动物试验方案(案例)
仅供参考
一、试验目的
探索胃、食管、十二指肠、结肠内进行冷冻消融安全性、有效性，观察消化道在冷冻下的急性表现。
1）探索冷冻消融在消化道（食道、胃窦、胃体、十二指肠、结肠）的急性表现与杀死细胞的有效性。
a.观察冷冻对消化道（食道、胃窦、胃体、十二指肠、结肠）的效果。
b.观察是否产生急性不良反应（穿孔、出血）。
c.测试胃壁深度及其据中心1cm、2cm处的冷冻温度。
c.活检组织观察冷冻杀死胃细胞的有效性。
二、实验对象和器材
1、实验对象
选用健康成年白猪，体重60kg（公司购买）
2、实验地点
上海交通大学附属第六人民医院动物实验中心（上海市徐汇区宜山路600号）
3、实验器材和药品
3.2 Senscure肿瘤冷冻消融设备，规格SR170与胃冷冻消融导管（公司提供。）
3.3 软镜及其工作站由XXX处提供，胃标本钳以及胃镜手术相关器械。
3.4 其他手术相关器械（由上海交通大学附属第六人民医院提供）
手术器械：剪刀，抓钳，止血钳，手术刀（由上海交通大学附属第六人民医院提供），
纱布，手套若干。
3.5试验用药品
麻醉药物（由上海交通大学附属第六人民医院动物实验中心提供）
三、实验方法
*术前观察：在进行冷冻实验前，提前一周时间，记录动物每日的进食量，排便次数1手术过程
1）麻醉
实验猪术前12h禁食，允许自由饮水。术前以头孢氨苄15 mg/kg 静脉滴注。静脉注
射丙泊酚诱导麻醉，气管插管后以异氟醚吸入麻醉维持。取仰卧位。
2）冷冻消融手术
a.将内镜插入至胃内部并拍照。
b.同时调试胃冷冻消融导管与Senscure肿瘤冷冻消融设备，将胃冷冻消融导管紧
贴冷冻部位，分别选取胃外壁及距离冷冻中心1cm与2cm处放置热电偶温度
计，设备开启冷冻，2min后，冷冻关闭，记录各个温度计的实时温度并拍照，开启复温，取出导管，观察冷冻后的胃内壁组织情况以及急性并发症情况，并
拍照。
c.取出冷冻消融导管，用胃镜专用标本钳在冷冻部位处取标本。
以上步骤以胃窦部为例，之后其他部位操作流程同胃窦部。
2 动物处死
上海交通大学附属第六人民医院动物实验中心负责处理动物尸体。
组织研磨管的使用方法 1.作用：只适用于蛋白提取、RNA提取、基因组DNA提取时的组 织裂解，不做他用； 2.组织研磨管：容量为1.5ml, 里面已经提前放置了研磨珠（有时也 不放置），研磨液（Trizol或RIPA裂解液，有时也不放置）一般在取回后才加入，如果已经加入了研磨液，请离心后才拧开管盖，以免研磨液溢出，对皮肤造成伤害，所以操作时，要小心注意！ 3.组织：把收取的组织分切，用生理盐水或PBS缓冲液把分切的组 织上的血液漂洗干净，然后用医用纱布或滤纸把组织表面的水分吸干，然后放入研磨管（组织体积大小为1颗绿豆至2颗黄豆，根据实际情况决定）中，然后把放入的组织尽量剪碎； 4.存放：上述过程应尽量在最短的时间内操作完毕，立即用液氮冻 结，然后置于液氮或-80℃保存； 5.操作事项：操作时间尽可能短，做好一个，立马放置一个；
实验方法总结（3）：动物模型部分 1、研究肿瘤细胞增殖 (2) 2、研究肿瘤细胞转移 (3) 2.1. 体外(浸润模型) (3) 2.2. 体内(转移模型) (3) 3、研究肿瘤细胞耐药 (5) 3.1. 耐药细胞株的建立 (5) 3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立 (6) 从肿瘤起源分，肿瘤动物模型的分类如下： 从研究目的来分，可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析： 1、研究肿瘤细胞增殖 细胞准备：GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为：空白对照组、阴性对照组、实验组。 取Balb/c裸鼠，雄性，6周龄，每组10只，适应一周后进行肿瘤细胞注射。
XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液，计数后取适量的细胞用PBS悬浮，在Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。每只接种2×106个细胞，注射体积为100 μL。此后，每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。30天后裸鼠小鼠腹腔注射80 mg/kg 戊巴比妥钠，小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照（侧卧位，接种部位朝上），小鼠颈椎脱臼处死，取出肿瘤称重，将肿瘤置蓝色背景布上拍照，肿瘤一分为二，一份4%多聚甲醛固定，待后续病理分析，一份-80℃冻存。 2、研究肿瘤细胞转移 肿瘤转移的模型包括两大类：体外(浸润模型)和体内(转移模型)。体外(浸润模型)：了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。体内模型主要研究肿瘤细胞的转移性即肿瘤细胞在远端组织形成病灶的能力。 2.1. 体外(浸润模型) 例：浸润型脑胶质瘤动物模型的建立 方法：取若干只Balb/c免疫缺陷裸鼠，将分离和鉴定并转染携带绿色荧光蛋白的脑胶质瘤干细胞立体定向法行小鼠颅内接种，每组10只。小鼠麻醉后头部正中切口，剥离骨膜后钻孔(坐标是冠状缝后0.5 cm，矢状缝右侧2.5 cm) 。取2 μL胶质瘤干细胞以1×104 cells /只小鼠的剂量，经微量注射器缓慢注射入鼠脑纹状体内(深度是2.5 ～3 mm) 。在确定的时间点处死一部分动物进行荧光( 立体荧光显微镜下) 病理证实和比较，同时检查脑胶质瘤干细胞的体内生长特征以及干细胞标志物等。 2.2. 体内(转移模型)
