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1表达谱芯片

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康成生物全基因组表达谱芯片技术服务

康成生物为您提供全基因组表达谱芯片技术服务,您只需要提供保存完好的组织或细胞标本,康成的芯片技术服务人员就可为您完成全部实验操作,并提供完整的实验报告。根据您的需要您可选择不同厂家提供的全基因组表达谱芯片,包括Phalanx,Agilent 和 NimbleGen。

Phalanx全基因组表达谱芯片

华联生物科技开发的标准规格的高密度基因组芯片 (Phalanx Whole Genome Microarray)在开发过程中透过台湾工业技术研究院与英国Sanger Institute等国外权威研究机构合作,从设计到生产再到实验的各个步骤中均执行严格标准,采用创新技术,广泛吸收现有芯片的优点,使得其生产的高密度基因组芯片获得了优异的国际品质。康成生物为您提供华联生物高密度基因组芯片及全程技术服务。

●Phalanx Slide TM 专利片基处理技术

华联生物的高密度基因组芯片,探针设计采用台湾工业技术研究院特有探针设计软件平台(Integrated Massive Probes Optimal Recognition Tool,IMPORT)。在芯片的制作过程中,华联生物应用表面化学专利技术(PhalanxSlide TM Technology)对片基表面进行处理,使得片基与寡核苷酸探针的亲和活力更高,背景噪音更低,点阵的均一性更强。

●高速的PhalanxArray探针布放技术

华联生物在点样过程中,采用非接触式基因探针布放技术,并以方阵基因探针高速布放技术 (PhalanxArray Technology)之优势,大量生产。PhalanxArray 同时使用196个排列整齐的PhalanxJets,在一张芯片上布放39,200个均一的探针。PhalanxArray能够布放多达1,000,000张高密度芯片,布放效率和产量是目前市场上一般芯片布放系统的100倍。

●先进的PhalanxJet TM专利点样技术

华联生物开发出独特的PhalanxJet TM系统,结合其先进的非接触式基因探针布放技术和专利的片基处理技术,保证了探针布放的高重复性。尤其重要的是,PhalanxJet TM系统可以最大限度的避免探针布放中可能的探针交叉污染。每个单独的PhalanxJet TM包含200个独立的点样针,分别对应不同的探针,在布放时彼此独立,不会相互干扰。

●严谨的检测探针和控制探针设计

华联生物的的高密度基因组芯片,寡核苷酸探针均经过严格筛选,能特异性检测数据库中的基因,灵敏度高,特异性强。人类基因组表达谱芯片,探针信息主要基于数据库UniGene V.175版,同时整合了各大重要数据库信息。小鼠基因组表达谱芯片,探针信息基于数据库MEEBO (Mouse Exonic Evidence Based Oligonucleotide)。

华联生物的高密度基因组芯片,实验控制探针设计严谨,包括GAM,OGAM,CGAMs,IHCs,ITQC,ETQC等等,并且还采用了多家公司已经设计好的芯片检测探针,如SpotReport Oligo Array 验证系统,Stratagene 的Alien Oligo Array 验证系统,以及Ambion 公司的ArrayControl Sense Oligo Spots 系统等等,从而全面检测样品质量,杂交反应效果,标记反应效果等。使得芯片质量与实验效果得到双重保障。

●生物芯片质量评估标准MAQC规范

依据美国食品药物管理局(FDA)与国际上主要生物芯片企业协商制定的生物芯片质量评估标准MAQC计划规范,华联全基因组表达谱芯片各项指标,包括检出率,再现率,重复性和准确性,均达到或者超过国际先进水平。

●实验全过程反复优化,采用多种独特技术

华联生物的高密度基因组芯片在杂交步骤中采用了独特的热收缩杂交袋,将芯片固定在杂交袋内,在杂交液一定的情况下,有效的提高杂交反应的均一性,从而提升杂交效率,增进杂交效果,使实验结果的准确性和可靠性大大提高。在实验中,康成生物基于华联生物提供的实验条件进一步优化改进。康成生物对RNA样品的质量要求更加严格,在采用Trizol的方法进行RNA抽提后,进一步用DNase消化DNA,并采用Qiagen纯化柱对RNA进行纯化,探针标记和杂交则严格按照华联生物的要求。芯片检测采用先进的GenePix 4000B荧光检测系统以保证优质的实验结果。

Agilent全基因组表达谱芯片

Agilent公司的原位喷墨专利技术(SurePrint)可以实现在1"x 3"的玻璃片基上灵活地、大规模地原位合成60mer的寡核苷酸探针,该技术可以很快很灵活地响应并实现最新的芯片探针设计方案,使研究者及时得到高质量的、最新的芯片,作为研究基因表达变化的利器。

每个芯片探针的设计除了经过软件考虑其Tm、二级结构、序列特异性等之外,还都要经反复实验筛选优化以得到灵敏度和精确度更高、重复性更好的结果。2006年美国FDA发表的现主流芯片平台评估报告MAQC中,Agilent array 的结果与 Taqman array 结果的重复性最高。在国际论文期刊上,也有很多利用Agilent array 平台发表的高质量文章,具体请参阅Agilent 网站。

目前提供的芯片有人、小鼠、大鼠的全基因组表达芯片,每个物种覆盖的基因超过41000个,探针设计综合参考了各种公共数据库,是经过实验验证的经典设计方案。

Agilent Design ID Array format Genes coverage Database source

Whole human genome 14850 4 x 44K ~41,000 Goldenpath, Ensembl, Unigene, Human Genome (Build 33), Refseq, GebBank

whole mouse genome 14868 4 x 44K ~41,000 USC mRNA known genes, Natl. Institute on Aging, Genbank, Unigene, Refseq, Ensembl, RIKEN

whole rat genome 14879 4 x 44K ~41,000 Ensembl, UCSC Goldenpath, Unigene, Refseq, Genbank

Agilent 芯片技术示意图

A. 客户提供实验组(Exp)、对照组(Control)样本或Total RNA;

B. 使用Nanodrop测定RNA 在分光光度计260nm 、280nm和230nm的吸收值,以计算浓度并评估纯度;

C. cDNA放大及荧光标记,实验组(Cy5),对照组(Cy3);

D. 进行芯片杂交及洗脱等步骤;

E. 进行图像扫描及数据分析。

NimbleGen全基因组表达谱芯片

NimbleGen公司运用光介导合成专利技术生产高密度DNA芯片,其探针为50-80mer的长寡核苷酸,在单张玻璃基片上包含385,000个探针,这些长寡核苷酸探针在高严谨杂交条件下可得到高灵敏度及高特异性的无以伦比的理想实验结果。

