护手套操作； 使用说明： 1：使用前将10 X TBS缓冲液和Tween20按1:39混合，注意需在使用前新鲜配制。2：将混合后的TBST缓冲液（10X）加入到9份去离子水中，充分混匀即可使用。
常见缓冲液配制大全 缓冲液 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸 3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。 乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。 巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用 2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。 巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成 2000ml，即得。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。 甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L 氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH 值至3.25～3.30,即得。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。 枸橼酸盐缓冲液 取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml，即得。
常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理 (一)甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L ) X毫升0.2 mol/L甘氨酸+ Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。 甘氨酸分子量=75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 (二)邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L) 邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L。 Na2HPO4 分子量=141.98; 0.2 mol/L 溶液为28.40 g/L。Na2HPO4?2H2O 分子量=178.05; 0.2 mol/L 溶液为35.61 g/L。Na2HPO4-12H2O 分子量=358.22; 0.2 mol/L 溶液为71.64 g/L。 C6H8O7H2O 分子量=210.14 ; 0.1 mol/L 溶液为21.01 g/L。
① 使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 柠檬酸：C6H8O7H2O 分子量=210.14 ; 0.1 mol/L 溶液为21.01 g/L。柠檬酸钠：Na3C6H5O72H2O 分子量=294.12 ; 0.1 mol/L 溶液为29.41 g/L。 （七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L ）
Na2HPO4?2H2O 分子量=178.05; 0.2 mol/L 溶液为35.61 g/L。Na2HPO4?12H2O 分子量 =358.22; 0.2 mol/L 溶液为71.64 g/L。 NaH2PO4-H2O分子量=138.01 ; 0.2 mol/L 溶液为27.6 g/L。 NaH2PO4-2H2O 分子量=156.03; 0.2 mol/L 溶液为31.21 g/L。 巴比妥钠分子量= 206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。（十）Tris-HCI缓冲液（0.05 mol/L） 50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100
第四章缓冲溶液练习题 一、选择题( 共10题) 1. 下列各混合溶液中，具有缓冲作用的是………………………………………………（） (A) HCl (1 mol·dm-3) + NaAc (2 mol·dm-3) (B) NaOH (1 mol·dm-3) + NH3 (1 mol·dm-3) (C) HCl (1 mol·dm-3) + NaCl (1 mol·dm-3) (D) NaOH (1 mol·dm-3) + NaCl (1 mol·dm-3) 2. 人体中血液的pH值总是维持在7.35 ~ 7.45范围内，这是由于……………………（） (A) 人体内有大量的水分(水约占体重70 %) (B) 新陈代谢的CO2部分溶解在血液中 (C) 新陈代谢的酸碱物质等量地溶在血液中 (D) 血液中的HCO3-和H2CO3只允许在一定的比例范围中 3. 0.36 mol·dm-3 NaAc溶液的pH为(HAc：K a = 1.8 ? 10-5)……………………………（） (A) 4.85 (B) 5.15 (C) 9.15 (D) 8.85 4. 