淋病奈瑟氏菌的微生物学特点
（一）形态、染色和致病物质及所致疾病
1.形态与染色
革兰氏染色呈阴性球菌，多在中性粒细胞内，直径0.6～0.8微米，呈咖啡豆状（或肾形）成双排列，大多有菌毛，无鞭毛，不形成芽孢（胞），无荚膜，但在菌细胞外有外膜层和粘肽层结构。
2.致病物质
（1）菌毛：它与细胞表面受体结合，使淋病奈瑟氏菌更易附着在人泌尿生殖道上皮细胞、精子、红细胞及白细胞上。
（2）脂寡糖：由外膜的脂质A与核心寡糖构成，类似于脂多糖（LPS）的内毒素作用。
（3）lgA1蛋白酶：破坏黏膜细胞表面的特异性SIgA1，使细菌在黏膜上及黏膜下大量增殖，引起泌尿生殖系统感染。
（4）外膜蛋白：具有破坏宿主黏膜上皮细胞膜结构，介导细菌黏附于上皮细胞和阻抑杀菌抗体的作用。
（二）防治原则
人类是淋病奈瑟氏菌惟一宿主，经性接触传播。
1.取缔娼妓，加强性病知识宣传教育，提高人民道德素质，杜绝性滥交，是防治包括淋病在内的性传播疾病的根本措施。
2.对患者根治措施首选药物为青霉素类抗生素足够剂量和足够疗程治疗，以控制传染源；对新生儿用1％硝酸银滴眼，以预防淋病性脓漏眼。
淋病奈瑟球菌可以治愈吗 文章目录*一、淋病奈瑟球菌可以治愈吗*二、引起淋病的病因有哪些*三、淋病的预防方法有哪些 淋病奈瑟球菌可以治愈吗1、淋病奈瑟球菌可以治愈吗淋病奈瑟球菌是可以治愈的，但是治疗淋病的方法和药物还是有很多种的,作为淋病的患者来说,最根本的方法还是根据自 己的实际情况来进行治疗,只有对症下药了才能够早日治疗淋病,避免淋病给大家的困扰哦。 2、淋病患者日常如何护理 2.1、检查配偶 淋病患者在治疗的同时,其配偶也应到医院进行性病检查, 以便发现问题,夫妻同治,尽早痊愈。 2.2、夫妻同治 夫妻双方一同治疗,由于该病具有较强的传染性,所以当夫 妻双方中其中一方患病后,另一方也应该要一同进行治疗。 2.3、严禁性生活 淋病病人在治疗过程中,应绝对禁止性生活,以免引起生殖 器官充血水肿,使症状加剧,更主要的是淋病具有很强的传染性,以防传染给他人。 3、淋病会给患者造成哪些危害 3.1、诱发男性不育症。淋病逆行感染,感染到男性前列腺、
精囊炎、附睾,使精子发生反常,就会患不育症。 3.2、致使性功能妨碍。淋病如得不到及时医治,易呈现性欲减退、勃起不坚、阳痿、早泄及神经衰弱等表现。 3.3、排尿妨碍。尿线纤细、射程短,乃至尿潴留。尿痛细微,排尿时仅感到尿道火热或轻度刺痛,常可见终末血尿。尿液通常通明,但可见淋菌丝浮游于其间。尿道口红肿,灼痛,流粘脓液等。 3.4、并发别的病症。如尿道炎、尿道周围安排炎和脓肿、包皮腺炎、输精管炎、精囊炎、鞭膜积液、睾丸炎、前列腺炎、龟头包皮炎等。淋球菌也可经血行播散,致使关节炎、肝炎,严重的可危及生命。 引起淋病的病因有哪些1、自身免疫力低下 淋病的病因之一就是自身免疫力低下,主要是指非性接触传染。这些患者一般是通过接触患者的分泌物,或是被污染了的用具,比方说毛巾、脚布脚盆、衣被等,甚至是接触到患者使用过的厕所的马桶圈也可能会被传染。 2、不洁性接触 淋病主要是通过性接触传染,因此,不洁的性接触是导致淋 病的一大原因。男性患者极多数都是因为性接触了患病的,其传播速度极快,且感染率极高,一般在感染后的三至五天就会发病。 3、外伤感染
药敏试验： 用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗生素浓度梯度法（E-test 法），和自动化仪器等。 简介： 体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验。 根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)近期推荐的标准，对非苛氧菌（肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、和其他非肠科杆菌、葡萄球菌属细菌、肠球菌属细菌）和苛氧菌（嗜血杆菌属细菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌和其他链球菌）选择常规药敏试验的首选药物（A 组抗生素）或临床使用的主要抗生素（B组抗生素）进行药敏试验。 抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了很大的经济损失。 随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参
