生物材料检验复习资
料
生物材料检验：分析检验生物材料中化学物质及其代谢物的含量或因化学物质引起的的生物效应指标变化。
生物材料：是人体体液（如血液）、排泄物（如呼吸气、尿液）、毛发，指甲以及组织脏器等的总
称。
生物标志物：指生物系统接触外源性物质后出现的一种变化。分为三类：接触性生物标志物、效应性生物标志物，敏感性生物标志物。
接触性标志物：生物体内可分析测定的有害物质，代谢产物，以及他们同生物体内分子或细胞相互作
用形成的中间物
效应性标志物：那些同健康危害或疾病有关的可测定性的生化，生理行为以及其他生物学变化
敏感性标志物：生物体内先天固有或后天获得的对外界有害因素所引起的有害效应的反应能力
生物转化：外源性化合物在体内经过一系列化学变化并形成其衍生物以及分解产物的过程
生物接触限值（BEL ）:大体相当于健康人吸入接触最高允许浓度的毒物时生物材料中被测物的水平。
尿液可分为全日尿，晨尿，定时尿和随时尿。
生物半减期：指进入生物体内的化学物质的里量通过各种途径消除一半所需要的时间，又代谢半减
期。
一、检验方法的一般要求：
1. 方法的一般要求1）灵敏度选择符合生物监测的基本要求2）操作简便3）试剂易得、价廉4）效率高5）符合国情，易推行、
2 ?选择和建立生物检测方法必须考
测成分①溶解性，稳定性②含量水平高g/L水平低ug/L
二、方法研制准则的基本内容
1 ?取样、运输、保存的原则
1）取样：（1）容器工具材质不干扰测定（2）取样的操作要防止污染
（3）取样时间根据半减期判断决定（4）取样的体积尿液＞=50ml静脉血＞=5ml末梢血500ul
2）保存时间：一天，三天，一周，两周一般只要求两周
3）运输过程：保证分析物稳定，必要时要冷藏和冷冻运输
4）防腐剂（尿）和抗凝剂（血）
2. 样品预处理原则
1）尿液浓度按比重校正尿标准比重1.020，＞1.030及＜1.010的尿液应弃去
2）样品预处理的目的是消除干扰
（1）测定无机物时①用稀释液稀释后测定②混合酸消化
（2）测定有机物成分：先水解，再分离（3）回收率＞=75%
3. 制定分析方法的程序
1）分析条件选择、优化
2）确定检出限
（1）影响检出限的因素：试剂的纯度，仪器的工作状态，电源稳定性光源的温度变化、污染等不可控制的因素。
（2）检出限的确定一般用统计法，一般用空白值的3倍标准差计算；色谱法用3倍噪音水平，检出限应小于0.3倍生物接触限值。
（3）检出限的表示方法浓度或绝对量表示，用浓度表示时要说明方法取样体积。
3）精密度：同一个人用同一方法重复测定同一均匀样品测定结果的符合程度通常在线性范围内取
高、中、低三个浓度水平分别重复测定3~5次。用RSD表示或用变异系数表示复杂方法RSD＜=20简单
方法＜=10.
4）准确度（1）分析高低浓度水平和国家级标准物质各一组，测定值应在标准值的不确定范围内。
（2）用接触表样品的加标回收率表示回收率＞=75%若＞105%表明存在明显的系统误差。
（3）用标准方法或权威方法比较：①两个方法均值相对误差应小于10%②t检验
在确定一个置信水平条件，两方法测定无明显差异
5）干扰试验：如果有干扰，要找出消除干扰的方法
6）样品的稳定性实验：时间：当天，3天，1周，2周温度：室温，普通冰箱冷藏（4C），冷
冻保存（-8C），低温冰箱（-20C）
4方法的验证1）新方法的验证：必须是另一单位①研制方提供方法所有技术材料②验证内容：四项线性范围，精密度，准确度，样品的稳定性。2）引进国外标准方法或权威方法，引进
方就是验证方。
5现场应用①首先要观察检出率②观察检测结果与环境污染的符合程度③同时取非接触样品进行对照
、确定生物监测指标的依据
（一）化学物质在体内的动力学过程
1. 吸收1）呼吸道吸收①气体物质通过肺泡
壁及周围毛细血管吸收②固体物质，溶解时吸收的前提2）皮肤①有些有机物很容易被皮肤吸收F=C/15 *（0.038-0.153p）exp（-
0.016MN） F 皮肤吸收量mg/c m 2/h C化学物质在水中的饱和度mg/ml P辛醇-
水的分配系数MN相对分子质量②许多农药易被皮肤吸收如有机磷
2. 体内分压和贮存 1 ）起始主要分布于血液中最终分布取决亲和力 2 ）血液侧得量是反映
新近吸收量或机体组织的水平3 ）血液中毒物或其他被测物并非均匀分布 4 ）一般脂溶
性溶剂及卤代烃会分布在脂肪组织中，乳汁是检测有机氯农药最好的样品 5 ）体内储存
毒物的形式大多为结合状态，测定尿液中的代谢物需要先水解
3. 生物转化1 ）概念：外源性化合物在体内经过一系列化学变化并形成其衍生物以及分解
产物的过程。2 ）有关生物转化的讨论①是毒物发生质的变化②生物转化的数量关
系，个体差异很大③是一种动态过程，对时间的了解是确定采样时间的基础，生物半衰期。
4?排出易挥发性有机溶剂从呼吸气中排出较多。长期蓄积的有机氯农药可从乳汁中排出及耵聍（耳屎）中排出，易代谢的有机毒物大多以结合态从尿中排出。
（二）、个体差异
1、毒物在生物体内的动力学过程有种属家族和个体的差异，其中生物转化过程变异极大；
2、生物
监测的个体差异可用监测结果的变异系数表示；
3、个体差异降低了生物监测的精确性，却可帮助检出特殊敏感人群或耐受人群。
（三）、接触水平（剂量）一效应（反应）关系
1、是确定一次生物监测指标的关键依据；
2、生物监测结果与空气毒物浓度之间的相关资料，可作为选择生物监测指标的替代依据。
四、检验指标的选择与分类
（一）、选择的基本要求1、特异性好；2、具有良好的剂量一效应关系；3、稳定性好；4、有准确可靠的检验方法。（二）、生物材料检验指标的分类1、化学物质原形：①化学物质在生物体内不进行生物转化或转化速度很慢；②缺乏毒物代谢动力学资料；③代谢产物在体内没有特异性
2、化学物质代谢产物
3、生物效应指标。
五、样品的采集与保存
一）、生物材料样品的选择
（一）、种类及特点
尿液：最常用的1）特点：采集方便、无损伤性、采集量大2）适用性：水溶性化学物质、代谢
产物、金属等3）尿样的种类：（1）全日尿（24h尿）收集24h内的全部尿液，通常只用于住院病人（2）晨尿起床后、早餐前第一次排出的尿（3）定时尿：生物半减期①班前尿：第2个工作日上班前以内排出的尿②班中尿：上班2~3h以后排出的尿③班末尿：下班前1h内排的尿④班后尿：下班以后1h以内排出的尿⑤周末尿：连续工作第五个工作日的班末尿。
血液1）特点：①成分较恒定②个体差异小③取样污染机会小④损伤性采集样品⑤血样贮存条件要求较高；2）种类：①血清：不抗凝离心分离出的上层清夜②血浆：加抗凝剂离心分离的上层清夜③全血④红细胞。
呼出气1）特点①优点：操作方便、干扰物少，非损伤性②缺点：a、被测物的含量比较低
b、肺泡气中水分对某些测定有影响
c、肺部“死腔”中环境空气对肺泡气稀释不稳定，影响测定结果的解释；2）
适用性①监测仅限于挥发性物质②主要用于测定化学物质原形③呼出气监测结果能反映采样期间车间空气的平均浓度；
3）呼出气的分类混合呼出气、终末呼出气（肺泡气）第一阶段呼出的是空气，第二
