第十章吸光光度法
一、单项选择题（共25题）
10.1.1 在光度分析中，以1cm的比色皿测量透光率为T，若比色皿的厚度增加一倍，透过率为（）
A、T/2
B、T2
C、2T D
10.1.2 相同质量Fe3+和Cd2+（Mr（Fe）=55.85，Mr（Cd）=112.4），各用一种显色剂在同样体积溶液中显色，用分光光度法测定，前者用2cm比色皿，后者用1cm比色皿，测得吸光度相同，则两种有色络合物的摩尔吸光系数ε为（）
A、基本相同
B、Fe3+为Cd2+两倍
C、Cd2+为Fe3+两倍
D、Cd2+为Fe3+四倍
10.1.3 以下说法错误的是（）
A、摩尔吸光系数ε随浓度增大而增大
B、吸光度A随浓度增大而增大
C、透过率T随浓度增大而增大
D、透过率T随比色皿加厚而减小
10.1.4 Ni（NH3）42+络离子为绿色溶液，其吸收最大的光的颜色为（）
A、绿色
B、红色
C、紫色
D、黄色
10.1.5 以下说法错误的是（）
A、吸光度A与浓度C成直线关系
B、透光率随浓度的增加而减少
C、当透过率为“0”时吸光度为∞
D、选用透过率与浓度做工作曲线准确度高
10.1.6 分光光度计检测器直接测定是（）
A、入射光的强度
B、吸收光的强度
C、透过光的强度
D、散射光的强度
10.1.7 某金属离子M与试剂R形成一有色络合物MR，若溶液中M的浓度为
1.0?10-4mol/L，用1cm比色皿于波长525nm处测得吸光度A为0.400，此络合物在525nm处的摩尔吸光系数ε为（）
A、4.0?10-3 L*mol-1*cm-1
B、4.0?103 L*mol-1*cm-1
C、4.0?10-4 L*mol-1*cm-1
D、4.0?105 L*mol-1*cm-1
10.1.8 测定纯金属钴中锰时，在酸性溶液中以KIO4氧化Mn2+成MnO4-光度测定，测定试样中锰时，其参比溶液为（）
A、蒸馏水
B、含KIO4的试样溶液
C、KIO4溶液
D、不含KIO4的试样溶液
10.1.9 一有色溶液对某波长光的吸收遵守比耳定律。当选用2.0cm的比色皿时，测得透过率为T，若改用1.0cm的吸收池，则透过率为（）
A、2T
B、T/2
C、T2D
10.1.10 以下说法错误的是（）
A、比色分析所用的参比溶液又称空白溶液
B、滤光片应使用使溶液吸光度最大者为宜
C、一般说，摩尔吸光系数ε在105—106 L*mol-1*cm-1
D、吸光度具有加和性
10.1.11 在光度分析中，采用有色显示剂测定金属离子时，一般采用的参比溶液是（）
A、蒸馏水
B、待测溶液
C、试剂空白
D、加入显色剂后的待测夜
10.1.12 有色络合物的摩尔吸光系数ε与下列因素有关的是（）
A、比色皿的厚度
B、入射光的波长
C、有色络合物的浓度
D、络合物的稳定性
10.1.13 符合朗伯—比尔定律的一有色溶液通过1cm比色皿，测得透过率为
80%，若通过5cm比色皿，其透过率为（）
A、32.7%
B、40.0%
C、67.3%
D、80.5%
10.1.14 摩尔吸光系数ε的单位是（）
A、L*mol-1*cm-1
B、L*mol*cm
C、L*mol-1*cm
D、L*mol-1*cm
10.1.15 桑德尔灵敏度与摩尔吸光系数ε成（）
A、反比
B、正比
C、不确定
D、S∝ε2
10.1.16 分光光度法的吸收曲线的坐标体δ为（）
A、A—λ
B、A—C （标准曲线）
C、T—ε
D、A—ε
10.1.17 分光光度法测高浓度溶液时常用示差法定量，其选用的参比液为（D ）
A、蒸馏水
B、试剂空白
C、去离子水
D、待测离子的低含量标准液
10.1.18 分光光度法的对比度指显色体系的λmax与试剂空白的λmax之差，其差值应（ B ）
A、<60nm
B、≥60nm
C、<40nm
D、≥40nm
10.1.19 分光光度法中，吸光度A与浓度C是成比的，但实际情况中，若条件不适宜，往往A不正比于C，这种现象称（ A ）
A、朗伯—比尔偏离
B、光源不稳定
C、溶液不纯
D、溶液无色
10.1.20 在分光光度法中，显色剂有颜色，可选择下列哪种溶液作参比溶液（B ）
A、蒸馏水
B、不加试样溶液的试剂空白液
C、不加显色剂的被测试液
D、被测试液
10.1.21 当吸光度A在（C ）时，才能保证测量的相对误差较小。
A、0.2—0.5
B、0.1—0.8
C、0.2—0.8
D、0.5—1.0
10.1.22 当吸光度A为（ D ）时，测量的相对误差最小。T=36.8%
A、0.289
B、0.325
C、0.879
D、0.434
10.1.23 示差吸光度法常用于测定（ C ）
A、微量组分
B、痕量组分
C、浓度过高及过低组分，一般高浓度多示差吸光度法应用最多
D、常量组分
10.1.24 在分光光度法中，摩尔比法和等摩尔连续多化法多用于测定（A ）
A、络合物组成
B、络合物含量
C、络合物的结构
D、络合物吸光度
10.1.25 一般紫外分光光度法所用光源为（），而可见分光光度法光源为（ B ）
A、钨灯—氘灯
B、氘灯—钨灯
C、钠光灯—氘灯
D、能斯特灯—钨灯
二、填空题（20题）
10.2.1分光光度计的仪器部分组成为光源、单色器、吸收池、检测器及数据处
理装置
10.2.2互补光是指两种特定波长的光按一定比例混合后得白光的这两种光10.2.3一符合朗伯—比尔定律的有色溶液，当浓度为C时，透过率为T，若其
他条件不多，浓度为C/3时，T为————————，浓度为2C时，T为—
———————。
10.2.4在相同条件下，测定某物质浓度，当浓度为C时，T=80%，若浓度为
2C时，T=————————。
10.2.5光电比色法中单色器为滤光片，其选择原则为滤光片的颜色与被测试液
的颜色互为互补色。分光光度计中光量调节器的作用是放入参比液后，
调节透射光的强度，使检流计的指针在透过率为100%处
10.2.6含磷0.35u g/ml的标准液显色后，测得吸光度为0.450，同条件下测含
磷未知液吸光度为0.540，则未知液中磷的浓度为————————mg/ml。
10.2.7在分光光度计上分别读出透光率（T%）和吸光度（A），将其对应值填
入空格处。
10.2.8为降低测量误差，吸光光度分析中比较适宜的吸光度值范围为0.2——
0.8，吸光度值为0.434时误差最小。
10.2.9朗伯比尔定律A=Kbc中，浓度以g/L为单位时，K称为吸光系数，其
单位为L*g-1*cm-1，当浓度以mol/L为单位时，K称为摩尔吸光系数，
其单位为L*mol-1*cm-1
10.2.10在分光光度计的检流计上刻有透光率为T和吸光度A，两者的关系为——
——————，当T=10%时，A为————————。
10.2.11为降低测量误差，吸光光度分析中比较适宜的透过率为15%--65%，透
过率为36.8%时误差最小。
10.2.12在分光光度法中所有的有机显色剂结构可大致分为生色团；因体；助色
团
10.2.13在分光光度法中吸光度A与浓度C成正比，称比耳定律，吸光度A与盛