动物实验方案申请书 中国科学院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所（实验动物管理委员会批准不超过两年期的《动物实验方案申请书》）动物实验方案名称: 动物实验方案编号(由实验动物管理委员会填写) : 动物实验方案研究期限: 动物实验方案首次提交日期: 动物实验方案更新日期（方案到期前个工作日内）: 以下内容由实验动物管理委员会填写 实验动物管理委员会审查意见： 实验动物管理委员会决定: 实验动物管理委员 兽医（签章）：日期: 实验动物管理委员会（签章）: 日期:
★如实验动物管理委员会在审批过程中发现，该实验中有涉及生物安全及伦理审查方面的内容，则由实验动物管理委员会各成员在充分讨论后填写本页内容送生物安全与伦理委员会进行审批： 实验方案中涉及到生物安全及伦理审查方面的内容是： 该内容可能带来的潜在的生物安全风险及伦理考虑点主要是: 如该问题未能得到有效的管理监督及控制,可能的严重后果是: 基于以上原因,可采取的应对方式包括有: *** 动物实验方案参与人员*** 研究组长 姓名: 单位： 办公电话: 移动电话： 电子邮件：传真：
学位：职位： 请在下列方框内填写是或否 [] 是否有参加过实验动物及动物实验的相关培训？ [] 是否有从事动物实验或动物模型的工作经历、经验？ [] 是否有参加过实验动物导致的意外伤害及生物安全培训？ 请简要描述本人与该实验方案中所用的实验动物及动物模型有关的工作经验或培训经历： 紧急联系人 姓名: 单位： 办公电话: 移动电话： 电子邮件：传真： 学位：职位： 请在下列方框内填写是或否 [] 是否有参加过实验动物及动物实验的相关培训？ [] 是否有从事动物实验或动物模型的工作经历、经验？ [] 是否有参加过实验动物导致的意外伤害及生物安全培训？ 请简要描述本人与该实验方案中所用的实验动物及动物模型有关的工作经验或培训经历： 其他人员(如涉及多于一人参与本实验方案，请按需要拷贝并增加本页，至完成所有实验人员信息的填写) 姓名: 单位： 办公电话: 移动电话： 电子邮件：传真： 学位：职位： 请在下列方框内填写是或否 [] 是否有参加过实验动物及动物实验的相关培训？ [] 是否有从事动物实验或动物模型的工作经历、经验？ [] 是否有参加过实验动物导致的意外伤害及生物安全培训？
动物行为学习题 选择题 1、下列属于后天获得的行为是： A.候鸟迁徙B．鸟类筑巢C蜘蛛结网D．复杂的“鸟语” 2、生活在离海边50公里的某种小鸟，每天飞到海边取食时间都比前一天迟到50分钟。这种现象叫： A．日节律B．潮汐节律C。月节律D。无规律 3、在自然选择过程中，最终对动物行为起支配作用的遗传物质是： A.染色体B．DNA C．基因D．RNA 4、蜜蜂是一种典型的社会性昆虫，它们的社会生活高度发展主要表现在个体形态和职能分工上的高度专门化，在蜜蜂群体中表现出明显的利他行为。 A．蜂王B．蜂后C。工蜂D。雄峰 5、城市中喜鹊的巢与巢间距很近，远小于市郊野外种群的巢间距离，其原因是（多选）： A.合适的巢址分布密集B．食物充足C。利于繁殖D。喜鹊喜欢群居 6、下列行为中哪种行为属于后天学习来的行为?（多选） A．小鸭子出生后跟随首先看到的移动物体 B．小狗看到装食物的空盘子时也会分泌唾液 C．幼猴将马铃薯放在水中后洗净后再吃 D．山雀喜好取食个体较大的毛虫 7、无毒的拟斑蝶外观酷似色彩鲜艳、身体有毒的王斑蝶，这—现象属：（多选） 拟态中贝茨拟态是指可食性物种模拟有毒、有刺或味道不佳的不可食物种的拟态现象；缪勒拟态是指一种生物模仿其他生物以便于接近进攻对象的拟态如蚁蛛。 A.贝茨拟态B．缪勒拟态C．警戒色D．保护色 8、根据动物行为的定义，你认为下列哪项不是动物行为： A．黑猩猩为另一只黑猩猩梳理毛发B．雄螽斯在交配时，给雌螽斯提供食物C．地松鼠在洞穴附近直立，观察周围环境D．郊狼盘算如何阻止同伴来争夺猎物 9、动物的警戒色是用来： A．吸引配偶B．提醒捕食者自己是不可食的 C．保证动物体色与周围环境颜色一致D．吸引传粉昆虫 10、Lehrman设计了一个关于斑鸠的实验，实验分三个组：（1）全为雌鸟，单独饲养；（2）雌鸟与雄鸟配对饲养，不提供筑窝材料；（3）雌鸟与雄鸟配对饲养，提供筑窝材料。然后给各实验组每只雌斑鸠一窝卵，检查它们的孵窝情况。结果发现：第（1）组的雌斑鸠没有一只孵卵；第（2）组的雌斑鸠，从第6，7和8天，孵卵的雌性斑鸠比例越来越高，但不是所有的雌斑鸠都孵卵；第（3）组中，第8天，所有的雌斑鸠都开始孵卵。基于这个实验我们可以认为： A．雄性配偶能够引起雌鸟的全部孵卵行为 B．筑窝材料能引起雌鸟的全部孵卵行为 C．雄性配偶和筑窝材料是雌斑鸠孵卵的前提条件 D．实验设计不合理，不能得出任何结论 11、在繁殖季节，个体小的雄鸟对同类的鸣唱反应强烈，它们会靠近播放类似鸣唱录音的设备，并将回应播放的录音而发出鸣叫。通过这一技术可以确定该物种的种群密度。这项技术的理论依据是： A．个体小的鸟傻，它们会接近任何陌生的声音 B．个体小的鸟聪明，它们会接近任何陌生的声音
实验方法总结：动物模型部分 1、研究肿瘤细胞增殖 (1) 2、研究肿瘤细胞转移 (2) 2.1. 体外(浸润模型) (2) 2.2. 体内(转移模型) (2) 3、研究肿瘤细胞耐药 (4) 3.1. 耐药细胞株的建立 (4) 3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立 (5) 从肿瘤起源分，肿瘤动物模型的分类如下： 从研究目的来分，可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析： 1、研究肿瘤细胞增殖 细胞准备：GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为：空白对照组、阴性对照组、实验组。 取Balb/c裸鼠，雄性，6周龄，每组10只，适应一周后进行肿瘤细胞注射。
XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液，计数后取适量的细胞用PBS悬浮，在Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。每只接种2×106个细胞，注射体积为100 μL。此后，每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。30天后裸鼠小鼠腹腔注射80 mg/kg 戊巴比妥钠，小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照（侧卧位，接种部位朝上），小鼠颈椎脱臼处死，取出肿瘤称重，将肿瘤置蓝色背景布上拍照，肿瘤一分为二，一份4%多聚甲醛固定，待后续病理分析，一份-80℃冻存。 2、研究肿瘤细胞转移 肿瘤转移的模型包括两大类：体外(浸润模型)和体内(转移模型)。体外(浸润模型)：了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。体内模型主要研究肿瘤细胞的转移性即肿瘤细胞在远端组织形成病灶的能力。 2.1. 体外(浸润模型) 例：浸润型脑胶质瘤动物模型的建立 方法：取若干只Balb/c免疫缺陷裸鼠，将分离和鉴定并转染携带绿色荧光蛋白的脑胶质瘤干细胞立体定向法行小鼠颅内接种，每组10只。小鼠麻醉后头部正中切口，剥离骨膜后钻孔(坐标是冠状缝后0.5 cm，矢状缝右侧2.5 cm) 。取2 μL胶质瘤干细胞以1×104 cells /只小鼠的剂量，经微量注射器缓慢注射入鼠脑纹状体内(深度是2.5 ～3 mm) 。在确定的时间点处死一部分动物进行荧光( 立体荧光显微镜下) 病理证实和比较，同时检查脑胶质瘤干细胞的体内生长特征以及干细胞标志物等。 2.2. 体内(转移模型)
动物实验室的设计布局是规范工作流程和人员、动物、物品等相互关系和移动，并确保实验室安全，此外，对形成屏障结构具有重要意义。本文将从三个防护区（外围防护区、建筑防护区、饲养防护区）和四条控制路线（人员控制路线、动物控制路线、物料控制路线、废物控制路线）等方面详细介绍。 动物实验室 1.外围防护区 外围防护区主要指建筑外围的区域。鉴于实验动物饲养的特殊性，外围可能需要设监控设备、人员进出的控制、卫生防护带等。如果设施内从事涉及高致病性病原微生物的动物实验活动，须考虑设施的安保要求，以及一旦发生意外事故后对周围控制区域、疏散和救援的需求。外围的防护主要通过设置栅栏、围墙等方式实现。鉴于景观的需求，使用栅栏更显人性化。栅栏不应低于2米，栏杆的间距不大于10厘米，栏杆要坚固、易于清洁。 此外，需要设置照明系统、报警系统和视频监控系统，更高级别的防护包括地下的电磁场报警、红外线报警和运动物体报警、低压电击等措施。防护区内一般不布置绿化，以免影响监控，同时也可减少昆虫、老鼠等。为保证正常的外来服务，如邮件、送货、访客等，通过风险评估决定是否需要建设安检、特殊通道、中转站等措施。对控制区域应设置警示牌，避免无意闯入。对防护要求高的设施，
应保证外来车辆不能靠近设施，距离保持至少30米。在外围防护区，宜设专用的外部人员和车辆入口。 2.建筑防护区 建筑防护区主要指动物实验室所在的建筑。建筑内有动物设施和其它设施之分，其它设施可以与动物设施有关，也可以无关;动物设施可以就是建筑的主体，也可以是其部分。需要考虑的主要问题是动物设施环境与建筑物内其它区域环境的相互隔离与相互关系，人员、动物、物料和废物的进出路线。使用时，动物设施及其相关的设施宜集中布置，从事感染动物活动的设施需要单独布置。建筑除主入口外，要考虑设置动物、大型设备和废物的出口和入口。 出于安全考虑，必须评估和明确对门窗的性能要求。在合理控制数量的前提下，对门窗的大小、形状、耐冲击能力、耐火性、保温性、光学特性等均要有要求。可能的风险来自于异常的气候、自然灾害、人为破坏、设备异常等，如，通风系统的异常可造成室内压力急剧变化，造成门窗损坏。 3.饲养防护区 饲养防护区设施基本的形态是由入口、走廊(或通道)、功能间和出口组成。走廊是连接各功能区的纽带，各种通道发挥快捷、隔离、消毒等作用。实验动物设施的特点是不相容的因素多，需要利用走廊和通道对不相容的因素作合理的安排。走廊的形式包括双走廊、单走廊、U型走廊、环廊等。设施内部的安排应根据工作流程和利于控制风险的原则确定，此外，还要考虑工程可行性和日常维护的方便性，可以组成相对独立的单元。 1.人员控制路线 进出动物实验室的人员主要包括动物管理人员、动物实验人员和清洁人员。此外，还有送货人员、维护人员、来访人员、检查人员、安保人员等。为保证各类人员的进出有序，需要合理设计路线和设置不同级别的物理限制。人员的移动具有主动性，可以到达任何区域，要通过SOP和物理控制措施管理人员的移动。
保健食品各功能需要做的动物及人体试验功效成分或标志性成分检测、卫生学试验、稳定性试验、复核检验 （一）只要求动物实验的项目有： 1. 增强免疫力功能检验方法 主要指标：细胞免疫功能 体液免疫功能 单核－巨噬细胞功能 NK细胞活性测定 判定：四项指标中任两项结果阳性。 注意事项：不认可增强单项免疫力功能。 2. 改善睡眠功能检验方法 主要指标：戊巴比妥纳睡眠时间实验 巴比妥钠睡眠潜伏期实验 戊巴比妥钠（或巴比妥钠）阈下剂量催眠实验判定：3项实验中任2项阳性，且直接睡眠作用。 注意事项：对动物进行直接睡眠实验时，也要同样注意进行30天灌胃。 3. 缓解体力疲劳检验方法 主要指标：血乳酸 血清尿素 肝糖原/肌糖原 动物负重游泳实验 判定：负重游泳实验结果阳性，血乳酸曲线下面积、血清尿素、肝糖/肌糖原3项生化指标中任2项指标阳性。 注意事项： （1）对同批受试样品进行违禁药物的检测。 （2）在负重游泳实验时，酒类样品测试当天可以不灌胃。 4. 提高缺氧耐受力功能检验方法 主要指标：常压耐缺氧实验 亚硝酸钠中毒存活实验 急性脑缺血性缺氧实验 判定：三项试验中任二项实验结果阳性。 注意事项：每批实验动物的体重尽量保持一致。 5. 对辐射危害有辅助保护功能检验方法 主要指标：外周血白细胞计数 骨髓细胞DNA含量或骨髓有核细胞数 小鼠骨髓细胞微核实验 血/组织中SOD活性实验 血清溶血素含量实验 判定：以上5项实验中任3选项进行实验，3项实验中任何2项实验结果阳性。 注意事项：选用小鼠，受试样品于照射前给予14～30天，照射后仍然给予
