一、目的
建立培养基模拟灌装验证的管理规程，确保培养基模拟灌装验证符合生产工艺及GMP要求。
二、适用范围
适用于制剂车间生产的产品需要培养基模拟灌装验证的整个工艺过程，包括从部件、材料的灭菌准备，一直到完成灌装和容器密封的整个过程。
三、责任者
制剂车间、生产部、公用事业部、质量控制部、物流部、质量保证部及验证部遵照执行。
四、缩写与定义
1. 最差条件（worstcase）
在SOP范围内（或超出），由工艺参数的上、下限和相关因素组成的一个或一系列条件。与理想条件相比时，最差条件使产品或者生产工艺失败的几率为最大，这样的条件不一定导致产品或生产工艺的失败。
2. 干预（Intervention）
操作人员在无菌操作区域内的操作活动。
3. 正常干预（InherentInterventions）
在无菌工艺灌装过程中发生的正常的在计划中的活动（例如，设备安装、装量调节、胶塞的再补给、灌装容器的再补给、环境监测、取样等等）。
4.纠正干预（CorrectiveInterventions）
在无菌工艺灌装过程中的纠正或调整的活动，其不属于计划性。（例如，灌装容器的破损、倒瓶、掉塞、更换灌装针、灌装设备维修）
五、健康、安全和环境
无
六、程序
1. 验证小组职责：
1.1验证部
1.1.1负责编制培养基模拟灌装验证管理规程。
1.1.2协助起草并审核培养基模拟灌装验证方案及培养基模拟灌装验证报告。
1.1.3验证工作的组织与协调，参与并监督培养基模拟灌装验证的实施，模拟灌装样品的接收、培养及结果观察。
1.1.4对验证过程中偏差、变更处理过程追踪。
1.2质量保证部
1.2.1审核培养基模拟灌装验证方案及培养基模拟灌装验证报告。
1.2.2验证工作的组织与协调，参与并监督培养基模拟灌装验证的实施，负责验证过程中取样。
1.2.3负责培养基模拟灌装验证环境监控，参与模拟灌装样品的接收、培养及结果观察。
1.2.4参与验证过程中偏差、变更处理。
1.3生产部及制剂车间
1.3.1负责起草培养基模拟灌装验证方案及报告。
1.3.2负责方案实施前的培训、验证的实施。
1.3.3负责验证过程的偏差、变更的处理。
1.3.4负责培养基模拟灌装验证的进度，组织与协调验证实施。
1.4质量控制部
1.4.1审核培养基模拟灌装验证方案及报告。
1.4.2负责培养基模拟灌装验证过程中所需物料及样品检验，出具检验结果及报告。
1.4.3 负责培养基模拟灌装验证样品的接收、培养及结果观察。
1.5公用事业部
1.5.1审核培养基模拟灌装验证方案及培养基模拟灌装验证报告。
1.5.2确保培养基模拟灌装验证所需的公用设施、设备等正常运行。
1.6物流部
负责提供培养基模拟灌装验证中所需的合格物料。
1.7生产管理负责人：审核批准培养基模拟灌装验证方案及报告。
1.8质量管理负责人：审核批准培养基模拟灌装验证方案及报告。
2.培养基模拟灌装验证原则
根据风险评估的原则和结果，确定每次培养基模拟灌装验证的具体方案，风险评估考虑的因素包括：
2.1近两年内笔式水针车间培养基模拟灌装的实施情况、实施结果以及偏差情况。
2.2近两年内笔式水针车间空调净化系统、关键生产设备的确认及使用情况。
2.3前次培养基模拟灌装验证后生产工艺（包括批量）变更以及人员变更情况，关键生产设备维修保养情况等。
2.4前次培养基模拟灌装验证后日常生产过程中对无菌结果存在潜在影响的关键操作的变化。
2.5 前次培养基模拟验证后日常生产过程中最差条件的变化，详细参见5.2.2培养基灌装验证最差条件。
3. 培养基模拟灌装验证条件的选择
3.1 培养基的确定
根据产品的剂型、培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基。
根据PDATR22Revised2011技术报告以及从2013年历次的培养基模拟灌装验证，选用胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB），其每批培养基适用性都符合药典要求，并且其属于广谱培养基，其选择性良好，能有效促进细菌和真菌的生长，同时有较好的澄清度，较小的粘度，适用于除菌过滤，满足工艺现有的生产工艺。因此，在培养基模拟灌装验证时选择的培养基确定为胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB）。
3.2培养基模拟灌装批号确定
批号由MF+8位数字组成：MFXXXXXXXX, 批号的前4位数表示培养基生产的年份，此后的2位表示生产的月份，最后2位表示年流水号。例如：2014年04月生产第2批培养基，则批号为MF20140402。
3.3培养基模拟灌装批量的确定
培养基模拟灌装批量应当足以保证评价的有效性。灌装的数量基于具体工艺的污染风险，并应足以模拟正常生产那些有代表性的操作。一般培养基模拟灌装批量不少于实际生产线批量。具体见下表：
3.4容器、密封结构、灌装体积及灌装速度的确定
3.4.1在日常生产中该灌装生产线使用灌装容器为：笔式注射器用中性硼硅玻璃套筒（规格：3ml）、笔式注射器用溴化丁基橡胶活塞（规格：3ml）、笔式注射器用铝盖（规格：3ml），故在培养基模拟灌装验证中使用以上容器进行验证。
3.4.3根据风险评估原则：在培养基模拟灌装验证时，灌装线速度应设置在灌装速度范围的低端，增加灌装时间，增大受污染的几率。但由于本公司是用3ml笔式注射器用中性硼硅玻璃套筒作为灌装容器，较快的灌装速度会增加更多的干预，因此培养基灌装验证时模拟较慢的灌装速度和较快的灌装速度。
4. 培养基模拟灌装验证的一般流程
培养基模拟灌装验证与实际灌装工艺一致。
5. 培养基模拟灌装验证要求及内容
5.1验证实施前确认
5.1.1人员资格确认
5.1.1.1确认所有参加验证生产人员(含设备维修人员、QA、QC人员)均接受验证方案培训。
5.1.1.2确认所有进入灌装区的人员经过GMP、无菌操作培训、洁净室行为规范、微生物基础知识的培训并考核合格。
5.1.1.3确认所有进入灌装区的人员（包括QA、设备维修人员）已接受无菌更衣程序的培训，并经更衣确认合格。
5.1.1.4确认参与验证的生产人员、设备维修人员、QC、QA均接受岗位操作培训，并持证上岗。培养基结果观察人员已接受培养基污染识别的培训。
5.1.1.5参加培养基模拟灌装的操作人员（包括QA、设备维修人员）在培养基模拟灌装验证实施中需进行特定的操作，具体操作包括过滤、灌装系统的安装、清洁消毒、操作、内包材供给和产品处理、转移、取样、环境监控的一些正常干预和破瓶、裂瓶处理、设备维修、手工剔除倒破/瓶干预、手工排除卡塞、振荡锅卡塞、下盖轨道堵塞、胶管破裂更换灌装针等纠正干预。参加完一次成功的培养基模拟灌装验证人员才可以进行日常产品的灌装。
5.1.2验证前先决条件
5.2.1原则：培养基模拟灌装验证应当尽可能模拟常规的无菌生产工艺，包括所有对无菌结果有影响的关键操作，以及生产中尽可能出现的各种干预和最差条件。最差条件不意味着创造出超出允许操作条件或可能导致系统失效的情况。
5.2.2在设计培养基模拟灌装验证的方案时，必须考虑以下项目（包括但不限于）的最差条件：
5.2.2.1灌装间人员
5.2.2.2房间/设备再清洁或灭菌后的最长保存期限
5.2.2.3最大容器的最小灌装速度（最长开放时间）
5.2.2.4最小容器的最高灌装速度（较难控制）
5.2.2.5灌装持续时间
5.2.2.5各种类型的干预次数及频率等