阶段混合呼出气，第三阶段肺泡气。
（二）、生物材料样品的选择
1、同一毒物或代谢产物在不同生物材料其生物学意义不一样，血镉代表近期接触水平、尿镉反映长
期接触的浓度；
2、选择生物材料样品种类的要求：①被测物有特异性②与外剂量有相关性③有足够的稳定④测定
结果重复性好，个体差异在允许范围内⑤采样能被受试者接受；
3、尿、血、呼出气是目前较理想的生物材料样品，美国BEI55个尿58%、血27%、呼出气14%。
）、样品米集、运输及保存
般要求
1采样时间：依据生物半减期；2、采样环境：无污染；
3、采样容器：①测无机成分、塑料、高压聚合玻璃：硬质、石英不锈钢含Cr、Ni、Mn （不能用
于测此三种元素）使用前要求用酸液（稀HN03）浸泡24h洗涤；②测有机物玻璃、塑料（不能用橡胶和添加染料的橡胶）冷冻保存不能用玻璃仪器；
4、样品的运输与保存；
5、米样记录①编号②检验项目③受试者信息④米样信息：时间、地点、环境、过程。⑤米样人及
记录人信息
（二）样品采集与保存
1、尿样
1）尿样的校正：（1）比重校正法标准比重1.020 校正公式C校正=（1.020-1.000 ）/ （d-
1.000）*c=kc d的使用范围1.010?1.030 （2）肌酐校正法.尿中被测物浓度（mg/g肌酐）=实测浓
度（mg/L）/肌酐浓度（g/L ），肌酐含量
2）采样.采集尿液不少于50ml,用顶空分析法测定挥发性物质时.收集尿样的容器要充满尿样并知道体积，记录2人上次排空膀胱的时间及采集样的终点时间。
3）储存.贮存一般2周.反腐加酸.氯仿.冷藏测尿中汞或挥发性有机物要尽快测定要保存5 天以上的，最好冷冻
2、血样
1）采集（1）、全血；要抗凝（2）、血清（血浆）或红细胞
2）注意事项采集过程避免污染.毛细管血防止溶血.金属针头（取下）再挤出针管时不能太
快取末梢血要避免挤压采集部位，自然流出弃去第一滴血④有三种情况不宜采集毛细管血a血液量
超过5ml.b采集环境有外源性化学物质存在c测定挥发性成分
3）血样的运输与保存避免振动和温度的改变血样冷冻肯定溶血采集血清或血浆时，应分
离再保存临时存放4°C过夜，长时间保存要冷冻④测酶活性要采集后尽快分析
去年微生物重点 1、分类学： （1）进化树； （2）以前分类和现代分类差别 2、生态学： （1）结构和信息的传递与交流；结构和功能； （2）肠道生态学的安全性； （3）极端生态环境：从分子机制上解释微生物怎么存活，机制上总结归纳，从角度上分析；（4）环境样品中怎么样认识它，微生物的结构（复杂体系中）； （5）结构特征反应生态学效应。 3、代谢： （1）代谢网络； （2）NRPS模型：核糖体和非核糖体的形成机制； （2）细胞的生理过程来考虑，代谢网络对微生物的影响。 4、生理学： （1）微生物的发育，细菌的分裂（关键事件）； （2）菌丝发育：内因子的影响； （3）异核体和单孢子形成关系； （4）孢子形成机制； （5）表型联现象； 5、发酵过程控制： （1）哪些因素对过程产生影响：泡沫，溶氧，染菌等； （2）应用微生物的开发从哪些方面考虑。
一、分类学： （1）进化树； 微生物的进化是指微生物与其生存环境相互作用过程中，其遗传系统随时间发生一系列不可逆的改变，在大多数情况下，导致微生物表型改变和对生存环境的相对适应。 系统发育是指生物进化的历史。 生物进化测量指征 一、能标示生物进化的指征分子 二、作为进化标尺的生物大分子的选择原则 三、16S rRNA是最佳的生物进化的指征分子，16S rRNA被普遍公认为是一把好的谱系分析的“分子尺” 1、rRNA具有重要且恒定的生理功能。 2、在16S rRNA分子中，含有高度保守、中度保守序列区域和 高度变化的序列区域。 3、16S rRNA分子量大小适中，便于序列分析； 4、和真核生物中的18S rRNA同源 四. 16S rRNA序列的顺序和进化 微生物间16S rRNA序列变化量越大，亲缘关系越远。 进化树是由相互关联的分支线条做成的图形。进化树具有时空概念。分支线条代表着属或种等分类单位；分支末端代表着某种生活着的生物个体。树还有时间尺度，其分支长度代表着已经发生在两线条间的分子进化时间距离。进化树可以是有根树也可是无根树。 进化树在生物学中，用来表示物种之间的进化关系，又称“系统树”、“系谱树”。生物分类学家和进化论者根据各类生物间的亲缘关系的远近，把各类生物安置在有分枝的树状的图表上，简明地表示生物的进化历程和亲缘关系。在进化树上每个叶子结点代表一个物种，如果每一条边都被赋予一个适当的权值，那么两个叶子结点之间的最短距离就可以表示相应的两个物种之间的差异程度。从进化树中还可看出：生物进化有一个规律，都是从水生到陆生，从低等到高等，从简单到复杂。 （2）以前分类和现代分类差别 1、经典微生物分类鉴定手段
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1.仪器的标识管理：红（停用）黄（准用）绿（合格）各自所表明的状态。 2.分光光度计检测细菌浓度用可见光分光光度计，测细菌波长用６００ｎｍ。检测蛋白用紫外分光光度计（波长用２８０ｎｍ），它也可测核酸浓度（波长２６０ｎｍ）。选定分光光度计测定颜色反应光的波长是４５０ｎｍ。石英比色皿用于紫外分光光度计，玻璃比色皿用于可见光分光光度计。 3．紫外透射仪该仪器使用条件是暗室和紫外线，主要用于在紫外线下看ＤＮＡ条带。 4．色谱气相色谱可做微生物分类和鉴定，用于微生物的化学成分分析。液相色谱仪也可做微生物化学成分分析。质谱仪也可做微生物化学成分分析。 5．测序仪蛋白测序仪测定氨基酸排列顺序，ＤＮＡ测序仪是测核苷酸排列顺序。能做ＤＮＡ测序的物质是质粒、噬菌体、ＰＣＲ产物。 6．扩增仪ＰＣＲ是聚合酶链反应缩写，能做ＰＣＲ称ＤＮＡ扩增仪。它能以一定ＤＮＡ片段为模板，变换温度，扩增该片段。常用的“枪”是实验室常用的微量可调移液器。 7．酶标做ＥＬＩＳＡ的仪器称酶标仪，做ＥＵＳＡ反应，其中主要设备有塑料凹孔板、洗板机和酶标仪。
溴化乙锭有致癌作用，故在使用时应注意。丙烯酰胺具有神经毒，在用时注意个人防护。 12、琼脂糖凝胶电泳此电泳用于核酸分离与纯化，用水平电泳槽。分离ＤＮＡ片段最佳范围为２００ｂｐ～５０ｋｂ。 13、聚丙烯酰胺电泳该电泳通常用垂直电泳槽，分离ＤＮＡ片段是最佳范围是５～５００ｂｐ。 14.中华人民共和国国家标准GB 19489--2004《实验室生物安全通用要求》根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级：危害等级Ⅰ（低个体危害，低群体危害）不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。 危害等级Ⅱ（中等个体危害，有限群体危害）能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。 危害等级Ⅲ（高个体危害，低群体危害）能引起人或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能用抗生素抗寄生虫药治疗的病原体。 危害等级Ⅳ（高个体危害，高群体危害）能引起人或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接、间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物之间传播的病原体。
