微柱凝胶技术操作规程 SXYJ-GZ-0228
1目的规范微柱凝胶技术检测操作。
2适用范围采用微柱凝胶技术进行抗人球蛋白试验。
3职责检测者负责按此程序进行微柱凝胶技术操作。
4材料与设备Biovue工作站系统（包括孵育器、离心机）、微柱凝胶卡（Anti-IgG,-C3d;polyspecific）、低离子增强液（BLISS液）、微量加量枪、吸头等、KUBOTA KA-2200型离心机、0.9%无菌生理盐水；根据检测需要准备相应的抗血清及试剂红细胞。5操作方法
5.1待检标本的准备及要求
5.1.1患者血清准备不抗凝血样3-5ml，退缩充分，离心3000rpm/5min分离出血清备用。
5.1.2红细胞悬液的准备 EDTA抗凝血样3400rpm/2min（KA-2200型离心机Ⅲ档离心2次）压积红细胞。取另一小试管作好标记加入190ul生理盐水，加入压积红细胞10ul，混匀，配制成4%红细胞悬液；或加入1ml生理盐水，加入压积红细胞10ul，混匀，配制成0.8%红细胞悬液。
5.2直接抗人球蛋白试验
5.2.1取微柱凝胶卡，做好标记，揭开铝箔封条；
5.2.2加入4%待检红细胞悬液10 ul；
5.2.3离心5min，观察结果。
5.3间接抗人球蛋白试验（添加法）
5.3.1打开孵育器将温度设定为37℃；取微柱凝胶卡，做好标记，揭开铝箔封条；
5.3.2每孔加BLISS液50ul；
5.3.3加入10ul4%红细胞悬液、或者20ul抗体筛选试剂红细胞（sanquin公司）、或者25ul
反定型试剂O细胞（北京金豪公司）；
5.3.4加入患者血清或试剂抗血清40ul；
5.3.537℃孵育15min，离心5min，观察结果。
5.4间接抗人球蛋白试验（重悬法）
5.4.14%红细胞1ml加入3ml生理盐水，900g离心5min，弃上清加入4mlBLISS液，配制
成浓度为1%的红细胞悬液；
5.4.2打开孵育器将温度设定为37℃；取微柱凝胶卡，做好标记，揭开铝箔封条；
5.4.3加入1%的红细胞悬液40ul，加入患者血清或试剂抗血清40ul；
5.4.437℃孵育15min，离心5min，观察结果。
5.5间接抗人球蛋白试验（酶处理法）
5.5.1打开孵育器将温度设定为37℃；取微柱凝胶卡，做好标记，揭开铝箔封条；
5.5.2加入4%的酶处理红细胞悬液10ul，加入患者血清或试剂抗血清40ul；
5.5.337℃孵育15min，离心5min，观察结果。
6结果判定凝集强度判定参考下图标准
阳性结果红细胞凝集为阳性结果，表明红细胞表面存在相应的抗原。无论是否发生凝集，溶血的存在视为阳性结果。
阴性结果无溶血及红细胞未凝集是阴性结果，表明红细胞表面不存在相应的抗原。
7注意事项
7.1微柱凝胶卡室温保存，应在剥除铝箔纸1小时之内使用试剂卡。如果柱内的试剂液面位
于或低于玻璃珠的顶端，请勿使用该试剂卡。
7.2加样时请勿让移液器吸头接触到反应腔的侧壁，一旦发生触碰，请在向下一反应腔中加
样之前更换吸头。
7.3加样后应确保反应物在反应腔中进行孵育，离心前反应物不能与微柱中的抗人球蛋白试
剂相混合。
7.4质量控制设置阳性对照——用含有IgG抗体的人血清或血浆及相关抗原阳性的红细胞
进行抗IgG活性分析。然后BLISS添加法或重悬法执行实验；设置阴性对照——使用不含有非期待红细胞抗体的人血清和血浆及未致敏的红细胞。然后按照BLISS添加法或重悬法执行实验。
7.5实验结束后，从微柱的正、反两面判读凝集和/或溶血结果，在有较强阳性反应的试剂
卡一侧读取并记录反应强度。
8依据
BIOVUE SYSTEM HAND-BOOK CONTENTS
血型鉴定微柱凝胶法 1.目的： 采用正反定型对受检者进行血型鉴定 2.职责： 严格按照血型鉴定试剂说明书操作 3.适用范围： 血库工作人员 4.原理： 凝胶作为微柱凝胶卡的填充物，将生物化学的凝胶分子筛过滤技术、离心技术和血型血清学的抗体特异性结合在一起，当抗原抗体反应时，凝集的红细胞在离心力的作用下不能通过凝胶而留在凝胶上层或游离在凝胶中，呈阳性反应；而抗原抗体没有反应时，未凝集的红细胞在离心力的作用下可通过凝胶而沉积在微柱凝胶管的底部，呈现阴性反应。 5.试剂、仪器及所需材料 ℃保存，主要成分：IgM性质抗-A单克隆试剂：细胞株HA4、ADD、HA5、HA3，来源于河北医科大学生物医学工程中心； IgM性质抗-B单克隆试剂：细胞株BAD、BDF、HB4，来源于河北医科大学生物医学工程中心；IgM性质抗-D单克隆试剂：细胞株RUM-1，来源于英国Millipore公司。 %-1%的A型和B型红细胞 %的生理盐水：安徽双鹤药业有限责任公司 LB-3000医用低速离心机一次性吸管一次性塑料试管 6.标准种类及收集要求 样本应符合《临床输血技术规范》要求，应无严重溶血、无脂血及无纤维蛋白存在，EDTA抗凝的血液标本。 7.检测环境条件： 18-25℃，湿度30%-70% 8.操作程序
血型卡有六个凝集管。其中第一管为抗A凝胶，第二管为抗B凝胶，第三管为抗D凝胶，第四至六管为中性胶。 用生理盐水将待检者的压积红细胞配置成%-1%浓度，分别加入第一至第三管和第六管微管中，每管50ul。 将A型、B型红细胞分别加入到第四和第五管中，每管50ul。