每次培养基模拟灌装验证的具体方案可以根据风险评估的原则并结合人员、设备的运行情况对各种干预和最差条件进行调整，不仅限于5.2.2。
5.3培养基模拟灌装过程具体操作要求
5.3.1胰蛋白胨大豆肉汤培养基（3%溶液）的配制
按照胰蛋白胨大豆肉汤培养基使用说明书进行配制，并采用与笔式水针车间（贝那鲁肽注射液）实际生产时所用的生产设备，以及日常生产的所有无菌工序，如取样、无菌连接、除菌过滤等。任何保存时间，包括配液和除菌过滤时间以及过滤后存放时间。
5.3.2培养基模拟灌装操作
培养基模拟灌装操作过程应被监督和用录像来记录，确保灌装线上的所有活动都被模拟，确认已进行了适当的正常干预与纠正性干预，同时也为后续出现阳性结果调差提供依据。在每半年的培养基灌装前应对上一阶段的生产状况进行总结和趋势分析，综合考虑有代表性的活动及干预，将其列入方案中。
5.3.2.1正常干预
正常干预是在无菌工艺灌装过程中发生的正常的计划内的行为，（例如，设备安装、装量调节、胶塞的再补给、灌装容器的再补给、环境监测、取样等等）。正常干预不是灌装线发生事情时进行的整改措施，是整个工艺中计划并要记录的。正常干预需在培养基模拟灌装验证方案中按照规定的频次或灌装时间点进行模拟。
5.3.2.2纠正干预
在无菌工艺灌装过程中的纠正或调整的活动，其不属于计划性。（例如，灌装容器的破损、倒瓶、掉塞、更换灌装针、灌装设备维修），但这些行为有时候会发生在工艺过程中的，因此其活动应该能证明是可接受的无菌技术和无菌控制。
培养基模拟灌装验证方案设计时应该体现最差原则，即纠正干预模拟的次数不得少于实际生产可能发生的最多次数，此外还需对为何要进行这些纠正干预给予合理解释，这些纠正干预是计划之外的，均要清楚的识别并被记录。
在日常灌装过程中发生新的纠正干预（未在培养基模拟灌装验证中模拟的干预），必需进行评估。干预是否可接受，可根据之前是否模拟过相似的干预，并且是否采用了适当的无菌技术，这种干预的评估可
通过风险评估来支持。
5.3.2.3干预相关容器的处理
整个培养基灌装过程中需要严格控制丢弃任何已经灌装的培养基，避免将一些潜在污染的可能性也同时丢弃了。任何丢弃都要有充分的理由，并做好相应的记录和解释。确定因操作不当或储存不当而导致培养基密封性缺陷的，且有明确的书面规程可以进行剔除报废的产品才可以丢弃。通常所有密闭性完整的容器都应被进行培养并检査。例如，在灌装过程中正常产品的灌装量控制精度需要很高，但培养基灌装时，只要符合最低灌装量，而不应该丢弃。但如果是胶塞上位不正确的培养基，由于密闭系统不完整，必须丢弃。同时，培养基灌装中剔除的产品或者区域不得比实际生产中清除的多。生产线上保留的产品必须进行培养，已证明控制有效和隔离适当。在干预发生前生产的产品，除非不包括在生产中，否则必须进行培养。
5.3.2.4灌装的持续时间
培养基模拟灌装的持续时间应充分包括任何可能包括在实际灌装过程中的正常干预与纠正干预。其灌装持续时间能足以发现这些干预所能造成的潜在微生物影响，在设计方案时其灌装的持续时间要比日常灌装时间长。
5.3.3环境监控
培养基模拟灌装验证的环境监控按照“洁净区环境监控管理规程”进行取样监测。任何不满足日常监测限度的标准的偏差应按照日常环境监测调查程序进行调差并采取行动，环境监测的异常不一定会导致最终培养基模拟灌装验证的失败。
5.3.4培养前容器检查
灌装后的培养基模拟灌装验证样品需逐瓶进行容器密封性检查，凡瓶体破损、轧盖不严、橡胶活塞破损等需剔除不作培养，并做好记录。
5.3.5培养条件与温度
培养之前，灌装好的培养基模拟灌装样品需进行编号并倒置培养，先在20～25℃（设定23℃）培养7天，后在30～35℃（设定33℃）培养7天。培养期间，可不定期对灌装的培养基进行目检（微生物污染情况），但在培养后的第7天，第14天必须分别进行一次全面检查。在培养过程中，任何发现损坏
的样品也应列入培养基灌装的批记录数据中。如果要将这类已培养的样品从最后的结果判定计算中剔除，则必需充分说明理由，并在培养基灌装报告中对偏差做出解释。假如难以判断微生物污染是由损坏引起还是本身就存在，则应进行偏差调査以确定原因。
5.3.6培养基灵敏度检查
培养基模拟灌装验证所用的胰蛋白胨大豆肉汤培养基，在使用前和14天培养结束后，需对培养基进行灵敏度检查，推荐测试包含环境菌或其它不同测试的阳性菌。
6. 可接受标准
培养基模拟灌装结果的目标是零污染，应当遵循以下要求：
6.1灌装数量＜5000瓶时，不得有检出污染品。若有1瓶污染，必须进行彻底调查，调查后重新验证（连续3批）。
6.2灌装数量5000至10000瓶时，若有1瓶污染，需调查，并视调查结果决定是否需要重新进行1批培养基模拟灌装，若有2瓶污染，必须进行彻底调查，调查后重新进行验证（连续3批）
6.3灌装数量＞10000瓶时，若有1瓶污染，需彻底调查，若有2瓶污染，必须进行彻底调查，调查后重新进行验证（连续3批）。
7. 验证过程的偏差
当验证过程中某一部分无法实施或实际情况无法达到可接受标准时，按照“验证偏差管理规程”进行偏
差调查，并确定该偏差是由什么引起的，之后再确定相应的解决措施。
8.培养基模拟灌装偏差调查的一般方法
8.1调查的范围应包括：
8.1.1生产环境微生物监测数据；
8.1.2生产环境悬浮粒子监测数据；
8.1.3人员污染的监测数据；
8.1.4HEPA过滤器的完整性检测、粒子、风速等；
8.1.5操作间的空气流向、压差；
8.1.6. 操作人员的操作方法、培训情况；
8.1.7模拟灌装试验过程中的干预因素分析；
8.1.8无菌室生产工具及其他用品的储存状况；
8.1.9鉴别污染微生物的种、属，以寻找污染源的线索；
8.1.10无菌室的清洁、清洁规程的培训及执行情况；
8.1.11无菌生产用设备的控制系统和监测系统的校正；
8.1.12生产前、生产后过滤器的完整性检测结果；
8.1.13验证过程中内包材抽检结果；
8.1.14相关产品、相关生产过程存在的问题等。
原因调查结束后，应根据调查所确定的或可能发生的原因制定纠正或改进方案并予以实施。当改进方案实施之后应重复模拟灌装试验。
9. 持续的工艺评估
9.1在初始验证时，至少要连续成功地灌装3个批次。初次验证后，为了评估无菌工艺的受控情况，每条生产线的培养基灌装每半年应进行一次，每次至少一批。
9.2当产品或生产线发生变更时，均应按照书面的变更控制系统规定的流程进行全面评估，一般以下情况变更后应当通过培养基灌装验证对整个工艺过程的无菌保证能力变化进行评估。
9.2.1设备改装（相同部件的更换不构成改装）
9.2.2设备或厂房的改变潜在影响了无菌环境的空气质量或气流。
9.2.3生产人员数量大的变化或者启动2班。（验证状态为1班）
9.2.4无菌生产工艺及工艺规程有较大变化。
9.2.5新增产品容器或容器密封。
9.3培养基灌装的结果表明工艺过程可能失控时，应进行调查，确定污染源及问题的范围。纠偏措施一旦制定，就应再次进行工艺模拟试验，以确认缺陷已得到纠正，工艺巳返回受控状态。当调查的结果还不足以得出培养基灌装失败原因的明确结论时，那就有必要采取提高无菌保证水平的措施，并进行3批连续成功的试验以确认工艺已返回受控状态。
9.4当厂房或工艺持续监视时发现有趋势变化可能需要进行必要的工艺模拟的再次确认，如下列情况
9.4.1关键区域环境监测持续超出警戒/纠偏限度
9.4.2任何产品无菌测试失败。
9.4.3无菌生产区违反无菌规定。