考，并提高疗效。农业部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心总结出几套适合基层进行药敏试验的操作方法，现简单介绍如下。 实验步骤： 实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备） 细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
第28章奈瑟氏菌屬Neisseria
1.德，A.L.S.Neisser醫生為第一位描述淋病球菌者。 2.淋病雙球菌(Neisseria gonorrhoeae)和腦膜炎雙球菌(Neisseria meningitidis)為人類病原。其他存在咽頭和鼻咽腔的黏膜表面。偶有存在肛門、生殖器 官、生殖器官的黏膜表面。 3.需氧，G(-)，球菌並排成對。不具運動性，不形成 內孢子。 4.常形成莢膜(encapsulated)，氧化酶陽性，大都產生 觸酶，配合Gram stain可做快速鑑別診斷。 5.可氧化碳水化合物而產生酸。 6.和其他奈瑟氏球菌屬細菌的不同點：淋球菌只能 以葡萄糖行醱酵作用。
淋病雙球菌(Neisseria gonorrhoeae) 腦膜炎雙球菌(Neisseria meningitidis) 其他奈瑟氏菌屬(Other Neisseria Species)
淋病雙球菌(Neisseria gonorrhoeae) 生理與構造(Physiology and Structure) 1.非常挑剔，需巧克力培養基加入Arg、Hypoxanthine、 uracil和可溶性澱粉，於潮濕及CO2存在下才易生長。 2.最適宜生長溫度為35~37℃，冰冷環境不易存活。且不 耐乾燥和脂肪酸。 3.鐵分子為其生長與代謝所必需，藉結合轉鐵蛋白 (transferrin)、乳鐵蛋白(lactoferrin)和血漿素 (hemoglobin)獲取鐵分子。 4.難由臨床檢體分離培養，但易人→人。 5.G(-)，外表被覆由菌毛蛋白(pilin protein)所構成的菌毛 (pili)。無菌毛者不具毒性。 6.菌毛蛋白的抗原和菌毛蛋白的表現改變對此菌的再度 感染即失去免疫力。∴難發展出有效疫苗。
细菌药敏试验实验报告解读 “医院有的药物不做药敏实验，医院没有的药物做什么药敏实验？”在临床上经常能听到临床医生们抱怨。“药敏报告显示敏感的药物，而临床治疗无效？”有时也让大夫们感到不解。这些问题使得临床医师不知道如何选择抗菌药物，那么如何正确解读药敏报告，合理选择抗菌药物报告呢。 我们先来了解几个概念： 最低抑菌浓度（MIC）：测量抗菌药物的抗菌活性大小的一个指标，指在体外培养细菌18至24小时后能抑制培养基内病原菌生长的最低药物浓度。 最小杀菌浓度（MBC）：抗菌药物能能使受试菌最初的活菌总数减少99.9%以上所需要的最低抗菌药物浓度。 折点：是最低抑菌浓度或者抑菌圈直径，用于区分离株为敏感、剂量依赖性敏感、中介、非敏感还是耐药 敏感（S）：通过折点来定义，指当对感染部位采用推荐剂量时，具有MIC值等于或低于敏感折点（或抑菌圈等于或高于敏感折点）的菌株通常可被抗菌药物所达到的浓度水平所抑制，产生可能的临床疗效。 中介（I）：通过折点来定义，包括这些MlC或者抑菌圈直径在中介范围内的菌株，其抗菌药物MIC接近于血液和组织中通常可达到的水平，而抗菌药物治疗的疗效可能低于敏感株。耐药（R）：通过折点来定义，指按常规用药方案，在药物通常可达到的浓度水平时，菌株不能被抑制，表明MIC值或抑菌圈直径可能在一个产生了某种特殊的耐药机制(如β-内酰胺酶）的范围内，而且治疗研究显示该药的临床疗效不可靠。 