目前可以提供人、小鼠、大鼠全基因组表达芯片,探针全部根据最新基因组版本设计,每个物种有两种设计方案供您选择,覆盖所有已知或预测基因转录本,详细参数请看下表。

Organism Catalog Number Genes Source Features Probes/ Target

Homo sapiens A4542-00-01 47,633 NCBI HG18, Build 36 385,000 8

Homo sapiens A4487001-00-01 24,000 NCBI HG18, Build 36 4 x 72,000 3

Mus musculus A4543-00-01 42,586 NCBI MM8 385,000 9

Mus musculus A4486001-00-01 18,869 NCBI MM8 4 x 72,000 3

Rattus norvegicus A6184-00-01 26,739 Ensembl RGSC 3.4 385,000 14

Rattus norvegicus A6185-00-01 26,208 Ensembl RGSC 3.4 4 x 72,000 3

全基因组表达谱芯片技术服务

康成生物为您提供全基因组表达谱芯片技术服务,您只需要提供保存完好的组织或细胞标本,康成的芯片技术服务人员就可为您完成全部实验操作,并提供完整的实验报告。主要实验流程如下:

1、样品RNA 抽提

a. 实验对象为组织样品,取适量(50-100mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,使用BioPulverizer TM冰冻粉碎组织,加1ml的RNA抽提试剂Trizol

(Invitrogen),使用Mini-Bead-Beater-16匀浆后抽提RNA。

b. 实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,加1ml的RNA抽提试剂Trizol(样品为贴壁细胞,每10cm2培养皿Trizol使用量为1ml),裂解

后抽提RNA。

2. RNA 质量检测

a.使用Nanodrop测定RNA 在分光光度计260nm 、280nm和230nm的吸收值,以计算浓度并评估纯度。

b.用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳,检测RNA 纯度及完整性。

c. 提供RNA QC报告。

注意:用于芯片检测的RNA 样品,必须是高质量的,完整的,没有RNase污染(降解的样品不能用于标记和芯片检测),没有基因组污染。

3. aRNA样品合成和标记

a.样品RNA进行逆转录反应合成cDNA。

b.cDNA第二链合成

c. aRNA合成及纯化

d. 荧光标记aRNA并纯化

4. 标记效率质量检测

使用Nanodrop检测荧光标记效率,标记效率合格以保证后续芯片实验结果的可靠性。

5. 片段化aRNA

使用Ambion的RNA Fragmentation Reagents对标记好的aRNA进行片段化处理。

6. 芯片杂交

在标准条件下将标记好的探针和高密度基因组芯片进行杂交。

7. 图像采集和数据分析

使用GenePix 4000B 芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度,并将实验结果转换成数字型数据保存,使用配套软件对原始数据进行分析运算。

8. 提供实验报告

包括详细的实验方法以及芯片实验数据和图表。

全基因组表达谱分析方法(DGE)

全基因组表达谱分析方法(DGE)----基于新一代测序技术的 技术路线 该方法首先从每个mRNA的3’端酶切得到一段21bp的TAG片段(特异性标记该基因);然后通过高通量测序,得到大量的TAG序列,不同的TAG序列的数量就代表了相应基因的表达量;通过生物信息学分析得到TAG代表的基因、基因表达水平、以及样品间基因表达差异等信息。技术路线如下: 1、样品准备: a) 提供浓度≥300ng/ul、总量≥6ug、OD260/280为1.8~2.2的总RNA样品; 2、样品制备(见图1-1): a) 类似SAGE技术,通过特异性酶切的方法从每个mRNA的3’末端得到一段21bp 的特异性片段,用来标记该基因,称为TAG; b) 在TAG片段两端连接上用于测序的接头引物; 3、上机测序: a) 通过高通量测序每个样品可以得到至少250万条TAG序列; 4、基本信息分析: a) 对原始数据进行基本处理,得到高质量的TAG序列; b) 通过统计每个TAG序列的数量,得到该TAG标记的基因的表达量; c) 对TAG进行注释,建立TAG和基因的对应关系; d) 基因在正义链和反义链上表达量间的关系; e) 其它统计分析; 5、高级信息分析: a) 基因在样品间差异表达分析; b) 库容量饱和度分析;

c) 其它分析; 测序优势 利用高通量测序进行表达谱研究的优势很明显,具体如下: 1.数字化信号:直接测定每个基因的特异性表达标签序列,通过计数表达标签序列的数目来确定该基因的表达量,大大提高了定量分析的准确度。整体表达差异分布符合正态分布,不会因为不同批次实验引起不必要的误差。 2.可重复性高:不同批次的表达谱度量准确,能够更准确的进行表达差异分析。 3.高灵敏度:对于表达差异不大的基因能够灵敏的检测其表达差异;能够检测出低丰度的表达基因。 4.全基因组分析,高性价比:由于该技术不用事先设计探针,而是直接测序的方式,因此无需了解物种基因信息,可以直接对任何物种进行包括未知基因在内的全基因组表达谱分析,因此性价比很高。 5.高通量测序:已有数据表明,当测序通量达到200万个表达标签时,即可得到样本中接近全部表达基因的表达量数据,而目前每个样本分析可以得到300 万~600万个表达标签。

基因表达谱测序

基因表达谱测序 背景介绍 基因表达谱分析利用HiSeq 2000高通量测序平台对mRNA进行测序,获得10M读长为49nt的原始reads,每一个reads可以对应到相应的转录本,从而研究基因的表达差异情况。与转录组测序相比,基因表达谱分析要求的读长更短,测序通量更小,仅可用于基因表达差异的研究。该方法具有定量准、可重复性高、检测阈值宽、成本低等特点,能很好的替代以往的数字化表达谱分析。 技术路线

生物信息学分析 送样要求 样品要求 1. 所需Total RNA 的量均不少于 20μg/文库,Total RNA 可以保存在DEPC 处理过的水中、75%的乙醇、异丙醇中,具体以什么方式保存请注明。 2. 如提供实验材料为动物组织材料,样品质量需大于2g ; 3. 如提供实验材料为植物样品,样品质量需大于4g ; 4. 如提供实验材料为培养细胞,请提供1×107培养好的细胞; 5. 如提供实验材料为血液样品,请提供≥2ml 的样品。 我们强烈建议在送样的同时客户做好备份,以备后续实验之用。 样品纯度要求 1. OD 260/OD 280在1.8- 2.0之间,RNA 无降解、28S 和18S 核糖体RNA 条带非常亮且清晰(其