一、名词解释： 1、溶原性细菌：获得温和噬菌体核酸的细菌。 2、前噬菌体：温和噬菌体整合于细菌染色体（宿主基因组）中的核酸称为前噬菌体。 3、侵袭力：病原微生物能突破宿主的防御系统，在机体内定植、繁殖和扩散的能力。 4、正常菌群MIC（最低抑菌浓度）：在体外试验中，抗菌药物抑制培养基中某种细菌生长最低药物浓度，是药物 抗菌活性指标，提示药物的抑菌能力（μg/ml） 5、MRSA：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 6、迁徙生长现象：变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长，形成以菌种接种部位为中心的，厚薄交替同心圆型 的层层波状菌苔 7、菌丝：真菌在适宜的环境中，由孢子出芽形成芽管，逐渐延长呈丝状，称为菌丝。 8、二相性真菌：有些真菌在不同寄生环境和培养条件下可出现两种形态，称二相性真菌 9、病毒体：一个成熟有感染性的病毒颗粒称为病毒体 二、填空、判断、选择、问答部分 （一）革兰氏染色的三个原理，操作步骤与临床意义【选择题】 1、原理： （1）渗透学说：革兰阳性菌细胞壁结构较紧密，肽聚糖层厚，含脂质少，脱色时乙醇不易渗入，反而使细胞壁 脱水，通透性下降，胞内结晶紫与碘的复合物不易渗出。格兰阴性菌细胞壁结构较疏松，肽聚糖层薄，含脂质多，易被乙醇溶解，是细胞壁通透性增加，胞内结晶紫与碘的复合物易被乙醇溶解溢出而被脱色。【主要学说——细 胞壁结构学说：G+菌和G-菌的细胞壁成分差异大，对脱色剂的反应不同】 （2）化学学说：革兰阳性菌含大量核糖核酸镁盐可与结晶紫、碘牢固结合，而不易被乙醇脱色。革兰阴性菌内 所含核糖核酸镁盐少，故易被脱色。 （3）等电点学说：革兰阳性菌的等电点（pH2~3）比格兰阴性菌（pH4~5）低，在相同pH的条件下，革兰阳性菌 比格兰阴性菌所带的负电荷多，与带正电荷的碱性染料结合较牢固，而不易脱色。 2、操作步骤：①细菌涂片、干燥，经火焰固定（菌膜>1cmX1cm）②结晶紫染色1min，水洗甩干③加碘液媒染 1min，水洗甩干④加95%乙醇脱色30s，水洗甩干⑤用稀释复红或沙黄复染30s，水洗吸干后镜检 3、临床意义：①鉴别细菌②选择治疗用药③与细菌致病性有关 （二）细菌的基本结构及功能、细菌的特殊结构及功能、细菌的变异机理【选择题】 细菌蛋白质的合成场所：核糖体（同时也是药物作用的部分） 细菌内毒素的化学成分：脂多糖 1、细菌的基本结构 基本结构：由外向内依次为细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等。 （1）细胞壁 a.主要功能：①维持细菌固有形态②抵抗低渗作用③物质交换作用 2、化学组成和结构 a.肽聚糖：是细菌细胞壁的主要成分，也是原核细胞所特有的成分 革兰阳性菌的肽聚糖（多）：聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥三部分构成的三维网架结构 革兰阴性菌的肽聚糖（少）：聚糖骨架、四肽侧链两部分构成的二维网架结构 b.磷壁酸：革兰阳性菌细胞壁特有。作用：调节、维护细菌细胞内离子平衡作用，是革兰阳性菌重要的表面抗原，与细菌致病性有关。 壁磷壁酸：由肽聚糖延伸；膜磷壁酸：由细胞膜延伸 c.外膜层：革兰阴性菌细胞壁特有。细胞壁肽聚糖外侧，由外向内依次为脂多糖、脂质双层、脂蛋白三部分①脂 多糖：格兰阴性菌内毒素，脂质A为主要毒性成分 第1/12页 （2）细胞膜：一层柔软而富有弹性的半渗透性双层脂质生物膜结构，脂质双层中镶嵌有多种蛋白质。中介体： 细胞膜内陷折叠而成的囊状结构。 （3）细胞质 有质粒（是染色体外遗传物质） 包括：F质粒（至育性质粒）R质粒（耐药性质粒）Vi质粒（毒力质粒） 2、细菌的特殊结构（鞭毛、荚膜、芽孢和菌毛） （1）鞭毛：附着在菌体上面胞壁外的细长呈波浪形弯曲的丝状物。 a.类型：周毛菌，单毛菌，双毛菌，丛毛菌。 b.作用和意义：①是细菌的运动器官②与细菌致病性有关③与细菌鉴定、分类及分型有关 （2）菌毛：是指菌体表面具有比鞭毛更细、短而直的丝状附属物。化学本质：蛋白质 a.普通菌毛：是细菌的黏附器官，与细菌致病性密切相关 b.性菌毛：F质粒控制，表面有性菌毛的称为雄性菌（F+），无性菌毛称为雌性菌（F-） （3）荚膜：某些细菌在细胞壁外包绕的一层黏液性物质。化学本质：多糖类，少数为多肽 通常在机体内和营养丰富的培养基中易形成荚膜 a.作用：①抗吞噬②抗杀伤③抗干燥④与致病性有关⑤细菌鉴别和分型的依据⑥免疫原性 （4）芽孢：是某些细菌在一定条件下细胞质、核质浓缩脱水而形成的一个折光性很强，具有多层膜状结构、通 透性很低的圆形或卵圆形的小体。 a.形成条件：缺乏营养物质，有害代谢产物的堆积
单选——24 x 1.5分=36分 1.在接触毒物时混合呼出气中毒物浓度高，在停止接触后，末端呼出气毒物浓 度高。（取样考虑） 2.班前：进入工作岗位前1h；班中：开始工作后2h至下班前1h；班末：下班 前1h内；班后：下班后1h内。 3.尿样比重低于1.010g/ml或高于1.035g/ml的尿样，肌酐浓度小于0.3或大 于3.0g/L的尿样，都重新采样测定。 4.无机元素分析的样品预处理中矿物化法可将有机物彻底分解破坏，其中湿消 化法最常联用：硫酸、硝酸、高氯酸。 5.正常参考值范围的计算方法：正态近视法、百分位数法。 6.有些组分在血中的含量在一天内并非恒定不变，如血清铁在早晨6时最高而 在晚上21时至22时最低。 7.二硫化碳的生物监测指标：班末尿中TTCA、终末呼出气中二硫化碳。 8.硒：谷胱甘肽过氧化酶的活性中心，和维生素e一起能阻断自由基的连锁反 应。可抗肿瘤。缺硒引起克山病、大骨节病。检验尿硒和血硒可以了解它在体内的吸收、代谢和蓄积水平。 9.芳香烃分类：单环芳烃和多环芳烃。单环芳烃有苯及其同系物、苯基取代的不饱和脂烃。 多环芳烃有联苯和联多苯环芳烃、多苯代脂肪烃环芳烃以及稠环芳烃。 10.尿酚和呼出气中苯的含量为苯接触监测指标。 尿酚值大于10mg/L时，提示有苯的接触，但正常人尿酚水平为2~18mg/L，平均5~18mg/L。由于个体差异大，尿酚仅适合作群体接触程度的监测指标，又由于接触苯酚时尿酚的浓度也会升高，故测定呼出气中苯作为确认实验。 11.肝微粒体上的细胞色素P450（cytP450）至少有6种同工酶，其中2B和2E与苯代谢有 关。 12.美国政府工业卫生家协会ACGIH规定接触苯时尿中总酚的生物接触指数为50mg/L（班 末）。