液池厚度成正比称朗伯定律。
10.2.14朗伯—比尔定律吸光度A与浓度C及盛液池厚度b成正比，入射光为平
行的单色光，被测试液为均匀、透明、无散射等
10.2.15分光光度法的灵敏度可用————————、————————及————————表
示，一般用摩尔吸光系数ε。
10.2.16分光光度法中测定条件的选择包括————————波长————————、——
——————、————————、————————、————————及————————
等。
10.2.17在分光光度法测量中，引起以偏离朗伯—比尔定律的因素主要有①———
—————②————————③————————等。
10.2.18在消除引起朗伯—比尔定律偏离的因素时，引起吸光度测量误差的原因
主要有——————————————————————————————————————、
——————————————————————————————————————及———
———————————————————————————————————。
10.2.19光度分析方法主要有————————法————————法及————————法。
10.2.20在分光光度法中，常用的参比液为①—————————————————————
——————②———————————————————————————③———————
————————————————————④—————————————————————
——————。
三、简答题（5题）
10.3.1分光光度法的仪器部分有哪些？其作用各是什么？
10.3.2分光光度法中为什么含引起朗伯—比尔定律偏离及引起偏离的因素主要
有哪些？
10.3.3简述何为互补光？测定高锰酸钾液时应选用什么滤光片作单色器？为什
么？
10.3.4引起分光光度法测量误差的原因有哪些？为什么测量时要控制吸光度A
值在0.2—0.8之间？
10.3.5在分光光度法测量中，为什么要选用参比液？其选用原则是什么？
四、计算题（10题）
10.4.1以邻二氮菲（以R表示）作显色剂，用光度法测定Fe，显色反应为：
Fe2++3R=FeR3㏒K FeR3=21.3
（1）若过量显色剂的总浓度为[R’]=1.0?10-4mol/L，问在PH=3.0时能否使99.9%的Fe2+络合为FeR32+？（PH=3.0时，㏒αR（H）=1.9）（2）称取0.5000g试样，制成100ml试液，从中移取10.00ml显色后稀释为50ml，用1.0cm比色皿，在510nm处测得透过率T=60%，
求试样中Fe2+的百分含量。
（已知：ε510=1.1?104L/mol*cm，Mr（Fe）=55.85）
10.4.2欲测定某有机胺的摩尔质量，先用苦味酸（M=229g/mol）处理，得到
苦味酸胺（1：1的加合物）。今称取此苦味酸胺0.0300g，溶于乙醇并配制成1L溶液，用1.00cm的比色皿，于其最大吸收波长380nm处测得吸光度为0.800（已知苦味酸胺在380nm处的摩尔吸光系数ε=1.3?104L/mol*cm）。试求该有机胺的摩尔质量。
10.4.3某试液用2cm吸收池测量时，T=60%，若改用1cm或3cm吸收池，T
及A等于多少？
10.4.4某钢样含鎳约0.12%，用丁二酮光度法（ε=1.3?104L*mol-1*cm-1）进行
测定。试样溶解后，转入100ml容量瓶中，显色，并加水稀释至刻度。
取部分试液于波长470nm处用1cm吸收池进行测量。如要求此时的测量误差最小，应称取试样多少克？
10.4.5浓度为25.5 μg*(50ml)-1的Cu2+溶液，用双环已酮草酰二腙光度法进
行测定，于波长600nm处用2cm吸收池进行测量，测得T=50.5%，求摩尔吸光系数ε、桑德尔灵敏度S。
10.4.6用一般吸光光度法测量0.0010mol/L锌标准溶液和含锌的试液，分别测
得A=0.700和A=1.000，两种溶液的透射比相差多少？如用0.0010 mol/L锌标准溶液作参比溶液，试液的吸光度是多少？与示差吸光光度法相比，读书标尺放大了多少倍？
10.4.7以示差吸光光度法测定KMnO4溶液的浓度，以含锰10.0mg/ml的标准
溶液作参比溶液，其对水的透射比为T=20%，并以此调节透射比为100%，此时测得未知浓度KMnO4溶液的透射比Tx=40.0%，计算KMnO4的质量浓度。
10.4.8Ti和V与H2O2作用生成有色络合物，今以50ml1.06?10-3mol/L的钛
溶液发色后定容为100ml；25ml6.28?10-3mol/L的钒溶液发色后定容为100ml。另取20.0ml含Ti和V的未知混合溶液经以上相同方法发色。
这三份溶液各用厚度为1cm的吸收池在415nm及455nm处测得吸光度值如下：
求未知溶液中Ti 和V 的含量各为多少。
10.4.9 NO 2-在波长355nm 处ε355=23.3L*mol -1*cm -1，ε355/ε302=2.50；NO 3-
在波长355nm 处的吸收可忽略，在波长302nm 处ε302=7.24
L*mol -1*cm -1.今有一含NO 2-和NO 3-的试液，用1cm 吸收池测得
A 302=1.010，A 355=0.730，计算试液中NO 2-和NO 3-的浓度。
10.4.10 某有色络合物的0.0010%的水溶液在510nm 处，用2cm 吸收池以水
作参比测得透射比为42.0%。已知ε=2.5?10311L mol cm --??.求此络合物
的摩尔质量。
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10.4.11
第九章 吸光光度法 1.与化学分析法相比，吸光光度法的主要特点是什么？ 答：①灵敏度高 ②仪器设备简单，操作简便，快速 ③ 准确度较高 ④ 应用广泛 2.何谓复合光、单色光、可见光和互补色光？白光与复合光有何区别？ 答：⑴复合光指由不同单色光组成的光； 单色光指其处于某一波长的光； 可见光指人的眼睛所能感觉到的波长范围为400-750 nm 的电磁波； 将两种适当颜色的光按照一定的强度比例混合若可形成白光，它们称为互补色光； ⑵ 白光是是一种特殊的复合光，它是将各种不同颜色的光按一定的强度比例混合而成有复合光。 3.简述朗伯-比尔定律成立的前提条件及物理意义，写出其数学表达式。 答：确定前提为：①入射光为平行单色光且垂直照射；② 吸光物质为均匀非散射体系；③吸光质点之间无相互作用；④辐射与物质之间的作用仅限于光吸收过程，无荧光和光化学现象发生。 其物理意义如下：当一束单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时，其吸光度A 与吸光物质的浓度c 及吸收层厚度 b 成正比。 其数学表达式为： Kbc T I I A t ===1 lg lg 0 4.摩尔吸收系数κ在光度分析中有什么意义？如何求出κ值？κ值受什么因素的影响？ 