精心整理*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 审批 目录 1.介绍……………………………………………………………………………………………............. ..错误!未指定书签。 2.目的……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 3.范围……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 4.职责……………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 4.1.生产部职责 ....................................................................................... 错误!未指定书签。
4.2.质量保证部职责 (4) 4.3质量控制部职责 (4) 4.4.设备部、物资管理部门各职责 ............................................................. 错误!未指定书签。 5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..错误!未指定书签。 5.1.法规................................................................................................. 错误!未指定书签。 5.2.指南................................................................................................. 错误!未指定书签。 6.参考文件………………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 7.生产工艺描述…………………………………………………………………………………..错误!未指定书签。 7.12.风险评估 ................................................................................................. 7.13.工艺风险分析 .......................................................................................... 错误!未指定书签。 7.14.模拟项目 ................................................................................................. 错误!未指定书签。 7.14.1模拟灌装过程 .......................................................................................... 错误!未指定书签。 7.14.2灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装 .................................................. 错误!未指定书签。 7.14.3模拟最多进入灌装间的人数..................................................................... 错误!未指定书签。 7.14.4人员干预.................................................................................................. 错误!未指定书签。 7.14.5模拟人员活动 .......................................................................................... 错误!未指定书签。 7.14.6模拟最差条件 .......................................................................................... 错误!未指定书签。
培养基模拟灌装试验验证方案(10ml) 2011年08月 培养基模拟灌装试验验证方案(10ml)验证方案的起草与审批
验证小组成员 方案起草 验证委员会审阅会签 方案批准 目录 1概述 (3) 2.验证目的 (3) 3风险评估 (4) 4验证参考标准 (5)
5.验证范围 (4) 6.验证职责 (5) 7验证前提条件 (5) 8 验证批次和时间 (7) 9 验证步骤 (8) 10培养基的培养和检查 (14) 11试验结果评价 (14) 12试验结果分析 (15) 13风险的评估与接受 (15) 14验证结果评审和结论 (15) 15方案修改记录 (14) 16再验证周期 (14) 17附件 (14) 1概述 本次培养基模拟灌装试验验证是以灭菌的乳糖粉末分装到10ml西林瓶中，整个过程模拟正常的粉针剂品种的分装状态，在盖塞前将胰蛋白胨大豆肉汤培养基灌入瓶内，压塞轧盖后进行培养，确认无菌分装工艺的无菌可靠性。 2.验证目的 在各种干扰和最差条件下，评估灭菌工艺、人员更衣、行为习惯、A/B级气流模式、无菌环境的建立、消毒维持方法和物料的传递控制等整个流程的无菌保证水平。
3风险评估 经验证小组人员共同对培养基模拟灌装试验验证进行风险评估，对存在的质量风险提出了预防和纠正措施建议，具体见下表： 评估人年月日 4.验证参考标准 4.1 药品生产质量管理规范（2010年版） 4.2 药品生产质量管理规范（2010年版）指南 4.3 中国药典2010年版（二部） 4.4 药品生产验证指南（2003年版） 5.验证范围 本方案适用粉针车间生产的全过程。包括：人员更衣、各房间的清洁消毒、物料传递、容器工具的处理、内包材的处理、中控取样、动态下环境监测、无菌分装、轧盖过程，并在分装过程中模拟正常与非正常干扰活动。方案中还规定瓶子、胶塞和铝盖灭菌后存放有效期的验证。
培养基模拟灌装验证 方案参考
验证方案编码：STP-YZ-04702 A A A A药业有限公司 验证方案 项目名称培养基模拟灌装 方案日期
验证方案审批表
验证进度计划 培养基模拟灌装验证方案
目录 验证方案审批表 1. 验证目的 2.适用范围 3.职责 4.有关背景资料 5.验证项目、评价方法及结果 6．漏项与偏差 7．审阅本验证方案，并确认验证结果 8．验证总结 9.SOP的修订 10.再验证时间 11 证明 1.验证目的