配制pH = 9.2的缓冲溶液时，应选用的缓冲对是……………………………………（） (A) HAc-NaAc (K a = 1.8 ? 10-5) (B) NaH2PO4-Na2HPO4 (K a2= 6.3 ? 10-8) (C) NH3-NH4Cl (K b = 1.8 ? 10-5) (D) NaHCO3-Na2CO3 (K a2 = 5.6 ? 10-11) 5. 为测定某一元弱酸的电离常数，将待测弱酸溶于水得50 cm3溶液，把此溶液分成两等份。一份用NaOH中和，然后与另一份未被中和的弱酸混合，测得此溶液pH为4.00，则此弱酸的K a为…………………………………………………………………………………（） (A) 5.0 ? 10-5(B) 2.0 ? 10-4(C) 1.0 ? 10-4(D) A, B, C均不对 6. 配制pH = 7的缓冲溶液时，选择最合适的缓冲对是…………………………………（）(K a(HAc) = 1.8 ? 10-5，K b(NH3) = 1.8 ? 10-5； H3PO4：K a1 = 7.52 ? 10-3，K a2 = 6.23 ? 10-8，K a3 = 4.4 ? 10-13； H2CO3：K a1 = 4.30 ? 10-7，K a2 = 5.61 ? 10-11) (A) HAc-NaAc (B) NH3-NH4Cl (C) NaH2PO4-Na2HPO4(D) NaHCO3-Na2CO3 7. 不能配制pH = 7 左右的缓冲溶液的共轭酸碱混合物是…………………………（） (A) NaHCO3-Na2CO3(B) NaH2PO4-Na2HPO4 ? HclO-NaClO (D) H2CO3-NaHCO3 (已知HclO ：K = 3.4 ? 10-8 H2CO3：K1 = 4.2 ? 10-7，K2 = 5.6 ? 10-11H3PO4：K1 = 7.6 ?10-3，K2 = 6.3 ? 10-8，K3 = 4.4 ? 10-13) 8. 将0.10 mol·dm-3 HAc与0.10 mol·dm-3 NaOH等体积混合，其pH值为 (K a(HAc) = 1.76 ? 10-5)………………………………………………………………………（） (A) 5.27 (B) 8.73 (C) 6.73 (D) 10.49 9. 用0.20 mol·dm-3 HAc和0.20 mol·dm-3 NaAc溶液直接混合(不加水)，配制1.0 dm3 pH = 5.00的缓冲溶液，需取0.20 mol·dm-3 HAc溶液为…………………………………（）(p K a(HAc) = 4.75) (A) 6.4 ? 102 cm3(B) 6.5 ? 102 cm3 (C) 3.5 ? 102 cm3(D) 3.6 ? 102 cm3
常用缓冲液配置Last revision on 21 December 2020
实验室常用缓冲液配置方案 1)1 M Tris-HCl , , 组份浓度：1 M Tris-HCl 配制量：1 L 配制方法： 1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 4. 将溶液定容至1 L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。 2)10×TE Buffer , , 组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA 配制量：1 L 配制方法： 1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。 2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。 3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。 3)1.5 M Tris-HCl 组份浓度：1.5 M Tris-HCl 配制量：1 L 配制方法： 1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调节pH值至。 4. 将溶液定容至1 L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低个单位。 4)3 M 醋酸钠 组份浓度：3M 醋酸钠 配制量：100ml 配制方法： 1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解 2.加入冰醋酸调节pH值至 3.加去离子水将溶液定容至100ml 4高温高压灭菌后，室温保存。 5)PBS Buffer 组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4
陕西中医学院《医用化学》课程设计（首页） 课程名称：医用化学任课教师：职称： 所在系部：医学技术系教研室：化学教研室 授课对象：医学影像授课时间： 课程类型：必修基础课 授课章节：第四章缓冲溶液 基本教材：魏祖期主编《基础化学》第八版, 人民卫生出版社，2013年3月。 自学资源： 1、《无机化学》许善锦主编，人民卫生出版社. 2、《基础化学》第五版.魏祖期主编，人民卫生出版社. 3、《基础化学》徐春祥主编，高等教育出版社. 4、《现代化学基础》朱裕贞主编，化学工业出版社. 5、《现代化学基础》胡忠鲠主编，高等教育出版社. 教学目标： （一）知识目标： 1. 掌握缓冲溶液的概念、组成和作用机制；影响缓冲溶液pH的因素、Henderson-Hasselbalch方程式及应用；缓冲容量的概念、影响因素及有关计算。 2. 熟悉缓冲溶液的配制原则、方法和步骤；血液中的主要缓冲系及其在稳定血液pH过程中的作用。 3. 了解医学上常用的缓冲溶液的配方和标准缓冲溶液的组成。 （二）能力目标：