答：⑴摩尔吸光系数κ在光度分析中的意义：当吸光物质的浓度为1mol/L 和吸收层厚度为 1cm 时，吸光物质对某波长光的吸光度。 (2)在吸光物质的浓度适宜低时，测其吸光度A ，然后根据bc A = κ计算而求得。 (3) κ值受入射光的波长，吸光物质的性质、溶剂、温度、溶液的组成、仪器灵敏度等因素的影响。 5.何谓吸光度和透射比，两者的关系如何？ 答：吸光度A 是指入射光强度I 0与透射光强度I t 的比值的对数值。 透射比T 是指透射光强度I t 与入射光强度I 0的比值。 两者的关系如下：T I I A t 1lg lg 0== 6.在光度法测定中引起偏离朗伯-比尔定律的主要因素有那些？如何消除这些因素的影响？ 答：⑴物理因素：①非单色光引起的偏离 ②非平行入射光引起的偏离 ③ 介质不均匀引起的偏离。 ⑵化学因素：①溶液浓度过高引起的偏离 ② 化学反应引起的偏离。 消除这些影响的方法：采用性能较好的单色器 采用平行光束进行入射，改造吸光物质使之为均匀非散射体系，在稀溶液进行，控制解离度不变，加入过量的显色剂并保持溶液中游离显色剂的浓度恒定。 7.分光光度计的主要部件有哪些？各部件的作用是什么？ 答：分光光度计的主要部件有：光源、单色器、吸收池、检测系统、信号显示系统。 光源能提供具有足够发射强度、稳定且波长连续变化的复合光。 单色器的作用是从光源发出的复合光中分出所需要的单色光。
第七章吸光光度法 一、选择题 1．所谓可见光区，所指的波长范围是（B ） （A）200~400nm （B）400~750nm （C）750~1000nm （D）100~200nm 2.一束（ B ）通过有色溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。（A）平行可见光（B）平行单色光（C）白光（D）紫外光 3．下列说法正确的是（ A ） （A）朗伯-比尔定律，浓度c与吸光度A之间的关系是一条通过原点的直线 （B）朗伯-比尔定律成立的条件是稀溶液，与是否单色光无关 （C）最大吸收波长λmax是指物质能对光产生吸收所对应的最大波长 （D）同一物质在不同波长处吸光系数不同，不同物质在同一波长处的吸光系数相同4．符合比耳定律的有色溶液稀释时，其最大的吸收峰的波长位置（C ） （A）向长波方向移动（B）向短波方向移动 （C）不移动，但峰高降低（D）无任何变化 5．标准工作曲线不过原点的可能的原因是（ D ） （A）显色反应得酸度控制不当（B）显色剂得浓度过高 （C）吸收波长选择不当（D）参比溶液选择不当 6．某物质摩尔吸光系数很大，则表明（ A ） （A）该物质对某波长光的吸光能力很强 （B）该物质浓度很大 （C）测定该物质的精密度很高 （D）测量该物质产生的吸光度很大
7．吸光性物质的摩尔吸光系数与下列( D )因素有关 （A）比色皿厚度（B）该物质浓度 （C）吸收池材料（D）入射光波长 8．已知KMnO4的相对分子质量为158.04，κ545nm=2.2×103，今在545nm处用浓度为0.0020%KMnO4溶液，3.00cm比色皿测得透射比为（ A ） （A）15% （B）83% （C）25% （D）53% 9．有AB两份不同浓度的有色溶液，A溶液用1.0cm吸收池，B溶液用3.0cm吸收池，在同一波长下测得的吸光度值相等，则它们的浓度关系为( D ) （A）A是B的1/3 （B）A等于B （C）B是A的3倍（D）B是A的1/3 10．某有色溶液，当用1cm吸收池时，其透射比为T，若改用2cm吸收池，则透射比应为（ D ） （A）2T （B）2lgT （C）T 1/2 （D）T2 11．用常规分光光度法测得标准溶液的透射率为20％，试液的透射率为10％，若以示差分光光度法测定试液，以标准溶液为参比，则试液的透过率为（ C ） （A）20% （B）40% （C）50% （D）80% 12．用分光光度计测量有色化合物，浓度相对标准偏差最小时的吸光度为（ D ） （A）0.368 （B）0.334 （C）0.443 （D）0.434 13．在分光光度测定中，如试样溶液有色，显色剂本身无色，溶液中除被测离子外，其它共存离子与显色剂不生色，此时应选（B ）为参比。 （A）溶剂空白（B）试液空白（C）试剂空白（D）褪色参比 14．用邻菲罗啉法测定锅炉水中的铁，pH需控制在4~6之间，通常选择（ D ）缓冲溶液较合适。 （A）邻苯二甲酸氢钾（B）NH3—NH4Cl （C）NaHCO3—Na2CO3 （D）HAc—NaAc 15．下述操作中正确的是（ C ）
第十章 吸光光度法 1.与化学分析法相比，吸光光度法的主要特点是什么？ 答：①灵敏度高 ②仪器设备简单,操作简便,快速. ③ 准确度较高 ④ 应用广泛 。 2.何谓复合光、单色光、可见光和互补色光？白光与复合光有何区别？ 答：⑴复合光指由不同单色光组成的光; 单色光指其处于某一波长的光; 可见光指人的眼睛所能感觉到的波长范围为400-750 nm 的电磁波; 将两种适当颜色的光按照一定的强度比例混合就可形成复合光,它们称为互补色光; ⑵ 白光是是一种特殊的复合光，它是将将各种小组长的光按一定的强度比例混合而成。 3.简述朗伯-比尔定律成立的前提条件及物理意义，写出其数学表达式。 答：确定前提为：①入射光为平行单色光且垂直照射;② 吸光物质为均匀非散射体系;③吸光质点之间无相互作用;④辐射与物质之间的作用仅限于光吸收过程,无荧光和化学现象发生。 其物理意义如下：当一束单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时,其吸光度A 与物质的浓度c 及吸收层厚度 b 成正比。 其数学表达式为： Kbc T I I A t ===1lg lg 0 4.摩尔吸收系数κ在光度分析中有什么意义？如何求出κ值？κ值受什么因素的影响？ 答：⑴摩尔吸光系数κ在光度分析中的意义：当吸光物质的浓度为1mol/L 和吸收层厚度为 1cm 时，吸光物质对某波长光的吸光度。 (2)在适宜的低浓度时，测其吸光度A ，然后根据bc A =κ计算而求得。 (3) κ值受入射光的波长，吸光物质的性质、溶剂、温度、溶液的组成、仪器灵敏度等因素的影响。 5.何谓吸光度和透射比，两者的关系如何？ 答：吸光度A 是指入射光强度与透射光强度的比值的对数值。 透射比T 是指透射光强度I t 与入射光强度I 0的比值。 两者的关系如下：T I I A t 1lg lg 0== 6.在光度法测定中引起偏离朗伯-比尔定律的主要因素有那些？如何消除这些因素的影响？ 答：⑴物理因素：①非单色光引起的偏离 ②非平行入射光引起的偏离 ③ 介质不均匀引起的偏离。 ⑵化学因素：①溶液浓度过高引起的偏离 ② 化学反应引起的偏离。 消除这些影响的方法：采用性能较好的单色器 采用平行光束进行入射，吸光物质为均匀非散射体系，溶液较稀，控制解离度不变，加入过量的显色剂并保持溶液中游离显色剂的浓度恒定。 7.分光光度计的主要部件有哪些？各部件的作用是什么？ 答：分光光度计的主要部件有：光源、单色器、吸收池、检测系统、信号显示系统。 光源能提供具有足够发射强度、稳定且波长连续变化的复合光。 单色器的作用是从光源发出的复合光中分出所需要的单色光。 吸收池是用于盛装参比溶液、试样溶液的器皿。