将待检者血浆分别加入到第四至第六管中。每管25ul。 混匀后置专用离心机离心5分钟。 离心结束后，取出观察结果并记录。 9.结果判定 10.注意事项 为了便于鉴别，抗A微管中内容物为蓝色，抗B微管中内容物为黄色，抗D微管中内容物为乳白色，其他三个中性胶中内容物为乳白色。 使用血型卡前重新离心后使用。 若凝胶卡封口开裂、孔中凝胶干涸或有气泡时，不可使用。 撕开凝胶卡的封口膜时，不可用力过猛，以免造成凝胶微孔间的交叉感染。 红细胞悬液的浓度为%-1%，浓度过高或过低会影响检测结果。血浆标本必须充分离心去除纤维蛋白，否则会在微柱凝胶中阻止红细胞沉淀，呈现假阳性反应。 如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，一定要认真分析并向上级主管技术人员报告并讨论。
卡式微柱凝胶试验与传统检验方法对临床输血检验的应用比较 发表时间：2018-03-02T13:14:45.873Z 来源：《医药前沿》2018年1月第3期作者：周文彪[导读] 以卡式微柱凝胶试验展开临床输血检验，可提升一次性检验正确率，为患者输血安全提供有力保障。 （云南省楚雄州人民医院输血科云南楚雄 675000）【摘要】目的：比较卡式微柱凝胶试验与传统检验方法对临床输血检验的应用价值。方法：为158例交叉配血的患者以盐水法、卡式微柱凝胶试验展开临床输血检验，比较检验结果。结果：卡式微柱凝胶试验正定型、反定型一次性检验符合率100.0%、99.4%明显高于盐水法的96.8%、91.8%（P＜0.05）。经交叉配血后，1例患者发生配血不符，占比0.6%。结论：以卡式微柱凝胶试验展开临床输血检验，可提升一次性检验正确率，为患者输血安全提供有力保障，值得推广。【关键词】输血检验；卡式微柱凝胶试验；传统检验【中图分类号】R457.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）03-0137-01 输血是重要的临床辅助治疗手段，要求安全、快速，而展开准确的交叉配血试验对患者用血安全性有重要影响[1]。现阶段临床应用较多的交叉配血检验方法为聚凝胺法、酶法、盐水介质法等，这些传统检验方法操作繁琐，用时较长，极易被外界因素影响，灵敏度较低，输血的安全性有待提高[2]。卡式微柱凝胶试验是新型输血检验方法，操作简便且准确性高。为分析卡式微柱凝胶试验的应用价值，笔者选取158例交叉配血试验患者展开临床研究，现报道如下。 1.资料与方法 1.1 临床资料 选取2016年1月至2017年2月在我院行交叉配血试验的158例患者，其中男95例，女63例，年龄13～71岁，平均（35.4±6.9）岁；所有患者临床资料均完整，其中54例有输血史，10例有妊娠史，1例短期内输血数次，3例有妊娠合并输血史。 1.2 方法 根据规范要求，采集患者肘静脉血3～5ml，以枸橼酸钠抗凝剂行抗凝处理，利用试管对158例患者展开盐水正向定型与反向定型试验。对卡式凝胶管并做标记，以生理盐水制作0.05%红细胞悬液，将待测血清50μl加入A、B两试管，分别加入20μl抗A血清与抗B血清和5%红细胞悬液50μl，将待测血清50μl和抗C血清加入试管C中。在A1与B1食管内加入待测血清、A型及B型血清、0.5%红细胞悬液。检测期间调整温度为37℃并孵化10min，向凝胶试管加入O型血50μl，以1000r/min的速度离心3min，之后展开测量。 1.3 判定标准 阳性：试管中的红细胞全部或部分结合柱内的凝胶；阴性：试管中的红细胞均沉淀至底。 1.4 统计学分析 用SPSS 20.0软件包分析数据，计数资料对比采用χ2检验。P＜0.05为差异显著。 2.结果 2.1 两种试验方法的检验结果 卡式微柱凝胶试验正定型、反定型一次性检验符合率明显高于盐水法（=5.08、10.76，P=0.024、0.001）见表1。 2.2 血型检测结果 158例患者中RhD阴性1例，占比0.6%；E阴性44例，占比27.8%；C阴性11例，占比7.0%；1例患者在交叉配血试验之后发生配血不符，占比0.6%。 3.讨论 在很多疾病治疗中，输血具有无可取代的重要地位，而输血检验是确保患者用血安全的重要环节。传统的输血检验方法如聚凝胺法、酶法及盐水法等最低检测限度较高，自动化程度不佳，且操作比较麻烦，难以标准化，若患者为危急重症，一旦输血延误将会导致患者疾病治疗受到影响，严重时可危及患者生命安全[3]；若配型不准则会导致抗凝现象，甚至可诱发血管内栓塞，导致残疾或死亡。因此输血前展开准确、快速的配对十分重要。 过去临床常用的传统检验方法在血清配对、血型配对方面的准确度有待提高，与此同时因配对不准引发的医疗事故也并不少见，这些给患者及医院均造成了不良影响[4]。近年来，卡式微柱凝胶试验在输血检验中的应用逐渐增多。卡式微柱凝胶试验属于血型血清配对的新型、迅捷检验方法，以抗人球蛋白为基础，展开血型鉴定和配血。其工作原理是借助细小凝胶颗粒构成滤网，与系统调控下的离心机器配合，可迅速将非凝结红细胞与凝结红细胞分离，于电脑显示器上反映出不同图谱，检验医师可结合标准解读方法对图谱进行分析，实现标准化输血检验，可在最大限度上降低人为因素给交叉配血检验造成的干扰。卡式微柱凝胶试验可避免传统检测方法的不足，能够快速、准确的实现血液配对，为患者输血安全与迅速的输血治疗提供更多保障。在本次研究中，卡式微柱凝胶试验正定型、反定型一次性检验符合率100.0%、99.4%明显高于盐水法的96.8%、91.8%（P＜0.05）。经交叉配血后，1例患者发生配血不符，占比0.6%。从中可见，卡式微柱凝胶试验的输血检验准确率较高。 本研究中有1例患者经卡式微柱凝胶试验结果并不正确，推断可能是因为患者自身疾病可能会影响到试验结果的准确性，如免疫性溶血性贫血、自身凝血功能障碍或恶性肿瘤等，因此在运用卡式微柱凝胶试验展开输血检验前，应先判断患者疾病。另外，在检验过程中，根据规范标准保存血液病适当处理，之后再展开血清血型检验十分重要，若血液样品的保存时间过长，会影响检测结果的准确性。卡式微柱凝胶试验可减少医护人员和血液样品的接触，能减少医护人员带来的污染，同时又能避免血液样品中可能存在的病原给医护人员健康造成损害。