多重耐药（MDR）：是指有多重耐药性的病原菌。其定义为一种微生物对三类（比如氨基糖苷类、大环内酯类、β－内酰胺类、喹诺酮类等）或三类以上抗菌药物同时耐药，而不是同一类的三种。 泛耐药(XDR)：广泛耐药细菌指细菌对常用抗菌药物几乎全部耐药，革兰氏阴性杆菌仅对黏菌素和替加环素敏感，革兰氏阳性球菌仅对糖肽类和利奈唑胺敏感。 全耐药（PDR）：泛耐药细菌指对所有分类的抗菌药物全部耐药，革兰氏阴性杆菌对包括黏菌素和替加环素在内的全部抗菌药物耐药，革兰氏阳性球菌对包括糖肽类和利奈唑胺在内的全部抗菌药物耐药。 药敏试验目的 使用体外试验的方法检测细菌的耐药性，预测抗菌药物临床治疗效果并为临床医生针对某一特定感染问题选用药物提供依据。 判断标准
淋病奈瑟菌 的生物危害评估报告 一、淋病奈瑟菌的传播与致病 淋病奈瑟菌又称淋球菌，是淋病的病原菌，人类是本菌的唯一天然宿主和传染源。淋病是淋菌性尿道炎的简称，是由淋球菌引起的泌尿生殖系统化脓性炎性疾病，它是人类很古老的，也是当前世界范围内流行非常广泛的一种性传播疾病。 淋病患者是主要传染源，有症状或无症状的患者均可通过性接触传播，其中轻症或无症状的淋病患者是重要的传染源。其传播途径主要包括性交传染，还可通过非性接触传播，如通过接触患者分泌物污染的用品（衣裤、床上用品、毛巾、浴盆、马桶等）间接感染；孕妇淋病患者当羊膜破裂，可继发羊膜腔内及胎儿感染；新生儿经过患淋病的母体产道时常可引起淋菌性眼炎；另外尚可通过医护人员的手和器具引起医源性感染。 本病最初多侵犯尿道、宫颈内膜，继而可波及前列腺、精囊、副睾、子宫内膜及输卵管。有时肛门、直肠、咽粘膜、眼结膜也可受染。尚可经血行播散引起菌血症、关节炎、心内膜炎及脑膜炎，可引起死亡或不育、不孕、失明及尿道狭窄等后果。由于本病潜伏期短、传染性强、后果严重，因此它是我国当前重点防治的性病之一。 二、淋病奈瑟菌的生物学特性. 淋病奈瑟菌属奈瑟菌属，镜下呈肾形，常成双排列，邻近面扁平或稍凹，像两瓣黄豆对在一起，大小0.6μm×0.8μm。革兰氏染色阴性，呈粉红色，美蓝染色呈蓝色。急性炎症期细菌多在患者分泌物的少部分中性粒细胞的胞浆中，慢性期则多在细胞外，且有些可呈单个球形或四联状。人工培养后形态亦常呈球形、单个、成双或四联排列。 淋球菌适于潮湿（相对温度80％～85％）、温暖（35.5℃～36.5℃）、中性偏碱（pH7.2～7.6）、含5％～10％二氧化碳的条件下生长。最怕干燥，在完全干燥环境下只能存活1～2小时，对温度变化敏感，超过38℃或低于30℃则不能生长，在培养基上室温放置1～2天即可死亡，在39℃存活13小时，42℃存活15分钟，50℃存活5分钟。如在不完全干燥的衣裤、被褥、毛巾、玩具上则可存活18～24小时。一般消毒剂容易将它杀灭，在 1:4000硝酸银溶液中7分钟死亡，1％石炭酸溶液中3分钟内死亡。 淋球菌较为娇嫩，酶系统不完整，初代培养普通培养基不易成功，需在含有动物蛋白的培养基上，且含有二氧化碳的条件下才能生长。淋球菌在血琼脂培养基孵育24小时后，可形成直径0.5～1mm的圆形稍隆起，湿润光滑，半透明，边缘呈花瓣状，有粘性的露滴状菌。
l药敏纸片的制作方法 1.1纸片的制作及灭菌 选用质量较好的滤纸片(定量滤纸)，用打孔器打成直径为6毫米的圆片，每l00片放入一小瓶中，l60℃干热灭菌1-2小时或高压灭菌(15磅30分钟)后，在60℃条件下烘干备用。 1.2抗菌药物浓度的配制 1.2.1计算最小浓度值 按药物使用说明上的配料或饮水比例换算成一个基本单位药量(以能准确 称量药品的最小值为宜，如0.5克、l克、2克等)能配多少料或饮多少水，相当于 配制浸泡药片的药品浓度时所加蒸馏水的毫升数。例如，药品使用说明上标明5克本品可拌50千克饲料，其换算方法为l克本品可拌10千克饲料，也就是1 克本品拌l0000克饲料，相当于药品浓度为l克本品加l0000毫升蒸馏水。 1.2.2浓度配制 准确称取上述基本单位药量(片剂要研磨成粉末后再行称量)，在无菌条件下，按下列分列顶用蒸馏水进行倍比稀释。根据以上换算l克本品加10000毫升蒸馏水，即l克本品加1O×lO×10×lO毫升蒸馏水。