受试物，必要时可延至45天。 6. 增加骨密度功能检验方法 根据受试样品作用的原理不同，分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。 主要指标：体重 骨钙含量 骨密度 判定：（方案一）骨钙含量/骨密度显著高于低钙对照组且不低于相应剂量的碳酸钙对照组，钙的吸收率不低于碳酸钙对照组。 （方案二）①不含钙的产品：骨钙含量/骨密度较模型对照组明显增加，其它指标（体重除外）不显著低于卵巢切除＋溶剂组。②不以补钙为主（可少量含钙）的产品：骨钙含量/骨密度较模型对照组明显增加，差异有统计学意义，且不低于相应剂量的碳酸钙对照组，其它指标（体重除外）不显著低于卵巢切除＋溶剂组。 注意事项： （1）使用未批准用于食品的钙的化合物，除必做主要指标外，还必须进行钙吸收率的测定；使用属营养强化剂范围内的钙源及来自普通食品的钙源可以不进行钙的吸收率实验。 （2）必须使用单光子骨矿密度仪或双能X线骨密度仪或其它相关仪器测量股骨中点及股骨远心端的单位面积骨矿含量。 7.对化学性肝损伤有辅助保护作用检验方法 根据样品的用途进行选择，方案一（四氯化碳肝损伤模型）和方案二（酒精肝损伤模型） 方案一 主要指标：谷丙转氨酶+谷草转氨酶+肝组织病理学检查 判定：模型成立的前提下，ALT或AST任一项指标阳性，病理结果阳性。 方案二 主要指标：丙二醛+还原型谷胱甘肽+甘油三酯+肝组织病理学检查 判定：满足以下任一条件，可判定该受试物具有对酒精性肝损伤有辅助性保护作用①肝脏MDA、GSH、TG三项指标结果阳性；② 肝脏MDA、GSH、TG三指标中任2项指标阳性，且肝脏病理结果阳性。 注意事项：报告中需提供列表详细描述肝脏病理情况。 （二）只要求人体实验的项目有： 1. 缓解视疲劳功能试验 受试对象：为儿童、青少年或成人，长期用眼，视力易疲劳者。排除患有眼部疾病者、短期内服用与受试物功能有关的物品者或长期服用其它有关治疗视力的药物或使用其它治疗方法者。 要求：考虑年龄、性别等因素，进行均衡性检验。 2. 祛痤疮功能试验 受试对象：选择临床痤疮I－III度的自愿健康受试者，排除因病理性原因及妊娠及哺乳期妇女。 要求：
《动物行为学》复习思考题 1什么是动物行为和动物行为学？动物行为学研究目的和意义是什么？ 为了满足个体生存和种群繁衍的要求，适应体内外环境的变化，动物的个体和 群体所做出的有规律、成系统的适应性活动就是动物行为。 动物行为学是研究动物对环境和其他生物的互动等动物行为问题的学科，研究的对象包括动物的沟通行为、情绪表达、社交行为、学习行为、繁殖行为等。 人类与其他动物的根本区别是人类不断探索我们所处的世界，这不仅仅是出于好奇心，也是为了人类自身生存的需要。作为一种社会动物，人类也希望通过了解动物的行为来理解自己的行为。 更好地了解动物行为将有助于人类更好地协调人与自然的关系，促进人类保护濒危稀有动物物种。濒危动物迁地保护时，需要研究、掌握动物的行为；研究动物行为有利于澄清关于动物疼痛和动物福利等方面的问题。 2.简述动物行为学的研究历史和现状。 亚里士多德《动物记》----行为的基本观察、记录。 法布尔《昆虫记》----昆虫行为的系统观察和记录。 达尔文《物种起源》和《人类及动物的表情》等----行为的进化。 1947. 行为学期刊《Behaviour》(行为) 1953. 《Animal Behaviour》(动物行为) 1954. 《Insect Society》(昆虫社会) 1956. 《Behavioural Science》(行为科学) 1963. 《Experimental Journal of Animal Behaviour》(动物行为实验杂志) 1964. 《Journal of Experimental Journal of Animal Behaviour》(行为实验分析) 1966. 《Physiology and Behaviour》(生理学和行为) 1970. 《Brain, Behaviour and Evolution》(脑，行为与进化) 1971. 《Behaviour Genetics》(行为遗传) 1978. 英国出版第一本行为生态学论文集《Behavioural Ecology—an Evolutionary Approach》1982. 第一本行为生态学理论专著《An Introduction to Behavior Ecology》 1983. 在Mainz召开了第一次国际性动物行为学讨论会 1999. 《An Introduction to Behaviour Ecology》第四版(Krebs & Davies) 1973. 《Learning and Behaviour of Animal》(动物的学习与行为) 1975. 《Applied Ethology》(应用行为学) 1975. 《Animal Behavioural Process》(动物行为进程) 1977. 《Bird Behaviour》(鸟类行为) 1977. 《Behaviour, Ecology and Sociobiology》(行为、生态和社会生物学) 1978. 《Behaviour and Brain Science》(行为和脑科学) 1980. 《Ethology and Sociobiology》(行为学与社会生物学) 1998. 《行为生态学》尚玉昌，北京大学出版社 2004. 《动物行为原理与物种保护方法》蒋志刚，科学出版社 在过去的二十多年中，对动物的行为已经出现了一个新的研究方法，即行为生态学和社会生物学研究法。行为生态学和社会生物学在很多方面都是相似的，它们都进行大量的野外工作，以野外工作为主，但也在实验室进行试验。它们都十分注意推理过程，包括所研究动物生态学方面和自然选择对动物行为作用方式方面。