操作规程编号：YTO-FS-PD383 回柱工安全技术操作规程通用版 In Order T o Standardize The Management Of Daily Behavior, The Activities And T asks Are Controlled By The Determined Terms, So As T o Achieve The Effect Of Safe Production And Reduce Hidden Dangers. 标准/ 权威/ 规范/ 实用 Authoritative And Practical Standards
回柱工安全技术操作规程通用版 使用提示：本操作规程文件可用于工作中为规范日常行为与作业运行过程的管理，通过对确定的条款对活动和任务实施控制,使活动和任务在受控状态，从而达到安全生产和减少隐患的效果。文件下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用。 (一)一般规定 1、回柱时必须按照作业规程规定的方法回柱。 2、回柱前要检查周围顶板、支架是否完好，把各种不安全因素处理好后，再开始回柱。 3、工作面有断梁、缺柱时，必须将断梁、缺柱补齐后方可回柱。 4、回柱要两人配合。一人回柱，一人照明观察顶板，回柱时必须在支架完好的安全地点进行工作，要清理好后退路，打好护身柱，并告知在附近工作的其他人员。 5、回柱顺序一般自下而上，由里向外的方式回柱（特殊情况应在规程或措施内规定）。当顶板来压或遇到其它险情时要停止回柱，待处理安全后再回柱。 6、回柱前要详细观察顶板的滑纹变化情况，根据具体情况采取相应的回柱方法。 7、工作面上、下两巷放顶线处、断层处及有复合顶板或大面积悬顶和顶板压力过大时，不得人工回柱，应用绞车远距离回柱或用其它安全方式回柱。
Guide operators to deal with the process of things, and require them to be familiar with the details of safety technology and be able to complete things after special training.工贸企业浇铸工安全操作 规程正式版
工贸企业浇铸工安全操作规程正式版 下载提示：此操作规程资料适用于指导操作人员处理某件事情的流程和主要的行动方向，并要求参加 施工的人员，熟知本工种的安全技术细节和经过专门训练，合格的情况下完成列表中的每个操作事 项。文档可以直接使用，也可根据实际需要修订后使用。 1．清除通道和场地的一切障碍物。 2．检查铁水包是否烘干，包底、包耳、包杠、端把是否安全可靠，转动部分是否灵活。禁止使用未烘干的铁水包。 3．与铁水接触的一切工具，使用前必须预热至500℃以上，否则不准使用。 4．铁水不得超过铁水包容积的80％，抬包要平稳慢行，步调一致，防止铁水溅出伤人。 5．用吊车吊运铁水前应检查吊钩、链子是否可靠，吊运时链子不准打结，要有专人负责跟随铁水包，经过路线，不得有
闲杂人员。 6．严格贯彻六不浇： ①铁水温度不够不浇； ②铁水牌号不对不浇； ③不挡渣不浇； ④砂箱不干不浇； ⑤不放外浇口不浇； ⑥铁水不够不浇。 7．浇铸时要准确平稳，不准从冒口往砂箱内倒铁水和看铁水。 8．当铁水浇入砂型时，要随时点燃出汽孔、冒口、箱缝排出的废气、以免毒气和铁水飞溅伤人。 9．剩余的铁水要倒在准备好的铁模或砂坑内，不准倒在砂堆和地面上，防止铁
常见的微生物检测 方法
摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同
时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法：
交叉配血试验标准操作规程 （微柱凝胶抗人球蛋白法） 1.目的 为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用，保证检测结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。 2.适用范围 适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。 3.职责 医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。 4.原理 红细胞血型抗原与不完全抗体（IgG），在抗人球蛋白的桥梁作用下，经一定的离心力，产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体（IgM）直接产生的特异性免疫凝集复合物，被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体；红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部，即判断为阴性反应，表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。 