大小决定于用于抽提RNA的物种类型),28S的密度大约是18S的2倍;Agilent 2100检测仪分析RNA完整性数据RIN≥8。 2. 无蛋白质、基因组DNA污染,如有污染请去蛋白并进行DNase I处理。 请提供至少一种样品的凝胶电泳或者Agilent 2100检测仪检测图片,并注明其浓度、体积、OD260/OD280、溶剂名称、制备时间、物种来源以及特别备注。最终以我方定量、质检为准。 样品采集 为了保证提取RNA的完整性,确保后续实验的顺利进行,请务必确保样品的新鲜,对于如何确保样品的新鲜针对不同的样品获取材料的方法如下: 1. 动物组织:从活体上迅速的取下组织(切成黄豆粒大小的块状),每切成一个黄豆粒大小的块状立即放入液氮中,重复上述操作,直至足够提取总RNA的量;准备一个50ml的离心管,做相应的标记(样品名称、编号、客户姓名、时间),最好既在管盖上做好标记,也在管壁上做好相应的标记,先放入液氮中预冷2-3min,拿出离心管(离心管的下部分还是保持在液氮中),打开离心管的盖子,将液氮中黄豆粒大小的块状收集进离心管中。 2. 植物组织: (1)如所采集的是果实、麦穗等体积偏大的样品,收集样品请参照1.动物组织取样方法;(2)如采集的是叶片等体积偏小的样品,请尽量采集嫩叶、幼芽等,每采集一片叶片立即放入液氮中,直至足够提取总RNA的量,后续操作请参照动物组织的采集。 (3)如是植物的花,在采集花骨朵的时候请尽量不要采集到花萼、叶片等,每采集一个花骨朵请立即放入液氮中,直至足够提取总RNA的量;后续操作请参照动物组织的采集。3. 如提供实验材料为菌丝体,请取500μl的菌液于1.5ml离心管中,离心去上清,剩余菌丝体放入液氮或干冰中,请提供不少于5管的菌丝体。 样品运输 从液氮中取出准备好的样品,请立即放入干冰中,并用干冰掩埋好样品。请填写完整订单,放入自封袋中与样品一起邮寄。为防止RNA的降解,请确保干冰的量足够运送到目的地。我们强烈建议在寄送RNA样品时将RNA保存在75%的乙醇或异丙醇中。 如是特殊样品,关于送样量和保存问题请与我们联系沟通,以便双方共同协商解决。 提供结果 根据客户需求,提供不同深度的信息分析结果。

(完整版)小鼠表达谱芯片及服务

小鼠表达谱芯片及服务 热点推荐 芯片名称:Agilent SurePrint G3 Mouse Gene Expression 8x60K HOT! 芯片介绍:安捷伦基于G3平台最新设计的小鼠表达谱芯片。涵盖39,430 条Entrez Gene RNAs 外,及16,251条lincRNA。除了检测蛋白编码RNA表达量变化,还能检测非编码lincRNA 的表达量变化。探针设计参照的数据库为:RefSeq Build 37;Ensembl Release 55;Unigene Build 176;GenBank (April 2009);RIKEN 3。lincRNA探针是Agilent和John Rinn 实验室(麻省理工学院-哈佛大学Broad研究所)共同设计的。 Agilent 小鼠表达谱芯片服务 芯片名称:Agilent SurePrint G3 Mouse Gene Expression 8x60K NEW! 芯片介绍:安捷伦基于G3平台最新设计的小鼠表达谱芯片。涵盖39,430 条Entrez Gene RNAs 外,及16,251条lincRNA。除了检测蛋白编码RNA表达量变化,还能检测非编码lincRNA 的表达量变化。探针设计参照的数据库为:RefSeq Build 37;Ensembl Release 55;Unigene Build 176;GenBank (April 2009);RIKEN 3。lincRNA探针是Agilent和John Rinn 实验室(麻省理工学院-哈佛大学Broad研究所)共同设计的。 芯片推荐:Agilent Whole Mouse Genome Oligo Microarray(4×44K) 芯片介绍:Agilent小鼠全基因组表达谱芯片,真正代表小鼠基因组中所有已知基因及其产生的转录本,代表了超过41,174 个小鼠基因和转录本。设计该产品所用的序列信息源于UCSC、NIA、RefSeq、Ensembl、Unigene和RIKEN等数据库,而且绝大多数探针经过Agilent专利的实验验证程序的检验和优化。 Affymetrix 小鼠表达谱芯片服务 芯片名称:GeneChip Mouse Genome 430 2.0 Array 详细介绍:涵盖了39,000个转录本,代表34,000个的小鼠基因。序列信息基于GeneBank、dbEST、RefSeq,The sequence clusters 在UniGene database (Build 107, June 2002)创建,并通过了Whitehead Institute for Genome Research (MGSC, April 2002)小鼠基因组进行了分析比较。 芯片推荐:Affymetrix GeneChip HT MG-430 PM Array Plate 芯片介绍:该款芯片信息与Affymetrix 小鼠基因组430 2.0芯片相同。涵盖了39,000个转录本,代表34,000个的小鼠基因。序列信息基于GeneBank、dbEST、RefSeq,The sequence clusters 在UniGene database (Build 107, June 2002)创建,并通过了Whitehead Institute for Genome Research (MGSC, April 2002)小鼠基因组进行了分析比较。 Phalanx小鼠表达谱芯片及服务 芯片名称:Phalanx MOA V5 Mouse OneArray? 芯片介绍:源自台湾工业研究院专利生产技术,依据美国食品药品管理局(FDA)制定的生物芯片质量评估标准MAQC计划规范,总探针数27,294个,基因探针数26,423个,参考数据库:RefSeq release 42;Ensemble release 59。 Illumina小鼠表达谱芯片服务 芯片推荐:Illumina Mouse WG-6 expression beadchips

第24章 基因表达谱分析的生物信息学方法思考与练习参考答案

第24章 基因表达谱分析的生物信息学方法 思考与练习参考答案 1.据教材表24–3提供的数据信息可以构建一棵决策树,请利用最大信息增益方法写出如何选出根结点中用于分割的特征。 教材表24-3 天气情况与是否去打球的关系数据集 注:该信息表示根据天气情况决定是否出去打球,数据集共包含14个样本,两个类别信息(Yes 、No ),每个样本包含3 个特征信息(Outlook 、Temp 、Windy )。 解:计算用每一个特征进行分割时所获取的信息增益,取信息增益最大的那个特征作为分割特征,以Outlook 特征为例计算(参照练习图24-1) 练习图24-1 同Outlook 特征进行分割所获得的信息增益 )14 9 log 149145 log 145()(220+-=S H