培养基模拟灌装试验是用与实际生产工艺相同的条件与操作方法，包括生产环境，向安瓿内灌装经除菌过滤的液体培养基，然后将此模拟制品在适当条件下培养，以确认无菌工艺过程的可靠性。证明在本公司小容量注射剂车间生产线中灌装过程中所采用的各种方法和各种规程，防止微生物污染的水平达到可接受的合格标准的能力，或提供保证所生产产品的无菌性的可信限度达到可接受的合格标准的证据。充分验证无菌生产工艺的可靠性。同时评价生产操作人员的行为规范性。 我公司小容量注射剂车间于2011年3月5-6日进行过三批培养基无菌灌装验证，验证结果符合要求。由于小容量注射剂车间的纯化水系统、注射用水系统、空调净化系统于2011年8-10进行了改造和验证，关键生产设备如超声波洗瓶机、隧道干燥杀菌机、安瓿拉丝灌封机也于2011年9月进行了改造和验证，为充分验证无菌生产工艺的可靠性，故拟再次进行三批培养基模拟灌装验证。 2.验证范围 本验证方案适用于本公司小容量注射剂车间培养基模拟灌装生产验证，当上述条件改变时，应重新验证。 3.职责 3.1验证领导小组 3.1.1负责验证方案会审 3.1.2负责验证方案的批准 3.1.3负责对验证方案修改稿的批准 3.1.4负责验证报告审核、批准 3.2 验证小组 3.2.1 负责验证方案的起草和审核。 3.2.2负责按验证方案对有关人员进行培训。 3.2.3负责组织、协调本验证方案的实施。 3.2.4负责收集、整理和审核验证数据，起草验证报告（如方案执行有偏差，要完成OOS调查报告）。 3.3 小容量注射剂车间 3.3.1 负责验证方案的实施。 3.3.2 负责组织培训岗位操作人员。 3.4生产部 3.4.1协助验证方案的实施，提供必要的技术支持。
培养基模拟灌装实验方案考试卷 一、填空题（5分/题，共50分） 1. 本次培养基模拟灌装实验为新改建的洁净厂房内实施，为培养基模拟试验的首次验证，因此通过连续三批模拟灌装实验及结果有限性的评价，确认结果的重现性。 2. 对无菌灌装区的设备台面及可能接触到的表面进行无菌程度的检查，其合格标准为：灌装机设备台面微生物数量＜3个，设备输送带＜5个。 3. 培养基模拟灌装过程中对操作人员的无菌服、五指手套、口罩等部位微生物数量进行检测, 其合格标准为：五指手套微生物数量＜3个，一个操作人员双臂、前胸微生物总数＜5个，口罩微生物数量＜3个。 4. 粉针剂无菌分装间应控制合适的温度及相对湿度，其合格标准为：房间温度：20-22 ℃，相对湿度：45-50%。 5. 模拟分装过程：采用先灌装乳糖、再注入液体培养基的方式，其阳性对照样品为枯草芽孢杆菌和白色念珠菌。 6. 微生物培养条件：将全部样品在适宜的温度下培养14天，先在较低的温度（23-28℃）培养7天，然后在较高的温度下(30-35℃)培养7天，在第三天和第七天之间至少观察培养基样品的微生物的生长情况，通过最后一天的观察，确认有无微生物生长。 7. 对于培养基/乳糖样品的培养结果，若发现污染应明确记录瓶号、瓶数，同时应检查胶塞、铝盖的密封情况；若有破损应记录并检查其破损原因。对于被污染的样品进行鉴别试验，至少包括菌落数、细胞形态学记革兰染色特性等。 8. 试验结果与评价：评价无菌模拟灌装实验结果的主要指标就是污染水平，不管实验的数量有多少，其结果污染瓶均要为零，如果连续三批实验结果均出现1瓶，应进行再次实验，培养结果如出现2瓶以上，应停止生产，进行污染调查。 9. 对于已投入使用的粉针剂生产线，每年至少进行2次培养基模拟灌装实验，其生产线的每一位员工至少每年参加一次成功的培养基模拟灌装实验。 10. 当生产设备、设施、操作人员的结构、操作方法发生变动时，必须进行培养基模拟灌装实验，已确认其变动没有对该生产线的无菌保证产生影响。 二、问答题（50分） 1.简述培养基模拟灌装实验方案验证内容（15分）。 答：①培养基制备及无菌性检查，②培养基促生长实验，③无菌原料的制备、无菌性及抑菌性检验，④模拟灌装最差条件选择，⑤模拟分装过程，⑥灌装产品的培养，⑦根据培养，⑧结果确定本次模拟灌装实验的有效性，⑨模拟灌装过程记录。
分发部门： 培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺验证小组
一、概述 厂区无菌操作生产线，按2010版GMP 及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最终灭菌产品生产使用。 某某产品因无法进行F 0≥8分钟湿热灭菌，以达到SAL ≤10-6 ，但处方可以通过微生物滞留过滤器过滤，故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。 无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，确保产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施为：①人员的培训 ②无菌工艺验证。 按SFDA 化学药品注射剂基本技术要求：培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验证，是判断无菌保证水平的关键手段。故在正式生产前必须按某某产品生产工艺进行培养基模拟灌装验证。 1 本次验证关键生产工艺流程图 2 验证原理 将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。 3验证次数 按2010版GMP 附录1要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次验证，故需进行
二、验证目的 1通过该工艺验证活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求； 2通过该工艺验证活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险； 3通过该工艺验证活动确保生产符合现行GMP法规要求。 三、验证范围和实施时间 1本验证方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装验证活动； 2计划验证实施时间为2013年3月~4月连续三个批次。 四、验证小组和职责 1 验证小组 根据验证的内容和验证管理文件要求，成立验证小组，验证小组成员见下表，小组人员应在最终验证报告中签名确认。在验证实施前，方案起草人应对所有相关参与人员进行验证方案的培训，做好培训记录，并将记录附于验证报告后。
页眉 培养基模拟灌装试验验证方案(10ml) 2011年08月 (10ml)培养基模拟灌装试验验证方案验证方案的起草与审批页脚
页眉验证小组成员 方案起草 方案批准
录目.......................................................................................................................................... 3 . 1概述.. (4) 验证目的2.页脚 页眉 3风险评估 (4) 4验证参考标准 (5) 5.验证范围 (5) 6.验证职责 (5) 7验证前提条件 (6) 8 验证批次和时间 (7) 9 验证步骤 (8) 10培养基的培养和检查............................................................................................................. 14 11试验结果评价........................................................................................................................ 