如出现l克本品拌321克饲 料等情况，可改成1克本品拌320克饲料，即加l0×4×8毫升蒸馏水。这样改 动易形成分列项，并不影响实际效果，因为在配料时可按纸片浓度l克本品拌320克饲料进行拌料。如所加蒸馏水量较少或现场蒸馏水充足，可不按上述倍比稀释法稀释，而直接按配料或饮水比例一次稀释而成。 1.3 药敏纸片的浸泡及保存 取0.5毫升或l毫升已配制好的药液注入已灭菌的含l00片纸片的小瓶中，置冰箱内浸泡1-2小时后取出烘干，并置冰箱中保存。 3上述现场应用中提到的高敏药物和中敏药物，是指不同直径抑菌圈药物与治疗疾病实际效果相对而言的。根据笔者经验，抑菌圈直径在17毫米以上者为高敏药物，其治疗效果非常显著；抑菌圈直径在12-16毫米的药物为中敏药物，其 对疾病的治疗效果较好；抑菌圈直径在11毫米以下者为低敏药物，该药对病的治疗效果很差。 2：抗菌药物浓度的配制 取复合制剂1g加水30毫升或0.1g加3ml水，直接浸泡药敏片。 3：取出浸泡好的纸片烘干，并在冰箱中保存备用。
淋病奈瑟菌的研究现状 淋病(gonorrhea)是由淋病奈瑟菌，简称淋病奈瑟菌引起的经典性病之一。人类是淋病奈瑟菌唯一的自然宿主，主要通过性接触而传播。感染淋病奈瑟菌之后，患者发生泌尿生殖系统的损害，表现为尿道炎和宫颈炎，以及附睾炎、盆腔炎等并发症，女性患者还可由于并发症造成不育、富外孕等严重后果。淋病常见，在世界范围内广为流行；据近年来世界卫生组织估计，全世界每年约有6200万新病例发生，其中以欧美和非洲一些国家尤甚。发病与病人因素，诸如年龄、性别、种族、受教育程度、性行为方式及免疫力有关，并随地区和季节的不同会有所变化。 关键词：淋病奈瑟菌、耐药、淋病奈瑟菌PI蛋白、检测方法 1.淋病奈瑟菌的感染 淋病奈瑟菌主要侵犯粘膜，尤其对单层柱状上皮和移行上皮细胞有很强的亲和力，淋病奈瑟菌侵入前尿道或子宫颈后，借助菌毛、外膜蛋白粘附到柱状上皮细胞表面进行繁殖，之后被柱状上皮细胞吞饮，进入细胞内大量繁殖，导致细胞损伤裂解。淋病奈瑟菌在逸入粘膜下层，通过内毒素与补体、IgM等协同作用，诱导中性粒细胞聚集吞噬，引起局部急性炎症，出现充血、水肿、粘膜糜烂和尿痛，形成典型尿道脓性分泌物。当细菌进入尿道腺体和隐窝后，腺管开口及隐窝被阻塞，潜藏的细菌可引起慢性淋病。 2.淋病奈瑟菌PI蛋白 目前已知的淋球菌表面抗原有PI(Porin，Por，主要外膜蛋白)，PII(0pa，热修饰蛋白)，PIII(还原反应可修饰蛋白、或浓度相关蛋白)等外膜蛋白，及菌毛蛋白和LPS(脂多糖)、LOS(脂寡糖)，均能诱导相关的特异性体液免疫和细胞免疫。在这几种抗原中，PI是外膜蛋白中含量最高的蛋白成分，约占60％，且仅有中等程度的抗原变异。抗PI抗体具有杀菌作用，故而PI抗原最有可能用于制备成功的淋病疫苗，这使其成为目前这一领域的研究热点。PI 蛋白是淋球菌主要外膜蛋白，它是液态的跨膜蛋白通道，以利于某些离子和大分子通过外膜屏障。PI蛋白在淋球菌感染致病过程中也起重要作用，因为体外试验显示它能从淋球菌外膜贯穿入中性粒细胞膜，该过程在体内淋球菌粘附至上皮细胞表面中可能起了关键性的作用。纯的PI蛋白插入细胞脂质双层形成电压门控、轻微阴离子选择的通道，这一功能已被实验证实。纯PI蛋白也能插入血浆中性白细胞膜。哺乳细胞中加入纯PI蛋白可引起短暂跨膜电压改变以及调节宿主细胞间信号传导。但是尚未得到完整的淋球菌将功能性小PI插入受感染哺乳细胞直接证据【1】。 3.淋病奈瑟菌的耐药性 淋球菌具有类似于大肠杆菌的被膜结构。由外到内依次是外膜、肽聚糖、周间隙、质膜。外膜是革兰氏阴性菌的特有结构。主要由蛋白质和LPS组成。外膜蛋白（om）在维持外膜结构、保证物质运输等方面有重要作用。按其拷贝数目的多少可分为主要蛋白和微量蛋白。孔蛋白是主要蛋白，起运输作用【2】。大肠杆菌的孔蛋白ompF、ompC、ompA的相对分子质量