)5 2 log 5253 log 53()(2211+-=S H 0)4 4 log 44()(212=-=S H )52 log 5253 log 53()(2213+-=S H )(14 5 )(144)(145)(1312111S H S H S H S H ++= infor-gain (Outlook )=)()(10S H S H - 同理,计算其他两个特征的信息增益,最后从三个值中选取最大的一个对应的特征作为根结点的分割特征。 2.请从https://www.doczj.com/doc/9e2945886.html,/上下载一原始未经标准化的表达谱数据,并对该数据进行如下分析: (1)对数据进行标准化处理。 (2)对数据进行分类分析。 (3)分别对基因和样本进行聚类分析。 (4)选择特征基因。 (答案略)

基因表达谱芯片的数据分析

基因表达谱芯片的数据分析(2012-03-13 15:25:58)转载▼ 标签:杂谈分类:生物信息 摘要 基因芯片数据分析的目的就是从看似杂乱无序的数据中找出它固有的规律, 本文根据数据分析的目的, 从差异基因表达分析、聚类分析、判别分析以及其它分析等角度对芯片数据分析进行综述, 并对每一种方法的优缺点进行评述, 为正确选用基因芯片数据分析方法提供参考. 关键词: 基因芯片; 数据分析; 差异基因表达; 聚类分析; 判别分析 吴斌, 沈自尹. 基因表达谱芯片的数据分析. 世界华人消化杂志2006;14(1):68-74 https://www.doczj.com/doc/9e2945886.html,/1009-3079/14/68.asp 0 引言 基因芯片数据分析就是对从基因芯片高密度杂交点阵图中提取的杂交点荧光强度信号进行的定量分析, 通过有效数据的筛选和相关基因表达谱的聚类, 最终整合杂交点的生物学信息, 发现基因的表达谱与功能可能存在的联系. 然而每次实验都产生海量数据, 如何解读芯片上成千上万个基因点的杂交信息, 将无机的信息数据与有机的生命活动联系起来, 阐释生命特征和规律以及基因的功能, 是生物信息学研究的重要课题[1]. 基因芯片的数据分析方法从机器学习的角度可分为监督分析和非监督分析, 假如分类还没有形成, 非监督分析和聚类方法是恰当的分析方法; 假如分类已经存在, 则监督分析和判别方法就比非监督分析和聚类方法更有效率。根据研究目的的不同[2,3], 我们对基因芯片数据分析方法分类如下: (1)差异基因表达分析: 基因芯片可用于监测基因在不同组织样品中的表达差异, 例如在正常细胞和肿瘤细胞中; (2)聚类分析: 分析基因或样本之间的相互关系, 使用的统计方法主要是聚类分析; (3)判别分析: 以某些在不同样品中表达差异显著的基因作为模版, 通过判别分析就可建立有效的疾病诊断方法. 1 差异基因表达分析(difference expression, DE) 对于使用参照实验设计进行的重复实验, 可以对2样本的基因表达数据进行差异基因表达分

转录组RNAseq术语解释

RNA-Seq名词解释 1.index 测序的标签,用于测定混合样本,通过每个样本添加的不同标签进行数据区分,鉴别测序样品。 2.碱基质量值 (Quality Score或Q-score)是碱基识别(Base Calling)出错的概率的整数映射。碱基质量值越高 表明碱基识别越可靠,碱基测错的可能性越小。 3.Q30 碱基质量值为Q30代表碱基的精确度在99.9%。 4.FPKM(Fragments Per Kilobase of transcript per Million fragments mapped) 每1百万个map上的reads中map到外显子的每1K个碱基上的fragment个数。计算公式为 公式中,cDNA Fragments 表示比对到某一转录本上的片段数目,即双端Reads数目;Mapped Reads(Millions)表示Mapped Reads总数, 以10为单位;Transcript Length(kb):转录本长度,以kb个碱基为单位。 5.FC(Fold Change) 即差异表达倍数。 6.FDR(False Discovery Rate) 即错误发现率,定义为在多重假设检验过程中,错误拒绝(拒绝真的原(零)假设)的个数占所有被拒绝 的原假设个数的比例的期望值。通过控制FDR来决定P值的阈值。 7.P值(P-value) 即概率,反映某一事件发生的可能性大小。统计学根据显著性检验方法所得到的P 值,一般以P<0.05 为显著,P<0.01为非常显著,其含义是样本间的差异由抽样误差所致的概率小于0.05或0.01。 8.可变剪接(Alternative splicing)

1表达谱芯片

康成生物全基因组表达谱芯片技术服务 康成生物为您提供全基因组表达谱芯片技术服务,您只需要提供保存完好的组织或细胞标本,康成的芯片技术服务人员就可为您完成全部实验操作, 并提供完整的实验报告。根据您的需要您可选择不同厂家提供的全基因组表达谱芯片,包括Phalanx , Agilent和NimbleGen。 Phala nx 全基因组表达谱芯片 华联生物科技开发的标准规格的高密度基因组芯片(Phalanx Whole Genome Microarray)在开发过程中透过台湾工业技术研究院与英国 Sanger Institute等国外权威研究机构合作,从设计到生产再到实验的各个步骤中均执行严格标准,采用创新技术,广泛吸收现有芯片的优点,使得其生产的高密度基因组芯片获得了优异的国际品质。康成生物为您提供华联生物高密度基因组芯片及全程技术服务。 Phalanx Slide TM专利片基处理技术 华联生物的高密度基因组芯片,探针设计采用台湾工业技术研究院特有探针设计软件平台( Integrated Massive Probes Optimal Recognition Tool ,IMPORT )。在芯片的制作过程中,华联生物应用表面化学专利技术( PhalanxSlide TM Technology )对片基表面进行处理,使得片基与寡核苷酸探针的亲和活力更高,背景噪音更低,点阵的均一性更强。 高速的PhalanxArray探针布放技术 华联生物在点样过程中,采用非接触式基因探针布放技术,并以方阵基因探针高速布放技术(PhalanxArray Technology)之优势,大量生产。PhalanxArray 同时使用196个排列整齐的PhalanxJets,在一张芯片上布放39,200个均一的探针。PhalanxArray能够布放多达1,000,000张高 密度芯片,布放效率和产量是目前市场上一般芯片布放系统的100倍。 先进的PhalanxJet TM专利点样技术 华联生物开发出独特的PhalanxJet TM系统,结合其先进的非接触式基因探针布放技术和专利的片基处理技术,保证了探针布放的高重复性。尤其重要 的是,PhalanxJet TM系统可以最大限度的避免探针布放中可能的探针交叉污染。每个单独的PhalanxJet TM包含200个独立的点样针,分别对应不同 的探针,在布放时彼此独立,不会相互干扰。 严谨的检测探针和控制探针设计 华联生物的的高密度基因组芯片,寡核苷酸探针均经过严格筛选,能特异性检测数据库中的基因,灵敏度高,特异性强。人类基因组表达谱芯片,探针 信息主要基于数据库UniGene V.175版,同时整合了各大重要数据库信息。小鼠基因组表达谱芯片,探针信息基于数据库MEEBO (Mouse Exonic Evidence Based Oligonucleotide) 。 华联生物的高密度基因组芯片,实验控制探针设计严谨,包括GAM,OGAM,CGAMs,IHCs,ITQC,ETQC等等,并且还采用了多家公司已经设计好的芯片检测探针,如SpotReport Oligo Array 验证系统,Stratagene 的Alien Oligo Array 验证系统,以及Ambion 公司的ArrayControl Sense Oligo Spots系统等等,从而全面检测样品质量,杂交反应效果,标记反应效果等。使得芯片质量与实验效果得到双重保障。 生物芯片质量评估标准MAQC规范 依据美国食品药物管理局(FDA)与国际上主要生物芯片企业协商制定的生物芯片质量评估标准MAQC计划规范,华联全基因组表达谱芯片各项指标,