5.所需设备和试剂 普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡 6.检测环境条件 室湿应控制在18~27℃，湿度应保持30%~70%。 7.操作步骤 7.1先将供（受）血标本制备0.5%红细胞低离子介质（LIM）悬液。 7.2撕开卡的封膜，于反应胶中主（次）侧管加供（受）者0.5% 红细胞LIM悬液100μl，加入受（供）血者血浆或血清25μl（或50μl）。 7.3将检测卡37℃孵育15min取出，置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。 结果，表示受（供）血者血浆或血清中含供（受）血者红细胞血 型抗原相应的抗体（不完全抗体IgG或完全抗体IgM），供 受血者血液不相容。
阴性结果，表示供受血者血液相容。 8.质量控制 8.1微柱凝胶试剂卡在有效期内使用，每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。 8.1试剂质量控制方法 8.1.1即作阴、阳性对照试验：撕开检测卡的封膜，于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl。 8.1.2将检测卡于离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。 8.1.3取出，结果判定同7.3 9.注意事项 9.1检测卡若在冰箱储存，使用前须放置实验室平衡至室温。 9.2检测卡试验前，应3000r/min离心1min，正立放置待用。 9.3如因运输过程产生的气泡，可将检测卡放置在漩涡震荡器上震荡，使气泡漂移至胶面为止，3000r/min离心2min。 9.4细菌污染、纤维蛋白析出、抗凝不佳的血，可产生假阳性。 9.5离心速度过快，时间过长，试剂失效等因素均可导致假阴性。 10.相关文件 山东科博试剂仪器有限公司《抗人球蛋白检测卡说明书》
( 操作规程 ) 单位：_________________________ 姓名：_________________________ 日期：_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 回柱放顶工作业操作规程(最新 版) Safety operating procedures refer to documents describing all aspects of work steps and operating procedures that comply with production safety laws and regulations.
回柱放顶工作业操作规程(最新版) 1．工作前应备齐工具和用品。 2．检查与处理 （1）工作区域内的各种支护是否完整可靠，合乎质量要求； （2）顶板是否有冒顶危险或窜矸现象； （3）放顶区域内的材料、浮煤、矸、移溜器等，是否安放整齐和清理干净； （4）各安全出口是否有障碍物，高度是否符合作业规程要求； （5）放顶前检查特殊支架是否按规定移设牢固可靠； （6）顶板冒落情况及工作面有无异常现象； （7）回柱放顶用的支护材料、挡矸帘等是否备齐； （8）使用绞车回柱时还应进行下列检查： ①信号工应检查信号是否灵敏可靠，信号电线是否有损坏或挤
压现象； ②看滑轮工应检查滑轮戗柱、绳套和滑轮是否符合要求； ③绞车司机应检查绞车，绞车压、戗柱、钢丝绳、绳钩和电缆、按钮等是否符合要求； 发现问题，必须及时妥善处理。 3．人工回柱放顶的方法和顺序 （1）按规定距离和质量要求，架设特种支架后，拆除原特种支架； （2）在分段开口处的中间打上半排收尾柱； （3）在新切顶线的梁柱靠采空区侧挂好挡矸帘； （4）在需回梁的煤帮侧梁上从下往上插好扁销，并要打紧； （5）回柱工站在回柱的斜上方进行回柱。回摩擦支柱时，用锤打松水平楔；回单体液压支柱时，用卸载手把慢慢使支柱卸载取出支柱后支设在规定位置； （6）回梁时，站在支架完整的斜上方，用锤打脱扁销后再将梁的圆销打脱，使该梁脱离连接后取出；
浇铸工安全技术操作规程(最 新版) The safety operation procedure is a very detailed operation description of the work content in the form of work flow, and each action is described in words. ( 安全管理 ) 单位：______________________ 姓名：______________________ 日期：______________________ 编号：AQ-SN-0816
浇铸工安全技术操作规程(最新版) 1．清除通道和场地的一切障碍物。 2．检查铁水包是否烘干，包底、包耳、包杠、端把是否安全可靠，转动部分是否灵活。禁止使用未烘干的铁水包。 3．与铁水接触的一切工具，使用前必须预热至500℃以上，否则不准使用。 4．铁水不得超过铁水包容积的80％，抬包要平稳慢行，步调一致，防止铁水溅出伤人。 5．用吊车吊运铁水前应检查吊钩、链子是否可靠，吊运时链子不准打结，要有专人负责跟随铁水包，经过路线，不得有闲杂人员。 6．严格贯彻六不浇： ①铁水温度不够不浇； ②铁水牌号不对不浇；