淋病奈瑟菌检测操作规程 （一）涂片镜检 1、检测目的 查找标本中白细胞内的革兰阴性双球菌，规范淋病奈瑟氏菌的涂片检测，保证检测结果的准确性。 2、标本采集 生殖道分泌物，无菌留取。 3、玻片的制备 （1）取洁净载玻片，在有磨砂的一面写上编号（化验单尾号或标本号） （2）在生物安全柜内涂片，自然干燥后进行革兰染色及显微镜检查。 4、染色 （1）涂片经火焰固定后，加结晶紫染液染1分钟，流水缓慢冲去染液。 （2）吸水纸吸干玻片水分后加碘液媒染1分钟，水洗。 （3）加脱色液，复染30秒，水洗。 （4）加复染液，复染30秒，水洗 （5）玻片完全干燥后，显微镜镜检。 5、镜检与结果报告 阳性：革兰染色显微镜下为革兰阴性双球菌，呈双肾形成对排列。 结果报告：细胞内可见革兰阴性双球菌。 6、参考范围：阴性 7、质量控制 （1）每次染色时应同时用已知的革兰阳性菌和阴性菌进行对照试验，以检查染色液的质量。 （2）结晶紫与草酸铵溶液混合不能保存太久，如有沉淀则应重新配制。 （3）采样时，女性拭子插入子宫颈3cm处取样，避免阴道分泌物污染拭子。 （4）对于不能及时送检的标本应常温保存，不可以冷藏。 8、生物安全防护 （1）操作前应做好自身防护（穿工作服、戴口罩、胶皮手套）。 （2）在生物安全柜中进行涂片操作。 （3）所有不再需要的标本，培养物和其他生物性材料，应置于专用和有生物危害标记、用于处置危险废弃物的防漏容器内。 （4）试验操作工作面应以500ppm“84”消毒液擦试，再用紫外线灭菌灯照射2小时。（5）所有弃置的实验室生物标本，培养物和被污染的废弃物，应通过高压消毒或其他无害化处理。
中国现代医生2018年6月第56卷第17期CHINA MODERN DOCTOR Vol.56No.17June 2018·检验医学· 淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae)俗称淋球菌, 为革兰阴性双球菌,是人类常见性传播疾病淋病的病 原体。由淋病奈瑟菌感染引起的以人为唯一天然宿主 的淋病是我国目前流行的发病率最高的性传染病之 一,也是我国《中华人民共和国传染病防治法》[1]规定的重点防治的乙类传染病,主要引起男性尿道炎、附睾炎、前列腺炎,女性尿道炎、阴道炎、子宫炎,以及新生儿的淋球菌结膜炎[2]。近年来,淋病发病率不断上升,其病原体淋病奈瑟菌的耐药性也日益增强。本文对2008年1月~2016年12月在我院分离到的702株淋病奈瑟菌的检测及耐药结果进行统计与分析。 浙江省702株淋病奈瑟菌的耐药性分析 赵钊1王巧刚2沈雅婕1孙哲伟1葛玉梅1▲ 1.浙江省人民医院临床医学检验中心杭州医学院附属人民医院,浙江杭州310014; 2.浙江省东阳市人民医院检验中心,浙江东阳322100 [摘要]目的检测淋病奈瑟菌临床分离株的耐药性及了解其对常用抗生素的耐药现状,对该地区淋病的临床用药治疗和控制有重要意义。方法收集2008~2016年浙江省人民医院分离的淋病奈瑟菌702株,菌落革兰染色镜检,并采用法国梅里埃VITEK 2-compact 全自动细菌检测分析系统及其配套的API-NH 细菌鉴定卡进行鉴定。采用VCAT3培养基35℃含5.0%CO 2条件下的K-B 法进行药敏检测。采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。结果702株淋病奈瑟菌对环丙沙星和四环素的耐药性分别为91.7%和86.2%;其次是青霉素G 和氨苄西林,耐药率分别为82.7%和25.3%,对头孢噻肟和头孢曲松暂未出现耐药。结论环丙沙星、四环素、青霉素G 和氨苄西林等药物因该地区的淋病奈瑟菌的耐药性太高已不宜作为本地区治疗淋病的一线药物使用,头孢噻肟和头孢曲松等可作为首选药物考虑,同时应进一步加强对淋病奈瑟菌耐药性的监测及根据相关药敏试验合理选用抗菌药物。 [关键词]淋病奈瑟菌;耐药性;抗生素;菌落革兰染色镜检;药敏试验 [中图分类号]R446.5;R759.2[文献标识码]B [文章编号]1673-9701(2018)17-0115-03 Analysis on the drug resistance of 702strains of Neisseria gonorrhoeae in Zhejiang province ZHAO Zhao 1WANG Qiaogang 2SHEN Yajie 1SUN Zhewei 1GE Yumei 1 1.Clinical Medical Examination Center,Zhejiang Provincial People’s Hospital,People’s Hospital of Hangzhou Medical College,Hangzhou 310014,China; 2.Examination Center,Dongyang People’s Hospital in Zhejiang Province,Dongyang 322100,China [Abstract]Objective To investigate the drug resistance of Neisseria gonorrhoeae(NG)clinical isolates and the drug re?sistance to common antibiotics,which is significant for the clinical medication treatment and control of the local gon?orrhea.Methods 702strains of NG isolated in Zhejiang Provincial People’s Hospital from 2008to 2016were collect?ed.Bacterial colonies were tested using gram staining microscopy and identified using VITEK 2-compact automated ID/AST instrument of Biomerieux,France and matching API -NH strip.Drug sensitivity test was taken using K -B method under the temperature of 35℃containing 5%CO 2in the VCAT3culture media.Statistical analysis was taken in SPSS13.0.Results The drug resistance of these 702NG strains to ciprofloxacin and tetracycline was 91.7%and 86.2%respectively.Then was penicillin G and ampicillin,to which the drug resistance was 82.7%and 25.3%.There was no drug resistance showed to cefotaxime and ceftriaxone.Conclusion Ciprofloxacin,tetracycline,penicillin G and ampi?cillin are not proper to be used as the first-line drugs of local gonorrhea due to the high drug resistance of local NG.Cefotaxime and ceftriaxone could be considered as the preferred drugs.In the meantime,the surveillance of NG drug resistance should be further enhanced and the antibiotic drugs should be selected based on the related drug sensitivity test. [Key words]Neisseria gonorrhoeae;Drug resistance;Antibiotics;Bacterial colony gram staining microscopy;Drug sen?sitivity test [基金项目]浙江省自然科学基金一般项目(LY18H160042); 浙江省医药卫生科技计划项目(2017KY004) ▲通讯作者115