转录组测序

真核mRNA测序是基于HiSeq平台,对真核生物特定组织或细胞在某个时期转录出来的所有mRNA进行测序,既可研究已知基因,亦能发掘新基因,全 面快速地获得mRNA序列和丰度信息。真核mRNA测序方法可以分为:有参考转录组、无参考转录组以及数字基因表达谱(DGE)三大类。 技术参数 案例解析 [案例一] mRNA和small RNA转录组揭示新合成异源六倍体小麦杂种 优势的动态部分同源调控 诺禾致源携手中国农业科学院作物科学研究所,利用转录组测序技术,对杂交亲本、新合成异源六倍体小麦的幼苗、穗和种子进行了mRNA和smallRNA测序及信息分析,发现新合成异源六倍体小麦绝大部分基因表现为12类基因表达模式,包括加性表达,少部分的基因表现为非加性,基因的非加性表现出非常强的发育时期特异性,与生长势密切相关;miRNA的丰度随着倍性的增加逐渐下降,新合成异源六倍体小麦中非加性表达的 miRNA也同样表现出亲本显性表 达,miRNA的表达敏感性与生长势和适应性密切相关。该研究揭示了不同倍性 非对等杂种优势的分子基础。 [案例二] 磷酸三(2,3-二氯丙基)酯(TDCPP)对四膜虫生长繁殖的 抑制作用与核糖体相关 诺禾携手华中农业大学,利用转录组测序和信息分析技术,研究了TDCPP处理组和对照组差异基因表达,并对差异表达基因进行KEGG通路分析,发现核糖体基因通路显著富集, 同时伴随胞浆和粗面内质网上核糖体数量减少体积增大。这些探索表明四膜虫可以作为TDCPP反应的生物指标,为后续研究TDCPP作用其他生物的毒理机制提供了新视角。 [案例三] 转录组揭示寄主植物与宿主之间进行RNA交换的机制 参考文献 菟丝子被称作勒死草,会用被称作吸根的专用器官穿透宿主组织与其建立联系,可以吸取宿主的水份与营养物质,也能吸取RNA(mRNA)分子。本研究分别选取菟丝子和拟南芥及番茄的共生体茎上的三段组织进行转录组学的研究,发现寄生植物与寄主之间mRNA的转移量很大且是一种双向转移的模式;两种宿主相比,更多的拟南芥RNA被转移到菟丝子植物之中,而且菟丝子与拟南芥之间较自由的交换,可表明调节菟丝子吸根选择性的机制可能是宿主特异性的,从而揭示了寄主与宿主之间进行RNA转移的遗传机制。 [1] Li A, Liu D, Wu J, et al . mRNA and small RNA transcriptomes reveal insights into dynamic homoeolog regulation of allopolyploid heterosis in nascent hexaploid wheat [J]. The Plant Cell, 2014: tpc. 114.124388.[2] Jing Li, John P , Giesy, Liqin Yu, et al . Effects of Tris (1,3-dichloro-2-propyl) Phosphate (TDCPP) in Tetrahymena Thermophila: Targeting the Ribosome. Scientific Reports. 2015, 5:10562. [3] Kim G, LeBlanc M L, et al . Genomic-scale exchange of mRNA between a parasitic plant and its hosts [J]. Science, 2014, 345(6198): 808-811. 图1 非加性表达miRNA与亲本显性表达miRNA的 等级聚类分析和两者的关联 图2 显著富集的KEGG通路 图3 菟丝子与拟南芥、番茄转移RNA和非转移RNA的表达和富集分析 样品要求文库类型测序策略数据量类型 分析内容 项目周期 真核有参转录组测序 真核无参转录组测序 6 Gb、8 Gb、10 Gb、12 Gb clean data 6 M clean reads 3 Gb clean data 项目数据至少12 Gb clean data 数字基因表达谱(DGE) HiSeq PE150 HiSeq PE150 HiSeq SE50HiSeq PE125普通转录组文库; 链特异性转录组文库 40天50天30天 35天(有参)45天(无参) RNA样品总量≥1.5 μg; RNA样品浓度≥50 ng/μL 参考基因组比对 新转录本预测可变剪切分析SNP/InDel分析 基因表达水平分析RNA-seq整体质量评估 转录因子注释GO/KEGG富集分析蛋白互作网络分析基因共表达网络构建可视化结果展示 参考转录组拼接 转录本/Unigene长度统计 基因功能注释NR,NT,Swiss Prot GO,KEGG,KOG Protein Family CDS预测分析SNP/SSR分析