14 12试验结果分析........................................................................................................................ 15 13风险的评估与接受................................................................................................................. 15 14验证结果评审和结论............................................................................................................. 15 15方案修改记录........................................................................................................................ 15 16再验证周期............................................................................................................................ 15 17附件....................................................................................................................................... 15
审批 部门姓名签名日期起草人品质管理部 起草人生产技术部 起草人针剂车间 审核人针剂车间 审核人生产技术部 审核人质检中心 审核人品质管理部 批准人质量负责人 分发部门： 培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺验证小组 一、概述 厂区无菌操作生产线，按2010 版 GMP及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最终灭菌产品 生产使用。 某某产品因无法进行F0≥8 分钟湿热灭菌，以达到SAL≤ 10-6，但处方可以通过微生物滞留过滤器过滤，
故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。 无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，确保产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施为：①人员的培训②无菌工艺验证。 按 SFDA化学药品注射剂基本技术要求：培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验证， 是判断无菌保证水平的关键手段。故在正式生产前必须按某某产品生产工艺进行培养基模拟灌装验证。 1 本次验证关键生产工艺流程图 安瓿的清洗称量配料工器具清洗和灭菌 除菌过滤 干热灭菌 灌封 灯检 D级背景 C 级背景 A 级背景一般区 2验证原理 将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。 3验证次数 按 2010 版 GMP附录 1 要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次验证，故需进行 连续三个批次的验证活动。 二、验证目的 1通过该工艺验证活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求； 2通过该工艺验证活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险； 3通过该工艺验证活动确保生产符合现行GMP法规要求。 三、验证范围和实施时间 1 本验证方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装验证活动；
1 主题内容与适用范围 本文件规定了培养基模拟灌装试验的程序和要求。 本文件适用于培养基模拟灌装试验的管理。 2 引用标准 《药品生产质量管理规范》2010年修订 3 术语 培养基模拟灌装试验（以下简称试验）：英文名称MFT——Media Fill Test的英文缩写，是用一种模拟替代物质来模拟整个无菌生产过程，在所得的模拟产品中加注培养基，再对所得的全部培养基样品进行无菌培养。培养基模拟试验是无菌生产工艺的验证手段，是任何非最终无菌药品生产必须进行的一项验证。 最差条件：导致工艺及产品失败的概率高于正常工艺的条件或状态，即标准操作规程范围以内工艺的上限和下限。但这类最差条件不一定必然导致产品或工艺的不合格。 4 职责 4.1 生产部门负责试验方案的制定、组织实施、试验报告的撰写、偏差的报告等。 4.2 质监中心负责试验培养基的促生长试验、灌装物的培养等。 4.3 质量保证部负责试验过程的监督管理。 5 管理规定 5.1 试验目的：规范公司培养基模拟灌装试验，评估无菌原料药和无菌制剂的生产工艺，为所生产产品无菌性的可信限度达到可接受的合格标准提供证据，证明其具有生产无菌原料药和无菌制剂的能力并具有可重现性，符合现行GMP要求和相关技术指南要求。 5.2 试验要求 5.2.1 试验频次 培养基模拟灌装试验的首次验证，每班次应当连续进行3次合格试验。培养基模拟灌装试验按照生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。单一规格品种再验证周期为半年，正常生产的多规格品种每一规格再验证周期为一年。每位无菌操作人员每年至少参加一次成功的培养基模拟灌装试验。空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装试验。 5.2.2 试验批量及容器的数量、装量 培养基灌装批量及容器的数量、装量应当足以保证评价的有效性。批量较小的产品，培
******药业有限公司验证方案 ****生产线培养基灌装
小组主要成员及职责 根据《确认与验证管理规程》规定，组织成立***培养基灌装验证小组，验证小组成员及职责如下表：
方案会签及审批
目录 一、概述 (6) 1.验证原因 (6) 2.验证原理 (6) 二、验证目的 (7) 三、参考文件 (7) 1.参考标准 (7) 2.公司规程 (7) 四、风险评估 (8) 五、验证范围 (15) 六、验证计划 (16) 七、方案培训 (16) 八、验证可接受标准 (16) 九、验证内容 (17) 1.配制 (17) 2.冷藏、除菌过滤 (18) 3.洗瓶 (18) 4.灌封 (20) 5.环境及人员卫生监测（动态） (21) 6.培养 (22) 7.培养基灌装后清洁确认 (23) 十、漏项与偏差处理 (24)
十一、再验证周期 (24) 十二、确立文件 (24) 十三、附件 (25) 附件1： (26)