规定班前呼出气中苯的生物接触指数为0.42mg/m3。 13.采集：呼出气样品应采集接触苯后次日班前的终末呼出气（肺泡气）。 尿样：对于正常人，一般去晨尿分析，对苯接触者，因开始接触后苯酚浓度迅速上升，脱离接触后又很快下降，故取样时间应严格控制，以取班末尿为宜。 14.出气苯测定的注意事项：采样应在无污染的室内进行。当回收率低于75%时，应检查六 通阀是否泄漏，或是否需要更换活性炭，活性炭在分析前要先热解析活化。苯与乙醇分离不完全，需考虑饮酒情况。正乙烷、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲苯、环己酮等均不干扰苯的测定。 15.尿中苯酚的测定： 分光光度法 偶氮染料法 二氯醌氯亚胺法 4-氨基安替比林法：较常用，线性范围宽，操作和试剂均较简单。 气相色谱法：分离效果依使用的色谱柱而异。 反相高效液相色潽法：最常用。快速、准确、灵敏。贵！ 16.进入体内的甲苯约15%-20%以原型经呼吸道排出，这是甲苯生物监测的特异性指标， 但因代谢很快和缺乏灵敏的检测方法，目前我国还没有广泛应用于生物监测中。尿中马尿酸作为甲苯接触的非特异性生物监测指标，影响因素多，但是测定方法简便，易于操作，有一定的参考价值。静脉血中的甲苯是特异的监测指标，但目前方法不到位。
巴斯德效应：在有氧条件下。兼性厌氧微生物终止发酵，进行有氧呼吸，这种呼吸抑制发酵的现象称为巴斯德效应。即呼吸抑制作用。 巴斯德的贡献：1.证实了微生物活动和否定了微生物自然发生学说；2开创了免疫学——预防接种。3.发酵的研究 ；4.巴斯德消毒法，观察丁醇发酵时发现厌氧生命，提出好氧厌氧属于。 柯赫的贡献：1设计了分离和纯化细菌的方法：划线法、混合平板法。2.设计了培养细菌用的肉汁胨培养液和营养琼脂培养基。3.设计了细菌染色技术。4.提出柯赫法则：（证明某种生物是否为某种疾病的病原的基本原则）i.病原体微生物一定伴随着病害而存在; ii; 必须能自原寄主分理处这种微生物，并培养成为纯培养; iii. 分离培养出的病原体比能在实验动物身上产生相同的症状 iiii 必须自人工接种发病的寄主内，能重新分离出同一病原微生物并培养成纯培养。 3．试述染色法的机制并说明此法的重要性。 答：革兰氏染色的机制为：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，在加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，G-细菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此细胞退成无色。这时，在经沙黄等红色染料复染，就使 G-细菌呈红色，而 G+细菌则仍保留最初的紫色。 此法证明了 G+和 G-主要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不同而使染色反应不同，是一种积极重要的鉴别染色法，不仅可以用与鉴别真细菌，也可鉴别古生菌。 5. 试述几种细菌细胞壁缺损型的形成，特点和实际意义。 自发缺壁突变：L 型细菌 实验室中形成 彻底除尽：原生质体 人工方法去壁 部分去除：原生质球 自然界长期进化中形成：支原体 实际意义：原生质体和原生质球比正常有细胞壁的细菌更易导入外源遗传物质，故是遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料。 L 型细菌：细菌在某种环境条件下（如低浓度青霉素）因基因突变而产生的缺乏细胞壁的遗传性能稳定的变异类型。
食品微生物学检验GB 4789 系列知识点汇总 GB 4789.1-2016 食品卫生学检验总则 一、2016版总则变更内容 1.删除了标准中的英文名称、起草单位变更为中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局。 2.删除了规范性引用文件。 3.修改了实验室基本要求： 微生物专业教育或培训经历（如生物学、植 物学、医学、食品科学与工程、食品质量与安全等与微 生物有关的相关专业），具备相应的资质（应有岗位上岗 证、生物安全上岗证和压力容器上岗证），能够理解并正 确实施检验。 ①人员修改为检验人员实验室生物安全操作和消毒知识（相关标准及培训， 如GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求、消毒技术 规范（2002））。 品。 确保自身安全。
有颜色视觉障碍的人员不能从事涉及辨色的实验（即无颜 色视觉障碍）。 ②环境与设施--突出温度、湿度和洁净度。 生物危害程度应与实验室生物防护水平相适应: 灭的微生物，如天花病毒。 间传播如霍乱弧菌。 病原微生物分类 沙门氏菌、单增李斯特氏菌。 第四类：通常不会引起人或动物疾病的微生物。 BSL-1）：操作第四类病原微生物（属于正压，适用 ） 实验室生物安全级别BSL-2）：操作第三类病原微生物（属于负压，适用 II级生物安全 ） BSL-3）：操作第二类病原微生物
四级（BSL-4）：操作第一类病原微生物 消毒：是杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其中的孢子。 灭菌：是杀死和去除所有微生物及其中孢子的过程。 蒸法消毒） 消毒剂表面消毒 微生物实验 高压灭菌 干热灭菌（180℃1h或170℃2h） 培养基和试剂灭菌 过滤除菌 紫外线消毒法：紫外灯管放射一定波长，破坏细菌或病毒的DNA和RNA，使他们丧失生存能力和繁殖能力，从而达到灭菌目的。紫外线的特点是对芽孢和营养细胞都能起作用，但细菌芽孢和霉菌芽孢对其抵抗力大，且紫外线穿透力极低，所以只能用于表面灭菌，对固体物质灭菌不彻底。
检验技术资格考试考点精要——微生物学检验（中级） 1. 生物学按界门纲目科属种分类，种是最小单位。病毒分类：目、科、亚科、属、种。属名--VRir us 结尾的单词,亚科名--VRir inae结尾的单词,科名--VRir idae结尾的单词。目名—VRir ales。2004年ICTV 公布病毒分为：73个科、11个亚种、289个属。 2. 结核菌可利用甘油为碳源，梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源，流感嗜血杆菌要Ⅴ，Ⅹ因子才能生长。 3. 药物敏感试验：纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。常用单片纸碟法、试管稀释法（以抗菌药物的最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点，该管含药浓度为最低抑菌浓度MIC或最低杀菌浓度MBC），两值越低则表示越敏感。MIC与抑菌圈呈负相关，即抑菌环直径越大，MIC越小。 各药敏纸片间距不少于24mm，距平板内缘不小于15mm。 药物敏感实验判定标准：抑菌圈直径（毫米）：20以上极敏、15~20高敏、10~14中敏、10以下低敏。