基因表达谱芯片数据分析及其Bioconductor实现

基因表达谱芯片数据分析及其Bioconductor实现 1.表达谱芯片及其应用 表达谱DNA芯片(DNA microarrays for gene expression profiles)是指将大量DNA片段或寡核昔酸固定在玻璃、硅、塑料等硬质载体上制备成基因芯片,待测样品中的mRNA被提取后,通过逆转录获得cDNA,并在此过程中标记荧光,然后与包含上千个基因的DNA芯片进行杂交反应30min~20h后,将芯片上未发生结合反应的片段洗去,再对玻片进行激光共聚焦扫描,测定芯片上个点的荧光强度,从而推算出待测样品中各种基因的表达水平。用于硏究基因表达的芯片可以有两种:①cDNA芯片;② 寡核昔酸芯片。 cDNA芯片技术及载有较长片段的寡核昔酸芯片采用双色荧光系统:U前常用Cy3—dUTP (绿色)标记对照组mRNA, Cy5—dUTP (红色)标记样品组mRNAUl。用不同波长的荧光扫描芯片,将扫描所得每一点荧光信号值自动输入计?算机并进行信息处理,给出每个点在不同波长下的荧光强度值及其比值(ratio值),同时计算机还给出直观的显色图。在样品中呈高表达的基因其杂交点呈红色,相反,在对照组中高表达的基因其杂交点呈绿色,在两组中表达水平相当的显黄色,这些信号就代表了样品中基因的转录表达情况⑵。 基因芯片因具有高效率,高通量、高精度以及能平行对照研究等特点,被迅速应用于动、植物和人类基因的研究领域,如病原微生物毒力相关基因的。基因表达谱可直接检测mRNA的种类及丰度,可以同时分析上万个基因的表达变化,来揭示基因之间表达变化的相互关系。表达谱芯片可用于研究:①同一个体在同一时间里,不同基因的表达差异。芯片上固定的已知序列的cDNA或寡聚核昔酸最多可以达到30 000多个序列,与人类全基因组基因数相当,所以基因芯片一次反应儿乎就能够分析整个人的基因⑶。②同一个体在不同时间里,相同基因的表达差异。 ③不同个体的相同基因表达上的差异。利用基因芯片可以分析多个样本,同时筛选不同样本(如肿瘤组织、癌前病变和正常组织)之间差异表达的基因,这样可以避免了芯片间的变异造成的误差⑷。张辛燕⑸ 等将512个人癌基因和抑癌基因的cDNA用点样仪点在特制玻片上制成表达谱芯片,对正常人卵巢组织及卵巢癌组织基因表达的差异性进行比较研究,结果发现在卵巢癌组织中下调的基因有23个,上调的基因有15个,初步筛选出了卵巢癌相关基因。Lowe⑹等利用胰腺癌、问充质细胞癌等组织的cDNA制备基因芯片,筛选到胰腺癌细胞中高表达的基因,为医疗诊断、病理研究及新药设计 奠定基础。 2.表达谱芯片的数据处理技术

基因表达谱聚类

基因表达谱聚类分析 [ 文章来源:| 文章作者:| 发布时间:2006-12-21| 字体:[大中小] 学习过程可以采用从全局到局部的策略。采取这种策略时,学习初期可设定较大的交互作用半径R ,随着学习过程的不断推进,逐步减小R ,直至不考虑对邻近单元的影响。邻域的形状可以是正方形或者圆形。 KFM 的聚类结果与K 均值相似,它的优点是自动提取样本数据中的信息,同时也是一种全局的决策方法,能避免陷入局部最小,缺点在于必须实现人为设定类的数目与学习参数,而且学习时间较长。KFM 方法克服了K- 均值聚类的一些缺点:它应用类间的全局关系,能提供大数据集内相似性关系的综合看法,便于研究数据变量值的分布及发现类结构。而且,它具有更稳健更准确的特点,对噪声稳定,一般不依赖于数据分布的形状。 8.4.2.5 其它聚类方法 聚类方法是数据挖掘中的基本方法,数据挖掘的方法很多,在基因表达谱的分析中,除了以上常用方法外,还有一些其它的方法。由于对聚类结果尚没有一种有效的方法进行评价,尤其是对聚类结果的进一步生物学知识发现尚没有新的分析思路和成功应用,因此,科学家们在不断地研究一些新方法。这些方法有不同的原理,能够提取不同数据特征,有可能对具体的数据得到更有意义的结果,发现更多的生物学知识。这里,简单介绍这些方法的原理,更详细的介绍请参看相关文献。 (1)模糊聚类分析方法:这是一种模拟人类的思维方法,通过隶属度函数来反映某一对象属于某一类的程度。基本思路是计算两两基因表达谱之间的相似性程度,构建模糊相似矩阵,利用模糊数学中的传递闭包计算方法得到模糊等价矩阵,选择不同的置信水平从模糊等价矩阵中构建动态聚类图。对于特定的置信水平,可以实现对基因表达谱的分类。该方法的优点是利用了模糊数学中的隶属度概念,能够更好的反映基因表达谱之间的相互关系,而且它是一种全局的优化方法,与向量的顺序无关。 (2)模糊C均值算法:该方法同样将模糊数学中的隶属度概念引入到常用的K 均值聚类方法中。对于K 均值算法,一个基因表达谱所属的类只有一个,因此,它与各类别的关系要么是 1 ,要么是0 ,即属于或不属于某一类。而对于模糊 C 均值法,一个基因表达谱是否属于某一类,是以隶属度来确定第i 个样本属于第j 类的可能性。最终的聚类结果取决于分析的目的,可以根据最大隶属度来确定基因表达谱的分类,即一个基因表达谱只属于一类;但往往是确定隶属度的阈值,只要大于该阈值,就可以将基因表达谱划分为该类,这样的划分结果是一个基因表达谱可以属于多个类,这也是可以被生物学家接受的。模糊 C 均值法与K 均值法的实现过程基本相同,所不同的是对于

关于基因数据的统计学研究

龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/9e2945886.html, 关于基因数据的统计学研究 作者:张燕 来源:《现代职业教育·高职高专》2018年第06期 [摘要] 贝叶斯网络有着很好的理论知识和清楚的知识表达形式,是统计学中不确定性研 究的一种重要方法,在数据挖掘中有着重要作用。将其引入基因数据的分析中,能较好地构建网络模型,分析各基因间的相互作用与影响,可广泛应用于生物学和肿瘤学的研究,观察疾病所引起的基因表达变化,并找出重要作用的变量基因。 [关键词] 基因数据;统计学;结构学习 [中图分类号] G648 [文献标志码] A [文章编号] 2096-0603(2018)16-0137-01 随着人类基因组序列草图的完成,有关功能基因组的研究在生命科学领域中占据越来越重要的地位。阐明基因选择性表达所依赖的调控信息及其相互作用的分子机制,成为揭示生命现象本质的核心问题,是功能组研究的重要内容。随着基因组学研究的深入展开,基因的表达调控研究已经从单个基因、线性的调控拓展到立体层面上多基因、基因簇乃至整个基因组的调控网络。如何有效地利用已有的基因组学数据,充分整合多学科的思路,建立新的试验系统和技术体系,阐明基因组表达的调控网络,分析基因之间的相互制约关系,已经成为功能基因组学领域内国际竞争的焦点。 贝叶斯网络方法将概率理论知识与图论结合,其有图形化表示、因果关系清晰以及不确定性推理等优点,本文将贝叶斯网络引入基因数据中并进行分析,从概率角度描述了各基因间的依赖关系,从而阐明了整个基因组之间的调控网络。 一、对基因数据的预处理 贝叶斯网络的结构学习是一个NP-Hard问题,而构建网络结构最常见的方法是在结点变量的顺序已经确定的情况下,采用局部搜索算法。在基因表达谱数据中,由于没有任何先验知识,本实验中对网络的构建使用的是K2算法,而K2算法需要预先知道网络变量的先后顺序,本文将重点介绍决策树算法,将ID3算法用于确定各结点的顺序。 二、结构学习 在建模之前需要完成的最后一步工作是需要把样本数据分成训练集和检验集,分别用于训练检验和模型检验。数据经过离散化之后,除去预留几个样本的各基因表达情况用作模型验证,其余的样本作为训练集导入实验软件matlab中。 在网络拓扑结构的构建过程中,最大父结点个数的设置问题直接影响了所得网络的规模与结构。随着父结点个数越多,所得的网络结构就越复杂,虽然能更多地揭示各结点之间的相互