二十种常见实验动物模型 一、缺铁性贫血动物模型 缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）是体内用来合成血红蛋白（HGB）的贮存铁缺乏，HGB合成减少而导致的小细胞低色素性贫血，主要发生于以下情况：（1）铁需求增加而摄入不足，见于饮食中缺铁的婴幼儿、青少年、孕妇和哺乳期妇女。（2）铁吸收不良，见于胃酸缺乏、小肠粘膜病变、肠道功能紊乱、胃空肠吻合术后以及服用抗酸和H2受体及抗剂等药物等情况。（3）铁丢失过多，见于反复多次小量失血，如钩虫病、月经量过多等。 IDA是一种多发性疾病，据报道，在多数发展中国家，约2/3的儿童和育龄妇女缺铁，其中1/3患IDA，因此，研究IDA的预防和治疗具有重要的意义。在这些研究中，缺铁性贫血的动物模型（Animal model of IDA），又是实施研究的基础工具。常见的IDA动物模型的构建技术如下： 实验动物：一般选用SD大鼠，4周龄，雌雄不拘，体重65g左右，HGB≥130g/L。 建模方法：低铁饲料加多次少量放血法。低铁饲料一般参照AOAC 配方配制，采用EDTA浸泡处理以去除饲料中的铁，饲料中的含铁量是诱导SD大鼠形成缺铁性贫血模型的关键，现有研究表明，饲喂含铁量<15.63mg/Kg的饲料35天，SD大鼠出现典型IDA表现，而饲喂
含铁40.30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁，但并不表现贫血症状。建模时一般采用去离子水作为动物饮水，以排除饮水中铁离子的影响。少量多次放血主要用于模拟反复多次小量失血导致的铁丢失，还可以加速贫血的形成。放血一般在低铁饲料饲喂2周后进行，常用尾静脉放血法，1～1.5ml/次，2次/周。 模型指标：（1）HGB≤100g/L；（2）血象：红细胞体积较正常红细胞偏小，大小不一，中心淡染区扩大，MCV减小、MCHC降低；（3）血清铁（SI）降低，常小于10μmol/L，血清总铁结合力（TIBC）增高，常大于60μmol/L。 需要指出的是，以上模型不能用于铁吸收不良相关IDA的防治研究。根据具体的研究需要，也可以适当调整建模方法。 二、白血病动物模型 用免疫耐受性强的人类胎儿骨片植入重症联合免疫缺陷病(SCID)小鼠皮下，出于人类造血细胞与造血微环境均植入小鼠，建立具有人类造血功能的SCID小鼠模型称为SCID－hu小鼠。再将髓系白血病患者的骨髓细胞植入SCID－hu小鼠皮下的人类胎儿骨片内，植入的髓系白血病细胞选择性生长在SCID－hu小鼠体内的人类造血微环境中，即为人类髓系白血病的小鼠模型。SCID小鼠是由于其scid所致。T、B淋巴细胞功能联合缺陷，这种小鼠能接受人类器官移植物。 造模方法：
动物实验室设计布局要求与规范 动物实验室包括普通的动物实验室规划设计和洁净动物实验室规划设计，一般由前区、饲养区、动物实验室、辅助区组成。 1.动物实验室布局的设计:计符合实验室标准和使用要求的产品布局规划;确定实验室内产品的类别规格数量。 2.水电预留位置的设计:在确定了平面布局后，提供全面水电位置图，方便客户工程精准施工。 3.通排风系统的设计:在实验室新建或改造项目中，在规划阶段就参与其中，派专业的工程师到现场与相关的人员联系，根据实验室内通风载体的数量(如通风柜、集气罩、排气罩)设计出完整的通风方案;方案内容包括：建筑内预留排风管井的位置及尺寸，管道的分布及规格。确保通风的载体使用时的风速、排风量、噪声等指标符合国家标准，并与建筑内的空调、消防、照明等线路互不干绕。 4.气路管道系统的设计:根据实验对气体供应的需要，结合现场布局，提供供气系统设计方案，在保证气体纯度的同时，精密调控气体的压力和流量。 5.环保的设计:提供完善的废气净化处理解决方案，使实验中产生的废气得到有效的解决，符合环保的排放指标。 6.产品个性设计:根据实验流程及人员的特殊要求，调整产品结构和功能，设计出个性的产品以满足不同用户的需要。 7.安全设施的设计:按照国际标准，在实验室合理配置安全柜、毒品柜及紧急事故淋洗器，急救洗眼器等安全设施。 动物实验室的级别： 一级普通动物(CV)，系指微生物不受特殊控制的一般动物。要求排除人兽共患病的病原体和积少数的实验动物烈性传染病的病原体。为防止传染病，在实验动物饲养和繁殖时，要采取一定的措施，应保证其用于测试的结果具有反应的重现性(即无论不同的操作人员，在不同的时间，用同一品系的动物按规定的实验规程所做的实验，都能获得几乎相同的结果)。 二级清洁动物(CL)，要求排除人兽共患病及动物主要传染病的病原体。 三级无特殊病原体动物(SPF)，要求到二级外，还要排除一些规定的病原体。其除菌与灭菌的方法，可使用高效空气过滤器除菌法、紫外线灭菌法、三甘醇蒸气喷雾法及氯化锂水溶液喷雾法。 四级无菌动物(GF)或悉生动物(GN)。无菌动物要求不带有任何用现有方法可检出的微生物。悉生动物要求在无菌动物体上植入一种或数种已知的微生物。 在病理学检查上，四类实验动物也有不同的病理检查标准。 一级外观健康，主要器官不应有病灶。 二级除一级指标外，显微镜检查无二级微生物病原的病变。 三级无特殊病原体动物。无二、三级微生物病原的病变。