不同的菌株、不同的抗生素纸片需参照NCCLs的标准或者CLSI标准。 多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6—9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。 4.常用的免疫技术：酶免疫技术（EIA）、协同凝集试验、免疫荧光技术（IF）、对流免疫电泳（CIE）、免疫印迹技术。 5.病原菌核酸的检测：核酸杂交、PCR技术、基因芯片技术。 PCR技术—是选择DNA或RNA体外扩增技术，用标本提取DNA为扩增模板，选用一对特异寡核苷酸为引物，PCR一般要经历三十多次循环，经不同温度变性93-94℃（作用1min氢键断裂形成单链DNA）、退火40-60℃（迅速冷却30-60s引物与DNA模板结合，形成局部双链）、延伸70-75℃（在TaqDNA聚合酶作用下，以A、T、G、C四种脱氧核苷酸为原料，从引物5’→3’端延伸，合成与模板互补的DNA链。），扩增产物用溴乙啶染色的凝胶电泳。其具有特异、快速、灵敏、特异性强、操作简便、能够定量。引物是PCR特异性的决定因素，PCR反应中TaqDNA聚合酶、引物加量过多，可引起非靶序列扩增。 变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变： 1）溶液粘度降低。2）溶液旋光性发生改变。3）增色效应。热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为" 退火"，Tm低25℃左右的温度是复性的最佳条件。核酸实验中经常以迅速冷却至4℃以下方式保持DNA的变性(单链)状态。 基因芯片技术（DNA芯片、DNA微阵列）—主要过程：DNA微阵列的制备、样品的制备、靶分子和探针之间的杂交、杂交信号的检测与分析。具有快速、敏感、高通量检测平台。 核酸杂交（基因探针杂交技术）--是指单链RNA和DNA或DNA和DNA或RNA和RNA，根据碱基配对原则，借氢键相连而形成杂交分子的过程。杂交百分率＞70%（≥69%）为高度同源性，同源性在60%以上是一个种，同源性在60%--70%是同一种内不同亚种，同源性在20%--60%同一属内不同菌种，同源性
绪论 1.微生物的定义与特点;微生物的分类。 一、微生物的概念与特点 1.微生物（microorganism）是一群个体微小，结构简单，肉眼不能直接看见，必须借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能观察到的微小生物的总称。 2.微生物的特点 个体微小，结构简单 比表面积大，吸收多，转化快 繁殖快，代谢强 适应强，易变异 种类多，分布广 1.微生物类型 根据微生物大小、结构和组成不同分为三类型 2.病原微生物的定义病原微生物：是指能引起动物、植物或人类产生疾病的微生物。 3.医学微生物学的发展简史。 .微生物的发现与研究 （1）列文虎克发明显微镜，最早观察到微生物；微生物学研究的创始人：巴斯德、科赫、李斯特 第一章细菌的基本性状 第一节细菌的形态与结构 1.细菌细胞壁的结构和功能，肽聚糖结构及其化学组成；革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要区别 （一）细胞壁 化学组成与结构，革兰染色共有组分：肽聚糖 特殊组分：G+ 菌、G-菌不同 革兰阳性菌细胞壁特殊组分：磷壁酸 革兰阴性菌细胞壁特殊组分：外膜
革兰阴性菌细胞壁肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链 2.细胞壁的功能： （1）维持细菌固有形态和抵抗低渗作用。（2）物质交换作用。（3）屏障作用。（4）免疫作用。（5）致病作用。（6）与细菌药物敏感性有关。 G+菌与G-菌细胞壁结构比较 ?细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同，由磷脂和多种蛋白质组成，但不含胆固醇。 ?细菌细胞膜可形成一种特有的结构，称中介体。 2.细菌荚膜、鞭毛和菌毛的功能。 荚膜： 功能： 有抗吞噬和抵抗杀菌物质的杀菌作用，增强细菌的侵袭力，构成细菌致病力的重要因素之一。②具有免疫原性。③鉴别细菌和血清学分型 鞭毛：功能：细菌的运动器官 菌毛 普通菌毛：具有黏附性，与细菌致病性有关。 性菌毛：与细菌的遗传变异相关 3.芽胞结构特点、意义、与消毒灭菌的关系；细菌L型的形态特征、检验要点。 芽胞：某些细菌（主要为革兰阳性杆菌）在一定条件下，细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强，具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。 L型细菌：细胞壁缺陷的细菌。 常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中。 根据细胞壁缺陷程度分： 原生质体（完全失去细胞壁，见于G+菌，仅在高渗环境中存活) 原生质球（细胞壁部分缺损，见于G-菌，在高渗或非高渗环境中均能存活） 4.G+菌和G-菌细胞壁结构的差异及其意义。 第二节细菌的生理 细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;IMViC试验的组成及机制;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义。
生物材料检验考试重点 https://www.doczj.com/doc/5619081010.html,work Information Technology Company.2020YEAR
生物材料检验 第一章绪论 1、生物材料（biological material）：人体体液（如血液）、分泌物（唾液、乳汁、汗液）、排泄物（如呼出气、尿液）、毛发、指甲以及组织（脂肪组织）等的总称。 2、生物材料检验（Analysis of biological materials）： 3、生物材料中化学物质及其代谢产物、或由化学物质引起机体产生的生物学效应指标变化的检验方法的科学。 4、生物监测（biological monitoring） 系统收集人体生物材料样品，定期检测其中毒物或其代谢产物的含量或由它们所引起的效应水平，以评价人体接触化学物质的程度及对健康的影响。 5、环境监测（environmental monitoring）：强调空气、水等外环境中有害物质的含量水平，评价的是毒物的外剂量水平。 6、生物标志物（biomarker） 一般指生物系统接触外源性物质后出现的一种改变，主要是化学物质在生物体内形成的代谢产物，以及可测定的生化、生理、免疫、细胞或分子的变化，主要用于接触评价、健康危害评价以及临床诊断等。 可分为接触性生物标志物、效应性生物标志物和敏感性生物标志物。 