表达谱

对于基因表达谱数据的分析是生物信息学的研究热点和难点。转化为数学问题,分析任务是从数据矩阵 M 中找出显著性结构,结构类型包括全局模型 (model) 和局部模式 (pattern) 。对基因表达谱数据的分析是数据挖掘问题,所采用的方法包括通过可视化进行探索性数据分析( Exploratory Data Analysis )、描述建模 (descriptive modeling) 、分类、聚类、回归和机器学习等。 基因表达谱分析所采用的常用方法是聚类,其目的就是将基因分组。从数学的角度,聚类得到的基因分组,一般是组内各成员在数学特征上彼此相似,但与其它组中的成员不同。从生物学的角度,聚类分析方法所隐含的生物学意义或基本假设是,组内基因的表达谱相似,它们可能有相似的功能。然而,产物有相同功能的编码基因(例如对其它蛋白质有磷酸化作用),不一定共享相似的转录模式。相反,有不同功能的基因可能因为巧合或随机扰动而有相似的表达谱。尽管有许多意外的情况存在,大量功能相关的基因的确在相关的一组条件下有非常相似的表达谱,特别是被共同的转录因子共调控的基因,或者产物构成同一个蛋白复合体,或者参与相同的调控路径。因此,在具体的应用中,可以根据对相似表达谱的基因进行聚类,从而指派未知基因的功能。 聚类分析是模式识别和数据挖掘中普遍使用的一种方法,是基于数据的知识发现的有效方法,特别适用于模式分类数不知道的情况。聚类分析是一种无监督学习方法,不需要任何先验领域知识,它根据数学特征提取分类标准,对数据进行分类,这种数学特征的例子有统计平均值、相关系数、协方差矩阵的本征值及本征向量等。聚类分析在基因表达数据分析中应用得很多,主要有层次聚类、 K 均值、自组织特征映射网络等。本节将介绍基因表达数据分析中常用的聚类方法及与此相关的内容。 8.4.1 相似性度量函数 对基因表达谱进行聚类分析之前,必须首先确定反映不同基因表达谱相似程度的度量函数,根据该函数可以将相似程度高的基因分为一类。在实际计算中,还可以用距离代替相似的概念,相似性度量被转化为两个基因表达谱之间的距离。距离越小,表达模式越相近;反之,则表达模式差异大。 常见的相似性度量有距离、点积、相关系数( correlation coefficient )、互信息( mutual information )等。假设两个基因表达谱分别为X = (x 1 ,x 2 ,…,x m )和Y = (y 1 ,y 2 ,…, y m ) , 距离函数 d( X ,Y ) 必须满足如下条件: d( X ,Y ) ≧ 0 d( X ,Y ) = d( Y ,X ) d( X ,Y ) = 0 if X = Y

基因表达谱数据分析技术

第18卷第6期微阵列技术[1-3]的到来对生物学和医学来说是一场 革命,通过它可以同时观测成千上万个基因的表达水平,从而能够在基因组水平上以系统的、 全局的观念去研究生命现象及其本质。还可以根据基因在不同条件下表达的差异性来进行复杂疾病诊断、药物筛选、个性化治疗、基因功能发现、农作物优育和优选、环境检测和防治、食品卫生监督及司法鉴定等,因此对基因表达谱的研究具有重要的理论价值和应用意义。微阵列基因表达数据具有维数高、样本小、非线性的特点,这对一些传统的机器学习方法提出了新的挑战,对其数据的分析已成为生物信息学研究的焦点。 1基因表达数据采集 基因表达数据采集可分为三个步骤:微阵列设计、 图像分析和数据获取、过滤、标准化。基因芯片(gene chip ),简称为微阵列,就是指固着在载体上的高密度 DNA 微点阵,具体地说就是将靶基因或寡核苷酸片段有序地、高密度排列在玻璃、硅等载体上。mRNA (信使核糖核酸)的表达水平的获得是通过选取来自不同状态的样本(如正常组织与肿瘤组织、不同发育阶段组织,或用药之前与用药之后组织等,一种称为实验样本,另外一种称为参考样本),在逆转录过程中,实验样本和参考样本RNA (核糖核酸)分别用不同的红、绿荧光染料去标记,并将它们混合,与微阵列上的探针序列进行杂交,经适当的洗脱步骤与激光扫描仪对芯片进行扫描,获得对应于每种荧光的荧光强度图像,通过专用的图像分析软件,可获得微阵列上每个点的红、绿荧光强度(Cy5和Cy3),其比值(Cy5/Cy3)表示该基因在实验样本中的表达水平。在通常情况下,考虑Cy5和Cy3的数值时,还应考虑相应的背景数值,如果微阵列上某个基因的Cy5或Cy3数值比相应的背景数值低,则该基因的表达水平无法确定。为了方便数据处理,常 孟令梅等:一种基于DCT 变换的图像认证算法文章编号:1005-1228(2010)06-0017-03 基因表达谱数据分析技术 刘 玲 (江苏财经职业技术学院,江苏淮安 223001) 摘 要:人类基因组计划的研究已进入后基因组时代,后基因组时代研究的焦点已经从测序转向功能研究,主要采用无监 督和有监督技术来分析基因表达谱和识别基因功能,通过基因转录调控网络分析细胞内基因之间的相互作用关系的整体表示,说明生命功能在基因表达层面的展现,对目前基因表达谱数据分析技术及它们的发展,进行了综述性的研究,分析了它们的优缺点,提出了解决问题的思路和方法,为基因表达谱的进一步研究提供了新的途径。关键词:基因表达谱;分类;无监督;有监督;基因调控网络中图分类号:Q81;TP181 文献标识码:A Gene Expression Data Analysis LIU Ling (Jiangsu Vocational College of Finance &Econimics ,huai ’an 223001,China ) Abstract :As the work of sequencing the genome of the human has been fully finished,the post-genomic era has begun.Scientists are turning their focus toward identifying gene function from sequencing.Clustering technology,as one of the important tools of analyzing gene expression data and identifying gene function,has been used widely.Transcriptive regulatory networks are the global representation of multiple interactions between genes and their products ,which can help us understand the cell ’s function at the level of gene expression In this paper we discuss main clustering technology about gene expression data at present,analyze their advantages and disadvantages ,present the methods to solve the problems and given approaches to study gene expression data. Key words:gene expression profile ; classification ;gene regulatory network Vol.18No.6Dec 2010 第18卷第6期2010年12月 电脑与信息技术Computer and Information Technology 收稿日期: 2010-06-09项目资助: 江苏省淮安市科技发展计划项目(HAG08015)作者简介: 刘玲(1964-),山东胶州人,副教授,硕士,主要研究方向:生物信息。