SPF级动物实验室的建设方案 动物实验室主要是用于针对动物的研究实验，其实验成果可以应用于各个领域，因此科学研究对实验动物质量的要求越来越高，许多人在建设动物实验室时更是要求必须使用SPF级及以上等级。作为专业的实验室建设工程公司，SAREN三仁实验室做过很多关于SPF级动物实验室建设的实例，下面为某次SPF级动物实验室建设方案的简单概述，希望可以帮到大家。 1.建筑卫生要求 SPF级动物实验室在卫生条件方面的要求特别高。建设时，在动物繁育、生产和实验场所里面的所有围护结构材料都必须是无毒、无放射性。建筑内墙表面要光滑平整，阴阳角均为圆弧形，便于工作人员日后的清洗以及消毒。注意墙面要采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击的材料。地面则应采用防滑、耐磨，不会渗漏的材料。天花板需要耐水、耐腐蚀。 2.空调系统 在整个实验过程中空调系统必须以稳定的环境条件来确保实验结果不受外部条件的影响，所以SAREN三仁建议采用全新风中央空调通风系统。空气需要经过初、中、高效三级过滤器后再进入到SPF级动物实验室内，使空气达到所要求的洁净级别。空调设备位于初、中效过滤器之间，由一套单元式机组，机组有两台压缩机，相互独立，一用一备，保证整个系统的正常运行。
3.通讯系统 避免因沟通而进出浪费时间，同时也可以应对突发事件，室内各房间均应安装内部电话机。建议按照房间顺序编排电话号码，不仅方便，还能避免混乱。各室内电话不仅需要相互连通，还需要与监控室总机保持联系，保证实验室内外信息的及时沟通。 4.供水系统要求 SPF级动物实验室的饮用水宜用纯净水。在建设时也可以设置接水槽和净化装置，为实验动物供应灭菌的饮用水和屏障系统内用水。但要记得经常更换和清洗输水管道，在清洗笼具时可以添加适当比例的84消毒液。 5.监控系统要求 为了能实时监测设施的运行状态和实验动物的反应，SAREN三仁建议在SPF级动物实验室的出入口、走道、实验动物饲养室、功能操作室等重要位置安装摄像机。这样也能有效督促实验人员严格执行操作规程，避免因人为因素造成的室内环境和设施的污染。 为了严格控制动物实验室的环境不受病源微生物的危害，保护动物的安全，动物实验室的建设方案一定要谨慎合理。
如何设计动物实验 一般来说，动物实验的研究工作应该明确描述，研究的目的和/或者需要验证的假说。1、选择特定动物模型的原因。2、动物种、品系、来源和类型。3、每个独立实验步骤的详细描述，包括研究设计和使用动物数量。4、数据分析所用的统计学方法。动物实验设计有重要的意义的意义1、正确的动物实验设计对提高科学研究质量、发表高水平的学术论文非常重要2、目前许多动物实验质量不高。3、一个好的实验设计，对统计学分析来说帮助很大，可以使问题变得更加容易解决4、一个不正确的实验设计，导致结果信息无用。实验设计的主要目的一是保证所测变量的任何差异是由处理造成的，而不是其他非对照变量引起；另一个目的是通过控制确定的变量在尽可能小的范围内，减少所测反应的变异性，这样对处理效应的评介更准确。我将它分为以下几个步骤 一、实验设计的最初步骤 1、查阅文献 A: 明确研究焦点B：明确方法 C：明确模型D：评估实验 2、科研方法 A：观察和描述科研中的现象B：系统的陈述问题和解释问题的假说C：利用假说预测新的观察结果D：验证假说 3、问题的陈述、研究的目标和提出假说 ?问题提出：实验将说明的问题是什么，意义 ?研究目标：总目标，特殊问题 ?假说：对每一个至少给出两个预计结果 ４、动物模型的确定 ?使用系统发育水平最低的动物，符合３Ｒ原则 ?使用的动物具有研究要求种属或品系专一特点，特定研究目的必须特点?实验期间动物模型维持条件 ?动物模型来源渠道 ?最终确定动物模型前征询实验动物兽医意见 ５、实验合作者的确定 ?在研究的过程中，明确应用的试验技术操作，并确认具有相应操作专长的人员来完成。 ?让合作者了解实验：设计、计算、样品收集．．．． ?实验动物中心可以提供动物实验有关技术操作培训及昂贵设备服务 二、动物实验设计 １、研究方案 根据问题、目标、假说，提出实验操作安排的计划并文字化 考虑的方面： A：动物模型持续时间B: 模型中预期疾病的进程（决定测定的最适时间点） Ｃ：人员参加的时间，实验花费Ｄ：给药方法 Ｅ：风险评估Ｆ：统计学方法选定 ２、实验单元 可以是一个动物，也可以是一组动物群体
动物行为学实验室建立要点 动物行为学实验室建立要点：动物行为学分析系统，是指通过对动物行为的视频、光电和生物电等信号的采集，并结合计算机图像处理、提取动物行为的轨迹并计算实验动物对象的各种行为学参考指标，用来进行评价药物效果和影响的软件及硬件系统。 一、动物行为学实验室建设原则 实验室建设原则参考普通环境标准，该环境设施符合动物居住的基本要求，不能完全控制传染因子，适用于饲养教学等用途的普通实验动物。 1.给水排水系统：上水水压0.3-0.5MPa，冷热水分别独立提供；实验室下水口距地面高度低于10cm。 2. 实验室内光照度：室内光照度恒定，阻断室外光线（隔光窗帘或无窗户），室内光源由室内灯提供，分为实验光源和工作光源，实验光源根据不同实验设备专门布置射灯位置及角度，实验时保持实验光源提供的光照度恒定不变（可以用光照计测量）；工作光源漫反