通过本章节的学习，使学生初步掌握缓冲溶液的组成、缓冲溶液的缓冲机理、缓冲溶液的配制方法、缓冲溶液PH值的计算、缓冲范围、影响缓冲容量的因素以及缓冲溶液在医学上的应用等等，培养学生独立的分析问题和解决问题能力。 （三）情感目标 通过缓冲溶液的学习， 学生特点分析： 本课程针对临床专业大一学生开设，学生在中学阶段选修课程部分内容不讲解，知识结构不系统，在讲解时要精讲，并结合临床专业的实例，调动学生的积极性，培养他们学习化学课程的兴趣。 教学重点： 1.缓冲溶液的概念、组成和缓冲作用的机理；影响缓冲溶液pH的因素及缓冲溶液pH的计算；缓冲溶液的配制原则、方法和步骤；缓冲容量的概念及缓冲容量的有关计算。 教学难点： 1.缓冲容量的概念及缓冲容量的有关计算。 2.缓冲对的选择。 解决方法和处理措施： 1. 通过实验教学设置相关的实验内容，让学生首先了解缓冲容量的概念和影响缓冲容量的因素，然后通过结合实验结果讲述这些因素对缓冲容量的影响情况，并且引出如何计算缓冲容量。 2. 通过医学上的实例说明所选择的缓冲对，然后通过计算得出缓冲溶液的PH值，再说明决定缓冲溶液PH值的因素，进而指出如何选择缓冲对。 教学内容与教学活动： 本章内容知识点多，过程中可以采用多种教学活动，比如人体中的重要缓冲系、人体如何通过呼吸调节自身PH值基本恒定不变，小孩为什么消化能力比成人差等等，均可以采用设问，然后通过平衡的移动等来进行解释。增强学生通过化学原理来解释一些现实问题的能力，培养他们解决问题的能力。 教学媒体的选择和使用方法：
1、选择合适的缓冲对：原则是所选缓冲对弱酸的pKa尽量接近于所需pH，并尽量在缓冲对的 缓冲范围内（pH= pKa±1）。二是所选缓冲对不能与溶液中主物质发生作用。 2、缓冲溶液的总浓度要适当，一般0.1-0.5 mol·L-1之间 3、计算所需缓冲对的量，为方便计算和配制，常用相同浓度的共轭酸、碱溶液，分别取不同体 积混合即可 4、校正，实际pH值与计算pH值常有出入，用pH计或精密pH纸校正。 表1. 常用pH缓冲溶液的配制和pH值 Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions
表2. pH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions
表3. 标准缓冲液pH值与温度对照表
表4。常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 24 Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。 C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。 22
7．磷酸盐缓冲液 242 Na2HPO4·2H2O分子量= 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。 Na2HPO4·2H2O分子量= 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。 242 KH2PO4分子量= 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M） X毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升
磷酸盐缓冲液 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2M） pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.2M NaH2PO4/ml 5.8 8.0 92.0 5.9 10.0 90 .0 6.0 12.3 87.7 6.1 15.0 85.0 6.2 18.5 81.5 6.3 22.5 77.5 6.4 26.5 73.5 6.5 31.5 68.5 6.6 3 7.5 62.5 6.7 43.5 56.5 6.8 49.5 50. 5 6.9 55.0 45.0 7.0 61.0 39.0 7.1 67.0 33.0 7.2 72.0 28.0 7.3 77.0 23.0
7.4 81.0 19.0 7.5 84.0 16.0 7.6 87.0 13.0 7.7 89.5 10.5 7.8 91.5 8.5 7.9 93.0 7.0 8.0 94.7 5.3 Na2HPO4?2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L Na2HPO4?12 H2O分子量＝358.22 0.2M溶液含71.64g/L NaH2PO4?H2O分子量＝138.01 0.2M溶液含27.6g/L NaH2PO4?2H2O分子量＝156.03 0.2M溶液含31.21g/L 磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。 磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。 磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.6)