第九章吸光光度法知识点 吸光光度法是基于分子对光的选择性吸收而建立的一种分析方法，包括比色法、紫外一可见吸光光度法、红外光谱法等。 1．吸光光度法的基本原理 ①物质对光的选择性吸收：当光照射到物质上时，会产生反射、散射、吸收或透射。若被照射的物质为溶液，光的散射可以忽略。当一束白光照射某一有色溶液时，一些波长的光被溶液吸收，另一些波长的光则透过，溶液的颜色由透射光的波长所决定。吸收光与透射光互为补色光(它们混合在一起可组成白光)。 分子与原子、离子一样，都具有不连续的量子化能级，在一般情况下分子处于最低能态(基态)。当入射光照射物质时，分子会选择性地吸收某些频率的光子的能量，由基态跃迁到激发态(较高能级)，其能级差E激发态一E基态与选择性吸收的光子能量hv的关系为Hv=E激发态一E基态 分子运动包括分子的转动、分子的振动和电子的运动。 分子转动、振动能级间隔一般小于1 eV，其光谱处于红外和远红外区。 电子能级间的能量差一般为1～20 eV，由电子能级跃迁而产生的吸收光谱位于紫外及可见光区，其实验方法为比色法和可见-紫外吸光光度法。 ②吸收曲线：以波长为横坐标，以吸收光的强度为纵坐标绘制的曲线，称为吸收光谱图，也称吸收曲线。它能清楚地描述物质对不同
波长的光的吸收情况。 ③光的吸收定律——朗伯一比尔定律：当一束平行单色光垂直通过一厚度为b、非散射的均匀吸光物质溶液时，吸光物质吸收光能，致使透射光强度减弱。 若用I。表示入射光强度，I t表示透射光强度，I。与I t之比称为透光率或透光度T，T=I。/I t，吸光物质对光的吸收程度，还常用吸光度A表示，A=lgT=log I。/I t。 实验证明，当一束平行单色光垂直照射某一均匀的非散射吸光物质溶液时，溶液的吸光度A与溶液浓度c和液层厚度b的乘积成正比，此即朗伯一比尔定律，其数学表达式为 A=lgT=log I。/I t =abc 式中，a为吸收系数。溶液浓度以g·L-1为单位、液层厚度以cm 为单位时，a的单位为L·g-1·cm-1。当溶液浓度以mol·L-1为单位、液层厚度以cm为单位时，此时吸收系数称为摩尔吸收系数，用符号k表示，其单位为L·mol-1·cm-1。 此时朗伯一比尔定律可写为A—Kbc。 摩尔吸收系数k是吸光物质在给定波长和溶剂下的特征常数，k越大，表示该物质对某波长光的吸收能力越强，测定方法的灵敏度也就越高。 根据朗伯一比尔定律，当吸光物质光程一定时，吸光度与吸光物质的浓度成线性关系，因此可以根据直接比较法和标准曲线法测定试样溶液中待测物质的浓度。
第七章分光光度法 分光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。（在选定波长下，被测定溶液对光的吸收程度与溶液中吸光组分的浓度有简单的定量关系）。根据被利用的光波长范围可分为可见、紫外、红外光谱法。利用可见光进行分光光度分析时，通常将被测定组分通过化学反应转变成有色化合物，然后进行吸光度的测量。因此分光光度法在一定意义上使用着比色法，吸光光度法等名词，本章重点讨论可见分光光度法。 一、分光光度法 （一）光的基本性质 光是电磁波。其波长范围很广，如果以波长或频率为序排列可得到如下电磁波谱图。 光谱名称波长范围跃迁类型分析方法 X—射线远紫外光近紫外光可见光近紫外光中红外光远红外光微波 无线电波0.1—10nm 10—200nm 200—400nm 400—760nm 0.76—2.5μm 2.5—5.0μm 500—1000μm 0.1—100cm 1—1000m K.L层电子 中层电子 价电子 分子振动 分子振动和低位 转动 分子振动 X—射线光谱法 真空紫外光度法 紫外可见光度法 比色可见光度法 近红外光谱法 中红外光谱法 远红外光谱法 微波光谱法 核磁共振光谱法 光有微粒二象性，波动性是指光按波的形式传播。如光的折射、衍射、偏振和干涉等，光的波长λ，频率γ与速度c的关系为： λγ = c 式中λ以cm表示，γ以Hz表示，c为光速2.7979×1010cm/s（真空中） 光同时又具有粒子性，如电效应就明显地表现其粒子性。 光是由“光微粒子”（光量子或光子）组成的，光量子的能量可表示为 γh E=h为普朗克常数6.6262×10-34J.S 可见上式把光的波粒两相性用h统一起来了。 结论：不同波长（或频率）的光，其能量不同，短波的能量大，长波的能量小。（二）物质对光的吸收 吸收光谱有原子吸收光谱和分子吸收光谱。 原子吸收光谱是由原子外层电子选择性地吸收某些波长的电磁波而引起的。原子吸收分光光度法就是根据原子的这种性质所引起来的。分子吸收光谱比较复杂。这是由分子结构的复杂性引起的，在同一电子能级中有几个振动能级，而在同一振动能级中又有几个转动能级，电子能级之间的能量差一般为1~20电子伏特。因此，电子能级跃迁而产生的吸收光谱，位于紫外-可见光部分。这种又价电子跃迁而产生的分光光谱称为电子光谱。 在电子能级变化时，不可避免地也伴随着分子振动和转动能级的变化，因此，分子的电子光谱通常比原子的线状光谱复杂的多，呈带状光谱。如果用近红外线
第十章吸光光度法 9.1 0.088 mg Fe3+．用硫氰酸盐显色后，在容量瓶中用水稀释到50 mL，用1 cm 比色皿，在波长480 nm处测得A＝0.740。求吸收系数α及κ。 9.2 用双硫腙光度法测定Pb2+，Pb2+的浓度为0.08mg/50mL，用2cm比色皿在520nm下测得T＝53%，求κ。 9.3 用磺基水杨酸法测定微量铁。标准溶液是由0.2160gNH4Fe(SO4)2·12H2O溶于水中稀释至500mL配制成的。根据下列数据，绘制标准曲线。 标准铁溶液的体积V /mL 0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 吸光度0.0 0.165 0.320 0.480 0.630 0.790 某试液5.00 mL，稀释至250 mL。取此稀释液2.00 mL，与绘制标准曲线相同条件下显色和测定吸光度。测得A＝0.500。求试液铁含量(单位：mg/mL)。铁铵矾的相对分子质量为482.178。
9.4 取钢试样1.0 g，溶解于酸中，将其中锰氧化成高锰酸盐，准确配制成250mL，测得其吸光度为1.00×10–3 mol·L－1 KMnO4溶液的吸光度的1.5倍。计算钢中锰的百分含量。
9.5 用普通光度法测定铜。在相同条件下测得1.00×10-2 mol·L-1标准铜溶液和含铜试液的吸光度分别为0.699和1.00。如光度计透光度读数的相对误差为0.5％，测试液浓度测定的相对误差为多少？如采用示差法测定，用铜标准液为参比，测试液的吸光度为多少？浓度测定的相对误差为多少？两种测定方法中标准溶液与试液的透光度各差多少？示差法使读书标尺放大了多少倍？