一、概述 1.验证原因 公司****按照2010版GMP 附录1《无菌药品》的要求进行设计，洁净区级别分为A 级、B 级、C 、级、D 级，该线用于小容量注射剂非最终灭菌产品（****）生产使用。 现按2010版GMP 附录1要求对**生产线进行产品培养基灌装验证，以考察该线的无菌保证水平。本次为第四次培养基模拟灌装（上次验证报告编号R.4-001/2015），故只进行一个批次的验证活动。 验证关键生产工艺流程图如下： 2.验证原理 将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。 3.验证的先决条件 ? 参与培养基验证的人员经过培训。 ? 涉及培养基灌装试验使用的配液系统、冷藏系统、除菌过滤系统、灌封系统、洗瓶机、杀菌干燥
文件编号MFVP-**** **********有限公司 页码 1 of 96 ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 ml灌装线培养基模拟灌装验证方案
目录 1. 介绍.............................................................................. ..4 2. 目的 (4) 3. 范围 (4) 4. 职责 (4) 4.1. 生产部职责............................................................ 错误！未定义书签。 4.2. 质量保证部职责 (4) 4.3质量控制部职责 (4) 4.4.设备部、物资管理部门各职责............................................ 错误！未定义书签。 5. 法规和指南........................................................................ ..4 5.1. 法规 (5) 5.2. 指南 (5) 6. 参考文件 (6) 7. 生产工艺描述 (8) 7.1. 工艺流程图 (8) 7.2. 模拟灌装验证流程图 (9) 7.2.1模拟灌装过程流程图 (10) 7.3. 生产工艺过程描 (10) 7.3.1 产品生产规模 (10) 7.3.2 生产制度 (10) 7.3.3 生产前检查 ......................................................................... 1 1 7.3.4 操作前检查 ......................................................................... 1 1 7.3.5 生产操作 ........................................................................... 1 1 7.3.6 车L盖............................................................................. 1 1 7.4. 基本原理............................................................................... 1 1 7.5. 工艺：................................................................................. 1 1 7.6. 人员： (12) 7.7. 设备和器具： (12) 7.8. 运行频次和周期 (12) 7.9. 运行数量 (12)
.药事. Phorrnoceuticol Administration China Pharmaceuticals 2018年9月20日第27卷第18期Vol. 27, No. 18, September 20, 2018 ?监管实践? d o i: 10. 3969/j.issn. 1006 -4931. 2018. 18. 026培养基模拟灌装试验相关缺陷分析与改进建议 毛红 (重庆市药品技术审评认证中心，重庆401120) 摘要：目的帮助生产企业和药品生产质量管理规范（GM P)检查员了解培养基模拟灌装试验中的关键点，改进缺陷以符合法规要求。方法分析无菌药品生产企业G M P认证现场检查发现的缺陷中涉及培养基模拟灌装试验的问题，及其产生原因。结果与结论共发现与培养基模拟灌装相关的缺陷项378条，出现频次较高的缺陷分为人员与培训、方案设计、培养基及培养条件、记录缺失、最差条件、干扰设计、偏差调查7个方面。分析其表现及对策，有助于形成培养基模拟灌装试验的关注要点与重点。 关键词：无菌药品；培养基模拟灌装试验;缺陷分析；改进措施 中图分类号：R951 文献标识码：A 文章编号= 1006 -4931牗018) 18 -0080-03 Defect Analysis and Improvement Suggestion of Simulation Test of Culture Media Fill Mao Hong i Chongqing Center fo r Drug Evaluation and Certification，Chongqing，China A b s tra c t： O bjective To help the manufacturing enterprises and GMP inspectors understand the key points in simulated test of culture media fill and improve the defects to meet the requirements of regulations. M ethods The problems and causes of defects involved in simulated test of culture media fill were found and analyzed in the GMP certification on - site inspection of aseptic drug manufacturers. R esults an d C onclusion Totally 378 defects related to simulated test of culture media fill were found. Higher frequency of defects were divided into seven aspects：personnel and t raining，program design,culture media and condition of culture,record m issing,worst con-dition ,interference design, deviation survey. The analysis of its performance and countermeasures will help to form the key points of sim-ulated test of culture media fill. Key w o rd s： sterile drug products; simulated test of culture media fill;defect analysis;improvement measure 《药品生产质量管理规范（2010年修订）》犤](以下简称GMP)及《无菌药品附录》[2]要求，非最终灭菌药品 的无菌工艺验证应进行培养基模拟灌装试验。