射光源，照度为150-300LX. 3.动物房光线：动物房内要有较亮的工作光线和较暗的生活光线调节；要装有昼夜明暗交替照明系统，每12h轮转照明，工作照度150-300LX,动物照度15-20LX,调节实验动物节律跟人类一致。 4.通风：实验动物一般对气味非常敏感，所以实验室、动物房要有独立的通风系统，换气次数8-10次/h，气流速度0.1-0.2m/s（最好是从笼子里出来直接排到室外，而不是排到室内）。 5.隔音：实验室建设初期可在四周墙壁中加装隔音层或者后期加装波峰海绵,室内噪音低于60dB（也可购置专门的隔音箱）。 6.温度：室内温度恒定19~26℃为宜（日温差小于4℃），推荐20~25℃（日温差小于3℃），冷热双制空调系统是必需的。 7.相对湿度控制在40%~70%较好。 8.动物房距离实验室的距离因在同一隔离区域内，实验动物繁育、生产、实验设施应与生活区保持大于50m的距离，尽量避免实验动物的搬运过程接触外界。 9.实验过程中禁止实验人员或其他人员在实验室内或实验室门外频繁进出，避免在同一间实验室内同时进行两项或两项以上的实验，去除实验人员对实验动物的影响。 10.动物行为学实验设备一般体积较大、数量较多，实验室空间根据实验设备的要求定制和设计实验场地。 11.实验室的电脑操作室要求独立一个房间，避免影响实验。 12.每套电脑因单独控制一套设备为宜。 13.实验室最好配置恒定白噪音发生器（避免外界和动物间的声音干扰） 14. 实验室的电气指标要求三厢，可拼配接20A电流。实验室因配置UPS设备，保证实验室供电稳定性保证实验正常进行 15. 走廊宽度不应少于1.5m，门宽度不少于1.0m，房高不能低于2.8m。
一. 背景： 本次动物实验相关疾病介绍、国内外相关治疗及研究的现状及结果（含临床、基础）、相关引文摘要等。 二、实验所用器械简介： 三、实验目的 1、使用猪或其他适宜动物为实验模型, 按照临床要求对产品进行模拟 使用，对* *器械的* *性能、* *效应进行测试。 2、通过动物实验取得数据和经验, 以便为产品的临床使用撰写详尽的使 用指南。 3、确定* * 器械置入猪后的最长可回收天数, 以便为临床使用的最长 可回收时间提供参考。 4、研究* *器械置入* *天后的可回收性, 以回答以往实验中未能解决 的* * 器械在置入* * 天后是否可取出的问题。 四、实验模型和材料 1、实验模型 （1）.动物模型：猪，体重：25?35KG （2）.体外模型：拟采用透明塑料软管作成的20mm 25mm两 种直径的下腔静脉模型。 2、材料： （1）* *器械采用XX公司研发生产的器械。 （2）其他手术配套器械采用临床通用器械。 3.过程要求：
本实验开始前必须取得动物道德委员会的许可（注：国外 有此要求，国内仅少数几家大医院有动物伦理委员会） 五.实验设计 动物数量及分组方法：实验动物共22头，在置入器械后分为A和B两组.A组动物采用介入方法取出滤器，B组动物采用外科方法经腹切开方法取出滤器.下腔静 脉滤器置入后饲养观察时间为7、10、12、14、16、20、30、60和90天，具体分组方法见下表。 分组（头） 时间（天）- A B 7 1 1 10 1 1 12 3 1 14 3 1 16 1 1 20 3 1 30 0 2 60 0 1 90 0 1 六、实验方法： 1、随机选取实验动物以1:1的比例进行* *实验，并记录* * 总结出的操作要求。7?20天实验用以观察器械置入后的可回收期，30、60、90天实验用以观察器械置入后的长期通畅情况。 2、所有动物器械取出前应造影复查，并与器械置入时的资料进行对比，判断器
第一章测试 1 【单选题】(1分) 由蝌蚪到青蛙行为变化的研究属于动物行为的（）研究。 A. 发育 B. 原因 C. 功能 D. 进化 2 【判断题】(1分) 无论在什么条件下，动物行为的表达都是为了自身的生存。 A. 对 B. 错 3 【判断题】(1分) 高等动物一旦濒危，就难以恢复，一个重要的原因是学习行为所占比例较大。 A.
错 B. 对 4 【单选题】(1分) 当一个学生经历多次失败后认为失败是因为自身能力不足的时候，这个学生处于（）状态。 A. 攻击 B. 自责 C. 习得性无助 D. 习惯化 5 【多选题】(1分) 研究动物行为有助于（）。 A. 动物保护 B. 理解人类自身行为 C. 动物驯养繁殖
D. 野生动物疾病控制 E. 人与动物冲突控制 第二章测试 1 【判断题】(1分) 克劳格原理要求研究人员在研究一个科学问题时要选择一种合适的动物，动物行为学研究也不例外。 A. 对 B. 错 2 【判断题】(1分) 动物的年龄、性别、社会等级等都可能影响到对动物的观察。 A. 对 B. 错
3 【多选题】(1分) 以下技术和设备可以应用到研究动物行为中的有（）。 A. 望远镜 B. 物联网技术 C. 户外相机 D. 夜视仪 4 【判断题】(1分) 黑头鸥把蛋壳残片扔到鸟巢外面是因为蛋壳残片吸引天敌，这属于因果研究。 A. 对 B. 错 5 【多选题】(1分) 在设计动物行为实验时，可以利用（）。
A. 动物本身差异 B. 移除实验 C. 人工控制 D. 使用模型 第三章测试 1 【判断题】(1分) 刚性行为和弹性行为的区别就是动物随着占有资源量的变化表达的频次和持续的时间是否有显著的变化。 A. 对 B. 错 2 【多选题】(1分) 动物往往存在同性集群，常见的原因有（）。 A. 活动预算不同
我国动物实验领域的问题与对策 动物实验的科学定义指在实验室内，为了获得有关生物学、医学等方面的新知识或解决具体问题而使用动物进行的科学研究。随着整个世界科学技术的进步，以及我国生活水平的提高，吃饱穿暖已不再让人堪忧，更多为人关注的则是怎样能生活的有质量，人们似乎更趋于对自己生理构造的探究以及自己生命及生活质量的的保证和提高。我们不断着手于探索生物的起源，揭开遗传的奥密，攻克癌症的堡垒，研究各种疾病与衰老的机理，监测公害、污染，保护人类生存的环境，生产更多更好的农畜产品为人类生活造福，在药品、生物制品、农药、食品、添加剂、化工产品、化妆品、航天、放射性和军工产品的研究试验与生产中，在进出口商品检验。然而，此类科研结果不经动物实验又怎能轻易地施以人身？我们不能用人去做实验。因此动物实验领域，已受到世界各国的普遍重视，投入了巨大的人力物力，这是因为在生物科学领域内，我们必须借助实验动物去完成对人类生命的探索。