第9章吸光光度法 一、选择题 1．所谓可见光区，所指的波长范围是（） （A）200～400nm（B）400～750nm（C）750～1000nm（D）100～200nm 2.一束（）通过有色溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 （A）平行可见光（B）平行单色光（C）白光（D）紫外光 3．下列说法正确的是（） （A）朗伯-比尔定律，浓度c与吸光度A之间的关系是一条通过原点的直线（B）朗伯-比尔定律成立的条件是稀溶液，与是否单色光无关 （C）最大吸收波长λmax是指物质能对光产生吸收所对应的最大波长 （D）同一物质在不同波长处吸光系数不同，不同物质在同一波长处的吸光系数相同 4．符合比耳定律的有色溶液稀释时，其最大的吸收峰的波长位置（）（A）向长波方向移动（B）向短波方向移动 （C）不移动，但峰高降低（D）无任何变化 5．标准工作曲线不过原点的可能的原因是（） （A）显色反应得酸度控制不当（B）显色剂得浓度过高 （C）吸收波长选择不当（D）参比溶液选择不当 6．某物质摩尔吸光系数很大，则表明（） （A）该物质对某波长光的吸光能力很强 （B）该物质浓度很大 （C）测定该物质的精密度很高 （D）测量该物质产生的吸光度很大 7．吸光性物质的摩尔吸光系数与下列()因素有关 （A）比色皿厚度（B）该物质浓度 （C）吸收池材料（D）入射光波长 8．已知KMnO 4的相对分子质量为158.04，ε 545nm =2.2×103 L/(mo l·cm)今在545nm 处用浓度为0.0020% KMnO 4 溶液，3.00cm比色皿测得透射比为（）（A）15%（B）83%（C）25%（D）53%
第10章吸光光度法 基本内容 1概述 1.1吸光光度法的特点 吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法,包括比色法,可见紫外吸光光度法和红外光谱法等。 1.1.1.光的基本性质：光是一种电磁波。具有同一波长的光称为单色光，由不同波长组成的光称为复合光。波长在200nm～400nm范围的光称为紫外光，人的眼睛能感到波长在400nm～750nm范围的光叫可见光。白光是由红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种单色光按一定强度比例混合而成的。实验证明：将适当的两种单色光按一定强度比例混合，也可得到白光，这两种单色光互称为互补色光。 1.1. 2.物质对光的选择性吸收：溶液呈不同的颜色是由于溶液中的吸光质点选择性吸收了某种颜色的光所引起的。当白光通过某一均匀的溶液时，若该溶液对可见光波段的光都不吸收，则溶液无色透明；若溶液对不同波长的光全部吸收，则溶液呈黑色；若溶液对各种波长的光呈选择性吸收，则溶液呈现的是与吸收光成互补色光的颜色。如硫酸铜溶液呈蓝色是因为溶液吸收了白光中的黄色光，高锰酸钾溶液因吸收了白光中的绿光而呈紫色等。 1.1.3.光吸收曲线：任何一种溶液对不同波长的光的吸收程度不同，若将各种波长的单色光依次通过某一浓度的溶液，测量每一波长下溶液对光的吸收程度，以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标绘画，所得曲线叫光吸收曲线。由光吸收曲线可知：溶液对各种波长的单色光的吸收程度是不同的，在某一波长处有一最大吸收，这一波长称为最λ表示；不同浓度的同一种物质的溶液，光吸收曲线的形状相似，最大吸收波长，用 max 大吸收波长不变，只是相应的吸光度大小不同。 1.2光吸收的基本定律 当一束平行的单色光通过含有吸光物质的溶液时，溶液的吸光度A与吸光物质的浓度c及液层厚度b成正比，即A=Kbc
第十二章分光光度分析法 （一）判断题 1. 可见光的波长范围在400-760nm之间。（） 2. 吸光度A与透光度T成反比。（） 3. 朗伯-比尔定律只适用于单色光。（） 4. 同一物质与不同显色剂反应，生成不同的有色化合物时具有相同的ε值。（） 5. 可见光源用钨丝白炽灯，紫外光源用氘灯。（） 6. 若显色剂用量多，则显色反应完成程度高，故显色剂用量越多越好。（） 7. 一般来说，加入有机溶剂，可以提高显色反应的灵敏度。（） 8. 浓度相对误差仅与仪器读数误差相关。（） 9. 浓度较高时测量相对误差大，浓度较低时，测量相对误差小。（） 10. 符合朗伯-比尔定律的某有色溶液稀释时，其最大吸收波长λmax向长波方向移动。（） 11. 有色溶液的吸光度随溶液浓度增大而增大，所以吸光度与浓度成正比。（） 12. 在光度分析中，溶液浓度越大，吸光度越大，测量结果越准确。（）（二）填空题 1. 朗伯-比尔定律数学表达式：A=kbc，式中A代表，b代表，c代表，k代表。当c的单位用mol·L-1表示时，k以符号表示，称为。 2. 下列物质水溶液选择吸收光的颜色为：CuSO4；K2Cr2O7； KMnO4。 3. 光度计的种类和型号繁多，但都主要由、、、、五大部件组成。 4. 分光光度计的表头上，均匀的标尺是，不均匀的标尺是。 5. 为了降低测量误差，吸光光度分析中比较适宜的吸光度范围是，吸光度为时，测量误差最小。 6. 在以参比溶液调节仪器的零点时，因无法调至透光度为100%，而只好调节至95%处，此处测得一有色溶液的透光度读数为35.2%，该有色溶液的真正透光度为。 7. 二苯硫腙的CCl4溶液吸收580 ~ 620nm范围内的光，它显色。 8. 测量某有色配合物在一定波长下用2cm比色皿测定时其T =0.60，若在相同条件下改用1.0cm比色皿测定，吸光度A为，用3.0cm比色皿测定，T为。 9. 苯酚在水溶液中摩尔吸光系数为6.17?103 L·cm—1·mol—1，若要求使用1.0cm比色皿，透光度在0.15 ~ 0.65之间，则苯酚的浓度应控制在。 10. 吸光光度分析的方法有、、等。 （三）选择题 1. 在吸光光度法中，透射光强度与入射光强度之比称为（） A．吸光度 B. 透光度 C. 消光度 D. 光密度 2. 有色溶液的摩尔吸光系数ε与下列哪种因素有关（） A．入射光波长 B.液层厚度 C.有色物质浓度 D.有色物质稳定性 3. 透光度与吸光度的关系是（） A. 1/T = A B. lg1/T = A C. lg T = A D. T = lg1/A 4. 若测得某溶液在λmax时A>0.8，可以采取下列哪些措施？（） A.增大光源亮度 B.改变入射光波长 C.稀释溶液 D.换用小的比色皿。 5. 邻菲罗林测Fe，合适的参比溶液（） A．样品空白 B.试剂空白 C.蒸馏水空白 6. 分光光度法测定钴盐中微量Mn，加入无色氧化剂将Mn2+氧化为MnO4-，测定中应选（）