③不挡渣不浇； ④砂箱不干不浇； ⑤不放外浇口不浇； ⑥铁水不够不浇。 7．浇铸时要准确平稳，不准从冒口往砂箱内倒铁水和看铁水。 8．当铁水浇入砂型时，要随时点燃出汽孔、冒口、箱缝排出的废气、以免毒气和铁水飞溅伤人。 9．剩余的铁水要倒在准备好的铁模或砂坑内，不准倒在砂堆和地面上，防止铁水爆炸伤人。因跑火或其它原因流在地面上的铁水，在未凝固之前不得用砂覆盖，凝固后应及时清除。 10．所有设备使用前应检查安全可靠性，使用后娈清理干净。 XXX图文设计 本文档文字均可以自由修改
(一)、概述 食用被微生物污染的食品而导致的疾病，称作食源性疾病。导致这类疾病的微生物叫食源性致病菌。随着人们居住和卫生条件的不断改善，以及抗生素的滥用，人类对病菌的抵抗能力却在不断下降，食源性疾病一直呈上升的趋势。因此，对食品中致病菌的监测和检验也就越显示其重要性，常规的检验大多依靠培养目标微生物的方法来确定食品是否受到此微生物的污染，这些方法需要一定的培养时间，少则2～3天，多至数周，才能确定。而现行有效的一些快速检测方法不仅可以大大缩短检测时间提高微生物检出率并可用于微生物计数、早期诊断、鉴定等方面，以做到快速、简便、准确。快速方法包括了微生物学、分子化学、生物化学、生物物理学、免疫学和血清学等领域。 （二）、常见、常用的快速、简便的检测微生物数量的方法如下： 1、活细胞计数的改进方法 （1）、旋转平皿计数方法 （2）、疏水性栅格滤膜法（HGMF）或等格法（isogrid method） （3）、血膜系统（Pertrifilm） （4）、酶底物技术（ColiComplete） （5）、直接外荧光滤过技术（DEFT） （6）、“即用胶”系统（SimPlate） 2、用于估计微生物数量的新方法 （1）、阻抗法 （2）、A TP生物发光技术 3、其他方法 （1）、微量量热法 （2）、接触酶测定仪 （3）、放射测定法 （三）、食品中沙门氏菌的快速筛检方法 1、沙门氏菌显色培养基法 2、免疫学方法 3、分子生物学方法 4、自动传导法 （四）、大肠杆菌O157：H7快速检测方法 大肠杆菌O157：H7肠出血性大肠杆菌的主要血清型，自1982年在美国被分离并命名以来，陆续发现本菌与轻度腹泻、溶血性尿毒综合症、出血性肠炎、婴儿猝死综合症等多种人类病症密切相关，是食源性疾病的一种重要致病菌。E.coli O157：H7属于肠杆菌科埃希氏菌属，为革兰氏阴性杆菌，有鞭毛。近年来作为食品卫生及流行病学的研究热点，E.coli O157：H7的分离和鉴定方法已取得了较大进展。利用其生化特征、免疫原性建立的方法以及现代分子生物学技术的应用，可以从多方面对E.coli O157：H7进行检测。 1、E.coli O157：H7鉴别培养基及显色培养基 2、免疫学检测方法 3、分子生物学方法 （五）、金黄色葡萄球菌的快速检测方法 金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，呈普通串状排列无芽孢，无鞭毛，不能运动。该菌在自然界中分布广泛，如空气、水、土壤、饲料和一些物品上，是最常见的化脓性球菌之一，食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌食物中毒是其肠毒引起的，目前已确认的肠毒素至少有A,B,C1,C2,C3,D,E和F8个型。由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的中毒爆发事件，近年来
编号：CZ-GC-01439 ( 操作规程) 单位：_____________________ 审批：_____________________ 日期：_____________________ WORD文档/ A4打印/ 可编辑 回柱绞车安全操作要求 Safety operation requirements of column return winch
回柱绞车安全操作要求 操作备注：安全操作规程是要求员工在日常工作中必须遵照执行的一种保证安全的规定程序。忽视操作规程在生产工作中的重要作用，就有可能导致出现各类安全事故，给公司和员工带来经济损失和人身伤害，严重的会危及生命安全，造成终身无法弥补遗憾。 1．开车前的检查 (1)检查回柱绞车附近的帮顶情况有无变化。 (2)检查固定绞车的支撑是否可靠。 (3)检查绞车各部螺栓、销子等有无松动、脱落等情况。 (4)检查操作按钮是否完好，是否符合防爆要求；信号装置是否清晰可靠。 (5)检查钢丝绳的磨损、断丝情况是否超过规定。 2．运行中的要求 (1)开车前必须先松开手闸。 (2)运行中必须精神集中，注意信号，注意与回柱工之间的密切配合，信号不清不能开车。 (3)注意观察绞车各部运转情况，如电动机声响、钢丝绳缠绕情况、减速器温度(不得超过60℃)、电动机外壳温度(不得超过70℃)
等。 (4)绞车运行中必须坚守岗位，不得离开绞车，必须时常注意顶板及绞车的支撑固定情况以及钢丝绳的受力情况，发现异常，立即停车处理。 3．停车后要求 停车后要将启动器停电闭锁。 这里填写您的公司名字 Fill In Your Business Name Here