生物标志物的分类 ①接触性生物标志物: 测定组织、体液或排泄物中吸收的化学物、其代谢产物或内源性物质的反应产物，作为吸收剂量或靶剂量的指标，提供关于接触外源性化学物的信息。 ②效应性生物标志物:同健康危害或疾病有关的可测定性的生化、生理、行为以及其它生物学变化。如接触苯出现再生障碍性贫血时各项血液学检查指标，中毒性肝病和肾病患者各项肝肾功能检查指标等。 ③敏感性生物标志物: 关于个体对外源性化学物的生物易感性的指标。指机体先天固有或后天获得的对外界有害因素所引起的有害效应的反应能力。敏感性的生物标志物可用于筛检易感人群，保护高危人群。 6、生物接触限值（biological exposure limit, BEL）： 对生物材料中有害物质或其代谢产物规定的最高容许浓度，或某些效应指标改变所容许的浓度范围，相当于健康工人吸入或接触车间空气最高容许浓度的毒物时，生物材料中被测物的含量水平。 美国称生物接触指数(BEI)，德国称生物学耐受量(BAT)。 7、正常参考值（normal reference range） 无明显肝、肾及血液系统疾病和无职业有害因素接触史的“健康正常人”的生物材料样品中某种成分的含量或生化指标值。 8、混合呼出气（mixed expired gas）：尽力吸气后用最大力量呼出气至不能再呼出气为止所呼出的全部气体。 9、检验指标选择基本要求 1. 特异性好：如果特异性不好，可考虑选用两个或两个以上指标进行检验。如氯乙烯，检测血、尿、呼出气中的 氯乙烯，也可检测其代谢产物尿中亚硫基二乙酸。 2.具有良好的剂量-效应关系：内剂量与外接触量，内剂量与生物学效应。如铅，ZPP、ALAD、ALA与血铅有良好的 剂量关系，血铅与环境中的铅有良好的剂量反应关系。 3.稳定性好：在一定时间内可以稳定不变化 4.有准确可靠的检验方法
一.卫生微生物学的研究对象 1.环境中与人类相关的微生物即卫生微生物 2.卫生微生物所处的环境：物理环境和生物环境 二.卫生微生物学的应用及研究前景 1.在感染性疾病中的控制和治疗及其预防的应用 2.在生物危害和恐怖中的应用 3.在生物病原性突发事件中的应用 4.在科学发展和研究中的应用 5.在制定国家标准和行业规范服务中的应用 三.微生物与环境相互作用的三个基本规律 1.限制因子定律：存在于稳定环境中，任何生物的生物量取决于环境中该生物生长所需的最低营养浓度。 2.耐受性定律：是指生物对于环境中生态因子能耐受的范围。 3.综合作用定律;一个生物或一群生物的生存和繁殖取决于综合环境 四.微生物种群之间的相互作用类型 1.互生关系：偏利互生.互利互生.互惠互生 2.寄生关系 3.捕食关系 4.竞争关系 5.拮抗关系 6.种间共处 五.微生物生态研究的应用 1.在病因研究中的应用 2.在认识疾病本质中的应用 3.在疾病防治中的应用 4.在环境污染研究中的应用。 六.真菌包括哪些微生物，水体富营养化于哪种藻类相关 酵母菌.霉菌.丝状菌.类酵母菌甲藻海洋赤潮
七.什么是蓝藻菌，其中哪几属与水体富营养化有关 1.蓝藻菌是一种原核细胞型微生物，含叶绿素A，能进行光合作用 2.鱼腥藻属，颤藻属，微囊藻属 八.放线菌的一般特征是什么 原核微生物，其细胞壁含有胞壁酸，对抗生素敏感，无性生殖，大多属革兰阳性菌，体积比细菌大，以um计算，菌落形态介于霉菌和细菌之间，多数为腐生菌，厌氧或微需氧。 九.微生物检测时样品的采集原则 1.注意采样的代表性 2.样品的采集原则：避免采样时外界微生物对于样品的新污染，避免采样时微生物的杂灭作用和引入新的抑菌物质，保护目的微生物，详细的样品标记。 十.什么是卫生指示微生物，其选择标准是什么 1.是指用以指示样品的卫生状况和安全性的微生物 2.标准：数量大，易于检出，经济，简便，方便，效率高，具有一定的代表性，即数量发生变化时具有明显的反应。 十一.为什么检测指示微生物能反应样品的安全性 1.致病微生物种类繁多，很难分别分离和鉴别 2.分离鉴别致病菌需时长，很难满足实际需求 3.致病菌的数量少，检测方法灵敏度不高，容易产生假阴性结果 4.分离鉴别致病菌花费较高，对技术人员的要求也较高 十二.影响消毒灭菌效果的因素 处理剂量.微生物的种类和数量.温度.湿度.酸碱度.化学拮抗物质.穿透力
2018年《预防疾控微生物检验技术》重点题(十一) 单选题-1/知识点：病毒及病毒检验综合题 对病毒抵抗力叙述错误的是 A.大多数病毒60℃30分钟可被灭活 B.大多数病毒在－70℃下可存活 C.紫外线能灭活病毒 D.甲醛能使病毒灭活，但保留抗原性 E.所有病毒对脂溶剂都敏感 单选题-2/知识点：试题 初步将志贺菌从肠道杆菌中鉴别出来的生化反应方法是 A.培养基中加亚碲酸钾 B.菊糖发酵试验 C.尿素分解试验 D.胆汁溶菌试验 E.双糖铁培养基接种试验 单选题-3/知识点：试题 不能判定为有污染菌的是 A.单个菌落经斜面培养，形成不均匀的菌苔 B.有的菌落不在接种线上 C.单个菌落经平板划线培养后，形成大小不一的菌落
D.脑脊液或血标本培养后有多种细菌(3种以上)生长 E.葡萄球菌液体培养后，产生菌膜 单选题-4/知识点：试题 以氧化无机物提供能量的营养类型是 A.光能自养型 B.化能自养型 C.光能异养型 D.化能异养型 E.以上都错 单选题-5/知识点：细菌及细菌检验综合题 关于细菌耐药机制，下述叙述错误的是 A.R质粒是携带耐药基因的质粒 B.染色体突变可导致耐药 C.转座子可携带耐药基因 D.耐药基因极少通过接合转移 E.质粒编码的耐药通常是多药耐药 单选题-6/知识点：模拟试题 为了保持人体微生态平衡，应合理使用抗生素，主要原则中错误的是 A.选择用药前，除危重患者外，原则上应先做细菌药敏试验 B.尽量使用小剂量
C.疗程尽量缩短 D.尽量使用广谱抗生素，彻底杀死病原菌 E.对肠道外感染，尽量非经口用药 单选题-7/知识点：流行病学 脊髓灰质炎活疫苗现场试验结果表明：接种疫苗组儿童脊髓灰质炎的发病率是16/10万，接受安慰剂组儿童的发病率是57／10万，因此该疫苗的效果指数是 A.72% B.0.28 C.72 D.3.6 E.41 单选题-8/知识点：试题 三级生物安全柜设计的生物安全等级为 A.1级生物安全实验室 B.2级生物安全实验室 C.3级生物安全实验室 D.4级生物安全实验室 E.5级生物安全实验室 单选题-9/知识点：试题
微生物检验知识点