第十二章 吸光光度分析法 一、本章要点 1．掌握吸收曲线的绘制方法、吸收光谱、最大吸收波长的概念。 2. 掌握朗伯-比尔定律、吸光度、摩尔吸光系数、透光率的基本概念及相互之间的关系。 3.熟悉偏离朗伯-比尔定律的原因。 4. 掌握显色反应及其条件的选择、吸光光度分析方法及熟悉常用仪器的基本原理、主要部件 及具体操作。 二、示例解析 1. 已知含Cd 2+浓度为140μg ·L -1 的溶液，用双硫腙显色后，用厚度为2cm 的比色皿测得 A =0.22，计算此溶液的摩尔吸光系数。 解： 查表知Cd 的摩尔质量为112.41g ·mol —1 c (C d 2+)=140×10-6/112.41=1.25×10—6（mol ·L —1） 46108810 2512220?=??==ε-...bc A （L ·mol -1·cm —1） 需要指出的是，上例中的ε 值是把被测组分看成是完全转变成有色化合物的。但在实际测 定中，因有色物质组成不确定或有副反应存在，实际计算出的是表观摩尔吸光系数。 2. 已知吸光度A = 0.474，计算T 及T % 解： A = -lg T = 2 - lg T % lg T = -A = -0.474 ， T = 0.336； lg T % = 2-A = 2-0.474 =1.53， T % = 33.6 3. 准确移取含磷30μg 的标准溶液于25mL 容量瓶中，加入5%钼酸铵及其它相关试剂， 稀释至刻度。在690nm 处测定吸光度为0.410。称10.0g 含磷试样，在与标准溶液相同的条件 下测得吸光度为0.320。计算试样中磷的质量分数。 解： ω（P ）=100?m A V c A S X S X =3100.1025410.02530320.0????? =0.23 4. 某一分光光度计的透光率读数误差为0.005，当测量的百分透光率为9.5%时，测得的 浓度相对误差为多少？ 解：?T = 0.005，T = 0.095，代入式（8-6）： 095 .0lg 095.0005.0434.0??=?c c = -0.022 = -2.2% 5. 测定某样品中Fe 的含量，称样0.2g 测得T =1.0%，若仪器透光率读数误差为0.50% 试计算： ⑴ 测量结果的相对误差为多少？ ⑵ 欲使测得的A 值为0.434，以提高测量的准确度，则应减少称样量或稀释样品多少倍？ ⑶ 若不进行上面的操作，为提高测量准确度应选用几厘米的比色皿？ 解： ⑴ ?T =0.50%，T = 1.0%，代入（8-6）式 01 .0lg 01.0005.0434.0??=?C C = 0.1085 = 10.85% ⑵ 原试液T =1.0%，A = 2.00，要使A = 0.434，降低相对误差，则需稀释样品。因为 减少称样量会增大称量误差。所以稀释倍数=C 原/C =2.00/0.434 =4.6，即稀释4.6倍。 ⑶若不稀释样品，为了提高准确度，则要降低吸光度，因为C 较大，所以应选择厚度小 的比色皿，即选用0.5cm 比色皿。 6. 如何选择适宜的参比溶液？
第六章吸光光度法 一、大纲要求及考点提示 大纲内容与要求：了解分光光度计基本原理，光度计的基本原件及其作用。理解光吸收基本原理：朗伯–比耳定律，物质颜色与吸收光颜色的互补关系，以及偏离比耳定律的原因。掌握常用的分光光度计的基本构造，显色剂、显色反应、显色条件、吸光度测量条件，以及光度计的应用。 知识点：分光光度法基本原理，光度计的基本元件及其作用，以及分光光度计的应用。 二、主要概念、重要定理与公式 （一）吸光光度法的特点 1. 光的基本性质：光是一种电磁波。 2. 吸收光谱产生的原理 吸收光谱有原子光谱与分子吸收光谱。原子吸收光谱是由原子外层电子选择性地吸收某些波长的电磁波而引起的。分子吸收光谱由价电子跃迁而产生的分子光谱称为电子光谱。通常比原子的线状光谱复杂的多，呈带状光谱。由分子振动能级和转动能级的跃迁而产生的吸收光谱，成为振动–转动光谱或红外吸收光谱。故红外光谱法可应用于分子结构的研究。3. 目视比色法和吸光光度法的特点 灵敏度高，准确度高，应用广泛，仪器简单、操作简便、快速。 （二）光吸收的基本定律 1. 朗伯–比耳定律 溶液的透射比越大表示它对光的吸收越小，反之亦然。溶液对光的吸收程度与溶液浓度液层厚度及入射光波长等因素有关。 2. 摩尔吸收系数 ε反映吸光物质对光的吸收能力，也反映用吸光光度法测定该吸光物质的灵敏度，是选择显色反应的重要依据。 3. 桑德尔灵敏度 桑德尔灵敏度也可表示吸光光度分析的灵敏度。 （三）比色法和吸光光度法及其仪器 1. 目视比色法 仪器简单，操作简便，适宜于大批试样的分析。但准确度不高，标准系列不能久存，需要在测定时临时配制。 2. 吸光光度法 入射光是纯度较高的单色光，利用吸光度的加和性，可同时测定溶液中两种或两种以上的组分。许多无色物质，只要它们在紫外或红外区域内有吸收峰，都可以用吸光光度法进行测定。 3. 分光光度计及其基本部件 按工作波长范围分：紫外、可见分光光度计。主要应用与无机物和有机物含量的测定。分光光度计又可分为单光束和多光束两类。
吸光光度法课后练习题及参考答案 一、选择题 1．所谓可见光区，所指的波长范围是（B ） （A）200~400nm （B）400~750nm （C）750~1000nm （D）100~200nm 2.一束（B ）通过有色溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 （A）平行可见光（B）平行单色光（C）白光（D）紫外光 3．下列说法正确的是（A ） （A）朗伯-比尔定律，浓度c与吸光度A之间的关系是一条通过原点的直线（B）朗伯-比尔定律成立的条件是稀溶液，与是否单色光无关 （C）最大吸收波长λmax是指物质能对光产生吸收所对应的最大波长 （D）同一物质在不同波长处吸光系数不同，不同物质在同一波长处的吸光系数相同 4．符合比耳定律的有色溶液稀释时，其最大的吸收峰的波长位置（C ）（A）向长波方向移动（B）向短波方向移动 （C）不移动，但峰高降低（D）无任何变化 5．标准工作曲线不过原点的可能的原因是（D ） （A）显色反应得酸度控制不当（B）显色剂得浓度过高 （C）吸收波长选择不当（D）参比溶液选择不当 6．某物质摩尔吸光系数很大，则表明（A ） （A）该物质对某波长光的吸光能力很强 （B）该物质浓度很大 （C）测定该物质的精密度很高 （D）测量该物质产生的吸光度很大 7．吸光性物质的摩尔吸光系数与下列(D )因素有关 （A）比色皿厚度（B）该物质浓度 （C）吸收池材料（D）入射光波长 8．已知KMnO4的相对分子质量为158.04，κ545nm=2.2×103，今在545nm处用浓度为0.0020%KMnO4溶液，3.00cm比色皿测得透射比为（A ）