The prerequisite for vigorously developing our productivity is that we must be responsible for the safety of our company and our own lives. （安全管理） 单位：___________________ 姓名：___________________ 日期：___________________ 浇铸工安全操作规程(通用版)
浇铸工安全操作规程(通用版)导语：建立和健全我们的现代企业制度，是指引我们生产劳动的方向。而大力发展我们生产力的前提，是我们必须对我们企业和我们自己的生命安全负责。可用于实体印刷或电子存档（使用前请详细阅读条款）。 1、清除通道和场地的一切障碍物。 2、检查铁水包是否烘干，包底、包耳、包杠、端把是否安全可靠，转动部分是否灵活。禁止使用未烘干的铁水包。 3、与铁水接触的一切工具，使用前必须预热至500℃以上，否则不准使用。 4、铁水不得超过铁水包容积的80％，抬包要平稳慢行，步调一致，防止铁水溅出伤人。 5、用吊车吊运铁水前应检查吊钩、链子是否可靠，吊运时链子不准打结，要有专人负责跟随铁水包，经过路线，不得有闲杂人员。 6、严格贯彻六不浇： （1）铁水温度不够不浇； （2）铁水牌号不对不浇； （3）不挡渣不浇； （4）砂箱不干不浇；
（5）不放外浇口不浇； （6）铁水不够不浇。 7、浇铸时要准确平稳，不准从冒口往砂箱内倒铁水和看铁水。 8、当铁水浇入砂型时，要随时点燃出汽孔、冒口、箱缝排出的废气、以免毒气和铁水飞溅伤人。 9、剩余的铁水要倒在准备好的铁模或砂坑内，不准倒在砂堆和地面上，防止铁水爆炸伤人。因跑火或其它原因流在地面上的铁水，在未凝固之前不得用砂覆盖，凝固后应及时清除。 10、所有设备使用前应检查安全可靠性，使用后娈清理干净。 XX设计有限公司 Your Name Design Co., Ltd.
微柱凝胶法血型鉴定操 作规程 GE GROUP system office room 【GEIHUA16H-GEIHUA GEIHUA8Q8-
微柱凝胶法 抗凝血2.0ml 1标本：EDTA-K 2 2原理： 2.1人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应（其本质为血凝反应）； 2.2检测系统是在微柱中（载体）装有的介质凝胶； 2.3凝胶间隙具有分子筛作用。凝集的红细胞（结合的）被留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。未凝集的红细胞（即未结合、游离的）通过离心后沉入微柱的底部； 2.4微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗A、抗B试剂检测红细胞上相应的血型抗原，从而鉴定红细胞的血型。 3操作： 3.1在A1孔悬空加入50ul标准A1红细胞，在B孔悬空加入50ul标准B红细胞，再在两孔中各加入50ul样品血浆。 3.2在A、B、D、C、E、Ctrl六个孔内分别悬空加入5%病人红细胞悬液10ul 3.3将卡放到戴安娜专用离心机中离心9分钟 3.4离心结束后在白色背景前观察结果 4结果判断： A孔阳性B孔阴性为A型;A孔阴性B孔阳性为B型; A孔阴性B孔阴性为O型;A孔阳性B孔阳性为AB型。
5.注意事项 5.1严格按操作规程操作，认真核对标本并作好标记。 5.2应先加红细胞悬液，然后再加血浆。 5.3为了防止冷凝集现象的干扰，一般应在室温下进行试验。 5.4严格控制离心速度和时间，防止假阳性或假阴性结果。 5.5未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存，用完后放4℃冰箱保存1周。
5.6判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。 6.方法评价 卡式法定型使用安全，操作简单，结果稳定可靠，灵敏度高，重复性好，但费用昂贵，需要特殊的仪器设备。
回柱工安全技术操作规程 (一)一般规定1、回柱时必须按照作业规程规定的方法回柱。2、回柱前要检查周围顶板、支架是否完好，把各种不安全因素处理好后，再开始回柱。3、工作面有断梁、缺柱时，必须将断梁、缺柱补齐后方可回柱。4、回柱要两人配合。一人回柱，一人照明观察顶板，回柱时必须在支架完好的安全地点进行工作，要清理好后退路，打好护身柱，并告知在附近工作的其他人员。5、回柱顺序一般自下而上，由里向外的方式回柱。当顶板来压或遇到其它险情时要停止回柱，待处理安全后再回柱。6、回柱前要详细观察顶板的滑纹变化情况，根据具体情况采取相应的回柱方法。7、工作面上、下两巷放顶线处、断层处及有复合顶板或大面积悬顶和顶板压力过大时，不得人工回柱，应用绞车远距离回柱或用其它安全方式回柱。8、回出的支柱必须实行全承载、无空载支柱。 (二)移回柱绞车9、工作面移回柱绞车时，必须打好临时支架，控制好顶板后再移。10、移绞车时先看好路线，绞车牵柱应找顶板好、吃劲的柱子，新打牵引柱要斜向绞车方向打牢。11、移绞车必须2~3人操作，拴绳后人员必须撤到安全地点，发出开车信号，移动时要稳，防止碰撞支架和挤压电缆。12、绞车移动时，不得损坏电机护罩，并严禁用手或脚捋绳。底板软时要下底梁，调正绞车方向。