动物总是做为人类的替身，去承担安全评价和效果试验，在生命科学领域内一切研究课题的确立，成果水平的高低，都决定于实验动物的质量，没有它，我们的科学实验就不能在时间、空间和研究者之间进行比较，我们的科研成果、论文就不能在国际上进行交流，得不到国际的公认，将被国际同行们看为科学水平不高甚至是一堆废纸。动物实验探索人类的生命奥秘，控制人类的疾病和衰老，延长人类的寿命，它具有深远的意义。而因此动物实验也是不可替代的方式。 对于科技起步较晚发展速度较快而经济水平以及人民素质依然较落后的我国，尽管随着动物实验领域的发展不断的收益，然而诸多的问题不断显现。围绕道德伦理和实验验本身的安全问题及各种可行性问题不断带来了一些障碍阻碍相关事业的发展。第一个问题，动物实验正确与否在人们心中的伦理性判断观点不一。有很多人对科学工作者的以动物为实验物进行省道和指责。随着动物实验的不断开展，有越来越多的动物权利主义者。动物实验反对者者反对将动物当作一般财货或是为人类效力的工具。他们有着各种离鸾观点。有人认为掠夺和杀害动物是非常残忍的，残酷行为本身是有悖于人的道德修养的。此外，人对动物的残忍行为会使一般人染上残忍的品性，是正常人变得对其他同伴也残忍，冷漠，麻木不仁。以上也是西方动物保护组织所持主流伦理学观点。而大多数反对的主要原因则是权利问题，及他们认为生命和感觉是人类拥有天赋和权力的基础；而动物也拥有生命和感觉，所以动物也应该具有天赋权利。动物的权利也应该受到保护。第二个问题则是我国的实验动物福利状况并不乐观，现有的实验动物管理法律体系对于实验动物福利问题的回应非常被动和保守。我国实验动物管理法律体系仍属于传统的行政管理法律体系，而并不是现有的一些理论成果认为的旨在保护实验动物福利的法律体系。法律规范，在人类和动物之间创造一种和谐的关系，是人类数百年来理性思考的结果。实验动物福利是动物实验与实验动物之间平衡的最佳纽带。实验动物福利问题既涉及到动物福利，又关乎我国科研技术的发展，同时与我国在国际贸易上应对技术壁垒等一系列的国际经济问题有着密切的联系，更与社会自身的发展息息相关。对实验动物福利的问题的关注是社会进步和经济发展到了一定阶段的必然产物，符合我国构建和谐社会的理念，也符合人与自然，人与动物和谐的理念。而我国在这一重要方面正有者十分严重的缺陷。第三个问题，则是对实验者本身的的探究与思考。包括他们的自我保护意识和安
动物实验终点的准则的建议 介绍适合的种端点是每一个动物实验方案（ASP）的一部分，该ACUC 必须解决端点上的每一种研究动物。它是理想的，当科学目标和这项研究的目标无不良影响，疼痛或痛苦的动物可以完成。然而，这并不总是可能的，必须考虑到： ?研究的科学要求; ?预期和可能产生的不利影响的研究动物可能经历（痛苦，苦恼，疾病等）; ?最有可能的时间过程以及这些不利影响的进展; ?最早最具预测指标存在或即将发生的不良反应。 哪里疼痛或痛苦是这项研究的一个必要组成部分，必须始终使用一个人性化的端点。一人性化的端点是IACUC批准的最早的科学合理的点时的疼痛或痛苦。实验动物是可以预防，终止或解除的，同时满足科学目标和研究的目标。有效利用端点需要适当的培训和合格的人员同时执行。研究动物在适当的时间点一般需要特定的研究观察。该评估标准和要求的响应必须明确界定，并采用特定的研究，动物评估记录应予以考虑。研究设计必须尽量减少疼痛和或苦恼。如果疼痛或痛苦是不可避免的，那么科学的论证必须进行审查和批准ACUC和回答的科学尽早端点兼容的问题必须采用。这样的端点最好是死亡或濒死的，因为他们能减少疼痛和痛苦。当启动一个新的组实验，用于治疗疼痛或焦虑的潜在可能是未知或导致的发病率和濒死或死亡的性质和程度是始料不及的。因此，较小的试点研究可能是有用的，因为他们可以有助本发展适当的端点。最后，包括疼痛或痛苦进行研究，调查人员应在整个研究尝试完善的端点和必要性任何发病率，濒死或死亡。 发病率 动物研究的建议，其中包括发病率作为终点或者说包括动物程序，有可能造成不良潜力应解决以下，因为它们涉及到预期成果： 1。标准终结点时，已经达到了确立。有文献中的几个例子可能被认为对大多数物种，包括：1）评价的动物的病情五个方面所描述的莫顿及格里菲思。它们是：体重，外貌，可测量的临床症状，无端行为和对外界刺激的反应。 2 2）所描述的在癌症研究和毒理学研究中使用的临床观察蒙哥马利。参数包括改变整体外观，皮肤和头发，眼睛，鼻子，嘴和头部，呼吸，尿，粪便和运动（表1）。3）身体状况得分可以通过5适用于大多数的物种，公元前1212骨骼结构极为突出，很少或根本没有肌肉质量，椎骨明显分割，公元前2分割脊椎动物柱明显，背盆腔骨骼容易触及，减少肌肉质量公元前3椎骨和骨盆背不突出可见，有轻微的压力公元前脊柱是一个连续的列，可摸到椎骨只压力公元前轮廓光滑，体积大，骨结构消失，下肉，皮下脂肪临床体征，视严重程度，持续时间和响应于适当的疗法，即可以构成在大多数物种的端点包括，但不限于：迅速或逐渐消瘦。体况损失也应予以考虑，并在研究动物那里是对身体条件的潜在损失特别有用没有重量的损失。腹泻衰弱脱水降低皮肤弹性浮肿相当大的腹部肿大或腹水渐进性皮炎被毛粗糙蓬乱的外观，弯腰驼背的姿势，嗜睡或持续斜卧，咳嗽，呼吸困难，流鼻涕黄疸，紫绀，和苍白贫血。神经系统体征从任何孔流血自我引发的创伤任何条件与日常活动（如进食或饮水，下床活动，或干扰消除）过量或长期高温或低温，对于水生物种的其他症状包括脊柱侧弯，形体消瘦，显著皮损和/或肌肉或其他组织的曝光角在肿瘤研究额外的标志可能构成一个端点包括，但不限于：1）一种肿瘤负荷大于10％的体重。在成年小鼠，肿瘤不应该超过20毫米在任何一个维度;在成年大鼠，肿瘤不应超过40毫米在任何一个维度。公式计算肿瘤大小可以在文献中找到（见肿瘤大小的参考）。 3 2）溃疡肿瘤，成为坏死或感染。3）干扰进食或损害下地肿瘤e。 注意事项老化研究：1）由于衰老的效果，老化的动物可以自然表现出了一些临床症状，将表明在年轻的动物显著的发病率。动物的年龄以不同的速率所以除了实足年龄等因素的基