（A）15% （B）83% （C）25% （D）53% 9．有AB两份不同浓度的有色溶液，A溶液用1.0cm吸收池，B溶液用3.0cm吸收池，在同一波长下测得的吸光度值相等，则它们的浓度关系为(D ) （A）A是B的1/3 （B）A等于B （C）B是A的3倍（D）B是A的1/3 10．某有色溶液，当用1cm吸收池时，其透射比为T，若改用2cm吸收池，则透射比应为（D ） （A）2T （B）2lgT （C）T1/2 （D）T2 11．用常规分光光度法测得标准溶液的透射率为20％，试液的透射率为10％，若以示差分光光度法测定试液，以标准溶液为参比，则试液的透过率为（C ）（A）20% （B）40% （C）50% （D）80% 12．用分光光度计测量有色化合物，浓度相对标准偏差最小时的吸光度为（D ）（A）0.368 （B）0.334 （C）0.443 （D）0.434 13．在分光光度测定中，如试样溶液有色，显色剂本身无色，溶液中除被测离子外，其它共存离子与显色剂不生色，此时应选（B ）为参比。 （A）溶剂空白（B）试液空白（C）试剂空白（D）褪色参比 14．用邻菲罗啉法测定锅炉水中的铁，pH需控制在4~6之间，通常选择（D ）缓冲溶液较合适。 （A）邻苯二甲酸氢钾（B）NH3—NH4Cl （C）NaHCO3—Na2CO3（D）HA c—NaAc 15．下述操作中正确的是（C ） （A）比色皿外壁有水珠（B）手捏比色皿的磨光面 （C）手捏比色皿的毛面（D）用报纸去擦比色皿外壁的水 二、填空题 1．在可见光区，物质的颜色是由（透射光的波长）决定的。已知姿色和绿色是一对互补色光，则KMNO4溶液吸收的是（绿）色光。 2．符合朗伯-比尔定律的有色物质的浓度增加后，最大吸收波长λmax（不变），吸光度A（变大），摩尔吸光系数κ（不变）。 3．（摩尔吸光系数）是物质吸光能力大小的量度。 4．摩尔吸光系数越大，灵敏度越（高）。
第十章 吸光光度法 吸光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。 吸光光度法或光度分析根据入射光的波长范围可分为紫外吸收光谱法、可见分光光度法、红外光谱法。可见吸光光度法又分为比色法（光电比色法和目视比色法）和分光光度法。 目视比色法：基于有色物质溶液颜色的深浅与其浓度有关，浓度愈大，颜色愈深。通过与标准色阶比较颜色深浅的方法确定溶液中有色物质的含量。目视法仪器简单，操作简便，但灵敏度和准确度不如分光光度法，只是在一些准确度要求不高的分析中仍有一定的实用性。如果用光电比色计代替人眼观察，则为光电比色法。 分光光度法：如果是使用分光光度计，利用溶液对单色光的吸收程度来确定物质含量，则称为分光光度法。 分光光度法灵敏度较高，可不经富集直接测定低至5510%-?微量组分。一般情况下，测定浓度的下限也可达0.11()g ppm g μ，相当于含量为0.001% 0.0001%的微量组分。 如果是采用高灵敏度的显色试剂，或事先将待测组分加以富集，甚至可能测定低至 6710%10%--的组分。 虽然光度法的准确度相对于重量分析法和滴定分析法要低得多，通常分光光度法的相对误差为2%5%（比色法为5%20%），但这已经能满足一般微量组分测定准确度的要求。若用差示分光光度法，其相对误差甚至可达0.5%，已接近重量分析法和滴定分析法的误差水平。相反滴定分析法或重量分析法却难于完成这些微量组分的测定。 光度分析技术比较成熟，所需仪器相对廉价，操作简便易行，已广泛用于工农业生产和生物、医学、临床、环保等领域。几乎所有的金属元素和众多的有机化合物都可用光度法测定。 我们主要学习可见分光光度法。 §10.1物质对光的选择性吸收 一、光的基本性质 光是一种电磁波，具有波动性和微粒性。 光的折射、衍射、偏振和干涉等现象可用光的波动性来解释。描述波动性的重要参数是波长（cm ），频率ν（Hz ）。它们与光速的关系是： c νλ = 真空中101310c cm s -=? 光电效应、光的吸收和发射等，只能用光的微粒性才能解释，即把光看作是带有能量的微粒流。这种微粒称为光子或光量子。单个光子的能量E 决定于光的频率。 c E h h νλ == E 为光子的能量（J ），h ：普朗克常数（346.62610J s -?） 理论上，将仅具有某一波长的光称为单色光，单色光由具有相同能量的光子组成。由不同波长的光组成的光称为复合光。 当人为地按照波长将电磁波划分为不同的区域时，得到电磁波谱或光谱（见表10-1）。
第六章： 吸光光度法思考题解答 一、思考题： 1、解释下列名词 a.光吸收曲线及标准曲线； b.互补色光及单色光； c.吸光度及透射比。 解： a. (1)光吸收曲线指的是测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度时，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图得到的一条吸收光谱曲线。 (2)标准曲线指的是在选择的实验条件下分别测量一系列不同含量的标准溶液的吸光度时，以标准溶液中待测组分的含量为横坐标，吸光度为纵坐标作图得到的一条直线。 b. (1)互补色光指的是两种相对应颜色的光，将它们按一定比例混合，可得到白光。 (2)单色光指的是具有同一波长的光。 c. (1)吸光度指的是溶液对光的吸收程度，与溶液浓度、液层厚度及入射光波长等因素有关。 (2)透射比指的是透射光强度与入射光强度的比值。 2、符合朗伯-比尔定律的某一吸光物质溶液，其最大吸收波长和吸光度随吸光物质浓度的增大其变化情况如何？ 解：
最大吸收波长不变，吸光度增大。 3、吸光物质的摩尔吸收系数与下列哪些因素有关？入射光波长，被测物质的浓 度，络合物的解离度，掩蔽剂。 解： 入射光波长、络合物的解离度和掩蔽剂。 4、试说明吸光光度法中标准曲线不通过原点的原因。 解： 可能是由于参比溶液选择不当，吸收池厚度不等，吸收池位置不妥，吸收池透光面不清洁等原因所引起的。 5、在吸光光度法中，影响显色反应的因素有哪些？ 解： 溶液酸度、显色剂的用量、显色反应时间、显色反应温度、溶剂和干扰物质。 6、酸度对显色反应的影响主要表现在哪些方面？ 解： 影响显色剂的平衡浓度和颜色；影响被测金属离子的存在状态；影响络合物的组成。 7、在吸光光度法中，选择入射光波长的原则是什么？ 解： 吸收最大，干扰最小。 8、分光光度计是由哪些部件组成的？各部件的作用如何？
第六章吸光光度法 实训一分光光度计的使用 一、目的要求 1.了解朗伯-比耳定律的物理意义及应用范围。 2.明确分光光度计的构造及操作方法。 二、实训原理 在日常生活中我们看到各种溶液呈现不同的颜色，这是与它们对可见光的选择吸收有关。利用有色溶液颜色的深浅与溶液浓度有关的性质，进行定量测定的分析方法称为比色法。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度和液层厚度有一定的比例关系，也符合于朗伯-比耳定律。 T=I/I0 (12-1) A= -lgT = lg(I0/I) = kcb (12-2) 式中: T——透射比； I0——入射光强度； I——透射光强度； A——吸光度； k——吸收系数； b——溶液厚度； c——溶液浓度。 图6-1 溶液对光的吸收 从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 分光光度计的工作原理是用分光能力较强的棱镜或光栅来分光，棱镜或光栅将入射光色散成谱带，从而获得纯度较高，波长范围较窄的各波段的单色光。这种单色光的波长范围一般约在5nm左右。因而测定的灵敏度高选择性较好，因此若选择最合适的波长进行测定，可以校正偏离朗伯-比耳定律的情况。 吸光光度法的最大优点是可以在一个试样中同时测定两种以上的组分，不必事先进行分离。因为吸光光度法可以任意选择某种波长的单色光，根据不同物质对于不同波长光的吸收不同，可以利用各种组分吸光度的加和性，在指定条件下进行混合物中各组分含量的测定。