13、绞车移好后，先把防爆开关打到零位，然后将绞车电缆撤出工作面，盘好放在防爆开关外或顶板完好的地方。14、移上下顺槽绞车除遵照以上有关规定外，还要做到：移车前要看好移车路线是否有障碍物，并确定好绞车新停放的位置，绞车要停放在顶板完好、支架牢固的地方，并留有人行道。15、移绞车前要把牵引绳、戗柱打在顶板上，不准打在支架上。戗柱打好后，人要躲在戗柱前方或绞车后方一侧，开车人员要躲在后方一侧，要停停开开，分段前移。 (三)用吊葫芦回柱16、使用吊葫芦回柱最少2人，1人操作吊葫芦，1人观察顶板，吊葫芦的尾链要拴在牢固的支柱上，大链要调顺，不得拧结，以免将大链拉断。17、使用吊葫芦回柱，如果遇到死柱子，应用掏底或松顶的方法回柱。 (四)回单体液压支柱18、单体液压支柱卸载时，必须使用卸载手把或专用工具。卸载时必须由小到大逐步卸载，待顶板稳定，支柱脱离顶梁后，方可快速卸载。19、单体液压支柱
微柱凝胶卡交叉配血试验常见问题及处理苯露露论坛 微柱凝胶卡交叉配血试验的原理:在微柱凝胶介质中，红细胞抗原与相应抗体结合，利用凝胶的空间位阻，经低速离心，凝集的红细胞悬浮在凝胶上层，而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部(管底尖部)。 微柱凝胶卡交叉配血试验的优点:微柱凝胶实验(又名微柱凝胶血型卡法)有结果清楚明确、结果稳定可保存、灵敏度高、特异性强、可标准化操作、自动化程度高、可检出IgG抗体、标本用量少、降低错误发生率的优点。微柱凝胶卡交叉配血试验常见问题: 1主侧不凝集，次侧凝集 1.1微柱凝胶卡交叉配血试验如果主侧不凝集，而次侧凝集，原因有:?患者的红细胞已经包被了抗体(自身抗体，直接抗人球蛋白试验即DAT阳性反应)。最常见的原因是患者有免疫系统疾病、肿瘤以及骨科患者。?供血者血浆中存在针对患者红细胞的抗体。?患者与供血者的ABO血型不合。 1.2处理 1.2.1患者红细胞直接抗人球蛋白试验:患者05%红细胞悬液50ul加入合血卡主侧或次侧，立即离心5min(900rpm2min;1500rpm3min。程序已设置好。)，取出肉眼判定结果。如果为阳性结果，则说明患者自身红细胞问题，即患者红细胞已被致敏，此袋血可以发出，但报告写清楚:主侧不凝集，次侧凝集，患者红细胞直接抗人球蛋白试验阳性，请缓慢输注。 1.2.2如果患者红细胞直接抗人球蛋白试验为阴性结果，则查找献血员血浆中是否存在不完全抗体。用献血员血浆作不完全抗体筛查试验:08%标准红细胞悬液?、?、?各50ul(1滴)加入相应凝胶管中，再加献血员血浆50ul，37?孵育
15min，离心5min(900rpm2min;1500rpm3min。程序已设置好。)，取出肉眼判断结果。如果为阳性结果，则说明献血员血浆中存在不完全抗体，此袋血不能发出，必须换一袋血再重新合血 1.2.3如果还查找不出原因，则请临床重新抽取血液标本，用新标本重新合血。 2主侧凝集，次侧不凝集 2.1微柱凝胶卡交叉配血试验如果主侧凝集，次侧不凝集，原因有:?患者或供血者ABO定型不正确，或二者的ABO血型不配合。?某些亚型的特异性非常强。?患者血清中存在同种抗体，与供血者红细胞上的相应抗原发生了反应。?供血者红细胞上已经包被了抗体。?患者血清不正常，患者刚输注大分子药物如右旋糖酐。 2.2处理?重新鉴定血型，如属血型错误，则重新用同型血合血。?如属亚型，则此袋血不可以发出，必须换一袋血重新合血。?如果患者刚输注大分子药物如右旋糖酐，则立即停止输注大分子药物，2h后重新抽取血液标本，重新合血。 3主次侧均凝集 3.1微柱凝胶卡交叉配血试验如果主次侧均凝集，原因主要是ABO血型的错误。 3.2处理重新检测受血者和献血者的ABO血型(正反定型)，必须用ABO、RHD血型定型试剂卡(单克隆抗体)(微柱凝胶卡)作血型鉴定，如果正反定型不符，要按相应方法处理，直到结果能做出合理解释为止。 注意事项:?抗人球蛋白凝胶合血卡必须标注患者姓名和献血员血袋号(后4位)，一卡可以合三袋血。?微柱凝胶卡的准备:合血前首先观察微柱凝胶卡的外观如有干胶、杂质、 气泡不可使用，然后用专用离心机离心3~4min。?红细胞悬液浓度不可太浓或太淡，应以0.5%~0.8%为宜。?冬天可将生理盐水37?孵育后配红细胞悬液，遇疑难
文件编号：TP-AR-L1577 There Are Certain Management Mechanisms And Methods In The Management Of Organizations, And The Provisions Are Binding On The Personnel Within The Jurisdiction, Which Should Be Observed By Each Party. （示范文本） 编制：_______________ 审核：_______________ 单位：_______________ 回柱放顶工作业安全操作规程正式样本
回柱放顶工作业安全操作规程正式 样本 使用注意：该操作规程资料可用在组织/机构/单位管理上，形成一定的管理机制和管理原则、管理方法以及管理机构设置的规范，条款对管辖范围内人员具有约束力需各自遵守。材料内容可根据实际情况作相应修改，请在使用时认真阅读。 1．工作前应备齐工具和用品。 2．检查与处理 （1）工作区域内的各种支护是否完整可靠，合 乎质量要求； （2）顶板是否有冒顶危险或窜矸现象； （3）放顶区域内的材料、浮煤、矸、移溜器 等，是否安放整齐和清理干净； （4）各安全出口是否有障碍物，高度是否符合 作业规程要求； （5）放顶前检查特殊支架是否按规定移设牢固