1、微生物的分类：（三型八大类)**全部是重点** 三型八大类特点 非细胞型微生物病毒、亚病毒和朊粒无细胞结构，结构最简单，体积最微小，能通过 滤菌器； 单一核酸； 活细胞内寄生。 自我复制方式进行增殖 原核细胞型微生物细菌、放线菌、螺旋体、 支原体、衣原体、立克 次体仅有原始核； 缺乏完整细胞器。 真核细胞型微生物真菌、原虫细胞核分化程度较高； 有丝分裂进行繁殖； 有多种完整细胞器。 2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。 3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素） 4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白） 5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。是溶菌 酶、青霉素作用部位） 6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子 7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛— 粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质） *将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标 8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。②颗粒型菌落（简称G 型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。高渗环境生长。（环丙沙星） 9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体内有 机物为原料),所有致病菌都是异营菌。 10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。 11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长 12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。 13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法； 14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～10%CO2的气缸中培养，大部分细 菌可于24～48h生长良好。 15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长 才有价值。 16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。 17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染，使脱色菌体 着色）。 18、胃部细菌喜酸，肠道细菌喜碱 19、SS琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强，可影响检出率，所以，使用 时最好加一种弱选择平板以配对互补。
八年级生物会考重要知识点复习资料 第一单元：生物和生物圈 1、生物具有的共同特征：植物的营养：绝大多数通过光合作用制造有机物;动物的营养：从外界获取现成的营养。 2)生物能进行呼吸。 3)生物能排出身体内的废物。 动物排出废物的方式：出汗、呼出气体、排尿。 植物排出废物的方式：落叶。 4)生物能对外界刺激做出反应。例：斑马发现敌害后迅速奔逃。含羞草对刺激的反应。 5)生物能生长和繁殖。 6)除病毒以外，生物都是由细胞构成的。 2、生物圈的范围：大气圈的底部、水圈的大部和岩石圈的表面。 3、生物圈为生物的生存提供的基本条件：营养物质、阳光、空气和水、适宜的温度和一定的生存空间。 4、影响生物的生存的环境因素： 非生物因素：光、温度、水分等;生物因素：影响某种生物生活的其他生物。 例：七星瓢虫捕食蚜虫，是捕食关系。稻田里杂草和水稻争夺阳光，属竞争关系。蚂蚁、蜜蜂家庭成员之间分工合作。
5、探究：光对鼠妇生活的影响 1)提出问题：光会影响鼠妇的生活吗 2)作出假设：光会影响鼠妇的生活。 3)制定计划：检验假设是否正确，需通过实验进行探究。 实验方案的要求：需设计对照实验，光照是这个探究实验中的唯一变量。其他条件都相同。 4)实施计划 5)得出结论 6)表达、交流 6、生物对环境的适应和影响： 1)生物对环境的适应举例：荒漠中的骆驼，尿液非常少。骆驼刺地下根比地上部分长很多。寒冷海域中的海豹，胸部皮下脂肪厚，旗形树等。 2)生物对环境的影响：蚯蚓在土壤中活动，可以使土壤疏松，其粪便增加土壤的肥力;沙地植物防风固沙等都属于生物影响环境。 7、生态系统的概念和组成 概念：在一定地域内生物与环境所形成的统一整体叫做生态系统。 组成：包括生物部分和非生物部分。生物部分包括生产者、消费者和分解者。非生物部分包括阳光、水、空气、温度等 8、食物链和食物网：
1.仪器的标识管理：红（停用）黄（准用）绿（合格）各自所表明的状态。 2.分光光度计检测细菌浓度用可见光分光光度计，测细菌波长用６００ｎｍ。检测蛋白用紫外分光光度计（波长用２８０ｎｍ），它也可测核酸浓度（波长２６０ｎｍ）。选定分光光度计测定颜色反应光的波长是４５０ｎｍ。石英比色皿用于紫外分光光度计，玻璃比色皿用于可见光分光光度计。 3．紫外透射仪该仪器使用条件是暗室和紫外线，主要用于在紫外线下看ＤＮＡ条带。 4．色谱气相色谱可做微生物分类和鉴定，用于微生物的化学成分分析。液相色谱仪也可做微生物化学成分分析。质谱仪也可做微生物化学成分分析。 5．测序仪蛋白测序仪测定氨基酸排列顺序，ＤＮＡ测序仪是测核苷酸排列顺序。能做ＤＮＡ测序的物质是质粒、噬菌体、ＰＣＲ产物。 6．扩增仪ＰＣＲ是聚合酶链反应缩写，能做ＰＣＲ称ＤＮＡ扩增仪。它能以一定ＤＮＡ片段为模板，变换温度，扩增该片段。常用的“枪”是实验室常用的微量可调移液器。 7．酶标做ＥＬＩＳＡ的仪器称酶标仪，做ＥＵＳＡ反应，其中主要设备有塑料凹孔板、洗板机和酶标仪。 8.电泳类别醋酸纤维膜电泳可用于免疫球蛋白鉴定，琼脂免疫电泳用于蛋白分离和鉴定，对流免疫电泳可测抗原或抗体，火箭电
泳测抗原量，交叉定量免疫电泳测抗原量。ＩＦＥ是等电聚焦电泳。ＰＦＧＥ是脉冲电场凝胶电泳，ＰＡＧＥ是聚丙烯酰胺凝胶电泳。 9.ＰＡＧＥ用于蛋白和核酸分离，原理是凝胶介质形成立体多孔网状结构，具有分子筛和电泳作用。分离条带上边是大分子，下边是小分子物质。过硫酸铵在ＰＡＧＥ制备起催化聚合作用。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ是十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，它用于蛋白分离，在此电泳中，丙烯酰胺浓度越大，线性分离围越小；该物浓度越小，线性分离围越大，十二烷基硫酸钠作用是解离蛋白，用标准蛋白做标识测验电泳条带分子量。在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中常用蛋白染料是考马斯亮蓝，硝酸银也是其常用染料。该电泳中缓冲液重要成分为甘氨酸。 10、等电聚焦电泳其原理是以两性电解质制造凝胶有不同ｐＨ，使带不同电荷的多肽在电泳条件下于等电点停留。两性电解质是制备该电泳凝胶不同ｐＨ重要物质，用聚丙烯酰胺制备等电聚焦电泳凝胶。这种电泳主要用于蛋白质分离。 11、脉冲电泳脉冲电泳用于核酸分离，其优点是分离大片段核酸。用琼脂糖制备该电泳凝胶的介质。这种电泳的电场为正交的交变脉冲电场。脉冲电场凝胶电泳条带靠近负极为大片段ＤＮＡ，靠近正极为小片段ＤＮＡ。ＤＮＡ染色可用溴化乙锭，也可用硝酸银。因溴化乙锭有致癌作用，故在使用时应注意。丙烯酰胺具有神经毒，在用时注意个人防护。 12、琼脂糖凝胶电泳此电泳用于核酸分离与纯化，用水平电泳槽。分离ＤＮＡ片段最佳围为２００ｂｐ～５０ｋｂ。