苛养菌的药敏试验（一） 苛养菌是指一类需要特殊营养成分才能生长繁殖的细菌，如淋病奈瑟菌、嗜血杆菌及肺炎链球菌等。 1．淋病奈瑟菌的药敏试验可采用纸片扩散法和稀释法进行。但需在含1%添加剂的淋病奈瑟菌GC平板上进行。操作方法同纸片扩散法和稀释法。在35℃5%C02孵育20～24 小时后测量抑菌环直径。 可选用头孢克肟、头孢噻肟、头孢泊肟、头孢唑肟、头孢曲松等抗生素中的1～2种，头孢西丁、头孢呋辛、头孢替坦、环丙沙星或氧氟沙星、青霉素G、壮观霉素、四环素等进行测定。对于分离的菌株可测定p内酰胺酶，阳性结果预示青霉素 G等耐药。 2．嗜血杆菌属的药敏试验以下抗菌药物：阿莫西林／克拉维酸、头孢克洛、头孢丙烯、氯碳头孢、头孢地尼、头孢克肟、头孢泊肟、口服头孢呋辛酯、阿奇霉素和克拉霉素等对单一嗜血杆菌感染患者的治疗往往不需进行敏感试验，仅在耐药性监测或流行病学调查时才进行。从脑膜炎、败血症、会厌炎和面部蜂窝炎等重危患者的血液和脑脊液中分离到的流感嗜血杆菌，应进行常规试验并报告氨苄西林、一种三代头孢菌素、氯霉素和美洛培南的药敏结果。氨苄西林敏感试验测定的结果，可预报阿莫西林的活性；大多数耐氨苄西林和阿莫西林的流感嗜血杆菌分离株产生TEM型l3内酰胺酶。从细菌性脑膜炎及败血症患者标本中分离的嗜血杆菌，应直接作l3内酰胺酶试验，以快速检出氨苄西林和阿莫西林耐药菌株。 可用纸片扩散法和稀释法进行药敏试验。纸片扩散法使用嗜血杆菌专用HTM培养基，操作同纸片扩散法。接种物制备按直接菌悬液法。稀释法用HTM 肉汤。可在常规条件下孵育20～24小时报告，而不一定在50/4COz的环境下。
3．肺炎链球菌的药敏试验在M-H琼脂中添加5%绵羊血，倾注平板用于肺炎链球菌的纸片扩散法试验，接种后置5%CO。、35℃孵育20～24小时观察结果，其他操作同纸片扩散法。大多数抗菌药物需要用含2%～5%(V／V)溶解马血的阳离子调节的M-H肉汤(AMHI3-LHB)作为基质，稀释抗菌药物，进行稀释法测定。
超全的细菌药敏总结 一、什么情况下做药敏试验 做药敏试验的原则是只对与感染相关致病菌或可能致病菌做药敏试验，否则将导致不必要的治疗。做药敏需考虑的主要因素如下： 1. 标本来源 （1）无菌部位标本分离的细菌最具临床意义 如脑脊液、血液、体液和骨髓等。血、无菌体液标本中分离的任何细菌均需做药敏试验，除外血培养单次分离的芽孢杆菌属、棒状杆菌属、凝固酶阴性葡萄球菌（不包括路登葡萄球菌）；除外无菌体液中分离的芽孢杆菌属。如果多次培养分离出以上所示同一种细菌，仍需做药敏试验）。 （2）来自正常菌群或污染部位的标本 需做药敏试验的情况如伤口、脓肿和来自其他污染部位标本，培养生长1或2种中量或大量可能病原菌；质量合格痰标本培养生长1或2种中量或大量可能病原菌。对正常菌群或污染菌不做药敏试验。 2. 不能预测治疗用药的敏感性 如伤口分离的化脓链球，因通常对青霉素敏感，不用做药敏试验；如伤口分离的金黄色葡萄球菌，因敏感性不可预测，需做药敏试验。 3. 定量培养 以下情况需做药敏试验： （1）中段尿标本菌落计数>10^5CFU/ml，且分离到1种或2种可能致病菌；女性有临床症状患者分离到1种致病菌，菌落计数≥10,000CFU/ml；从65岁以上患者留置导尿管取尿标本，菌落计数>10,000CFU/ml纯培养；直接导尿或膀胱镜等采集尿标本，纯培养或分离到2种致病菌，每种菌的菌落计数均>1000CFU/ml。 （2）静脉插管尖端分离的凝固酶阴性葡萄球菌>15个菌落。 4. 其他微生物的存在和定量 正常菌群的存在和定量是重要的考虑因素。通常对纯培养细菌做药敏试验，混合细菌生长是否做药敏试验不确定。