该试验是 指采用微生物培养基替代产品(无菌粉末分装的培养基 模拟灌装试验是将产品替代品溶于培养基中)对无菌工 艺进行评估的验证技术，它解决了无菌检查不能复检的 问题，灌装批量即为无菌检查取样量，更能体现污染率 问题犤_4]。该试验是非最终灭菌药品GMP管理中一项 重要的验证工作。2014年至2015年，国家食品药品监 督管理总局食品药品审核查验中心在组织的无菌药品 生产企业的GMP认证检查缺陷中，共发现与培养基模 拟灌装相关的缺陷项378条。本研究中对这些缺陷项进 行了分类汇总和梳理,现报道如下。 1 缺陷项目分类及分析 选取近年来收集的与培养基模拟灌装试验相关的 378条认证检查缺陷，出现频次较高的缺陷分为人员与 培训、方案设计、培养基及培养条件、记录缺失、最差条 件、干扰设计、偏差调查7个方面。 人员与培训:无菌药品生产中，人是最大的污染源,操作人员应始终按无菌技术操作,并在日常操作中努力 降低风险犤_6]。检查中人员与培训缺陷主要为试验中未 包括所有日常生产人员；模拟灌装前未对人员无菌更衣效果进行确认，人员更衣不规范;无菌更衣培训记录过 于简单,无视频资料;未对进人灌装区域的维修人员、环 境监测人员进行表面微生物监测;模拟灌装后培养基的 培养结果由灌装车间灯检岗位人员执行,但未对该岗位 人员进行微生物学知识和检查技能的培训。人员方面的 缺陷对无菌药品最终质量的影响最大。 方案设计:培养基模拟灌装试验要求尽可能模拟整 个工艺过程，但也要考虑到培养基的生长条件,避免某 些工艺抑制微生物的生长。检查中方案设计缺陷主要 为，试验时按照正常生产工艺充氮气保护，未考虑氮气 可能对需氧菌的抑菌效果;冻干时真空度过低造成培养 基中的水分减少;培养基在冻干箱中温度降低导致微生 物生长抑制，未同步进行促生长试验；试验中模拟了开 门、停电、停风等会带来污染风险的操作。试验应当经过 详细的计划和良好的组织，以保证真实反映工艺中的污 染风险犤]。 培养基和培养条件:培养基和培养条件的选择对于 培养基模拟灌装试验的成败至关重要。检查中此类缺陷 主要为，未对试验用培养基进行灵敏度试验;培养结束 后，未进行培养基促生长能力试验;培养条件未严格按 照微生物的繁殖规律,先低温、后高温进行培养,如验证 方案规定“灌装后的培养基一半置23 ~ 28 °C的温度条 第一作者：毛红（196/ -),女，大学本科，高级工程师，研究方向为药品G M P检查，（电话）023 -60353850(电子信箱）120715625@ qq. com。 80
*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 审批 目录 1. 介绍…………………………………………………………………………………………… ..3 2.目的 (4) 3.范围 (4) 4.职责 (4)
4.1. 生产部职责................................................................................................... 错误!未定义书签。 4.2. 质量保证部职责 (4) 4.3 质量控制部职责 (4) 4.4. 设备部、物资管理部门各职责...................................................................... 错误!未定义书签。 5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..4 5.1. 法规 (5) 5.2. 指南 (5) 6.参考文件 (5) 7.生产工艺描述 (7) 7.1. 工艺流程图 (7) 7.2. 模拟灌装验证流程图 (8) 7.2.1模拟灌装过程流程图 (9) 7.3. 生产工艺过程描 (9) 7.3.1 产品生产规模 (9) 7.3.2 生产制度 (9) 7.3.3 生产前检查 (10) 7.3.4 操作前检查 (10) 7.3.5 生产操作 (10) 7.3.6 轧盖 (10) 7.4. 基本原理 (10) 7.5. 工艺： (10) 7.6. 人员： (10) 7.7. 设备和器具： (11) 7.8. 运行频次和周期 (11) 7.9. 运行数量 (11) 7.10. 模拟物料和培养基 (11) 7.11. 密闭和开放系统 (12) 7.12. 风险评估 (13) 7.13. 工艺风险分析 (14) 7.14. 模拟项目 (16) 7.14.1 模拟灌装过程 (16) 7.14.2 灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装 (16) 7.14.3 模拟最多进入灌装间的人数 (16)
无菌培养基模拟灌装实验的研究 以培养基替代产品进行无菌培养基模拟灌装实验，探讨无菌生产过程的验证方法，设计较合理的验证方案，证实无菌培养基模拟灌装实验是评价无菌保证水平的重要依据。 标签：无菌培养基；无菌灌装；验证；GMP 注射剂车间无菌灌装生产线或生产工艺的重大变更，按照2010版GMP指南规定[1]，必须进行生产工艺验证。我公司冻干粉针车间采用无菌培养基模拟灌装试验作为无菌生产工艺在线验证的重要手段，作为对无菌操作人员卫生水平及无菌操作水平的检定，对无菌灌装生产线的每一位操作人员每年至少参加一次无菌培养基模拟灌装试验。结果车间经过多年的生产运行未出现微生物污染的现象，证明采用无菌培养基模拟灌装试验作为评价与验证无菌灌装生产线的方法是可行的。下面针对培养基模拟灌装试验方案的设计中应考虑的因素、试验实施的过程以及试验结果的分析展开研究。 1无菌培养基模拟灌装实验 无菌培养基模拟灌装试验是采用微生物培养基替代产品对无菌工艺进行评估的验证技术，也称为培养基灌装试验。无菌培养基模拟灌装是用于证明所生产的非最终灭菌的无菌产品可以在确定的环境、工艺和规范操作下，能够最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染，能够对无菌工艺的无菌保证水平进行综合评估，用来证实设备、人员、操作、灭菌过程、环境等各个要素能够有效的共同运作的能力。 2培养基模拟灌装试验方案的设计 2.1无菌培养基模拟灌装试验的前提应完成厂房设施设备的确认和清洁、灭菌工艺的验证影响产品质量的公用工程系统（如空调系统、水系统、蒸汽、压缩空气、加热、制冷等）均需经过确认。公用工程是生产得以正常实施的保证之一，由于产品暴露是发生污染导致无菌工艺验证失败的主要原因之一，其中空调系统的验证应提供足够的试验数据支持，证明在其生产过程中无论是产品还是其他材料所暴露的区域都是A级洁净区，而且A级的洁净区域连续覆盖全部分装生产线并覆盖关键生产设备，对整个生产过程进行动态监控。试验实施前，所有相关设备、容器、工器具的清洗验证、无菌室消毒效果的验证以及灭菌工艺的验证（如湿热、干热灭菌工艺、在线灭菌工艺、除菌过滤工艺等）均应完成，应保证清洗彻底和灭菌成功。如果清洗和灭菌不彻底，残存的药物或者微生物会使无菌培养基受到污染而使试验失败。 2.2最差条件设计在培养基灌装设计中，工艺条件的选择应选取合理的”最差条件”，用最差条件来对工艺流程、设备和整个体系进行挑战。最差条件是指在工艺允许范围内正常生产时可能遇到的最差情况，并不包括由于偏差引起的超