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17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染，使脱色菌体 着色）。 18、胃部细菌喜酸，肠道细菌喜碱 19、SS琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强，可影响检出率，所以，使用 时最好加一种弱选择平板以配对互补。 20、碱性琼脂或TCBS琼脂用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。 21、痰标本：血平板、中国蓝／麦康凯、巧克力平板作分离。 22、中国蓝／麦康凯用于筛选G-杆菌； 23、含杆菌肽的巧克力平板（含有V和X因子）用于筛选嗜血杆菌 24、连续划线分离法：杂菌不多的标本。 分区划线分离法：杂菌量较多的标本。 25、斜面接种法：该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性 26、倾注平板法：牛乳、饮水和尿液细菌计数 27、涂布接种法：常用于纸片法药物敏感性测定，也可用于被检标本中的细菌计数。 28、半固体培养基用于观察细菌的动力（沿穿刺线生长呈模糊或根须状，并使培养基变混浊为动力阳性） 29、α溶血：菌落周围血培养基变为绿色环状；红细胞外形完整无缺。 β溶血：红细胞的溶解在菌落周围形成一个完全清晰透明的环。 γ溶血：无溶血。 双环：在菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二圆圈。 30、氧化-发酵试验（O/F试验）：有氧参加——氧化型；无氧降解——发酵型；不分解葡萄糖而分解蛋白 胨——产碱型。（肠杆菌科细菌发酵型全+） 31、甲基红试验(与V-P试验相反)：阳性红色，阴性黄色。大肠埃希菌（+），产气肠杆菌(-) 32、白喉棒状杆菌：G+，异染颗粒、毒力试验，Elek平板，亚碲酸钾血琼脂。外毒素（毒血症）只有携 带β-棒状噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素。 33、内毒素测定主要用于确诊患者是否发生G-细菌感染。常采用鲎试验。本方法灵敏度高，可检查出 0.0005～0.005μg/ml内毒素。 外毒素主要用于确诊患者是否感染革兰阳性菌及部分阴性菌。常用体内及体外毒力试验检测，也可通过ELISA法测定。 34、葡萄球菌属：G+，耐热、耐干燥、耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。 凝固酶阳性葡萄球菌：金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌 凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）：表皮葡萄球菌（新生霉素敏感，医院感染，血培养污染）、腐生葡萄球菌（新生霉素耐药，凝固酶阴性。尿路感染） 蛋白抗原：葡萄球菌A蛋白（SPA）：完全抗原，有种属特异性，无型特异性。抗吞噬作用。多糖抗原：半抗原，型特异性。 35、金黄色葡萄球菌：触酶试验、凝固酶试验（最简单）、耐热DNA酶试验、甘露醇发酵试验均阳性。对新生霉素敏感。透明溶血环。 致病性：感染（化脓性感染，食物中毒，表现为急性胃肠炎），医院内感染，毒素性疾病。主要致病物质有血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素、表皮溶解毒素和毒性休克综合征毒素等。
生物材料检验 第一章绪论 1、生物材料（biological material）：人体体液（如血液）、分泌物（唾液、乳汁、汗液）、排泄物（如呼出气、尿液）、毛发、指甲以及组织（脂肪组织）等的总称。 2、生物材料检验（Analysis of biological materials）： 生物材料中化学物质及其代产物、或由化学物质引起机体产生的生物学效应指标变化的检验方法的科学。 3、生物监测（biological monitoring） 系统收集人体生物材料样品，定期检测其中毒物或其代产物的含量或由它们所引起的效应水平，以评价人体接触化学物质的程度及对健康的影响。 4、环境监测（environmental monitoring）：强调空气、水等外环境中有害物质的含量水平，评价的是毒物的外剂量水平。 5、生物标志物（biomarker） 一般指生物系统接触外源性物质后出现的一种改变，主要是化学物质在生物体形成的代产物，以及可测定的生化、生理、免疫、细胞或分子的变化，主要用于接触评价、健康危害评价以及临床诊断等。 可分为接触性生物标志物、效应性生物标志物和敏感性生物标志物。 生物标志物的分类 ①接触性生物标志物: 测定组织、体液或排泄物中吸收的化学物、其代产物或源性物质的反应产物，作为吸收剂量或靶剂量的指标，提供关于接触外源性化学物的信息。 ②效应性生物标志物:同健康危害或疾病有关的可测定性的生化、生理、行为以及其它生物学变化。如接触苯出现再生障碍性贫血时各项血液学检查指标，中毒性肝病和肾病患者各项肝肾功能检查指标等。 ③敏感性生物标志物: 关于个体对外源性化学物的生物易感性的指标。指机体先天固有或后天获得的对外界有害因素所引起的有害效应的反应能力。敏感性的生物标志物可用于筛检易感人群，保护高危人群。 6、生物接触限值（biological exposure limit, BEL）： 对生物材料中有害物质或其代产物规定的最高容许浓度，或某些效应指标改变所容许的浓度围，相当于健康工人吸入或接触车间空气最高容许浓度的毒物时，生物材料中被测物的含量水平。 美国称生物接触指数(BEI)，德国称生物学耐受量(BAT)。 7、正常参考值（normal reference range） 无明显肝、肾及血液系统疾病和无职业有害因素接触史的“健康正常人”的生物材料样品中某种成分的含量或生化指标值。 8、混合呼出气（mixed expired gas）：尽力吸气后用最大力量呼出气至不能再呼出气为止所呼出的全部气体。 终末呼出气（end expired gas）：先尽力吸气，在平和呼出气后，再尽力呼出气至不能呼出气为止的最后一段呼出气。