需做药敏试验的定量培养支气管镜采集标本: 保护毛刷标本生长≥10^3CFU/mL、支气管肺泡灌洗液生长≥10^4CFU/mL（或半定量为中量/大量并多于正常菌群）分离培养出的下呼吸道致病菌、厌氧菌（只限保护毛刷标本）、定量计数≥10^3～10^4CFU/mL纯培养物、任何数量的铜绿假单胞菌等。 5. 患者年龄 分离自特定年龄组的一些细菌有必要做药敏试验，如痰培养正常菌群中存在中量流感嗜血杆菌，2岁儿童患者需做药敏试验，而成年患者不做药敏试验。 6. 独特的宿主因素 （1）正常免疫患者遵循一般规则；免疫抑制患者对一些条件致病菌也需做药敏试验；（2）对选用药物过敏，如从青霉素过敏患者分离的化脓链球菌，用红霉素治疗无反应，需做药敏试验。 二、哪些情况无需做药敏试验 1. 对天然耐药的细菌/抗菌药物组合 与获得性或突变耐药相反，天然（固有）耐药是几乎所有细菌种的特性。药物的抗菌能力临床表现不足或固有耐药，将导致临床治疗无效。这种情况下无需做药敏试验。 肠杆菌科对三代头孢菌素、头孢吡肟、氨曲南、替卡西林/棒酸、哌拉西林/他唑巴坦和卡巴培南类无天然耐药。枸橼酸杆菌属、产气肠杆菌属、变形杆菌属、普罗菲登菌属、粘质
各种属细菌药敏试验解释标准 1.1 常见非苛养菌和苛养菌的药敏试验解释标准 因判定折点每年更新一次，常见非苛养菌（肠杆菌科、铜绿假单胞菌、不动菌属、洋葱伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食单胞菌、其他革兰阴性杆菌、葡萄球菌属和肠球菌属）和常见苛养菌（肺炎链球菌和其他链球菌、流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌）的药敏试验解释标准参照CLSI M100的每年更新版文件。 1.2 不常见苛养菌和不常见非苛养菌的药敏试验解释标准 1.2.1 乏养球菌属和颗粒链球菌属 乏养球菌属和颗粒链球菌属属于苛养菌，是感染性心内膜炎的重要致病菌。首选检测药物为青霉素、头孢噻肟或头孢曲松和万古霉素。来自呼吸道或伤口的分离株不必进行药敏试验，来自无菌部位如血液、深部组织、植入的假体装置，特别是免疫缺陷患者，应进行药敏试验。药敏试验解释标准见表1。 表1 乏养球菌属和颗粒链球菌属的药敏试验解释标准 1.2.2 其他革兰阳性球菌（气球菌属、孪生球菌属、乳球菌属和微球菌属） 气球菌属首选检测药物为青霉素、头孢曲松和万古霉素；孪生球菌属首选检测药物为青霉素、头孢噻肟或头孢曲松、万古霉素；乳球菌属首选检测药物为青霉素或氨苄西林、头孢曲松、万古霉素、克林霉素和红霉素，格氏乳球菌对克林霉素天然耐药。 微球菌属首选检测抗菌药物为青霉素和万古霉素。微球菌属常为污染菌，多次血培养阳性或植入假体装置分离的菌株可进行药敏试验。这些菌属药敏试验解释标准见表2。 表2 气球菌属、孪生球菌属、乳球菌属和微球菌属的药敏试验解释标准
1.2.3 对糖肽类药物天然耐药的革兰阳性菌（无色藻菌属、明串珠菌属、片球菌属、猪红斑丹毒丝菌和乳杆菌属） 无色藻菌属、明串珠菌属和片球菌属 无色藻菌属、片球菌属和明串珠菌属为苛养菌，对万古霉素天然耐药。首选检测抗菌药物为青霉素或氨苄西林。分离自无菌部位如血培养、深部组织的菌株，尤其是免疫缺陷患者无菌部位分离的菌株可进行药敏试验。药敏结果解释标准见表3。 猪红斑丹毒丝菌 猪红斑丹毒丝菌为苛养菌，对万古霉素和氨基糖苷类天然耐药。首选检测抗菌药物为青霉素或氨苄西林。猪红斑丹毒丝菌不必进行药敏试验；但因其引起的心内膜炎的暴发性特质和对常用于革兰阳性菌经验治疗的万古霉素天然耐药，应立即进行药敏试验。对青霉素过敏患者，需检测红霉素和克林霉素的敏感性。药敏试验解释标准详见表4。 乳杆菌属 乳杆菌属通常属于苛养菌。首选检测抗菌药物为青霉素或氨苄西林。干酪乳杆菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳杆菌、阴道乳杆菌和玉米乳杆菌对万古霉素天然耐药；而嗜酸乳杆菌、卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌、惰性乳杆菌、詹氏乳杆菌、约氏乳杆菌和乳酸乳杆菌对万古霉素敏感。美罗培南的MIC值一般比亚胺培南MIC值高2～