可靠； （6）顶板冒落情况及工作面有无异常现象； （7）回柱放顶用的支护材料、挡矸帘等是否备齐； （8）使用绞车回柱时还应进行下列检查： ①信号工应检查信号是否灵敏可靠，信号电线是否有损坏或挤压现象； ②看滑轮工应检查滑轮戗柱、绳套和滑轮是否符合要求； ③绞车司机应检查绞车，绞车压、戗柱、钢丝绳、绳钩和电缆、按钮等是否符合要求； 发现问题，必须及时妥善处理。 3．人工回柱放顶的方法和顺序 （1）按规定距离和质量要求，架设特种支架后，拆除原特种支架；
内部编号：AN-QP-HT595 版本/ 修改状态：01 / 00 The Procedures Or Steps Formulated T o Ensure The Safe And Effective Operation Of Daily Production, Which Must Be Followed By Relevant Personnel When Operating Equipment Or Handling Business, Are Usually Systematic Documents, Which Are The Operation Specifications Of Operators. 编辑：__________________ 审核：__________________ 单位：__________________ 回柱工安全技术操作规程通用范本
回柱工安全技术操作规程通用范本 使用指引：本操作规程文件可用于保证本部门的日常生产、工作能够安全、稳定、有效运转而制定的，相关人员在操作设备或办理业务时必须遵循的程序或步骤，通常为系统性的文件，是操作人员的操作规范。资料下载后可以进行自定义修改，可按照所需进行删减和使用。 (一)一般规定 1、回柱时必须按照作业规程规定的方法回柱。 2、回柱前要检查周围顶板、支架是否完好，把各种不安全因素处理好后，再开始回柱。 3、工作面有断梁、缺柱时，必须将断梁、缺柱补齐后方可回柱。 4、回柱要两人配合。一人回柱，一人照明观察顶板，回柱时必须在支架完好的安全地点进行工作，要清理好后退路，打好护身柱，并告知在附近工作的其他人员。
行业资料：________ 浇铸工安全操作规程 单位：______________________ 部门：______________________ 日期：______年_____月_____日 第1 页共5 页
浇铸工安全操作规程 1、清除通道和场地的一切障碍物。 2、检查铁水包是否烘干，包底、包耳、包杠、端把是否安全可靠，转动部分是否灵活。禁止使用未烘干的铁水包。 3、与铁水接触的一切工具，使用前必须预热至500℃以上，否则不准使用。 4、铁水不得超过铁水包容积的80％，抬包要平稳慢行，步调一致，防止铁水溅出伤人。 5、用吊车吊运铁水前应检查吊钩、链子是否可靠，吊运时链子不准打结，要有专人负责跟随铁水包，经过路线，不得有闲杂人员。 6、严格贯彻六不浇： （1）铁水温度不够不浇； （2）铁水牌号不对不浇； （3）不挡渣不浇； （4）砂箱不干不浇； （5）不放外浇口不浇； （6）铁水不够不浇。 7、浇铸时要准确平稳，不准从冒口往砂箱内倒铁水和看铁水。 8、当铁水浇入砂型时，要随时点燃出汽孔、冒口、箱缝排出的废气、以免毒气和铁水飞溅伤人。 9、剩余的铁水要倒在准备好的铁模或砂坑内，不准倒在砂堆和地面上，防止铁水爆炸伤人。因跑火或其它原因流在地面上的铁水，在未凝固之前不得用砂覆盖，凝固后应及时清除。 第 2 页共 5 页
10、所有设备使用前应检查安全可靠性，使用后娈清理干净。 浇铸工序行车安全操作规程 a.上岗前不能喝酒，不得带酒意上岗。 b.行车行驶前，应注意周围环境，观察行车轨道两边是否有人和障碍物。 c.定期检查钢丝绳是否缺油、断丝或松动。 d.行车作业人员严禁往下抛掷物件。 e.起吊货物时首先要鸣铃，起吊要平衡，逐档加速。 f.起吊货物时，禁止从人头、车和仪表室上空越过，禁止起吊货物在空中 g.长期停留，禁止在作业中检修。 h.在进入行车两侧时，要使用慢档，并注意停车。 i.做到十不吊: l指挥信号不明或乱指挥不吊； l超负荷不吊； l工件紧固不牢不吊； l吊物上面站人不吊； l安全系数装置失灵不吊； l光线阴暗看不清不吊； l工件埋在地表下不吊； 第 3 页共 5 页
微生物检测手段及注意事项
微生物检测手段及注意事项 微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而
测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 1. 微生物计量法 1.1 体积测量法 又称测菌丝浓度法，通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10 mL）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5 min）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法 可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。