培养基模拟灌装方案-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 审批 目录 1. 介绍…………………………………………………………………………………………… .............错误!未定义书签。 2.目的……………………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。 3.范围……………………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。 4.职责……………………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。
. 质量保证部职责 (4) 质量控制部职责 (4) . 设备部、物资管理部门各职责 ............................................................. 错误!未定义书签。 5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..错误!未定义书签。 . 法规 (9) . 指南 ................................................................................................. 错误!未定义书签。 6.参考文件………………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。 7.生产工艺描述…………………………………………………………………………………..错误!未定义书签。 . 工艺流程图 ....................................................................................... 错误!未定义书签。 . 模拟灌装验证流程图 .................................................................................... 错误!未定义书签。 模拟灌装过程流程图........................................................................................... 错误!未定义书签。 . 生产工艺过程描................................................................................. 错误!未定义书签。 产品生产规模 ......................................................................................... 错误!未定义书签。 生产制度 ................................................................................................ 错误!未定义书签。 生产前检查 (9) 操作前检查............................................................................................. 错误!未定义书签。 生产操作 ................................................................................................ 错误!未定义书签。 轧盖........................................................................................................ 错误!未定义书签。 . 基本原理 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 工艺： .......................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 人员： .......................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 设备和器具： ............................................................................................... 错误!未定义书签。 . 运行频次和周期 ........................................................................................... 错误!未定义书签。 . 运行数量 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 模拟物料和培养基 (9) . 密闭和开放系统 ........................................................................................... 错误!未定义书签。 . 风险评估 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 . 工艺风险分析 ............................................................................................... 错误!未定义书签。 . 模拟项目 ...................................................................................................... 错误!未定义书签。 模拟灌装过程 .................................................................................................... 错误!未定义书签。 灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装............................................................. 错误!未定义书签。 模拟最多进入灌装间的人数............................................................................... 错误!未定义书签。 人员干预 ............................................................................................................ 错误!未定义书签。