基于RNA-Seq技术的国产沉香转录组测序及数字基因表达谱分析

基于RNA-Seq技术的国产沉香转录组测序及数字基因表达谱分 析 国产沉香是我国传统名贵药材,而白木香是其唯一植物资源,健康的白木香不产沉香,为满足对沉香的消费需求,人们对人工结香技术进行了研究,发现任何对白木香树干的伤害均能诱导产生沉香物质,而这些伤害是怎样诱导结香的,其中的结香机理是怎样的,相关的研究报道却很少。本项目对白木香木材组织总RNA的提取方法进行了研究,利用第二代高通量测序技术对国产沉香的转录组进行测序,并对国产沉香各组织进行了数字基因表达谱分析,筛选各组织表达有差异的基因,从倍半萜合成代谢途径和伤害防御反应两方面研究白木香产沉香的机理。 获得结果如下:(1)确定白木香木材组织总RNA的最佳提取方法为改良异硫 (2)氰酸胍-CTAB法,并用该方法成功提取白木香各组织总RNA用于转录组测序。 本研究进行的转录组测序结果理想,测序质量较高,Q20值高达97.45%,组装后获得平均长度为702nt,N50值为1120的83,467条Unigenes序列,丰富了白木香产沉香的转录组信息。 经过blast比对,共50,565条Unigenes序列得到基因功能注释,占所有Unigenes总量的60.58%,其中各有171、33、1352条Unigenes序列分别被Terpenoid backbone biosynthesis(ko00900)、Sesquiterpenoid and triterpenoidbiosynthesis(ko00909)和Plant-pathogen interaction(ko03040)Pathway注释,为研究白木香倍半萜代谢途径和白木香伤害防御反应机制提供序列信息。(3)利用RNA-Seq技术对国产沉香各组织进行数字基因表达谱分析,各样品均获得超过7M的clean reads,约80%以上的序列能比对上参考转录组数据。

基因表达谱公共数据库

基因表达谱公共数据库(2010-04-17 11:17:21)转载▼ 标签:教育分类:系统生物学 gene expression profiles: NCBI: GEO EBI ArrayExpress和SMD 功能基因组相关信息分析 功能基因组学是后基因组研究的核心内容,它强调发展和应用整体的(基因组水平或系统水平)实验方法分析基因组序列信息阐明基因功能,特点是采用高通量的实验方法结合的大规模数据统计计算方法进行研究,基本策略是从研究单一基因或蛋白上升到从系统角度一次研究所有基因或蛋白。随着功能基因组实验研究的深入,大量的数据不断涌现,生物信息学将在功能基因组学研究中的扮演关键角色。 7.1 大规模基因表达谱分析 随着人类基因组测序逐渐接近完成,科学家发现即使获得了完整基因图谱,对了解生命活动还有很大距离。我们从基因图谱不知道基因表达的产物是否出现与何时出现;基因表达产物的浓度是多少;是否存在翻译后的修饰过程,若存在是如何修饰的,等一系列问题。这些问题的实质是不了解按照特定的时间、空间进行的基因表达谱。获得基因表达的信息是比DNA 序列测定艰巨得多的任务,因为基因表达是依赖于许多因素的动态过程。 国际上在核酸和蛋白质两个层次上发展了分析基因表达谱的新技术,即核酸层次上的cDNA 芯片(cDNA微阵列)技术和蛋白质层次上的二维凝胶电泳和测序质谱技术,即蛋白质组(proteome)技术。DNA芯片技术能够在基因组水平分析基因表达,检测许多基因的转录水平。对大规模基因表达谱的分析存在新的方法学问题,它们从数学角度看不是简单的NP问题、动力系统问题或不确定性问题,而是基因表达网络,因此需要发展新的方法和工具。同时,在芯片等的设计上,也需要从理论到软件的支持 下面主要围绕cDNA芯片相关的数据管理和分析问题进行讨论。 1.实验室信息管理系统 cDNA芯片实验的目的是要在一次实验中同时得到成千上万个基因的表达行为,这样的实验需要有管理实验前后大量数据的能力。设计构建检测基因表达的微阵列需要获得生物体基因的所有序列、注释和克隆。在杂交反应和扫描后,收集到的数据必须以某种方式保存,以便很容易进行图象处理和统计及生物学分析。因此需要建立与大规模高通量实验方法相匹配的实验材料和信息管理系统。 该系统除用来定位和跟踪材料来源(例如,克隆,微阵列,探针)外,还必须管理实验前后大量的数据。此外,还包括实验室设备软件系统,如斯坦福大学Brown实验室免费的控制自制机器点样设备软件(https://www.doczj.com/doc/9e2945886.html,/pbrown) 芯片图象处理已有各种软件工具,基本的功能是将不同信号强度点的图像转换为每个点的强度数值。这方面没有一致的方法,许多研究小组仍在开发这类软件。图象分析软件的质量对精确解释玻片和膜上的信号非常关键。NHGRI的Yidong Chen开发了一种复杂的图象分析程序,deArray,可免费获取。 美国国立卫生研究院人类基因组研究所(NHGRI)开发的免费的cDNA芯片数据管理分析系统ArrayDB,涉及微阵列的设计、实验室信息管理、实验结果的处理和解释。下面加以简单介绍。 ArrayDB ArrayDB是用来储存、查询和分析cDNA芯片实验信息的实验室管理系统。ArrayDB整合了cDNA芯片实验中的多个方面,包括数据管理、用户介面、机器自动点样、扫描和图象处理。

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