第七章吸光光度法练习题 1.符合Lambert－Beer定律的某有色溶液，当有色物质的浓度增加时，最大吸收波长和吸光度分别是……… A.不变、增加 B.不变、减小 C. 向长波移动、不变 D. 向短波移动、不变 2.某溶液测得其吸光度为A0，稀释后测得其吸光度为A1，已知A0－A1＝0.477，稀释后的透射比T1应为……… A.T1=2T0 B.T1=3T0 C.T1=1/3 T0 D.T1=1/2T0 3. 用分光光度法测定Fe3+,下列说法正确的是……… A. FeSCN2+的吸光度随着SCN－浓度的增大而线性增大 B. FeSCN2+的吸光度随着Fe3+浓度的增大而线性增大 C. 溶液的吸光度与透射率线性相关 D. 溶液的条件摩尔吸光度系数随着波长变化而变化 4.已知某显色体系的桑德尔灵敏度为0.005ug.cm-2,Fe的相对原子质量为5 5.85，则用该显色体系分光光度法测定Fe2+的摩尔吸光系数为（L.mol-1,cm-1）……… A.1.1×104 B.2.2×104 C.1.1×105 D. 2.2×105 5.用常规分光光度法测得标准溶液的透射率为20％，试液的透射率为10％，若以示差分光光度法测定试液，以标准溶液为参比，则试液的透过率为……… A.20% B.40% C.50% D.80% 6.测定纯金属钴中微量锰时，在酸性介质中以KIO4氧化Mn2+为MnO4-以分光光度法测定，选择参比溶液为……… A.蒸馏水 B.含KIO4的试样溶液 C.KIO4溶液 D.不含KIO4的试样溶液 7.标准工作曲线不过原点的可能的原因是……… A.显色反应得酸度控制不当 B.显色剂得浓度过高 C.吸收波长选择不当 D.参比溶液选择不当 8. 某钢样含Ni的质量分数为0.12％，用丁二酮肟分光光度法 （ε=1.3×104L.mol-1.cm-1）进行测定。若试样溶解后转入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，在470nm波长处用1.0cm吸收池测量，希望此时的测量误差最小，应称取样品______ [Ar（Ni）＝58.69]。 A 1.60g B 0.16g C.0.14g D.1.4g 9.用硅钼蓝法测定SiO2，以一含有SiO20.020mg 的标准溶液作参比，测得另一含0.100mgSiO2标液的透射率T为14.4%,今有一未知溶液，在相同的条件下测得透射率为31.8％，该溶液中SiO2的质量（mg）为____。 A.0.067 B.0.14 C.0.67 D.0.014
第六章 吸光光度法 1. 根据lg A T K c '=-=，设4 2.510K '=?，今有五个标准溶液，浓度c 分别为4.0×10-6，8.0×10-6，1.2×10-5，1.6×10-5，2.0×10-5 mol/L ，绘制以c 为横坐标、T 为纵坐标的c -T 关系曲线图。为什么这样的曲线图不能用作定量分析标准曲线？请绘制出可作定量分析的标准曲线。 解： 由公式计算可知，当c 分别为4.0×10-6，8.0×10-6，1.2×10-5，1.6×10-5，2.0×10-5 mol/L 时，分别求得吸光度A = 0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，对应的透光度T 分别为0.794，0.62，0.501，0.398，0.316。 c 与T 不呈线性关系，故c-T 曲线不可作定量分析标准曲线用。 可作c -A 曲线，用作定量分析。 2. 某试液用2 cm 比色皿测量时，T = 60%，若改用1 cm 或3 cm 比色皿，T 及A 等于多少？ 解： 11 22 2 cm -lg 0.22 60% 0.22 1 cm 0.11 77% 20.22 3 cm 30.33 46% 2 b A T T A b A bc A b b A T b A T ε============?== 3. 某钢样含镍约0.12%，用丁二酮圬光度法 (4-1-11.310 L mol cm ε=???) 进行测定。试样溶解后，转入100 mL 容量瓶中，显色，并加水稀释至刻度。取部分试液于波长470 nm 处用1 cm 吸收池进行测量。如要求此时的测量误差最小，应称取试样多少克？ 解： 测量误差最小时，A=0.434
吸光光度法 习题 【10-1】根据A=-lgT=K ′c ，设K ′=2.5×104，今有五个标准溶液，浓度c 分别为4.0×10-6，8.0×10-6，1.2×10-5，1.6×10-5，2.0×10-5 mol×L -1，绘制以c 为横坐标、T 为纵坐标的c-T 关系曲线图。这样的曲线图能否作定量分析标准曲线用，为什么？ 解： 吸光度与吸光物质的含量成正比，这是光度法进行定量的基础，标准曲线就是根据这一原理制作的。当K ′=2.5×104时，虽然A ∝c ，但是T-c 关系呈指数关系，不好用作定量分析标准曲线用。 【10-2】某试液用2 cm 吸收池测量时，T =60%，若改用1 cm 或3cm 吸收池，T 及A 等于多少？ 解：A =-lg T =Kbc 当b =2cm 时，A =-log0.60=0.222； 当b =1cm ，A =0.222/2=0.111，lg T =-0.111，∴T =0.77=77%； 当b =3cm ，A =0.222×3/2=0.333，lg T =-0.333，∴T =0.46=46%。 【10-3】某钢样含镍约0.12%，用丁二酮肟光度法（ε=1.3×104 L·mol -1·cm -1）进行测定。试样溶解后，转入100 mL 容量瓶中，显色，并加入水稀释至刻度。取部分试液于波长470 nm 处用1 cm 比色皿进行测量。如要求此时的测量误差最小，应称取试样多少克？ 解：∵A =0.434时，测量的相对误差最小， ∴40.4340.10058.6931.31010.160.12% Ni s Ni A V M b m g ???? ???? ? ???????===εω 【10-4】浓度为25.5 mg/50 mL 的Cu 2+溶液，用双环己酮草酰二腙光度法进行测定，于波长600 nm 处用2 cm 比色皿进行测量，测得T=50.5%，求摩尔吸收系数ε，灵敏度指数s 。 解：lg lg50.5%0.297A T =-=-= 6 6125.5108.181063.5460.050 c mol L ---?==???